مقالة منهجية

دراسة تجريبية على Muscone يقلل من نشاط مسار NF-κB من خلال استهداف IL-1R1 لتخفيف إصابة الإجهاد التأكسدي في خلايا شوان

DOI:

10.3791/69009

⸱

أكتوبر 10, 2025

 ,  ,  , 
1Department of Rehabilitation, Baoshan Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, 2Institute of Innovative Chinese Medicine, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تدرس هذه الورقة تأثير المسكون ، المكون الرئيسي في المسك ، على تكاثر الخلايا المبرمج لخلايا شوان. توضح النتائج مبدئيا الآلية المحتملة للمسك الذي يقلل من نشاط مسار NF-κB عن طريق تثبيط IL-1R1 لتخفيف إصابة الإجهاد التأكسدي في شلل بيل.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الآلية الأساسية لكيفية علاج المسك الطبيعي لشلل بيل غير واضحة. تهدف هذه الدراسة إلى الكشف عن الآلية المحتملة للمسك في علاج إصابة الأعصاب الطرفية في المختبر. لتحقيق ذلك ، تم إنشاء نموذج إصابة الإجهاد التأكسدي في خلايا شوان (SCs) باستخدام كلوريد الكوبالت (CoCl2). لتقييم التأثيرات الوقائية ل Muscone (Mus) على هذه الإصابة واستكشاف آليتها ، تم استخدام فحوصات جدوى الخلية ، وتعداء siRNA ، ومقايسات الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) ، وتفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي الكمي (qRT-PCR) ، والنشاف الغربي ، وتلوين التألق المناعي ، والتحليل الهيكلي للخلايا. نتيجة لذلك ، يشار إلى أن تدخل Mus عزز انتشار SC و S-100b mRNA تحت نقص الأكسجة ، مع تقليل أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) ورفع مستويات ديسموتاز الفائق (SOD). خفف موس من الإجهاد التأكسدي والالتهابات في SCs ناقصة الأكسجين عن طريق تقليل IL-1β و TNF-α. علاوة على ذلك ، قام موس بتعديل المؤشرات الرئيسية المشاركة في استقلاب الأكسجين وإصلاح الخلايا والتمثيل الغذائي العصبي ، بما في ذلك C-JUN و GDNF. تم تنظيم IL-1R1 ، المترجم في غشاء SC ، بسبب نقص الأكسجة ولكن تم تنظيمه بشكل كبير بعد تدخل موس. كما منع Mus التعبير عن مكونات مسار NF-κB (IRAK1 ، IKK ، p65 ، p50) وزاد من IκB-α. بشكل حاسم ، أظهر إلغاء تعبير IL-1R1 عبر ضربة قاضية siRNA تأثيرا ثابتا مع Mus. استنتج أنه من خلال قمع IL-1R1 ، خفف موس الالتهاب في SCs نقص الأكسجة من خلال تثبيط مسار NF-κB. أشارت هذه الدراسة إلى دور IL-1R1 في الخلل الوظيفي SC الناجم عن نقص الأكسجة. علاوة على ذلك ، قد يكون موس دواء فعالا محتملا لعلاج شلل بيل.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Muscone (Mus) ، 3-methylcyclopentadecanone ، تم عزله من المستخلص الطبيعي لمسك الغزلان في وقت مبكر من عام 19061. المسك ، وهو طب صيني تقليدي قيم وفعال (TCM) ، له تأثيرات علاجية واسعة النطاق مثل الانتفاخ ، ومكافحة الالتهابات ، والإنعاش ، وتعزيز الدورة الدموية2. تم استخدام الطب الصيني التقليدي المحتوي على المسك لمجموعة متنوعة من الأمراض الشائعة ، بما في ذلك مرض الجهاز العصبي المركزي3 ، وإزالة السموم4 ، وأورام الجهاز الهضمي5 ، والتهاب الكبد الفيروسي6 ، وأمراض القلب التاجية7 ، إلخ. باعتباره المكون الصيدلاني النشط للمسك ، أظهر Mus تأثيرات بيولوجية ممتازة تتضمن مضادات الالتهاب8 ، ومضادات الأكسدة8،9 ، وإصلاح تلف الخلايا العصبية ، وتخفيف احتشاء عضلة القلب10 ، إلخ. ميكانيكيا ، أظهرت الدراسات أن Mus يمكن أن يقلل من إطلاق السيتوكينات الالتهابية مثل الإنترلوكين (IL) -1β ، IL-6 ، عامل نخر الورم (TNF) -α ، أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) 1،8 ، وتنظيم بروتين كيناز المنشط بالميتوجين (MAPK) ، العامل النووي kappa-light-chain محسن للخلايا البائية المنشطة (NF-κB) ، AKT / الهدف الميكانيكي للرابامايسين (mTOR) ، ومسار CaN / Erk1 / 2 1 ، 8،11 ، إلخ.

