Method Article

الدور الوقائي للعظام من Bupleurum في نموذج الفئران لهشاشة العظام بعد انقطاع الطمث

DOI:

10.3791/68675

⸱

August 22nd, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1YouJiang Medical University for Nationalities, 2Affiliated Hospital of YouJiang Medical University for Nationalities, 3ShenZhen International Travel Health Care Center (ShenZhen Customs Port Clinic)

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في هذه الدراسة ، استخدمنا نموذج الفئران المبيض لهشاشة العظام بعد انقطاع الطمث لإثبات أن سائل الفم Bupleurum (Chai hu) يحسن البنية المجهرية للعظام عن طريق قمع العوامل المؤيدة للالتهابات وتعزيز العوامل المضادة للالتهابات. يشير هذا إلى أن آليته المضادة للالتهابات تخفف جزئيا من هشاشة العظام الناجمة عن نقص هرمون الاستروجين.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يهدف البروتوكول إلى التحقيق في آثار إعطاء تشاي هو على هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث في الفئران المبيضة (OVX). خضعت أنثى فئران سبراج دولي البالغة من العمر ثمانية أسابيع لاستئصال المبيض الثنائي باستخدام النهج الظهري لإنشاء نموذج هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث. تم إعطاء جرعات مختلفة من سائل تشاي هو عن طريق الفم عن طريق التزقيم الفموي لمدة 12 أسبوعا متتاليا ، تليها تقييمات البنية المجهرية للعظام وقياسات مستويات السيتوكين الالتهابية. أدى علاج تشاي هو بجرعة متوسطة وعالية إلى تثبيط فقدان العظام جزئيا ، وتقليل تعبير السيتوكين المؤيد للالتهابات ، وزيادة مستويات السيتوكين المضادة للالتهابات في فئران OVX. كان هناك انخفاض كبير في شدة تدمير العظام من جرعات منخفضة إلى عالية ، ولوحظت تحسينات مرتبطة بالجرعة في إعادة بناء البنية المجهرية للعظام. خفف تشاي هو من فقدان العظام الناجم عن نقص هرمون الاستروجين وتدهور البنية المجهرية ، وبالتالي قمع تطور OP في نموذج OVX هذا. كان من المحتمل أن يكون هذا ناتجا عن التأثيرات المضادة للالتهابات للمسارات المعنية.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هشاشة العظام (OP) هو مرض استقلابي شائع في العظام يتميز بانخفاض كتلة العظام وانخفاض قوة العظام وتدمير الهندسة المعمارية الدقيقةللعظام 1. يمكن أن يظهر OP على أنه إما أولي أو ثانوي ، ويصنف OP الأولي على أنه OP بعد انقطاع الطمث (PMOP) ، و OP الشيخوخة ، و OP مجهول السبب (والذي يحدث غالبا عند المراهقين). من بينها ، يحدث النوع الأول PMOP بشكل أساسي عند النساء بعد الياز ، حيث يوجد انخفاض ملحوظ في كثافة العظام بعد انقطاع الطمث بسبب انخفاض مستويات هرمون الاستروجين2. إنه مرض استقلابي جهازي للعظام ، مما يؤدي إلى زيادة نشاط ناقضات العظم والتمايز الشديد3. بالإضافة إلى ذلك ، فإن شدة ارتشاف العظام أكبر بكثير من تكوينها ، مما يؤدي إلى انخفاض كتلة العظام بالإضافة إلى زيادة هشاشة العظام وخطر الكسر4.

وجدت الأبحاث الحالية أن العديد من الأمراض الالتهابية المزمنة ، مثل هشاشة العظام والتهاب دواعم السن ، ترتبط بفقدان كبير للعظام ، مما يشير إلى أن الالتهاب قد يكون مرتبطا ارتباطا وثيقا ب OP5. مع تقدم النساء في العمر ، بالإضافة إلى تغيرات الغدد الصماء ، تنخفض الوظائف الفسيولوجية والمناعية ، ويترك الجسم في حالة التهاب مزمن لفترات طويلة من الزمن. تلعب العديد من هذه العوامل المعززة للالتهاب والسيتوكينات المشتقة من الخلايا التائية أدوارا مهمة في فقدان العظام. لذلك ، يعرف PMOP أيضا بأنه مرض التهابي مزمن6،7.

يتمتع الطب الصيني التقليدي (TCM) بتاريخ طويل وخبرة سريرية غنية في الوقاية من PMOP وعلاجه ، مع التركيز على الإدارة الشاملة والتشخيص والعلاج الفردي ، ويمكنه تنظيم الغدد الصماء والجهاز المناعي في نفس الوقت ، وهو نعمة للنساء بعد انقطاعالطمث 8. يسمح لنسبة كبيرة من النساء بالحصول على العلاج الطبي. أظهرت الدراسات الدوائية الحديثة والتجارب السريرية أن الطب الصيني التقليدي له مزايا الاستهداف المتعدد والسمية المنخفضة والآثار الجانبية ، وهو رخيص. يمكن تقليل خطر حدوث مضاعفات بشكل كبير في علاج الطب الصيني التقليدي ل PMOP9.

يحتوي تشاي هو نفسه على خصائص مضادة للالتهابات10 ومضادة للاكتئاب11، ويمكنها تنظيم إفراز الهرمونات في الجسم12 بالإضافة إلى المساعدة في الصحةالجيدة 13. تشاي هو هو المكون الرئيسي الذي يلعب دورا رئيسيا في تركيبة مركب الطب الصيني التقليدي ، حبوب Xiaoyao ، والتي لها تأثير على تهدئة المشاعر ، وتعزيز الهضم ، والامتصاص في المعدة والأمعاء. ومن المعروف أيضا تجديد طاقة تشي والدم وكذلك تنظيم أعراض الدورة الشهرية وعدم الراحة المرتبطةبها 14. المكون الرئيسي ل Chai hu هو Chai hu saponin ، الذي له نشاط قوي مضاد للالتهابات ، يتجلى بشكل أساسي في تثبيط التعبير عن السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، مثل عامل نخر الورم α (TNF-α) ، وإنترلوكين 1β ، و IL-615. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يعزز التعبير عن السيتوكين المضاد للالتهابات ، IL-10 ، وبالتالي يخفف الالتهاب ، مثل التهاب القولون والتهاب بطانة الرحم والتهاب الكبد16.

