مقالة بحثية

تحسين تطور التهاب دواعم السن التجريبي بوساطة CD44 في الفئران المصابة بهشاشة العظام بواسطة الجليسيتين

DOI:

10.3791/69067

⸱

أكتوبر 24, 2025

 ,  ,  ,  , 
1The First School of Clinical Medicine, Lanzhou University, 2School of Stomatology Lanzhou University, 3Stomatology Center of Gansu Provincial Hospital, 4Department of Endocrinology, Gansu Provincial Hospital

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يسهل CD44 التسبب في المرض عن طريق تنظيم الشلالات الالتهابية والتمايز العظمي عبر تنشيط مسار PI3K / Akt. يمارس الجليسيتين تأثيرات علاجية على مظاهر هشاشة العظام المصاحبة (OP) + التهاب دواعم السن (PD) من خلال التوهين المستهدف للإشارات بوساطة CD44.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يوضح هذا التحقيق المحددات الجزيئية الحرجة المرتبطة بالاعتلال المشترك لهشاشة العظام (OP) والتهاب دواعم السن (PD) من خلال التنميط البروتيني ، مع تحديد الوظيفة التنظيمية ل CD44 في التهاب دواعم السن التجريبي في نموذج الفئران OP. تضمنت المرحلة الأولى جمع عينات مصل الدم من المرضى الذين يعانون من OP + PD (ن = 3) والضوابط الصحية (ن = 6) الذين يخضعون لتقييمات صحية روتينية في مؤسستنا لتحليل البروتين المقارن. تم إجراء التحقق الانتقالي اللاحق للجينات المعبر عنها تفاضليا (DEGs) وشلالات الإشارات المرتبطة بها عبر العينات السريرية ونماذج الفئران OP + PD. لتوصيف دور CD44 ميكانيكيا في تطور مرض باركنسون في ظل ظروف هشاشة العظام ، تم إنشاء نموذج الفئران OP من خلال استئصال المبيض الثنائي ، متبوعا بتحريض PD التجريبي عن طريق وضع الربط. تضمنت التقييمات الشاملة التغيرات النسيجية عن طريق تلطيخ الهيماتوكسيلين يوزين ، وتحليل العظام المعمارية المجهرية في المنطقة الضرسية الأولى للفك العلوي باستخدام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق ، وتقييم التنشيف المناعي لمكونات مسار الفوسفينوسيتيد -3-كيناز (PI3K) / AKT. تم تنفيذ الفحص الدوائي للشبكة المتوازية إلى جانب محاكاة الإرساء الجزيئي لتحديد المكونات النشطة بيولوجيا من حشيشة الملاك سينينسيس ذات الإمكانات العلاجية. حدد الاستجواب البروتيني CST3 و A2M و CD44 و CDH13 و CETP و VWF كوسطاء ممرضين مرشحين في التسبب في OP + PD. في أيدينا ، كشف تحليل تخصيب مجموعة الجينات أن إشارات PI3K / Akt تعمل كوسيط رئيسي لتطور مرض OP + PD. أكد التحقق المستند إلى تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي الكمي تنظيما كبيرا ل CD44 في كل من مجموعات OP + PD السريرية والتجريبية. أعاد التعديل في الجسم الحي عن طريق قمع CD44 بشكل كبير سلامة أنسجة اللثة ، وتقليل تسلل الخلايا الالتهابية ، وتعزيز البنية الدقيقة للعظام السنخية في فئران OP ، بالتزامن مع تثبيط مسار PI3K / Akt. كشف علم الأدوية الشبكي عن الجليسيتين كمادة كيميائية نباتية أساسية نشطة بيولوجيا في حشيشة الملاك ، مع تحديد CD44 كهدف جزيئي مركزي. قام الجليسيتين بتحسين بنية العظام السنخية في فئران OP + PD ، مما يزيد من كسر حجم العظام (BV / TV) ، وسمك التربيق (Tb.Th) ، وكثافة المعادن في العظام (BMD) ، وتقليل العدد التربيقي (Tb.N) ، ونسبة حجم سطح العظام إلى العظام (BS / BV) ، مما يشير إلى جودة عظام أكثر صحة ، تعزى ميكانيكيا إلى توهين محور إشارات CD44.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التهاب دواعم السن (PD) هو مرض ميكروبي معقد ومختلط ناتج عن ترسب الأغشية الحيوية المرضية في التلم اللثوي1. يتميز بعدم التوازن في البيئة البيئية الدقيقة التي تؤدي إلى سلسلة التهابية مرضية داخل المضيف ، مما يؤدي في النهاية إلى ضرر تدريجي لا رجعة فيه للأملاط ورباط اللثة والعظم السنخي ، وهي مكونات لنظام التعلق اللثة. يمكن أن يؤدي ذلك إلى ارتخاء الأسنان أو حتى فقدانها2. تم توحيد الكمية من أجل قابلية المقارنة، وتشير أحدث البيانات الوبائية3 إلى أن أكثر من 1.066 مليار شخص على مستوى العالم يعانون من التهاب دواعم السن الوخيم، مع انتشار موحد حسب العمر يبلغ حوالي 12.5٪، مما يسلط الضوء على تباين كبير بين السكان الدوليين.

هشاشة العظام (OP) ، وهو مرض عظمي جهازي ، يتميز بتدهور كبير في البنية المجهرية للعظام وفقدان منهجي لكتلة العظام4،5. يزداد خطر الإصابة بالكسور بشكل كبير بسبب هذا الضعف الهيكلي ، خاصة عند كبار السن. والجدير بالذكر أن الأشخاص الذين تبلغ أعمارهم 65 عاما فما فوق في اليابان لديهم معدل انتشار أعلى لأمراض اللثة مقارنة بالبالغين الذين تتراوح أعمارهم بين 30 و 64 عاما. النساء بعد انقطاع الطمث لديهن معدل أعلى للإصابة بأمراض اللثة وغالبا ما يعانين من مشاكل صحية أخرى6،7. وتتوقع الدراسة أنه من عام 2005 إلى عام 2025، سيزداد عبء المرض بأكثر من 50٪، مع توقع أن ترتفع التكلفة الاقتصادية من 17 مليار دولار إلى 25 مليار دولار. وتتوقع الدراسة أنه من عام 2005 إلى عام 2025، سيزداد عبء المرض بأكثر من 50٪، مع توقع أن ترتفع التكلفة الاقتصادية من 17 مليار دولار إلى 25 مليار دولار. يسلط هذا الاتجاه الضوء على التأثير الاجتماعي والاقتصادي الكبير لأمراض اللثة هذه. بالإضافة إلى ذلك ، في المرضى الإناث المصابين بأمراض اللثة والتهاب اللثة ، هناك علاقة إيجابية واضحة بين مدة المرض ومزمنه وزيادة المخاطر الصحية8.