في الصين ، تم الإبلاغ عن أن بعض الأطباء قد نجحوا في علاج شلل بيل بالمسك الطبيعي وفقا لسجلات الأدبيات السابقة والتجربة السريرية12،13،14،15. موس ليس دواء موصى به في إرشادات التشخيص والعلاج ، ولكن في المناطق الطبية المتخلفة أو بالنسبة لبعض الأشخاص الذين لا يستطيعون استخدام المنشطات أو الأدوية المضادة للفيروسات ، يمكن أن يكون موس خيارا مفضلا آخر. يظهر تحليل الأدبيات في السنوات الأخيرة أيضا أن المسك هو الطب الصيني الأكثر استخداما في وصفات رقعة الطب الصيني المنشورة ودراسات نقاط الوخز بالإبر لعلاج شلل الوجه المحيطي16. على الرغم من وجود العديد من الدراسات الدوائية والطبية على موس ، إلا أن كيف عالج المسك شلل بيل بالضبط ، وما هي الآليات البيولوجية الكيميائية العصبية والخلوية الأساسية ، لا يزال غير معروف.

شلل بيل ، وهو شلل حاد في الوجه مجهول السبب ، ينتج عن خلل وظيفي في العصب الوجهي المحيطي ، والذي يعصب جميع عضلات الوجه. أكثر العلامات وضوحا لأعراض شلل بيل هي ضعف وتدلي عضلات الوجه على جانب واحد. على الرغم من أن شلل وجه بيل لا يهدد الحياة ، إلا أنه يمكن أن يؤثر على نوعية حياة المريض بل ويسبب القلق والاكتئاب. ما يثير القلق بشكل خاص هو أن ما يصل إلى 30٪ من المرضى يعانون من عقابيل طويلة الأمد ، بما في ذلك الحركية ، والتقلص ، وشلل جزئي دائم في الوجه ، وعدم تناسق الوجه ، حتى مع العلاج المناسب. لذلك ، فإن إيجاد حل لشلل بيل وتقليل خطر الشلل هما أهدافنا الرئيسية. لا تزال المعرفة الحالية حول الآلية المسببة للأمراض لشلل بيل غير واضحة. أظهرت الأبحاث الحديثة أن إعادة تنشيط الفيروسات قد تكون السبب الرئيسي لشلل بيل ، ويمكن أن تسبب هذه الفيروسات وذمة عصبية والتهابا لتحفيز نوبة شلل بيل.

بناء على الأدلة الحديثة ، افترضنا أن موس يخفف من أعراض شلل بيل عن طريق تحسين تلف الإجهاد التأكسدي للعصب الوجهي. أشارت هذه الدراسة تجريبيا إلى التأثيرات العلاجية ل Mus ، وكشفت أن IL-1R1 المنظم في SCs ينشط مسار NF-κB ، مما يتسبب في تلف الخلايا. بشكل حاسم ، أظهرنا أن Mus يمنع إشارات NF-κB عن طريق تقليل تنظيم IL-1R1. حددت النتائج التي توصلنا إليها دور تنظيم IL-1R1 في SCs المعرضة للإجهاد التأكسدي في المختبر ووضعت إدارة Mus كاستراتيجية علاجية جديدة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم إجراء هذا البحث التجريبي بموافقة اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام (رقم الموافقة: LL-240077).