بالمقارنة مع علاجات OP القياسية (بما في ذلك استخدام البايفوسفونات17 ، ومعدلات مستقبلات هرمون الاستروجين الانتقائية18 ، ودينوسوماب19) ، فإن Chai hu ، باعتباره الطب الصيني التقليدي شائع الاستخدام ، لديه ميزة محتملة تتمثل في آلية عمل متعددة المكونات ومتعددة الأهداف. عادة ما تستهدف العلاجات القياسية مسارات أيضية محددة للعظام20 (تثبيط نشاط ناقضات العظم) ، والتي قد تترافق مع بعض الآثار الجانبية مثل الانزعاج المعدي المعوي ، وزيادة خطر الإصابة بنخر العظم في الفكين ، والأعراض الشبيهة بالإنفلونزا ، بالإضافة إلى ارتفاع تكاليف الأدوية على المدى الطويل21.

وجدت مراجعة للأدبيات ذات الصلة أن استخدام Chai hu للتدخل في الفئران PM مع OP يمكن أن يكون له تأثيرات علاجية مخففة22. وهكذا ، بناء على المعلوماتية الحيوية والتحليل الدوائي بالإضافة إلى محاكاة الإرساء الجزيئي للتنبؤ بمواقع الإرساء23 ، افترضنا أن تشاي هو يمكن أن يتدخل في العملية الالتهابية ، ويعدل الحالة المناعية للجسم ، ويعيد التوازن المناعي للعظام. ستساعد هذه على استقرار حالة إعادة بناء العظام وتحقيق التأثير العلاجي المطلوب للتخفيف من OP.

استخدمت هذه الدراسة تشاي هو السائل عن طريق الفم (تركيز: 1 جم / مل) إدارة على مدى 12 أسبوعا متتاليا. تم تصميم نظام الجرعات بناء على جرعات شائعة سريريا في الطب الصيني التقليدي ودراسات الحرائك الدوائية24.

الهدف العام من طريقة الإدارة هذه هو إنشاء بروتوكول جرعات مستقر وذي صلة سريريا ، وبالتالي تقييم تأثير التدخل المستمر ل Chai hu بشكل منهجي في النموذج المستهدف (نموذج الفئران لهشاشة العظام بعد انقطاع الطمث). يضمن نهج الإدارة هذا أن الدواء يحافظ على تركيز فعال في البلازما طوال الفترة التجريبية ، مما يوفر أساسا موثوقا للتدخل للتقييمات اللاحقة (مثل مؤشرات التمثيل الغذائي للعظام ومستويات العوامل الالتهابية). علاوة على ذلك ، فهو يساعد في توضيح دور تشاي هو في الأمراض ذات الصلة بالإضافة إلى علاقته بين الجرعة والتأثير ، مع تقديم نموذج مرجعي للإدارة الموحدة للأدوية الصينية التقليدية في البحث التجريبي.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم إجراء جميع الإجراءات التجريبية التي تشمل وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر (الطبعة الثامنة) وتمت الموافقة عليها على وجه التحديد من قبل لجنة أخلاقيات التابعة لجامعة يوجيانغ الطبية للجنسيات (الموافقة رقم 2024071001).

1. تحليل علم الأدوية الشبكي

ملاحظة: علم الصيدلة الإلكترونية هو نهج يجمع بين بيولوجيا الأنظمة والبيولوجيا الحاسوبية وعلم الأدوية ويهدف إلى فهم آلية عمل الأدوية والتفاعلات الدوائية من خلال تحليل الشبكات الجزيئيةالحيوية 25.

  1. فحص المركبات النشطة ذات التوافر البيولوجي الفموي الجيد (OB) والتشابه مع الدواء (DL) باستخدام أدوات مثل قاعدة بيانات وتحليل الأدوية لأنظمة الطب الصيني التقليدي (TCMSP: http://ibts.hkbu.edu.hk/LSP/tcmsp.php). اضبط OB على ≥30٪ ، و DL على ≥0.1826. ابحث عن Chai hu وانقر فوق Herb Details وقم بتنزيل جميع البيانات المركبة. قم بتسمية الملف الذي تم تنزيله Chaihu.
  2. احصل على الاسم المستهدف للمكون الأساسي عن طريق لصق معرف MOL للمكون الأساسي في قاعدة بيانات TCMSP. الصق في البحث الدفعي TCMSP وحدد التنبؤ المستهدف، ثم انقر فوق إرسال.
  3. افتح قاعدة بيانات UniProtsh ، وانسخ عمود اسم الهدف في البحث ، وابحث عن اسم البروتين الغامق ، وهو بالضبط نفس اسم البروتين المستهدف الملصق. بعد العثور على اسم البروتين المقابل ، اجمع أسماء الجينات المقابلة في العمود الذي يليه.
  4. قم بتصفية الجينات المرتبطة بهشاشة العظام في قاعدة بيانات GeneCards (https://www.genecards.org) وفقا لدرجة الصلة ≥ 1 واحصل على جميع الجينات (5741)27.
    ملاحظة: أسباب اختيار الجينات ذات درجة الصلة ≥ 1 من قاعدة بيانات GeneCards هي كما يلي: تشير الدرجة ≥ 1 إلى أن الجين قد وثق ارتباطات مع المرض المستهدف ، مما يميزها بوضوح عن الجينات التي لم يتم الإبلاغ عنها (النتيجة = 0). تضمن هذه العتبة الاحتفاظ بالجينات ذات الصلة الموثوقة بالمرض مع تجنب التدخل المفرط من الجينات غير ذات الصلة. قد تشمل العتبة الدنيا (<1) جينات بدون ارتباطات تم التحقق من صحتها ، وبالتالي زيادة الإيجابيات الخاطئة.
  5. احصل على الجينات المتقاطعة بعد الجمع بين مجموعات الجينات المرتبطة بالأمراض وأهداف الأدوية للتقاطع. بناء على التفاعلات بين أهداف المرض والمكونات النشطة للأدوية ، قم ببناء شبكة تقاطع للطب الصيني التقليدي النشط بين المكونات والأمراض المستهدفة باستخدام برنامج Cytoscape.
  6. احصل على معلومات التفاعل بين البروتين والبروتين (PPI) من خلال قاعدة بيانات String (https://cn.string-db.org/) وقم بإنشاء شبكة PPI. افتح Cytoscape (https://www.cytoscape.org) ، وقم بتحميل ملف TSV الذي تم تنزيله في شبكة التحميل ، ثم حدد حساب > TOP10 أو TOP20 ، وانقر فوق إرسال.
  7. قم بإنشاء جدولين للاستيراد إلى Cytoscape. قم بإنشاء ملف جدول بيانات إلكتروني باسم الشبكة. في العمود أ ، أدخل نفس معرفات MOL (CH1 ، CH2 ...) التي تم استبدالها باختصار الطب الصيني التقليدي. قم بتسمية العمود B كمعرف MOL وفرزه بترتيب تصاعدي حسب معرفات MOL. قم بتسمية العمود C كرمز. انسخ معرفات المكونات (معرفات MOL) وأسماء الجينات من الملفات المتعلقة ب Chaihu إلى العمودين B و C ، على التوالي. ثم احذف العمود ب وأعد تسمية العمود أ بمعرف MOL.
  8. قم بتوسيع الجدول حتى نهاية النص. في عمود الرمز ، أدخل معرفات MOL (CH1 ، CH2 ...) ، واستبدلت باختصار الطب الصيني التقليدي. في عمود معرف MOL، أدخل اختصار الطب الصيني التقليدي: CH. من خلال الخطوات المذكورة أعلاه ، يتم الانتهاء من تكميل المعلومات وبناء شبكة الطب الصيني التقليدي - المكون - الهدف.
  9. بعد ذلك ، قم بعمل النموذج الثاني ، ملف TYPE. أنشئ جدول بيانات جديدا وأطلق عليه اسم TYPE. قم بتسمية العمود A ك مصطلح والعمود B على أنه TYPE. انسخ اسم الجين إلى عمود المصطلح وأعطه سمة الجين في عمود النوع (الغرض من ذلك هو البحث عن الجين ؛ سيتم تحديد جميع أسماء الجينات ، بحيث يكون من السهل تشغيله). أدخل المكونات في عمود المصطلح وامنح المكون سمة دواء 1.
  10. الاستيراد إلى برنامج Cytoscape. استيراد الشبكة لتحميل ملف الشبكة واستيراد الجدول لتحميل ملف النوع. في مربع البحث ، اكتب gene ، واضغط على Enter ، بحيث يتم تحديد جميع الجينات ، واسحب الجينات المحددة إلى اليسار ، ثم انقر فوق تخطيط > Attribute() > Selected (اختر دائريا أو مربعا بين قوسين).
  11. اجمع بين نتائج تحليل علم الأدوية الشبكي والبيانات التجريبية لتحديد المركبات الرئيسية والآليات الجزيئية لعمل الدواء.

