يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

التشخيص السريع لعدوى المتفطرة السلية ومقاومة الأدوية بناء على تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري في الوقت الفعلي

764 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/68445

⸱

يوليو 15, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The Fifth Division Hospital of Xinjiang Production and Construction Corps, 2Laboratory Medicine, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

هنا ، يتم تقديم بروتوكول للكشف عن المتفطرة السلية ومقاومتها للأدوية باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الفعلي (qPCR).

الملخص

يعد السل مصدر قلق صحي رئيسي يؤثر بشكل غير متناسب على الفئات السكانية الضعيفة. يشكل ظهور السل المقاوم للأدوية وانتشاره تهديدا خطيرا للصحة العمومية العالمية. طرق التشخيص التقليدية لمتفطرة السل (MTB)، مثل الفحص المجهري للطاخة والثقافة، لها قيود كبيرة وغالبا ما تؤدي إلى تأخر العلاج السريري. لمواجهة هذا التحدي ، تم تطوير مخطط تشخيصي فعال يعتمد على تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري في الوقت الفعلي. يمكن استخراج الأحماض النووية MTB عالية الجودة من عينات الاختبار ، ويمكن تحديد حالة المقاومة في مواقع المقاومة الرئيسية. بالمقارنة مع الطرق التقليدية ، يقلل هذا النهج بشكل كبير من وقت الكشف إلى بضع ساعات فقط ، مما يتيح تحديد حالة العدوى والمقاومة بعد فترة وجيزة من الزيارة الأولى للمريض. تتجاوز حساسية الكشف 85٪ ، وتصل الخصوصية إلى 95٪. لا تقلل هذه التقنية غير الغازية من انزعاج المريض فحسب ، بل تدعم أيضا التشخيص الدقيق في المؤسسات الطبية الشعبية نظرا لتكلفتها المنخفضة وكفاءتها العالية. وبشكل عام، يمثل هذا النهج تحسنا كبيرا في تشخيص السل.

المقدمة

يعد السل (TB) ، وهو مرض معد مزمن تسببه المتفطرة السلية (MTB) ، من بين الأسباب العشرة الأولى للوفاة في العالم1. يمثل السل المقاوم للأدوية تحديا كبيرا لجهود مكافحة السل. تؤكد خطة العمل لبناء مجتمعات خالية من السل (2022-2027) ، الصادرة عن المركز الصيني لمكافحة الأمراض والوقاية منها (China CDC) ، على الحاجة إلى إجراء فحص مبكر لمقاومة الأدوية لدى جميع مرضى السل الرئوي المؤكدينبكتريولوجيا 2. وتدعو إلى اعتماد تكنولوجيات جديدة للتشخيص الجزيئي لتعزيز قدرات الكشف عن السل المقاوم للأدوية، وتقصير الجداول الزمنية للتشخيص، وتحديد حالات السل المقاوم للأدوية إلى أقصى حد، وضمان توحيد العلاج والتدبير العلاجي، وتنفيذ تدابير مكافحة العدوىاللازمة. علاوة على ذلك، ينص الإشعار المتعلق بتعزيز الوقاية من السل المقاوم للأدوية ومكافحته (رقم 4 لعام 2023) على تعزيز تقنيات التشخيص المتقدمة على الصعيد الوطني. ويحث على فحص المقاومة في الوقت المناسب لجميع مرضى السل المؤكدين بكتيريا لتحقيق الفحص الشامل، وتحسين توحيد التشخيص، وتعزيز إمكانية الوصول إلى الرعاية الصحية4.

يشير السل المقاوم للأدوية إلى حالات السل المقاومة لدواء واحد على الأقل مضاد للسل. تشمل التصنيفات الحالية السل المقاوم للريفامبيسين (RR) ، والمقاومة الأحادية ، والمقاومة المتعددة ، والمقاومة للأدوية المتعددة (MDR) ، والمقاومة للأدوية الواسعة النطاق (قبل XDR) ، والسل المقاوم للأدوية على نطاق واسع (XDR). يكشف تحليل تلوي عالمي لوبائيات السل المقاوم للأدوية المقاومة للقلق معدلات مقاومة مقلقة: السل المقاوم للأدوية المتعددة بنسبة 11.6٪، ومقاومة الأيزونيازيد بنسبة 15.7٪، ومقاومة الريفامبيسين بنسبة 9.4٪، والمقاومة الأحادية بنسبة 11.8٪. وتؤكد هذه البيانات خطورة وتعقيد السلالمقاوم للأدوية 5.

