التغيرات في تدفق دم المبيض خلال فترة ما قبل الإباضة ضرورية للإباضة. تم استخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر في البشر الكبيرة لتقييم ديناميكا الدم في المبيض والتروية. يتم تقديم بروتوكول لتطبيق التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر لتقييم ديناميكا الدم المبيض خلال مرحلتي ما قبل الإباضة وحوائط الإباضة في الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تصوير دوبلر بالموجات فوق الصوتية للتصوير الحي والقياس الكمي لوظيفة الأوعية الدموية للمبيض في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
لتقييم وظيفة الأوعية الدموية للمبيض بشكل فعال وفهم دورها في فسيولوجيا المبيض وعلم الأمراض ، تعد الأساليب غير الغازية في الجسم الحي ضرورية لالتقاط التغييرات في الوقت الفعلي دون تعطيل تدفق الدم الطبيعي. يعد التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر أداة راسخة وغير جراحية لتقييم تدفق دم المبيض في الأنواع الكبيرة ، ولكن تطبيقه كان محدودا في الفئران ، والتي تعد واحدة من أكثر النماذج الحيوانية استخداما للبحث في بيولوجيا المبيض ، مثل الإباضة. الإباضة هي عملية منظمة بإحكام تعتمد على النضوج المنسق للجريبات الذي يحفزه هرمون محفز للجريب ، يليه ارتفاع هرمون اللوتين قبل الإباضة (LH) يؤدي إلى تمزق جدار المسام وإطلاق البويضات للتخصيب. تؤدي زيادة الهرمون اللوتيني أيضا إلى سلسلة من التغييرات الهيكلية والوظيفية في الأوعية الدموية للمبيض (إعادة تشكيل الأوعية الدموية) ، مثل تكوين الأوعية الدموية وانقباض الشعيرات الدموية في موقع تمزق المسامي قبل وقت قصير من الإباضة. بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن زيادة سريعة في تدفق دم المبيض بعد زيادة LH في أنواع متعددة ولكن ليس في الفئران. يستخدم هذا البروتوكول تصوير دوبلر بالموجات فوق الصوتية لتصور الأوعية الدموية لمبيض الفئران وتحديد معلمات ديناميكا الدم. يقدم البروتوكول المقدم هنا طرقا مفصلة لتحضير الهرمونات والتخدير ووضع الفأر وتحديد المبيض والأوعية الدموية باستخدام دوبلر القوة واللون وقياس سرعة تدفق الدم ومعلمات المقاومة. تتيح هذه الطريقة التقييم الطولي في الوقت الفعلي لوظيفة الأوعية الدموية للمبيض في الفئران الحية ، مما يوفر أداة قوية لدراسة وظيفة الأوعية الدموية للمبيض في كل من السياقات الفسيولوجية والمرضية.
المقدمة
المبيض هو عضو شديد الأوعية الدموية ، والتغيرات الدورية والهيكلية والوظيفية المنظمة بإحكام في الأوعية الدموية (إعادة تشكيل الأوعية الدموية) ضرورية لفسيولوجيا المبيض الطبيعية ، بما في ذلك نمو البصيلات والإباضة وتكوين الجسم الأصفر1،2،3،4. تشمل إعادة تشكيل الأوعية الدموية سلسلة من العمليات المنسقة مثل التغيرات في نفاذية الأوعية الدموية ، وتكوين الأوعية الدموية ، وتوسع الأوعية ، وتضيق الأوعية ، والتغيرات في تدفق الدم (ديناميكا الدم). تمكن هذه العمليات المبيض من ضبط إمدادات الدم بسرعة استجابة للإشارات الهرمونية عب....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تم الحفاظ على جميع الفئران المستخدمة بما يتفق بدقة مع دليل المعهد الوطني للصحة لرعاية واستخدام المختبر ، بموافقة أخلاقية من اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامها في جامعة كورنيل. كانت جميع المستخدمة في هذا البروتوكول غير ناضجة (21-23 يوما) فئران C57BL6.
1. التحفيز الهرموني للإباضة الفائقة
- حقن الفئران التي يبلغ عمرها 21-23 يوما بوزن 10-12 جم داخل الصفاق مع 5 وحدة دولية من موجهة الغدد التناسلية المصلي للفرس الحامل (PMSG) متبوعة ب 5 وحدات دولية من موجهة الغدد التناسلية المشيمية البشرية (hCG) بعد 48 ساعة. يتم تحضير كل حقنة عن طريق تخفيف 50 ميكرولتر من الهرمون (المعاد تكوينه من قارورة مخ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
الهدف من هذا البروتوكول هو تطبيق التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر لتصور مبيض الفئران والأوعية الدموية ، وتقييم التغيرات في تروية المبيض ، وتحديد ديناميكا الدم في المبيض.
يوضح الشكل 2 صورا تمثيلية لنفس المبيض عبر نقاط زمنية متعددة خلال فترة حوائط الإباضة (12 ساعة قبل الإباضة و 12 ساعة بعد الإباضة) بعد حقن قوات حرس السواحل الهايتية. يوضح الشكل 2 أ صور الوضع B المستخدمة لتحديد موقع المبيض بالنسبة إلى P.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تقدم هذه الدراسة طريقة غير جراحية لتصور وقياس ديناميكا الدم المبيض في الجسم الحي باستخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر. على عكس الطرق الحالية ، يتيح هذا النهج التقييم في الوقت الفعلي لتدفق الدم دون تعطيل وظيفة الأوعية الدموية. يعد التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر أداة فعالة ومستخدمة على نطاق واسع لتقييم مورفولوجيا المبيض ووظيفة الأوعية الدموية في البشر ونماذج الكبيرة15،16،17
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم دعم هذه الدراسة من قبل NICHD 1R01HD109392. تم الحصول على بيانات التصوير من خلال مرفق التصوير في مركز موارد التكنولوجيا الحيوية في كورنيل (BRC) ، مع S10OD016191 المعاهد الوطنية للصحة للموجات فوق الصوتية VisualSonics Vevo-2100.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| شريط 3M الجراحي | شركة VWR الدولية ذات المسؤولية المحدودة | MMM1534-3 | |
| جل نقل الموجات فوق الصوتية Aquasonic Clear | باركر | PKR-03-08 | |
| مقص الشعر | شركة سكال شيفر ذ.م.م | BBT 2020 | |
| الغونادوتروبين التشيمي البشري | سيغما ألدريتش | 9002-61-3 | |
| مزيل الشعر Nair Body Cream | ناير | إزالة الشعر | |
| Optixcare Eye Lube Plus | أفينتيكس | OPX-4252 | |
| كريم الألكترود باركر سيجنأكريم | باركر | PKR-17-05-CS | |
| مصب فرس حامل الغدد التناسلية | إنزيمات الإبداع | NATE-0969 | |
| نظام التصوير VisualSonics Vevo 2100 | VisualSonics Inc. |
المراجع
- Duffy, D. M., Ko, C., Jo, M., Brannstrom, M., Curry, T. E. Jr Ovulation: Parallels with inflammatory processes. Endocr Rev. 40 (2), 369-416 (2018).
- Feng, Y., et al. Clarity reveals dynamics of ovarian follicular architecture and vasculature in three-dimensions. ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