زراعة الخلايا والتدخل الدوائي
تمت زراعة خلايا الفئران شوان (SCs) في وسط خلية شوان ، الذي يتكون من وسط قاعدي ، و 5٪ مصل بقري للجنين ، و 1٪ مكمل نمو خلايا شوان ، و 1٪ بنسلين ، و 1٪ ستربتومايسين. تم الاحتفاظ بجميع الخلايافي غلاف جوي من ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5٪ عند 37 درجة مئوية. عندما يسمح لها بالنمو إلى كثافة 70-80٪ ، تم تقسيم SCs إلى أربع مجموعات (ن = 5 لكل مجموعة): (1) مجموعة NC ؛ (2) مجموعة NC + CoCl2 ؛ (3) مجموعة NC + CoCl2 + Mus ؛ (4) مجموعة NC + CoCl2 + siIL-1R1 + Mus.

من المعروف أن كلوريد الكوبالت (CoCl2) ، وهو عامل يستخدم بشكل متكرر لتقليد نقص الأكسجة ، يؤدي إلى استجابات مشابهة لتلك الخاصة بنقص الأكسجة ، مثل إعاقة تدهور واستقرار العوامل المحفزة لنقص الأكسجة وتراكم بروتين HIF-1α15. وفقا للطريقة المعدلة القائمة على Osuru et al.17 ، في مجموعة NC + CoCl2 ومجموعة NC + CoCl2 + Mus ، تمت زراعة SCs في Schwann Cell Medium المكمل ب 240 ميكرومتر CoCl2 لمدة 8 ساعات ، في الظروف الجوية بنسبة 95٪ هواء و 5٪ ثاني أكسيد الكربون2 عند 37 درجة مئوية في حاضنة مرطبة (21٪ O2). ثم ، في مجموعات موس ، تم تطبيق تدخل 1.25 ميكروغرام / مل موس لمدة 24 ساعة إضافية. وفي الوقت نفسه ، في مجموعة NC + CoCl2 + siIL-1R1 + Mus ، عولجت SCs أولا ب 24 ساعة من عدوى siRNA ، ثم تمت زراعتها باستمرار مع 240 ميكرومتر CoCl2 لمدة 8 ساعات ، متبوعا بتدخل 1.25 ميكروغرام / مل موس لمدة 24 ساعة إضافية ، كما هو الحال في المجموعات السابقة. يظهر المخطط الانسيابي للعملية التجريبية في الشكل 1.

مقايسة بقاء الخلية
تم تحديد جدوى SCs باستخدام كاشف فحص مجموعة عد الخلايا -8 (CCK-8) وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. تم زرع SCs المستزرعة بكثافة 5 × 105 خلايا / بئر في صفيحة زراعة خلوية مكونة من 96 بئرا مع 100 ميكرولتر من وسط النمو الكامل عند 37 درجة مئوية في جو مرطب بنسبة 5٪ ثاني أكسيد الكربون2 . عندما وصل التقاء إلى 70-80٪ ، تمت إضافة 10 ميكرولتر من محلول CCK-8 إلى كل بئر ، وتم تحضين الصفائح لمدة ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية. تم قياس الكثافة البصرية (OD) لألواح 96 بئرا عند 450 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة دقيقة ، وتم حساب صلاحية الخلية. تم تقسيم الخلايا إلى أربع مجموعات: مجموعة NC ، ومجموعة NC + CoCl2 ، ومجموعة NC + CoCl2 + Mus ، ومجموعة NC + CoCl2 + siIL-1R1 + Mus. تم تصحيح النتائج التجريبية باستخدام بئر فارغ (وسط + محلول CCK8). معدل بقاء الخلية = [(المجموعة التجريبية - بئر فارغ) / (مجموعة NC - بئر فارغ)] × 100٪.

تعداء siRNA
تم إجراء تعدي وفقا لتعليمات الشركة المصنعة لكاشف تعداء siRNA / miRNA التجاري في المختبر باستخدام siRNA المزدوج الاصطناعي من siIL-1R1 (AUAGUCUUGGAUUUUCUCCAA ، GGAGAAAAUCCAAGACUAUGA) بتركيز 100 نانوغرام / ميكرولتر لمدة 24 ساعة. بعد تعداء siIL-1R1 ، تم تقييم تعبيرات siIL-1R1 عن طريق إجراء تحليل RT-qPCR بعد 24 ساعة من تعداء18 ، ويجب التأكد من أن الكفاءة أعلى من 80٪

مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)
تم جمع المواد الطافية بعد الاستزراع وطردها بالطرد المركزي في ظل ظروف خاصة بالمجموعة (2950 جم ، 20 دقيقة ، 25 درجة مئوية). تم فحص المستويات خارج الخلية من IL-1β و TNF-α و ROS و SOD عبر ELISA باتباع تعليمات المجموعة. تم الحصول على قراءات الامتصاص النهائية عند 450 نانومتر باستخدام قارئ الصفيحة الدقيقة.