ويعتبر ريفامبيسين والإيزونيازيد من الأدوية الأساسية لعلاج السل. ومع ذلك ، تلاحظ منظمة الصحة العالمية (WHO) أنه في حين أن تقنيات التشخيص السريع لمقاومة الريفامبيسين متوفرة ، إلا أنه لا توجد أدوات مماثلة لمقاومة الأيزونيازيد. وتعوق هذه الفجوة تشخيص السل المقاوم للأدوية المتعددة في الوقت المناسب. يعكس التعريف المؤقت ل "السل المقاوم للريفامبيسين" هذا القيد التشخيصي ، مما يسلط الضوء على عدم كفاية القدرة على الكشف السريع عن مقاومة الأدوية الأخرى6،7. وتقدر منظمة الصحة العالمية أن حالات السل المقاومة للإيزونيازيد أكثر انتشارا بمرتين من الحالات المقاومة للريفامبيسين. الاعتماد الحصري على مخاطر فحص مقاومة الريفامبيسين التي تتجاهل السل الأحادي المقاوم للإيزونيازيد8. يواجه مرضى السل البشري غير المكتشف الذين عولجوا بأنظمة قياسية مخاطر متزايدة لفشل العلاج والانتكاس والتقدم إلى السل المقاوم للأدويةالمتعددة 9. مقاومة الإيثامبوتول مثيرة للقلق أيضا. باعتباره دواء حيويا لعلاج السل والسل المقاوم للأدوية المتعددة، أفادت الدراسة الاستقصائية الأساسية للسل المقاوم للأدوية المتعددة في الصين لعام 2017 بمعدلات مقاومة للإيثامبوتول بلغت 4.9٪ في الحالات الجديدة و 17.2٪ في حالات إعادةالعلاج 10.

في الوقت الحاضر ، للكشف عن مقاومة السل المتبقي للأدوية ، لا يزال الاستزراع الاصطناعي هو الطريقة المفضلة في بعض المختبرات ، لكن تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري في الوقت الفعلي تتفوق على الطرق التقليدية في الكشف عن مقاومة السل للأدوية: الكشف والقياس الكمي: يوفر تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري في الوقت الفعلي تحليلا كميا دقيقا من خلال المراقبة في الوقت الفعلي لإشارات الفلورسنت ، بينما تفتقر الطرق التقليدية إلى هذه الدقة. تستغرق طرق التجربة التقليدية وقتا طويلا وتتطلب عمالة مكثفة ، وتتطلب موظفين مدربين ، وهي ذاتية للغاية. على العكس من ذلك ، يلتقط تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي مجسات وإشارات الفلورسنت عن طريق الكمبيوتر ، مما يقلل من الأخطاء البشرية. تعد طرق تحليل البيانات التقليدية أكثر ذاتية ، بينما تحقق تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي تحليلا دقيقا وموضوعيا من خلال منحنيات التضخيم والمنحنيات القياسية وطرق التحليل الأخرى. هذه التطورات تجعل تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري في الوقت الفعلي الطريقة المفضلة للكشف عن مقاومة السل للأدوية11.

باختصار، برز السل المقاوم للأدوية كأزمة عالمية. وتزيد مقاومة الأدوية الرئيسية - الأيزونيازيد والريفامبيسين والإيثامبوتول - من تعقيد جهود مكافحة السل. يعد الكشف الدقيق في الوقت المناسب عن مقاومة الأدوية أمرا بالغ الأهمية لتوجيه أنظمة العلاج المصممة خصيصا ، وتحسين النجاح العلاجي ، والتخفيف من تهديد السل المقاوم للأدوية.

