يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

تنظيم الانتقال الظهاري إلى اللحمة المتوسطة في سرطان المبيض بواسطة LncRNA MALAT1 عبر SNAI2 و MiR-200c-3p

473 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/68653

⸱

أغسطس 22, 2025

 , 
1Department of Obstetrics and Gynecology, Affiliated Hospital of Putian University

في هذه المقالة

ملخص

يصف هذا البروتوكول طرقا لتقييم دور MALAT1 في تعزيز الانتقال الظهاري الوسيط في سرطان المبيض الظهاري من خلال تنظيمه لمحور miR-200c-3p / SNAI2.

الملخص

ينظم الحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر MALAT1 الانتقال الظهاري الوسيط (EMT) والورم الخبيث في سرطان المبيض الظهاري (EOC) من خلال آلية الحمض النووي الريبي الداخلي المتنافسة (ceRNA) التي تتضمن تعديل miRNA. هدفت هذه الدراسة إلى توضيح المسار الجزيئي الذي يؤثر من خلاله MALAT1 على EMT والسلوك النقيلي من خلال التفاعل مع miR-200c-3p و SNAI2. تم التلاعب بتعبير MALAT1 وراثيا في خط خلية EOC SK-OV-3 إما عن طريق الإفراط في التعبير أو الضربة القاضية. تم تقييم التأثيرات الوظيفية على مستويات البروتين المرتبطة بالطب الكهربائي ، وهجرة الخلايا ، والغزو باستخدام النشاف الغربي ، والتئام الجروح ، ومقايسات Transwell ، على التوالي. حدد تحليل المعلوماتية الحيوية miR-200c-3p كهدف مشترك ل MALAT1 و SNAI2. تم التحقق من صحة محور MALAT1 / miR-200c-3p / SNAI2 بشكل أكبر من خلال فحوصات مراسل لوسيفيراز مزدوج وتلوين التألق المناعي لتأكيد التفاعلات الجزيئية المباشرة. أدى الإفراط في التعبير عن MALAT1 إلى تعزيز هجرة خلايا SK-OV-3 بنسبة 20٪ والغزو بنسبة 5٪ ، مصحوبا بزيادة كبيرة في تعبير SNAI2 (P < 0.01). على العكس من ذلك ، قمعت ضربة قاضية MALAT1 هذه الأنماط الظاهرية. أكدت فحوصات اللوسيفيراز المزدوجة أن miR-200c-3p يرتبط مباشرة بكل من MALAT1 و SNAI2 (ص < 0.001). أدى الإفراط في التعبير miR-200c-3p إلى تقليل EMT المدفوع ب MALAT1 عن طريق تقليل تنظيم SNAI2 (P < 0.05) ، في حين أن استعادة SNAI2 عكست التأثيرات المثبطة لإسكات MALAT1 على ورم خبيث. يوضح هذا البروتوكول أن MALAT1 يعزز EMT والورم الخبيث في EOC من خلال العمل كceRNA يعزل miR-200c-3p ، مما يؤدي إلى إزالة قمع SNAI2. توفر النتائج نظرة ميكانيكية جديدة وتحدد محور MALAT1 / miR-200c-3p / SNAI2 كهدف علاجي محتمل لتثبيط ورم خبيث في سرطان المبيض.

