يقدم هذا البروتوكول نموذجا للفئران قابلا للتكرار باستخدام الأعصاب الحسية لتقليد ألم ورم العصب البشري وتقييم العلاجات الجراحية ، مما يوفر أداة قيمة لأبحاث ورم العصب الانتقالي.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج جراحي جديد للقوارض لدراسة خيارات علاج آلام الورم العصبي باستخدام إعادة تعصيب العضلات المستهدفة من خلال العصب الصافن
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يصف هذا البروتوكول نموذجا جراحيا جديدا لدراسة آلام الأعصاب والعلاج الجراحي في الفئران. تستخدم نماذج ورم العصب التقليدية أعصابا مختلطة ، على الرغم من أن الأعصاب الحسية غالبا ما تؤدي إلى ظهور أورام عصبية مؤلمة في البيئة السريرية. من خلال اختيار العصب الصافن ، يعكس هذا النهج الواقع السريري لتكوين الورم العصبي ويوفر منصة ذات صلة لتقييم الاستراتيجيات الجراحية. تهدف هذه الطريقة إلى تكرار الفيزيولوجيا المرضية لتكوين ورم العصب البشري وتقييم التدخل الجراحي الشائع لألم الورم العصبي ، وخاصة إعادة تعصيب العضلات المستهدفة (TMR) ، وهو تدخل مستخدم على نطاق واسع للألم المرتبط بالورم العصبي. تقدم المقالة وصفا تفصيليا خطوة بخطوة للإجراء ، بدءا من إعداد والرعاية المحيطة بالجراحة. يتم شرح التقنية الجراحية مع الاهتمام بالمعالم التشريحية ومتطلبات الأدوات والاعتبارات الفنية التي تعمل على تحسين الدقة والاتساق. تم تحديد تدابير المراقبة والرفاهية بعد الجراحة لضمان الالتزام بالمعايير الأخلاقية وقابلية التكرار عبر المختبرات. هذا النموذج قابل للتكرار ويمكن الوصول إليه تقنيا وذو صلة متعدية ، لأنه يحاكي الواقع السريري لتكوين ورم العصب الحسي. يوفر منصة لتقييم الاستراتيجيات الجراحية وأبحاث ورم العصب قبل السريري.
المقدمة
الأورام العصبية هي أورام عصبية مؤلمة تتشكل بعد إصابة الأعصاب1،2. إنها تمثل مشكلة سريرية كبيرة ذات عواقب مجتمعية بعيدة المدى وزيادة التكاليف الطبية3،4،5،6،7. غالبا ما تكون خيارات العلاج مثل العلاج الدوائي أعراضا ، وتعالج الألم ولكنها تفشل في حل أسبابه الكامنةوراءها 8. لقد ثبت أن التدخلات الجراحية لها معدلات نجاح متغيرة (56٪ -82٪) ، ولا تزال الآليات التي تقود تكوين ورم العصب المؤلم غير مفهومةجيدا 9،10،11.
يعتقد أن الألم الناتج عن الأورام العصبية ينشأ من الحزم الحسية في العصب التالف ، مما يؤكد أهمية نمذجة المساهمات الحسية البحتة للألم المرتبط بالورم العصبي12. تظل النماذج الحيوانية منصة أساسية لاستكشاف الآليات المعقدة الكامنة وراء ألم الورم العصبي وأيضا لتطوير علاجات جراحية فعالة13. ومع ذلك ، فإن معظم النماذج الحيوانية المتاحة تستخدم الأعصاب الحسية الحركية المختلطة ، مما يحد من قابليتها للتطبيق الانتقالي ، حيث أن ما يقرب من 74٪ من الأورام العصبية المؤلمة في البيئة السريرية تنشأ من الأعصاب الحسية البحتة14،15.
