مقالة منهجية

تعزيز رفاهية الجربيل من خلال التدريب الإيجابي على التعزيز في بيئات البحث

DOI:

10.3791/68657

⸱

أغسطس 15, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Translational Animal Research Center, University Medical Center of the Johannes Gutenberg University Mainz

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعمل تدريب الفرس كتقنية تعزيز إيجابية للجربوع المختبرية. تهدف هذه الطريقة إلى تقليل التوتر وتحسين كفاءة المناولة من خلال التعزيز الإيجابي ، وبالتالي المساهمة في رفاهية التجارب.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعد تحسين رفاهية المختبر من خلال تقليل التوتر وتعزيز التعامل المناسب للأنواع هدفا رئيسيا للبحوث الطبية الحيوية المعاصرة في جميع أنحاء العالم. يستخدم تدريب الفرس ، وهو شكل معترف به على نطاق واسع من تدريب التعزيز الإيجابي ، صوت النقر كمعزز مشروط لسد بين السلوك المطلوب والمكافأة ، مما يمكن من التعلم بسرعة أكبر وبتقليل التوتر. أثبتت مجموعتنا البحثية سابقا أن تدريب الفرس يعمل كشكل من أشكال الإثراء المعرفي في الفئران والجرذان. في هذه الدراسة ، نجحنا في تكييف نهج التدريب هذا للجربوع المنغولية (Meriones unguiculatus) ، وتصميم البروتوكول وفقا للخصائص السلوكية الخاصة بالأنواع للجربوع. خضعت مجموعة من 43 جربولا فطريا (27 أنثى و 16 ذكرا) لبروتوكول تدريب موحد مدته 10 أيام ، تعلموا خلاله الاقتراب طواعية من يد المجرب والتفاعل معها مقابل مكافأة غذائية. بعد فترة التدريب ، خضعت لتقييمات سلوكية ، بما في ذلك اختبار المجال المفتوح واختبار التفاعل البشري الموحد ، لتقييم آثار التدريب على السلوك الاستكشافي والتفاعل بين الإنسان. توضح النتائج التي توصلنا إليها أن تنفيذ تدريب النقر في الجربوع سريع وفعال وجيد التحمل. أظهرت المدربة ، وخاصة الإناث ، تفاعلا طوعيا متزايدا مع يد المجرب وتقليل السلوكيات الشبيهة بالقلق. تشير هذه النتائج إلى أن بروتوكولات تدريب النقر المكيفة مع الأنواع يمكن أن تسهل تنمية الثقة بين المجرب ، مما يقلل في النهاية من الإجهاد ويحسن كل من رفاهية وموثوقية النتائج التجريبية.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعد تحسين استخدام في البحوث الطبية الحيوية للحد من الإجهاد وتحسين الرفاهية هدفا دوليا معترفا بهعلى نطاق واسع 1،2،3. في عام 2022 ، أفادت المفوضية الأوروبية أنه من بين 838,539 مستخدما في الاتحاد الأوروبي (Alures) ، كان 3,440 من الجربوع4. في ألمانيا ، تم استخدام ما يقرب من 1.46 مليون من الفقاريات ورأسيات الأرجل في التجارب على في عام 2023 بموجب القسم 7 (2) من قانون رعاية (TierSchG) 5. بالاقتران مع التي قتلت لأغراض علمية ، بلغ العدد الإجمالي لحيوانات المختبر المستخدمة في ألمانيا في عام 2023 حوالي 2.1 مليون6. تسلط هذه الأرقام الضوء على أهمية استخدام الجربوع في البحوث الطبية الحيوية ، مع التأكيد على الحاجة إلى تحسينات مستمرة في بروتوكولات رعاية.

تم الاعتراف على نطاق واسع بالاحتياجات السلوكية لحيوانات المختبر وأهمية استراتيجيات الإدارة التي تدعم الرفاهية الخاصة بالأنواع على أنها ضرورية للممارسة الأخلاقية والعلمية7. غالبا ما تقتصر التفاعلات بين الإنسان في التربية على المهمة الأساسية المتمثلة في نقل من أقفاص قذرة إلى أقفاص نظيفة ، دون تعزيز الرابطة بين المعالج. يمكن أن يؤدي هذا النقص في التفاعل الاجتماعي إلى الإجهاد ، مما يؤثر سلبا على سلوك وعلم وظائف الأعضاء ، مما يؤثر في النهاية على النتائجالتجريبية 8. المعالجة غير السليمة هي مصدر معروف للتباين في بيانات البحث9. على سبيل المثال ، رفع الفئران من الذيل يزيد من القلق والتوتر ، بينما تعزز طرق النفق أو اليد المفتوحة نهجا طوعيا وتقلل من السلوك الشبيهبالقلق 10،11. يتم استخدام المناولة كضغط حاد موحد في دراسات الثدييات الصغيرة نظرا لتأثيراتها المتسقة على العلامات الفسيولوجية مثل مستويات الجلوكوكورتيكويد12. تسلط هذه النتائج الضوء على التأثير الكبير للتفاعلات البشرية القصيرة والحاجة إلى تقنيات معالجة منخفضة الضغط13.

اكتسب التحسين القائم على التدريب اعترافا متزايدا كطريقة فعالة لتعزيز رفاهية وجودةالبحث 10،14. واحدة من أكثر طرق التدريب فعالية المستخدمة في الأبحاث على هي التدريب على النقر ، والذي غالبا ما يقترن بمكافآت الطعام15،16. على مدى العقود الماضية ، تم نشر 34 دراسة حول تدريب النقر ، مما يعكس الاهتمام العلمي المتزايد بهذا النهج التدريبي17. تشير الدراسات إلى أن (47٪) والخيول (30٪) هي أكثر المختبر تدريبا شيوعا ، تليها القطط والماشية والأسماك والماعز (كل منها 3٪)17. يمكن للحيوانات المدربة المشاركة طواعية في الإجراءات ، مما يقلل من التوتر ويقلل من الحاجة إلى ضبط النفسالبدني 18.

كما تم تطبيق بروتوكولات التعزيز الإيجابية على الثدييات الصغيرة. تشير الدراسات الحديثة إلى تدريب ناجح في الأرانب لإجراءات التربية ، والجربوع للبحوث السلوكية19،20. في بعض الأعمال السابقة ، أظهرنا أن الفئران المدربة على النقر أظهرت اتصالا متزايدا مع المجربين ومؤشرات سلوكية أقل مرتبطة بالإجهاد ، مثل التبول والتغوط والنطق والسلوك العائم21،22،23. يتوافق هذا مع النتائج التي توصل إليها المجال البيطري ، حيث ثبت أن تدريب الثدييات الصغيرة - مثل الأرانب والقوارض والقوارض - يقلل من استجابات الخوف ويسهل التعامل معه من خلال تقنيات التعزيزالإيجابي 24. والجدير بالذكر أننا لاحظنا أيضا اختلافا خاصا بالجنس في أداء التدريب: أظهرت إناث الفئران دافعا أكبر وتواتر استجابة أعلى من الذكور عبر الجلسات التدريبية. يشير هذا إلى أن إناث الفئران قد تنخرط بسهولة أكبر في مهام التدريب التطوعي في ظل ظروف موحدة21.