عزل الحمض النووي الريبي وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الفعلي (RT-qPCR)
باتباع تعليمات الشركة المصنعة ، تم استخراج إجمالي الحمض النووي الريبي من الخلايا المستنبتة باستخدام كاشف TRizol. تم تضخيم الجينات المستهدفة (IL-1β و TNF-α و S-100b و IL-1R1) في 20 ميكرولتر من تفاعلات مزيج SYBR qPCR لمدة 40 دورة على أداة تفاعل المتسلسل البوليميراز المتسلسل (PCR). يستخدم تطبيع البيانات β أكتين ، مع التحقق من خصوصية تفاعل البوليميراز المتسلسل عن طريق تحليل منحنى الذوبان. قامت طريقة 2−ΔΔCt بقياس التعبير النسبي من خمس عينات مستقلة تم فحصها في ثلاث نسخ. يتم سرد البادئات في الجدول 1.

وصمة عار غربية
بعد العلاج ، تم احتضان SCs من جميع المجموعات التجريبية لمدة 24 ساعة وتم حصادها. تم استخراج البروتين الكلي باستخدام مجموعة استخراج البروتين الكلي. تم دمج محللات البروتين مع الرحلان الكهربائي لهلام بولي أكريلاميد الصوديوم (SDS-PAGE) تم تغيير طبيعته عند 98 درجة مئوية لمدة 5 دقائق ، وفصله (20 ميكروغرام لكل حارة) على 10-12٪ من المواد الهلامية SDS-بولي أكريلاميد. تم نقل البروتينات المحلولة كهربائيا إلى أغشية فلوريد البولي فينيلدين (PVDF). تم حظر الأغشية بحليب جاف خالي الدسم بنسبة 5٪ لمدة 60 دقيقة في درجة حرارة الغرفة ، ثم تم تحضينها طوال الليل عند 4 درجات مئوية بحجم 6 مل مع الأجسام المضادة الأولية التالية: الجسم المضاد ل HIF-1α (1: 1000) ، الجسم المضاد ل GAPDH (1: 1000) ، الجسم المضاد ل IL-1R1 (1: 1000) ، الأجسام المضادة ل C-JUN (1: 1000) ، الأجسام المضادة ل GDNF (1: 1000) ، الجسم المضاد IRAK1 (1: 1000) ، الأجسام المضادة IKK (1: 1000) ، الأجسام المضادة المضادة ل p65 (1: 800) ، الجسم المضاد ل p50 (1: 900) ، الأجسام المضادة المضادة ل IκB-α (1: 900) والأجسام المضادة المضادة ل β-actin (1: 1000). بعد الغسيل ، تم فحص الأغشية باستخدام الأجسام المضادة الثانوية المترافقة مع بيروكسيداز الفجل (HRP) لمدة 60 دقيقة عند 25 درجة مئوية. تم اكتشاف إشارات البروتين باستخدام Image Studio Digits الإصدار 4.0. تم قياس شدة النطاق باستخدام برنامج ImageJ وتطبيعها إلى تعبير β الأكتين و GAPDH. تم إجراء ثلاث تجارب مستقلة.

