مقالة منهجية

بروتوكول لبناء نموذج فأر لتليف عضلة القلب الناتج عن ارتفاع ضغط الدم باستخدام الأنجيوتنسين II

DOI:

10.3791/69409

⸱

نوفمبر 14, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital, Southwest Medical University, 2Shenzhen Traditional Chinese Medicine Hospital, 3Guangdong-Macao In-Depth Cooperation Zone in Hengqin, Chinese Medicine Guangdong Laboratory (Hengqin Laboratory), 4State Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Syndrome, Guangdong Provincial Hospital of Chinese Medicine, Guangdong Provincial Academy of Chinese Medical Sciences, The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, 5School of Pharmacy, Southwest Medical University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعد التسريب المستمر للأنجيوتنسين II (Ang II) عبر المضخات التناضحية أحد الطرق الكلاسيكية لبناء نماذج حيوانية لتليف عضلة القلب الناتج عن ارتفاع ضغط الدم. قام هذا البروتوكول بتحسين عملية بناء هذا النموذج بشكل منهجي ووضع النقاط الرئيسية لزرع المضخة التناضحية وتحديد المواقع وإعداد تركيز Ang II.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعد التسريب المستمر للأنجيوتنسين II (Ang II) عبر المضخات التناضحية نهجا مستخدما على نطاق واسع لإنشاء نماذج حيوانية لتليف عضلة القلب الناتج عن ارتفاع ضغط الدم. ومع ذلك ، فإن هذه التقنية تظهر قيودا معينة في التقارير الحالية ، مثل عدم استقرار Ang II ، ووضع المضخة غير الدقيق ، وعدم وجود إجراء موحد. ولا تزال التقارير الحالية عن منهجية إنشاء هذه المنهجية محدودة نسبيا. قام هذا البروتوكول بشكل منهجي بتحسين إنشاء نماذج تليف عضلة القلب الناجمة عن ارتفاع ضغط الدم بالمضخة التناضحية Ang II في الفئران ، بما في ذلك التحضير الموحد لمحلول Ang II ، ومعايرة الجرعة ، والزرع الدقيق تحت الجلد للمضخات التناضحية ، والمعايير الكمية لمؤشرات تقييم النموذج. أظهرت النتائج التجريبية أن تليف عضلة القلب الناجم عن المضخة التناضحية Ang II في الفئران ذات معدلات البقاء على قيد الحياة العالية. استقرت مستويات ضغط الدم الانقباضي عند 160 ملم زئبق بعد سبعة أيام من الزرع تحت الجلد. قللت الفئران النموذجية بشكل كبير من كسور طرد البطين الأيسر وزادت من الأبعاد الانبساطي النهائي للبطين الأيسر. بالمقارنة مع مجموعة الجراحة الوهمية ، زاد ترسب الكولاجين داخل الأنسجة الخلالية لعضلة القلب والمناطق المحيطة بالأوعية الدموية. هذه الدراسة ، بناء على حجم عينة صغير (ن = 6) ، أثبتت مبدئيا صحة جدوى إنشاء نموذج فأر لتليف عضلة القلب بارتفاع ضغط الدم باستخدام Ang II جنبا إلى جنب مع مضخة تناضحية ، وأنشأت نظاما للتحقق من النمط الظاهري الكمي.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتميز تليف عضلة القلب (MF) ، وهو نتيجة مرضية رئيسية لارتفاع ضغط الدم ، بترسب مفرط لألياف الكولاجين داخل عضلة القلب التالفة أو المضغوطة. وهو يمثل أحد أهم أشكال تلف الأعضاء المستهدفة بوساطة ارتفاع ضغط الدم ويساهم في ضعف القلب التدريجي1،2. يعد إنشاء نماذج حيوانية مناسبة أمرا ضروريا للنهوض بالبحث الميكانيكي وتطوير استراتيجيات علاجية جديدة لتليف عضلة القلب الناتج عن ارتفاع ضغط الدم. يلعب الأنجيوتنسين الثاني (Ang II) ، وهو مستجيب مركزي لنظام الرينين والأنجيوتنسين ، دورا محوريا في التسبب في ارتفاع ضغط الدم3. لذلك أصبح الحث القائم على Ang II نهجا مستخدما على نط....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تنفيذ جميع الإجراءات التجريبية وفقا للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام المختبر التابعة للمعاهد الوطنية للصحة ، وتمت الموافقة على البروتوكولات التجريبية من قبل لجنة أبحاث بجامعة ساوث ويست الطبية (رقم الموافقة SWMU2020317).