المقدمة

سرطان المبيض (OvCa) هو ورم خبيث شديد الخبيثة ويتم تشخيصه في وقت متأخر. عادة ما يتطور بدون أعراض حتى يصل إلى مراحل لاحقة ، تتميز بالنمو العدواني في المقام الأول داخل التجويف البريتوني. تظهر هذه العملية المرضية عادة مع الاستسقاء ، وانخفاض الاستجابة العلاجية ، والتشخيص السيئ1. كشفت الإحصاءات الوبائية من عام 2018 عن حوالي 295,000 حالة تم تشخيصها حديثا في جميع أنحاء العالم ، مع 185,000 حالة وفاة ، مما يعكس مسارا تصاعديا مستمرا في عبء المرض2. على الرغم من أن بروتوكولات العلاج الحديثة تتضمن التدخل الجراحي والأنظمة الدوائية ، إلا أن القيود المستمرة في الكشف المبكر جنبا إلى جنب مع ورم خبيث ومقاومة العلاج تحافظ على معدلات البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل أقل من 45٪ 3. يلاحظ التكرار في غضون 12-18 شهرا بشكل شائع في العديد من المرضى الذين يعانون من مرض متقدم4. تؤكد هذه الحقائق السريرية على الحاجة الملحة لتحديد علامات التشخيص ذات الصلة سريريا واستراتيجيات المراقبة العلاجية. لذلك ، من المفيد تحديد علامات التشخيص ذات الصلة سريريا.

حاليا ، اكتشف الباحثون أن نسبة كبيرة من الجينوم البشري تولد RNAs طويلة غير مشفرة (lncRNAs)5. لا تقوم LncRNAs بتشفير البروتينات ، وتوجد فقط في شكل RNA ، وتلعب أدوارا تنظيمية في الوظائف البيولوجية المختلفة للخلايا. تظهر LncRNAs عدم الحفاظ عليها وتعرض أنماط تعبير خاصة بالأنسجة6. والجدير بالذكر أنه لوحظ الإفراط في التعبير عن lncRNAs في أنسجة سرطانية متعددة7. كشفت آلية الحمض النووي الريبي الذاتي المتنافسة (ceRNA) عن طريقة جديدة لتفاعل الحمض النووي الريبي. من الثابت أن microRNAs (miRNAs) يمكنها إسكات الجينات من خلال التفاعلات الخاصة بالتسلسل مع 3'مناطق غير مترجمة (UTR) من mRNA. وفي الوقت نفسه ، يمكن أن ترتبط الحمض النووي الريبي غير المشفرة (ncRNAs) بشكل تنافسي ب miRNA ، مما يعيق قدرتها على الارتباط بالجينات المستهدفة والتأثير على التعبير الجيني8. تعد آلية ceRNA حاليا الفرضية الأكثر قبولا على نطاق واسع للدور التنظيمي ل lncRNAs. يبني الحديث المتبادل الثلاثي بين نصوص الترميز و miRNAs و RNAs التنظيمية شبكات جزيئية معقدة تؤثر على بدء الورم وتطوره9.

تم تحديد MALAT1 لأول مرة في نقائل سرطان الرئة ذات الخلايا غير الصغيرة ، وقد ظهر على أنه lncRNA مفرط التعبير عنه على نطاق واسع في العديد من الأورامالخبيثة 10. في دراساتنا السابقة ، حددنا زيادة التعبير عن MALAT1 في أنسجة OvCa التي ترتبط ارتباطا مباشرا ب OvCa التدريج11. نقدم هنا بروتوكولا لتعديل تعبير MALAT1 وراثيا في خط الخلية الظهارية OvCa (EOC) SK-OV-3 وتقييم تأثيره على التعبير البروتيني المرتبط بالانتقال الظهاري الوسيط (EMT) ، والقدرة على الهجرة ، والإمكانيات الغازية عبر المقايسات الجزيئية مثل qPCR ، والنشاف الغربي ، ومقايسات مراسل اللوسيفيراز المزدوج ، والمقايسات الوظيفية مثل فحوصات التئام الجروح ومقايسات Transwell. الهدف هو توضيح الآلية الجزيئية التي ينظم بها MALAT1 EMT والانتشار النقيلي في EOC من خلال التفاعلات مع miR-200c-3p و SNAI2.

