مقالة منهجية

إنشاء وتقييم نموذج الفئران الناجم عن مستخلص المبيضات البيضاء القابل للذوبان في الماء لالتهاب الشرايين التاجية المرتبط بمرض كاواساكي

DOI:

10.3791/69041

⸱

نوفمبر 7, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Medical Laboratory, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 2Department of Anesthesiology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Pathology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 44Department of Pediatrics, Huai'an First People's Hospital, Huai'an Clinical College of Xuzhou Medical University, 5Department of Pediatrics, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يحاكي نموذج الفئران الناجم عن CAWS بشكل فعال تطور مرض كاواساكي من الالتهاب الحاد إلى التليف المزمن ، ويكشف عن السمات المرضية والمناعية المرضية الرئيسية ، وقد يسهل تطوير استراتيجيات علاجية مستهدفة لمرض كاواساكي.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مرض كاواساكي (KD) هو التهاب الأوعية الدموية الجهازي الذي يصيب الأطفال بشكل أساسي ، وآفات الشريان التاجي هي أشد مضاعفاته. في هذه الدراسة ، تم إنشاء نموذج KD محسن للفأر باستخدام مستخلص المبيضات البيضاء القابل للذوبان في الماء (CAWS). تم تقييم التهاب عضلة القلب والتغيرات المرضية ذات الصلة باستخدام تلطيخ HE وتلوين Masson ثلاثي الألوان. كشفت تقنية التألق المناعي عن تسلل الخلايا المناعية في أنسجة القلب. تم الكشف عن التعبير عن بروتين VDAC1 وتوطينه في أنسجة عضلة القلب عن طريق الكيمياء المناعية. في المختبر ، تم إنشاء نموذج البلعمة من خلال الزراعة المشتركة بين البلاعم RAW264.7 مع جراثيم المبيضات البيضاء ، وتم تقييم تكوين ووظيفة البلعمة الذاتية باستخدام تلطيخ التألق المناعي LC3 ومسبار Lyso-Tracker الأحمر. من خلال فحص الجرعة ، تم تحديد أن 8 ملغ كانت جرعة النمذجة المثلى للحث على التهاب الشريان التاجي ، مع معدل وفيات معتدل عند هذه الجرعة. أظهر تلطيخ HE أن حقن CAWS تسبب بثبات في آفات الشريان التاجي بما يتفق مع خصائص مرض كاواساكي البشري في الفئران. أكد تلطيخ ماسون أن هناك ترسب كبير لألياف الكولاجين حول الشرايين التاجية والشريان الأورطي في مجموعة CAWS من الفئران ، والتي تزامن بشكل وثيق مع المنطقة الالتهابية ، ولوحظ اختلاف ذي دلالة إحصائية من المجموعة الضابطة في 14 يوما (ص < 0.001). كشف التألق المناعي أنه في اليوم الرابع عشر من النمذجة ، زاد تسلل الخلايا المناعية المتعددة في أنسجة القلب لمجموعة CAWS بشكل ملحوظ (ص < 0.001). أظهرت نتائج الكيمياء المناعية أنه في اليوم الثامن والعشرين من النمذجة ، تم تنظيم التعبير عن بروتين VDAC1 في أنسجة عضلة القلب لمجموعة CAWS بشكل كبير (ص < 0.001). أظهرت التجارب في المختبر أنه في البلاعم المصابة بجراثيم المبيضات البيضاء ، يزداد تكوين البلعمة الذاتية في المرحلة المبكرة ، بينما يتم حظر التدفق الذاتي في المرحلة اللاحقة ، مما يشير إلى وجود اضطراب وظيفي.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مرض كاواساكي (KD) ، وهو شكل من أشكال متلازمة العقدة الليمفاوية المخاطية الجلدية ، هو مرض مناعي ذاتي يحدث عند الأطفال دون سن 5 سنوات ويرافقه التهاب الأوعية الدموية الحموي1،2،3. تشير الدراسات إلى أن الدورات غير المعالجة أو العلاجية التي تتجاوز 10 أيام من مرض كاوايت كاناتي الشديد عرضة للتسبب في مضاعفات خطيرة للقلب والأوعية الدموية ، بما في ذلك بشكل رئيسي تمدد الأوعية الدموية التاجية وتضيق الشريان التاجي4،5. قد يؤدي تمزق تمدد الأوعية الدموية التاجية إلى صدمة قلبية أو حتى موت مفاجئ ، وهو السبب الرئيسي لأمراض القلب المكتسبة عند الأطفال 6,7. على الرغم من أن تطبيق الغلوبولين المناعي عن طريق الوريد قد حسن بشكل كبير من التشخيص ، إلا أن مسبباته ومسبباته لا تزال غير واضحة ، مما يحد من تطوير الاستراتيجيات العلاجية المستهدفة8،9. لذلك ، أصبح إنشاء نماذج حيوانية يمكنها محاكاة خصائص الأمراض البشرية بدقة حاجة ملحة للبحث الحالي.