تم تطوير العديد من النماذج الحيوانية لمحاكاة آلام الاعتلال العصبي وتقييم التدخلات المحتملة16. أولا ، تم وصف نموذج إصابة الانقباض المزمن (CCI)17. يؤدي هذا النموذج إلى تلف جزئي للأعصاب من خلال أربطة مربوطة بشكل فضفاض حول العصب الوركي ، مما يحاكي حالات الألم العصبي. يوفر نظرة ثاقبة للحساسية المحيطية ، والتنكس المحوري ، والاستجابات الالتهابية ، والتغيرات المركزية في الحبل الشوكي ، ويستخدم على نطاق واسع لتقييم العلاجات المسكنة المحتملة17،18. ثانيا ، تؤدي إصابة العصب التجيب (SNI) إلى إصابة اثنين من الفروع الطرفية الثلاثة للعصب الوركي (الأعصاب الظنبوية والشظوية الشائعة) ، تاركة العصب السورالي المتبقيسليما 19. ثالثا ، نموذج تبديل ورم العصب الظنبوبي (TNT) ، الذي طوره دورسي وآخرون. يتم نقل العصب الظنبوبي جراحيا ونقله تحت الجلد لتسهيل تقييم تكوين الورم العصبي والألم المرتبطبه 16،20. يسمح هذا النموذج بتقييم فرط الحساسية الأولي عن طريق تحفيز فون فراي للجلد الذي يغطي ورم العصب المنقول في موقع ما قبل الظنبوب ، وتقييم فرط الحساسية الثانوي في الجلد العصبي السطحي أو المتبقي المجاور. تم تصميم نموذج TNT جراحيا لتكرار تطور الورم العصبي ، دون دمج أي تدخل جراحي أو غير جراحي يهدف إلى الوقاية من الألم المرتبط بالورم العصبي أو علاجه20. على هذا النحو ، فإنه لا يسمح بتقييم الاستراتيجيات العلاجية ، مثل إعادة تعصيب العضلات المستهدفة (TMR) ، في الإعداد الأساسي (الشكل 1).
TMR هي تقنية تربط العصب (الحسي) بفرع حركي قابل للاستهلاك للهدف بعد استئصال الورم العصبي. يستخدم هذا المفهوم مبدأ إعطاء العصب شيئا يفعله ، حيث يتجدد العصب في عصب متصل بهدف عضلي. تهدف الفلسفة إلى منع تكوين ورم عصبي في حد ذاته من خلال السماح للعصب بالتجدد إلى عضلة مقلوبة11.
في هذه الدراسة ، نصف نموذج القوارض الذي يتضمن قطع العصب الصافن. يتم نقل هذا العصب الحسي البحت ، ونقله إلى عضلة المعدة ، وإما تركه دون علاج (تبديل ورم العصب الصافن ، SNT) أو يتم تربيته في فرع حركي (TMR). يتيح هذا النموذج التحقيق في تأثيرات TMR المطبقة على العصب الصافن على فرط الحساسية الميكانيكية الثانوية في الأمراض الجلدية المجاورة للأعصاب السليمة تشريحيا ، وتحديدا داخل منطقة الظنبوب على السطح الأخمصي المركزي للمخلب الخلفي (الشكل 1) 21،22. يسلط هذا السياق التشريحي الضوء أيضا على الأهمية السريرية للمرضى. نظرا لمساره التشريحي السطحي ، فإن العصب الصافن عرضة بشكل خاص للإصابة علاجية المنشأ أو الرضحية ، خاصة بعد جراحة الركبة ، مما يؤدي غالبا إلى ألم الاعتلال العصبي. والجدير بالذكر أن 55.2٪ من المرضى أبلغوا عن أعراض مستمرة على الرغم من جراحة المراجعة مثل تحلل الأعصاب أو استئصال الأعصاب23،24.
تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء نموذج للقوارض قابل للتكرار من أجل تكرار الإعداد السريري لتكوين ورم العصب المؤلم. هذا النموذج مناسب بشكل خاص للتحقيق في الفيزيولوجيا المرضية للورم العصبي الحسي النقي وتأثيرات TMR ، بينما يركز مقياس النتائج الأولية على فرط الحساسية الميكانيكية الثانوية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
يتماشى هذا البروتوكول مع المبادئ التوجيهية الأخلاقية للأبحاث الحيوانية ويؤكد على إمكاناته الانتقالية. رقم المشروع: AVD1150020198824.
1. قياسات فون فراي
- قم بإجراء اختبار فون فراي للسطح الأخمصي للمخلب الخلفي وفقا للبروتوكول المكيف ل Brakkee et al. لتقييم فرط الحساسية الميكانيكية الثانوية20.
- تحديد الحساسية الأساسية لمناطق التعصيب في أعصاب الظنبوب والسور على السطح الأخمصي للمخلب الخلفي. قم بإجراء ثلاثة قياسات أساسية في أيام منفصلة باستخدام خيوط فون فراي للحصول على بيانات موثوقة وقابلة للتكرار20،25،26،27،28،29،30.
- تأقلم الفئران مع أقفاص القاع الشبكي لمدة 5-7 أيام على الأقل قبل قياسات خط الأساس. تعامل مع يوميا لتقليل استجابات الإجهاد. يتم توفير بيانات خط الأساس فون فراي في الجدول التكميلي 1. قم بتقييم فرط الحساسية الناجم عن الجراحة في مناطق تعصيب الظنبوب والسورال باستخدام اختبار فون فراي بدءا من 7 أيام بعد الجراحة.
- ضع بهدوء في قفص الاختبار وتأكد من أن الحركات العفوية ضئيلة قبل البدء.