على الرغم من أنها واعدة ، إلا أن مناهج التدريب الحالية للجربوع ترتبط عادة بنماذج سلوكية محددة وليست مصممة للاستخدام العام في إجراءات التربيةاليومية 25. لم يتم بعد إنشاء بروتوكول موحد قابل للتطبيق على نطاق واسع للجربوع المنغولية (Meriones unguiculatus) - مستقل عن إعداد تجريبي معين. لمعالجة هذه الفجوة ، هدفت الدراسة الحالية إلى تطوير والتحقق من صحة بروتوكول تدريب بسيط للنقر مصمم خصيصا لخصائص أنواع الجربوع. يركز البروتوكول على الحد من التوتر من خلال التعامل اللطيف والمشاركة الطوعية مع المجرب. نفترض أن هذا النهج سيحسن رفاهية ، ويضع خطوط أساس سلوكية أكثر اتساقا ، ويزيد من موثوقية النتائج التجريبية. نظرا لبساطته ومرونته ، يمكن تنفيذه بسهولة عبر مجموعة واسعة من إعدادات المختبرات.

لتقييم فعالية وقابلية تطبيق بروتوكول التدريب المقترح ، قمنا بصياغة التنبؤات المحددة التالية القابلة للاختبار:
ستؤدي الجربوع المدربة السلوك المستهدف بشكل موثوق - الجلوس طواعية على يد المجرب - خلال فترة تدريب مدتها 10 أيام.
ستظهر المدربة تفاعلا طوعيا متزايدا مع المجرب في اختبار موحد ، مقارنة بالضوابط غير المدربة.
ستظهر المدربة مؤشرات سلوكية تتوافق مع انخفاض السلوك الشبيه بالقلق ، وتحديدا من خلال قضاء المزيد من الوقت في المنطقة المركزية لاختبار المجال المفتوح.
قد تظهر الجربوع الأنثوية استجابات سلوكية أقوى للتدريب من الذكور ، مما قد يعكس الاختلافات بين الجنسين في التكيف مع التفاعل البشري.
وجهت هذه التنبؤات تصميم التقييمات السلوكية وأبلغت معايير التقييم للبروتوكول.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم التعامل مع الجربوع والإجراءات التجريبية وفقا للمبادئ التوجيهية الأوروبية والوطنية والمؤسسية لرعاية. معتمد من قبل ترخيص السلطات المحلية G 21-1-100. يتضمن البروتوكول 10 أيام من التدريب (من الاثنين إلى الجمعة) ، مع فترات راحة في عطلات نهاية الأسبوع (السبت والأحد). يمكن تكييف البروتوكول بسهولة لتلبية الاحتياجات الخاصة. جميع المواد المطلوبة مدرجة في جدول المواد.

1. تحضير

  1. الحصول على العدد المطلوب من من منشأة التربية المؤسسية. الحفاظ على تحت دورة الضوء / الظلام 12 ساعة في نظام سكن مفتوح.
  2. فطام ذرية في عمر 5 أسابيع. قم بوضع علامة على بعد الفطام ووضعها في مجموعات من نفس الجنس من 2-3 أفراد لكل قفص.
  3. خلفي ووضع جميع الجربوع في أقفاص من النوع 4 (590 × 380 × 200 مم ؛ 1.815 م2). جهز كل قفص بثلاثة أنفاق على الأقل وامضغ الخشب للتخصيب. توفير الغذاء والماء حسب الطلب (انظر جدول المواد).
  4. قم بتعيين عشوائيا للمجموعات المدربة (الإناث: العدد = 27 ؛ الذكور: العدد = 16) وغير المدربين (الإناث: العدد = 16 ؛ الذكور: العدد = 5) لتقليل تحيز الاختيار وضمان ظروف خط الأساس المماثلة عبر العلاجات. تعويد على كل من المكافأة الغذائية ويد المجرب داخل بيئة قفص التكاثر ، كما هو موضح في الخطوة 2.2. من البروتوكول. في بداية التدريب ، كان عمر (الإناث والذكور) حوالي 8 أسابيع.

2. تعويد

ملاحظة: إذا لم يتم نقل الجربوع ، فيمكن تقليل وقت التعود. يتم تصوير النظرة العامة الرسومية للبروتوكول في الشكل 1. في التي يتم تربيتها في المنزل ، يمكن تقصير فترة التعود على الأحداث بشكل كبير إذا كانت الأم معتادة جيدا واستمر التعود اليدوي مرة واحدة على الأقل في الأسبوع من الوقت الذي تصبح فيه الجراء متحركة. تم تصميم هذه المرحلة التحضيرية للحد من الرهاب الجديد وإنشاء جمعية إيجابية للتعامل مع الطعام ، مما يضمن الانتقال السلس إلى التدريب القائم على النقر.

figure-protocol-1
الشكل 1: نظرة عامة على بروتوكول التعود والتدريب للحيوانات التي يتم تربيتها من مصادر خارجية وداخلية: يوضح هذا الشكل الجدول الزمني والخطوات الإجرائية الرئيسية لبروتوكول التعود والتدريب المستخدم للجربوع من مصادر خارجية والجربوع التي يتم تربيتها داخليا. يتضمن البروتوكول المناولة الأولية ، والتعود على الطعام ، وإدخال الفرس ، وتدريب الفرس ، ويتم تعديله بناء على أصل وتعرضها المسبق. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

