توضح هذه الدراسة بالتفصيل طريقة تثبيت الفئران المناسبة لتصوير الوخز بالإبر والتصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء. علاوة على ذلك ، فإنه يوضح أن الوخز بالإبر الكهربائية في نقاط الوخز بالوخز بالوخز بالوخز بالحساسية يثبط الألم الالتهابي الموضعي.
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
توضح هذه الدراسة بالتفصيل طريقة تثبيت الفئران المناسبة لتصوير الوخز بالإبر والتصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء. علاوة على ذلك ، فإنه يوضح أن الوخز بالإبر الكهربائية في نقاط الوخز بالوخز بالوخز بالوخز بالحساسية يثبط الألم الالتهابي الموضعي.
لا يزال هشاشة العظام في الركبة (KOA) ، وهو سبب رئيسي لآلام العضلات والعظام والإعاقة الوظيفية في جميع أنحاء العالم ، يمثل تحديا في إدارته بسبب الفعالية المحدودة للتدخلات الدوائية والجراحية الحالية في تحقيق تخفيف الآلام بشكل مستدام. على الرغم من أن الوخز بالإبر قد أظهر وعدا سريريا في تخفيف الألم المرتبط ب KOA ، إلا أن آلياته الأساسية تتطلب مزيدا من التوضيح. يمكن أن يؤدي تطبيق الوخز بالإبر على نقاط الوخز بالوخز بالوخز بالحساسية إلى تعزيز فعالية العلاج بشكل ملحوظ. ينشئ هذا البروتوكول نموذجا للفئران ل KOA من خلال الحقن داخل المفصل لأحادي يودوأسيتات الصوديوم (MIA) ويصف بشكل منهجي بروتوكول الوخز بالإبر الذي يستهدف نقاط الوخز بالوخز بالوخز بالحساسية ، بما في ذلك طرق ضبط النفس ، وتوطين نقطة الوخز بالإبر ، ومعلمات الوخز بالإبر. تم تقييم الفعالية العلاجية بشكل شامل من خلال التقييمات السلوكية للألم ، والتحليل الحراري بالأشعة تحت الحمراء لمفصل الركبة ، والكشف عن السيتوكين الالتهابي في المصل ، والفحص النسيجي المرضي لأنسجة الغضروف. تشير النتائج إلى أن الوخز بالإبر في نقاط الوخز بالوخز بالوخز بالحساسية يخفف بشكل كبير من الأنماط الظاهرية للألم في الفئران النموذجية التي يسببها MIA عن طريق تثبيط إطلاق الوسطاء المؤيدين للالتهابات ، ومنع انتقال إشارات الألم ، وتحسين دوران الأوعية الدقيقة في الدم ، وتنظيم درجة حرارة المفصل المحلي ، وتأخير تنكس المفاصل.
يتميز هشاشة العظام في الركبة (KOA) ، وهو اضطراب تنكسي سائد في المفاصل ، بالتهاب مزمن وأمراض المفصل بالكامل ، بما في ذلك تآكل الغضروف ، وإعادة تشكيل العظام تحت الغضروف ، وتطور النباتات العظمية ، والالتهاب الزليلي1،2. سريريا ، يعاني المرضى عادة من الألم وضعف العضلات وعدم استقرار المفاصل وتصلب الصباح العابر والقيود الوظيفية التدريجية. يفرض KOA عبئا عالميا كبيرا على المرض ، يؤثر على ما يقرب من 365 مليون فرد من ذوي الإعاقة الوظيفية ، حيث تتنبأ النماذج الوبائية بزيادة بنسبة 74.9٪ في أعداد الحالات من خطوط الأساس لعام 2020 بحلول منتصف القرن 2050. والجدير بالذكر أنه في حين أن الألم يعمل كحافز أساسي للعلاج4 ، إلا أنه يؤدي في نفس الوقت إلى تفاقم الإعاقة الوظيفية ، مما يعرض مجالات جودة الحياة المتعددة للخطر من خلال ضعف الحركة وانخفاض قدرة النشاط اليومي. وبالتالي ، تهدف الاستراتيجيات العلاجية إلى تخفيف الألم واستعادة الوظيفة وتأخير تطورالمرض 5. يشمل العلاج الدوائي الحالي من الخط الأول المسكنات والأدوية غير الستيرويدية المضادة للالتهابات والكوندرويتين وكبريتات الجلوكوزامين والكورتيكوستيرويدات داخل المفصل لتقليل الألموالالتهابات 6. ومع ذلك ، فإن الاستخدام المطول لهذه العوامل مقيد بمخاطر علاجية المنشأ الكبيرة ، وخاصة مضاعفات الجهاز الهضمي والأحداث الضائرة للقلب والأوعيةالدموية 7 ، مما يؤكد الحاجة الماسة لبدائل علاجية أكثر أمانا واستدامة.