- ضع سلسلة من الخيوط الأحادية المعايرة (0.6 جم ، 1 جم ، 1.4 جم ، 2 جم ، 4 جم ، 6 جم ، 8 جم ، 10 جم ، 15 جم) بشكل عمودي على الجلد حتى ينحني الفتيل قليلا. استمر في الاتصال لمدة 3 ثوان تقريبا.
ملاحظة: لا تقم بإجراء الاختبار عندما يقوم بالعناية أو التبول أو الوقوف أو التغوط. قم بإجراء الاختبار فقط عندما يتم توزيع الوزن بالتساوي على جميع الكفوف الأربعة. - قم بتغيير ترتيب الأمراض الجلدية عبر لتجنب التحيز المنهجي كما هو موضح أدناه.
منطقة العصب السوري: سطح أخمصي جانبي ، بالقرب من الحدود المشعرة.
منطقة العصب الظنبوبي: السطح الأخمصي المركزي ، وتجنب الوسادات. - استخدم الطريقة من أعلى إلى أسفل: ابدأ بخيوط 4 جم. في حالة حدوث انسحاب (رفع مخلب مفاجئ ، جفل ، لعق ، أو نطق) ، قم بتطبيق القوة السفلية التالية ؛ إذا لم تحدث استجابة ، فقم بتطبيق القوة الأعلى التالية. استمر حتى 5-6 استجابات بعد الحصول على التغيير الأول في السلوك. سجل استجابة إيجابية مثل أي انسحاب سريع أو جفل أو لعق أو نطق. سجل غياب هذه السلوكيات كرد فعل سلبي.
- احسب عتبة السحب بنسبة 50٪ باستخدام طريقة Dixon من أعلى إلى أسفل ، والتي تحدد القوة التي يوجد عندها احتمال 50٪ لاستجابة الانسحاب بناء على سلسلة من زيادة ونقصان تطبيقات خيوط فون فراي31.
- لتقييم فرط الألم الثانوي ، قارن عتبات ما بعد الجراحة في مناطق الظنبوب والسور بقيم خط الأساس والمخلب المقابل.
ملاحظة: تفضيل المكان المشروط (CPP) هو نموذج سلوكي تم التحقق من صحته لتقييم الألم المستمر وتأثير العلاج في النماذج الحيوانية لإصابة الأعصاب الطرفية ، خاصة عندما يكون الاختبار الميكانيكي غير ممكن بسبب الموقع التشريحي لتكوين الورم العصبي ، مثل عمق الفخذ32،33،34. تم ذكرها هنا كمعلومات أساسية فقط ولم يتم تطبيقها في هذه الدراسة.
2. التحضير قبل الجراحة
- احجز غرفة جراحة وقم بإعداد / طلب أدوات معقمة (انظر جدول المواد).
- التسكين والتخدير والتحضير
ملاحظة: أجريت هذه الدراسة على 12 (6 إناث و 6 ذكور) من فئران Sprague Dawley التي كان عمرها 12 أسبوعا.- حقن 0.5 ملغ/كغ من الكاربروفين المسكن تحت الجلد في منطقة البطن قبل 1 ساعة من الجراحة.
- تخدير باستخدام 5٪ إيزوفلوران للتحريض ، مع الحفاظ على التخدير مع 2٪ -3٪ إيزوفلوران.
- ضع على ظهره ورأسه إما يسارا أو يمينا لإجراء العملية عليه ، مقابل وضع الجراح.
- ضع على وسادة تسخين مضبوطة على 37 درجة مئوية للحفاظ على درجة حرارة جسمه أثناء العملية. وزع سطح التسخين بالتساوي ومنع ارتفاع درجة الحرارة. راقب درجة الحرارة باستخدام مسبار حراري للمستقيم ، مثبت على الذيل باستخدام شريط ورقي. اضبط وسادة التدفئة حسب الضرورة للحفاظ على الحرارة الطبيعية.
ملاحظة: هذه الخطوة ضرورية لمنع انخفاض حرارة الجسم الناجم عن التخدير وضمان الاستقرار الفسيولوجي طوال فترة الجراحة. - ضع مرهما معقما للعين على العينين لمنع الجفاف الناجم عن التخدير بالغازات.
ملاحظة: تضمن هذه الخطوة بقاء سطح القرنية رطبا ومحميا أثناء العملية ، مما يقلل من خطر تهيج العين أو تلفها. - احلق موقع الجراحة من الفخذ إلى الكاحل باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية. بعد الحلاقة ، استخدم الجانب اللاصق لقطعة من الشريط لإزالة أي شعر متساب متبقي للتحضير الأمثل للبشرة.