أشارت الدراسات السابقة إلى أن OP قد يعزز تطور مرض باركنسون والعكس صحيح بسبب عوامل الخطر الشائعة لكلا المرضين ، مثل الشيخوخة والتدخين وعدم كفاية تناول الكالسيوم وفيتامين د. في الإناث بعد انقطاع الطمث ، يمكن أن يكون OP الشديد مصحوبا بانخفاض محتوى معادن الفك السفلي ، والذي قد يترافق مع مستويات نقصية من ارتباط اللثة9. لقد ثبت أن انخفاض كثافة العظام المرتبط بالبروتوكول الاختياري قد يسرع ارتشاف العظام السنخية الناجم عن مرض باركنسون ، وبالتالي يفضل غزو مسببات أمراض اللثة10. من بين مجموعة من التحديات الصحية المرتبطة بالتغير العمري والفسيولوجي ، تبرز PD و OP بشكل خاص مع تسارع شيخوخة سكان العالم والزيادة الكبيرة في عدد النساء في سن اليأس. لذلك ، فإن توضيح المؤشرات ذات الصلة وارتباطاتها له أهمية حاسمة للوقاية من الأمراض وعلاجها وتقييم التشخيص. بدافع من هذه الجوانب ، استخدمت هذه الدراسة البروتينات لفحص البروتينات الرئيسية ، مع التركيز على إشارات PI3K / Akt بوساطة CD44 ، في تطوير OP + PD ، واستكشاف الأدوار التنظيمية والآليات المحتملة للبروتينات الرئيسية باستخدام نموذج PD التجريبي في فئران OP. مزيد من الفحص للعوامل العلاجية المستهدفة الموجودة في حشيشة الملاك سينينسيس - عشب طبي صيني تقليدي يستخدم على نطاق واسع في الممارسة السريرية لخصائصه المضادة للالتهابات وحماية العظام ، وتم الإبلاغ عنه سابقا للتخفيف من فقدان العظام وتعديل الاستجابات الالتهابية في هشاشة العظام وأمراض اللثة. مسترشدا بعلم الأدوية الشبكي والإرساء الجزيئي ، تم تحديد الجليسيتين على أنه مادة كيميائية نباتية أساسية نشطة بيولوجيا ومرشح عقلاني لتدخل OP + PD.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أجريت جميع التجارب على وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية لرعاية واستخدام المختبر. تمت مراجعة بروتوكول الدراسة والموافقة عليه من قبل لجنة أخلاقيات. تم بذل كل الجهود لتقليل معاناة.

تهدف هذه الدراسة إلى تقييم دور التنظيم بوساطة CD44 لمسار PI3K / Akt في تمايز هشاشة العظام والتقدم الالتهابي أثناء هشاشة العظام المصاحبة والتهاب دواعم السن (OP + PD) وتحديد ما إذا كان الجليسيتين ، وهو مركب نشط بيولوجيا من حشيشة الملاك ، يمكنه تعديل هذه التأثيرات علاجيا. ينبع الأساس المنطقي من الأدلة الناشئة التي تربط الإفراط في التعبير عن CD44 بارتشاف العظام المرضي وعدم التنظيم المناعي في OP + PD11،12،13. من خلال دمج البروتينات ، والنمذجة في الجسم الحي ، وعلم الأدوية الشبكي ، يبحث البروتوكول بشكل منهجي في الآليات الجزيئية والتدخلات العلاجية للتخفيف من تطور المرض14.

استند حجم العينة للتجارب في الجسم الحي إلى الدراسات السابقة وتحليل القوة ، مما أدى إلى n = 6 لكل مجموعة ، مما يضمن قوة إحصائية كافية للكشف عن الاختلافات ذات الدلالة الانتباه (P < 0.05) عبر ظروف العلاج. تم إعطاء الجليسيتين بجرعات 50 مجم / كغ و 100 مجم / كغ ، معلق في 5٪ DMSO في زيت الزيتون ، وتم تسليمه عن طريق التزقيم الفموي اليومي. تمت مراقبة الفئران على مدى 8 أسابيع بعد تحريض مرض باركنسون. استخدم وضع الرباط للحث على التهاب اللثة 5-0 خيوط حريرية ، وتم إجراء استئصال المبيض الثنائي تحت تخدير الصوديوم بنتوباربيتال 0.3٪ (0.5 مل / 100 جم) 15. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء المقايسات الجزيئية ، بما في ذلك RT-qPCR ، والنشاف الغربي ، و ELISA ، باستخدام البروتوكولات16 التي تم التحقق من صحتها ، واتبعت التقييمات النسيجية ، مثل الهيماتوكسيلين يوزين (H & E) وتلوين الميثيلين الأزرق ، الجداول الزمنية المحددة وفترات التلوين.

تم إجراء جميع الإجراءات التجريبية التي تنطوي على الكواشف الكيميائية وعوامل التلوين والعينات البيولوجية باتباع بروتوكولات السلامة الحيوية القياسية لتقليل المخاطر الصحية. تم التعامل مع المواد الخطرة مثل الفورمالين و EDTA والميثيلين الأزرق والفوشين الحمضي باستخدام معدات الحماية الشخصية (PPE) ، بما في ذلك القفازات والأقنعة ونظارات السلامة. تم جمع جميع مواد النفايات، بما في ذلك الكواشف المستخدمة والمستهلكات الملوثة، في حاويات مخصصة للمخاطر البيولوجية والتخلص منها من خلال خدمات التخلص من النفايات الخطرة المعتمدة وفقا لإرشادات السلامة المؤسسية والبيئية. يوضح الشكل 1 سير العمل التجريبي العام.

جمع البيانات السريرية
في دراستنا ، قمنا بجمع وتحليل شامل للبيانات السريرية الأساسية والتاريخ الطبي التفصيلي لثلاثة مرضى OP + PD وستة أشخاص ضابطين ، بما في ذلك العوامل الديموغرافية ونمط الحياة ، بالإضافة إلى الملامح التشريحية والنقيلية. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء تأكيد صارم لنتيجة اختبار عدوى فيروس الورم الحليمي البشري (إيجابية أو سلبية). تم تسجيل مرحلة التقدم أو نمط تكرار الآفات النقيلية بالتفصيل. خلال الأيام السبعة الأولى من العلاج المناعي ، تم جمع عينات دم المرضى بشكل منهجي وتوحيدها ، بما في ذلك المؤشرات الكيميائية الحيوية مثل اختبارات الدم الروتينية. تم إجراء اختبارات الدم الروتينية وفقا للإجراءات القياسية لتقييم المعلمات الرئيسية بدقة مثل الصفائح الدموية والخلايا الليمفاوية والعدلات. تم قياس الألبومين المصلي بالتوازي ، وتم تقييم وظائف الكبد من خلال التحليل الكمي لمؤشر تركيز الجلوبيولين.