لمواجهة التحدي التشخيصي ، استخدمت هذه الدراسة مجموعة يمكنها تحديد المتفطرة السلية واكتشاف الطفرات المقاومة للأدوية في غضون 3.5 ساعة باستخدام عينات البلغم. تم تحقيق ذلك بدعم من qPCR الفلوري في الوقت الفعلي. وهذه الطريقة بسيطة وفعالة من حيث التكلفة ودقيقة، مما يجعلها أداة قيمة في مكافحة السل المقاوم للأدوية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على هذا البحث من قبل لجنة الأخلاقيات في مستشفى القسم الخامس في فيلق شينجيانغ للإنتاج والبناء. رقم الأخلاق LLWYH2025001 ، ولا يوجد تعارض أخلاقي. الكواشف والمعدات المستخدمة مدرجة في جدول المواد.

1. جمع العينات

  1. استخدم زجاجات البلغم ذات الغطاء اللولبي الموحدة دوليا الموصى بها من قبل منظمة الصحة العالمية (WHO) ، أو الصناديق البلاستيكية محكمة الغلق وصناديق ورق الشمع ، لجمع عينات البلغم.
  2. قم بتسمية حاويات البلغم باسم المريض ورقمه (رقم تسلسل العيادات الخارجية للمرضى الجدد أو رقم التسجيل لمرضى المتابعة) وعناصر الفحص وأرقام تسلسل الحاوية 1 و 2 و 3 (1 = بلغم فوري في نفس اليوم ، 2 = بلغم الليل ، 3 = بلغم الصباح في اليوم التالي). بالنسبة للمرضى الذين لا يعانون من البلغم ، اجمع العينات من خلال جمع البلغم الناجم عن الهباء الجوي.
    ملاحظة: يجب على الموظفين تقييم جودة عينات البلغم التي تم جمعها. يجب الحفاظ على حجم العينة بشكل عام عند 3-5 مل. تشمل العينات المؤهلة البلغم الجاف أو البلغم الملطخ بالدم البني أو البلغم الذي يحتوي على كمية صغيرة من الدم الطازج أو البلغم المخاطي. يجب إعادة تقديم العينات غير المؤهلة ، مثل اللعاب ، للاختبار بعد مزيد من الإرشادات.

2. المعالجة المسبقة للبلغم

  1. أضف 1-2 أضعاف حجم محلول هيدروكسيد الصوديوم بنسبة 4٪ إلى حاوية البلغم بناء على حجم البلغم الذي تم جمعه. رج المحتويات واخلطها لمدة 2 دقيقة.
  2. ضع الحاوية في خزانة السلامة الحيوية في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة ، مع رجها عدة مرات خلال هذه الفترة لضمان تسييل البلغم بالكامل.
    ملاحظة: تعامل مع هيدروكسيد الصوديوم بحذر بسبب طبيعته المسببة للتآكل. إذا لم يتم تسييل البلغم بالكامل ، فقم بزيادة وقت الاهتزاز. هذه الخطوة مهمة بشكل خاص طوال التجربة.

3. تحضير الكاشف (منطقة ما قبل PCR)

  1. تحضير الكواشف: تحضير الكواشف في منطقة ما قبل تفاعل البوليميراز المتسلسل المخصصة. قم بإذابة الكواشف المجمدة إلى درجة حرارة الغرفة. دوامة لمدة 5-10 ثوان. جهاز طرد مركزي عند 3000 × جم لمدة 5-10 ثوان في درجة حرارة الغرفة.
    ملاحظة: هذا الكاشف هو نظام مزدوج (A / B) ويجب تحضيره بشكل منفصل.
  2. تحضير الخليط الرئيسي PCR
    1. مزيج أ: في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مل ، امزج (ن + 3) × 19.6 ميكرولتر من RIF PCR Mix A و (ن + 3) × 0.4 ميكرولتر من إنزيم السل. دوامة لمدة 5-10 ثوان. جهاز طرد مركزي عند 3000 × جم لمدة 5-10 ثوان في درجة حرارة الغرفة (PCR Mix A: 60 ميكرولتر).
    2. المزيج ب: في أنبوب آخر للطرد المركزي الدقيق سعة 1.5 مل ، امزج (ن + 3) × 19.6 ميكرولتر من RIF PCR Mix B و (ن + 3) × 0.4 ميكرولتر من إنزيم السل. الدوامة والطرد المركزي على النحو الوارد أعلاه (PCR Mix B: 60 μL).
  3. التخزين والاستخدام: قم بتخزين الخلطات الرئيسية المحضرة عند ≤-18 درجة مئوية. إذا لم يتم استخدامه على الفور ، استخدمه في غضون 4 ساعات.
    ملاحظة: ينطبق نفس البروتوكول على كواشف EMB و INH.
  4. Aliquoting مزيج PCR الرئيسي: قم بتوزيع 20 ميكرولتر من PCR Mix A و Mix B في أنابيب تفاعل PCR منفصلة رقيقة الجدران. انقل الأنابيب المقتبسة في أكياس محكمة الغلق إلى منطقة الاستخراج.