2. الإرساء الجزيئي

ملاحظة: الإرساء الجزيئي هو تقنية حسابية للتنبؤ بوضع الارتباط الأمثل والتقارب بين جزيء صغير (الترابط) والبروتين المستهدف أو الجزيءالحيوي 28.

  1. تحضير المستقبلات والترابط
    1. مصدر المستقبل (البروتين): احصل على ملف PDB للبروتينات المستهدفة من بنك بيانات البروتين RCSB (https://www.rcsb.org). ابحث في 3Q4B (مثال على مستقبلات IL-6)، انقر فوق تنزيل الملفات > تنسيق PDB.
    2. قم بإزالة جزيئات الماء البلورية بالنقر فوق تحرير > حذف > الماء والأيونات الدخيلة والروابط غير الأساسية (الاحتفاظ بالعوامل المساعدة الحرجة مثل أيونات المعادن) بالنقر فوق تحرير > حذف > الذرات غير المتجانسة. أضف ذرات الهيدروجين المفقودة بالنقر فوق تحرير > الهيدروجين > إضافة. حفظ ك بروتين.pdbqt. بالنقر فوق تحرير > الرسوم > حساب Gasteiger ثم الشبكة > Macromolecule > اختر > حفظ ك PDBQT.
    3. مصدر Ligand (جزيء صغير): قم بتنزيل هيكل الترابط من PubChem (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov). ابحث في Saikosaponin A (CID: 6443568) ، انقر فوق 3D Conformer > تنزيل SDF.
    4. استخدم برنامج Open Babel لتحويل ملف Saikosaponin A بتنسيق SDF إلى ملف بتنسيق PDB بمطابقات ثلاثية الأبعاد منخفضة الطاقة ، وقم بتسميه saikosaponinA.
  2. إعداد معلمة الإرساء (أدوات الإرساء التلقائي)
    1. تحميل المستقبلات وملفات الترابط. قم باستيراد ملف الجزيء الصغير saikosaponin A واحفظه كملف PDBQT. بعد ذلك ، قم بتحميل المستقبل والترابط: انقر فوق الإرساء > Macromolecule > Open ، حدد IL6_receptor.pdbqt. ثم انقر فوق Docking > Ligand > Open ، وحدد saikosaponinA.pdbqt.
    2. تكوين مربع الشبكة: انقر فوق Grid > Grid Box ، واضبط حجم المربع ليشمل الموقع النشط بالكامل (استخدم قرص التحكم على اللوحة اليسرى للضبط) ، ثم احفظ الإعدادات الحالية vبالنقر فوق File > Close Saving Current وقم بتسمية الملف grid.gpf.
    3. إعداد برنامج تشغيل AutoGrid: انقر فوق تشغيل AutoGrid، وحدد ملف grid.gpf، ثم انقر فوق تشغيل. بعد ذلك ، قم بتكوين معلمات الإرساء: بالتسلسل ، ضمن قائمة الإرساء ، انقر فوق جزيء كبير وحدد ملف البروتين IL6_receptor.pdbqt ؛ انقر فوق Ligand وحدد ملف الجزيء الصغير saikosaponin A.pdbqt ؛ تعيين الخوارزمية الجينية وتأكيدها ؛ اضبط معلمات الإرساء وقم بتأكيدها. أخيرا ، في الإخراج ، حدد خوارزمية Lamarckian (4،2) ، وقم بتسمية الملف dock.dpf ، واحفظه.
    4. تنفيذ AutoGrid وحفظ النتائج: انقر فوق تشغيل AutoDock ، وحدد ملف dock.dpf ، وقم بتشغيل المحاكاة. عند الانتهاء، انقر فوق كتابة معقد، وقم بتسمية البنية المعقدة، واحفظها بتنسيق PDBQT.
  3. تحليل النتائج باستخدام PyMOL
    1. قم بتحويل ملف تنسيق PDBQT الذي تم الحصول عليه من خطوة الإرساء الجزيئي السابقة إلى تنسيق PDB باستخدام برنامج Open Babel. ثم قم باستيراد ملف تنسيق PDB إلى برنامج PyMOL لعمليات التصور اللاحقة.
    2. حدد موقع الترابط وافصله بشكل فردي: بعد تحديد الترابط ، قم بتغيير لونه بالنقر فوق Sele ثم اختيار اللون من اللون. في عمود Sele ، انقر فوق Extract Object ضمن Action لاستخراج الترابط ككائن مستقل جديد.
    3. قياس مسافة رابطة الهيدروجين: في عمود sele ، انقر فوق إجراء ، وابحث عن جهات الاتصال القطبية ، وانقر فوق إلى ذرات أخرى في كائن. سيتم عرض الروابط الهيدروجينية كخطوط صفراء. انقر فوق خيار القياس في عمود المعالج ، وانقر فوق الذرات في طرفي الرابطة الهيدروجينية بالتسلسل، ثم انقر فوق تم لإكمال القياس.
  4. تصدير الصورة: انقر على تصدير الصورة بتنسيق PNG في ملف. إذا كانت هناك حاجة إلى عرض عالي الدقة، فأدخل ray 300 (وحدات البكسل قابلة للتعديل) واضغط على Enter.