المرضي
تقييم كثافة المعادن في العظام والتقسيم الطبقي للمشاركين
أجرينا مقارنة منهجية لقياسات كثافة العظام في منطقة أسفل الظهر وعنق الفخذ. تم إجراء جميع الفحوصات من قبل أخصائيي الأشعة ذوي الخبرة في قسمنا ، باستخدام معدات دقيقة لتحديد قيم كثافة العظام بدقة. لضمان جمع العينات الموحدة ، طلب من المشاركين الصيام لمدة 8 ساعات على الأقل قبل أخذ العينات. من خلال دمج بيانات كثافة العظام مع بيانات تقييم اللثة الشاملة ، قمنا بتصنيف الأشخاص بدقة إلى مجموعة هشاشة العظام مع التهاب دواعم السن (OP + PD) أو المجموعة الضابطة الصحية (HC) ، مما يضمن مطابقة نسبة الجنس تماما بين المجموعتين. تشير مطابقة الجنس إلى التوزيع المتساوي للإناث بين OP + PD والمجموعات الضابطة الصحية. ومع ذلك ، تم تضمين المشاركات الإناث فقط في هذه الدراسة للتركيز على هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث. لم يكن هناك أشخاص ذكور في أي من المجموعتين. التزمت الدراسة بالمبادئ التوجيهية الأخلاقية لإعلان هلسنكي، حيث وقع جميع المشاركين على استمارات الموافقة الرسمية المستنيرة ، مما يحمي حقوقهم بشكل كامل.

معلمات التشخيص
تم تعريف هشاشة العظام وفقا للمبادئ التوجيهية الصينية لتشخيص وإدارة هشاشة العظام الأولية (2022) 17 ، مع تحديد عتبات التشخيص عند درجة T ≤ -2.5 الانحرافات المعيارية (SD) لأسفل الظهر (L1-L4) أو BMD في الورك. جاء تنظيم مراحل التهاب دواعم السن في أعقاب ورشة العمل العالمية لتصنيف أمراض اللثة لعام 201818 ، مع اقتصار الإدراج على حالات الدرجة A ، المرحلة الثانية والثالثة. معايير الشمول: الإناث بعد انقطاع الطمث اللواتي تتراوح أعمارهن بين 50 و 65 عاما ، التشخيص المزدوج ل OP و PD الذي يستوفي المعايير المذكورة أعلاه ، وغياب اضطرابات المناعة الذاتية ، وعدم وجود تاريخ من الأورام الخبيثة ، ووظائف القلب والرئة والكبد والكلى الطبيعية. معايير الاستبعاد: رفض مشاركة المريض أو الأسرة ، العلاج الدوائي الأخير (≤6 أشهر) للعلاج الداخلي أو مرض باركنسون.

التنميط البروتيني لعينات المصل
تم جمع عينات مصل من ثلاثة مرضى OP + PD وستة أشخاص ضابطين لتحليل البروتين. تم تحقيق القياس الكمي النسبي للبروتين من خلال الإجراءات القياسية ، وتم تعريف البروتينات المعبر عنها تفاضليا على أنها تلك التي تحتوي على P < 0.05 وتغيير الطية > 1.519.

تحليل تخصيب مجموعة الجينات (GSEA)
تم استخدام GSEA لتحديد مسارات الإشارات الرئيسية غير المنظمة بين مجموعات التحكم و OP + PD. تم تحويل البيانات النسخية الأولية أولا باستخدام تحويل log2 وتطبيعها عبر التطبيع الكمي لإزالة تأثيرات الدفعات. تم فحص مجموعات الجينات ذات الوظائف البيولوجية المتعددة من قاعدة بيانات التوقيعات الجزيئية (MSigDB) ، وتم تقييم الدلالة الإحصائية باستخدام اختبار مجموع رتبة ويلكوكسون غير البارامتري. تم الإبلاغ عن نتائج التخصيب باستخدام درجات التخصيب الطبيعية ومعدلات الاكتشاف الخاطئ (FDR < 0.25).

تحليل شبكة التعبير المشترك للجينات المرجحة (WGCNA)
تم استخدام WGCNA لتحديد وحدات الجينات المرتبطة بشكل كبير بالأنماط الظاهرية OP + PD. تم اختيار قوة عتبة ناعمة تبلغ 12 لتحقيق طوبولوجيا شبكة خالية من المقاييس (R2 > 0.85) ، وتم استخدام تحليل ارتباط بيرسون لتقييم العلاقات بين الجينات الذاتية للوحدة والسمات السريرية. تم إجراء تحليلات الإثراء الوظيفي للكشف عن المسارات البيولوجية ذات الصلة في وحدات مترابطة بشدة.

إنشاء نماذج الفئران هشاشة العظام الناجمة عن استئصال المبيض
شملت هذه الدراسة 116 أنثى فئران من الدرجة SPF. قبل التجارب ، تم إيواء في ظل ظروف درجة حرارة ورطوبة خاضعة للرقابة لمرحلة التكيف لمدة 7 أيام ، تم خلالها إعطاؤها طعام القوارض القياسي والماء المقطر. اتبعت جميع إجراءات التعامل مع بدقة البروتوكولات الأخلاقية المعتمدة من قبل لجنة الأخلاقيات في مركز العلوم الصحية بجامعة شيان جياوتونغ ، بموجب معرف الموافقة 0609. تم تسجيل الدراسة تحت رقم المشروع [2024-054].

البروتوكول الجراحي لاستئصال المبيض الثنائي (OVX):
تم تخدير الفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق بنسبة 0.3٪ من الصوديوم بنتوباربيتال (0.5 مل / 100 جم من وزن الجسم). تم إزالة الشعر من الفراء الظهري جراحيا ، وتم وضع في حالة استلقاء ظهرية على منصة جراحية ساخنة ومعقمة. بعد التحضير المعقم بنسبة 75٪ من الإيثانول ، تم إجراء شقوق ثنائية فقرية (1 سم جانبي للعمود الفقري) على مستوى وسادات الدهون الكلوية. تم إخراج الجراب المبيض ، وتم ربط قناة البيض بالقرب من المبيض باستخدام خيوط حريرية 5-0 ، تليها استئصال المبايض الثنائية ، والأنسجة الدهنية المرتبطة بها ، وهياكل القنوات المبويضة الجزئية. تم إغلاق طبقات اللفافة العضلية والجلدية بالتتابع مع 4-0 خيوط قابلة للامتصاص. تم إجراء التعقيم بعد الجراحة باستخدام 75٪ إيثانول.

