تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية الموضحة في هذه الدراسة من قبل اللجنة الأخلاقية المؤسسية للتجارب على التابعة لمعاهد شنتشن للتكنولوجيا المتقدمة (رقم الشهادة: SIAT-IACUC-200721-YGS-NLL-A1313). استخدمت جميع التجارب ذكور الفئران C57BL / 6J (8 أسابيع). كان وزن الفئران 18-22 جم وقت الجراحة.
1. تحريض التخدير والصيانة (5 ± 1 دقيقة)
- اشحن دائرة التخدير مسبقا لمدة 5 دقائق.
- اضبط حجرة الحث على توصيل 4٪ من الأيزوفلوران في الهواء الطبي بمعدل تدفق 2 لتر / دقيقة.
- قم بالتبديل إلى تهوية قناع الوجه بعد فقدان المنعكس الصحيح.
- اضبط المرذاذ للحفاظ على تركيز 1.5-2٪ إيزوفلوران.
- حافظ على درجة حرارة جسم الفأر باستخدام بطانية الاحترار على 37 درجة مئوية ، مع نطاق مستهدف من 36-38 درجة مئوية طوال فترة التخدير.
- ضع مرهم Terramycin للعيون.
2. تحديد المواقع (1 ± 1 دقيقة)
- استخدم محولا تجسيميا قابلا للتعديل للماوس.
- ضع الفأر بخط مع محاذاة العمود الفقري للحفاظ على الانحناء الفسيولوجي للعمود الفقري.
- قم بتأمين رأس الماوس باستخدام قضبان الأذن.
- ضع الأطراف بشكل متماثل.
3. التحضير الميداني الجراحي (1 ± 1 دقيقة)
- استخدم ماكينة قص كهربائية (فجوة الشفرة 0.1 مم) لإزالة الشعر من موقع الجراحة.
- تأكد من أن مساحة إزالة الشعر حوالي 3 سم × 1 سم.
- قم بإجراء ثلاث تمريرات من القص في الاتجاه المعاكس لنمو الشعر.
4. الشق والنهج (2 ± 1 دقيقة)
- امسح المنطقة باليودوفور 3 مرات (30 ثانية).
- امسح الضلع الأخير (المتصل بفقرة T13 في الفئران) واستخدمه ك
المعلم الأساسي. قم بعمل شق 2.5 سم على مستوى العمود الفقري T13 على طول
خط الوسط الظهري باستخدام مشرط.
- تشريح اللفافة تحت الجلد بالتتابع.
- كشف العضلات المجاورة للنخاع من خلال الطائرات التشريحية.
5. تسلخ العضلات المجاورة الشوكية (5 ± 1 دقيقة)
- اضبط تكبير المجهر الجراحي على 5x للحصول على التصور الأمثل للعضلات المجاورة للنخاع والهياكل الفقرية.
- قم بإجراء تشريح حاد للعضلات المجاورة للنخاع باستخدام مقص دقيق.
- استئصال العضلات الظهرية والجانبية المجاورة للنخاع تماما مع الحفاظ على طبقات العضلات البطنية.
- إدارة النزيف باستخدام شاش مرقئ قابل للامتصاص.
6. تركيب قاعدة معدنية (1 ± 1 دقيقة)
- قم بتركيب قضيب التثبيت (البلاستيك) على المحول التجسيمي.
- قم بتركيب القاعدة المعدنية المخصصة (الفولاذ المقاوم للصدأ ، 0.28 جم) في الطرف البعيد للقضيب (الشكل 1 أ).
- ضع القاعدة المعدنية المخصصة بشكل ثنائي في العمليات المستعرضة للعمود الفقري T13.
- تحقق من استقرار أداة التوصيل.
7. تحضير واجهة العظام (2 ± 1 دقيقة)
- إزالة الأنسجة العضلية المتبقية من الصفيحة والعمليات الشائكة تحت المجهر الجراحي.
- حقق إرقاء كامل باستخدام ضغط القطن المعقم.
- قم بإنشاء سطح تلامس مستو باستخدام مثقاب عظام دقيق مع الري الملحي المستمر. قم بتشغيل المثقاب بسرعة 5,000-10,000 دورة في الدقيقة لتقليل توليد الحرارة. ارتد واقيا للعين وقناعا أثناء الحفر.
- قم بإزالة غبار العظام باستخدام مسحات قطنية مبللة بالمحلول الملحي.
8. ختم نظام التثبيت (3 ± 1 دقيقة)
- امزج المواد الأساسية لأطقم الأسنان ولاصق سيانواكريليت (502 غراء) بنسبة حجم 3: 1. ارتد قفازات النتريل ونظارات واقية لمنع ملامسة الجلد / العين.