التألق المناعي
تم تقييم توطين IL-1R1 في SCs بعد Zhao et al.19. حصاد الخلايا خلال مرحلة النمو اللوغاريتمي عن طريق التربسين ، وأعد تعليقها في وسط كامل جديد ، وقم بتثبيتها جيدا للحصول على تعليق موحد أحادي الخلية. زرع الخلايا على ألواح ثقافة تحتوي على زلات غطاء معقمة. بمجرد وصول الخلايا إلى الالتقاء الكامل ، اشطفها 1-2 مرات باستخدام محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) ، وقم بإزالة زلات الغطاء بعناية ، وقم بتثبيت الخلايا الملتصقة بنسبة 4٪ بارافورمالديهايد في PBS لمدة 10 دقائق ، وتخلل مع 0.05٪ Triton X-100 (10 دقائق) ، وقم بحظر مصل الماعز بنسبة 5٪ (1 ساعة). تستخدم الحضانة الأولية الأرانب المضادة للفئران IL-1R1 mAb. بعد غسل PBS ، تم تحضين العينات باستخدام IgG المضاد للأرانب من الماعز المقترن ب FITC لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. أضف عوامل تركيب قابلة للذوبان في الماء إلى انزلاق الغطاء للتركيب. تم تصور الخلايا ذات العلامات المناعية وقياسها باستخدام مجهر مضان بطول موجة الإثارة 492 نانومتر والطول الموجي للانبعاث 520 نانومتر.

تحليل البنية التحتية
باتباع بروتوكول Zhao et al.19 ، تم تثبيت SCs في 2.5٪ جلوتارالديهايد وتم تثبيتها بعد الليل عند 4 درجات مئوية في 1٪ رابع أكسيد الأوزميوم. خضعت العينات لسلسلة جفاف الإيثانول / الأسيتون. تم تلطيخ المقاطع فائقة النحافة (80 نانومتر) بخلات اليورانيل وسيترات الرصاص قبل الفحص الفائق الهيكلي باستخدام مجهر إلكتروني ناقل.

التخلص من الكواشف الكيميائية الخطرة
يتم جمع الوسيط والمحاليل التي تحتوي على CoCl2 في حاوية نفايات معدنية ثقيلة مخصصة. تصنف جميع المواد التي تستخدم لمرة واحدة والتي لامست السوائل المذكورة أعلاه ، بما في ذلك أطراف الماصات وأنابيب الطرد المركزي والقفازات على أنها نفايات خطرة من المعادن الثقيلة ويتم نقلها إلى شركة مرخصة لإدارة النفايات الخطرة معتمدة من قبل السلطات المختصة للتخلص منها بشكل صحيح. تخلص من نفايات محلول بارافورمالديهايد في حاوية نفايات ألدهيد مخصصة. يجب جمع المواد الاستهلاكية المستخدمة كنفايات ألدهيد ومعالجتها من قبل نفس شركة إدارة النفايات الخطرة المرخصة.

التحليل الإحصائي
تم تحليل المقارنات متعددة المجموعات بواسطة ANOVA أحادي الاتجاه مع اختبار Tukey اللاحق في GraphPad Prism 8.0. تم تعريف الدلالة الإحصائية على أنها P < 0.05. يتم تقديم البيانات كمتوسط ±± الانحراف المعياري (SD).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الآثار الوقائية ل Mus على إصابة الإجهاد التأكسدي لخلايا شوان في المختبر
أظهر التعبير عن HIF-1α تغيرات استجابة للتغيرات في ظروف نقص الأكسجة20. لنمذجة نقص الأكسجة ، تعرضت SCs ل CoCl2 ، والذي نجح في إحداث نقص الأكسجة كما أكدته مستويات بروتين HIF-1α المرتفعة ، وهي علامة نقص الأكسجة الكنسية ، عبر النشاف الغربي (الشكل 2 أ). قام التدخل اللاحق ل Mus من SCs منخفضة الأكسجين بتقييم آثاره على الانتشار واستجابات الإجهاد. كشف...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