- تطهير المنطقة المحلوقة بثلاث جولات متناوبة من الكلورهيكسيدين ثنائي جلوكونات 0.5٪ باستخدام وسادة شاش معقمة. اترك كل تطبيق يجف تماما قبل الانتقال إلى الجولة التالية.
ملاحظة: توفر ثلاث جولات متناوبة تعقيما شاملا لموقع الجراحة وتقلل من مخاطر العدوى. - تحقق من التخدير عن طريق الضغط برفق على مساحة الويب لقدم بالملقط. يشير عدم وجود انسحاب إلى التخدير المكبوت والكافي.
ملاحظة: تابع فقط عند غياب ردود الفعل لتأكيد التخدير الفعال والامتثال للمعايير الأخلاقية لتقليل ضائقة أثناء الجراحة. تابع فقط عندما تتمكن من تأكيد عدم وجود ردود أفعال.
3. التقنية الجراحية
- ضع في وضع ضعيف وقم بتدوير ساق الجراحة بشكل جانبي لكشف موقع الجراحة.
- تحت تكبير المجهر 6x ، ضع علامة على خط الشق باستخدام علامة جلدية معقمة. حقن 0.05 مل من الليدوكائين 1٪ تحت الجلد باستخدام حقنة 1 مل بإبرة 25 جرام على طول الخط المحدد لتوفير التخدير الموضعي وتقليل آلام موقع الجراحة. وزعي الحقن بالتساوي وأكدوا عدم وجود أي ردود فعل سلبية فورية قبل المتابعة. تقلل هذه الخطوة من الانزعاج وتحسن الدقة الجراحية.
- قم بإنشاء شق جلدي طولي 8-10 مم فوق الطرف الخلفي الإنسي باستخدام شفرة مشرط 15 (الشكل 2 أ). يجب شق الأدمة فقط.
ملاحظة: يجب توخي الحذر الشديد فيما يتعلق بعمق الشق. إذا أمكن ، ابدأ الاستئصال واستمر على طول الخط المحدد باستخدام المقص لفتح الجلد. نظرا لأن العصب الصافن يقع تحت الجلد مباشرة ، يتم إيلاء اهتمام دقيق لتجنب شق عميق (الشكل 2 ب). - حدد حزمة الأوعية الدموية العصبية السطحية ، بما في ذلك الشريان الصافن والوريد والأعصاب. قم بتمرير العصب الصافن بعناية وعزله عن طريق تشريح الإبرة لمنع التلف العرضي. استخدم الكي الكهربائي إذا لزم الأمر للسيطرة على النزيف الطفيف من الأوعية المحيطة.
- قم بتشريح الإبرة عن طريق توجيه شطبة إبرة رفيعة نحو المشغل وتحريك الطرف برفق على طول مستوى الأنسجة. تخلق هذه التقنية حافة حادة في الجانب السفلي من طرف الإبرة ، مما يسمح بالفصل الدقيق للأنسجة الضامة الحساسة دون ممارسة الجر أو الضغط المفرط على الهياكل المجاورة.
- زيادة التخدير الأيزوفلوران إلى 5٪ قبل قطع العصب. بعد الانتهاء من القطع ، قلل التخدير الأيزوفلوران مرة أخرى إلى 2٪ -3٪ للحفاظ على مستويات تخدير كافية ولكن خاضعة للرقابة.
- قم بتغيير تكبير المجهر إلى 16x.
- عند الاقتراب من عضلات المقربة وسطيا وإجراء فصل دقيق ، يتم مواجهة وريد متقاطع عموديا ، الوريد الذيلي الفخذي ، مركزيا داخل منطقة التشريح ، مصحوبا ب Ramus nervi obturatorii. يصبح هذا الوريد مرئيا عند تشريح المقربين طوليا أعمق باتجاه الفرع الحركي الإنسي للعصب الظنبوبي ، والذي يعصب عضلة المعدة والدماغية. قم بإجراء تشريح دقيق إما وسطيا أو جانبيا للحفاظ على السلامة الوريدية قبل إنشاء مجال التكاثف.
ملاحظة: الوريد الذيلي الفخذ يعبر عموديا على اتجاه الألياف من العضلات المقربة; احرص على تجنب وضع الجر المفرط على هذا الوعاء لمنع التلف وفقدان الدم غير الضروري. - تطبيق تحفيز 1 مللي أمبير مع محفز العصب لتقييم نشاط العضلات على الفرع الحركي للعصب الظنبوبي وتأكيد الاستجابة في عضلة المعدة.
- أثناء تحضير العصب المتلقي ، قم بتشريح دقيق على طول مساره وقم بتقطيعه بمقص جراحي مجهري على بعد أقل من 3 مم من سطح العضلات. ضع موقع التخثر بالقرب من نقطة دخول عضلات الفرع الحركي لتسهيل التجديد المحوري الأمثل. زيادة الأيزوفلوران إلى 5٪ لفترة وجيزة عند عبور العصب.
