يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تقييد غير مكروه: يتيح تسجيل المنعكس البصري في السناجب الأرضية

2.1K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/68335

⸱

يوليو 25, 2025

 ,  ,  ,  ,  , 
1Retinal Neurophysiology Section, National Eye Institute, National Institutes of Health, 2Department of Ophthalmology, Faculty of Medicine, University of Murcia and Biomedical Research Institute of Murcia (IMIB-Pascual Parrilla), 3Striatech GmbH

في هذه المقالة

ملخص

يصف البروتوكول كيفية قياس الاستجابة الحركية البصرية في السناجب الأرضية المكونة من 13 مبطرا ، وهي نوع مخروطي سائد مع سمات شبكية تشبه البقعة البشرية. يعزز تصميم المنصة المناولة ويقلل من القلق ، ويحسن قدرة على البقاء على المنصة المرتفعة ، مما يتيح التقييم غير الجراحي للتغيرات في الوظيفة البصرية.

الملخص

يوفر المنعكس الحركي البصري (OMR) تقييما سلوكيا لحساسية التباين للحيوان وحدة البصر. عادة ما يتم وضع الفئران أو الفئران مباشرة على منصة دائرية صغيرة باليد. ومع ذلك ، فإن التعامل مع مثل هذه يمكن أن يحفز التوتر والقلق ، مما يؤدي إلى عوامل مربكة عند تفسير البيانات. لقد ثبت أن طرق المناولة غير المكروهة ، مثل التقاط الفئران أو الفئران في نفق / أنبوب مألوف ، يمكن أن تقلل من القلق. هذا له أهمية خاصة في الدراسات التي تظهر فيها ضغطا متزايدا أو فرط نشاط أو خللا وظيفيا حركيا ، مما يؤدي إلى عدم القدرة على البقاء على المنصة. قام فريق بقيادة الدكتورين كيوهارو ج. مياجيشيما وفرانسيسكو إم نادال نيكولاس بإعادة تصميم منصة OMR التقليدية لتوفير احتواء شبه مغلق. هذا يجعل من الممكن لأول مرة تسجيل المنعكس البصري في السنجاب الأرضي المكون من 13 مبطرا ، وهو أحد الثدييات القليلة التي يمكنها رؤية اللون. لها خط بصري بكثافة عالية من المخاريط تشبه البقعة البشرية مما يوفر نموذجا جذابا لدراسة التأثيرات على النظام البصري المخروطي.

المقدمة

تقدم السناجب الأرضية نموذجا فريدا وقيما لدراسة الوظيفة البصرية نظرا لأسلوب حياتها النهاري وشبكية العين التي تهيمن عليها المخروطية ، والتي تحاكي عن كثب الرؤيةالبشرية 1. هذا ، إلى جانب المزايا العملية لاستخدامها (حجم أصغر ، تكلفة تربية أقل) مقارنة بالرئيسيات ، يجعلها نموذجا مثاليا للبحث الانتقالي في إصابة الشبكية أو المرض أو الآثار الجانبية للعين للأدوية على تغيرات رؤيةالألوان 2،3،4،5،6. تعتمد الأبحاث قبل السريرية على أمراض الشبكية على القدرة على تقييم ما إذا كان يمكنه الرؤية. يوفر المنعكس البصري (OMR) طريقة ذات صلة سريريا لتقييم الوظيفة البصرية في دون الحاجة إلى التخدير ، مما يتيح قياسا دقيقا لحدة البصر7،8. في هذا الاختبار ، يتبع نمط شريطي دوار بنظرته. تحفز الخطوط الدوارة على إدراك الحركة العالمية في البيئة ، مما يؤدي إلى حركة رأس لا إرادية - OMR. يعمل هذا المنعكس على استقرار البيئة بصريا ويمكن استخدامه لتحديد مدى جودة رؤية عن طريق الضبط التدريجي للتردد المكاني أو تباين المنبه. عندما يصبح إدراك الحافز أكثر صعوبة ، لا يتم تشغيل OMR في النهاية ، مما يسمح بتحديد حدة البصر أو عتبة التباين. ميزة OMR هي أنه رد فعل. وبالتالي ، لا يلزم تدريب ، وتثبيت الرأس أو الجراحة غير ضرورية. المنعكس موجود حتى في الصغيرة جدا (عند فتح العين)9،10 ، مما يجعل من الممكن دراسة الأمراض المبكرة. بالإضافة إلى ذلك ، نظرا لأنه غير جراحي ، يمكن إجراء قياسات طولية تمكن من تتبع تطور المرض.