تم استخدام الوخز بالإبر والوخز بالإبر الكهربائية على نطاق واسع في إدارة هشاشة العظام ، مما يدل على فعاليتها في تخفيف آلام الركبة وتحسين وظائفالمفاصل 8،9 ، مع اعتراف منظمة الصحة العالمية (WHO) بالتهاب المفاصل كشرط ذو أولوية لعلاج الوخز بالإبر. باعتبارها أهدافا تحفيزية ومؤثرات ، تظل نقاط الوخز بالإبر مركزية في أبحاث الوخز بالإبر ، حيث تخضع مظهرها المورفولوجي وأبعادها المكانية واستجابتها الوظيفية لتغييرات ديناميكية أثناء حالات المرض ، وهي ظاهرة تسمى "حساسية نقاط الوخز بالإبر"10،11. بشكل حاسم ، تعدل عملية الحساسية هذه منطقة المجال الاستقبالي والاستجابة العلاجية لنقاط الوخز ، وبالتالي تحديد فعالية العلاج. أظهرت الدراسات قبل السريرية السابقة12،13التحسس في Yanglingquan (GB34 ، الموجود في الاكتئاب الأمامي والسفلي لرأس الشظية ، بالقرب من الجانب الجانبي من الطرف الخلفي) و Zusanli (ST36 ، الموجود على الجانب الأمامي من الساق ، يتم انخفاض الحدود الجانبية للرباط الرضفي إلى نقطة المنتصف الأمامية ، 3/16 من مفصل الكاحل) في نماذج حيوانية KOA. كشف التصوير بالبقع بالليزر عن ارتفاع نضح الدم الموضعي في نقاط الوخز هذه ، في حين أن التصوير الضوئي الصوتي لم يظهر أي تغييرات هيكلية كبيرة في دوران الأوعية الدقيقة ، مما يشير إلى أن تغيرات الدورة الدموية الدقيقة أثناء تحسس نقطة الوخز في KOA وظيفية في المقام الأول وليست هيكلية. تتطلب التحقيقات في الآليات الأساسية استخدام نماذج الفئران. ومع ذلك ، فإن الامتثال الإجرائي الضعيف في يؤدي إلى استثمار كبير في الوقت. لمعالجة هذه القيود ، تم تطوير جهاز تثبيت الفئران ، مصمم خصيصا لتسهيل الوصول إلى نقاط الوخز بالإبر في الأطراف السفلية وتعزيز كفاءة إجراءات الوخز بالإبر الكهربائية.
يستخدم التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء ، كطريقة تصوير وظيفية ، مستشعرات الأشعة تحت الحمراء غير الملامسة للكشف عن الإشعاع الحراري من مناطق الاهتمام المحددة مسبقا ، مع البيانات المعالجة بالكمبيوتر التي تولد مخططات حرارة زائفة للتحليل الكمي14،15. تتيح هذه التقنية المراقبة غير الغازية للتغيرات الديناميكية الدموية الجلدية عن طريق قياس التغيرات في درجات الحرارة المرتبطة بتقلبات تدفق الدم في الأنسجة الجلدية والأوعية الدموية والعضلية16 ، وبالتالي تسهيل التقييم البصري لتغيرات الدورة الدموية الدقيقة الوظيفية في نقاط الوخز بالإبر. في هذه الدراسة ، تم التحقق من صحة حساسية الألم في نقاط الوخز بالإبر GB34 و ST36 لأول مرة باستخدام مقياس التقليم الإلكتروني ، متبوعا بالتطبيق المشترك للتلوين الأخضر السريع للسافرانين O ، وتحليل IL-1β و TNF-α ، والتصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء ، والتقييمات السلوكية المرتبطة بالألم للتحقيق في التأثيرات المسكنة لتحفيز الوخز بالإبر الكهربائية في نقاط الوخز بالإبر GB34 و ST36 في الفئران المصابة بالتهاب المفاصل العظمي في الركبة التي يسببها أسيتات اليود أحادية الصوديوم (MIA).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على جميع البروتوكولات التجريبية والإشراف عليها بدقة من قبل لجنة أخلاقيات بجامعة بكين للطب الصيني (ID: bucm-2024091102-3197) ، وتم الالتزام الصارم بجميع الإجراءات بدليل المعاهد الوطنية للصحة (NIH) لرعاية واستخدام المختبر. تم استخدام ثلاثين من ذكور فأر Sprague-Dawley (نطاق الوزن: 210-250 جم) في هذه الدراسة. الكواشف والمعدات المستخدمة مدرجة في جدول المواد.
