يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

بروتوكول الميوكين الناجم عن التمرين CLCF1 للتحقيق في آليات حماية العظام RANKL / OPG في هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث

593 مشاهدة

DOI:

10.3791/69172

نوفمبر 7, 2025

في هذه المقالة

ملخص

تقدم هذه المقالة بروتوكولا شاملا للتحقيق في عامل السيتوكين الشبيه بالكارديوتروپين 1 (CLCF1) كوسيط ناتج عن التمرين لحماية العظام من خلال تعديل محور RANKL / OPG في هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث.

الملخص

حددت الدراسات الحديثة عامل السيتوكين الشبيه بالكارديوتروفين 1 (CLCF1) على أنه "جزيء شباب" ناتج عن التمرين يتوسط فوائد العضلات والعظام ، ولكنه ينخفض مع تقدم العمر. يصف هذا البروتوكول نهجا منهجيا للتحقيق في الدور التنظيمي ل CLCF1 في حماية العظام بوساطة التمرين عبر آليات الحديث المتبادل للمناعة. تشمل المنهجية تحليل العينات السريرية ، وتقنيات التوصيف الجزيئي ، والمقايسات الوظيفية لتوضيح تأثير CLCF1 على منشط المستقبلات لمحور إشارات العامل النووي - رابط κB (RANKL) / osteoprotegerin (OPG). من خلال تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) ، والنشاف الغربي ، وتحرير جينات CRISPR / Cas9 ، وأنظمة الاستزراع المشترك ، يوضح هذا البروتوكول إجراءات الحماية المزدوجة للعظام ل CLCF1 عبر تثبيط ناقضات العظم بوساطة STAT1 وتعزيز بانيات العظم بوساطة STAT3. تتيح الطرق الموصوفة التقييم الشامل لأنماط تعبير CLCF1 ، وتحليلات الارتباط مع معلمات كثافة المعادن في العظام ، والتقييم الميكانيكي لتدخلات العلاج المحتملة لمحاكاة التمرين. على عكس العلاجات التقليدية المضادة للامتصاص التي تستهدف في المقام الأول ناقضات العظم ، قد توفر التدخلات القائمة على CLCF1 ميزة فريدة تتمثل في تعزيز تكوين العظام في نفس الوقت مع تثبيط الارتشاف. يوفر هذا البروتوكول للباحثين إجراءات موحدة للتحقيق في تنظيم التمثيل الغذائي للعظام بوساطة السيتوكينات الناجم عن التمرين ويسهل تطوير التدخلات العلاجية المستهدفة لاضطرابات العظام المرتبطة بالعمر.

المقدمة

يمثل هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث (PMOP) مثالا نموذجيا على التدهور العضلي الهيكلي المرتبط بالعمر حيث يؤدي خلل تنظيم الجهاز المناعي إلى فقدان العظام المرضي1،2،3. على الرغم من أن التمرين معترف به على نطاق واسع باعتباره التدخل غير الدوائي الأكثر فعالية لمنع تدهور العظام المرتبط بالعمر ، إلا أن الآليات الجزيئية الدقيقة الكامنة وراء حماية العظام التي يسببها التمرين ظلت بعيدة المنال حتى وقت قريب4. تطور الفهم المعاصر لعملية التمثيل الغذائي للعظام إلى ما هو أبعد من أطر الغدد الصماء التقليدية ليشمل تفاعلات المناعة العظمية المع....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل لجنة أخلاقيات البحث المؤسسي (البروتوكول #2024-CHSD-0156) ويلتزم بإعلان مبادئ هلسنكي. امتثلت جميع الإجراءات الحيوانية لإرشادات لجنة رعاية واستخدام المؤسسية (البروتوكول # 2024-037). قدم جميع المشاركين موافقة خطية مستنيرة.