يتم إجراء معظم اختبارات OMR باستخدام أنظمة مخصصة أو تجارية تتكون من منصة مرتفعة حيث يتم وضع ، وتحيط بها أربع شاشات تعرض أنماط شريطية دوارة بالأبيض والأسود. تتحرك الخطوط في اتجاه واحد (في اتجاه عقارب الساعة أو عكس اتجاه عقارب الساعة) ، مما يخلق حافزا للحركة يثير استجابة تتبع بصرية من10،11،12،13،14،15،16. يتم تركيب كاميرا فوق ساحة الاختبار لالتقاط حركات رأس التي يتم استثارتها بصريا استجابة للتحفيز الدوار. يتم تتبع حركات الرأس هذه وتحليلها لتحديد قدرة على إدراك الحركة والاستجابة لها ، وبالتالي تقييم حدة البصر.

على الرغم من أن OMR يستخدم بشكل روتيني في الفئران والجرذان ، إلا أن قياس الاستجابة الحركية البصرية في السناجب الأرضية المكونة من 13 مبطرا كان يمثل تحديا بسبب فرط نشاطها وعدم قدرتها على البقاء على منصات مرتفعة ، حتى مع التكييف المسبق. للتحايل على هذا ، قمنا بتطوير منصة توفر شبه احتواء ، مما يسهل نقل إلى الساحة. الهدف من هذه الطريقة هو تقليل الوقت الذي تستغرقه للتكيف مع الإعداد التجريبي ، مما يتيح تسجيل التي تظهر سلوكا غير متعاون أو تواجه صعوبة في البقاء على المنصة وتحسين إدراج في الدراسات. لقد حددنا أيضا بروتوكولا لقياس حدة البصر في السناجب باستخدام إعداد تباين محدد تجريبيا وقمنا بتعديل إعدادات الكاميرا لتحسين نتائج التصوير ، مما يتيح التحليل والتتبع الآلي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم إجراء الإجراءات المتعلقة بالحيوانات وفقا لقوانين الولايات المتحدة ولوائح وزارة الزراعة. أجريت جميع التجارب على وفقا للبروتوكولات المعتمدة من قبل لجنة والرعاية والاستخدام التابعة للمعهد الوطني للعيون في المعاهد الوطنية للصحة. تم شراء السناجب الأرضية المكونة من 13 مبطرا من الذكور والإناث (الذين تتراوح أعمارهم بين 6 و 8 أشهر) المستخدمة في هذه الدراسة من مستعمرة السنجاب بجامعة ويسكونسن. تم تربية الفئران (rd10: 1 شهر ، CX3CR1GFP /+: 6.5 أشهر) المستخدمة في هذه الدراسة في منشأتنا الحيوانية. تم اختيار وأقفاصها بشكل عشوائي وتوزيعها على مجموعات تجريبية.

1. إعداد منصة النموذج الأولي ونفق المناولة المعدل

ملاحظة: تستخدم المنصات المسطحة المستديرة بشكل شائع في الأنظمة المصممة لقياس الاستجابة الحركيةالضوئية 13. ومع ذلك ، غالبا ما تكافح نماذج القوارض مفرطة النشاط ، مثل السناجب ، للحفاظ على الاستقرار على هذه المنصات. يوفر هذا التصميم مساحة شبه مغلقة ، مما يساعد على التعود بسرعة ويقلل من السلوكيات الشبيهة بالقلق. يعزز هذا التحسن قدرة على التركيز ويقلل من حالات عدم التوازن أو السقوط أثناء التسجيلات.