1. ومجموعات التجارب
2. إنشاء نموذج KOA المستحث عن أحادي يودوأسيتات
3. إجراءات تثبيت الفئران
4. علاج الوخز بالإبر الكهربائية
5. اختبار عتبة الانسحاب الميكانيكي (MWT)
6. اختبار زمن انتقال سحب المخلب (PWL)
7. التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء
ملاحظة: قم بإزالة الأطراف الخلفية في اليوم السابق للتصوير الحراري للتخلص من تأثير الشعر على قياس درجة الحرارة.
8. مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)
9. تلطيخ أخضر سريع سافرانين
ملاحظة: بعد جمع الدم الأبهري البطني ، قم باستئصال مفصل الخنق الأيمن باستخدام مقص جراحي ، مع الحفاظ على أجزاء مفصلية 1 مم من كل من عظم الفخذ القريب والظنبوب البعيد. قم بإزالة الأنسجة الرخوة حول المفصل بعناية.
10. التحليل الإحصائي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
لم يمت أي خلال التجربة بأكملها. أشارت نتائج مدة إجراء العملية وعدد انفصال الإبر لكل فأر في كل من فئتي NF و EA إلى أن مجموعة EA ، بعد التقييد باستخدام روابط كبلات النايلون ، شهدت انخفاضا في وقت التشغيل وانخفاض انفصال الإبر (P < 0.001; الشكل 1H ، I). كشف تحليل عتبات ألم الوخز بالإبر عن عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية في حساسية الألم الميكانيكي بين GB34 و ST36 والمناطق غير المكونة من الوخز بالإبر قبل النمذجة (P > 0.05). بعد أربعة عشر يوما من حقن MIA ، زا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
MIA ، وهو مثبط أيضي ، يعطل بشكل انتقائي تحلل السكر الهوائي الخلوي ، مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج للخلايا الغضروفية17،18،19. يؤدي إعطاء MIA داخل المفصل إلى استنفاد الخلايا الغضروفية وتنكس الغضروف المفصلي اللاحق ، والذي يتميز بمخالفات مورفولوجية وتغيرات نسيجية مرضية تشبه إلى حد كبير أمراض التهاب المفاصل البشري20. وبالتالي ، يتم استخدامه على نطاق واسع في البحث عن آليات ا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
أعلن جميع المؤلفين عن عدم وجود تضارب محتمل في المصالح.