1. جمع العينات السريرية وتقييم التدخل في التمرين

  1. توظيف المشاركين وتقييم تاريخ التمرين
    1. تجنيد النساء بعد انقطاع الطمث اللواتي تتراوح أعمارهن بين 55 و 75 عاما لمدة لا تقل عن 1 سنة بعد انقطاع الطمث.
    2. قم بتقييم تاريخ التمرين التفصيلي ، بما في ذلك تكرار النشاط البدني وشدته ونوعه ومدته على مدار الأشهر الستة الماضية باستخدام استب....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يوضح تنفيذ هذا البروتوكول بنجاح الدور التنظيمي ل CLCF1 في عملية التمثيل الغذائي للعظام بوساطة المناعة باستخدام مناهج تجريبية متعددة. تظهر دراسات التحقق السريري انخفاضا كبيرا في تنظيم تعبير CLCF1 في مرضى PMOP مقارنة بالضوابط الأصحاء ، كما هو موضح في الشكل 1 أ ، أظهر تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي لخلايا الدم المحيطية أحادية النواة أن مستويات الحمض النووي الريبي النسبية CLCF1 قد انخفضت بشكل ملحوظ في مجموعة PMOP (ن = 109.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يوفر البروتوكول الموضح هنا إطارا منهجيا شاملا للتحقيق في دور CLCF1 كوسيط ناتج عن التمرين لحماية العظام من خلال تحليل منهجي لمحور RANKL / OPG. حددت الأبحاث الحديثة CLCF1 كعامل ناتج عن التمرين يكافح التدهور العضلي الهيكلي المرتبط بالعمر ، مما يجعله وسيطا مركزيا لحماية العظام التي يسببها التمرين34،35،36. يعالج هذا البروتوكول المعزز فجوة معرفية حرجة في علم المناعة العظمية من خلال توفير منهجية موحدة .......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى أصحاب البلاغ تضارب في المصالح للإعلان.