  1. في برنامج رسم CAD (على سبيل المثال ، OpenSCAD أو FreeCAD) ، قم بتصميم النظام الأساسي (الرمادي) والعلبة (الحمراء) كما هو موضح في الشكل 1.
    1. تأكد من الحفاظ على الأبعاد الرئيسية لمنصة السنجاب كطول وعرض (طول × عرض): 129 مم × 81 مم ، السماكة: 7 مم ، وارتفاع الجدار الذي يمتد حول المحيط: 8 مم. استخدم ملف المستند القياسي المجاني ل CAD المقدم للنموذج الأولي الأساسي (السنجاب) المستخدم في دراسة إثبات المفهوم هذه (ملف الترميز التكميلي 1).
    2. تأكد من الحفاظ على الأبعاد الرئيسية للحاوية العلوية القابلة للإزالة (من أعلى إلى أسفل) مثل الطول (119.5 سم) والعرض (76.2 سم) وارتفاع الجوانب (50.8 مم) وسمك الجزء (3 مم). استخدم ملف المستند القياسي المجاني CAD المقدم لتكرار العلبة العلوية القابلة للإزالة (السنجاب) المستخدمة في دراسة إثبات المفهوم هذه (ملف الترميز التكميلي 2).
  2. اضبط قطر الفتحة في قاعدة المنصة حسب الحاجة لتناسب قاعدة التمثال المستخدمة لرفع المنصة. القطر في الصورة 40 ملم.
  3. اطبع المنصة باستخدام خيوط بيضاء غير شفافة. يوفر هذا أقصى تباين للكاميرا ، مما يمكن برنامج التتبع من اكتشاف محيط بشكل صحيح على المنصة.
  4. اطبع العلبة العلوية القابلة للإزالة بخيوط داكنة غير شفافة (على سبيل المثال، أحمر). يوفر هذا إحساسا بالمأوى للقوارض ، مما يسهل توجيهها إلى النفق قبل رفعها ونقلها إلى الساحة.
  5. اطلب من الميكانيكي قطع الأنبوب المربع الشفاف المبثوق من الأكريليك باستخدام منشار طاولة بحيث يكون طول الطرف الطويل ~ 101.6 مم. تأكد من استخدام ارتداء العين الواقي وعصا الدفع لتوجيه الأكريليك عبر الشفرة مع الحفاظ على يديك في مأمن من الإصابة المحتملة.
  6. باستخدام منشار الطاولة أو أداة دوارة محمولة باليد مزودة بعجلة قطع كاشطة ، قم بإزالة أحد الوجوه المستطيلة الطويلة. يؤدي ذلك إلى إنشاء قمة مفتوحة ستتمتع من خلالها الكاميرا المثبتة أعلاه برؤية خالية من العوائق لموضع وحركات رأسه.
  7. نظف جميع الحواف بملف يدوي أو ورق صنفرة. قم بتجميع نفق المناولة المعدل باستخدام أنبوب مربع شفاف مقذوف من الأكريليك مقطوع إلى الطول باستخدام العلبة العلوية القابلة للإزالة المطبوعة ثلاثية الأبعاد عن طريق وضع العلبة أعلى الوجه المفتوح.

2. إعداد ساحة OMR

  1. قم بتطهير المنصة ومجموعة حاوية الأنبوب المربع بمنظف / مطهر قبل وبينها لإزالة الإشارات الشمية غير المرغوب فيها.
    ملاحظة: بينما تستخدم القفازات الجلدية للتعامل مع وتلامسها بشكل مباشر ، إلا أنها لا يتم ارتداؤها أثناء التسجيلات ولا تسبب أي آثار مربكة دائمة أو ملحوظة.
  2. قم بتمزيق قطعة صغيرة من المناديل الورقية بقياس 50 مم × 50 مم تقريبا وقم بطيها لتغطية السطح العلوي لقاعدة التمثال. ضع المنصة المطبوعة ثلاثية الأبعاد على قاعدة التمثال (ارتفاع 14 بوصة) مع وضع قطعة المنشفة الورقية في مكانها.
    ملاحظة: تقوم الورقة بضبط ملاءمة الضغط على المنصة ، وتمنع الحركة غير المقصودة ، وتوفر خلفية بيضاء موحدة للتصوير (إذا لم يكن سطح قاعدة التمثال أبيض) ، وتعمل كطبقة ماصة في حالة تبول أثناء التسجيل ، مما يمنع المنصة من أن تصبح زلقة.
  3. ارتداء قفازات العمل الجلدية ، قم بتوجيه برفق إلى مجموعة حاوية الأنبوب المربع.
  4. انقل إلى الساحة عن طريق وضع مجموعة العلبة على المنصة (الشكل 1J).
  5. افصل العلبة العلوية القابلة للإزالة بعناية ، تاركا في الأنبوب المربع الشفاف المبثوق من الأكريليك على المنصة. أغلق باب نظام OMR