4. استخراج الحمض النووي وتحميل العينة (منطقة الاستخراج)

  1. جهاز طرد مركزي 1.2 مل من البلغم المسال بالكامل عند 15,058 × جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. تخلص من المادة الطافية واحتفظ بالحبيبات. اختياري: جهاز الطرد المركزي للعينة المهضومة بالكامل إذا سمحت المعدات بذلك.
  2. أعد تعليق الحبيبات في 1.2 مل من المحلول الملحي والدوامة وأجهزة الطرد المركزي عند 15,058 × جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. كرر خطوة الغسيل هذه ثلاث مرات.
  3. أضف 250 ميكرولتر من المخزن المؤقت لاستخراج السل إلى الحبيبات. دوامة وإجراء التحلل الحراري عند 99 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. تبرد إلى درجة حرارة الغرفة. جهاز طرد مركزي عند 15،058 × جم لمدة 1 دقيقة في درجة حرارة الغرفة وجمع المادة الطافية (العينة المستخرجة).
    ملاحظة: بالنسبة للعينات اللزجة، قم بزيادة حجم المخزن المؤقت للتسييل أو قم بتمديد وقت الدوامة. إذا كانت العينات مخصصة فقط لاستخراج الحمض النووي ، فقم بإطالة وقت التسييل لضمان الهضم الكامل.
  4. باستخدام ماصة دقيقة، أضف 5 ميكرولتر من العينة المستخرجة أو عناصر التحكم السالبة/الإيجابية إلى كل أنبوب تفاعل رقيق الجدران PCR. أغلق الأنابيب على الفور وقم بتسمياتها بشكل مناسب.
  5. أنابيب PCR محملة بالدوامة لمدة 5-10 ثوان وأجهزة الطرد المركزي لفترة وجيزة (5-10 ثوان). نقل الأنابيب إلى منطقة تضخيم PCR.

5. تضخيم PCR (منطقة التضخيم)

ملاحظة: تم وضع برامج للكشف عن مقاومة الريفامبيسين والإيثامبوتول والأيزونيازيد على جهاز تدوير حراري هونغشي (الجدول 1 ، الجدول 2 ، والجدول 3). وتشمل شروط ركوب الدراجات.

  1. ضع أنابيب التفاعل ذات الجدران الرقيقة PCR المحملة في جهاز التدوير الحراري للتضخيم.
  2. الوصول إلى واجهة cycler. انقر فوق معالج التجربة وحدد نوع التجربة كمنحنى ذوبان قياسي (كما هو موضح في الشكل 1).
  3. انقر فوق محرر اللوحة ، وحدد أفقيا بئرين فارغين متجاورين ، وقم بتعيين قالب الدواء المقابل من اللوحة اليمنى لتحديد عينة واحدة (كما هو موضح في الشكل 2).
  4. تكوين عناصر التحكم السلبية/الإيجابية وعينة المعلومات. انقر فوق ابدأ لبدء البرنامج. مدة التشغيل 2 ساعة و 22 دقيقة.
  5. عند الانتهاء ، انقل أنابيب التفاعل ذات الجدران الرقيقة PCR (محكمة الإغلاق) إلى كيس محكم الغلق. قم بتأمين الإغلاق والتعامل معه كنفايات خطرة بيولوجيا.
  6. انقر فوق تحليل على Thermal Cycler لمعالجة البيانات.
    ملاحظة: حدود الكشف عن هذه الطريقة هي كما يلي: المجموعة المركبة: 10 بكتيريا / مل ؛ ريفامبيسين: 20,000 بكتيريا / مل ؛ إيزنيازيد: 10,000 بكتيريا / مل ؛ إيثامبوتول: 10,000 بكتيريا / مل. (بيانات حد الكشف (LoD) مشتقة من التحليل الإحصائي ل 765 حالة سريرية منصوص عليها في دليل تعليمات الكاشف.)