ملاحظة: تضمن هذه التقنية بقاء موقع التخثر بالقرب من إدخال الفرع الحركي في العضلات ، مما يسهل التجديد المحوري الأمثل والتعافي الوظيفي في إجراءات TMR. قد تؤدي المسافة المتزايدة بين موقع التكاثف ونقطة دخول الفرع الحركي إلى تشتت محوري وضعف توصيل الإشارة. - قم بنفق العصب الصافن عبر العضلات المقربة وقم بتطبيته بالفرع الحركي الإنسي للعصب الظنبوبي باستخدام 11.0 خيوط نايلون (الشكل 3). قم بعمل خياطتين وتأكد من أن الغرز لا تعيق الواجهة للسماح بالاختلاط العصبي الفعال. بالنسبة للضوابط غير المعالجة ، بعد حفر الأنفاق ، لا تقم بإجراء الاختلاط ؛ بدلا من ذلك ، قم بتبديل الجذع البعيد للعصب الصافن وتثبيته في اللفافة العضلية المعدية.
ملاحظة: يجب أن تكون خيطتان كافيتين لإنشاء سطح تلامس مثالي بين العصبين. خياطة واحدة غير مناسبة لأنها قد تتسبب في دوران أحد الأعصاب. - اضبط تكبير المجهر على 6x قبل الشروع في إغلاق الجلد. استخدم 8-0 خيوط لتقريب حواف البشرة بتقنية داخل الأدمة. حافظ على الحد الأدنى من التوتر على الجرح. بعد الإغلاق ، نظفي البشرة ب 0.9٪ كلوريد الصوديوم باستخدام قطعة قطن معقمة لإزالة الحطام المتبقي والحفاظ على بيئة علاجية مثالية.
4. رعاية ما بعد الجراحة
- ضع في قفص نظيف يتم التحكم في درجة حرارته مع وسادة تدفئة موضوعة جزئيا أسفل القفص للحفاظ على الدفء الأمثل. توفير الوصول إلى الغذاء والماء. اضبط الإضاءة على إعداد خافت وقم بحماية القفص من الأضواء الساطعة لغرفة العمليات.
ملاحظة: تقلل هذه الإجراءات من التوتر وتدعم التعافي السلس بعد الجراحة. - بعد الاستيقاظ ، يمكن إعادة إلى قفصه المشترك بعد حوالي 40 دقيقة. تأكد من اليقظة الكاملة والسلوك الطبيعي قبل إعادة تقديمه إلى رفقاء القفص. هذا يقلل من خطر الإصابة أو الإجهاد أثناء إعادة الإدماج.
- يتم تطبيق جرعة من الكاربروفين (0.5 ملغ/كغ) في منطقة البطن تحت الجلد بعد 24 ساعة و48 ساعة بعد الجراحة.
- راقب فقدان الوزن بما لا يزيد عن 15٪. توفير الترطيب الكافي وتناول الطعام.
5. التخلص من النفايات
- تخلص من الأدوات الحادة على الفور في حاوية أدوات حادة معتمدة. جمع نفايات التخدير وفقا لإرشادات السلامة البيولوجية المؤسسية. التعامل مع بقايا وفقا للوائح المؤسسية والوطنية للتخلص من النفايات البيولوجية.
6. جمع العينات والقتل الرحيم
- بعد 6 أسابيع من الجراحة ، قم بالقتل الرحيم للفئران بعد جمع عينات الأنسجة من أجل التمايز الأمثل بين العصب والأنسجة المحيطة.
- تحفيز التخدير وإعطاء المسكن كما هو موضح في الخطوات 2.2.1 إلى 2.2.5.
- أعد فتح خط الشق السابق على الفخذ الإنسي بمشرط. قم بتمديد الشق بمقدار 2 سم إذا لزم الأمر. قم بإجراء تشريح حاد من خلال الطبقة تحت الجلد.
- سحب أو تقسيم العضلات المقربة لفضح العصب الصافن. للأعصاب المعاد بناؤها: حدد الجزء المتجدد وأي ورم عصبي. استئصال موقع التكاثف مع 2 مم من العصب القريب والبعيد. بالنسبة للضوابط غير المعالجة: حدد الجذع البعيد للعصب الصافن واستئصال جزء 4 مم.
- نقل العينة مباشرة إلى مثبت. قم بتضمينها طوليا في البارافين أو الراتنج للتحليل المورفولوجي.