  1. الأسبوع 1: التعود على من مصادر خارجية
    1. عند الوصول ، تقيم الجربوع في مجموعات من نفس الجنس من 2-3 لكل قفص. أضف مواد التعشيش والفراش من صندوق النقل ، جنبا إلى جنب مع كمية صغيرة من كريات الطعام المألوفة لدعم التأقلم.
    2. قم بتزويد كل قفص بما لا يقل عن 3-4 أنفاق (على سبيل المثال ، أنابيب من الورق المقوى أو الملاجئ البلاستيكية) واملأ الفراش على عمق حوالي 8-10 سم للسماح بسلوك الحفر النموذجي للأنواع.
    3. تجنب رفع الجربوع من الذيل ، لأن ذلك قد يسبب الإجهاد ويخاطر بإصابة الذيل26. بدلا من ذلك ، استخدم المناولة المقعرة لنقل برفق عند الضرورة (انظر الشكل 2 أ).
    4. ابدأ التعود على الغذاء على الفور عن طريق نثر ~ 5 جم من بذور اليقطين أو عباد الشمس في الفراش (انظر جدول المواد). هذا يشجع على الحفر ويتعرف على المكافأة.
    5. في اليوم التالي ، أدخل يدا واحدة تحتوي على ~ 10 بذور مكافأة في القفص لمدة 2-3 دقائق. إذا لم تأخذ البذور مباشرة ، ضع ~ 5 جم من البذور في الفراش.
    6. كرر هذا الإجراء مرة واحدة يوميا حتى تأخذ الطعام من اليد. يستغرق هذا عادة حوالي أسبوع. إذا نجحت في وقت سابق ، فانتقل إلى تدريب الفرس (انظر الخطوة 3).
    7. أثناء التعود ، قم بتقييم تفضيلات الطعام من خلال تقديم أنواع مختلفة من البذور في اليد وعد البذور المتبقية بعد 2-3 دقائق.
      ملاحظة: قدم الطعام في أجزاء صغيرة فقط كمكافأة لتعزيز السلوك المطلوب. تأكد من أن المكافأة الغذائية تتوافق مع الإرشادات الغذائية لحيوانات المختبر. بينما يستخدم هذا البروتوكول بذور اليقطين وعباد الشمس ، يمكن استخدام مكافآت أخرى مناسبة إذا كانت تفي بمتطلبات نظافة المنشأة. كما أن العلاجات المتوفرة تجاريا والمصممة لحيوانات المختبر مقبولة أيضا.
  2. الأسبوع 1: التعود على التي يتم تربيتها في المنزل
    1. ابدأ في التعود على مكافأة الطعام مباشرة في قفص التكاثر عن طريق وضع ~ 5 جم من بذور اليقطين أو عباد الشمس في الفراش ، كما هو موضح في الخطوة 2.1.3. يجب أن تبدأ هذه الخطوة مع زوج التكاثر قبل الولادة لإثبات الإلمام بالمكافأة.
    2. بمجرد أن تستهلك التكاثر البذور بشكل موثوق من الفراش ، اعرض المكافأة من يد المجرب باتباع الإجراء الموضح في الخطوة 2.1.4. اسمح للحيوانات بالاستكشاف والحصول على المكافأة طواعية لمدة 2-3 دقائق يوميا.
    3. بعد أن تلد الأنثى ، التعود اليدوي لمدة أسبوع واحد على الأقل. خلال هذا الوقت ، استمر في تقديم مكافآت غذائية مباشرة في فراش القفص 1-5 مرات في الأسبوع للحفاظ على التعرض.
    4. استأنف التعود على اليد بمجرد أن تصبح الجراء متحركة (حوالي اليوم 18-21 بعد الولادة). اسمح للحيوانات باستكشاف اليد بمكافأة لمدة 2-3 دقائق لكل جلسة. هذا يدعم التعرف المبكر على النسل بسياق التدريب.
    5. في عمر 5 أسابيع ، فطام الأحداث وإيوائهم في مجموعات من نفس الجنس من 2-3 لكل قفص. استمر في التعود عن طريق وضع مكافأة الطعام في فراش القفص الجديد في يوم النقل.
    6. في اليوم التالي للفطام، أعد تقديم توصيل الطعام باليد كما هو موضح أعلاه (الخطوتان 2.1.4 و 2.1.5).
    7. كرر هذا الإجراء مرة واحدة يوميا حتى تأخذ الطعام من اليد.
    8. بمجرد أن يأخذ الأحداث المكافأة باستمرار من اليد ، تابع بروتوكول التدريب (انظر الخطوة 3). يستغرق هذا عادة حوالي أسبوع واحد. إذا نجحت في وقت سابق ، فانتقل إلى تدريب الفرس (انظر الخطوة 3).

figure-protocol-2
الشكل 2: التعامل مع الجربوع وتعويده باستخدام التعزيز الإيجابي. (أ) التعامل المقعر مع الجربوع: يتم غرف الجربوع برفق بكلتا يديه بطريقة مقعرة لتقليل التوتر. (ب) بدء التدريب: توضع يد المجرب على أرضية القفص مع مكافآت الطعام في راحة اليد. يأخذ الجربوع مكافأة ، ويتم استخدام نقرة لتمييز السلوك. (ج) يجلس الجربوع طواعية على يد المجرب ، مما يشير إلى التدريب الناجح. يتم وضع مكافأة الطعام بشكل واضح على راحة اليد. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

3. تدريب الفرس

ملاحظة: ابدأ التدريب فقط إذا كان الجربوع يقبل الطعام من يد المجريب. إذا لم يكن الأمر كذلك، فقم بتمديد مرحلة التعود على الطعام إلى ما بعد المدة كما هو موضح في الخطوة 2.1. أو 2.2.