شلل بيل هو شلل العصب الوجهي المحيطي مجهول السبب يتميز بضعف الوجه من جانب واحد. يؤدي غمد المايلين وظائف حاسمة مختلفة في الأداء الفعال للخلايا العصبية23. يضمن التوصيل السلس للنبضات العصبية ، ويدعم الخلايا العصبية من خلال توفير العوامل المغذية ، ويساعد في عملية التجديد24 . وبالتالي ، يمكن أن يؤدي فقدان المايلين في الجهاز العصبي المحيطي إلى إزالة الاعتلال العصبي ، والذي يمكن أن يسبب ضمور العضلات وتنمل وخدر وشلل25. تلعب خ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون أنهم لا يحملون مصالح متنافسة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يرغب جميع المؤلفين في تقديم شكرهم إلى هيئات التمويل وهي برنامج مواهب اللجنة الصحية لمنطقة باوشان (القادة الأكاديميون المتميزون) (BSWSYX-2024-02) ، وبرنامج ميزانية الإنفاق لجامعة شنغهاي للطب الصيني التقليدي (2021LK003) ، وبرنامج الشباب الممتاز للجنة الصحة بمقاطعة باوشان (Yucai) (BSWSYC-2024-02) ومشروع الزراعة من الفئة ب في التخصصات الطبية الرئيسية والعلامات التجارية المميزة ، لجنة الصحة في منطقة باوشان ، شنغهاي (BSZK-2023-BP07). لم يكن لهذه الهيئات الممولة أي دور في تصميم الدراسة أو قرار تقديم المخطوطة للنشر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
محلول هضم التربسين 0.25٪ (بدون EDTA)سيرفيسبيوجي 4002
10x TBSيوبيوتكBF0153
10-180 KDعلامة بروتين ملونةيوبيوتكص 0069
5٪ حليب جاف خالي الدسمBeyotime Biotechnology ، الصينP0216-300 جرام
الأجسام المضادة المضادة ل C-JUNإشارات الخلية ، الولايات المتحدة الأمريكية#9165T
الأجسام المضادة المضادة ل GAPDHabcam, المملكة المتحدةأب245355
الأجسام المضادة ل GDNFإشارات الخلية ، الولايات المتحدة الأمريكية#47808
مكافحة HIF-1 &alpha ؛ جسمإشارات الخلية ، الولايات المتحدة الأمريكية#14179
الأجسام المضادة المضادة ل IKKإشارات الخلية ، الولايات المتحدة الأمريكية#2682
الأجسام المضادة المضادة ل IL-1R1إشارات الخلية ، الولايات المتحدة الأمريكية#6775ل البنك الدولي
الأجسام المضادة المضادة ل IL-1R1بروتين تك84094-6-RRللتألق المناعي
الأجسام المضادة IRAK1إشارات الخلية ، الولايات المتحدة الأمريكية#4395
مناهضة أنا وكابا. ب- وألفا. جسمإشارات الخلية ، الولايات المتحدة الأمريكية#8943
الأجسام المضادة المضادة ل P50abcam, المملكة المتحدةأب305263
الأجسام المضادة P65   ؛abcam, المملكة المتحدةأب16502
مضاد للفئران IL-1R1 mAb   ؛Beyotime Biotechnology ، الصينأف7212
الأجسام المضادة للأكتينأبكامأب179467
مجموعة قياس بروتين BCAيوبيوتكط2123
مجموعة عد الخلايا -8 (CCK-8) كاشف الفحصBeyotime Biotechnology ، الصينC0048م
كلوريد الكوبالت (CoCl2)ماكلين ، الصينC804815
نجمة EuECLيوبيوتكطالع 2131
مصل الأبقار الجنينية (FBS)Bergolin ، الصينPWL001
الماعز المضاد للأرانب IgG المسمى FitcسيرفيسبيوGB22303
مجهر مضان   ؛نيكون  
كاشف تعداء siRNA / miRNA في المختبر Hieff TransfectionYEASEN, الصين40806ES01
الأجسام المضادة الثانوية المترافقة من بيروكسيداز الفجل (HRP)
الماعز المضاد للفأر IgG المسمى HRP		Servicebio ، الصينGB23301
IL-1 &beta ؛ و TNF- & و ROS و SOD ELISA KitBOSTER, الصينBES1762K ، BES0481K ، BES5018K ، BES2920K
موسكون (موس)علاء الدين، الصينM141496
مخزن مؤقت PBSسيرفيسبيوجي 4202
محلول البنسلين والستربتومايسين، 100xبروسيلPB180120
أغشية فلوريد البولي فينيل (PVDF)ميليبور ، الولايات المتحدة الأمريكيةIPFL00010
خلايا الجرذ شوان (SCs)بروسيل لايف ساينس & تكنولوجيا الصينسم إم 111
RIPA تحلل المخزن المؤقتيوبيوتكطالع 2116
خلية شوان المتوسطةScienCell ، الولايات المتحدة الأمريكية1701
المخزن المؤقت لتحميل SDS-PAGEBeyotime Biotechnology ، الصينص 0015
SDS-PAGE بروتين l المخزن المؤقت للتحميل ، 5xيوبيوتكط2122
سي - إيل - 1 ر1جين يونيفرسالRX0114371
طقم تحضير الرحلان الكهربائي لجل دوديسيل كبريتات بولي أكريلاميد (SDS-PAGE)يوبيوتكط2118
SYBR qPCR ميكسBeyotime Biotechnology ، الصيند7260
طقم استخراج البروتين الكليBeyotime Biotechnology ، الصينص 123-01
المجهر الإلكتروني الناقلهيتاشي HT7800 
تريزولBeyotime Biotechnology ، الصينر0011
توين -20يوبيوتكطالع 2114
عوامل تركيب قابلة للذوبان في الماءAbsin ، الصينمعبد المنافع 9240
المخزن المؤقت للنقل الغربييوبيوتكط2129