حاليا ، تتمثل إحدى العقبات الرئيسية في أبحاث مرض كاواساكي في عدم وجود نماذج حيوانية مميزة جيدا تلخص بشكل كامل أمراض المرض. من بين النماذج المختلفة التي تم تطويرها الآن ، يعد نموذج التهاب الأوعية الدموية الناجم عن مستخلص جدار الخلية الملبنة كاسي (LCWE) نظاما ناضجا نسبيا ، ويمكن أن يسبب هذا النموذج التهاب الشرايين التاجية. يستخدم على نطاق واسع لدراسة آلية خلل التنظيم المناعي والسيتوكينات المحددة في الأوعية الدموية الشبيهة بالدينار10،11. كما اجتذب نموذج التهاب الأوعية الدموية الناجم عن مستخلص المبيضات البيضاء القابل للذوبان في الماء (CAWS) الكثير من الاهتمام نظرا لتشابهه الكبير مع السمات المرضية لمرض كاواساكي البشري12،13. بعد التحسين والتحسين المنهجي من قبل فرق بحثية متعددة ، تطور النموذج الناجم عن CAWS ليصبح أداة مهمة لأبحاث مرض كاواساكي14. على الرغم من أن CAWS يمكن أن يحفز التهاب الشريان التاجي عن طريق الحقن داخل الصفاق ، إلا أن له قيودا من حيث أنه لا يمكنه إعادة إنتاج العملية المرضية الدقيقة لالتهاب الأوعية الدموية البشري KD بشكل كامل. على سبيل المثال ، لم يتم العثور على العدلات في علم الأمراض المتأخر للإنسان15 دينار كويتي ، ولكن تسلل العدلات لا يزال يحدث في هذا النموذج حتى 16 أسبوعا بعد حقن CAWS16. علاوة على ذلك ، لم يتم توضيح آلية التهاب الأوعية الدموية الناجم عن CAWS بشكل كامل في الوقت الحالي ، مما يحد من الفهم المتعمق والتطبيق للنموذج9. تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء نموذج حيواني موحد ل KD من خلال تحسين بروتوكول الحث ل CAWS ، وتوضيح آلية المرض ، وتسهيل تطوير العلاجات المستهدفة.

استخدمت هذه الدراسة CAWS لإنشاء نموذج حيواني أكثر توحيدا لمرض كاواساكي. من خلال تجارب تحسين الجرعة المنهجية ، تقرر أن الحقن داخل الصفاق بمقدار 8 ملغ يوميا لمدة خمسة أيام متتالية هو نظام الإدارة الأمثل. يمكن لهذا النظام أن يحفز آفات الشريان التاجي بثبات مع الحفاظ على معدل بقاء مرتفع في. بالإضافة إلى ذلك ، استكشفنا كذلك دور الخلل الوظيفي في الميتوكوندريا في تكوين التليف خلال المرحلة المزمنة من KD ، مع التركيز على الآلية المحتملة لقناة الأنيون المعتمدة على الجهد 1 (VDAC1) ، وهو بروتين رئيسي ينظم موت الخلايا المبرمج في الميتوكوندريا ، أثناء الانتقال من الالتهاب إلى التليف17. تجدر الإشارة إلى أنه من خلال تحليل التوطين المشترك للبلعمة الذاتية / الليزوزوم في هذه الدراسة ، لوحظت وظيفة الالتهام الذاتي غير الطبيعية في هذا النموذج. يوفر هذا النموذج المحسن أداة مهمة للدراسة المنهجية للتسبب في آفات الشريان التاجي في مرض كاواساكي وتقييم استراتيجيات العلاج الجديدة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على جميع التجارب البحثية التي تتضمن بيانات حيوانية من قبل لجنة الأخلاقيات التابعة لمستشفى Huai'an الشعبي رقم 1 التابع لجامعة نانجينغ الطبية (KY-2024-250-01). يتم سرد الكواشف والمعدات المستخدمة في جدول المواد.