  1. نظرة عامة على التدريب
    1. قم بإجراء جلسة تدريبية واحدة لكل جربوع يوميا ، كل منها تستغرق 4 دقائق. قم بإجراء التدريب مباشرة في قفص منزل لتقليل التوتر والحفاظ على بيئة مألوفة. ليس من الضروري إزالة جميع عناصر التخصيب ولكن التأكد من بقاء أنبوب أو نفق واحد على الأقل في القفص ، وأن هناك مساحة كافية ليد المجرب على أرضية القفص.
      ملاحظة: من الناحية المثالية ، يجب إجراء التدريب في غرفة هادئة مخصصة. إذا لم يكن ذلك ممكنا ، فيمكن استخدام خزانة محمية من الصوت داخل منشأة ، بشرط أن تقلل بشكل فعال من التعرض للضوضاء والاضطرابات البيئية.
    2. لمنع الإشارات السمعية من أن تصبح متغيرات مربكة ، تجنب تماما التواصل اللفظي أو الأصوات الصوتية أثناء الجلسات التدريبية. قصر أي تفاعل صوتي مع على فترات خارج سياق التدريب.
    3. استخدم تكرار السلوك المستهدف (على سبيل المثال ، الجلوس طوعا على يد المجريب) كمؤشر عملي للتعود والتعلم الناجح أثناء التدريب. ضع في اعتبارك التدريب ناجحا عندما يتم ملاحظة هذا السلوك بمقدار 5 مرات على الأقل لكل جلسة على مدار ثلاثة أيام متتالية (انظر الخطوة 3.4.4).
  2. التحضير للتدريب
    1. تحضير جميع المواد المطلوبة: قطع بذور عباد الشمس إلى نصفين أو بذور اليقطين إلى أثلاث كمكافآت. قم بتوفير أداة نقر القدم ، أو تطبيق مؤقت يستخدم إشارات ملونة (بدون صوت) ، أو أي مؤقت صامت آخر (رقمي أو تناظري) ، وقفص ثانوي نظيف (انظر جدول المواد).
    2. انقل قفص المنزل إلى منطقة هادئة وخالية من الإلهاء حيث سيتم التدريب لتقليل الضغوطات البيئية. تجنب الضوضاء المفاجئة أو الصاخبة مثل التحدث أو إغلاق الباب أو أصوات المعدات أثناء الجلسة ، لأن الجربوع شديدة الحساسية للمنبهات السمعية.
    3. قم بإزالة جميع عناصر التخصيب باستثناء نفق واحد. تأكد من أن النفق المتبقي لا يعيق الوصول إلى منطقة التدريب. تأكد من وجود مساحة كافية لاستيعاب اليد.
    4. انقل أي مصاحب إلى القفص الثانوي النظيف ، بما في ذلك كمية صغيرة من فراش القفص المنزلي والتخصيب لتقليل التوتر أثناء الانفصال.
    5. ضع جهاز النقر على القدم (جهاز ميكانيكي يصدر صوت نقر عند الضغط عليه بالقدم ؛ انظر جدول المواد) أسفل الطاولة أو سطح التدريب. يسمح ذلك للمدرب بتحديد السلوك المطلوب دون استخدام أيديهم ، مما يضمن توقيتا ثابتا مع إبقاء كلتا يديه متاحة للتفاعل مع.
  3. يوم التدريب 1-5: مقدمة عن الفرس
    1. بدء المؤقت: اضغط على البدء في التطبيق أو اضغط على الزر الموجود على المؤقت الصامت.
    2. قف أو اجلس أمام القفص. ضع خمس قطع من البذرة المختارة في راحة اليد وضع اليد بشكل مسطح على الركيزة في أحد أركان القفص.
    3. انقر في اللحظة التي يأخذ فيها الجربوع بذرة من اليد (الشكل 2 ب). إذا تم أخذ بذور متعددة بالتسلسل ، فانقر بعد كل واحدة. استخدم صوت النقر لربط مكافأة الطعام بسلوك التغذية من اليد.
    4. قم بإنهاء التدريب عندما يقوم بالسلوك المطلوب 5x أو عندما يصل المؤقت إلى الصفر (بعد 4 دقائق).
    5. بدءا من اليوم 3 ، اعتمادا على سلوك الجربوع ، ابدأ في تقديم البذور واحدة تلو الأخرى. أمسك اليد فوق أرضية القفص مباشرة لتشجيع على التمدد أو الاتصال لفترة وجيزة بمخالبه الأمامية (الشكل 2 ج). يساعد هذا في تشكيل السلوك تدريجيا ويهيئ لمرحلة التدريب التالية (انظر الخطوة 3.4).
  4. يوم التدريب 6-10
    ملاحظة: نصيحة تدريب اختيارية: إذا كان الجربوع مترددا في الصعود إلى اليد ، فقم بتقسيم المهمة إلى خطوات أصغر لبناء الثقة. أولا ، عزز سلوك لمس اليد قبل توقع تسلق. استخدم استراتيجية التشكيل هذه لتقليل التوتر ودعم التي تتطلب مزيدا من الوقت لتعتاد على التعامل معها.
    1. قدم بذرة واحدة فقط في كل مرة. أمسك اليد مرفوعة قليلا فوق الركيزة لتشجيع الجربوع على الصعود بالكامل إلى اليد للوصول إلى المكافأة. تعتمد هذه الخطوة على عملية التشكيل السابقة وتمثل الانتقال إلى السلوك المستهدف النهائي.
    2. بمجرد أن يصعد الجربوع باستمرار على اليد ، انقر لتعزيز السلوك. ابدأ في تقديم البذرة باستخدام يدك الثوانية (انظر الشكل 3). حافظ على يد التدريب فوق أرضية القفص حتى يتسعد الجربوع عليها بالكامل. استخدم إحدى يديك إما لإمساك البذرة بين إبهامك والسبابة (الشكل 3 أ) أو استخدم إحدى يديك لتقديم المكافأة فوق راحة اليد الأخرى ، والتي يتم تشجيع على الصعود إليها (الشكل 3 ب).
    3. قم بتقييم نجاح التدريب على أنه يجلس الجربوع طواعية على يد المجرب 5 مرات في كل جلسة ويقبل المكافأة إما من راحة اليد أو من اليد الثانية.
    4. اختتم التدريب بعد مدة أقصاها 3 أسابيع (5 أيام في الأسبوع) أو عندما يتم إثبات هدف التدريب باستمرار على مدار 3 أيام متتالية.
      ملاحظة: على الرغم من أن البروتوكول يحدد مرحلة تدريب منظمة تصل إلى 3 أسابيع ، إلا أنه يمكن مواصلة جلسات التعزيز بعد هذه الفترة إذا لزم الأمر ، خاصة عندما يكون من المتوقع حدوث تأخير بين نهاية التدريب وبدء الإجراءات التجريبية. يمكن أن يساعد التعزيز الإيجابي المستمر في الحفاظ على السلوك المكتسب وضمان الموثوقية بمرور الوقت. نوصي بمواصلة التعزيز مرة واحدة في الأسبوع بعد الانتهاء بنجاح من مرحلة التدريب. ومع ذلك ، لضمان الاتساق والمقارنة بين ، يجب توثيق نقطة نهاية تدريب واضحة - محددة من خلال الأداء المستقر والمتكرر للسلوك المستهدف - قبل الانتقال إلى المهام التجريبية.

figure-protocol-3
الشكل 3: أمثلة على وضع اليد أثناء تسليم المكافأة. (أ) يتم الاحتفاظ بالمكافأة بين أصابع الإبهام والسبابة في نفس اليد ، بينما يجلس على راحة اليد. (ب) يتم حمل المكافأة بالأصابع الثانية والسبابة ، بينما يجلس على راحة اليد الأخرى. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

4. إجراء الاختبارات السلوكية بعد التدريب (اليوم 10+)

  1. اختبار التفاعل
    ملاحظة: المتغيرات التابعة: المتغير الأساسي التابع هو مدة التفاعل الطوعي بين ويد المجرب خلال الدقيقة الثانية من الاختبار. يعرف التفاعل بأنه اتصال جسدي مباشر ، مثل الاستنشاق أو التسلق أو لمس اليد بالكفوف الأمامية10. يعتمد التسجيل السلوكي على تسجيلات الفيديو ويمكن إجراؤه يدويا أو باستخدام برنامج التحليل السلوكي.
    1. ضع كاميرا مثبتة على حامل ثلاثي القوائم فوق الطاولة حيث سيتم إجراء اختبار التفاعل.
    2. إذا تم إيواء في مجموعات ، فقم بنقل إلى قفص ثانوي نظيف يحتوي على حفنة من الفراش من قفص المنزل.
    3. قم بإزالة جميع الأنفاق أو الملاجئ من قفص المنزل وضعها في القفص النظيف. اترك الفراش فقط في قفص الاختبار (= قفص المنزل). ضع قفص المنزل ، الذي يحتوي الآن على الفراش فقط ، تحت الكاميرا.
    4. استخدم معالجة مقعرة لإعادة الاختبار برفق إلى قفص المنزل.
    5. ابدأ التسجيل. ابق ثابتا أمام القفص لمدة 1 دقيقة. بعد 1 دقيقة ، ضع يد واحدة مرتدية قفازا داخل القفص بالقرب من الحافة الأمامية لمدة 1 دقيقة إضافية.
    6. تغيير القفازات بين من مختلف الجنسين.
  2. اختبار المجال المفتوح
    ملاحظة: المتغيرات التابعة: تشمل المتغيرات المقاسة إجمالي المسافة المقطوعة والوقت المستغرق في منطقة المركز مقابل المحيط وعدد إدخالات المركز وأحداث التربية. تعكس هذه المؤشرات النشاط الحركي العام والسلوك الشبيه بالقلق. عادة ما يتم تفسير زيادة وقت المركز على أنه انخفاض القلق. يتم تسجيل السلوك عن طريق الفيديو وتحليله باستخدام برنامج التتبع الآلي (انظر جدول المواد).
    1. ضع كاميرا فوق ساحة المجال المفتوح (100 سم × 100 سم × 40 سم).
    2. ابدأ تسجيل الفيديو ، ثم ضع برفق في وسط الساحة باستخدام التعامل المقعر. سجل السلوك لمدة 7 دقائق.
    3. بعد الاختبار ، أعد إلى قفص منزله. نظف صندوق الحقل المفتوح والجدران بنسبة 70٪ من الإيثانول بعد كل. انتظر حتى يتبخر الإيثانول تماما قبل وضع التالي في الساحة.