تم دعم هذا البحث من قبل البرنامج الوطني للبحث والتطوير الرئيسي في الصين (منحة 2023YFC3502700) وصناديق البحوث الأساسية للجامعات المركزية (2025-JYB-XJSJJ014)
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 0-10ul ماصة قابلة للتعديل الحجم | سيرفيسبيو | IC012395160823 | |
| 0-200ul ماصة قابلة للتعديل الحجم | سيرفيسبيو | IC021029160323 | |
| 1.5 مل أنابيب إيبندورف | سيرفيسبيو | EP-150-م | |
| طرف ماصة دقيقة 10ul | سيرفيسبيو | تي بي -10 | |
| حقنة 1 مل | شنغهاي Zhiyu المعدات الطبية المحدودة | ZSQ-1 | |
| طرف ماصة دقيقة سعة 200 لتر | سيرفيسبيو | تي بي -200 | |
| إبرة قياس 22 ؛ | كروس | 112416ج | |
| 2 مل أنابيب إيبندورف | سيرفيسبيو | EP-150-م | |
| أنبوب دم أحمر 5 مل | شنغهاي شينلي للتكنولوجيا الحيوية المحدودة | سي إكس جي -5 آر | |
| 75٪ كحول | شاندونغ أنجي جاوك تكنولوجيا التطهير المحدودة | 75-500 مل | |
| شريحة ملتصقة | سيتوتست | 188105 | |
| غسالة الألواح الأوتوماتيكية | ريتو | RT-3100C | |
| إبرة جمع الدم | جيانغشي رويبانغ المجموعة الصناعية المحدودة | CXZ-07 | |
| أنسجة العظام سافرانين ومحلول تلطيخ أخضر صلب | شنغهاي يوان يي التكنولوجيا الحيوية المحدودة | 32730 راند | |
| غطاء زجاجي | Citotest مختبر التصنيع المحدودة | 10212432 ج | |
| مجفف | دياباث | دوناتيلو | |
| الميزان الإلكتروني | ميتلر توليدو | ME203E/02 | |
| فرن تجفيف الانفجار الكهروحرارية | لابوتيري | جل 70 | |
| آلة التضمين | ووهان جونجي للإلكترونيات المحدودة | جي بي - ف5 | |
| صديقة للبيئة إزالة الشمع السائل الشفاف | سيرفيسبيو | جي 1128-1 لتر | |
| كاشف ملصق الإنزيم | بيوتك | عصر | |
| ايثانول | مركز أبحاث المركز | 100092683 | |
| حمض الإيثيلين ديامين رباعي الخليت | ماكلين | 60-00-4 | |
| كرة قطنية خالية من الدهون | Caoxian Hualu المواد الصحية المحدودة | تزم كيو-500 | |
| جهاز طرد مركزي مبرد عالي السرعة | تنين | D3024R | |
| مطحنة الأنسجة عالية السرعة | سيرفيسبيو | كيزو - III - إف | |
| مقياس تسكين اللوح الساخن | أساس كيو | KW-CT-1 | |
| نظام التصوير | نيكون | نيكون DS-U3 | |
| جهاز تصوير حراري بالأشعة تحت الحمراء | تستو إيه جي | تستو 865 | |
| اليودوفور | شاندونغ أنجي جاوك تكنولوجيا التطهير المحدودة | DF-500 | |
| الأشعة تحت الحمراء سوفت | تستو إيه جي | ||
| إيزوفلوران | RWD علوم الحياة | 510-22-10 | |
| قفازات اللاتكس | بكين روجينغ منتجات اللاتكس المحدودة | RJJC-S | |
| جهاز اختبار وخز مخلب ميكانيكي | أساس كيو | KW-RB | |
| ميا | سيغما | 206-165-7 | |
| اللثة المحايدة | مركز أبحاث المركز | 10004160 | |
| البيوتانول العادي | مركز أبحاث المركز | 100052190 | |
| محلول ملحي عادي | شيمن | SLYS-500 مل | |
| سائل البارافين | ماكلين | 8012-95-1 | |
| مثبت بارافورمالديهايد (محايد) | سيرفيسبيو | جي 1101 | |
| قطاعة علم الأمراض | شنغهاي لايكا أداة المحدودة | ريزي 2016 | |
| الفئران IL-1 beta مجموعة إليسا GER0002-96 طن | سيرفيسبيو | AC30253754 | |
| طقم الجرذ TNF-alpha ELISA GER0004-96t | سيرفيسبيو | AC40253711 | |
| فئران SD | بكين سيبيفي التكنولوجيا الحيوية المحدودة | SCXK (جينغ) 2024-0001 | |
| آلة تخدير الصغيرة | يويان | إيه بي إم | |
| قناع جراحي | كاسب | [وجكز-1] | |
| موزع الأنسجة | تشجيانغ Kehua أداة المحدودة | دينار كويتي | |
| نظام تلميع المياه عالي النقاء | مياه أيكن El | AK-RO-C2 | |
| مجهر بصري مستقيم | نيكون | نيكون ECLIPSE E100 | |
| يوريتان | ماكلين | 2621-79-6 | |
| خلاط دوامة | سيرفيسبيو | إم في 100 | |
| الزيلين | مركز أبحاث المركز | 10023418 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن