توضح هذه المقالة تشغيل وتأثير الفحص المجهري متحد البؤر في الجسم الحي في تشخيص وعلاج جفاف العين وتبحث في تطبيق ونتائج الفحص المجهري متحد البؤر في الجسم الحي لتوفير أساس للبحث المستقبلي.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
توضح هذه المقالة تشغيل وتأثير الفحص المجهري متحد البؤر في الجسم الحي في تشخيص وعلاج جفاف العين وتبحث في تطبيق ونتائج الفحص المجهري متحد البؤر في الجسم الحي لتوفير أساس للبحث المستقبلي.
اكتسب الفحص المجهري متحد البؤر في الجسم الحي (IVCM) اهتماما كبيرا لطبيعته غير الغازية ودقته العالية. إنه يتيح المراقبة في الجسم الحي والقياس الكمي الموضوعي للعديد من هياكل سطح العين المرتبطة بمرض جفاف العين (DED) ، بما في ذلك القرنية والملتحمة وهامش الجفن والغدد الميبوميان والطفيليات مثل ديموديكس ، على المستوى الخلوي. تساعد هذه القدرة أطباء العيون في تحديد مسببات وأنواع فرعية محددة من DED ، وبالتالي تسهيل التشخيص الدقيق والعلاج المستهدف والتقييم التنبؤي. ومع ذلك، لا تزال البروتوكولات الموحدة لتشغيل IVCM والإبلاغ عنها غير موجودة. تعد الكفاءة في كل من معرفة طب العيون والتشغيل التقني أمرا ضروريا للاستخدام الفعال لهذا الجهاز وإنشاء تقارير عالية الجودة. توضح هذه المقالة بالتفصيل الخطوات الإجرائية والفروق الدقيقة في فحص IVCM لمرضى DED. هذا هو أول بروتوكول IVCM خطوة بخطوة من JoVE لدائرة التنمية الاقتصادية. يهدف إلى العمل كمرجع للأطباء ، ومساعدتهم على تجنب أوجه القصور التشغيلية والحصول باستمرار على صور عالية الجودة لسطح القرنية والعين لتوجيه الإدارة السريرية.
نظرا للقيود المفروضة على الموارد الطبية المحلية أو الأعباء المالية للمرضى، غالبا ما يركز التشخيص السريري لدائرة التنمية الاقتصادية على جانب أساسي فقط (على سبيل المثال، الملاحظة تحت مجهر المصباح الشقي، والشكوى من جفاف وحكة في العينين) أو حتى مؤشر واحد (على سبيل المثال، وقت تفكك الأغشية الدمعية الغازية، أو اختبار إفراز الدمع، أو الإصابة بالديموديكس). تطبيق IVCM غير متاح على نطاق واسع ، ناهيك عن توحيد البروتوكولات الخاصة به. ومع ذلك ، بالنسبة لمؤسسات طب العيون المجهزة ب IVCM ، يوصي المؤلف بأن يخضع المرضى لأول مرة لفحص مجهري شامل لتجنب الإغفال ، بما في ذلك القرنية والملتحمة وحافة الجفن. بالنسبة لحالات DED الملبسة أو للكشف عن Demodex ، فإن IVCM مناسب بشكل خاص للإجابة الصريحة.
يعرف مرض جفاف العين (DED) بأنه حالة مزمنة من سطح العين ناتجة عن تشوهات في جودة أو كمية السائل المسيل للدموع وانخفاض ثبات الفيلم المسيل للدموع. في ورشة عمل العين الجافة II (DEWS II) ، يتم تصنيف DED إلى خمسة أنواع: جفاف العين المائي (ADE) ، جفاف العين التبخيري (EDE) ، جفاف العين المختلط (MDE) ، الاستعداد لجفاف العين ، وحالة جفاف العين قبل السريرية1. لخص Ralene et al. الممارسة السريرية المهمة ل IVCM في أنواع مختلفة من جفاف العين ، بما في ذلك الأدبيات المنشورة من 2017 إلى 20222. أظهرت الأبحاث الحديثة أن الالتهاب يلعب دورا رئيسيا في التسبب في DED3،4. على وجه الخصوص ، قد تكون كثافة الخلايا المتغصنة (DCs) مؤشرا جيدا على DED المرتبطة بعملية مناعية جهازية5.
يستخدم IVCM تقنية التصوير المقطعي بالليزر متحد البؤر. يوفر دقة أفقية ورأسية تبلغ 1 ميكرومتر. تم توثيق المواصفات الفنية التفصيلية للجهاز في تقرير جيريمي وآخرون6. أثناء فحص سطح العين ، يتم تطبيق IVCM أولا على القرنية7 ، تليها الغدد الملتحمة والميبوميان8. حظي التهاب الجفن ديموديكس باهتمام سريري متزايد في السنوات الأخيرة9،10. يوفر IVCM صورا واضحة للقرنية والملتحمة وحافة الجفن. تسمح هذه الصور للأطباء بتقييم حالة المرض وتسهيل تصوير الخلايا الالتهابية والمناعية وتقديرها.
في تقييم دائرة التنمية الاقتصادية ، يشمل تركيزنا: الخلايا الظهارية للقرنية (CEC). الألياف العصبية تحت الظهارية (SNF); الخلايا الالتهابية / المناعية بين الظهارة وتحت الظهارة; خلايا كأس الملتحمة (CGCs) ؛ الخلايا الالتهابية / المناعية في الملتحمة. غدة ميبوميان acini وفتحات. Demodex folliculorum و Demodex brevis; والخلايا الالتهابية داخل الأنسجة المحيطة. ينبع هذا التركيز من الفيزيولوجيا المرضية: يؤدي الخلل الوظيفي في غدة ميبوميان إلى انخفاض إفراز أو تغيير تكوين الطبقة الدهنية للغشاء المسيل للدموع ، مما يؤدي إلى تسريع التبخر المسيل للدموع وتلف سطح العين. تساهم الإصابة بالديموديكس في حكة العين وعدم الراحة. تفرز CGCs الميوسين ، وهو مكون حاسم للغشاء المسيل للدموع. يمكن أن يتسبب نضوفها في نقص الميوسين. على العكس من ذلك ، فإن DED نفسها تلحق الضرر بهياكل سطح العين ، بما في ذلك CEC و SNF ، وبالتالي ترفع كثافة الخلايا الالتهابية / المناعية في أنسجة القرنية والملتحمة. بعد الحصول على الصور المثالية ، يمكننا استخدام الأدوات الكمية المدمجة في البرنامج بشكل فعال لحساب الخلايا المتعددة المذكورة (الشكل 1). ولكن بالنسبة للتنوع المورفولوجي ل SNF ، نحتاج إلى الاعتماد على البرامج التحليلية للمساعدة في القياس الكمي11،12.
لا غنى عن IVCM للتقييم في الوقت الفعلي لطبقات القرنية والألياف العصبية والخلايا الالتهابية / المناعية في أنسجة سطح العين. لتقييم CGCs ، يعمل علم الخلايا الانطباعي كطريقة بديلة. تستهدف هذه التقنية الملتحمة العصبية ، حيث تصل كثافة خلايا الكأس إلى ذروتها ، مما ينتج عنه قيم أعلى عادة من قياسات IVCM13،14. ومع ذلك ، تخضع النتائج لتقلبات التلوين وخبرة المشغل ، في حين أن البروتوكول الذي يستغرق وقتا طويلا يحد من التنفيذ السريري الروتيني. يمكن ملاحظة انسداد فتحة غدة ميبوميان مباشرة عن طريق الفحص المجهري للمصباح الشقي ، ومع ذلك لا يمكن لهذه الطريقة اكتشاف الانسدادات التي يسببها Demodex brevis ، والتي يحددها IVCM بدقة. لتشخيص الإصابة بالديموديكس ، يوفر إزالة الشعر بالرمش باستخدام الفحص المجهري الضوئي طريقة منخفضة التكلفة. على الرغم من بساطة هذا النهج من الناحية الفنية ، إلا أنه يحمل قيودا كبيرة: إزعاج المريض يقيد أخذ العينات المتعددة ، ويظل العث الموجود في عمق بصيلات الرموش أو فتحات غدة ميبوميان غير قابل للاكتشاف15. في المقابل ، يتيح IVCM فحصا شاملا لمواقع هامش الجفن المتعددة ، بما في ذلك بصيلات الرموش وفتحات غدة ميبوميان ، مع الحد الأدنى من إزعاج المريض. يحقق هذا النهج معدلات إيجابية تشخيصية أعلى بكثير من خلال التصور في الوقت الفعلي في الجسم الحي للطفيليات داخل موائلها الدقيقة16،17.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على إجراء الفحص من قبل لجنة الأخلاقيات في مستشفى هانكو آير للعيون ، وتم الحصول على موافقة مستنيرة من جميع المرضى.