5. التحليل الإحصائي

  1. في حين أن التعمية الكاملة للمجرب لم يكن ممكنا أثناء الجلسات التدريبية بسبب طبيعة التفاعل المباشر مع ، قم بإجراء تحليل البيانات السلوكية بطريقة عمياء لتقليل تحيز المراقب.
  2. لكل من اختبارات التفاعل والميدان المفتوح ، قم بتسجيل جميع الجلسات على الفيديو. جمع المتغيرات التابعة إما يدويا بواسطة مراقبين مدربين (اختبار التفاعل) أو تلقائيا باستخدام برنامج التحليل السلوكي (انظر جدول المواد) لتسجيلات الحقول المفتوحة (الوقت المستغرق في منطقة المركز).
  3. قبل التحليل الإحصائي ، اختبر جميع البيانات للتوزيع الطبيعي باستخدام اختبار Shapiro-Wilk. تحديد القيم المتطرفة واستبعادها باستخدام طريقة الانحدار القوي والإزالة الخارجية (ROUT) مع ضبط معدل اكتشاف خاطئ (Q) على 10٪. لتحليل تأثيرات التدريب والجنس على النتائج السلوكية ، قم بإجراء ANOVA للقياسات المتكررة ثنائية الاتجاه لاختبار التفاعل ، و ANOVA مختلط ثنائي الاتجاه لتقييم الوقت الذي يقضيه في وسط اختبار المجال المفتوح.
  4. صنف اختبار التفاعل والوقت التراكمي الذي يقضيه في المنطقة المركزية للحقل المفتوح كمتغيرات تابعة رئيسية. قم بإجراء مقارنات لاحقة باستخدام اختبار Tukey's Honest Significant Difference (HSD). واعتبرت قيمة p البالغة 0.05 < ذات دلالة إحصائية. تم إجراء جميع التحليلات الإحصائية باستخدام برامج إحصائية (انظر جدول المواد).

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تعلمت جميع الجربوع المدربة المهمة الموكلة إليها في غضون 10 أيام ، مما يدل على جدوى تدريب الفرس في هذا النوع. يعرض الشكل 4 نجاح تدريب الإناث (ن = 27) والذكور (ن = 16) الجربوع من اليوم 1 إلى اليوم 10. كشف ANOVA المقاييس المتكررة لتحليل الأداء في يوم التدريب 1 مقابل اليوم 10 في الجربوع من الذكور والإناث عن عدم وجود تأثير تفاعلي كبير بين الوقت والجنس (F (1 ، 41) = 0.003 ؛ ص = 0.955) ، مما يشير إلى أن التحسن بمرور الوقت كان متشابها لكلا الجنسين. لوحظ تأثير كبير للغاية للوقت (F (1 ، 41) = 38.83 ، ص < 0.0001) ، مما يدل على أن الجربوع من كلا الجنسين امتثلت تماما لبروتوكول التدريب بحلول اليوم 10.

حقيقة أن الجربوع المدربة امتثلت للمهمة الموكلة إليها في غضون 10 أيام تؤكد فعالية منهجية تدريب الفرس في هذا النوع. يتماشى معدل النجاح هذا مع المبادئ الأساسية للتكييف الفعال ، حيث يعمل جهاز النقر كمعزز ثانوي يسد الفجوة بين السلوك المطلوب والمكافأة الأولية (بذور عباد الشمس / اليقطين). يعمل جهاز النقر كجسر بين السلوك والمكافأة ، مما يسمح للمدرب بتحديد اللحظة الدقيقة التي يحدث فيها السلوك المطلوب بتوقيت دقيق. هذا يساعد في إنشاء ارتباط واضح وفوري بين الإجراء وعواقبه الإيجابية.

تم إجراء الاختبار السلوكي بعد الانتهاء من بروتوكول التدريب ، وتحديدا بعد يوم التدريب 10. أظهر تحليل ANOVA المختلط ثنائي الاتجاه أن الجربوع المدربة زادت من التفاعل الطوعي مع يد المجرب (الشكل 5 أ). تم الكشف عن تأثير كبير للتدريب (F (1 ، 60) = 22.89 ؛ ص < 0.0001) ، مع مشاركة المدربة بشكل متكرر مع المجري. كشف التحليل اللاحق عن الاختلافات المحددة في التدريب بين الإناث (ص < 0.0001 ، ن = 27) والذكور (ص = 0.049 ، ن = 16). لم يلاحظ التأثير الجنسي (F (1 ، 60) = 0.621 ، ص = 0.434) ، مما يشير إلى أن أداء الجربوع من الذكور والإناث كان أداء مشابها بشكل عام. كشف التحليل عن عدم وجود تفاعل معتد به بين الجنس والتدريب (F (1 ، 60) = 0.078 ، ص = 0.781).

يشير التفاعل الطوعي المتزايد من قبل الجربوع إلى أن تدريب النقر قلل بشكل فعال من استجابات الخوف الفطرية من خلال التعزيز الإيجابي. قد يساعد ذلك في تقليل التوتر أثناء المناولة والإجراءات التجريبية ، مما يحسن رعاية وجودة البيانات.

تم إجراء تقييم للسلوك الشبيه بالقلق بعد التدريب باستخدام اختبار المجال المفتوح. يوضح الشكل 5 ب المدة التراكمية التي تقضيها في منطقة المركز. لم يلاحظ أي تفاعل بين الجنس والتدريب في المدة التراكمية في المنطقة المركزية لاختبار المجال المفتوح (F (1 ، 60) = 0.101 ، ص = 0.751). بالإضافة إلى ذلك ، لم يتم العثور على تأثير رئيسي كبير للجنس (F (1 ، 60) = 0.001 ، ص = 0.969. لوحظ تأثير رئيسي كبير للغاية للتدريب (F (1 ، 60) = 17.26 ، ص < 0.0001 ؛ اختبار HSD Tukey: ص = 0.003 و ص = 0.052 في الإناث والذكور ، على التوالي) ، مما يشير إلى أن الجربوع المدربة أمضت وقتا أطول بكثير في المركز مقارنة بتلك غير المدربة. تعكس هذه النتائج الاستجابات السلوكية التي تم قياسها بعد أن أكملت فترة التدريب التي استمرت 10 أيام.