ضوابط جراحة الوهم:
خضعت الفئران التي يتم تشغيلها بواسطة الوهم لخطوات إجرائية متطابقة ، بما في ذلك التعرض للمبيض واستئصال الأنسجة الدهنية حول محيط الوريوس ، دون استئصال المبيض.

إدارة ما بعد الجراحة:
تم تسهيل التعافي بعد التخدير باستخدام وسادات تسخين المياه المتداولة حتى الخروج الكامل. تم الحفاظ على التسكين عن طريق إعطاء الكاربروفين تحت الجلد (5 ملغ/كغ يوميا) لمدة 72 ساعة بعد الجراحة، مع استكمال البنسلين G الوقائي (50,000 وحدة دولية/كغ) لمدة 48 ساعة للوقاية من التهابات موقع الجراحة. تمت مراقبة كتلة الجسم أسبوعيا خلال مرحلة نمذجة هشاشة العظام التي استمرت 6 أسابيع ، مع تطبيق معايير الاستبعاد على التي تظهر >20٪ من فقدان الوزن أو الضائقة السريرية.

بناء نموذج حيواني تجريبي OP + PD
تم تطوير نموذج PD التجريبي بناء على نموذج OP الذي تم إنشاؤه مسبقا. لتجنب كسر الخيط وضمان الإدخال السلس بين الأضراس ، تم استخدام خياطة حريرية 5-0 للربط. أثناء العملية ، تم سحب زاوية فم الفأر برفق ، وتم إمساك الخيط بملقط ووضعه بعناية في منطقة عنق الرحم بين الأضراس الأولى والثانية. تم الحفاظ على السلك وطرف الملقط مستويا لتقليل الصدمات التي تصيب الغشاء المخاطي الشدقي ، وبالتالي تقليل خطر النزيف أو الوفاة. سحبت اليد الأخرى برفق الطرف المقابل للسلك ، ووجهته تدريجيا إلى الفراغ بين الأضراس. بمجرد وضع الخيط بشكل صحيح ، تم تثبيت قسم بالقرب من جانب الخق بملقط وتمريره بعناية بين الأضراس الثانية والثالثة باستخدام نفس التقنية. يضمن الجر اللطيف لأسفل المرور السلس للحرير. أخيرا ، تم ربط الخيط بإحكام حول الضرس الثاني في منطقة منتصف عنق الرحم. سمح للفئران لاحقا بالتعافي.

تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي الكمي (RT-qPCR)
يسرد جدول المواد تسلسلات أولية أمامية وعكسية محددة لجينات RT-qPCR التي تستهدف الالتهاب والتخثر والتصاق الخلايا ، بما في ذلك CD44 و CDH13 و VWF و GAPDH. يتم تلخيص التسلسلات التمهيدي المستخدمة لتحليل RT-qPCR في الجدول 1.

تحليل اللطخة الغربية
تمت دراسة خصائص التعبير لبروتينات مسار الإشارات الرئيسية في أنسجة اللثة بشكل منهجي باستخدام النشاف الغربي. خضعت أنسجة اللثة لتجانس التجميد والذوبان باستخدام المخزن المؤقت RIPA ، الذي يحتوي على مثبطات البروتياز والفوسفاتيز ، لاستخراج البروتين الكلي بكفاءة. بعد الطرد المركزي عالي السرعة (12,000 × جم ، 4 درجات مئوية ، 10 دقائق) لفصل المحلل ، تم استخدام المادة الطافية لقياس تركيز البروتين بدقة باستخدام مجموعة BCA ، مما يوفر بيانات موثوقة للتجارب اللاحقة.

لكل مجموعة تجريبية ، تم تحميل 30 ميكروغرام من البروتين الكلي وفصلها من خلال نظام SDS-PAGE بنسبة 10٪. ثم تم نقل البروتينات المحلولة إلى أغشية PVDF باستخدام طريقة نشاف شبه جافة. لتقليل تداخل الخلفية ، تم حظر الأغشية بحليب جاف خالي الدسم بنسبة 5٪ في درجة الحرارة المحيطة. بعد ذلك ، تم الاحتفاظ بالأغشية عند 4 درجات مئوية في بيئة مستقرة لمزيد من المعالجة.

ثم تم تحضين الأغشية بأجسام مضادة أولية محددة (انظر جدول المواد) لمدة 2 ساعة عند درجة مئوية. في اليوم التالي ، تم استخدام المخزن المؤقت TBST للغسيل الشامل ، ثم تمت معالجة الأغشية بأجسام مضادة ثانوية مقترنة ب HRP عند تخفيف 1: 10,000 لمدة 1.5 ساعة في درجة حرارة الغرفة. تم تنفيذ جميع خطوات الكشف المناعي بما يتفق بدقة مع البروتوكولات الموحدة لضمان اتساق وصحة تحليل مسار الإشارات20.

باستخدام ركائز التلألؤ الكيميائي المحسن (ECL) لالتقاط الإشارات ومعدات التصوير عالية الدقة لتحديد موقع نطاقات البروتين بدقة ، تم تحليل قيم الكثافة البصرية للنطاقات كميا باستخدام برنامج ImageJ. في النهاية ، من خلال المقارنة المنهجية لمستويات التعبير النسبي للبروتينات المستهدفة / β-Actin في كل مجموعة مع المجموعة الضابطة ، تم تقييم درجة التنشيط والتغيرات الديناميكية لمسار PI3K / Akt في ظل تدخلات مختلفة بدقة.

مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)
باستخدام مجموعات ELISA (انظر جدول المواد) ، حققت هذه الدراسة تقديرا كميا دقيقا للسيتوكينات الالتهابية المختلفة ، بما في ذلك TNF-α و IL-6 و IL-1β و IL-4 ، في عينات المصل. كما قام بتقييم تركيزات TRAP5b و ALP و TGF-β كعلامات على نشاط ناقضات العظم. تم تحضين صفيحة 96 بئرا مطلية مسبقا بأجسام مضادة عند 25 درجة مئوية مع عينات مصل مخففة بنسبة 1:10 في PBS لمدة ساعتين ، مما يسمح للمستضدات بالارتباط على وجه التحديد بالأجسام المضادة الملتقطة المجمدة. بعد الحضانة ، تمت إزالة المواد غير المرتبطة عبر ثلاث غسلات باستخدام PBS-T (محلول ملحي مخزن بالفوسفات مع Tween-20). بعد ذلك ، تمت إضافة الأجسام المضادة للكشف المسمى بالبيوتين واحتضانها لمدة ساعة واحدة في نفس درجة الحرارة. بعد ذلك ، تم إدخال ستريبتافيدين-HRP لربط الأجسام المضادة البيوتينيل ، وتم تحضين الخليط لمدة 20 دقيقة إضافية في درجة حرارة الغرفة في ظل ظروف محمية من الضوء. ثم تم إنهاء التفاعل الأنزيمي باستخدام محلول التوقف ، وتم قياس الامتصاص عند 450 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة دقيقة لتحديد تركيزات السيتوكين.

