علم الأدوية الشبكي ودراسة تجريبية للخلايا المختبرية لاستكشاف الإمكانات العلاجية لمشتقات الثيازولون في الساركوما العضلية المخططة

ملخص

نقدم دراسة تبحث بشكل منهجي في الإمكانات العلاجية لمشتقات الثيازولون ضد الساركوما العضلية المخططة بناء على علم الأدوية الشبكي والكيمياء الحاسوبية ، مع التحقق من الصحة والتقييم يتم إجراؤه من خلال تجارب الخلايا المختبرية .

الملخص

الساركوما العضلية المخططة (RD) هي ورم خبيث ينشأ من الخلايا الجذيرية ، والتي تشكل تهديدا خطيرا لصحة الأطفال والمراهقين. بناء على إمكانات مشتقات الثيازولون في مجموعة متنوعة من الأنشطة البيولوجية ، تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف آليات مشتقات الثيازولون بشكل منهجي في علاج RD من خلال الجمع بين علم الأدوية الشبكية وتجارب الخلايا في المختبر . من خلال علم الأدوية الشبكي ، تم دمج البيانات عالية الإنتاجية للتنبؤ بالأهداف المحتملة للثيازولون. بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدام برنامج AutoDock Vina لحساب طاقة الارتباط للمركب وجزيء البروتين المستهدف ، مما يكشف عن مسار الإشارات المرتبط ب RD. أخيرا ، تحققت تجارب الخلايا في المختبر من التأثير القمعي للورم للمركبات. تم استخدام علم الأدوية الشبكية لتحليل أهداف مشتقات الثيازولون في علاج RD ، وتم الحصول أخيرا على 172 جينا مستهدفا عن طريق الجمع وإلغاء التكرار. تم فحص خمسة أهداف بروتينية ذات طاقة ربط منخفضة عن طريق الالتحام بين المركب وجزيء البروتين المستهدف ، PIK3CD و AKT1 و GSK3B و HSP90AB1 و ITGB1. أظهرت نتائج تجارب زراعة الخلايا في المختبر أن مشتقا محددا من الثيازولون كان له تأثير مثبط كبير على خطوط خلايا RD ، مما يوفر أساسا علميا لاكتشاف أهداف جديدة ومركبات فعالة لعلاج RD. كشفت هذه الدراسة عن آليات مشتقات الثيازولون في علاج RD من خلال مزيج من علم الأدوية الشبكي والتجارب في المختبر وقدمت منظورا جديدا لاستراتيجيات تطوير الأدوية والعلاج المستقبلية.

المقدمة

الساركوما العضلية المخططة (RD) ، ساركوما الأنسجة الرخوة شديدة العدوانية لدى الأطفال تمثل تهديدا كبيرا لصحة الأطفال ، مع خيارات علاجية محدودة. تشير الدراسات الوبائية إلى أنه في حين أن RD يظهر معدلات إصابة منخفضة نسبيا ، فإن الورم الخبيث المرتفع والتشخيص السيئ يمثلان تحديات سريرية كبيرة. يصنف RD إلى أربعة أنواع فرعية نسيجية متميزة: الجنينية ، السنخية ، خلية المغزل / التصلب ، ومتعددة الأشكال ، مع ساركوما عضلية مخططة جنينية (ERMS) كونها الشكل الأكثر^{انتشارا 1،2،3}. تتضمن الاستراتيجيات العلاجية الحالية لمرضى ERMS منخفضي الخطورة الذين تم تشخيصهم حديث....

البروتوكول

تم تنفيذ جميع إجراءات علم الأدوية بالشبكة وفقا للمبادئ التوجيهية لطرق تقييم علم الأدوية الشبكي²¹. يتم توضيح سير عمل علم الأدوية الشبكي الشامل المعتمد في هذه الدراسة بشكل تخطيطي في الشكل 2.

تخليق مشتقات الثيازولون
تم تصنيع مشتقات الثيازولون في هذه الدراسة في عملنا^{السابق 19} ، من خلال تفاعل التكسير غير المتماثل عن بعد المحفز بالنحاس. استخدم التفاعل CuI كمحفز و Pybox ligand اللولبي (L1) كنواة للتحكم المجسم ، في قاعدة DIPEA، ونظام مذيب الميثانول عند -10 درجة مئوية لمدة 48 ساعة، مما يحقق اقتران انتقائي عال بين استرات....