- القتل الرحيم للحيوان تحت التخدير النهائي (5٪ إيزوفلوران) عن طريق ثقب القلب. تعامل مع جميع عينات الأنسجة وفقا لبروتوكولات المختبر القياسية للحفاظ على السلامة الهيكلية والكيميائية الحيوية للتحليل اللاحق (الشكل 4).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
أظهر تقييم فرط الحساسية الثانوي (عتبات الانسحاب بنسبة 50٪ المحولة) اختلافات جماعية في جلد الظنبوب (الشكل 5 أ). أدى قطع العصب الصافن دون علاج (SNT) إلى أعلى حساسية خلال المتابعة التي استمرت 6 أسابيع. في المقابل ، أظهرت التي عولجت ب TMR اتجاها ثابتا نحو تقليل فرط الحساسية في منطقة الظنبوب. كان الاختلاف بين المجموعات أكثر وضوحا في الأسبوع 2 ، عندما بلغ متوسط عتبة الانسحاب 50٪ في مجموعة TMR 0.87 جم (95٪ CI 0.68-1.07) ، مقارنة ب 0.58 جم (95٪ CI 0.25-0.92) في مجمو...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
هذا النهج له العديد من نقاط القوة. يسمح الوصف التدريجي بالتكاثر عبر المختبرات ، ويمكن إجراء الإجراء بكفاءة باستخدام مهارات الجراحة المجهرية ، واستخدام العصب الحسي البحت يعزز أهميته الانتقالية. هذه الجوانب مجتمعة تجعل النموذج عمليا للدراسات المقارنة ومفيدا لاختبار التدخلات الجديدة. تعتبر الخطوات الحاسمة ، مثل الحفاظ على الظروف المعقمة ، والتشريح الدقيق للعصب الصافن ، والتعامل الدقيق مع هياكل الأوعية الدموية مثل الوريد الذيلي الفخذي ، أمرا حيويا لقابلية التكاثر. علاوة على ذلك ، فإنه يسمح ب...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
بحث يقوم به طالب دكتوراه (CB) مدعوما بمنحة Axogen (لا توجد علاقة بالمنتج). جميع المؤلفين الآخرين ليس لديهم تضارب في المصالح للكشف عنها.
شكر وتقدير
يقر المؤلفون بامتنان سابين فيرستيج لمساهمتها في تقييمات الألم السلوكي. نشكر أنيا فان دير سار وترودي أوسترفيلد-رومين (مختبر المشتركة، مختبر جيمينشابليك ديرين) على دعمهما الفني في إعداد مرافق الجراحة والفحص المجهري ورعايتهما المتفانية للحيوانات. يشكر المؤلفون أيضا Wim van Hecke على تقييمه الخبير لعينات الأعصاب التي تم جمعها.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الكاربروفين | الصيدلية البيطرية المحلية | لا يوجد | تقوم الصيدلية البيطرية المحلية بتحضير تخفيف الكاربروفين |
| عواد القطن | نوباميد | 974255 | — |
| ماكينة حلاقة كهربائية | إيسكولاب | GT421 | |
| الكي الكهربائي | أدوات العلوم الدقيقة | 18010-00 | — |
| الإيثانول 70٪ | إنتركيما بي في | 400406 | — |
| إثيلون 10.0 | جونسون & جونسون | BV130-3: الرمز 2820G | |
| إثيلون 11.0 | جونسون & جونسون | رمز BV50-3L 2881G | |
| إثيلون 4.0 | جونسون & جونسون | 1854G: الرمز 1854G | - |
| إثيلون 6.0 | جونسون & جونسون | BV130-5: الرمز 2809G | |
| إثيلون 8.0 | جونسون & جونسون | BV130-5: الرمز 2808G | — |
| إثيلون 9.0 | جونسون & جونسون | BV130-3: الرمز 2819G | |
| قفازات الفحص النتريل | سيمبيرمد GmbH | 1065920 | |
| حماية العين | 3M & trade; الرعاية الصحية | 71512-00001M | |
| معقم خرز الزجاج | معدات مختبر فانبيل | GBS300H | |
| منشور جراف باد | جراف باد سوفتوير، سان دييغو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية | الإصدار 10 | |
| وسادة التدفئة | علم السلوك | CS-HP-2005 | |
| الإيزوفلو (الإيزوفلوران) | منتجات زوتيس / ديتشرا البيطرية | B506 | — |
| ليدوكائين 1٪ | هنري شاين | 809755 | |
| أقفاص سفلية شبكية | شركة ستولتينغ. | 57816, 57824 | — |
| الملقط الدقيق | أدوات العلوم الدقيقة | 11251-35 | — |
| حامل الإبر الدقيق | أدوات العلوم الدقيقة | 12076-12 | — |
| المقص الصغير | أدوات العلوم الدقيقة | 15019-10 | — |
| الملقط الصغير | أدوات العلوم الدقيقة | 11254-20 | — |
| NaCl 0.9٪ | Trademed | H7 1000-FRE | — |
| إبرة 25G وأوقات الاستخدام؛ 1" | بيكتون، ديكنسون & الشركة | 300400 | |
| حامل الإبر | أدوات العلوم الدقيقة | 12004-16 | — |