تلطيخ الهيماتوكسيلين والأيوسين (H&E)
تم استخدام الطرق القياسية لإجراء تلطيخ H&E على الأجزاء المدمجة بالبارافين من أنسجة اللثة لتحليل التغيرات المجهرية. تضمنت عملية تحضير العينة التثبيت الأولي في محلول بارافورمالديهايد 4٪ لمدة 24 ساعة ، متبوعا بتجفيف الإيثانول المتدرج (70٪ ، 80٪ ، 95٪ و 100٪) وتطهيره في الزيلين ، وأخيرا التضمين في البارافين لإنتاج أقسام بسمك 4 ميكرومتر21. بعد إزالة الشمع من الزيلين ، تم إعادة ترطيب العينات من خلال تركيزات الإيثانول الهابطة (100٪ إلى 70٪). بدأت عملية التلوين بالغمر لمدة 5 دقائق في الهيماتوكسيلين (مايسنر) ، تليها الشطف تحت الماء الجاري ، والتمايز في الكحول الحمضي بنسبة 1٪ في الإيثانول ، وشطف آخر. ثم تم تلطيخ الأقسام ب 0.5٪ من الإيوزين لمدة 10 ثوان لإكمال البروتوكول.

بعد التلوين ، تم تجفيف الشرائح مرة أخرى في سلسلة إيثانول متدرجة ، وإزالتها في الزيلين ، وإغلاقها بوسط تثبيت. تم إجراء الملاحظات تحت مجهر مجهز بأهداف 10x و 40x للحصول على صور عالية الدقة. قام التحليل النسيجي بتقييم السلامة الهيكلية للنسيج الضام للثة ، وتسلل الخلايا الالتهابية ، ومورفولوجيا ارتشاف العظام السنخية. تم تسجيل مستوى الالتهاب باستخدام مؤشر Loe-Silness المحسن ، حيث قام اثنان من علماء الأمراض بتعمية هوية العينة بتقييم العينات بشكل مستقل عبر مقياس شبه كمي لضمان الموضوعية والتكاثر22.

تلطيخ الميثيلين الأزرق
استخدمت هذه الدراسة طريقة تلطيخ الميثيلين الأزرق على أقسام العظام السنخية الفكية القياسية والمعالجة لتحديد درجة ارتشاف العظام. بدأ الإجراء التجريبي بتثبيت الأنسجة: تم تثبيت أنسجة اللثة في محلول فورمالين محايد بنسبة 10٪ لمدة 24 ساعة ، تليها معالجة إزالة الكلس لمدة 21 يوما في محلول EDTA بنسبة 10٪ (درجة الحموضة 7.4). بعد إزالة الكلس ، تم تضمين العينات في البارافين وتحضيرها في أقسام أنسجة بسمك 4 ميكرومتر ، والتي تم تركيبها بعد ذلك على شرائح سيلانية. تضمنت عملية المعالجة المسبقة للقسم إزالة الشمع من الزيلين ، وترطيب الإيثانول المتدرج ، والحضانة في حمام مائي 60 درجة مئوية. ثم تم تلطيخ الشرائح بمحلول أزرق ميثيلين بنسبة 0.1٪ لمدة 15 دقيقة.

بعد التلوين ، تم غسل الأقسام لمدة 1 دقيقة باستخدام الماء المقطر الذي تم تسخينه مسبقا إلى 60 درجة مئوية ، مما يضمن الإزالة الفعالة للصبغة الزائدة دون الإضرار ببنية الأنسجة. ثم تم تلطيخها ب 0.1٪ فوكسين حامض لمدة 5 دقائق لتعزيز التباين بين هياكل الأنسجة. قدم بروتوكول التلوين هذا تصورا متسقا وموثوقا به للتحليل الكمي لارتشاف العظام السنخية23. أخيرا ، تم تجفيف الشرائح باستخدام الإيثانول المتدرج ، وإزالتها في الزيلين ، وتركيبها. تم تحليل أنسجة العظام الملطخة تحت مجهر المجال الضوئي ، وتم الحصول على صور عالية الدقة لتقييم ارتشاف حافة العظام السنخية بدقة للتقييم المورفولوجي اللاحق.

تحليل التصوير المقطعي المحوسب المجهري (Micro-CT)
تم إجراء المسح المقطعي المحوسب لتقييم التغيرات المجهرية ثلاثية الأبعاد في العظام السنخية للفئران النموذجية OP + PD ، والتي تستهدف على وجه التحديد المنطقة الضرسية الأولى للفك العلوي. بعد 8 أسابيع من المراقبة بعد الجراحة ، تم القتل الرحيم للفئران بشكل إنساني عن طريق استنشاق ثاني أكسيد الكربون2 ، وهي طريقة مناسبة للحفاظ على هياكل الوجه والفكين. ثم تم حصاد عينات الفك العلوي وتثبيتها في 4٪ بارافورمالديهايد عند 4 درجات مئوية لمدة 48 ساعةو 24.

تم إجراء تحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق باستخدام صور DICOM المعاد بناؤها لمنطقة الفك العلوي المستوردة إلى البرنامج عن طريق تحديد مجموعة البيانات المقابلة للعينات الممسوحة ضوئيا. تم تعريف المنطقة القياسية ذات الاهتمام (ROI) يدويا على أنها الجزء الشدقي الوسي الذي يبلغ ثلثه جذر الضرس الأول للفك العلوي من خلال تحديد بنية العظام السنخية على المشاهدات السهمية والإكليلية ، وعادة ما تم تضمين ما يقرب من 50 شريحة متتالية لتغطية المنطقة بالكامل.

لفصل العظام التربيقية عن الأنسجة الرخوة والخلفية المحيطة ، تم تطبيق عتبة كثافة 180-220 ملغم هكتار / سم3 . ثم تم إجراء التجزئة لتوليد بنية ثنائية تمثل العظم التربيقي فقط. تم إجراء التحليل المورفومتري باستخدام وحدة قياس تشكل العظام داخل البرنامج. تم حساب المعلمات تلقائيا ، بما في ذلك جزء حجم العظام (BV / TV) ، وسمك التربيق (Tb.Th) ، والرقم التربيقي (Tb.N) ، ونسبة حجم سطح العظام إلى العظام (BS / BV) ، وكثافة المعادن في العظام (BMD). بعد التحليل ، تم تصدير النتائج العددية كجداول بيانات.