النتائج

في هذه الدراسة, 13 مشتقات الثيازولوني (المركبات أ-م; الشكل 3 ، الشكل 4) تم تصنيعه مسبقا^{، تم اختيار 19} لتقييم نشاطها المثبط ضد الخلايا السرطانية (الشكل 5). من بين هذه المركبات ، أظهر المركب m عند 100 ميكرومتر أعلى معدل تثبيط ضد خلايا RD (خلية الساركوما العضلية المخططة الجنينية) (STR Authenticated)²². كشفت التجارب اللاحقة التي تنطوي على تركيزات متفاوتة (5 ميكرومتر ، 10 ميكرومتر ، 20 ميكر.......

المناقشة

يشيع استخدام علم الأدوية الشبكي للتنبؤ بالجزيئات النشطة المحتملة وفحصها داخل مكونات الطب الصيني التقليدي المعقدة ، ولتوضيح الآليات التآزرية للإجراءات متعددة المكونات والأهداف ومتعددة المسارات في التركيبات العشبية. في هذه الدراسة ، طبقنا نهج علم الأدوية الشبكي للتحقيق بشكل منهجي في الآلية المحتملة لمشتق الثيازولون المركب حديثا ضد RD من خلال بناء شبكة مركب للمسار المستهدف والمرض. في هذه الدراسة ، قمنا بتقييم منهجي التأثيرات المثبطة ل 13 مشتقا من الثيازولون على تكاثر خلايا RD للساركوما العض.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
مجموعة اختبار CCK-8	شركة بيوتايم للتكنولوجيا الحيوية المحدودة.	C0038	مجموعة تستخدم لقياس بقاء الخلايا وتكاثرها بناء على تقليل ملح رباعي التيرازوليوم القابل للذوبان في الماء لتكوين منتج ملون.
المقعد النظيف	شركة سوتشو أنتاي إيرتك المحدودة	SW-CJ-1FD	محطة عمل تدفق هواء طبقي توفر بيئة معقمة للتعامل مع مزرعات الخلايا والمواد الحساسة الأخرى.
حاضنة CO2	قوة الشفاء	HF90	يتم استخدام بيئة تحكمت بدرجة الحرارة والرطوبة وبيئة <تحت >2< أو تحت > ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على ظروف نمو مثالية.
مستوى الجلوكوز العالي DMEM	السيتيفا	SH30022.01	وسط زراعة الخلايا بتركيز جلوكوز مرتفع (4.5 جرام/لتر)، مناسب لأنواع مختلفة من الخلايا، بما في ذلك الخلايا الثديية سريعة النمو.
FBS	يسين	40130ES76	مكمل شائع في وسائط زراعة الخلايا، يوفر عوامل نمو أساسية وهرمونات ومغذيات لتكاثر الخلايا.
المجهر المقلوب	أوليمبوس	IX51	مجهر مصمم مع العدسة الموضوعية أسفل المرحلة، يسمح بمراقبة المزارع الخلوية في قوارير أو صفائح من الأسفل.
قارئ اللوحة الدقيقة	دياتيك	طائرات DR-200B	أداة تستخدم للكشف عن الأحداث البيولوجية أو الكيميائية أو الفيزيائية في عينات الصفائح الصغيرة عن طريق قياس الامتصاص أو التألق أو التلميع.
برنامج تلفزيوني	شركة جينوو للتكنولوجيا الطبية الحيوية المحدودة.	GNM20012	يستخدم محلول العزل بشكل شائع في الأبحاث البيولوجية لغسل الخلايا، وتخفيف المحاليل، والحفاظ على استقرار الرقم الهيدروجيني.
RD (خلية الورم العضلي الجنيني (RD) (تم التحقق من STR)	شركة شنغهاي فوهينغ للتكنولوجيا الحيوية المحدودة.	FH0712	تم التحقق من صحة خط الخلية من خلال تحليل التكرار القصير (STR)، ويمتلك خلفية جينية محددة جيدا وهوية خلوية واضحة، مما يضمن موثوقية وقابلية تكرار البيانات التجريبية.
RMPI ميديوم موديفايد (1640)	السيتيفا	SH30809.01	وسط زراعة الخلايا المستخدم على نطاق واسع تم تطويره أصلا لخلايا الكريات البيضاء البشرية، يستخدم الآن لأنواع مختلفة من خلايا الثدييات.
تريبسين-إيدتا	شركة جينوو للتكنولوجيا الطبية الحيوية المحدودة.	GNM25200	محلول يستخدم لفصل الخلايا الملتصقة من أسطح الزراعة عن طريق هضم البروتينات خارج الخلايا وتخلب أيونات الكالسيوم.