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون المشاركين الذين تطوعوا لهذه الدراسة والموظفين السريريين في المستشفى المركزي التابع لجامعة شاندونغ الطبية الأولى لمساعدتهم في توظيف المرضى وجمع العينات. نشكر فنيي المختبرات على دعمهم لتجارب زراعة الخلايا والبيولوجيا الجزيئية. قام H.Z. بتصميم وتصميم الدراسة ، وإجراء التجارب ، وتحليل البيانات ، وكتابة المخطوطة. ساهم H.L. في التصميم التجريبي وجمع البيانات ومراجعة المخطوطات. أشرف يوسف على المشروع وقدم ملاحظات نقدية وحرر المخطوطة. قام جميع المؤلفين بمراجعة المخطوطة النهائية ووافقوا عليها لتقديمها.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
<سترونغ>سيل كلتشر ميديا & المواد الكيميائية
كبريتات ثنائي الميثيل (DMSO)سيغما-ألدرتشD2650Purpose_Application:  مكون وسط الحفظ بالتجميد
Specifications_Comments: درجة علم الأحياء الجزيئي، مصفى بالتعقيم
DMEM mediumثيرمو فيشر العلمي11965092Purpose_Application:  متوسط زراعة الخلايا العظمية MG-63
Specifications_Comments: تركيبة عالية الجلوكوز مع L-جلوتامين
مصل الأبقار الجنيني (FBS)ثيرمو فيشر العلمي16000044Purpose_Application:  مكمل زراعة الخلايا (معطل بالحرارة)
Specifications_Comments: تم تعطيله بالحرارة عند 56Â ° C لمدة 30 دقيقة
البنسلين-ستريبتوميسينثيرمو فيشر العلمي15140122Purpose_Application:  مكمل المضادات الحيوية للزراعة المعقمة
Specifications_Comments: مخزون 100X، تركيز نهائي 1٪
بوليبرين (بروميد هيكساديميثرين)سانتا كروز للتكنولوجيا الحيويةSC-134220Purpose_Application:  معزز تحويل الفيروسات اللينتي
Specifications_Comments: 8 & Icirc; ¼ تركيز العمل في الجاذبية إلى الملليتر
بوروميسين ثنائي الهيدروكلوريدإنفيفوجينالنملة-PR-1Purpose_Application:  مضاد حيوي انتقائي للخلايا المحولة
Specifications_Comments: 4 & Icirc; ¼ تركيز اختيار الجاذبية/مل لمدة 7 أيام
RPMI-1640 متوسطثيرمو فيشر العلمي11875093Purpose_Application:  وسط زراعة خلايا اللمفاوية B-B راجي
Specifications_Comments: مع إل-جلوتامين، بدون الفينول الأحمر المفضل
محلول تريبان بلوثيرمو فيشر العلمي15250061Purpose_Application:  تقييم بقاء الخلية
Specifications_Comments: حل 0.4٪ لاختبار الاستبعاد
حاوية تجميد بمعدل تحكمثيرمو فيشر العلمي5100-0001Purpose_Application:  تجميد الخلايا بمعدل تحكم (-1Â ° C/min)
Specifications_Comments: السيد فروستي أو ما يعادله ل -1Â ° تبريد C/min
أنابيب جمع الدم من EDTAبكالوريوس العلوم الحيوية366643Purpose_Application:  جمع الدم الوريدي باستخدام مضاد التخثر
Specifications_Comments: سعة 10-20 مل، أنابيب علوية بنفسجية
تدرج كثافة Ficoll-Paque PLUSسيتيفا (GE Healthcare)17144003Purpose_Application:  عزل PBMC عبر الطرد المركزي بالكثافة
Specifications_Comments: معقم ومختبر بواسطة السموم الداخلية لفصل الخلايا
محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS)ثيرمو فيشر العلمي14190144Purpose_Application:  غسل الخلايا وتخفيف المحلول
Specifications_Comments: معقم، درجة زراعة الخلايا
<> الحمض النووي الريبي المقاوم واستخراج qPCR
الكلوروفورم (درجة ACS)سيغما-ألدرتشC2432Purpose_Application:  فصل الطور في استخراج الحمض النووي الريبي
Specifications_Comments: درجة كاشف ACS، ودورة السيرك؛ ‰ ¥ نقاء 99٪
الإيثانول (75٪، درجة جزيئية)سيغما-ألدرتشE7023Purpose_Application:  غسل حبيبات RNA
Specifications_Comments: درجة علم الأحياء الجزيئي، تحضير طازج
الأيزوبروبانول (الدرجة الجزيئية)سيغما-ألدرتشI9516Purpose_Application:  ترسيبات RNA ترسيب
Specifications_Comments: درجة علم الأحياء الجزيئي، ودورة السيرك؛ ‰ ¥ نقاء 99.5٪