3. إعداد معلمات برنامج OMR

ملاحظة: يستخدم نظام OMR المصور كاميرا صناعية صغيرة الحجم تتميز بمستشعر CMOS مقاس 1/3 بوصة حساس للأشعة تحت الحمراء مع غالق عالمي بمعدل 25 إطارا في الثانية (fps). تم تجهيز الكاميرا بعدسة بزاوية عريضة F1.6 ، مما يتيح رؤية كاملة من أعلى إلى أسفل للساحة. كشفت اختبارات حدة البصر الأولية التي أجريت على السناجب باستخدام إعداد التباين القياسي بنسبة 100٪ أن حدة البصر للسناجب تجاوزت حدود دقة الأجهزة. تتميز شاشات التبديل داخل الشاشة مقاس 23.8 بوصة عالية الدقة المستخدمة في الإعداد بدقة تبلغ 1920 بكسل فقط ، وبالتالي فإن البرنامج مشفر بشكل ثابت بحد أقصى للتردد المكاني يبلغ 2 cyc / °. للمقارنة ، تبلغ حدة البصر للفئران C57Bl / 6 حوالي 0.3-0.5 cyc / °. عند 2 cyc / ° ، يبلغ متوسط عرض كل شريط 5.3 بكسل. مع سرعة دوران تبلغ 12 درجة / ثانية ومعدل إطارات يبلغ 60 إطارا في الثانية ، يتغير النمط بمقدار 0.2 درجة لكل إطار ، أي ما يعادل 4.2 بكسل لكل إطار ، بافتراض سرعة بكسل موحدة. عند الترددات المكانية القريبة من 2 cyc / ° ، يقترب نمط الشريط من حد الدقة حيث قد يحدث التعرج ، مما يتسبب في ظهور النمط كما لو كان يتحرك للخلف. لمنع هذه القطعة الأثرية ، يتم ترميز البرنامج بشكل ثابت لتحديد التردد المكاني عند 2 cyc / °.

وهكذا ، بالنسبة للسناجب ، ابتكرنا بروتوكولا حيث نجري اختبار الحدة ولكن بتباين أقل بكثير. اخترنا إعداد تباين (12.78٪) حيث لم تتمكن السناجب من رؤية النمط المخطط عند دورتين / درجة.