غالبا ما تستخدم الطرق الحالية لدراسة تفاعلات lncRNA-miRNA في أدوات التنبؤ بالسيليكو وحدها ، والتي قد تفتقر إلى التحقق من الصحة التجريبية. بالنسبة لدراسات تنظيم EMT ، قد لا توفر الطرق النسيجية التقليدية رؤى جزيئية مفصلة. من خلال استخدام فحوصات مراسل لوسيفيراز مزدوج للتحقق التجريبي ، تتغلب دراستنا على هذه القيود ، مما يوفر تأكيدا أكثر موثوقية للتفاعلات المتوقعة. علاوة على ذلك ، فإن الجمع بين المقايسات الوظيفية المتعددة ، مثل فحوصات الخدش والترانسويل ، جنبا إلى جنب مع التقنيات الجزيئية ، يتيح فهما شاملا ل EMT على المستويين الخلوي والجزيئي ، متجاوزا العمق الذي توفره مناهج الفحص الفردي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

زراعة الخلايا والتعدي

تم زراعة خط خلايا OvCa البشري SK-OV-3 في ظل ظروف قياسية. تم الحفاظ على الخلايا في وسط استزراع يتألف من 89٪ McCoy's 5A ، و 10٪ مصل بقري جنيني ، و 1٪ محلول بنسلين - ستربتومايسين ، في حاضنة رطبة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيدالكربون 2. تم استبدال الوسط كل 2-3 أيام ، وتم تمرير الخلايا عند الوصول إلى التقاء 80-90٪ باستخدام 0.25٪ تريبسين-EDTA. تم الحصول على تركيبات الفيروسات العدسية للإفراط في التعبير عن MALAT1 والضربة القاضية MALAT1 (shRNA) ، بالإضافة إلى miR-200c-3p المقلدة والمثبطة والضوابط السلبية ، جنبا إلى جنب مع siRNA الذي يستهدف SNAI2 والتحكم المقابل له siRNA ، من مصادر تجارية. بالنسبة للتعداء ، تم زرع خلايا SK-OV-3 في ألواح 24 بئرا بكثافة 5 × 104 خلايا / بئر في 500 ميكرولتر من الوسط الكامل وسمحت لها بالالتصاق طوال الليل. تم إجراء عمليات التعداء باستخدام كاشف تعداء قائم على الدهون (RRID: AB_2548650) وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. باختصار ، تم تخفيف الأحماض النووية (miRNA المقلدات / المثبطات أو siRNAs) وكاشف التعداء القائم على الدهون في وسط مصل منخفض بشكل منفصل ، وتحضنها لمدة 5 دقائق ، ثم خلطها معا واحتضانها لمدة 15 دقيقة إضافية في درجة حرارة الغرفة للسماح بالتعقيد. تمت إضافة المجمعات بالتنقيط إلى الخلايا. بعد 6 ساعات ، تم استبدال الوسيط بوسط كامل طازج. تم حصاد الخلايا بعد 24-48 ساعة من التعدي لتحليلات المصب.

تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الفلوري في الوقت الحقيقي (qPCR)

تم استخراج إجمالي الحمض النووي الريبي من خلايا SK-OV-3 المستنبتة باستخدام كاشف استخراج الحمض النووي الريبي وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. باختصار ، تم تحلل الخلايا في 1 مل من الكاشف لكل بئر من صفيحة مكونة من 6 آبار ، وتم عزل الحمض النووي الريبي باستخدام مجموعة استخراج الحمض النووي الريبي التجارية باتباع البروتوكول المقدم. تم تحديد تركيز الحمض النووي الريبي ونقاوته باستخدام مقياس الطيف الضوئي ، واستخدمت عينات بنسبةA 260 / A280 بين 1.8 و 2.0 للتطبيقات النهائية. تم إجراء النسخ العكسي باستخدام RT Master Mix (RRID: SCR_018597) مع 500 نانوغرام من إجمالي الحمض النووي الريبي في حجم تفاعل 20 ميكرولتر. كانت ظروف التدوير الحراري على النحو التالي: 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، تليها 85 درجة مئوية لمدة 5 ثوان لتعطيل النسخ العكسي. تم تخزين (كدنا) الناتج عند -20 درجة مئوية حتى الاستخدام. تم إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الفعلي باستخدام مجموعة أدوات الكشف عن miRNA qRT-PCR التجارية على جهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي. تم إجراء كل تفاعل في حجم 20 ميكرولتر يحتوي على 10 ميكرولتر من مزيج رئيسي 2x qPCR ، و 1 ميكرولتر من بادئات محددة (أمامية وخلفية ، 10 ميكرومتر) ، و 2 ميكرولتر من قالب (كدنا) ، و 7 ميكرولتر من الماء الخالي من RNase. كانت ظروف التدوير الحراري: 95 درجة مئوية لمدة 10 دقائق ، تليها 40 دورة من 95 درجة مئوية لمدة 10 ثوان و 60 درجة مئوية لمدة 30 ثانية. تم إجراء تحليل منحنى الانصهار للتحقق من خصوصية المنتج. تم حساب مستويات التعبير باستخدام طريقة ΔΔCt ، مع GAPDH (ل mRNA) أو U6 (ل miRNA) كضوابط داخلية. تم إجراء جميع التفاعلات في ثلاث نسخ ، ويتم تقديم البيانات كمتوسط ± SD.
ملاحظة: كاشف استخراج الحمض النووي الريبي مادة كيميائية خطرة. يجب التعامل معه في غطاء الدخان لأنه تآكل وقد يسبب تهيج الجلد والعين. يجب التخلص من النفايات المحتوية على الكاشف وفقا للوائح التخلص من النفايات الخطرة المحلية.