6. تفسير النتائج

  1. تحديد الطفرات من خلال مقارنة الاختلافات في درجة حرارة الانذوبان (Tm) بين عينات الاختبار والضوابط الإيجابية.
    ملاحظة: النوع البري (حساس للأدوية): تتطابق قيم Tm للعينة مع التحكم الإيجابي في جميع القنوات الأربع (الانحراف ≤1 درجة مئوية). متحولة (مقاومة للأدوية): قيمة Tm في أي قناة أقل بمقدار ≥2 درجة مئوية من التحكم الإيجابي (ΔTm ≥2 °C).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

استخدمت هذه الدراسة تحليل PCR الفلوري في الوقت الفعلي وتحليل منحنى الذوبان لاختبار عينات البلغم من 17 مريضا بالسل. بالإضافة إلى ذلك ، خضع 30 مريضا لاختبار مقاومة الريفامبيسين ، وتم اختبار 20 لمقاومة الإيزونيازيد والإيثامبوتول. أظهرت طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري في الوقت الفعلي معدل اكتشاف إيجابي بنسبة 88.2٪ لمركب المتفطرة السلية .

كانت معدلات المقاومة 13.3٪ للريفامبيسين و 15.0٪ للأ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أدى ظهور سلالات متفطرة السل المعقدة المقاومة للأدوية على نطاق عالمي إلى تعقيد علاج مرضى السل بشكل كبير. على وجه الخصوص، يشكل السل المقاوم للأدوية المتعددة والسل المقاوم للأدوية على نطاق واسع تحديات هائلة لمكافحةالسل 12. يعد الكشف السريع عن مقاومة الأدوية أمرا بالغ الأهمية لتصميم أنظمة العلاج المناسبة ، ومنع الفشل العلاجي ، والحد من انتشار السلالات المقاومة13 ، 14. اكتسبت طرق الكشف القائمة على تقني...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

تم تمويل هذه الدراسة من خلال منحة خاصة من مشروع السل الفيلق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
أجهزة الطرد
تحلل العازلةشيامن Zhishan التكنولوجيا الحيوية المحدودة24110701
طقم الكشف عن الطفرات المقاومة للمتفطرة السلية EthambutolXiamen Zhishan Biotechnology Co.، Ltd.24030801
طقم الكشف عن الطفرات المقاومة للمتفطرة السلية IsoniazidXiamen Zhishan Biotechnology Co.، Ltd.24011101
المتفطرة السلية ريفامبيسين مقاومة الطفرات للكشف عن كيشيامن Zhishan التكنولوجيا الحيوية المحدودة24031001
SLAN-96P نظام PCR في الوقت الحقيقيشنغهاي Hongshi Medical Technology Co.، Ltd.SLAN-96P
شيامن Zhishan التكنولوجيا الحيوية المحدودة24110701
TopPette ماصة
المركزي عالية السرعةحل معالجة البلغم