3. تحليل التصوير المقطعي المحوسب الصغير

  1. حقن إناث الفئران SD (32 أسبوعا ، 320-350 جم) داخل الصفاق مع البنتوباربيتال الصوديوم (40 مجم / كجم) للتخدير العميق ، مؤكدا من خلال عدم وجود منعكس القرنية (لا وميض عند لمسة مسحة القطن) وانعكاس الألم (لا تقلص الطرف الخلفي لقرصة الملقط).
    1. إجراء جراحة عزل الأطراف الخلفية. القتل الرحيم للفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق من الصوديوم البنتوباربيتال بجرعة 3-5 أضعاف جرعة التخدير الجراحي (40 مجم / كجم) ، وضعها في وضع ضعيف ، وقم بعمل شق عرضي بطول 3 سم ، 1 سم فوق ارتفاق العانة على طول الرباط الإربي. قم بتشريح الفجوة بين عضلات الجراسيليس والسارتوريوس بصراحة لفضح الشريان الفخذي (الهيكل الأنبوبي النابض). اربط طرفي الشريان الفخذي باستخدام 4-0 خيوط ، مع ترك قسم غير مقيد بينهما ، قبل اقتطاع الوعاء بمقص العيون وقم بتقطيعه.
    2. قم بتدوير الطرف السفلي داخليا لخلع رأس الفخذ من الحق وقطع كبسولة المفصل والرباط المستدير ، مع الحفاظ على سلامة رأس الفخذ. اغمر الطرف الخلفي السليم في محلول ملحي مبرد مسبقا ، ثم ثبته في محلول فورمالديهايد بنسبة 4٪ لمدة 24-48 ساعة.
  2. إعداد التصوير: قم بتوصيل عظم الفخذ الثابت إلى المنشأة لإجراء الفحص بالتصوير المقطع المجهري. قم بتشغيل جهاز Micro-CT وحدد برنامج الإعداد المسبق لمسح عظام الصغيرة . استخدم معلمات الفحص التالية: جهد الأشعة السينية = 90 كيلو فولت، تيار الأشعة السينية = 80 ميكرو أمبير، مجال الرؤية (مجال الرؤية) = 36 مم، حجم البكسل = 72.0 ميكرومتر، الدوران = 360 درجة، مدة المسح = 14 دقيقة.
  3. ضع عظم الفخذ الأيسر للفئران الثابتة في حامل العينة ، وقم بإصلاح المشاشية الفخذية المراد تصويرها ، وابدأ تشغيل الجهاز ، وانتظر حتى يكتمل الاختبار الذاتي للجهاز. ابدأ فحص معاينة (مسح سريع منخفض الدقة) للتأكد من أن العينة في المنتصف، ثم اضبط منطقة الاهتمام لتغطية عظم الفخذ بالكامل.
  4. عند اكتمال المسح الضوئي والتصوير الفوتوغرافي، سيتم إيقاف تشغيل مصدر ضوء الأشعة السينية تلقائيا. في هذا الوقت ، تتجاوز قيمة الإشعاع داخل الماكينة المعيار ، ويمنع منعا باتا إخراج العينة بدون معدات الحماية.
  5. تحليل الصور: تحليل معلمات العظام (كثافة المعادن في العظام [BMD] ، الرقم التربقي) باستخدام البرنامج المدمج في الماسح الضوئي. حفظ الصور المعاد بناؤها وتصديرها لمزيد من التقييم.

4. تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي لاستخراج الحمض النووي الريبي من أنسجة عظام الفئران