| محفز الأعصاب | (جهاز تحديد العصب VARI-STIM) | المرجع 856200 | |
| برنامج راندومايس | فان إينيغه وآخرون; لايدن | الإصدار 1.1.7 | |
| مسبار شرجي للقوارض | وورلد بريسيجن إنسترومنتس | NC9506514 | |
| المشرط | أدوات العلوم الدقيقة | 10003-12 | — |
| المقص | أدوات العلوم الدقيقة | 14001-12 | — |
| مقيم الحواس | آلات لينتون | 514007– 514015 | من 0.6 جرام إلى 15 جرام أحادي الخيوط |
| المجهر الجراحي الستيريو | لايكا | A60 F | — |
| وسادات الشاش المعقمة | نوباميد | 740113 | |
| مرهم التشحيم المعقم للعين | ألكون | B00BRLSC8S | |
| ورقة معقمة بها ثقب | إيفركير / ون ميد | 1555-01 | — |
| شفرة جراحية رقم 15 | أدوات العلوم الدقيقة | 10015-00 | — |
| قناع الوجه الجراحي | شركة ميدلاين إندستريز، إنك. | MSK1002 | |
| قفل الحقن 2 مل | بيكتون، ديكنسون & الشركة | 300613 | |
| الملقط | أدوات العلوم الدقيقة | 11617-12 | — |
المراجع
- Oliveira, K. M. C., et al. Time course of traumatic neuroma development. PLoS One. 13 (7), e0200548(2018).
- O'reilly, M. aR., et al. Neuromas as the cause of pain in the residual limbs of amputees. An ultrasound study. Clin Radiol. 71 (10), 1068.e1-1068.e6 (2016).
- Anantavorasakul, N., et al. Surgery for lower extremity symptomatic neuroma: Long-term outcomes. J Plast Reconstr Aesthet Surg. 73 (8), 1456-1464 (2020).
- Dieleman, J. P., Kerklaan, J., Huygen, F., Bouma, P. aD., Sturkenboom, M. Incidence rates and treatment of neuropathic pain conditions in the general population. Pain. 137 (3), 681-688 (2008).
- List, E. B., Krijgh, D. D., Martin, E., Coert, J. H. Prevalence of residual limb pain and symptomatic neuromas after lower extremity amputation: A systematic review and meta-analysis. Pain. 162 (7), 1906-1913 (2021).
- Giladi, H., Scott, W., Shir, Y., Sullivan, M. J. Rates and correlates of unemployment across four common chronic pain diagnostic categories. J Occup Rehabil. 25 (3), 648-657 (2015).
- Ciaramitaro, P., et al. Traumatic peripheral nerve injuries: Epidemiological findings, neuropathic pain and quality of life in 158 patients. J Peripher Nerv Syst. 15 (2), 120-127 (2010).
- Moisset, X., et al. Pharmacological and non-pharmacological treatments for neuropathic pain: Systematic review and French recommendations. Rev Neurol (Paris). 176 (5), 325-352 (2020).
- Hwang, C. D., et al. Biology and pathophysiology of symptomatic neuromas. Pain. 165 (3), 550-564 (2024).
- Gottlieb, R. W., Westenberg, R. F., Chen, N. C., Coert, J. H., Eberlin, K. R. Long-term outcomes after surgical treatment of radial sensory nerve neuromas: Patient-reported outcomes and rate of secondary surgery. Plast Reconstr Surg. 147 (1), 101-111 (2021).
- Langeveld, M., et al. Surgical treatment of peripheral nerve neuromas: A systematic review and meta-analysis. Plast Reconstr Surg. 150 (4), 823e-834e (2022).
- Baron, R. Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms. Clin J Pain. 16 (2 Suppl), S12-S20 (2000).
- Alant, J. D., et al. Traumatic neuroma in continuity injury model in rodents. J Neurotrauma. 29 (8), 1691-1703 (2012).
- Shamoun, F., Shamoun, V., Akhavan, A., Tuffaha, S. H. Target receptors of regenerating nerves: Neuroma formation and current treatment options. Front Mol Neurosci. 15, 859221(2022).
- Cavadas, P. C., Tellez Palacios, D. Treatment of neuroma of the dorsal branch of the ulnar nerve with transfer to the distal anterior interosseous nerve. J Hand Surg Glob Online. 2 (6), 363-364 (2020).