يستغل OFT الصراع الطبيعي بين تجنب النهج الذي تواجهه القوارض عند استكشاف بيئات جديدة27. قد توازن الجربوع بين دافعها الفطري للاستكشاف وميلها الطبيعي لتجنب المساحات المفتوحة التي يحتمل أن تكون خطرة. لذلك ، فإن حقيقة أن الجربوع المدربة أمضت وقتا أطول في منطقة المركز المثيرة للقلق تشير إلى أن تدريب النقر عزز استعدادهم السلوكي العام للاستكشاف ، مما قد يشير إلى تحسينات في الرفاهية العامة.

figure-results-1
الشكل 4: التحقق من صحة تدريب الفرس. نجاح التدريب في اليوم 1 مقابل اليوم 10 للذكور والإناث: تم تقييم نجاح التدريب في الإناث (القضبان البيضاء ، ن = 27) والذكور (القضبان الرمادية ، ن = 16) الجربوع في اليوم 1 واليوم 10 من بروتوكول التدريب. كشفت ANOVA للقياسات المتكررة في اتجاهين عن تأثير رئيسي كبير ليوم التدريب (ص < 0.0001). أظهرت المقارنات المتعددة باستخدام اختبار Tukey's HSD زيادة كبيرة في نجاح التدريب من اليوم 1 إلى اليوم 10 في كل من الإناث (ص < 0.0001 ، ن = 27) والذكور (ص < 0.0001 ، ن = 16). يتم تقديم البيانات كمتوسط ± SD. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-2
الشكل 5: التقييم السلوكي. (أ) اختبار التفاعل: تم قياس مدة التفاعل مع يد المجرب (بالثانية) في الجربوع المدربة (القضبان الرمادية) وغير المدربة (القضبان البيضاء) من الإناث والذكور بعد أن أكملت فترة التدريب التي استمرت 10 أيام. كشف ANOVA المختلط ثنائي الاتجاه عن تأثير رئيسي كبير للتدريب (ص < 0.05) وتأثير تفاعل كبير (ص < 0.05). أظهر التحليل اللاحق باستخدام اختبار Tukey HSD أن الفئران المدربة تفاعلت بشكل أطول بشكل ملحوظ مع يد المجرب مقارنة بالفئران غير المدربة (الإناث: ص < 0.0001 ، الذكور: ص = 0.0497). يتم تقديم البيانات كمتوسط ± SD. الإناث المدربات: n = 27; الإناث غير المدربين: ن = 16 ؛ الذكور المدربون: ن = 16 ؛ الذكور غير المدربين: ن = 5. (ب) اختبار المجال المفتوح: تم إجراء الاختبار بعد الانتهاء من بروتوكول التدريب ، وتحديدا بعد اليوم التدريبي 10. تم قياس المدة التراكمية التي تقضيها في منطقة (مناطق) المركز في الجربوع المدربة (القضبان الرمادية) وغير المدربة (القضبان البيضاء) من الإناث والذكور. تم إجراء ANOVA مختلط ثنائي الاتجاه لتحليل تأثيرات التدريب على استكشاف منطقة المركز. كشفت المقارنات المتعددة باستخدام اختبار Tukey's HSD أن الإناث المدربات يقضين وقتا أطول بكثير في منطقة المركز مقارنة بالإناث غير المدربات (ص = 0.003). يتم تقديم البيانات كمتوسط ± SD. الإناث المدربات: n = 27; الإناث غير المدربين: ن = 16 ؛ الذكور المدربون: ن = 16 ؛ الذكور غير المدربين: ن = 5. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تظهر النتائج فعالية البروتوكول المقترح لتعويد الجربوع على التفاعل البشري في البيئات التجريبية. تسلط قدرة جميع المدربة على إكمال المهمة المطلوبة في غضون 10 أيام الضوء على كفاءة هذه الطريقة.

تتمثل إحدى الخطوات الحاسمة في البروتوكول في التعود التدريجي على يد المجرب ، مما يضمن أن الجربوع تربط التفاعل البشري بحافز إيجابي. يؤدي استخدام المكافآت الخاصة بالأنواع إلى تحسين عملية التدريب. يمكن للتعديلات ، مثل تعديل مدة الجلسات التدريبية أو تغيير نوع المكافأة ، أن تجعل البروتوكول أكثر ملاءمة للاختلافات الفردية بين الجربوع وتحسينه للمتطلبات المحددة للتجربة.

نحن نركز على الاختلافات الملحوظة الخاصة بالأنواع في السلوك وديناميكيات التعلم بين الفئران والجربوع المنغولية. يجب مراعاة هذه الاختلافات عند تصميم بروتوكولات التدريب. على سبيل المثال ، تميل الفئران إلى أن تكون أكثر رهاب الجدد وحساسية للإجهاد ، وغالبا ما تتطلب مزيدا من الوقت للتعود على البيئات الجديدة والتفاعل البشري28. في المقابل ، تظهر الجربوع دافعا استكشافيا أعلى وفضولا اجتماعيا ، مما يسهل المشاركة بشكل أسرع في مهام التدريب29. في الدراسة الحالية ، اقتربت الجربوع بسهولة من يد المجرب وتعلمت ربط جهاز النقر بمكافأة في جلسات أقل مما هو مذكور عادة للفئران21،22. ومع ذلك ، أظهرت الجربوع أيضا تباينا فرديا أكبر ، خاصة عند الذكور ، مما قد يعكس الإجهاد الخاص بالجنس أو العوامل التحفيزية التي تكون أقل وضوحا في نماذج الفئران. تسلط هذه الفروق الضوء على أهمية استراتيجيات التدريب المتكيفة مع الأنواع وتشير إلى أن الجربوع قد تستفيد من جلسات أقصر تركز على المكافأة مع التركيز بشكل أكبر على التفاعل الطوعي ، في حين أن الفئران قد تتطلب المزيد من إزالة التحسس التدريجي والتكرار المتسق. يعد فهم هذه الاختلافات السلوكية والمعرفية أمرا بالغ الأهمية لتحسين بروتوكولات التدريب وتعظيم فعاليتها عبر الأنواع.

يمكن أن تستفيد الجربوع المنغولية بشكل كبير من تدريب النقر غير المحدد أو المعمم ، والذي يركز على التفاعل الإيجابي بين الإنسان والتكييف السلوكي الأساسي بدلا من التحضير لإعداد تجريبي معين. يعزز هذا التدريب المعمم التعامل مع التسامح ، ويقلل من مستويات الإجهاد الأساسي ، ويعزز عوامل خط الأساس السلوكية التي يمكن التنبؤ بها والتي تكون ذات قيمة عبر مجموعة واسعة من السياقاتالتجريبية 30. يعزز التدريب غير المحدد المرونة السلوكية والتفاعل الطوعي المتسق مع المجرب ، مما يجعل أكثر قابلية للتكيف مع البيئات أو الإعدادات أو نماذج الاختبارالمختلفة 16،31،32. هذا مفيد بشكل خاص في الدراسات طويلة المدى أو التجارب متعددة المراحل ، حيث تتعرض لمجموعة متنوعة من الإجراءات. في هذه الدراسة ، على الرغم من أن التدريب لم يكن مرتبطا بشكل مباشر ببروتوكول اختبار واحد ، فقد أظهرت الجربوع تفاعلا محسنا مع المجرب وقلل من السلوك المرتبط بالإجهاد ، مما يدعم فكرة أن التعود العام من خلال التعزيز الإيجابي يمكن أن يحسن المرونة التجريبية الشاملة ورفاهية.