مياه خالية من النوكليازثيرمو فيشر العلميAM9930Purpose_Application:  تحضير تفاعل PCR
Specifications_Comments: خالي من DNase/RNase، تم اختباره لتطبيقات PCR
فيلم لاصق بصريثيرمو فيشر العلمي4311971Purpose_Application:  الختم البصري لألواح qPCR
Specifications_Comments: الجودة البصرية لتطبيقات qPCR
ألواح PCR (96-well)ثيرمو فيشر العلميN8010560Purpose_Application:  تنسيق 96 بئر لتقنية qPCR
Specifications_Comments عالية الإنتاجية: أبيض، قاع شفاف للكشف البصري
شرائط أنابيب PCRثيرمو فيشر العلميAB0451Purpose_Application:  تفاعلات PCR صغيرة الحجم
Specifications_Comments: شرائط ب8 أنابيب مع أغطية فردية
مجموعة كاشف RT برايم سكريبتنبذة تاكاراRR037APurpose_Application:  النسخ العكسي للحمض النووي الريبي إلى cDNA
Specifications_Comments: باستخدام ممحاة gDNA لإزالة الحمض النووي الجيني
مزيج SYBR Green Masterأنظمة حيوية تطبيقية4309155Purpose_Application:  تضخيم واكتشاف PCR في الوقت الحقيقي
Specifications_Comments: باستخدام صبغة ROX المرجعية لتطبيع
كاشف تريزول (تحلل RNA)ثيرمو فيشر العلمي15596026Purpose_Application:  تحليل الخلايا واستخراج الحمض النووي الريبي
Specifications_Comments: تخزين في 4Â ° C، استخدمها خلال 6 أشهر
تحليل <القوي>البروتين - ويسترن بلوت
أكريلاميد/بيس-أكريلاميد (29:1)بيو-راد1610146Purpose_Application:  بلمرة جل SDS-PAGE
Specifications_Comments: محلول أكريلاميد بنسبة 30٪
مجموعة اختبار بروتين BCAثيرمو فيشر العلمي23225Purpose_Application:  قياس تركيز البروتين
Specifications_Comments: متوافق مع التقليل لقياس دقيق
ركيزة التوألؤ الكيميائي المعزز (ECL)ثيرمو فيشر العلمي32106Purpose_Application:  كشف البروتينات الكيميائية المتوهجة
Specifications_Comments: كشف حساسية الفيمتوغرام
الحليب الجاف خالي الدسممختبر علمي170-6404Purpose_Application:  عامل حاجز البقع الغربية
Specifications_Comments: درجة الحجب، خلفية منخفضة
كوكتيل مثبط الفوسفاتازروش للعلوم التطبيقية4906845001Purpose_Application:  منع إزالة الفسفرة البروتينية
Specifications_Comments: يشمل حمض الأوكاديك والكاليكولين A
سلم البروتين المسبقبيو-راد1610394Purpose_Application:  معايير الوزن الجزيئي المرجعية
Specifications_Comments: نطاق 10-250 كيلو دالتون مع 11 نطاقا
كوكتيل مثبط البروتيازاتروش للعلوم التطبيقية11697498001Purpose_Application:  منع تحلل البروتين أثناء التحليل
Specifications_Comments: خال من EDTA للفوسفاتاز المعتمد على المعادن
أغشية PVDF (0.45 & Icirc؛ ¼ m)ميليبور سيغماIPVH00010Purpose_Application:  غشاء نقل البروتين (0.45 & Icirc؛ ¼ m pore)
Specifications_Comments: خلفية فلورية منخفضة
مخزن تحليل RIPAتقنية الإشارة الخلوية9806SPurpose_Application:  استخراج بروتين الخلايا الكاملة
Specifications_Comments: محلول تحلل جاهز للاستخدام مع المنظفات
مخزن تحميل العينة (4X)بيو-راد1610747Purpose_Application:  تحضير عينات البروتين ل SDS-PAGE
Specifications_Comments: تحميل الصبغة ب Icr; ²-ميركابتوإيثانول
مخزن SDS-PAGE الجاريبيو-راد1610732Purpose_Application:  الرحلان الكهربائي البروتيني
Specifications_Comments: نظام المخزن الثلاثي-جلايسين-SDS
فلوريد الصوديومسيغما-ألدرتش201154Purpose_Application:  تثبيط إضافي للفوسفاتاز
Specifications_Comments: تركيز عمل 50 ملليمولار
الصوديوم أورثوفاناديتسيغما-ألدرتشS6508Purpose_Application:  حفظ الفسفرة JAK2/STAT
Specifications_Comments: تركيز عمل 1 ملليمول، تحضير طازج
مركز المخزن الانتقاليبيو-راد1704156Purpose_Application:  نقل البروتين شبه الجاف
Specifications_Comments: مركز 10X، مخفف قبل الاستخدام