1. تحضير CAWS

  1. تلقيح المبيضات البيضاء في مرق سكر العنب سابورو وفقا للبروتوكول المعمول به من قبل دونغ وآخرون 18. ثم, زراعة المرق الملقح لاهوائي عند 37 درجة مئوية لمدة 48 ساعة في غرفة لاهوائية محكمة الغلق مع خليط الغاز.
    ملاحظة: لضمان عقم وسط الاستزراع ، يجب التحكم بشكل صارم في حالة الاستزراع اللاهوائي عند 37 درجة مئوية لمنع التلوث بالبكتيريا المتنوعة.
  2. اشطفها بشكل متكرر باستخدام وسط محدد C واحتضن عند 37 درجة مئوية لمدة 48 ساعة بسرعة دوران 4.5 × جم.
  3. أضف حجما متساويا من الإيثانول اللامائي واتركه طوال الليل عند 4 درجات مئوية.
  4. قم بجهاز الطرد المركزي عند 4.5 × جم لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية ، وقم بإزالة المادة الطافية ، وأضف حجما متساويا من الإيثانول اللامائي إلى الراسب ، واتركه طوال الليل عند 4 درجات مئوية.
  5. بعد الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية ، وأضف 50 مل من الأسيتون إلى الراسب ، وجهاز الطرد المركزي ، وجفف الراسب. قم بإذابة الراسب في محلول ملحي عادي معقم لاستخدامه لاحقا.

2. بناء نموذج فأر لمرض كاواساكي

  1. اختر ثمانين فأرا من الذكور من فئة C57BL / 6 من فئة SPF تتراوح أعمارهم بين 4-6 أسابيع ، وقم بإيوائهم في ظروف خاضعة للرقابة مع إمكانية الوصول المجاني إلى الطعام والماء.
    ملاحظة: لتقليل التداخل المحتمل لتقلبات مستوى هرمون الاستروجين على الاستجابات المناعية والالتهابية ، تم استخدام ذكور الفئران فقط في دراسة إنشاء النموذج الأولي وتوصيف19.
  2. قسم الفئران إلى 4 مجموعات بالتساوي بطريقة جدول الأرقام العشوائي ، بما في ذلك 3 مجموعات حقن CAWS بجرعات مختلفة (4 مجم ، 8 مجم ، 12 مجم) ومجموعة تحكم 1 من المحلول الملحي العادي ، مع 20 فأرا في كل مجموعة.
  3. تحضير مسحوق CAWS في ثلاثة تركيزات 40 مجم / مل و 80 مجم / مل و 120 مجم / مل باستخدام محلول ملحي عادي معقم (0.9٪ كلوريد الصوديوم). حقن المجموعة التجريبية ب 0.1 مل من CAWS في الصباح من اليوم الأول إلى اليوم الخامس من التجربة ، وقم بإعطاء كمية متساوية من المحلول الملحي العادي للمجموعة الضابطة وفقا لنفس الجدول الزمني.
    ملاحظة: تم إجراء الحقن داخل الصفاق باستخدام حقنة أنسولين سعة 1 مل. عند التشغيل ، ضع الماوس مع انخفاض رأسه وذيله أعلى لمنع تلف الأعضاء مثل الأمعاء الغليظة والدقيقة عند إدخال المحقنة.
  4. استخدم ميزانا إلكترونيا في الساعة 9 صباحا كل يوم لوزن العلف المتبقي في وحدة التغذية في نفس الوقت وحساب استهلاك الطعام لمدة 24 ساعة لكل قفص من الفئران.
  5. في الأيام الثالثة والسابعة والرابعة عشرة والثامنة والثامنة والعشرين بعد الحقن الأخير ، اختر بشكل عشوائي وضحي ب 3 فئران من كل مجموعة في كل نقطة زمنية.
  6. ضع الفئران في غرفة مغلقة مملوءة مسبقا بهواء الغرفة. أدخل ثاني أكسيد الكربونالمضغوط 2 بمعدل تدفق 30٪ من حجم الغرفة في الدقيقة. بعد 5 دقائق ، تم إجراء خلع عنق الرحم لتأكيد الوفاة.
  7. جمع ووزن عينات القلب. مراقبة الآفات الالتهابية في القلب والأوعية الدموية عن طريق تلطيخ HE.