  1. في لوحة الفيديو المباشر ، تأكد من أن يتكيف جيدا مع البيئة الجديدة ويبدأ في التحرك بشكل أقل ويهدأ.
    1. عند 2 cyc / ° ، يبلغ متوسط عرض كل شريط 5.3 بكسل. اضبط سرعة الدوران على 12 درجة / ثانية ومعدل إطارات 60 إطارا في الثانية ؛ يتحول النمط بمقدار 0.2 درجة لكل إطار، أي ما يعادل 4.2 بكسل لكل إطار، بافتراض سرعة بكسل موحدة. اضبط الترددات المكانية بالقرب من 2 cyc / ° بحيث يقترب نمط الشريط من حد الدقة حيث قد يحدث التعرج ، مما يتسبب في ظهور النمط كما لو كان يتحرك للخلف. لمنع هذه القطعة الأثرية ، قم بترميز البرنامج الثابت لوضع حد أقصى للتردد المكاني عند 2 cyc / °.
      ملاحظة: بالنسبة للسناجب ، ابتكرنا بروتوكولا نجري فيه اختبار الحدة ولكن بتباين أقل بكثير. اخترنا إعداد تباين (12.78٪) حيث لم تتمكن السناجب من رؤية النمط المخطط عند دورتين / درجة.
  2. قم بتنزيل ملف الترميز التكميلي 3. افتح برنامج OptoDrum.
  3. ضمن علامة التبويب الإعدادات ، انقر فوق إعدادات الاستيراد. قم بتحميل ملف الترميز التكميلي 3.
  4. ضمن علامة التبويب الإعدادات، اضبط إزاحة عتبة الخلفية على 17، والحد الأدنى لحجم [بكسل] إلى 30، والحد الأقصى لعرض الذيل [٪ من الحجم] إلى 1.
  5. ضمن إعدادات الكاميرا، اترك عكس الفيديو والتحكم اليدوي في الكاميرا دون تحديد وإيقاف تشغيل ضوء الأشعة تحت الحمراء.
  6. قم بتوسيع موضع وحجم منطقة الاهتمام للتتبع لاستيعاب السنجاب إذا كان يميل خارج فتحة الأنبوب. القيم المقترحة هي الموضع: X: 359 ، Y: 237 ، الحجم: X: 570 ، Y: 455. لا تقم بتمديد عائد الاستثمار على شاشة المحفزات ، حيث يمكن أن يؤدي ذلك إلى إيجابيات خاطئة.
  7. حدد تكوين الجلسة من اللوحة العلوية (الشكل 2 أ).
    1. بالنسبة للدرج ، قم بتعيين الحدة المكانية المقدرة على النحو التالي. ضبط الحدة المتوقعة على 1.800 cyc/° (648 دورة); ضبط دقة التحفيز المثلى على 0.5 CYC / ° (180 دورة) ؛ اضبط دقة القياس على 0.100 CYC/° (36 دورة).
    2. بالنسبة للدرج ، حدد عدد التأكيدات المطلوبة على النحو التالي. تعيين للمحاكمات الفاشلة إلى 3; تعيين للتجارب الناجحة إلى 2.
      ملاحظة: يمكن زيادة عدد التجارب الناجحة لزيادة الحد من حدوث التأكيدات الإيجابية الكاذبة. ومع ذلك ، مع استخدام هذه المنصة ونفق المناولة المعدل ، يظل معدل الخطأ منخفضا بشكل مقبول. ويرجع ذلك في المقام الأول إلى السكون النسبي للسناجب وقلة حركات الرأس الدورانية بصرف النظر عن تلك التي تسببها المحفزات التي يتم استثارتها بصريا.
  8. تحت علامة التبويب الدرج (الشكل 2 ب) ، اضبط منع التعويج على العرض إلى 3 بكسل واترك الجيوب الأنفية دون تحديد.
  9. بالنسبة لمعايير الاختبار ، قم بقفل التباين عند 12.78٪ وقفل سرعة الدوران عند 12 درجة / ثانية.