- قم بتوصيل الموازاة بالموجات فوق الصوتية (البلاستيك ، 0.6 جم ، الشكل 1 ب) والقاعدة المعدنية بالعمود الفقري باستخدام الخليط اللاصق (الشكل 1 ج).
- اترك الخليط اللاصق يجف في ظل الظروف المحيطة الخاضعة للرقابة (24 ± 1 درجة مئوية ، 40-60٪ رطوبة نسبية). حافظ على الوضع الثابت لمدة 60 ثانية حتى التأكيد البصري للتصلب الكامل (فقدان لمعان السطح وتشكيل واجهة صلبة).
- افصل القاعدة المعدنية عن قضيب التثبيت البلاستيكي.
- التحقق من استقرار التثبيت: قم بتطبيق قوة دوران لطيفة على القاعدة المعدنية في المستوى الأفقي. راقب الواجهة الموازية والفقرة تحت تكبير 5x لأي إزاحة (تحمل <0.1 مم). إذا تجاوزت الحركة التحمل ، أعد وضع الخليط اللاصق (الخطوة 8.2) وكرر المعالجة (الخطوة 8.3).
9. إغلاق الجرح (1 ± 1 دقيقة)
- قم بمحاذاة حواف الجرح لتغليف القاعدة المعدنية بالكامل.
- قم بإجراء خياطة متقطعة باستخدام 4-0 خيوط حريرية.
- امسح الشق باليودوفور.
- قم بإزالة بقايا الدم / العظام المتبقية داخل موقع التعرض الرقائقي للموازية وقم بتعبئتها بقطن معقم للختم والإرقاء.
10. إدارة ما بعد الجراحة
- التنظيم الحراري: حافظ على الفأر على بطانية تدفئة (37 درجة مئوية) حتى الشفاء التام من التجوال (عادة 2-3 ساعات بعد التخدير).
- الوقاية من المضادات الحيوية بعد الجراحة: يتم تطبيق سيفازولين الصوديوم (50 ملغ/كغ، مذاب في محلول ملحي 0.9٪ بتركيز 50 ملغم/مل) عن طريق الحقن تحت الجلد في منطقة الرقبة الظهرية مباشرة بعد الجراحة.
- الحفاظ على نظافة الجروح. نظف الجرح باستخدام قطعة قطن مبللة بالمحلول الملحي مرة واحدة يوميا لمدة 3 أيام الأولى وقم بإجراء فحص يومي لموقع الجراحة بحثا عن علامات العدوى أو التفرز أو الالتهاب.
- تسكين ما بعد الجراحة: يتم تطبيق الكاربروفين (5 ملغ/كغ، تحت الجلد) كل 12 ساعة لمدة 3 أيام بعد الجراحة11.
ملاحظة: يوضح الشكل 1D نظام التثبيت المزروع في فأرة حية بعد الاسترداد.
11. التخلص من النفايات الخطرة
- جمع غبار العظام والمواد الملوثة بالدم في أكياس بيولوجية مانعة للتسرب تحمل علامات "Biohazard" لنقلها إلى منشأة مرخصة للتخلص من النفايات الطبية.
- ضع مادة أساسية لأطقم الأسنان غير المعالجة و 502 بقايا غراء في حاويات محكمة الغلق مقاومة للمواد الكيميائية تحمل علامة "نفايات كيميائية" ، وقم بتخزينها في خزانة مخصصة جيدة التهوية للتخلص منها عبر بروتوكولات إدارة النفايات الكيميائية.
- تخلص من الإبر وشفرات المشرط والمثاقب العظمية في حاويات الأدوات الحادة المقاومة للثقب والتي تحمل ملصقات "Biohazard".
12. تحذيرات السلامة
- عند التعامل مع المواد ذات القاعدة الأسنانية ، تجنب ملامسة الجلد مباشرة عن طريق ارتداء قفازات النتريل ونظارات السلامة ، وقم بإجراء الخلط والمعالجة في غطاء دخان جيد التهوية لتقليل استنشاق المونومرات المتطايرة.
- التخلص من المواد المتبقية كنفايات كيميائية وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية. بالنسبة إلى 502 مادة لاصقة سيانواكريليت ، امنع ملامسة الجلد أو العين واشطفها على الفور بالماء لمدة 15 دقيقة في حالة حدوث تعرض ، واطلب المساعدة الطبية. استخدمها في مناطق جيدة التهوية ، وقم بتخزينها في أماكن باردة وجافة بعيدا عن مصادر الاشتعال ، وتجنب ملامسة الأقمشة القطنية أو الصوفية.
- عند استخدام المثاقب الدقيقة ، قم بتأمين المقبض ، وارتداء واقي للوجه وقناع جراحي ، وري موقع الحفر بالمحلول الملحي لمنع الإصابة الحرارية.