3. معايير التلوين والدرجات HE

  1. تم عزل القلب وقوس الأبهر (حوالي 3 مم × 3 مم) بسرعة. قم بإجراء متوسط بضع القص وفقا للطريقة الموصوفة20. افصل القلب بسرعة عن قوس الأبهر (حوالي 3 مم × 3 مم). تم تثبيت الأنسجة التي تم جمعها في الفورمالين المحايد بنسبة 10٪ لمدة 24 ساعة.
  2. بعد التثبيت ، قم بتجفيف الأنسجة من خلال سلسلة إيثانول متدرجة (70٪ إيثانول لمدة ساعة واحدة ، 80٪ إيثانول لمدة ساعة واحدة ، 95٪ إيثانول لمدة ساعة واحدة ، و 100٪ إيثانول لمدة ساعة واحدة) ، واضح في الزيلين ، وتضمينه في البارافين. أخيرا ، قسم الكتل إلى شرائح متواصلة بحجم 5 ميكرومتر.
  3. لتلوين H & E ، قم بتلطيخ الأقسام بالهيماتوكسيلين لمدة 5 دقائق ، واشطفها بالماء الجاري لمدة 10 دقائق ، ثم قم بالبقع المضادة بالإيوزين لمدة دقيقتين ، ثم تابع الجفاف والتركيب21.
    ملاحظة: وفقا لدرجة إصابة الأوعية الدموية الحميمة ، يتم تصنيفها إلى ثلاث درجات: تتميز الدرجة الأولى بشكل أساسي بتورم البطانة وتراكم العدلات. يتجلى الصف الثاني في تنكس العضلات الملساء ، وتسلل الخلايا الالتهابية ، وتلف العضيات. تظهر الدرجة الثالثة مع آفات شديدة مثل نخر البطانة وتساقط ، وترسب الفيبرين.

4. تلطيخ ماسون ثلاثي الألوان

  1. بعد التثبيت ، قم بتجفيف عينات الأنسجة من خلال سلسلة إيثانول متدرجة ، واضحة في الزيلين ، وتضمينها في البارافين.
  2. بعد إزالة الشمع ، قم بترطيب الأقسام من خلال سلسلة إيثانول متدرجة إلى الماء المقطر استعدادا للتلطيخ.
  3. قم بتلطيخ النوى بالهيماتوكسيلين الحديدي من Weigert لمدة 5 دقائق ، ثم اشطفها جيدا تحت الماء الجاري ، ثم صبغ السيتوبلازم بحمض Lichun Red Fuchsin لمدة 5 دقائق.
  4. تفريق مع 1٪ حمض الفوسفوموليبيك لمدة 1 دقيقة ، ثم تلطيخ ألياف الكولاجين مباشرة باللون الأزرق الأنيلين لمدة 3 دقائق. اشطفيه بسرعة باستخدام 1٪ حمض الخليك الجليدي.
    ملاحظة: تحكم بشكل صارم في توقيت خطوة التمايز لضمان خصوصية التلوين.
  5. بعد الجفاف بالإيثانول والزيلين ، ويصبح شفافا ، أغلق الفيلم المحايد.
  6. اشطف الأجزاء الملطخة تحت الماء الجاري لإزالة الصبغة الزائدة.
  7. قم بتجفيف الأقسام من خلال سلسلة إيثانول متدرجة ، واضحة في الزيلين ، وقم بتثبيتها بصمغ محايد.
  8. راقب الأقسام تحت المجهر الضوئي بتكبير ثابت. يجب أن تظهر ألياف الكولاجين باللون الأزرق ، وألياف العضلات والسيتوبلازم الأحمر ، والنوى زرقاء عميقة.