    ملاحظة: عند إعداد التباين بنسبة 12.78٪ ، تقتصر الحدة المكانية للسناجب على حوالي 1.5-1.8 cyc / °. لم يعد هذا التكوين يتجاوز الحد الأقصى لإعدادات الأجهزة ، بل يتيح تقييم الحدة المكانية استجابة للمرض أو الإصابة.
  10. بمجرد قفل اثنين من المعلمات الثلاثة، سيصبح خيار الضبط التلقائي للمعلمات نشطا (لم يعد باللون الرمادي). حدد المربع بجوار التعيين التلقائي للمعلمات.
  11. اضبط اتجاه الدوران بناء على ما إذا كان من المتوقع أن يكون ضعف البصر في إحدى العينين أو كلتيهما. لاحظ أنه بالنسبة لكل عين ، فإن الحركة فقط في الاتجاه الصدغي إلى الأنف تثير التتبع. وبالتالي ، قم بتقييم إصابة العين اليسرى باستخدام التحفيز في اتجاه عقارب الساعة (CW) ، حيث من المتوقع أن يؤدي التحفيز عكس اتجاه عقارب الساعة (CCW) إلى استجابات طبيعية. بالنسبة للتنكس أو الإصابة المتوقعة في كلتا العينين ، يمكن استخدام دوران المنبه في كلا الاتجاهين.
  12. انقر فوق بدء الإصدار التجريبي لبدء عرض التحفيز. ستبدأ الكاميرا أعلاه في تسجيل وتتبع حركات رأس. أثناء تقديم الحافز ، انقر فوق علامة التبويب التحليل لعرض معلمات السرعات الزاوية (دوران الرأس) وجودة المسار والنتيجة. في نهاية كل عرض تقديمي للتحفيز ، سيحدد البرنامج تلقائيا ما إذا كان سيتقدم (يشار إليه بعلامة الاختيار الخضراء) إلى Cyc / ° التالي ، أو يكرر التجربة ، أو يقلل Cyc / ° (يشار إليه بعلامة X الحمراء).
  13. أثناء التسجيل، إذا قام برنامج التتبع بقلب علامات الأنف (الحمراء) والذيل (الأخضر) بشكل غير صحيح، فاضغط على Ctrl على لوحة المفاتيح للسماح بالتجاوز اليدوي لتصحيح اتجاه الرأس والذيل.
  14. إذا سقط من المنصة ، فأوقف التجربة مؤقتا بالضغط على إيقاف التقييم مؤقتا أو النقر فوق مفتاح المسافة. قم بإزالة نفق المناولة من المنصة واستخدمه مع الغطاء للتعامل الآمن مع لوضعه مرة أخرى على المنصة. بمجرد أن يصبح جاهزا ، انقر فوق استئناف التقييم لمتابعة التجربة.
  15. بمجرد اكتمال جميع التجارب ، انقر فوق علامة التبويب الملخص لإظهار التجارب الناجحة باللون الأخضر والتجارب غير الناجحة باللون الأحمر. تشير التجربة المحاطة بدائرة خضراء إلى عتبة حدة البصر للسنجاب باستخدام تباين 12.78٪. أعد بعناية إلى قفص منزله.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يعتبر OMR ناجحا بمجرد أن يحدد البرنامج العتبة البصرية التي يحددها أداء في تجارب تمييز التردد المكاني. على وجه التحديد ، يتم تعريف العتبة على النحو التالي: تجربتان ناجحتان بتردد مكاني معين (تقاس ب cyc / °) ، تليها ثلاث تجارب فاشلة في التردد المكاني الأعلى التالي. تم إجراء OMR على السناجب الأرضية المبطنة المكونة من 13 مبطنة (6-8 أشهر من العمر) باستخدام المنصة المسطحة المستديرة القياسية (الشكل 3 أ) للمقارنة مع المنصة غير المكروهة ونفق المناولة (الشكل 3 ب). عندما تم...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