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhai, X., et al. Muscone ameliorates ovariectomy-induced bone loss and receptor activator of nuclear factor-κb ligand-induced osteoclastogenesis by suppressing TNF receptor-associated factor 6-mediated signaling pathways. Front. Pharmacol. 11, 348(2020).
  2. Lv, S., et al. Chemical compositions and pharmacological activities of natural musk (Moschus) and artificial musk: A review. J Ethnopharmacol. 284, 114799(2022).
  3. Dong, X., et al. Xingnaojing injection alleviates cerebral ischemia/reperfusion injury through regulating endoplasmic reticulum stress in vivo and in vitro. Heliyon. 10 (3), e25267(2024).
  4. Lu, L., et al. The atheroprotective roles of heart-protecting musk pills against atherosclerosis development in apolipoprotein E-deficient mice. Ann Transl Med. 7 (23), 714(2019).
  5. Zhuang, Q., et al. Pien Tze Huang inhibits tumor cell proliferation and promotes apoptosis via suppressing the STAT3 pathway in a colorectal cancer mouse model. Int J Oncol. 40 (5), 1569-1574 (2012).
  6. Yang, H. X., et al. Babaodan capsules for viral hepatitis: Systematic review of clinical efficacy and safety and Meta-analysis of randomized clinical trials. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 44 (22), 4953-4961 (2019).
  7. Li, J., et al. Chinese medicine She-Xiang-Xin-Tong-Ning, Containing Moschus, Corydalis and Ginseng, protects from myocardial ischemia injury via angiogenesis. Am J Chin Med. 48 (1), 107-126 (2020).
  8. Li, Y. C., et al. Muscone and (+)-borneol cooperatively strengthen CREB induction of claudin 5 in IL-1β-induced endothelium injury. Antioxidants (Basel). 11 (8), 1455(2022).
  9. Yu, S., et al. Muscone relieves inflammatory pain by inhibiting microglial activation-mediated inflammatory response via abrogation of the NOX4/JAK2-STAT3 pathway and NLRP3 inflammasome. Int Immunopharmacol. 82, 106355(2020).
  10. Du, Y., et al. Hypoxia-inducible factor 1 alpha (HIF-1alpha)/vascular endothelial growth factor (VEGF) pathway participates in angiogenesis of myocardial infarction in muscone-treated mice: Preliminary study. Med Sci Monit. 24, 8870-8877 (2018).
  11. Dong, J., Li, H., Bai, Y., Wu, C. Muscone ameliorates diabetic peripheral neuropathy through activating AKT/mTOR signalling pathway. J Pharm Pharmacol. 71 (11), 1706-1713 (2019).
  12. Zhao, M. Acupoint application for facial neuritis: 32 cases. Sichuan Tradit Chinese Med. 2, 54(1996).
  13. Wang, L., Chen, X. Clinical observation and analysis of 96 cases of facial neuritis treated by integrated Chinese and Western medicine. J Mod Integr Chinese West Med. 4, 617-618 (1997).
  14. Meng, S., Hu, C., Zhang, H., Shang, C. Observation of curative effect of acupuncture with musk combined with physical factors on facial neuritis. New Chinese Med. 45, 134-136 (2013).
  15. Chen, N., Qin, Y. Effect of artificial musk acupoint application combined with acupuncture on peripheral facial paralysis. People's Mil Med. 60, 1197-1198 (2017).
  16. Qi, Q., Ni, S., Li, C., Wang, X. Literature analysis of acupoint application of Chinese medicine in treatment of peripheral facial palsy. J Extern Treat Chinese Med. 23, 59-60 (2014).
  17. Osuru, H. P., Lavallee, M., Thiele, R. H. Molecular and cellular response of the myocardium (H9C2 cells) towards hypoxia and HIF-1alpha inhibition. Front Cardiovasc Med. 9, 711421(2022).