1. تحضير محلول Ang II وملء المضخة التناضحية

  1. حدد 12 فأرا ذكورا من فئة C57BL / 6J من فئة SPF (انظر جدول المواد) تزن 20 ± 1 جم عن طريق اختيار عمرها 8 أسابيع لتوحيدها التنموي للتحكم في المربكات المرتبطة بالعمر. قسم الفئران إلى مجموعة جراحة وهمية ومجموعة نموذجية باستخدام طريقة التوزيع العشوائي البسيطة، مع 6 فئران في كل مجموعة.
  2. قم بقياس و....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم زرع اثني عشر فأرا تحت الجلد بمضخات تناضحية ونجوا. أصيبت جميع مجموعة النماذج بارتفاع ضغط الدم (ن = 6). بعد سبعة أيام من الزرع ، تجاوز متوسط SBP في المجموعة النموذجية 160 مم زئبق (الشكل 1 أ). في الأيام 14 و 21 و 28 ، ظل SBP في مجموعة النماذج باستمرار فوق 160 مم زئبق. في المقابل ، حافظت مجموعة الجراحة الوهمية على مستويات SBP الطبيعية (حوالي 90-110 مم زئبق) طوال التجربة دون ارتفاع كبير.

بعد ثمانية وعشرين يوما من زرع المضخة التناضحية ، أشار تخطيط صدى القلب إلى أنه ب.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

قام هذا البروتوكول بتحسين الخطوات الرئيسية التي ينطوي عليها التسريب المستمر ل Ang II للحث على تليف عضلة القلب الناتج عن ارتفاع ضغط الدم باستخدام مضخة تناضحية وفصل الجوانب الحرجة ، مثل وضع الزرع للمضخة التناضحية وضبط تركيز Ang II. تم اختيار مضخة نموذج 2004 لمدة 4 أسابيع ، وتم حساب جرعة Ang II بناء على معدل التسريب الاسمي ، مع الأخذ في الاعتبار الحد الأدنى من التباين بين الدفعات. تم تأكيد فعالية هذا النموذج من خلال مراقبة SBP ، والموجات فوق الصوتية دوبلر للون القلبي ، وتلوين ماسون. في هذا .......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن جميع المؤلفين أن هذه المخطوطة لا يوجد بها تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82074378) ، ومشروع قسم العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان (2022YFS0618) ، ومشروع مكتب العلوم والتكنولوجيا وعمل المواهب في لوتشو (2023JYJ029) ، ومشروع مختبر مقاطعة قوانغدونغ للطب الصيني التقليدي لعام 2024 (HQCML-C-2024005) ، وبرنامج شنتشن للعلوم والتكنولوجيا (JCYJ20230807094603007 ، JCYJ20240813152440051) ، وصندوق شنتشن للبحوث الطبية (A2403028) ، مشروع جمعية سيتشوان الطبية (Q2025014) ومشروع جامعة ساوث ويست الطبية (2024ZKZ007 ، 2024ZKY073 ، 2023ZYYQ04). لم يكن للممول أي دور في تصميم الدراسة أو تحليل البيانات أو قرار النشر.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
أنغ الثانيشركة سيغما-ألدريتشسيغما، A9525
آلة تخديرشركة شينزين ريوارد لايف ساينس المحدودةR530
جهاز تنفسشركة شينزين ريوارد لايف ساينس المحدودةR415
GraphPad Prism شركة جراف باد سوفتوير إنك.الإصدار 9.0
جهاز قياس ضغط الدم الذكي غير الجراحيشركة نيبون سوفت دراجون المحدودةسوفترون، BP-98A
المجهر الضوئيشركة ييجينغتونغ للتكنولوجيا البصرية (شنغهاي) المحدودةأوليمبوس، SZ61TR
محلول وطقم تلوين ماسون ثلاثي الألوانشركة بكين سوليباو للتكنولوجيا المحدودةسولاربيو، G1340
فئرانشركة تشنغدو دوسي للحيوانات الاستثمارية المحدودةC57BL/6J
المضخات الأسموزيةشركة ألزاألزيت، موديل 2004
أنظمة التصوير بالموجات فوق الصوتيةشركة فوجي فيلم فيجوالسونيكس، كندافوجي فيلم، فيفو 3100

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhao, D., Liu, J., Wang, M., Zhang, X., Zhou, M. Epidemiology of cardiovascular disease in China: current features and implications. Nat Rev Cardiol. 16 (4), 203-212 (2019).
  2. Czubryt, M. P., Hale, T. M. Cardiac fibrosis: pathobiology and therapeutic targets. Cell Sign....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

الفيديو قريباً

مقالات ذات صلة