  1. إزالة العضلات الملتصقة واللفافة من عظم الفخذ الأيمن. قطع 100-200 ملغ من أنسجة العظام إلى قطع صغيرة. أضف 2-3 حبات طحن و 500 ميكرولتر من المخزن المؤقت لاستخراج الحمض النووي الريبي. تجانس باستخدام مطحنة مناديل عند 70 هرتز لمدة 5 دقائق عند 4 درجات مئوية.
  2. فصل الطور: بعد الطرد المركزي ، ينفصل المحلول إلى مرحلة مائية علوية (تحتوي على الحمض النووي الريبي) وراسب داكن سفلي (يحتوي على البروتينات والحمض النووي والسكريات). انقل 500 ميكرولتر من المادة الطافية بعناية إلى أنبوب جديد خال من RNase سعة 1.5 مل.
  3. قم بمعالجة المحلول العلوي الذي تم الحصول عليه من العزل لاستخراج الحمض النووي الريبي الكلي وفقا لتعليمات الشركة المصنعة.
  4. بعد إضافة الأيزوبروبانول إلى محلول التحلل ، اقلب الأنبوب برفق لخلط المحلول واتركه في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. إجراء فحص بصري في هذه المرحلة ؛ إذا لوحظت رواسب الحمض النووي الريبي الأبيض الندفي (تلتصق بجدار الأنبوب) ، فهذا يشير إلى أن الحمض النووي الريبي قد تم ترسيبه بشكل فعال.
  5. استخدم طرف ماصة سعة 200 ميكرولتر لشفط السائل المتبقي. احتفظ بحبيبات الحمض النووي الريبي البيضاء في قاع / جدار الأنبوب. أعد تعليق الحمض النووي الريبي في 50-100 ميكرولتر من الماء الخالي من RNase وتخزينه في -80 درجة مئوية.
  6. امزج 2 ميكرولتر من قالب الحمض النووي الريبي ، و 10 ميكرولتر من المزيج الرئيسي ، و 2 ميكرولتر من DNase ، و 5 ميكرولتر من الماء الخالي من النوكلياز في أنبوب خال من النوكلياز. تخلط بلطف عن طريق سحب العينات.
  7. احتضن عند 37 درجة مئوية لمدة دقيقتين لإزالة تلوث الحمض النووي الجيني. احتضان عند 55 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. في نهاية التفاعل ، احتضن عند 85 درجة مئوية لمدة 5 دقائق لإجهاض التفاعل.
  8. قم بتكوين نظام PCR الكمي الفلوري في الوقت الفعلي عن طريق وضع الحمض النووي المنسوخ عكسيا على الجليد. امزج جميع المكونات مسبقا: 10 ميكرولتر من qPCR SYBR Green Master Mix (بدون Rox) ، و 0.4 ميكرولتر لكل من Forward Primer و Reverse Primer ، و 8.2 ميكرولتر من الماء الخالي من RNase ، وقم بتقسيم وإضافة 1 ميكرولتر من الحمض النووي ، ومعالجة الثلج ، والحماية من الضوء.
  9. قم بتشغيل برنامج qPCR على النحو التالي: التمسخ المسبق عند 95 درجة مئوية لمدة 5 دقائق ، دورة واحدة متبوعة بالتمسخ عند 95 درجة مئوية لمدة 10 ثوان لمدة 40 دورة. قم بإجراء التلدين والتمدد والاستحواذ الفلوري عند 60 درجة مئوية لمدة 30 ثانية لمدة 40 دورة في قناة SYBR Green. احصل على منحنى انصهار لدرجة الحرارة من 65-95 درجة مئوية بزيادة قدرها 0.5 درجة مئوية / خطوة و 5 ثوان / خطوة. يتم توفير الاشعال المستخدمة في الجدول 1.

5. تحضير

  1. الحصول على 48 أنثى فئران SD nulliparous (درجة SPF ، تتراوح أعمارهم بين 8 أسابيع ، وزن الجسم 200-220 جم).
  2. قبل الإجراءات التجريبية ، تأقلم جميع الفئران مع فترة حجر صحي مدتها 7 أيام في منشأة عزل من الدرجة SPF والإقامة في بيئة معملية يتم التحكم فيها بواسطة عامل حماية من الشمس (درجة الحرارة: 22-24 درجة مئوية ، الرطوبة: 45٪ -55٪).

6. تحضير اختبار الدواء

  1. الحصول على سائل Chai hu عن طريق الفم (موافقة المنتج الطبي الوطني الصيني رقم Z41021539). تحتوي التركيبة على تشاي هو (المصدر الشمالي) كعنصر نشط ، مع سواغات بما في ذلك عامل النكهة والسكروز والبروبيلين جلايكول. تحتوي كل قارورة سعة 10 مل على مستخلص يعادل 10 جم من الأعشاب الخام.

7. تحضير نموذج الفئران المبيض

  1. التحضير قبل الجراحة: سريع الفئران لمدة 12 ساعة مع الوصول إلى الماء حسب الحرة. إجراء تعقيم الأدوات عن طريق تعقيم جميع الأدوات الجراحية.
  2. التخدير والتحضير: يتم تطبيق البنتوباربيتال الصوديوم عن طريق الحقن داخل الصفاق (40 ملغ/كغ). تحقق من عمق التخدير من خلال تقييم غياب منعكس القرنية (لا وميض عند لمسة القرنية بقطعة قطن) وغياب منعكس قرصة إصبع القدم (لا تراجع في الطرف الخلفي عند التثبيت). بعد 15-20 دقيقة ، احلق موقع الجراحة ، وقم بتطهيره باليود ، وقم بتغطيته بستارة محشوفة. ضع مرهم العين بفيتامين أ (الذي يحتوي على 15,000 وحدة دولية / جم) أثناء العملية لمنع عيون من الجفاف (الجدول 2).
  3. نموذج الفئران المبيض: قم بإجراء الجراحة في غرفة عمليات معقمة مخصصة. ارتدى جميع الأفراد عباءات عزل كاملة. امسح سطح العمل والمعدات المحيطة به بنسبة 75٪ من الإيثانول (الجدول 2) قبل الجراحة ، وقم بتشغيل مصابيح الأشعة فوق البنفسجية لمدة 30 دقيقة على الأقل للقضاء على الميكروبات في الهواء وعلى الأسطح.
    1. قم بعمل شق بطول 1 سم على الجلد الظهري ، وقم بتشريح الأنسجة تحت الجلد بصراحة ، واضغط على طبقة العضلات ، وقم بعمل شق 1 سم. حدد موقع وسادة الدهون وقم بإخراجها من الخارج لتحديد المبيض (أحمر فاتح اللون). اربط قناة فالوب بخياطة 4-0 ، واستئصال أنسجة المبيض ، وضعها في أنبوب طرد مركزي سعة 50 مل يحتوي على 4٪ بارافورمالدهيد (الجدول 2).
  4. إغلاق الجرح وتطهيره: رش مسحوق البنسلين على الجرح قبل الخياطة. خياطة طبقة العضلات بخياطة رقم 6 غير قابلة للامتصاص وأغلق الجلد بخياطة رقم 2. تطهير الشق المغلق باليود وتطبيق مسحوق البنسلين الموضعي.
  5. رعاية ما بعد الجراحة: ضع الفئران في أقفاص جديدة مع زجاجات مياه دافئة ومناشف للحفاظ على درجة حرارة الجسم. السريعة (المسموح بالمياه) لمدة 24 ساعة بعد الجراحة لمنع انسداد الأمعاء. ضع مسحوق البنسلين على موقع الشق يوميا لمدة 3 أيام متتالية.
    1. حقن الليدوكائين (تركيز 1٪ -2٪ ، بحد أقصى 5 مجم / كغ) حول الشق الجراحي لتقليل الألم الفوري بعد الجراحة. توفير تسكين مستمر لمدة 3-5 أيام ، مع تقليل الجرعة تدريجيا بناء على شدة الألم لتجنب التوقف المفاجئ.
    2. احتفظ بالحيوان في وضع جانبي أو رأسه لأسفل قبل الاستيقاظ لمنع سقوط اللسان وانسداد مجرى الهواء. السماح بوضع مريح مستقل بعد الاستيقاظ. اعزل ما بعد الجراحة عن الآخرين حتى الشفاء التام لتجنب القتال أو انتقال العدوى (الشكل 1).