بالإضافة إلى زيادة التفاعل مع المجرب ، أمضت إناث المدربة وقتا أطول بكثير في المنطقة المركزية لاختبار المجال المفتوح. عادة ما يتم تفسير هذا النمط السلوكي على أنه انخفاض في السلوك الشبيه بالقلق في القوارض ، لا سيما استجابة للبيئات الجديدة أو المكروهةبشكل معتدل 33. تشير هذه النتائج إلى أن تدريب الفرس قد يساهم في تقليل المؤشرات السلوكية للقلق ، وبالتالي تعزيز قدرة على التعامل مع الإجراءات التجريبية. هذا يدعم الاستنتاج الأوسع بأن بروتوكولات التعود القائمة على التعزيز الإيجابي يمكن أن تحسن مرونة الإجهاد والاستقرار السلوكي في الجربوع المختبرية. بالإضافة إلى الحد من الإجهاد ، فإن تدريب النقر له آثار أوسع على النتائج التجريبية34. أظهرت الجربوع المدربة تحملا أكبر للتعامل ، مما يقلل من الاختلافات الفسيولوجية الناجمة عن الإجهاد والتي يمكن أن تربك نتائج البحث. تم الإبلاغ عن نتائج مماثلة في أنواع أخرى ، بما في ذلك الأرانب والفئران المختبرية ، حيث أظهرت المدربة على النقر تفاعلا متزايدا مع المجربين وسلوكيات أقل مرتبطة بالقلق والاكتئاب ، مثل انخفاض التبول والتغوط والنطق والسلوك العائم19،21.

تسلط هذه النتائج الضوء على إمكانات تدريب الفرس لتحسين كل من رعاية واتساق البيانات السلوكية عن طريق تقليل التباين في الاستجابات المرتبطة بالتوتر. من المهم توضيح أن الهدف من هذا البروتوكول ليس تكييف لربط الإجراءات المكروهة بطبيعتها - مثل سحب الدم - بمحفزات إيجابية مثل الفرس. بدلا من ذلك ، الهدف هو تقليل الإجهاد الأساسي ، وتعويد على التفاعل البشري ، وتعزيز المشاركة الطوعية في المهام المحايدة أو الصعبة إلى حد ما. في حين أن بعض الدراسات قد استكشفت استخدام التعزيز الإيجابي لإعداد لإجراءات أكثر توغلا35 ، فإن هذا يتطلب عملية إزالة التحسس منظمة بعناية ويتجاوز نطاق البروتوكول الحالي. يمكن أن يؤدي سوء تطبيق إشارات النقر في السياقات المرتبطة بعدم الراحة إلى ارتباطات سلبية غير مقصودة. ومع ذلك ، عند تطبيقها بشكل صحيح ، يمكن أن تساعد تقنيات التعزيز الإيجابية على التعامل مع الإجراءات التي يحتمل أن تكون مكروهة من خلال تعزيز القدرة على التنبؤ والسماح بدرجة من التحكم36. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتحديد ما إذا كان يمكن تدريب الجربوع بشكل موثوق لمثل هذه السياقات ، كما تم إثباته بنجاح في الأنواع الأخرى مثل والرئيسيات غير البشرية37،38.

على الرغم من نجاحها ، إلا أن الطريقة لها قيود. تتطلب بعض الجربوع فترات تعويد أطول ، مما يشير إلى التباين الفردي في سرعة التعلم. بالإضافة إلى ذلك ، فإن العدد المنخفض نسبيا من الجربوع الذكور غير المدربين يحد من القوة الإحصائية للتحليل ، مما يجعل من الصعب استخلاص استنتاجات قوية. من المرجح أن تؤدي زيادة حجم العينة في هذه المجموعة إلى تحسين موثوقية النتائج وقابليتها للتفسير. يجب أن تستكشف المزيد من الدراسات الاختلافات المحتملة بين الجنسين في استجابات الإجهاد وآليات التعلم.

تمتد الآثار الأوسع لهذه الدراسة إلى ما هو أبعد من الحد من التوتر. قد يؤدي تنفيذ بروتوكولات التدريب المنظمة كجزء من التربية القياسية إلى تقليل التباين الناجم عن الاستجابات الفسيولوجية الناجمة عن الإجهاد وتحسين موثوقية النتائج التجريبية39،40. هذا مهم بشكل خاص في تخصصات مثل علم الأعصاب أو أبحاث التمثيل الغذائي ، حيث يكون الإجهاد عاملا مربكا حاسما. ويعد الإبلاغ الدقيق عن إجراءات التدريب وتوحيدها أمرا ضروريا لتجنب آثار التخصيب غير المقصودة.

من الآن فصاعدا ، يجب أن تستكشف الأبحاث المستقبلية جداول التعزيز البديلة ، وأتمتة إجراءات التدريب ، والتأثيرات طويلة المدى عبر الأنواع. مع زيادة الدعم العلمي ، يمثل تدريب النقر استراتيجية تحسين قيمة يمكن أن تعزز جودة البيانات ورفاهية. يمكن أن يساعد توحيد بروتوكولات التدريب والمناولة عبر المختبرات في تحسين قابلية التكاثر ودعم التبني الأوسع للممارسات الإنسانية والفعالة في البحوث الطبية الحيوية.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويعلن أصحاب البلاغ عدم وجود مصالح مالية متنافسة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل من قبل مركز أبحاث الانتقالية التابع للمركز الطبي الجامعي التابع لجامعة يوهانس جوتنبرج في ماينز.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
أقفاصZoonlab GmbH3010006590 × 380 × 200 مم ؛ 1.815 م 2
كاميراسونيHDR-CX240Eكاميرا فيديو رقمية عالية الدقة مسجل
كريات طعامSsniffV1644-000Art. رقم I-Clicker-Blau
Foot Clickerhttps://www.hundeschulen.com
GraphPad PrismGraphPad Software، Inchttps://www.graphpad.com/featuresالإصدار 10 للنوافذ
صندوق حقل مفتوحNoldusMXO1S-M001أوبال 100 × 100 × 40 سم
بذور اليقطينREWE8820911REWE Bio
Pylon viewerBaslerhttps://www.baslerweb.com/de-de/software/pylon/
بذور عبادالشمس Seeberger4744292
ترايبودأنفاق مانفروتوجي تي- mkbfra4gtxp bhأنفاق بيفري جي
تي بلكس إكس14179152 × 76 × 3 ملم