محلول ملحي معبأ بثلاثي مع Tween-20 (TBST)تقنية الإشارة الخلوية9997SPurpose_Application:  غسل الغشاء وتخفيف الأجسام المضادة
Specifications_Comments: 0.1٪ توين-20، درجة الحموضة 7.6
<قوي>كريسبر/تحرير الجينات
مجموعة نقل فوسفات الكالسيومبروميغاE1200Purpose_Application:  نقل الحمض النووي إلى خلايا التغليف
Specifications_Comments: كفاءة عالية في النقل لإنتاج فيروسات العدسة
مجموعة استخراج جل الحمض النوويتشياغن28706Purpose_Application:  تنقية منتجات PCR للتسلسل
Specifications_Comments: نظام تنقية قائم على الأعمدة
ناقل GV371 اللينتيفيروسالشركة جينكيم المحدودةGV371Purpose_Application:  تعبير كريسبر/كاس9 لجين الضرب
Specifications_Comments: نظام لينتيفيروسات CRISPR/Cas9 المستعد للاستخدام
HEK293T خط الخليةATCCCRL-3216Purpose_Application:  خط خلايا تغليف لينتيفيروس
Specifications_Comments: خط خلايا تغليف قابلة للنقل القابل للنقل
خدمة تسلسل سانجرشركة ماكروجينتقليدPurpose_Application:  التحقق من الإغلاق والتحليل غير الهدفي
Specifications_Comments: تسلسل قياسي مع تمهيدات مخصصة
T7 إندونوكلياز Iمختبرات نيو إنجلاند البيولوجيةM0302SPurpose_Application:  التحقق من كفاءة القطع في كريسبر
Specifications_Comments: إبطان النوكلياز الخاص بعدم التطابق للتحقق من صحة كريسبر
<سترونغ>إليسا & اختبارات مناعة
ألواح ELISA (96 بئر، قاع مسطح)كورنينج3590Purpose_Application:  تفاعل الركيزة ELISA
Specifications_Comments: عالي الارتباط ومسطح القاع ل ELISA
ELISA مجموعة ثنائية CLCF1 البشريةR& دي سيستمزDY1234Purpose_Application:  قياس كمية بروتين CLCF1 (31.2-2000 بيغم/مل)
Specifications_Comments: نطاق الكشف: 31.2-2000 pg/mL، CV & 10%
p24 مجموعة إليسا (عيار لينتيفيرال)شركة زيبتوميتريكس801111Purpose_Application:  تحديد عيار اللينتيفيرال
Specifications_Comments: لتحديد عيار العدسة الفيروسية (>10â ¸ TU/mL)
<اختبارات قوية>وظيفية
مجموعة تلطيع أليزارين ريد إسسيغما-ألدرتشA5533Purpose_Application:  تصور ترسيب الكالسيوم
Specifications_Comments: محلول 2٪ في ماء مقطر، درجة حموضة 4.1-4.3
مجموعة نشاط الفوسفاتاز القلويأبكامab83369Purpose_Application:  قياس النشاط الإنزيمي ALP
Specifications_Comments: اختبار لوني، يقرأ عند 405 نانومتر
حمض الأسكوربيك (L-أسكوربيك اسكوربك)سيغما-ألدرتشA4544Purpose_Application:  مكون الوسط العظامي
Specifications_Comments: 50 & Icirc; ¼ تركيز نهائي للغ/ملتر
كلوريد سيتيل بيريدينيومسيغما-ألدرتشC9002Purpose_Application:  استخراج Alizarin Red S للقياس
Specifications_Comments: محلول 10٪ لاستخراج الصبغة
ديكساميثازونسيغما-ألدرتشD4902Purpose_Application:  مكون وسط العظام
Specifications_Comments: تركيز نهائي 10 نانومتر
Î ²-جليسروسفاتسيغما-ألدرتشG9422Purpose_Application:  مكون وسط العظام
Specifications_Comments: تركيز نهائي 10 ملليمولار
وسط التمايز العظميبروموسيلC-28010Purpose_Application:  تحفيز تمايز الأرواستيات العظمية
Specifications_Comments: وسط تقويمي كامل جاهز للاستخدام
إدخالات زراعة الخلايا في ترانسويل (0.4 & Icirc؛ ¼ m)كورنينج3470Purpose_Application:  نظام الزراعة المشتركة مع 0.4 & Icirc; ¼ فصل m
Specifications_Comments: غشاء تيريفثالات بولي إيثيلين، عقيم
Equipment - الآلات الرئيسية
الطرد المركزي (عالي السرعة، مبرد)إبندورف5430RPurpose_Application:  معالجة العينات وفصل الخلايا
Specifications_Comments: مبرد، الحد الأقصى 30,000 × g
نظام تصوير الإضاءة الكيميائيةمختبرات بيو-راد12003154Purpose_Application:  تصوير وقياس البلوط الغربي
Specifications_Comments: توثيق الجل وتصوير البقعة الغربية