5. تلطيخ التألق المناعي

  1. إصلاح أقسام الخلايا أو الأنسجة ، وحظرها بنسبة 5٪ BSA لمدة ساعة واحدة لتقليل الارتباط غير المحدد.
  2. استخدم مصلا طبيعيا من نفس أصل النوع مثل الجسم المضاد الثانوي ، وقم بتخفيفه باستخدام PBS بنسبة 1:10 ، ثم قم بإسقاطه على العينة. أغلقه في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة. بعد الختم ، اشطفيه برفق مرتين باستخدام PBS.
  3. احتضان الأقسام بالجسم المضاد الأساسي طوال الليل عند 4 درجات مئوية. بعد الغسيل باستخدام PBS ، أضف الجسم المضاد الثانوي الفلوري واحتضان في الظلام لمدة 1 ساعة.
  4. تلطيخ اللب باستخدام DAPI ، والختم بعامل تركيب مضاد للتبريد ، والمراقبة تحت الفحص المجهري متحد البؤر.

6. الكيمياء المناعية

  1. بعد إزالة الشمع وترطيب أقسام البارافين ، قم بإجراء إصلاح المستضد ومنع البيروكسيديز الذاتي.
  2. حضانة الأجسام المضادة وتطوير اللون: أولا ، قم بحظر المصل الطبيعي ، ثم احتضان الجسم المضاد الأساسي والجسم المضاد الثانوي المسمى HRP بالتسلسل ، وأخيرا ، تطوير لون DAB. التحكم في درجة التفاعل تحت المجهر.
  3. أعد تلطيخ نوى الخلية بالهيماتوكسيلين. بعد الجفاف والشفافية ، أغلق الألواح وراقب الإشارة الموجبة الصفراء البنية تحت المجهر.
    ملاحظة: تحتاج التجربة إلى إعداد عناصر التحكم والتحكم الصارم في شروط الاستعادة وتطوير اللون.

7. الكشف عن التحلل التلقائي

  1. الاستزراع المشترك RAW264.7 البلاعم مع جراثيم المبيضات البيضاء بنسبة مناسبة (10: 1) ، واحتضان عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون2 لمدة 4 ساعات ، 8 ساعات ، 12 ساعة ، 16 ساعة ، 20 ساعة ، 24 ساعة ، 28 ساعة ، 32 ساعة ، 36 ساعة ، 40 ساعة ، 44 ساعة ، و 48 ساعة لإنشاء نموذج البلعمة.
  2. اغسل ثلاث مرات باستخدام PBS المبرد مسبقا لإزالة الجراثيم غير البلعمة.
  3. أولا ، قم بحظر العينات بنسبة 5٪ BSA لمدة 30 دقيقة. بعد ذلك ، احتضن على التوالي بالجسم المضاد الأساسي ضد LC3 (تخفيف 1: 200) في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة ، متبوعا بالجسم المضاد الثانوي المسمى Alexa Fluor 488 في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة.
  4. أضف مسبار الليزوزوم الأحمر Lyso-Tracker Red مباشرة إلى الخلايا لتصور توطين الليزوزومات. أخيرا ، قم بتلطيخ النوى باستخدام DAPI (1 ميكروغرام / مل) لمدة 5 دقائق.
    ملاحظة: يجب إجراء عملية العملية بأكملها في الظلام لضمان التحكم بدقة في وقت الحضانة وتركيز الجسم المضاد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في البداية ، قمنا بتقييم التغيرات المرضية في عضلة القلب بشكل منهجي الناجمة عن جرعات مختلفة من CAWS في الفئران. لم تلاحظ أي وفيات في المجموعة الضابطة من برنامج التقويم التلفزيوني ، ومجموعة CAWS 4 مجم ، ومجموعة CAWS 8 مجم (ن = 20 في كل مجموعة). في المقابل ، كانت الاستجابة الالتهابية في مجموعة 4 مجم خفيفة ولم تفي بمتطلبات النمذجة. كان معدل الوفيات أعلى في مجموعة 12 مجم CAWS (9/20 ، 45٪) ، وحدثت الوفيات من اليوم الثالث إلى اليوم العاشر بعد الحقن. تشير هذه الن...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعد تمدد الأوعية الدموية في الشريان التاجي (CAA) وتليف عضلة القلب في KD من الأسباب الرئيسية لأحداث القلب والأوعية الدموية طويلة الأمد. على الرغم من التقدم المحرز في علاج المرحلة الحادة ، لا يزال ما يقرب من 5٪ من المرضى يصابون ب CAA المستمر28،29. لا تزال آلية هذا التغيير المرضي المتأخر غير واضحة ، وهناك حاجة ملحة للنماذج الحيوانية للكشف عن عمليتها الديناميكية30. نظرا لعينات أنسجة القلب المحدودة للغاية لمرضى...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