ملاحظة: تشمل معايير الإدراج لاختيار المريض المرضى الذين يقدمون شكاوى من جفاف العين وحكة العين ، والأفراد الذين يسعون إلى إجراء فحوصات روتينية للعين. تشمل معايير الاستبعاد لاختيار المريض المرضى الذين يعانون من ثقب في القرنية أو ثقب وشيك في القرنية ، وأولئك الذين لديهم حساسية من التخدير العيني الموضعي ، والأفراد الصغار جدا (على سبيل المثال ، أقل من 3 سنوات) أو أكبر من أن يتعاونوا ، والمرضى الذين يعانون من شقوق جفنية ضيقة غير قادرة على استيعاب منظار الجفن ، والنساء الحوامل ، والأفراد غير القادرين على التعاون لأسباب أخرى. يمكن العثور على مخطط موجز لسير العمل في الشكل 2. وخطوات التشغيل التفصيلية هي كما يلي.
1. الفحص المسبق
2. أثناء الفحص
3. الفحص اللاحق
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم الحصول على جميع الصور المجهرية IVCM بدقة 384 بكسل × 384 بكسل ، ومجال مراقبة 400 ميكرومتر × 400 ميكرومتر. عند "تصفير" هذا الفحص بشكل صحيح ، سيعرض ثلاث نتائج محتملة فقط في إطار الصورة: أنا) لا توجد صورة على الإطلاق (تجربة غير ناجحة): لم تقم المنطقة البصرية المركزية بأي اتصال بالأنسجة المستهدفة. ب) صورة جزئية فقط (الشكل 7) أو حالات غير طبيعية أخرى (الشكل 8) (تجربة غير ناجحة): أقامت المنطقة البصرية المركزية اتصالا غير مكتمل أو فض...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
أسفر بحث في أدبيات PubMed باستخدام الكلمات الرئيسية "في الجسم الحي للفحص المجهري متحد البؤر" و "مرض جفاف العين" (تم استرجاعه في يونيو 2025) عن > 300 منشور. والجدير بالذكر أن معدلات النشر السنوية قد استقرت عند حوالي 40 ورقة سنويا منذ عام 2021. أنتجت التطبيقات الأوسع نطاقا ل IVCM في اضطرابات سطح العين > 2,000 دراسة على مدار العقدين الماضيين (2004-2024). سريريا ، أحدث IVCM ثورة في التقييم الخلوي لأمراض سطح العين. تتيح هذه التقنية الكشف عن مظاهر الأمراض تحت الإكلينيكية ، مما يسهل ال...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يعلن المؤلفون عدم وجود تضارب في المصالح.
يشكر المؤلفون لينا جين في مستشفى هانكو آير للعيون ومين تشن في قسم طب العيون في مستشفى ووهان آسيا للقلب على المساعدة في بعض الصور ، وجميع المشاركين والموظفين العاملين في إجراء العملية. تم دعم هذا البحث بمنحة من مشاريع البحث العلمي من لجنة الصحة في بلدية ووهان (WX23A20).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| كرات القطن الماصة | جيان تشي، الصين | http://www.hnjianqi.com | لصنع كرات الكحول، صغيرة |
| الجل المعتمد على الكحول | لي كانغ، شنغهاي، الصين | 31107904 | جل مطهر اليدين بدون شطف، 500 مل |
| قطرات العين الكربومرية | فيديسيتش، ألمانيا | 8187195 | جل العيون المعقم لعامل الاقتران، 10 جرام |
| غطاء تلامس القرنية (TomoCap) | هايدلبرغ، ألمانيا | 18829 | الوسط البصري والقرنية المتلامسة بشكل معقم |
| منظار الجفن | أسيكون، الصين | 6102A | لفتح العيون |
| برنامج مستكشف العيون في هايدلبرغ | هايدلبرغ، ألمانيا | الإصدار 1.5.2.0 | البرنامج المرفق مع جهاز IVCM |
| جهاز IVCM | هايدلبرغ، ألمانيا | HRT-?,08398 | المعدات الرئيسية للامتحان |
| عواد القطن الطبية | إيساوند ميد، الصين | www.e-soundmed.com | لتنظيف عيني المريض والمساعدة في فتح العيون، 10 سم |
| 75٪ كحول طبي | هوي تشانغ، الصين | www.huichang888.cn | لصنع كرات الكحول، 75٪ وأكثر؛ 5٪ 500 مل |
| قطرات عين أوكسيبوبروكائين هيدروكلوريد بنسبة 0.4٪ | سانتن، اليابان | http://www.santen.co.jp | مخدر موضعي للعيون، 0.4٪ (0.5 مل: 2 ملغ) |
| قطرات العين توبراميسين | توبريكس، بلجيكا | 8453824 | قطرات العين المضادة للالتهابات، 0.3٪ (5 مل: 15 ملغ) |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.