Research Article

يعزز PAK5 تطور سرطان الخلايا الحرشفية في المريء الذي يكشف عنه التنميط النصي

DOI:

10.3791/69085

⸱

December 16th, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Cancer Center, The Second Affiliated Hospital of Hainan Medical University, 2Department of Radiology, The Second Affiliated Hospital of Hainan Medical University, 3Department of Pathology, The Second Affiliated Hospital of Hainan Medical University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تقدم هذه الدراسة طريقة لتقييم وظيفة PAK5 في ESCC، مما يظهر أن التعبير الزائد عنه يتنبأ بتوقعات سيئة ويعزز تقدم الورم عبر محور إشارة PAK5-GAREM1.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

سرطان الخلايا الحرشفية المريء (ESCC) هو سبب رئيسي للوفيات المرتبطة بالسرطان على مستوى العالم، وخاصة في آسيا. نظرا لعدم ظهور الأعراض المبكرة، يتم تشخيص معظم المرضى في مراحل متقدمة، مما يحد من فعالية العلاج ويزيد من سوء التشخيص. فهم الآليات الكامنة وراء ESCC وتحديد العلامات الحيوية أو الأهداف العلاجية أمر بالغ الأهمية لتحسين نتائج المرضى. تم تورط كيناز بروتين P21 المنشط 5 (PAK5)، وهو عضو في عائلة كيناز البروتين المنشط بالميتوجين، في العديد من الأورام الخبيثة من خلال تنظيم دورة الخلية والهجرة والغزو. ومع ذلك، لا يزال دوره في ESCC غير واضح. قامت هذه الدراسة بتقييم تعبير PAK5 في أنسجة ESCC والأنسجة الطبيعية المجاورة باستخدام الكيمياء المناعية النسية، وأجرت تحليل بقاء Kaplan-Meier لتقييم العلاقة بين PAK5 والتشخيص. تم إنشاء نماذج خلايا ESCC التي تحتوي على تعبير مفرط وتقليل PAK5، وأجريت اختبارات وظيفية، بما في ذلك CCK-8، وتكوين المستعمرات، وفحوصات ترانسويل. علاوة على ذلك، تم إجراء تسلسل mRNA لتحديد الأهداف في المراحل النهائية ومسارات الإشارة التي تنظمها PAK5. أظهرت هذه النتائج أن تعبير PAK5 كان مرتفعا بشكل ملحوظ في أنسجة ESCC مقارنة بالأنسجة الطبيعية، وكان مرتبطا بتوقعات ضعيفة. كشفت الفحوصات الوظيفية أن PAK5 عزز تكاثر خلايا ESCC، وتكوين المستعمرات، وهجرتها، وغزوها، بينما أبرز تحليل النسخ GAREM1 كعامل رئيسي في المراحل اللاحقة. تشير هذه النتائج إلى أن PAK5 يساهم في تقدم ESCC وقد يكون مؤشرا حيويا تنبؤيا وهدفا علاجيا.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

على مستوى العالم، يعد سرطان المريء من بين أكثر الأورام الخبيثة فتكا. في الصين، يمثل سرطان الخلايا الحرشفية المريء (ESCC) النوع الفرعي النسيجي السائد. على الرغم من تحقيق تقدم علاجي، إلا أن التوقعات لمرضى ESCC لا تزال مخبئة، حيثتظهر بنسبة بقاء على قيد الحياة لمدة 5 سنوات فقط تتراوح بين 10٪ إلى 25٪. ويرجع ذلك إلى حد كبير إلى تحديات الكشف المبكر وقلة توفر العلاجات الفعالة المستهدفة جزيئيا2. على عكس الأورام الصلبة الأخرى التي أظهرت فيها العلاجات المستهدفة وعدا كبيرا، فإن مثل هذه الأساليب في ESCC لا تزال في مراحلها الأولى، بسبب ندرة الأهداف الجزيئية القابلة للتنفيذ.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل لجنة الأخلاقيات في المستشفى الثاني التابع لجامعة هاينان الطبية (رقم الموافقة) LW2022602)، وتم الحصول على موافقة مستنيرة من كل مشارك وفقا لإعلان هلسنكي. الكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