شكرا لأعضاء الفريق على دعمهم ومساهمتهم في هذه التجربة. تم دعم البحث من خلال المشاريع التالية: المشروع العام لصندوق التنمية للمستشفى التابع لجامعة Xuzhou الطبية (XYFM202234) ومشروع العلوم الطبيعية المتخصصة في حياة وصحة مدينة Huai'an (2023KX0006).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
جسم مضاد ثانوي للماعز لIgG Alexa Fluor 488أبكامAB15081جسم مضاد ثانوي للماعز لIgG Alexa Fluor 488
الحجرة اللاهوائيةثيرمو ساينتفيكثيرمو ساينتفيكالحجرة اللاهوائية
أزرق أنيلينسولاربيولوجياG3668أزرق أنيلين
ضد LC3أبكامab192890الجسم المضاد الأساسي ضد LC3
خزانة السلامة البيولوجيةثيرمو ساينتفيك1500خزانة السلامة البيولوجية
جيش صرب البوسنهسولاربيولوجياA8020جيش صرب البوسنه
الكانديدا ألبكانس (السلالة)NBRC1385الكانديدا ألبكانس (السلالة)
CD3eبكالوريوس علوم الحيوية561827قرص CD3e للعبة FITC Hamster المضادة للفئران (145-2C11)
CD86بكالوريوس علوم الحيوية105013CD86
CD8aبكالوريوس علوم الحيوية100713CD8a
حاضنة زراعة الخلاياثيرمو ساينتفيك311حاضنة زراعة الخلايا
الطرد المركزيثيرمو ساينتفيكST4R بلسالطرد المركزي
المجهر الكونفوكالأوليمبوسIX73المجهر الكونفوكال
DAPIبيوتايم بيوتكنولوجي  P0131-25 ملDAPI
DMEMجيبكو11965126DMEM
آلة التضمينبي إس جي الطبيةBM450Aآلة التضمين
إيوسينسولاربيولوجيا  G1100إيوسين
F4/80بكالوريوس علوم الحيوية123109F4/80
FBSجيبكو16000044FBS
فورمالدهيدسولاربيولوجيا  P1110فورمالدهيد
جهاز تجفيف الأنسجة الأوتوماتيكي بالكامللايكا بيوسيستمزASP3005جهاز تجفيف الأنسجة الأوتوماتيكي بالكامل
شرائح المجهر الزجاجيسيتوتست250124A1شرائح المجهر الزجاجي
H& صبغة Eبيوتايم بيوتكنولوجي  C0105MH& صبغة E
طقم IHCتقنية الأبسين الحيويةABS996-5mlطقم IHC
مسبار LC3بيوتايم بيوتكنولوجي  C3018Mمسبار LC3
شفرات ميكروتوم منخفضة الارتفاعثيرمو فيشر3052835شفرات ميكروتوم منخفضة الارتفاع
مسبار ليزوسومبيوتايم بيوتكنولوجي  C1046مسبار ليزوسوم
قلم التحديدديليSK109قلم التحديد
صبغة ماسونبيوتايم بيوتكنولوجي  C0189Mصبغة ماسون
ميكروتوملايكا بيوسيستمزقطع النواة النسيجيةميكروتوم
علكة محايدةسولاربي  G8590علكة محايدة
NK1.1بكالوريوس علوم الحيوية561117NK1.1
المجهر البصرينيكوننيكونالمجهر البصري
بارافينسولاربيولوجيا  YA0012بارافين
شمع البارافينسولاربيولوجياYA0012شمع البارافين
برنامج تلفزيونيسولاربيولوجياP1020برنامج تلفزيوني
حمض الفوسفوموليبدسولاربيولوجياG3472حمض الفوسفوموليبد
VDAC1أبكامab34726مضاد VDAC1