تم استخدام هذه القياسات لتقييم مدى الضرر المجهري في العظام السنخية المرتبطة بالحالة المرضية OP + PD ولتقييم الفعالية العلاجية للجليسيتين في استعادة جودة العظام. سمح هذا النهج بإجراء تقييم كمي عالي الدقة وقابل للتكرار للسلامة الهيكلية في بيئة عظام اللثة ، مما يوفر رؤى مورفولوجية رئيسية لنتائج العلاج.

التنميط الصيدلي الشبكي
للتحقيق بشكل منهجي في المكونات النشطة بيولوجيا للطب الصيني التقليدي (TCM) التي قد تعدل المسارات البيولوجية الرئيسية ذات الصلة بهشاشة العظام المصاحبة والتهاب دواعم السن (OP + PD) ، استخدمت هذه الدراسة نهج علم الأدوية الشبكية لتحليل حشيشة الملاك سينينسيس. تم اختيار هذا النبات استنادا إلى استخدامه التاريخي في الطب الصيني التقليدي لإدارة الاضطرابات المتصلة بالعظام والالتهابات, بما في ذلك الأعراض المرتبطة بهشاشة العظام وأمراض اللثة المزمنة. في مرحلة الفحص المركب ، تم استرداد المكونات النشطة من Angelica sinensis باستخدام قواعد بيانات TCMSP و TCMID [تم نقل تفاصيل قاعدة البيانات إلى ToM] ، وتم تصفيتها باستخدام التوافر البيولوجي عن طريق الفم (OB) ≥ 30٪ وشبه الدواء (DL) ≥0.18 المعيار. تم التنبؤ بالتفاعلات المركبة والهدف باستخدام STITCH ، مع التحقق من صحة الموقع المستهدف عبر DisGeNET و OMIM. تم إجراء تحليل تخصيب المسار باستخدام منصة DAVID 2021 لتحديد مسارات إشارات KEGG التي يحتمل أن يتم تعديلها بواسطة المركبات المختارة. لتصور التفاعلات الجزيئية ، تم إنشاء شبكة "مسار الهدف المركب" بناء على مؤشرات الطوبولوجية (مركزية الدرجة ، مركزية البين). حدد التحليل الجليسيتين ، وهو فلافونويد طبيعي ، كمركب ذو خصائص دوائية مواتية واتصال قوي ب CD44 ، مما يشير إلى أهمية علاجية محتملة في OP + PD. ومع ذلك ، لم تتم الموافقة سريريا على الجليسيتين لعلاج هشاشة العظام أو التهاب دواعم السن. تستند هذه النتائج إلى تنبؤات في السيليكو وتوفر إطارا نظريا لتجارب التحقق من الصحة في الجسم الحي اللاحقة 25.

التحقق من صحة الإرساء الجزيئي
تم استرداد هياكل البروتين ل CD44 (معرف PDB: 1UUH) و PI3K (معرف PDB: 4L23) من بنك بيانات البروتين RCSB (https://www.rcsb.org). تم تحسين هياكل الترابط (الجليسيتين ، الليجوستيليد) من خلال تقليل الطاقة باستخدام مجال القوة الجزيئية. تم إجراء محاكاة الإرساء باستخدام خوارزمية وراثية وفقا للمعلمات التالية: 100 جولة ، وحجم السكان 150 ، و 25×106 تقييمات للطاقة. تم تحديد جيوب الربط بناء على إحداثيات الترابط البلوري (CD44: 20×20×20 Å3; PI3K: 25×25×25 Å3). تم تصنيف وضعيات الإرساء الناتجة حسب طاقة الربط (ΔG ، كيلو كالوري / مول) ، وتم التحقق من صحة قابلية التكاثر باستخدام عتبة جذر متوسط الانحراف التربيعي (RMSD) البالغة <2.0 Å.

التقييم العلاجي للجيسيتين في نماذج الفئران OP + PD
تم الحصول على الجليسيتين (النقاء ≥ 98٪) من مورد كيميائي حيوي معتمد في الدرجة التحليلية للتجارب في الجسم الحي وهو إيسوفلافون طبيعي معروف بوجوده في حشيشة الملاك سينينسيس ، مع خصائص مضادة للالتهابات وواقية العظم26. تم إحداث التهاب دواعم السن العظمي في أنثى C57BL / 6 البالغة من العمر 11 أسبوعا من خلال استئصال المبيض الثنائي (OVX) والتهاب اللثة الناجم عن الربط. تم توزيع الفئران بشكل عشوائي إلى أربع مجموعات (ن = 6 لكل مجموعة):

الوسادة: جراحة وهمية + مركبة (5٪ ثنائي ميثيل سلفوكسيد [DMSO] في زيت الزيتون ، تزقيم الفم اليومي)
OP + PD: نموذج المرض + السيارة
OP + PD + جرعة منخفضة من الجليسيتين (50 مجم / كجم): نموذج المرض + تعليق الجليسيتين في السيارة
OP + PD + جرعة عالية من الجليسيتين (100 مجم / كجم): نموذج المرض + تعليق الجليسيتين في السيارة