المراجع

  1. Salari, N., et al. Global prevalence of drug-resistant tuberculosis: A systematic review and meta-analysis. Infect Dis Poverty. 12 (1), 57(2023).
  2. Cai, X., Xu, X., He, G., Jiang, X., Wu, L. Drug resistance in drug-resistant tuberculosis patients with and without diabetes mellitus: A comparative analysis. BMC Infect Dis. 24 (1), 807(2024).
  3. Egan, K. A., et al. Compensatory evolution in NusG improves fitness of drug-resistant M. tuberculosis. Nature. 628 (8006), 186-194 (2024).
  4. Sulis, G., Pai, M. Isoniazid-resistant tuberculosis: A problem we can no longer ignore. PLoS Med. 17 (1), e1003023(2020).
  5. Perumal, R., et al. Regimens for drug-resistant tuberculosis. N Engl J Med. 388 (2), 189(2023).
  6. Menzies, D., et al. Effect of duration and intermittency of rifampin on tuberculosis treatment outcomes: A systematic review and meta-analysis. PLoS Med. 6 (9), e1000146(2009).
  7. Turkova, A., et al. Shorter treatment for nonsevere tuberculosis in African and Indian children. N Engl J Med. 386 (10), 911-922 (2022).
  8. Diagnosis of tuberculosis and detection of drug-resistance: rapid communication. , World Health Organization. https://www.who.int/publications/i/item/B09111 (2024).
  9. Xiang, X., et al. Mycobacterial ethambutol responsive genes and implications in antibiotics resistance. J Drug Target. 29 (3), 284-293 (2021).
  10. Deshpande, A., Likhar, R., Khan, T., Omri, A. Decoding drug resistance in Mycobacterium tuberculosis complex: Genetic insights and future challenges. Expert Rev Anti Infect Ther. 22 (7), 511-527 (2024).
  11. Sun, Q., et al. Mutations within embCAB are associated with variable level of ethambutol resistance in Mycobacterium tuberculosis isolates from China. Antimicrob Agents Chemother. 62 (1), e01279-e01317 (2017).
  12. Noordhoek, G. T., et al. Sensitivity and specificity of PCR for detection of Mycobacterium tuberculosis: A blind comparison study among seven laboratories. J Clin Microbiol. 32, 277-284 (1994).
  13. Lee, H., et al. Assessment of the quantitative ability of AdvanSure TB/NTM real-time PCR in respiratory specimens by comparison with phenotypic methods. Ann Lab Med. 34, 51-55 (2014).
  14. Murphy, S. G., et al. Direct detection of drug-resistant Mycobacterium tuberculosis using targeted next generation sequencing. Front Public Health. 11, 1206056(2023).
  15. Araya, B. T., et al. Performance of the Abbott RealTime MTB and RIF/INH resistance assays for the detection of Mycobacterium tuberculosis and resistance markers in sputum specimens. PLoS One. 16, e0251602(2021).
  16. Motta, I., et al. Recent advances in the treatment of tuberculosis. Clin Microbiol Infect. 30 (9), 1107-1114 (2024).
  17. Zhang, X., et al. A new method for the detection of Mycobacterium tuberculosis based on the CRISPR/Cas system. BMC Infect Dis. 23 (1), 680(2023).
  18. Sam, I. K., et al. TB-QUICK: CRISPR-Cas12b-assisted rapid and sensitive detection of Mycobacterium tuberculosis. J Infect. 83 (1), 54-60 (2021).
  19. Park, Y. K., et al. Correlation of the phenotypic ethambutol susceptibility of Mycobacterium tuberculosis with embB gene mutations in Korea. J Med Microbiol. 61 (4), 529-534 (2012).
  20. Global tuberculosis report. , World Health Organization. https://www.who.int/teams/global-programme-on-tuberculosis-and-lung-health/tb-reports/global-tuberculosis-report-2023 (2023).
  21. Parsa, S., et al. Detection of isoniazid and rifampin resistance in Mycobacterium tuberculosis clinical isolates from sputum samples by high-resolution melting analysis. Curr Microbiol. 79 (9), 257(2022).
  22. Plinke, C., et al. embCAB sequence variation among ethambutol-resistant Mycobacterium tuberculosis isolates without embB306 mutation. J Antimicrob Chemother. 65 (7), 1359-1367 (2010).
  23. Xie, L., et al. Accurate and affordable detection of rifampicin and isoniazid resistance in tuberculosis sputum specimens by multiplex PCR-multiple probes melting analysis. Infection. 52 (6), 2371-2398 (2024).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

تشخيص السلالسل المقاوم للأدويةتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقياستخلاص الحمض النوويالكشف عن المقاومةالفحص المجهري للمسحاتطريقة المزرعةالحساسية التشخيصية

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.