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jone, P. -N., et al. Update on diagnosis and management of Kawasaki disease: A scientific statement from the American Heart Association. Circulation. 150 (23), e481-e500 (2024).
  2. Goel, A. R., Yalcindag, A. An update on Kawasaki disease. Curr Rheumatol Rep. 27 (1), 4(2024).
  3. Sapountzi, E., et al. disease: An update on genetics and pathophysiology. Genet Test Mol Biomarkers. 28 (9), 373-383 (2024).
  4. Beltran, J. V. B., Lin, F. -P., Chang, C. -L., Ko, T. -M. Single-cell meta-analysis of neutrophil activation in Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children reveals potential shared immunological drivers. Circulation. 148 (22), 1778-1796 (2023).
  5. Assempoor, R., et al. Different antithrombotic strategies to prevent cardiovascular complications in Kawasaki patients: A systematic review and meta-analysis. BMC Pediatr. 24 (1), 738(2024).
  6. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children: Common inflammatory pathways of two distinct diseases. Rheum Dis Clin North Am. 49 (3), 647-659 (2023).
  7. Li, W., et al. Impact of platelet glycoprotein Ia/IIa C807T gene polymorphisms on coronary artery aneurysms of KD patients. Cardiol Res Pract. 2021, 4895793(2021).
  8. Gorelik, M., et al. American College of Rheumatology/Vasculitis Foundation guideline for the management of Kawasaki disease. Arthritis Care Res (Hoboken). 74 (4), 538-548 (2022).
  9. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease: Pathophysiology and insights from mouse models. Nat Rev Rheumatol. 16 (7), 391-405 (2020).
  10. Li, R., et al. Lactobacillus casei cell wall extract and production of galactose-deficient IgA1 in a humanized IGHA1 mouse model. J Am Soc Nephrol. 36 (1), 60-72 (2025).
  11. Wei, K., et al. Mitochondrial DNA release via the mitochondrial permeability transition pore activates the cGAS-STING pathway, exacerbating inflammation in acute Kawasaki disease. Cell Commun Signal. 22 (1), 328(2024).
  12. Xu, H., et al. Characterization of inflammatory factors and T cell subpopulations in a murine model of Kawasaki disease induced by Candida albicans cell wall extracts (CAWS). Med Sci Monit. 28, e936355(2022).
  13. Miyabe, C., Miyabe, Y., Miyata, R., Ishiguro, N. Pathogens in vasculitis: Is it really idiopathic. JMA J. 4 (3), 216-224 (2021).
  14. Sato, W., Ishibashi, K. -I., Yamanaka, D., Adachi, Y., Ohno, N. Effects of natural and chemically defined nutrients on Candida albicans water-soluble fraction (CAWS) vasculitis in mice. Med Mycol J. 58 (2), E47-E62 (2017).
  15. Takahashi, K., Oharaseki, T., Yokouchi, Y. Histopathological aspects of cardiovascular lesions in Kawasaki disease. Int J Rheum Dis. 21 (1), 31-35 (2018).
  16. Lombardi Pereira, A. P., et al. Long-term cardiovascular inflammation and fibrosis in a murine model of vasculitis induced by Lactobacillus casei cell wall extract. Front Immunol. 15, 1411979(2024).
  17. Tian, G., et al. Voltage-dependent anion channel 1 (VDAC1) overexpression alleviates cardiac fibroblast activation in cardiac fibrosis via regulating fatty acid metabolism. Redox Biol. 67, 102907(2023).
  18. Duong, T. T., Silverman, E. D., Bissessar, M. V., Yeung, R. S. M. Superantigenic activity is responsible for induction of coronary arteritis in mice: An animal model of Kawasaki disease. Int Immunol. 15 (1), 79-89 (2003).