التحليل الإحصائي
تم إجراء اختبارات إحصائية استدلالية ، وتم إنشاء تمثيلات البيانات المرئية لإنشاء الرسم البياني وتصور البيانات. تم التعبير عن البيانات العددية كمتوسط ± SD. تم تقييم مقارنات المجموعة من خلال اختبارات t غير المزاوجة ثنائية الذيل ، مع الأخذ في الاعتبار القيم التي تحتوي على &l 0.05 ذات دلالة إحصائية. وضمنت هذه الأساليب متانة البيانات وعززت موثوقية النتائج التحليلية اللاحقة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التنميط البروتيني لمجموعات OP + PD
حدد التحليل البروتيني الكمي للمصل من مرضى OP + PD (ن = 3) والضوابط الصحية (ن = 6) البروتينات غير المنظمة المتورطة في التسبب في المرض. كشف التحليل المقارن عن تسعة بروتينات منخفضة التنظيم (APOL1 ، CST3 ، IGLV3-27 ، IGHV3-33 ، PF4 ، CLEC3B ، SRGN ، C6 ، SELL) وستة بروتينات منظمة (IGLV9-49 ، A2M ، VWF ، CETP ، CD44 ، CDH13) في مصل OP + PD مقابل الضوابط (الشكل 2 أ ، ب). تحليل شبكة التعبير الجيني المشترك المرجح (WGCNA) يحدد وح...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تقترح هذه الدراسة إطارا بحثيا متعديا يجمع بين التنميط البروتيني ، والتحقق من صحة التعبير الجيني ، ونمذجة في الجسم الحي ، وعلم الأدوية الشبكية لاستكشاف الآليات الجزيئية الكامنة وراء الاعتلال المشترك لهشاشة العظام والتهاب دواعم السن (OP + PD). الفرضية المركزية هي أن CD44 يعدل محور إشارات PI3K / Akt ، وبالتالي يؤدي إلى تفاقم فقدان العظام الالتهابي في ظروف OP + PD ، وأن الجليسيتين ، وهو فلافونويد من حشيشة الملاك ، قد يخفف من هذه العملية عن طريق تثبيط CD44. يربط هذا النهج المتكامل بين التسبب الجزيئي وعلم الأ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى أصحاب البلاغ تضارب في المصالح للإعلان.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذه الدراسة من قبل مؤسسة العلوم والتكنولوجيا لصناعة الرعاية الصحية في مقاطعة قانسو ، الصين (المنحة رقم. GSWSKY2020-77) ، ومؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة قانسو (رقم المنحة 25JRRA314 و 21JR7RA620) ، وبرنامج المواهب في مقاطعة قانسو ، وبرنامج أبحاث حاضنة الشباب في مستشفى مقاطعة قانسو (المنحة رقم 23GSSYF-35).

مساهمات المؤلف:
أجرى جينغ تشي غالبية العمل التجريبي وتحليل البيانات. ساهم Yunqing Pang في جمع العينات وتنظيم البيانات والتحليل الإحصائي. ساعد يو وانغ في التصميم التجريبي وقدم الدعم الفني. أشرف داوي هو وجينغ وانغ بشكل مشترك على المشروع ، وراجعوا المخطوطة بشكل نقدي للمحتوى الفكري المهم ، ووافقوا على النسخة النهائية. قرأ جميع المؤلفين ووافقوا على المخطوطة النهائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
أطقم ELISAشنغهاي إنزيم لينك التكنولوجيا الحيويةالقياس الكمي للسيتوكينات الالتهابية (TNF- & alpha ؛ ، IL-6 ، IL-1 &beta ؛ ، IL-4 ، ALP ، TRAP5b ، TGF- & beta ؛ ، VWF ، CD44)
طقم استخراج الحمض النووي الريبيشنغهاي يشنغ للتكنولوجيا الحيويةاستخراج الحمض النووي الريبي في الدم
طقم تخليق (كدنا)شنغهاي يشنغ للتكنولوجيا الحيويةالنسخ العكسي عالي النشاط
طقم qPCRشنغهاي يشنغ للتكنولوجيا الحيويةتضخيم PCR الكمي
الأجسام المضادة (الأولية / الثانوية)تكنولوجيا إشارات الخلية / Abcam / هانغتشو Xianli التكنولوجيا الحيوية / بكين تشونغشان Jinqiao التكنولوجيا الحيويةالأجسام المضادة الأولية المحددة; &beta ؛ الأكتين الرقابة الداخلية ؛ الماعز المضادة للأرانب IgG الأجسام المضادة الثانوية
كواشف الأنسجةبيوتايم للتكنولوجيا الحيوية / شنغهاي شانغشانغالهيماتوكسيلين &ndash ؛ تلطيخ اليوزين والميثيلين الأزرق
الركيزة الكيميائية المضيئةياكين للتكنولوجيا الحيويةكشف اللطخة الغربية
نظام التصوير المقطعي المحوسبسكانكو ميديكال إيه جي (فيفا CT40)تحليل البنية المجهرية عالية الدقة
نظام LC-MS/MSثيرمو ساينتفيك كيو إكستيكتيف HF-Xتحليل البروتين عالي الدقة
البرمجيات: MaxQuant (v2.1.0) ، أندروميدامعهد برودالمعالجة المسبقة لبيانات البروتينات
البرنامج: GSEA (الإصدار 4.3.2)معهد برودتحليل إثراء المسار
البرنامج: R (الإصدار 4.0.3) ، WGCNA (الإصدار 1.73) ، خريطة الغش (الإصدار 1.0.12)مؤسسة Rالحوسبة الإحصائية ، تحليل الشبكة ، التجميع ، خرائط الحرارة
البرنامج: AutoDock 4.2 ، AutoDockTools 1.5.7معهد سكريبس للأبحاثالإرساء الجزيئي وتعريف الشبكة
البرنامج: افتح بابل 3.1.1مشروع افتح بابلتحسين هيكل الترابط
البرنامج: PyMOL 2.5.2Schr & ouml; دينجر ، ذ م متصور الإرساء الجزيئي