8. التجميع التجريبي وإدارة الأدوية

  1. تخصيص المجموعة: قسم ما مجموعه 40 فأر SD إلى خمس مجموعات (ن = 8 لكل مجموعة) ، وهي المراقبة الطبيعية ، والتحكم النموذجي ، والتركيز المنخفض تشاي هو ، والتركيز المتوسط تشاي هو ، والتركيز العالي تشاي هو.
  2. بالنسبة لمجموعة الجرعة المتوسطة (5 مل / كجم) ، حدد الجرعة بناء على الإرشادات الموجودة في29،30. اتبع نسبة تدرج التركيز 1: 2: 4 لمجموعة التركيز المنخفض: 2.5 مل / كجم ، مجموعة التركيز المتوسط: 5 مل / كجم ومجموعة التركيز العالي: 10 مل / كغ.
  3. إعطاء الدواء: استخدم التزقيم عن طريق الفم وإعطاء الدواء مرة واحدة يوميا. بالنسبة للمجموعة الضابطة العادية والمجموعة الضابطة النموذجية (الخاضعة لاستئصال المبيض الثنائي) ، قم بإجراء التزقيم الفموي بكمية متساوية من المحلول الملحي. ابدأ العلاج في الأسبوع 1 بعد الجراحة واستمر لمدة 12 أسبوعا.

9. تحليل ما بعد التجربة وجمع البيانات

  1. قم بإجراء التحليلات التالية على خمس مجموعات حيوانية: التصوير المتوافق مع التصوير المقطعي المحوسب لبنية العظام وتحديد تعبير السيتوكين المرسال الالتهابي في أنسجة الفخذ في الفئران.
  2. جمع البيانات التي تشمل صورا مرئية للبنية المجهرية للتربيق الفخذي. معلمات العظام الكمية (بما في ذلك كثافة المعادن في العظام ، وجزء حجم العظام ، والانحراف المعياري للسمك التربيقي ، والتباعد التربقي ، والعدد التربقي ، وكثافة الاتصال) ؛ ومستويات التعبير النسبية عن mRNA للسيتوكينات المؤيدة للالتهابات (IL-6 ، IL-17) والسيتوكينات المضادة للالتهابات (IL-4 ، IL-10) في أنسجة الفخذ.
  3. قم بإجراء تحليلات البيانات باستخدام برنامج GraphPad Prism 10.1.2 عن طريق تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA). تم تعريف الدلالة الإحصائية للفروق بين المجموعات في المتوسط على أنها p < 0.05. تم إجراء مقارنات متعددة لاحقة باستخدام اختبار Tukey.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وظيفة GO وتحليل تخصيب مسار KEGG

اعتمدنا على تحليل التخصيب GO و KEGG في المعلوماتية الحيوية للتنبؤ بالآلية المحتملة للعمل ل Chai Hu على PMOP. أسفر تحليل تخصيب GO للجينات المستهدفة المتقاطعة مع المكونات النشطة ل Chai hu للأمراض عن 2138 إدخالا مهما ، وتم سرد النتائج العشر الأولى المهمة لكل مجموعة (الشكل 2 د). فيما يتعلق بالعمليات البيولوجية (الشكل 2 أ) ،...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

PMOP هو اضطراب جهازي في التمثيل الغذائي للعظام يحدث غالبا عند النساء بعد الولادة ، وينتج عن نقص هرمون الاستروجين الذي يؤدي إلى اضطراب توازن بانيات العظم وناقضات العظم ، مما يؤدي إلى تعزيز ارتشاف العظام وانخفاض إنتاج عظامبانيات العظم 31. أظهر عدد متزايد من الدراسات أن مستويات العوامل الالتهابية في الجسم تؤثر أيضا على التمايز بين ناقضات العظم وبانيات العظم ، وأن الإفراط في التعبير عن العوامل المؤيدة للالتهابات يساهم في تمايز ناقضات العظم32. و...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل من قبل برنامج البحث العلمي وتطوير التكنولوجيا في مدينة بايز ، ومشروع تعزيز القدرة الأساسية للبحث العلمي للمعلمين الشباب ومتوسطي العمر بجامعة قوانغشي لعام 2025 (رقم المشروع: 2025KY0549). يشكر المؤلفون الدكتور ديف سورانا من إمبريال كوليدج لندن و YMUN على تحرير المخطوطات. ساهمت ZY و LYR بالتساوي في هذا العمل.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
0.9٪ حقن كلوريد الصوديوم   ؛هوارين المستحضرات الصيدلانيةهاتف H1712059
1&مرات ؛ برنامج تلفزيوني  ترموفيشر10010023
75٪ كحول   ؛نانجينجركاشفC069156931
95٪ إيثانول   ؛نانجينجركاشفC0691520075
الإيثانول اللامائيماكلينE809056
Bupleurum chinense شركة صيدلية خنان بايكوانZ41021539
حل إزالة الكلسية  سولاربيوإ1171
مرهم الإريثروميسين   ؛شركة قوانغتشو بايونشان للمستحضرات الصيدلانية المحدودة مصنع بايونشان هيجيغونغ للأدويةH44023088
كحول الأيزوبروبيل   ؛شركة جينان جينريخه للكيماويات23727-29-9
البنسلين V كبسولات البوتاسيومسيتشوان للأدويةH20103156
بولي فورمالديهايد (CH2O) nبيوتايمص 0099
مطهر بوفيدون اليود   ؛شركة قوانغدونغ هنغجيان للأدويةH44023924
طقم PCR في الوقت الحقيقيYeasen التكنولوجيا الحيوية11201ES03
طقم استخراج الحمض النووي الريبيMonadbiotechMI20201S
طقم النسخ العكسي للحمض النووي الريبييوغونغ بيوتكEG15123S
بنتوباربيتال الصوديوم شنغهاي Jixiang للتكنولوجيا الحيويةJX082085
Trizol ترموفيشر15596026 سي ان