الخطوات الحاسمة

تسهيل دخول النفق - إحدى النقاط المهمة التي يجب مراعاتها هي أن السناجب تتطلب مجموعة الضميمة المطبوعة ثلاثية الأبعاد لتكون بمثابة غطاء مؤقت لنفق مستطيل الأكريليك. بدونها ، لن يدخلوا بسهولة. في منشأتنا ، يتم وضع السناجب الأرضية المكونة من 13 مبطنة بانتظام مع أسطوانة حمراء بحجم الفئران (الطول: 15.24 سم ، القطر: 7.62 سم). الغرض من العلبة المطبوعة ثلاثية الأبعاد هو توفير الإلمام بأنفاق التخصيب الخاصة بها ، مما يجعل التعامل معها أسهل....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن كيوهارو مياجيشيما وفرانسيسكو نادال نيكولاس وجون بول ووي لي عن عدم وجود مصالح مالية متنافسة. توماس مونش هو مالك ومدير البحث والتطوير في Striatech GmbH. بوريس بينكنر هو المؤسس والرئيس التنفيذي لشركة Striatech GmbH.

شكر وتقدير

تم دعم هذا البحث [جزئيا] من قبل برنامج البحوث الداخلية التابع للمعاهد الوطنية للصحة ، المعهد الوطني للعيون. تم دعم هذا العمل أيضا من قبل مكتب مساعد وزير الدفاع للشؤون الصحية ووكالة الصحة الدفاعية J9 ، مديرية البحث والتطوير ، من خلال برنامج أبحاث الرؤية تحت الجائزة رقم. (CDMRPL-18-0-VR180205). الآراء والتفسيرات والاستنتاجات والتوصيات هي آراء المؤلف ولا تؤيدها وزارة الدفاع بالضرورة. يشكر المؤلفون الدكتور Wenxin Ma على توفير الفئران rd10 و CX3CR1GFP / + ، والدكتور Haohua Qian (Visual Function Core ، NEI ، NIH) على المناقشة الثاقبة والمساعدة الفنية مع OMR ، ومتجر ماكينات NIMH / NINDS / NICHD للمساعدة في تصنيع المكونات ، وتشارلز كينج (مكتبة المعاهد الوطنية للصحة) للمساعدة في الطباعة ثلاثية الأبعاد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
12 فولت ماكس ليثيوم أيون اللاسلكي أداة دوارة كيتدريميل 8220F0138220JAلقص وتلميع أنبوب الأكريليك المربع.
https://www.dremel.com/us/en/p/8220-1-28-f0138220aa
6-0 خياطة VICRYL (polyglactin 910)إيثيكونJ670Gلخياطة جفن العين.
https://www.ethicon.com/na/epc/code/j670g?lang=en-default
أنبوب مربع أكريليك عديم اللون شفاف (2 بوصة × 12 بوصة)مركز القناة البلاستيكيةال RT-300161نفق مستطيل واضح (للماوس).
https://www.canalplastic.com/products/clear-colorless-acrylic-square-tube
أنبوب أكريليك مربع شفاف عديم اللون (3 × 12 بوصة)مركز القناة البلاستيكيةRT-300168نفق مستطيل واضح (للسنجاب).
https://www.canalplastic.com/products/clear-colorless-acrylic-square-tube
DREMEL EZ SpeedClic: عجلات القطع البلاستيكيةدريميلالطراز SC476لقطع أنبوب مربع الاكريليك
طابعة F270 ثلاثية الأبعادستراتاسيسلطباعة نماذج ثلاثية الأبعاد من الدرجة الهندسية للمنصات.
https://support.stratasys.com/en/printers/fdm-legacy/uprint
فلوريسو (إيزوفلوران)VetOne 502017التخدير العام. سائل للاستنشاق.
http://vetone.net/Default/GetFile?id=7dda0c60-45fa-e711-bf2e-0024e8785118
FreeCAD 1.0 مصمم 3D بارامتري مفتوح المصدر
برنامج Igor Pro الإصدار 6.3.7.2شركة WaveMetrics، Incلرسم الرسوم البيانية. https://www.wavemetrics.com/
أقنعة التخدير المنخفضة للمبخرات التقليدية
  ل SomnoFlo. كبير جدا (التي يزيد وزنها عن 300 جم)   ؛		مؤسسة كينت العلميةسومنو-0804لتوفير التخدير العام.
https://www.kentscientific.com/products/low-profile-anesthesia-masks-for-somnosuite/
MakerBot Print لنظام التشغيل Windows الإصدار 4.10.1.2056صناعات ميكربوت ذ م مبرنامج لتوجيه الأجزاء للطباعة
طابعة MakerBot Replicator المكتبية ثلاثية الأبعاد (الجيل الخامس)صناعات ميكربوت ذ م مMP05825لإصدارات النموذج الأولي للطباعة ثلاثية الأبعاد من المنصات.
https://www.rnd-tech.com/product/makerbot-replicator-desktop-3d-printer-5th-gen/
مايكروسوفت إكسلمايكروسوفتبرنامج جداول البيانات لتحليل البيانات. microsoft.com/en-us/microsoft-365/excel
قفازات عمل جلدية متعددة الأغراضشتاينر للصناعاتSPC02للتعامل مع السناجب.
https://www.steinerindustries.com/leather-palm/product/steiner-spc02-leather-palm-work-glove
OptoDrum Plusسترايا. التكنولوجياجهاز تجاري لقياس المنعكس البصري الحركي (حدة البصر وحساسية التباين) https://stria.tech/products/optodrum/  ؛
برنامج OptoDrum الإصدار 1.7.3سترايا. التكنولوجيابرنامج لتنفيذ المقاييس الآلية للانعكاس الحركي الضوئي.
بيروكسيجارد جاهز للاستخدام (منظف / مطهر)  بيروكسيجاردPRTU242101لتنظيف / تطهير المنصة وأنبوب الأكريليد المربع بين التجارب.
https://peroxigard.com/product-information/rtu/
آلة التخدير Pureline M6000
مع مكثف O2		شركة بن للإمداد البيطري ، وشركةSUPM6000لتخدير.
https://www.pennvet.com/customer/portal/catalog/home?urile=wcm:path%3APennVet+Catalog/Product+Catalog/SUPM6000/Pureline+M6000+Anesthesia+Mach+w_O2+Conc
طابعة uPrint SE Plus ثلاثية الأبعادستراتاسيسلطباعة نماذج ثلاثية الأبعاد من الدرجة الهندسية للمنصات.
https://www.makerbot.com/makerbot-print/
خيوط MakerBot PLA بيضاء غير شفافة ،
بكرة كبيرة للنسخ المتماثل + (0.9 كجم ، 2 رطل)		صناعات ميكربوت ذ م مMP05780خيوط لطباعة 3D المنصات.
https://store.ultimaker.com/3d-printer-materials/replicator-series-materials/makerbot-pla-material-large-spool-for-replicator
العلاج الدوائي
نيومايسين وبوليميكسين ب كبريتات < / > ومرهم عيون الزنك باسيتراسين ، USPBausch & لومبRX-0069مضاد حيوي ثلاثي للعين للوقاية من التهابات العين
بروباراكايين هيدروكلوريد 0.5٪أكورن17478-263-12مخدر موضعي لتقطير العيون