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Animal Use Alternatives (3Rs). , National Agricultural Library. Accessed May 21, 2025 https://www.nal.usda.gov/animal-health-and-welfare/animal-use-alternatives (2025).
  2. The 3Rs. , NC3Rsy. Accessed May 21, 2025 https://nc3rs.org.uk/who-we-are/3rs (2025).
  3. Locke, P., Romanchik, R., Kincaid, B., Golden, E. The 3RS and non-human animals in biomedical research: the next 65 years. , https://www.ufaw.org.uk/ (2025).
  4. Number of animals used in experiments in 2022. , European Commission. https://webgate.ec.europa.eu/envdataportal/content/alures/section1_number-of-animals.html (2022).
  5. Tierschutzgesetz TierSchG, 2022. , Bundesministerium der Justiz. https://www.gesetze-im-internet.de/tierschg/BJNR012770972.html (2022).
  6. Verwendung von Versuchstieren im Berichtsjahr 2023. , Bundesinstitut für Risikobewertung (BfR). https://www.bf3r.de/de/verwendung_von_versuchstieren_im_berichtsjahr_2023-318066.html (2022).
  7. Mulholland, M. M., Neal Webb, S. J., Schapiro, S. J. Behavioral Needs and Management of Laboratory Animals. Handbook Lab Animal Sci. 4, 14(2021).
  8. Gärtner, K., et al. Stress response of rats to handling and experimental procedures. Lab Anim. 14 (3), 267-274 (1980).
  9. Marcotte, M., et al. Handling Techniques to Reduce Stress in Mice. J Vis Exp. (175), e62593(2021).
  10. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nat Meth. 7, 825-826 (2010).
  11. Gouveia, K., Hurst, J. L. Reducing Mouse Anxiety during Handling: Effect of Experience with Handling Tunnels. PLoS One. 8 (6), e66401(2013).
  12. Ryabinin, A. E., Wang, Y. M., Finn, D. A. Different levels of Fos immunoreactivity after repeated handling and injection stress in two inbred strains of mice. Pharmacol Biochem Behav. 63 (1), 143-151 (1999).
  13. Balcombe, J. P., Barnard, N. D., Sandusky, C. Laboratory routines cause animal stress. Contemp Top Lab Anim Sci. 43 (6), 42-51 (2004).
  14. Rinwa, P., Eriksson, M., Cotgreave, I., Bäckberg, M. 3R-Refinement principles: elevating rodent well-being and research quality. Lab Anim Res. 40 (1), 1-11 (2024).
  15. Skinner, B. F. Operant behavior. Ame Psychol. 18 (8), 503-515 (1963).
  16. Leidinger, C. S., Kaiser, N., Baumgart, N., Baumgart, J. Using Clicker Training and Social Observation to Teach Rats to Voluntarily Change Cages. J Vis Exp. (140), e58511(2018).
  17. Pfaller-Sadovsky, N., Hurtado-Parrado, C., Cardillo, D., Medina, L. G., Friedman, S. G. What's in a Click? The Efficacy of Conditioned Reinforcement in Applied Animal Training: A Systematic Review and Meta-Analysis. Animals. 10, 1757(2020).
  18. Prescott, M. J., Buchanan-Smith, H. M. Training laboratory-housed non-human primates, part 1: a UK survey. Animal Welfare. 16, 21-36 (2007).
  19. Hohlbaum, K., Kahnau, P., Wilzopolski, J., Fischer-Tenhagen, C. Training Laboratory Rabbits to Refine Routine Husbandry Procedures. J Vis Exp. (204), e66008(2024).
  20. Jüchter, C., Beutelmann, R., Klump, G. M. Speech sound discrimination by Mongolian gerbils. Hear Res. 418, 108472(2022).
  21. Leidinger, C., Herrmann, F., Thöne-Reineke, C., Baumgart, N., Baumgart, J. Introducing clicker training as a cognitive enrichment for laboratory mice. J Vis Exp. , e55415(2017).
  22. Dickmann, J., et al. Clicker training mice for improved compliance in the catwalk test. Animals. 12 (24), 3545(2022).
  23. Leidinger, C. Refinement Strategies in Breeding and Keeping of Laboratory Mice. , https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/2088 (2018).
  24. Brown, S. A. Small mammal training in the veterinary practice. Vet Clin North Am Exotic Animal Pract. 15 (3), 469-485 (2012).
  25. Mankin, E. A., et al. The hippocampal code for space in Mongolian gerbils. Hippocampus. 29 (9), 787(2019).
  26. Busch, M., et al. Tiergerechte Haltung von Mongolischen Wüstenrennmäusen (Meriones unguiculatus). , gv-solas.de. (2021).
  27. Bridges, N. J., Starkey, N. J. Sex differences in Mongolian gerbils in four tests of anxiety. Physiol Behav. 83, 119-127 (2004).
  28. Walker, M. D., Mason, G. Female C57BL/6 mice show consistent individual differences in spontaneous interaction with environmental enrichment that are predicted by neophobia. Behav Brain Res. 224 (1), 207-212 (2011).
  29. Anselme, P. Animal Behavior and Cognition Exploratory Search: Information Matters More than Primary Reward. Animal Behav Cogni. 10 (4), 366-383 (2023).
  30. Tejedor-Real, P., Sahagún, M., Biguet, N. F., Mallet, J. Neonatal Handling Prevents the Effects of Phencyclidine in an Animal Model of Negative Symptoms of Schizophrenia. Biol Psychiatry. 61 (7), 865-872 (2007).
  31. Chen, K., et al. Exercise training improves motor skill learning via selective activation of mTOR. Sci Adv. 5 (7), eaaw1888(2019).
  32. Codita, A., et al. Effects of spatial and cognitive enrichment on activity pattern and learning performance in three strains of mice in the IntelliMaze. Behav Genet. 42 (3), 449-460 (2012).
  33. Wang, S., et al. The different baseline characteristics of cognitive behavior test between Mongolian gerbils and rats. Behav Brain Res. 352, 28-34 (2018).
  34. Baumans, V., Van Loo, P. L. P. How to improve housing conditions of laboratory animals: The possibilities of environmental refinement. Vet J. 195 (1), 24-32 (2012).
  35. Fiderer, D., Thoene-Reineke, C., Wiegard, M. Clicker Training in Minipigs to Reduce Stress during Blood Collection-An Example of Applied Refinement. Animals. 14 (19), 2819(2024).
  36. Layton, R., et al. A Positive-Reinforcement Training Regimen for Refined Sample Collection in Laboratory Pigs. Animals. 15 (4), 471(2025).
  37. Schapiro, S. J., Bloomsmith, M. A., Laule, G. E. Positive reinforcement training as a technique to alter nonhuman primate behavior: Quantitative assessments of effectiveness. J Appl Animal Welfare Sci. 6 (3), 175-187 (2003).
  38. Meunier, L. V. D. Selection, Acclimation, Training, and Preparation of Dogs for the Research Setting. ILAR J. 47 (4), 326-347 (2006).
  39. Golbidi, S., Frisbee, J. C., Laher, I. X. Chronic stress impacts the cardiovascular system: Animal models and clinical outcomes. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (12), H1476-H1498 (2015).
  40. Liu, X., Zheng, X., Liu, Y., Du, X., Chen, Z. Effects of adaptation to handling on the circadian rhythmicity of blood solutes in Mongolian gerbils. Animal Model Exp Med. 2 (2), 127-131 (2019).

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

الفيديو قريباً

مقالات ذات صلة