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. An, H., et al. Hyperoside alleviates postmenopausal osteoporosis via regulating mir-19a-5p/il-17a axis. Am J Reprod Immunol. 90 (1), e13709(2023).
  2. Wang, S., et al. Alginate oligosaccharide alleviates senile osteoporosis via the RANKL-RANK pathway in d-galactose-induced c57bl/6j mice. Chem Biol Drug Des. 99 (1), 46-55 (2021).
  3. Jiang, N., Qi, B., Li, G., Yao, L., Fan, X. Morin improves the bone histomorphology and biochemical markers in an animal model of ovariectomy-induced osteoporosis by suppressing autophagy and apoptosis. Food Sci Nutri. 12 (12), 10099-10109 (2024).
  4. Ramchand, S. K., Leder, B. Z. Sequential therapy for the long-term treatment of postmenopausal osteoporosis. J Clin Endocrinol Metab. 109 (2), 303-311 (2024).
  5. Juluri, R., et al. Association of postmenopausal osteoporosis and periodontal disease: A double-blind case-control study. J Int Oral Health. 7 (9), 119-123 (2015).
  6. Zhang, C., et al. Oxidative stress: A common pathological state in a high-risk population for osteoporosis. Biomed Pharmacother. 163, 114834(2023).
  7. Mansoori, M. N., et al. IL-18bp is decreased in osteoporotic women: Prevents inflammasome-mediated IL-18 activation and reduces Th17 differentiation. Sci Rep. 6, 33680(2016).
  8. Shanshan, J., Baorong, H., Tianyuan, C., Xiaoqiang, H. Research progress of Chinese medicine in treating postmenopausal women with osteoporosis. Front Med Sci Res. 5 (10), 92-98 (2023).
  9. Faiella, E., et al. Percutaneous vertebroplasty: A minimally invasive procedure for the management of vertebral compression fractures. Osteology. 2 (4), 139-151 (2022).
  10. Yue, L. C., et al. Correction: Saikosaponin d exerts an antidepressant effect by regulating Homer1-mGluR5 and mTOR signaling in a rat model of chronic unpredictable mild stress. Chinese Med. 18 (1), 147-147 (2023).
  11. Yue, T., Ge, Z., Ruonan, S., Hanqing, W., Nan, Z. Saikosaponin a activates tet1/dll3/notch1 signalling and promotes hippocampal neurogenesis to improve depression-like behavior in mice. J ethnopharmacol. 319 (P3), 117289-117289 (2023).
  12. Xuedong, A. N., et al. Shugan jieyu capsule improve sleep and emotional disorder in coronavirus disease 2019 convalescence patients: A randomized, double-blind, placebo-controlled trial. J Tradit Chin Med. 42 (5), 803-809 (2022).
  13. Ying, H. S. H. Experience of professor huang ying in treating postmenopausal syndrome by chaihu guizhi decoction. J Trad Chinese Med. 38 (23), 4557-4560 (2023).
  14. Yang, Y. X., et al. Studies on the anti-inflammatory effect of xiaoyao pills in the treatment of postmenopausal osteoporosis in mice. J Vis Exp. (210), e67051(2024).
  15. Wu, S. J., Tam, K. W., Tsai, W. H., Chang, C. C., Chao, J. C. Curcumin and saikosaponin a inhibit chemical-induced liver inflammation and fibrosis in rats. Am J Chin Med. 38 (1), 99-111 (2010).
  16. Zhou, Q. R., Chen, M. Y., Wang, M. D. Treatment of chronic endometritis by penning granule: A clinical randomized controlled trial. Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 36 (9), 1055-1060 (2016).
  17. Weibing, J., Yankun, D., Jinxin, Z., Suqin, D. Clinical efficacy and safety evaluation of calcitriol combined with bisphosphonates in the therapy of postmenopausal osteoporosis: Based on a retrospective cohort study. BioMed Res Int. 2022, 2711938-2711938 (2022).
  18. Hussain, I., Talaulikar, V. S. A systematic review of randomised clinical trials - the safety of vaginal hormones and selective estrogen receptor modulators for the treatment of genitourinary menopausal symptoms in breast cancer survivors. Post Reprod Health. 29 (4), 222-231 (2023).
  19. Anastasilakis, A. D., et al. Follistatins, activins and inhibins during osteoporosis therapy with denosumab or zoledronate and after their discontinuation. Diabetes Obesity Metab. 27 (4), 2288-2293 (2025).
  20. Si, Y., et al. Curcumin-encapsulated exosomes in bisphosphonate-modified hydrogel microspheres promote bone repair through macrophage polarization and DNA damage mitigation. Materials Today Bio. 32, 101874-101874 (2025).
  21. Shouguo, L. Clinical observation of qiangjin zhuangji decoction combined with denosumab in the treatment of postmenopausal osteoporosis. , (2024).
  22. Yeom, M., Kim, E. Y., Kim, J. H., Jung, H. S., Sohn, Y. High doses of bupleurum falcatum partially prevents estrogen deficiency-induced bone loss with anti-osteoclastogenic activity due to enhanced inos/no signaling. Front Pharmacol. 9, 1314(2018).
  23. Lu, L., Yinliang, X., Liu, Y., Zhenzhong, J., Xiaoyan, L. Analysis of the mechanism of action of euphorbia fischeriana steud on cirrhosis based on network pharmacology. Medicine. 102 (37), e35118(2023).
  24. Nan, L. S. HPLC-UV for the determination of plasma concentration of saikosaponin C in rats' serum. Info Trad Chin Med. 32 (02), 66-68 (2015).
  25. Sakle, N. S., More, S. A., Mokale, S. N. A network pharmacology-based approach to explore potential targets of caesalpinia pulcherima: An updated prototype in drug discovery. Sci Rep. 10 (1), 17217(2020).
  26. Ru, J., et al. Tcmsp: A database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines. J Cheminformatics. 6, 13(2014).
  27. Bowen, Y., Qiuwen, Z., Xiaodong, W., Jingxin, M., Shuqing, Z. Using network pharmacology and molecular docking verification to explore the mechanism of ursolic acid in the treatment of osteoporosis. Medicine. 101 (49), e32222(2022).
  28. Belghalia, E., et al. In silico research on new sulfonamide derivatives as brd4 inhibitors targeting acute myeloid leukemia using various computational techniques, including 3D-QSAR, HQSAR, molecular docking, ADME/Tox, and molecular dynamics. J Biomol Struct Dyn. 42 (17), 9201-9219 (2023).