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Demmer, R. T., Papapanou, P. N. Epidemiologic patterns of chronic and aggressive periodontitis. Periodontol 2000. 53, 28-44 (2000).
  2. Kumar, S. Evidence-based update on diagnosis and management of gingivitis and periodontitis. Dent Clin. 63 (1), 69-81 (2019).
  3. Nascimento, G. G., et al. Burden of severe periodontitis and edentulism in 2021, with projections up to 2050: The Global Burden of Disease 2021 study. J Periodontal Res. 59, 823-867 (2024).
  4. Genco, R. J. Current view of risk factors for periodontal diseases. J Periodontol. 67 (10 Suppl), 1041-1049 (1996).
  5. Eke, P. I., et al. Periodontitis in US adults: National Health and Nutrition Examination Survey 2009-2014. J Am Dent Assoc. 149 (7), 576-588 (2018).
  6. Reginster, J. Y., Burlet, N. Osteoporosis: a still increasing prevalence. Bone. 38 (2 Suppl 1), S4-S9 (2006).
  7. Kawai, M., Mödder, U. I., Khosla, S., Rosen, C. J. Emerging therapeutic opportunities for skeletal restoration. Nat Rev Drug Discov. 10 (2), 141-156 (2011).
  8. Burge, R., et al. Incidence and economic burden of osteoporosis-related fractures in the United States, 2005-2025. J Bone Miner Res. 22 (3), 465-475 (2007).
  9. Groen, J. J., Duyvensz, F., Halsted, J. A. Diffuse alveolar atrophy of the jaw (non-inflammatory form of paradental disease) and pre-senile osteoporosis. Gerontol Clin. 2, 68-86 (1960).
  10. Armitage, G. C. Development of a classification system for periodontal diseases and conditions. Northwest Dent. 79 (6), 31-35 (2000).
  11. Dong, N., Yang, Z. Glycitein exerts neuroprotective effects in rotenone-triggered oxidative stress and apoptosis in a Parkinson's disease cell model. Acta Biochim Pol. 69 (2), 447-452 (2022).
  12. Zang, Y. Q., et al. Glycitein induces ROS-dependent apoptosis and G0/G1 arrest via MAPK/STAT3/NF-κB pathway in human gastric cancer cells. Drug Dev Res. 80 (5), 573-584 (2019).
  13. Dong, W., et al. PTX3 promotes osteogenic differentiation by triggering HA/CD44/FAK/AKT feedback loop in inflammation. Bone. 154, 116231(2022).
  14. Thanee, M., et al. CD44 modulates metabolism and ROS-Akt signaling promoting cholangiocarcinoma progression. PLoS ONE. 16 (3), e0245871(2021).
  15. Lee, J. H., et al. Standardized micro-CT assessment for alveolar bone in preclinical models of periodontitis. Bone Rep. 17, 101624(2022).
  16. Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections. CSH Protoc. 2008, (2008).
  17. Chinese Society of Osteoporosis and Bone Mineral Research. Guidelines for the diagnosis and treatment of primary osteoporosis. Chin J Osteoporos Bone Miner Res. 15 (6), 573-611 (2022).
  18. Guo, S., Liu, Q., Ding, Y. A brief introduction of the new classification scheme for periodontal and peri-implant diseases and conditions. Int J Stomatol. 46 (2), 125-134 (2019).
  19. Wang, H., et al. Therapeutic potential of Angelica sinensis in bone metabolic disorders: Evidence from network pharmacology and experimental models. Phytomedicine. 102, 154200(2022).
  20. Wu, Y., et al. Modified methylene blue-acid fuchsin staining enhances bone resorption assessment in periodontal models. Front Physiol. 13, 856712(2022).
  21. Tian, L., et al. QizhiKebitong Formula ameliorates diabetic osteoporosis via PI3K/Akt/NF-κB pathway. Biomed Res Int. 2022, 4469766(2022).
  22. Hoare, A., Soto, C., Rojas-Celis, V., Bravo, D. Chronic inflammation as a link between periodontitis and carcinogenesis. Mediators Inflamm. 2019, 1029857(2019).
  23. Wang, L., et al. Role of PI3K in bone resorption of apical periodontitis. BMC Oral Health. 22 (1), 345(2022).
  24. Johnston, C. B., Dagar, M. Osteoporosis in older adults. Med Clin North Am. 104 (5), 873-884 (2020).
  25. Tabatabaei, M. S., Ahmed, M. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Cancer Cell Biology: Methods Mol Biol. , Springer US. New York, NY. 115-134 (2022).
  26. Huang, J., et al. Standardized histological assessment in periodontal models. J Tissue Eng. 13, 20417314221090381(2022).
  27. Wang, R. P., et al. IL-1β and TNF-α play an important role in modulating the risk of periodontitis and Alzheimer's disease. J Neuroinflammation. 20 (1), 71(2023).
  28. Mesrati, M. H., et al. CD44: a multifunction mediator of cancer progression. Biomolecules. 11 (12), 1850(2021).
  29. Sun, C., et al. A2M inhibits inflammatory mediators of chondrocytes by blocking IL-1β/NF-κB pathway. J Orthop Res. 41 (1), 241-248 (2023).
  30. Shao, Y., et al. CDH13 is a prognostic biomarker and a potential therapeutic target for patients with clear cell renal cell carcinoma. Am J Cancer Res. 12 (10), 4520-4544 (2022).
  31. Li, Z., Du, Y. CST3 alleviates bilirubin-induced neurocyte damage by promoting autophagy. Transl Neurosci. 14 (1), 20220314(2023).
  32. Chen, Z. Z., Gerszten, R. E. Metabolomics and proteomics in type 2 diabetes. Circ Res. 126 (11), 1613-1627 (2020).
  33. Dubin, R. F., Rhee, E. P. Proteomics and metabolomics in kidney disease, including insights into etiology, treatment, and prevention. Clin J Am Soc Nephrol. 15 (3), 404-411 (2020).
  34. Wu, P. Y., et al. Morinda officinalis polysaccharide regulates rat bone mesenchymal stem cell osteogenic-adipogenic differentiation in osteoporosis via miR-21 and PI3K/AKT pathway activation. Kaohsiung J Med Sci. 38 (7), 675-685 (2022).
  35. Kang, W. Q., et al. Inhibitory effects of prepared Radix Rehmanniae combined with Radix Astragali on osteoporosis via PI3K-Akt pathway. Acta Cir Bras. 37 (11), e371101(2023).
  36. Wang, S., et al. miR-21 promotes osteoclastogenesis via activation of PI3K/Akt signaling by targeting PTEN in RAW264.7 cells. Mol Med Rep. 21 (3), 1125-1132 (2020).
  37. Zhang, Y., et al. PSMC6 promotes osteoblast apoptosis by inhibiting PI3K/AKT signaling in ovariectomy-induced osteoporosis. J Cell Physiol. 235 (7-8), 5511-5524 (2020).
  38. Xu, Y., et al. Epimedin C alleviates glucocorticoid-induced suppression of osteogenic differentiation via PI3K/AKT/RUNX2 signaling. Front Pharmacol. 13, 894832(2022).
  39. Go, X., et al. Glipizide alleviates periodontitis pathogenicity by inhibiting angiogenesis, osteoclastogenesis and M1/M2 macrophage ratio. Inflammation. 46 (5), 1917-1931 (2023).
  40. Cui, J., et al. Triptolide prevents bone loss by inhibiting osteoclastogenesis through PI3K-AKT-NFATc1 pathway. J Cell Mol Med. 24 (11), 6149-6161 (2020).
  41. Chen, X., et al. LY3023414 inhibits osteogenesis and osteoclastogenesis through PI3K/Akt/GSK3 signaling pathway. Bone Joint Res. 10 (4), 237-249 (2021).
  42. Hao, S., et al. Identification of key immune genes of osteoporosis using bioinformatics and machine learning. Front Endocrinol. 14, 1118886(2023).
  43. Gong, L., et al. Modified inflammatory scoring systems for periodontal tissue. Sci Rep. 11 (1), 18701(2021).
  44. Zhang, Y., et al. Establishment of ovariectomy-induced osteoporosis model and its application in oral bone loss studies. Bone Rep. 15, 101113(2021).
  45. Eke, P. I., et al. Periodontitis in U.S. adults: National Health and Nutrition Examination Survey. J Periodontol. , (2022).
  46. Guo, X., et al. Integrating network pharmacology and experimental evaluation to investigate the therapeutic mechanism of herbal compounds in periodontitis. Heliyon. 10 (5), e37942(2024).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

CD44 PI3K Akt Angelica Sinensis

مقالات ذات صلة