- Dorsi, M. J., et al. The tibial neuroma transposition (tnt) model of neuroma pain and hyperalgesia. Pain. 134 (3), 320-334 (2008).
- Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33 (1), 87-107 (1988).
- Castelnuovo, G., et al. Psychological treatments and psychotherapies in the neurorehabilitation of pain: Evidences and recommendations from the italian consensus conference on pain in neurorehabilitation. Front Psychol. 7, 115(2016).
- Decosterd, I., Woolf, C. J. Spared nerve injury: An animal model of persistent peripheral neuropathic pain. Pain. 87 (2), 149-158 (2000).
- Brakkee, E. M., Devinney, E., Eijkelkamp, N., Coert, J. H. Surgery and behavioral testing in the tibial neuroma transposition model in rats. J Vis Exp. (191), e64659(2023).
- Kambiz, S., et al. Innervation mapping of the hind paw of the rat using evans blue extravasation, optical surface mapping and casam. J Neurosci Methods. 229, 15-27 (2014).
- Inquimbert, P., et al. Peripheral nerve injury produces a sustained shift in the balance between glutamate release and uptake in the dorsal horn of the spinal cord. Pain. 153 (12), 2422-2431 (2012).
- Krijgh, D. D., List, E. B., Teunis, T., Bleys, R., Coert, J. H. The origin and course of the infrapatellar branch of the saphenous nerve: An anatomical study. JPRAS Open. 34, 144-151 (2022).
- Besmens, I. S., Brackertz, S., Nietlispach, V., et al. A cohort study on neuropathic pain of the saphenous nerve—factors influencing surgical outcome. Eur J Plast Surg. 46, 397-402 (2023).
- Scura, P. V. Disability evaluation. , StatPearls [internet]. Treasure Island, FL. (2023).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
- Scheuren, P. S., Rosner, J., Curt, A., Hubli, M. Pain-autonomic interaction: A surrogate marker of central sensitization. Eur J Pain. 24 (10), 2015-2026 (2020).
- Woolf, C. J. Central sensitization: Implications for the diagnosis and treatment of pain. Pain. 152 (3 Suppl), S2-S15 (2011).
- Latremoliere, A., Woolf, C. J. Central sensitization: A generator of pain hypersensitivity by central neural plasticity. J Pain. 10 (9), 895-926 (2009).
- Roth, E., et al. Targeted muscle reinnervation prevents and reverses rat pain behaviors after nerve transection. Pain. 164 (2), 316-324 (2023).
- Dixon, W. J. Efficient analysis of experimental observations. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 20, 441-462 (1980).
- Wei, H., Viisanen, H., Amorim, D., Koivisto, A., Pertovaara, A. Dissociated modulation of conditioned place-preference and mechanical hypersensitivity by a trpa1 channel antagonist in peripheral neuropathy. Pharmacol Biochem Behav. 104, 90-96 (2013).
- Xie, J. Y., et al. Activation of mesocorticolimbic reward circuits for assessment of relief of ongoing pain: A potential biomarker of efficacy. Pain. 155 (8), 1659-1666 (2014).
- Dalm, B. D., Reddy, C. G., Howard, M. A., Kang, S., Brennan, T. J. Conditioned place preference and spontaneous dorsal horn neuron activity in chronic constriction injury model in rats. Pain. 156 (12), 2562-2571 (2015).
- Souza, J. M., et al. Targeted muscle reinnervation: A novel approach to postamputation neuroma pain. Clin Orthop Relat Res. 472 (10), 2984-2990 (2014).
- Asaoka, Y., Kato, T., Ide, S., Amano, T., Minami, M. Pregabalin induces conditioned place preference in the rat during the early, but not late, stage of neuropathic pain. Neurosci Lett. 668, 133-137 (2018).
- Sufka, K. J. Conditioned place preference paradigm: A novel approach for analgesic drug assessment against chronic pain. Pain. 58 (3), 355-366 (1994).
- Mckendrick, G., et al. Ketamine blocks morphine-induced conditioned place preference and anxiety-like behaviors in mice. Front Behav Neurosci. 14, 75(2020).
- Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10, 284(2017).
- Sotocinal, S. G., et al. The rat grimace scale: A partially automated method for quantifying pain in the laboratory rat via facial expressions. Mol Pain. 7, 55(2011).
- Draxler, P., et al. Spontaneous, voluntary, and affective behaviours in rat models of pathological pain. Front Pain Res (Lausanne). 2, 672711(2021).
- Panoutsopoulos, A. A. Organoids, assembloids, and novel biotechnology: Steps forward in developmental and disease-related neuroscience. Neuroscientist. 27 (5), 463-472 (2021).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