فحص الخدش

تم زرع خلايا SK-OV-3 في صفيحة 24 بئرا بكثافة 5 × 104 خلايا / بئر وتم زراعتها حتى وصلت إلى ما يقرب من 90-100٪ من التقاء ، لتشكيل طبقة أحادية موحدة. ثم تم استخدام طرف ماصة معقم سعة 10 ميكرولتر لإنشاء خدش خطي من خلال طبقة خلية أحادية في وسط كل بئر. لضمان الاتساق ، تم تطبيق نفس الزاوية والضغط أثناء تكوين الخدش عبر جميع الآبار. بعد الخدش ، تمت إضافة PBS لإزالة الخلايا المنفصلة بغسلتين لطيفتين. ثم تم زراعة الخلايا في وسط McCoy's 5A الخالي من المصل لتقليل تأثيرات الانتشار. تم التقاط صور لمنطقة الخدش على الفور (0 ساعة) ومرة أخرى في 24 ساعة و 48 ساعة باستخدام مجهر مقلوب بتكبير 10x. تم قياس عرض الخدش في كل نقطة زمنية باستخدام برنامج ImageJ ، والنسبة المئوية لإغلاق الجرح مقارنة بالعرض الأولي المستخدم لحساب معدل الترحيل.

مقايسة Transwell

تم زرع خلايا SK-OV-3 في الغرف العلوية لإدخالات Transwell (تحتوي الغرفة العلوية على 200 ميكرولتر من 1٪ وسط كامل ، وتحتوي الغرفة السفلية على 1 مل من 5٪ وسط كامل) بكثافة 5 × 103 خلايا لكل إدراج ، محضنة عند 37 درجة مئوية ، 5٪ ثاني أكسيد الكربون2 بيئة رطبة لمدة 24 ساعة قبل مزيد من التحليل. بعد الحضانة لمدة 24 ساعة ، تمت إزالة الإدخالات وغسلها 3x باستخدام PBS ، متبوعا بالتثبيت في 4٪ بارافورمالدهيد (PFA) لمدة 15 دقيقة. بعد الغسيل باستخدام PBS ، تم تلطيخ الخلايا بمحلول بنفسجي بلوري 1٪. بعد التلوين ، تم شطف الخلايا باستخدام PBS ولاحظت تحت المجهر المقلوب.
ملاحظة: البنفسجي الكريستالي هو بقعة بيولوجية وقد يكون ضارا إذا تم تناوله أو ملامسته للجلد. يجب التعامل معها بعناية ، ويجب التخلص من النفايات بشكل صحيح وفقا للوائح المحلية.