المراجع

  1. Ferguson, R., Miyagishima, K. J., Nadal-Nicolas, F. M., Li, W. Characterizing the rod pathway in cone-dominated thirteen-lined ground squirrels. Front Ophthalmol. 3, 1271882(2023).
  2. Nadal-Nicolas, F. M., Miyagishima, K. J., Li, W. In search for the "idyllic" animal model to evaluate ocular pathologies and translate new therapies to improve human health. Neural Regen Res. 17 (12), 2697-2699 (2022).
  3. Xiao, X., et al. Establishing the ground squirrel as a superb model for retinal ganglion cell disorders and optic neuropathies. Lab Invest. 101 (9), 1289-1303 (2021).
  4. Yanoga, F., et al. Sildenafil citrate induced retinal toxicity-electroretinogram, optical coherence tomography, and adaptive optics findings. Retin Cases Brief Rep. 12 (Suppl 1), S33-S40 (2018).
  5. Drug-induced colour vision disorders. Prescrire Int. 21 (127), 126-128 (2012).
  6. Widengard, I., Mandahl, A., Tornquist, P., Wistrand, P. J. Colour vision and side-effects during treatment with methazolamide. Eye. 9 (Pt 1), 130-135 (1995).
  7. Benkner, B., Mutter, M., Ecke, G., Munch, T. A. Characterizing visual performance in mice: An objective and automated system based on the optokinetic reflex. Behav Neurosci. 127 (5), 788-796 (2013).
  8. Chang, K., Chen, J., Rajagopalan, A., Chen, D. F., Cho, K. S. Testing visual function by assessment of the optomotor reflex in glaucoma. Methods Mol Biol. 2858, 219-227 (2025).
  9. Mui, A. M., et al. Daily visual stimulation in the critical period enhances multiple aspects of vision through bdnf-mediated pathways in the mouse retina. PLoS One. 13 (2), e0192435(2018).
  10. Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Invest Ophthalmol Vis Sci. 45 (12), 4611-4616 (2004).
  11. Shi, C., et al. Optimization of optomotor response-based visual function assessment in mice. Sci Rep. 8 (1), 9708(2018).
  12. Kretschmer, F., Tariq, M., Chatila, W., Wu, B., Badea, T. C. Comparison of optomotor and optokinetic reflexes in mice. J Neurophysiol. 118 (1), 300-316 (2017).
  13. Kretschmer, F., Kretschmer, V., Kunze, V. P., Kretzberg, J. Omr-arena: Automated measurement and stimulation system to determine mouse visual thresholds based on optomotor responses. PLoS One. 8 (11), e78058(2013).
  14. Kretschmer, F., Sajgo, S., Kretschmer, V., Badea, T. C. A system to measure the optokinetic and optomotor response in mice. J Neurosci Methods. 256, 91-105 (2015).
  15. Abdeljalil, J., et al. The optomotor response: A robust first-line visual screening method for mice. Vision Res. 45 (11), 1439-1446 (2005).
  16. Thaung, C., Arnold, K., Jackson, I. J., Coffey, P. J. Presence of visual head tracking differentiates normal sighted from retinal degenerate mice. Neurosci Lett. 325 (1), 21-24 (2002).
  17. Jecrois, E. S., et al. Treatment during a developmental window prevents nf1-associated optic pathway gliomas by targeting erk-dependent migrating glial progenitors. Dev Cell. 56 (20), 2871-2885.e6 (2021).
  18. Kandoi, S., Martinez, C., Merriman, D. K., Lamba, D. A. Characterization of retinal development in 13-lined ground squirrels. Transl Vis Sci Technol. 11 (11), 17(2022).
  19. Kryger, Z., Galli-Resta, L., Jacobs, G. H., Reese, B. E. The topography of rod and cone photoreceptors in the retina of the ground squirrel. Vis Neurosci. 15 (4), 685-691 (1998).
  20. Savignac, H. M., Dinan, T. G., Cryan, J. F. Resistance to early-life stress in mice: Effects of genetic background and stress duration. Front Behav Neurosci. 5, 13(2011).
  21. Hulliger, E. C., Hostettler, S. M., Kleinlogel, S. Empowering retinal gene therapy with a specific promoter for human rod and cone on-bipolar cells. Mol Ther Methods Clin Dev. 17, 505-519 (2020).
  22. Zhao, L., et al. Microglial phagocytosis of living photoreceptors contributes to inherited retinal degeneration. EMBO Mol Med. 7 (9), 1179-1197 (2015).
  23. Wang, T., et al. The pde6 mutation in the rd10 retinal degeneration mouse model causes protein mislocalization and instability and promotes cell death through increased ion influx. J Biol Chem. 293 (40), 15332-15346 (2018).
  24. Hwang, C. K., et al. Circadian rhythm of contrast sensitivity is regulated by a dopamine-neuronal pas-domain protein 2-adenylyl cyclase 1 signaling pathway in retinal ganglion cells. J Neurosci. 33 (38), 14989-14997 (2013).
  25. Merriman, D. K., Lahvis, G., Jooss, M., Gesicki, J. A., Schill, K. Current practices in a captive breeding colony of 13-lined ground squirrels (Ictidomys tridecemlineatus). Lab Anim. 41 (11), 315-325 (2012).
  26. Li, W. Ground squirrel - a cool model for a bright vision. Semin Cell Dev Biol. 106, 127-134 (2020).
  27. Gudapati, K., et al. Behavioral assessment of visual function via optomotor response and cognitive function via y-maze in diabetic rats. J Vis Exp. (164), e61806(2020).
  28. Stojcev, M., Radtke, N., D'amaro, D., Dyer, A. G., Neumeyer, C. General principles in motion vision: Color blindness of object motion depends on pattern velocity in honeybee and goldfish. Vis Neurosci. 28 (4), 361-370 (2011).
  29. Sajdak, B. S., et al. Noninvasive imaging of the tree shrew eye: Wavefront analysis and retinal imaging with correlative histology. Exp Eye Res. 185, 107683(2019).
  30. Okawa, H., et al. Optimal processing of photoreceptor signals is required to maximize behavioural sensitivity. J Physiol. 588 (Pt 11), 1947-1960 (2010).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

تقييد غير مكروه: يتيح تسجيل المنعكس البصري في السناجب الأرضية
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.