  29. Chinese pharmacopoeia Commission. The Pharmacopeia of the People's Republic of China 2020 Edition: Volume I. , CHINA MEDICAL SCIENCE PRESS. (2020).
  30. Chinese pharmacopoeia Commission. The pharmacopoeia of the People's Republic of China 2020 edition: volume IV. , CHINA MEDICAL SCIENCE PRESS. (2020).
  31. Xu, S., et al. Material Basis and Mechanism of Erzhi Pill for Preventing Osteoporosis Based on Network Pharmacology. Chin Pharma J. 53 (22), 1913-1920 (2018).
  32. Lee, D. K., et al. Phospholipase c β4 promotes rankl-dependent osteoclastogenesis by interacting with mkk3 and p38 mapk. Exp Mol Med. 57 (2), 323-334 (2025).
  33. Huang, Q., et al. The effects of Ti and Ta particle surface chemistry on inflammation, osteogenesis, and osteoclastogenesis in vitro and in vivo. Colloid Interf Sci Commun. 54, 100716(2023).
  34. Zhao, M., et al. Comprehensive comparison on the anti-inflammation and gc-ms-based metabolomics discrimination between bupleuri chinense dc. And b. Scorzonerifolium willd. Front Pharmacol. 13, 1005011(2022).
  35. Bin, L., et al. Analysis of mutual-detoxication compatibility rules of "bupleuri radix decreaseing liver's yin essence" based on data mining. Chin Trad Herbal Drugs. 53 (14), 4428-4436 (2022).
  36. Ying, W., Xuefeng, Z., Minjing, L., Tingting, Z., Ping, L. Xiaochaihu decoction in diabetic kidney disease: A study based on network pharmacology and molecular docking technology. Integrat Med Nephrol Androl. 8 (1), 13-13 (2021).
  37. Sheng, Z., Hongcheng, L., Min, X. Identifying immune cell infiltration and effective diagnostic biomarkers in rheumatoid arthritis by bioinformatics analysis. Front Immunol. 12, 726747(2021).
  38. Menon, S. M. P., Elengoe, A. Evaluation of the role of kras gene in colon cancer pathway using string and cytoscape software. Biomed Res Ther. 7 (6), 3835-3842 (2020).
  39. Yang, J., et al. Bioinformatics identification based on causal association inference using multi-omics reveals the underlying mechanism of gui-zhi-shao-yao-zhi-mu decoction in modulating rheumatoid arthritis. Phytomed Int J Phytother Phytopharmacol. 136, 156332(2024).
  40. Yang, M., et al. Purification of harvested rainwater using gravity-driven ceramic membrane: A visualization study combining micro-CT and Comsol simulations. J Environ Manag. 373, 123333(2024).
  41. Jui-Ting, H., et al. A comparison of micro-CT and dental CT in assessing cortical bone morphology and trabecular bone microarchitecture. PloS one. 9 (9), e107545(2014).
  42. Yang, S. S., et al. Grem1 inhibits osteogenic differentiation of mbmscs in ovx rats through bmp/smad1/5 signaling pathway. Regenerat Ther. 28, 527-535 (2025).
  43. Huang, W., Zheng, X., Yang, X., Fan, S. Stimulation of osteogenic differentiation by saikosaponin-a in bone marrow stromal cells via wnt/β-catenin pathway. Calcified Tiss Int. 100 (4), 392-401 (2017).
  44. Hattori, T., et al. The fixed herbal drug composition "saikokaryukotsuboreito" prevents bone loss with an association of serum IL-6 reductions in the ovariectomized mouse model. Phytomedicine. 17 (3-4), 170-177 (2010).
  45. Wu, X., et al. Inhibition of lipopolysaccharide-induced inflammatory bone loss by saikosaponin d is associated with regulation of the rankl/rank pathway. Drug Des Dev Ther. 15, 4741-4757 (2021).
  46. Yu-Ting, H., et al. Effects of saikosaponin d on differentially expressed genes, Ctla-4, IL-10, and IL-17 in mice with autoimmune hepatitis. J Shanghai Jiaotong Uni. 40 (03), 303-309 (2020).
  47. Allergy, Z. C. F., et al. Sebocytes contribute to skin inflammation by promoting the differentiation of t helper 17 cells. Br J Dermatol. 178 (3), 722-730 (2018).
  48. Piao, C. H., Song, C. H., Lee, E. J., Chai, O. H. Saikosaponin a ameliorates nasal inflammation by suppressing il-6/ror-γt/STAT3/IL-17/nf-κb pathway in ova-induced allergic rhinitis. Chem Biol Interact. 315, 108874(2020).
  49. Zhimeng, L., et al. Il-17/il-17 receptor pathway-mediated inflammatory response in apostichopus japonicus supports the conserved functions of cytokines in invertebrates. J Immunol. 208 (2), 464-479 (2022).
  50. Wang, X., et al. Forsythiaside a repairs uvb-induced skin inflammatory damage by il-17 signaling pathway. Food Biosci. 64, 105845-105845 (2025).
  51. Ridvan, G., Emine, Y. Evaluation of the awareness and knowledge levels of dentists regarding bisphosphonates and bisphosphonate-related jaw necrosis. J Craniofac Surg. 36 (4), e376-e382 (2025).
  52. Lijuan, W., et al. An ultra-performance liquid chromatography photodiode array detection tandem mass spectrometric method for simultaneous determination of seven major bioactive constituents in Xiaochaihutang and its application to a fourteen-compound compatibility study. J Chromatograph Sci. 53 (9), 1570-1576 (2015).
  53. Wang, D. L., Fang, F. F., Liu, C. S., Su, J. C. expert consensus on integrated traditional chinese and western medicine diagnosis and treatment for osteoporotic fractures. Zhongguo gu shang China. J Orthopaed Traumatol. 37 (3), 242-250 (2024).
  54. Shimeng, L., et al. Antidepressant active components of bupleurum chinense dc-paeonia lactiflora pall herb pair: Pharmacological mechanisms. BioMed Res Int. 2022, 1024693-1024693 (2022).
  55. Ran, S., et al. Bupleurum in treatment of depression disorder: A comprehensive review. Pharmaceuticals (Basel). 17 (4), 512(2024).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Postmenopausal OsteoporosisOvariectomized RatsBone MicrostructureChai Hu TreatmentBone Loss InhibitionInflammatory CytokinesAnti Inflammatory PathwaysEstrogen DeficiencyBone DestructionDose Response

Related Articles