1. جمع عينات من المرضى والأنسجة

تم تسجيل ما مجموعه 40 مريضا لديهم اضطراب كبدي وكلوي مؤكد مرضيا، جميعهم لديهم وظائف كبدية وكلوية طبيعية قبل الجراحة. تم جمع عينات الأورام (المجموعة T) والأنسجة الطبيعية المجاورة (المجموعة N؛ على بعد ≥2 سم من هامش الورم) مباشرة بعد الاستئصال الجراحي. تم تثبيت الأنسجة ف....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعبر عن PAK5 بشكل كبير في ESCC ويرتبط بسوء التوقعات
يوضح الشكل 1 سير العمل العام، من التحقق السريري ل PAK5 إلى التحليل الوظيفي والتحليل النصي، الذي يحدد GAREM1 كهدف لاحق. لاختبار فرضية أن PAK5 يعزز تقدم ESCC من خلال تعديل مسار MAPK عبر GAREM1، تم فحص أنماط تعبير PAK5 في أنسجة ESCC وارتباطها بالتوقعات السريرية. أولا، تم استخدام مجموعة بيانات التعبير الجيني GSE269447، المستمدة من قاعدة بيانات التعبير الجيني (GEO)، لفحص الجينات الم.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توفر هذه الدراسة دراسة متعمقا لدور PAK5 في تطور سرطان الخلايا الحرشفية المريء (ESCC) من خلال دمج العينات السريرية، والاختبارات الوظيفية، والتحليل النصي. توسع هذه النتائج فهم مشاركة PAK5 في ESCC، مما يبرز إمكاناته كمؤشر تنبؤي وهدف علاجي في آن واحد.

يتوافق التعبير المفرط الملحوظ عن PAK5 في أنسجة ESCC وارتباطه بضعف بقاء المرضى مع نتائج من سرطانات أخرى، حيث تم ربط PAK5 بتقدم الورم وسوء التوقعات10,11. من خل.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن المؤلفون أنه لا توجد مصالح مالية متنافسة أو علاقات شخصية قد تبدو وكأنها تؤثر على العمل المبلغ عنه في هذه الورقة.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد دعم هذا العمل مؤسسة هاينان الإقليمية للعلوم الطبيعية في الصين (منحة رقم 822QN474).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
مجموعة كشف الاستماتة المبرمج من Annexin V-FITCبيوتايم بيوتكنولوجيC1062Sمجموعة تلوين كشف الخلايا المبرمجة
الأجسام المضادة المضادة ل-PAK5أبكامab110069الجسم المضاد الأساسي ل IHC، التخفيف 1:100
نظام الرحلان الكهربائي الآليأجيلينت2100 بايومحللتقييم سلامة الحمض النووي الريبي
مجموعة تخليق الحمض النوويإنفيتروجين1896649مجموعة النسخ العكسي
محلول البنفسجي الكريستاليسيغما-ألدرتشC3886صبغة المستعمرات والغزو
DMEM ميديومجيبكو (ثيرمو فيشر)11965092وسط زراعة الخلايا
مصل الأبقار الجنيني (FBS)جيبكو (ثيرمو فيشر)16000044مكمل زراعة الخلايا
مقياس التدفق الخلويبكالوريوس العلوم الحيويةFACSCanto IIأداة لتحليل الخلايا
منشور جراف بادبرنامج جراف بادالإصدار 8برامج التحليل الإحصائي والرسوم البيانية
H& مجموعة التلوين الإلكترونيسولاربيولوجياG1120محلول تلوين الهيماتوكسيلين والإيوزين
IgG مضاد للفئران مرتبط ب HRPأبكامab150165الأجسام المضادة الثانوية ل IHC
متسلسل Illumina NovaSeqإلوميناNovaSeq 6000منصة تسلسل عالية الإنتاجية
خط خلايا KYSE-150بنك RIKEN CellRCB2057خط خلايا سرطان المريء الحرشفي البشري
ليبوفكتامين 3000ثيرموفيشرL3000008كاشف النقل
قارئ الميكروبليتبيو-تيك إنسترومنتسELx808جهاز قياس الامتصاص
داينابيد<سوب>TM أوليغو(dT)25sثيرمو فيشر العلمي61005لتنقية mRNA
البنسلين-ستريبتوميسينجيبكو (ثيرمو فيشر)15140122المضادات الحيوية لزراعة الخلايا
يوديد البروبيديوم (PI)سيغما-ألدرتشP4864صبغة تلوين الحمض النووي
RPMI-1640 متوسطجيبكو (ثيرمو فيشر)11875093وسط زراعة الخلايا
مقياس الطيف الفوتونيثيرمو فيشرنانوسدروب ND-1000تركيز الحمض النووي الريبي وقياس النقاء
برمجيات SPSSآي بي إمالإصدار 23برنامج التحليل الإحصائي
إدخالات ترانسويلكورنينغ3422إدخالات اختبار غزو الخلايا

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chen, W., et al. Cancer statistics in China, 2015. CA Cancer J Clin. 66 (2), 115-132 (2016).
  2. Pennathur, A., Gibson, M. K., Jobe, B. A., Luketich, J. D. Oesophageal carcinoma. Lancet. 381 (9864), 400-412 (2013).
  3. Zhang, D. G., et al.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Esophageal Squamous Cell CarcinomaPAK5 ExpressionTranscriptomic ProfilingPrognostic BiomarkerTherapeutic TargetCell ProliferationCell MigrationImmunohistochemistryKaplan Meier AnalysismRNA Sequencing

Related Articles