  18. Lai, W., Yu, L. Insulin-like growth factor 1 ameliorates pre-eclampsia by inhibiting zinc finger E-box binding homeobox 1 by up-regulation of microRNA-183. J Cell Mol Med. 27 (9), 1179-1191 (2023).
  19. Zhao, L., Qu, W., Wu, Y., Ma, H., Jiang, H. Dorsal root ganglion-derived Schwann cells combined with poly(lactic-co-glycolic acid)/chitosan conduits for the repair of sciatic nerve defects in rats. Neural Regen Res. 9 (22), 1961-1967 (2014).
  20. Tong, Y., et al. Effect of a hypoxic microenvironment after radiofrequency ablation on residual hepatocellular cell migration and invasion. Cancer Sci. 108 (4), 753-762 (2017).
  21. Zeng, H. T., et al. Modulating oxidative stress in B cells promotes immunotherapy in food allergy. Oxid Med Cell Longev. 2022, 3605977(2022).
  22. Wang, D., et al. Circulating brain-derived neurotrophic factor, antioxidant enzymes activities, and mitochondrial DNA in bipolar disorder: An exploratory report. Front Psychiatry. 11, 514658(2020).
  23. Stadelmann, C., Timmler, S., Barrantes-Freer, A., Simons, M. Myelin in the central nervous system: Structure, function, and pathology. Physiol Rev. 99 (3), 1381-1431 (2019).
  24. Intisar, A., et al. An electroceutical approach enhances myelination via upregulation of lipid biosynthesis in the dorsal root ganglion. Biofabrication. 14 (1), ac457c(2022).
  25. Kamil, K., Yazid, M. D., Idrus, R. B. H., Das, S., Kumar, J. Peripheral demyelinating diseases: From biology to translational medicine. Front Neurol. 10, 87(2019).
  26. Ma, Y., et al. Human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles promote the proliferation of Schwann cells by regulating the PI3K/AKT signaling pathway via transferring miR-21. Stem Cells Int. 2021, 1496101(2021).
  27. Su, Y., et al. Aptamer engineering exosomes loaded on biomimetic periosteum to promote angiogenesis and bone regeneration by targeting injured nerves via JNK3 MAPK pathway. Mater Today Bio. 16, 100434(2022).
  28. Tian, T., et al. IL1alpha antagonizes IL1beta and promotes adaptive immune rejection of malignant tumors. Cancer Immunol Res. 8 (5), 660-671 (2020).
  29. Mosley, B., et al. The interleukin-1 receptor binds the human interleukin-1 alpha precursor but not the interleukin-1 beta precursor. J Biol Chem. 262 (7), 2941-2944 (1987).
  30. Krumm, B., Xiang, Y., Deng, J. Structural biology of the IL-1 superfamily: Key cytokines in the regulation of immune and inflammatory responses. Protein Sci. 23 (5), 526-538 (2014).
  31. De Benedetti, F., et al. Canakinumab for the treatment of autoinflammatory recurrent fever syndromes. N Engl J Med. 378 (20), 1908-1919 (2018).
  32. Liskiewicz, A., et al. Methamphetamine-associated cognitive decline is attenuated by neutralizing IL-1 signaling. Brain Behav Immun. 80, 247-254 (2019).
  33. Zhang, H., et al. Activated Schwann cells and increased inflammatory cytokines IL-1beta, IL-6, and TNF-alpha in patients' sural nerve are lack of tight relationship with specific sensory disturbances in Parkinson's disease. CNS Neurosci Ther. 26 (5), 518-526 (2020).
  34. Su, D., et al. Tumor-neuroglia interaction promotes pancreatic cancer metastasis. Theranostics. 10 (11), 5029-5047 (2020).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

NF KappaB siRNA

مقالات ذات صلة