حاضنة ثاني أكسيد الكربون (مرطبة)ثيرمو فيشر العلمي51030287Purpose_Application:  صيانة زراعة الخلايا (37Â ° C، 5٪ CO2)
Specifications_Comments: ثلاثي الغاز (CO2/O2/N2)، التحكم في الرطوبة
جهاز مراقبة معدل ضربات القلب (حزام الصدر)بولار إلكتروH10Purpose_Application:  المراقبة المستمرة لمعدل ضربات القلب
Specifications_Comments: الاتصال بالبلوتوث، وAcirc; ± دقة 1 نبضة في الدقيقة
جهاز Hologic Discovery جهاز DXAشركة هولوجيكالاكتشاف أPurpose_Application:  قياس كثافة المعادن العظمية
Specifications_Comments: مع برنامج APEX v4.5، يتطلب مراقبة جودة يومية
قارئ الميكروبليت (متعدد الأوضاع)بيوتيك إنسترومنتسالتآزر H1Purpose_Application:  قراءة وقياس الامتصاص للوحة ELISA
Specifications_Comments: الأشعة فوق البنفسجية، الفلورة، كشف التلميع
جهاز المشي الآليلايف فيتنس95TiPurpose_Application:  التدخل الرياضي المعياري
Specifications_Comments: السرعة المتغيرة من 0 إلى 16 كم/س، 0-15٪ انحدار.
نظام PCR في الوقت الحقيقي (CFX96 أو ما يعادله)مختبرات بيو-راد1855195Purpose_Application:  تضخيم وكشف PCR في الوقت الحقيقي
Specifications_Comments: كتلة بسعة 96 بئرا، قادرة على التدرج
software & أدوات التحليل
برنامج APEX الإصدار 4.5 (تحليل DXA)شركة هولوجيكالإصدار 4.5Purpose_Application:  تحليل DXA وحساب BMD
Specifications_Comments: تحليل BMD مع قاعدة بيانات مرجعية
مايسترو Bio-Rad CFXمختبرات بيو-رادCFX مايستروPurpose_Application:  تحليل بيانات qPCR وتحديد CT
Specifications_Comments: تحليل PCR في الوقت الحقيقي وتصدير البيانات
GraphPad Prism v9.0برنامج جراف بادالإصدار 9.0Purpose_Application:  التحليل الإحصائي وتوليد الرسوم البيانية
Specifications_Comments: برنامج إحصائي مع توليد الرسوم البيانية
ImageJ/Fiji v1.53المعاهد الوطنية للصحةالإصدار 1.53Purpose_Application:  قياس كثافة النقاط الغربية وتحليل الصور
Specifications_Comments: تحليل الصور باستخدام أدوات القياس
مايكروسوفت إكسل 365شركة مايكروسوفت365Purpose_Application:  تنظيم البيانات والحسابات الأساسية
Specifications_Comments: تنظيم البيانات والوظائف الإحصائية الأساسية
<قوي>مستهلك ومواد استهلاكية أدوات بلاستيكية
أنابيب الطرد المركزي الدقيق بسعة 1.5 ملإبندورف22363204Purpose_Application:  تخزين ومعالجة العينات بحجم صغير
Specifications_Comments: خالي من DNase/RNase ومنخفض الارتباط
أنابيب مخروطية بسعة 15 ملكورنينج430766Purpose_Application:  معالجة عينات متوسطة الحجم
Specifications_Comments: بولي بروبيلين، مدرج مع أغطية
ألواح زراعة الخلايا ذات 24 بئركورنينج3524Purpose_Application:  إعداد الزراعة المشتركة والاختبارات الوظيفية
Specifications_Comments: معالجة زراعة الأنسجة، قاع مسطح
أنابيب مخروطية بسعة 50 ملكورنينج430829Purpose_Application:  جمع عينات ومعالجتها بكميات كبيرة
Specifications_Comments: بولي بروبيلين، مدرج مع أغطية
الكرايوفيال (1 مل)ثيرمو فيشر العلمي375418Purpose_Application:  تخزين الخلايا والعينات طويل الأمد عند -80Â ° C
Specifications_Comments: خيط خارجي، ختم O-ring، -196Â ° تصنيف C
معابد باستور (عقيمة)فيشر ساينتيفك13-678-20APurpose_Application:  جمع عينات معقمة ونقلها
Specifications_Comments: ملفوفة بشكل فردي، معقمة

المراجع

  1. Rachner, T. D., Khosla, S., Hofbauer, L. C. Osteoporosis: now and the future. Lancet. 377 (9773), 1276-1287 (2011).
  2. Chen, X., et al. Association of cardiotrophin-like cytokine factor 1 levels in peripheral....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

CLCF1 RANKL OPG qPCR CRISPR