  19. Miller, L. R., et al. Considering sex as a biological variable in preclinical research. FASEB J. 31 (1), 29-34 (2017).
  20. Miyamoto, H. D., et al. Iron overload via heme degradation in the endoplasmic reticulum triggers ferroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury. JACC Basic Transl Sci. 7 (8), 800-819 (2022).
  21. Ding, J., et al. Myeloid-specific blockade of Notch signaling ameliorates nonalcoholic fatty liver disease in mice. Int J Biol Sci. 19 (6), 1941-1954 (2023).
  22. Xie, Z., et al. Atlas of circulating immune cells in Kawasaki disease. Int Immunopharmacol. 102, 108396(2022).
  23. Menikou, S., Langford, P. R., Levin, M. Kawasaki disease: The role of immune complexes revisited. Front Immunol. 10, 1156(2019).
  24. Xu, S., et al. Ketogenic diets inhibit mitochondrial biogenesis and induce cardiac fibrosis. Signal Transduct Target Ther. 6 (1), 54(2021).
  25. Peng, F., et al. 2-APQC, a small-molecule activator of Sirtuin-3 (SIRT3), alleviates myocardial hypertrophy and fibrosis by regulating mitochondrial homeostasis. Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 133(2024).
  26. Lin, L. -C., et al. Mitochondrial quality control in cardiac fibrosis: Epigenetic mechanisms and therapeutic strategies. Metabolism. 145, 155626(2023).
  27. Yuan, M., et al. IP3R1/GRP75/VDAC1 complex mediates endoplasmic reticulum stress-mitochondrial oxidative stress in diabetic atrial remodeling. Redox Biol. 52, 102289(2022).
  28. Kim, J. -J., et al. Sex-specific susceptibility loci associated with coronary artery aneurysms in patients with Kawasaki disease. Korean Circ J. 54 (9), 577-586 (2024).
  29. Anzai, F., et al. Crucial role of NLRP3 inflammasome in a murine model of Kawasaki disease. J Mol Cell Cardiol. 138, 185-196 (2020).
  30. Ohashi, R., et al. Characterization of a murine model with arteritis induced by Nod1 ligand, FK565: A comparative study with a CAWS-induced model. Mod Rheumatol. 27 (6), 1024-1030 (2017).
  31. Wang, Z., et al. Single-cell RNA sequencing of peripheral blood mononuclear cells from acute Kawasaki disease patients. Nat Commun. 12 (1), 5444(2021).
  32. Yang, J., et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 16 (1), 1160(2025).
  33. Niu, B., et al. Protecting mitochondria via inhibiting VDAC1 oligomerization alleviates ferroptosis in acetaminophen-induced acute liver injury. Cell Biol Toxicol. 38 (3), 505-530 (2022).
  34. Shoshan-Barmatz, V., Krelin, Y., Chen, Q. VDAC1 as a player in mitochondria-mediated apoptosis and target for modulating apoptosis. Curr Med Chem. 24 (40), 4435-4446 (2017).
  35. Ham, S. J., et al. Decision between mitophagy and apoptosis by Parkin via VDAC1 ubiquitination. Proc Natl Acad Sci U S A. 117 (8), 4281-4291 (2020).
  36. Prabhu, S. D., Frangogiannis, N. G. The biological basis for cardiac repair after myocardial infarction: From inflammation to fibrosis. Circ Res. 119 (1), 91-112 (2016).
  37. Lin, M., et al. MCM8-mediated mitophagy protects vascular health in response to nitric oxide signaling in a mouse model of Kawasaki disease. Nat Cardiovasc Res. 2 (8), 778-792 (2023).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

VDAC1

مقالات ذات صلة