مقايسة مراسل ثنائي لوسيفيراز

يتم تحضين الخلايا المنقولة في ظل ظروف الاستزراع القياسية (37 درجة مئوية ، 5٪ ثاني أكسيد الكربون2 بيئة مرطبة) لمدة 48 ساعة قبل التحلل. بعد 48 ساعة من الحضانة ، تم تحلل الخلايا وطردها عند 5,000 × جم لمدة 5 دقائق عند 4 درجات مئوية. تم نقل 50 ميكرولتر من المادة الطافية إلى صفيحة مكونة من 96 بئرا ، تليها إضافة متسلسلة ل 100 ميكرولتر من كاشف لوسيفيراز اليراع و 100 ميكرولتر من كاشف رينيلا لوسيفيراز إلى كل بئر. تم قياس أنشطة Firefly و Renilla luciferase باستخدام نظام فحص مراسل Dual-Luciferase على مقياس الإضاءة. تم تطبيع نشاط Renilla luciferase إلى نشاط Firefly luciferase لحساب الاختلافات في كفاءة التعداد.

مقايسة التألق المناعي

تم تثبيت خلايا SK-OV-3 في 4٪ PFA لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة ثم غسلها 3x باستخدام PBS. لمنع الارتباط غير المحدد ، تم تحضين الخلايا بمصل الماعز بنسبة 5٪ في PBS لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. بعد الحظر ، تم تحضين الخلايا بين عشية وضحاها عند 4 درجات مئوية مع الأجسام المضادة الأولية ضد E-cadherin (RRID: AB_2833860) و N-cadherin (RRID: AB_2837725) و Vimentin (RRID: AB_2835318) ، كل منها مخفف بنسبة 1: 200. في اليوم التالي ، تم غسل الخلايا 3x باستخدام PBS واحتضانها بأجسام مضادة ثانوية مترافقة بالفلوروفور مناسبة [IgG-FITC المضادة للفأر (RRID: AB_2843438) ومضادة للأرانب IgG-FITC (RRID: AB_2843439)] مخففة 1: 500 لمدة ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية في الظلام.
ملاحظة: بارافورمالدهايد سام ومادة مسرطنة محتملة. يجب التعامل معها بحذر ، مع ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة (PPE) مثل القفازات والنظارات الواقية. يجب التخلص من النفايات المحتوية على PFA كنفايات خطرة.

التحليل الإحصائي

للمقارنات بين مجموعتين ، تم استخدام اختبار t ، وبالنسبة لمقارنات المجموعات المتعددة ، تم تطبيق ANOVA. تم تحديد الدلالة الإحصائية عند * p ±< 0.05 و ** p < 0.01 و ***p < 0.001. تم إجراء جميع التجارب بثلاث مكررات بيولوجية (ن = 3).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

القدرات المهاجرة والغازية لخلايا SK-OV-3 المعدلة بواسطة MALAT1

تم توضيح سير العمل التجريبي في الشكل 1. للتحقيق في دور MALAT1 في هجرة خلايا OvCa وغزوها ، قمنا بتعديل تعبيره في خلايا SK-OV-3. عند الضربة القاضية ل MALAT1 ، أكد qPCR قمعا كبيرا لمستويات MALAT1 (ص < 0.05 ؛ ص 0.05 ؛ الشكل 2 أ). أ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

لا يزال OvCa ، خامس سرطان نسائي رائد ، مصدر قلق كبير لصحة المرأة2. ومع ذلك ، يتم تحديد معظم الحالات في مراحل متقدمة ، مما يحد بشكل كبير من خيارات العلاج الفعالة ، مما يؤدي إلى تحسن طفيف في معدلات البقاء على قيد الحياةالإجمالية 12. تبرز ورم خبيث السرطان كمساهم رئيسي في وفيات المرضى في EOC13. تشير الأدلة الناشئة إلى أن lncRNAs و miRNAs كمنظمات محورية للتسبب في EOC14. من بين هؤلاء ، يظهر lncRNA

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل مشروع مؤسسة العلوم الطبيعية لمقاطعة فوجيان (2021J011378).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
0.22 μ م أغشية PVDFبيوتايمFFP32
مجموعة الكشف عن miRNA qRT-PCR الكل في واحدفولينجينكيو ب115
ألبومين مصل الأبقاربيوتايمالمعيار ST025
ركيزة التلألؤ الكيميائيسوتشو هايشينغ بيوساينس المحدودةTCH-C335
ركيزة التلألؤ الكيميائيميليبورWBKLS0100
طقم فحص الجينات المزدوج لوسيفيرازبيوتايمRG027
مصل الأبقار الجنينسوتشو هايشينغ بيوساينس المحدودةإف بي بي-سي 550
الماعز المضادة للفأر IgG FITCتقاربس 0007
الماعز المضادة للأرانب IgG FITCتقاربس0008
ليبوفيكتامين 2500قوانغتشو Yingxin التكنولوجيا الحيوية المحدودةSJ-LIP-2500
فيروس عدسي تداخل MALAT1شنغهاي GENECHEM المحدودةإف في مالات 1-ش
MALAT1 فرط التعبير lentivirusشنغهاي GENECHEM المحدودةإف - مالات 1-OE
مكوي 5 أسوتشو هايشينغ بيوساينس المحدودةGUMD-B305
miR-200c-3p تقليدشنغهاي GENECHEM المحدودةميكروفون HAS-200C-3P
محلل المقايسة المناعية الإنزيم متعدد الوظائفبيركين إلمرتصور 2100
محلول البنسلين الستربتومايسينسوتشو هايشينغ بيوساينس المحدودةجوسا - R002
كوكتيل مثبط الفوسفاتيزجي سبيوثGS1439A
الجسم المضاد الأولي E-cadherinتقاربBF0219
الجسم المضاد الأولي N-cadherinتقاربأف5239
الجسم المضاد الأولي فيمنتينتقاربأف7013
بريم سكريبت RT ماستر ميكستاكاراRR036أ
نظام الكشف عن PCR في الوقت الحقيقيبيو رادسي إف إكس 96
جهاز طرد مركزي مبردإيبندورف5810 ص.
مخزن تحلل RIPAجي سبيوثجي أس 504 أ
المواد الهلامية SDS-بولي أكريلاميدبيوتايمص 0012 أ
الأجسام المضادة الثانوية الماعز المضادة للفأر IgG FITCتقاربس 0007
الأجسام المضادة الثانوية الماعز المضادة للأرانب IgG FITCتقاربس0008
SNAI2 siRNAقوانغتشو Yingxin التكنولوجيا الحيوية المحدودةسي هاس الحلزون2
قاعدة بيانات StarBaseجامعة صن يات صنhttp://starbase.sysu.edu.cn
مجموعة فحص BCAدينغو للتكنولوجيا الحيويةBCA02
حاضنة زراعة الخلاياهيريوسخلية هيرا 150
نظام تحليل التصويربيو رادجل دوك 1000
المجهر المقلوبمشوتال [م] 152-N
طقم استخراج الحمض النووي الريبيإيكوتوبEK-1328-50T
كاشف TRIzolقوانغتشو Yingxin التكنولوجيا الحيوية المحدودةT751379
مزود طاقة الرحلان الكهربائي العالميويكس ساينتيكفويكس - EP600

المراجع

  1. Engyel, E. Ovarian cancer development and metastasis. Am J Pathol. 177 (3), 1053-1064 (2010).
  2. Torre, L. A., et al. Ovarian cancer statistics, 2018. CA Cancer J Clin. 68 (4), 284-296 (2018).
  3. Webb, P. M., Jordan, S. J. Epidemiology of epithelial ovarian cancer. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 41, 3-14 (2017).
  4. Deng, K., et al. Identification of pathway-based recurrence-associated signatures in optimally debulked patients with serous ovarian cancer. J Cell Biochem. 119 (10), 8564-8573 (2018).
  5. Turner, A. W., et al. Multi-omics approaches to study long non-coding RNA function in atherosclerosis. Front Cardiovasc Med. 6, 9(2019).
  6. Li, K., et al. Insights into the functions of lncRNAs in Drosophila. Int J Mol Sci. 20 (18), 4646(2019).
  7. Eptaminitaki, G. C., Stellas, D., Bonavida, B., Baritaki, S. Long non-coding RNAs (lncRNAs) signaling in cancer chemoresistance: from prediction to druggability. Drug Resist Updat. 65, 100866(2022).
  8. Navarro, E., Mallén, A., Cruzado, J. M., Torras, J., Hueso, M. Unveiling ncRNA regulatory axes in atherosclerosis progression. Clin Transl Med. 9 (1), 5(2020).
  9. Braga, E. A., et al. LncRNAs in ovarian cancer progression, metastasis, and main pathways: ceRNA and alternative mechanisms. Int J Mol Sci. 21 (22), 8855(2020).
  10. Goyal, B., et al. Diagnostic, prognostic, and therapeutic significance of long non-coding RNA MALAT1 in cancer. Biochim Biophys Acta Rev Cancer. 1875 (2), 188502(2021).
  11. Mao, T. -L., Fan, M. -H., Dlamini, N., Liu, C. -L. LncRNA MALAT1 facilitates ovarian cancer progression through promoting chemoresistance and invasiveness in the tumor microenvironment. Int J Mol Sci. 22 (19), 10201(2021).
  12. Marchetti, C., et al. First-line treatment of advanced ovarian cancer: current research and perspectives. Expert Rev Anticancer Ther. 10 (1), 47-60 (2010).
  13. Rupaimoole, R., et al. Long noncoding RNA Ceruloplasmin promotes cancer growth by altering glycolysis. Cell Rep. 13 (11), 2395-2402 (2015).
  14. Teng, Y., et al. miRNA-200a-c as potential biomarker in epithelial ovarian cancer (EOC): evidence based on miRNA. Oncotarget. 7 (49), 81621-81633 (2016).
  15. Cittelly, D. M., et al. Restoration of miR-200c to ovarian cancer reduces tumor burden and increases sensitivity to paclitaxel. Mol Cancer Ther. 11 (12), 2556-2565 (2012).
  16. Zhang, Z., et al. The long noncoding RNA MALAT-1 is highly expressed in ovarian cancer and induces cell growth and migration. PLOS One. 11 (5), e0155250(2016).
  17. Chen, Q., et al. Plasma long non-coding RNA MALAT1 is associated with distant metastasis in patients with epithelial ovarian cancer. Oncol Lett. 12 (2), 1361-1366 (2016).
  18. Jin, Y., Feng, S., Qiu, S., Shao, N., Zheng, J. LncRNA MALAT1 promotes proliferation and metastasis in epithelial ovarian cancer via the PI3K-AKT pathway. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 21 (14), 3176-3184 (2017).
  19. Li, J., et al. An inhibitory effect of miR-22 on cell migration and invasion in ovarian cancer. Gynecol Oncol. 119 (3), 543-548 (2010).
  20. Cochrane, D. R., Spoelstra, N. S., Howe, E. N., Nordeen, S. K., Richer, J. K. MicroRNA-200c mitigates invasiveness and restores sensitivity to microtubule-targeting chemotherapeutic agents. Mol Cancer Ther. 8 (5), 1055-1066 (2009).
  21. Howe, E., Cochrane, D., Richer, J. Targets of miR-200c mediate suppression of cell motility and anoikis resistance. Breast Cancer Res. 13 (2), R45(2011).
  22. Pei, C., Gong, X., Zhang, Y. LncRNA MALAT-1 promotes growth and metastasis of epithelial ovarian cancer via sponging microRNA-22. Am J Transl Res. 12 (11), 6977-6987 (2020).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

الرنا غير المشفر الطويل MALAT1تعبير SNAI2آلية الرنا التنافسي الداخليهجرة الخلاياغزو الخلايامقايسة لوسيفيريز المزدوجةلطخة ويسترن
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.