يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة بحثية
تم إنشاء نموذج للشيخوخة في الفئران وخلايا HK-2 باستخدام D-جالاكتوز. تم تقييم تأثيرات عديد السكريات الكورديسيبس (CCP) على شيخوخة الكلى باستخدام التعويذة الغربية والفلورية المناعية، مع تقييم التغيرات الميتوكوندرية من خلال اكتشاف أنواع الأكسجين التفاعلي وتلوين JC-1.
يشكل مرض الكلى المزمن (CKD) قلقا صحيا عالميا كبيرا. يؤدي شيخوخة الخلايا الظهارية الأنبوبية الكلوية (RTECs) إلى إعاقة تجدد الكلى وإصلاحها، ويعزز تقدم مرض الكلى المزمن من خلال إطلاق النمط الإفرازي المرتبط بالشيخوخة (SASP). كورديسيبس سينينسيس، التي تشمل مكوناتها الحيوية الرئيسية النشطة للكرديسات (CCP)، تدمج في عدة تحضيرات سريرية لمرض الكلى المزمن وقد أظهرت فوائد علاجية. لفحص دور CCP في شيخوخة الكلى، تم إنشاء نموذج شيخوخة الكلى الناجم عن D-galactoze في الفئران، مع إعطاء CCP كتدخل. تم تقييم نتائج العلاج باستخدام التلوين المرتبط بالشيخوخة وتقييمات لوظائف الكلى. تم تأسيس نموذج شيخوخة ناتج عن D-Galactose في خلايا HK-2 لدراسة الآليات الخلوية الأساسية. تم استخدام تلوين JC-1 واكتشاف أنواع الأكسجين التفاعلي (ROS) لتقييم التغيرات الميتوكوندرية بعد معالجة CCP في ظروف شيخوخة. تم إجراء فوهة مناعية، وإزالة الغرب، وPCR الكمي (RT-PCR) لتقييم تأثيرات CCP على فسفرة MAPK، والنقل النووي NF-κB، وتنشيط التهاب NLRP3. تظهر النتائج أن CCP يخفف من شيخوخة الخلايا الأنبوبية الداخلية، وإصابة الكلى، والتليف، مع تحسين وظيفة الميتوكوندريا في النماذج الخلوية والحيوانية للشيخوخة الناتجة عن D-galactose. ترتبط هذه التأثيرات بتعديل مسار الإشارة ROS/MAPK/NF-κB/NLRP3.
مرض الكلى المزمن (CKD) هو أحد أكثر اضطرابات الكلى شيوعا ويؤثر على عدد كبير من السكان حول العالم. وحدوث هذا النوع مرتبط ارتباطا وثيقا بالتقدم في العمر1. الأنابيب الكلوية هي الوحدات الوظيفية الأساسية للكلية، والشيخوخة الخلوية داخل خلايا الظهارة الأنبوبية الكلوية (RTECs) هو مساهم رئيسي في تدهور الوظائف الكلوية2. يمكن أن يؤدي التعرض للأدوية وغيرها من الضغوط إلى الشيخوخة الناتجة عن الإجهاد الأنبوبي، مما يؤدي إلى فقدان تدريجي لوظيفة الكلى وتطور مرض الكلى في المرحلة النهائية (ESKD). لذلك، قد يكون استهداف الشيخوخة في RTECs استراتيجية فعالة لتأخير الشيخوخة الكلوية والوقاية أو علاج مرض الكلى المزم....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم إجراء جميع الإجراءات المتعلقة بالحيوانات وفقا للإرشادات المؤسسية وتمت الموافقة عليها من لجنة أخلاقيات الحيوان في جامعة نانجينغ للطب الصيني (رقم الموافقة الأخلاقية 202108A006). تم جمع جميع النفايات الناتجة أثناء عمليات زراعة الخلايا والتلوين في حاويات محكمة الإغلاق وأكياس مخاطر بيولوجية والتخلص منها من قبل خدمة إدارة نفايات طبية مرخصة.
نموذج الحيوانات والتدخلات العلاجية
لتقليل التباين بين الأفراد، تم تقسيم 40 فأرا عشوائيا إلى خمس مجموعات (عدد = 8 لكل مجموعة) وخضعوا للتدخلات التالية: (1) مجموعة التحكم: تلقت إعطاء 0.2 مل من محلول ملحي داخل المعدة لكل فأر; (2)
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم استخدام دي-جالاكتوز لتأسيس نموذج شيخوخة الفئران، حيث كان فيتامين E أداة مضادة للشيخوخة شائعة. تمت معالجة الفئران المتقدمة في السن بجرعات مختلفة من عدادات السكريات (CCP). أظهرت الفئران المسنة ضعفا كلويا كبيرا، كما يتضح من زيادة مستويات البروتين البولي، وحمض اليوريك في المصل، والكرياتينين (الشكل 2B-D). كل من مكملات فيتامين E وCCP خففت من هذه الشذوذات. أظهر تلوين SA-β-gal انخفاضا في شيخوخة خلايا الكلى في الفئران المعالجة ب CCP، مع تأثيرات مم.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تظهر هذه الدراسة التأثيرات الوقائية لعدادات السكريات الكورديسيبس على خلايا الظهارة الأنبوبية الكلوية، وتوفر دليلا على أنها تخفف من الشيخوخة الالتهابية في خلايا HK-2 من خلال تعديل مسار الإشارات ROS/MAPK/NF-κB/NLRP3. توضح هذه النتائج بشكل أكبر الآليات المحتملة التي تكمن وراء تأثيرات المركبات المشتقة من كورديسيبس سينينسيس في علاج أمراض الكلى الحادة والمزمنة، وتوفر مرجعا للتحقيقات المستقبلية حول استراتيجيات العلاج المضاد للشيخوخة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المؤلفون لا يفرضون أي تضارب مصالح.
وقد دعمت هذه الدراسة المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 8217150545، 82575032).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| كاسيبيز1/الأرنب المشقوف pAb | WL03450 | وانلي، شينغيانغ، الصين | |
| مجموعة CCK-8 | C0037 | بيوتايم، شنغهاي، الصين | |
| الحزب الشيوعي الصيني | B21296 | يواني بيو، شينغيانغ، الصين | |
| مجموعة اختبار الكرياتينين | C011-2-1 | جيانتشنغ، نانجينغ، الصين | |
| دي-غال | HY-N0210 | MCE، الولايات المتحدة الأمريكية | |
| ERK Rabbit pAb | 4695 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_390779 |
| جابد رابيت pAb | ac033 | أبكلونال، ووهان، الصين | |
| H & مجموعة تلطيع E | G1120 | سولاربيو، بكين، الصين | |
| مجموعة JC-1 | C2003S | بيوتايم، شنغهاي، الصين | |
| طقم التلوين الخاص بماسون | G1340 | سولاربيو، بكين، الصين | |
| NLRP3 Rabbit pAb | WLH3383 | وانلي، شينغيانغ، الصين | |
| P21 Rabbit pAb | 64016s | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_2892063 |
| p38 رابيت pAb | 9212 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_330713 |
| p50 رابيت pAb | 3035 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_330564 |
| p65 رابيت pAb | 8242 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_10859369 |
| p-ERK أرنب pAb | 4370 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_2315112 |
| الجسم المضاد الفوسفو-SAPK/JNK | 4668 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_823588 |
| p-p38 أرنب pAb | 4511 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_2139682 |
| مجموعة تلوين ROS | S0033S | بيوتايم، شنغهاي، الصين | |
| الأجسام المضادة SAPK/JNK | 9256 | CST، الولايات المتحدة الأمريكية | AB_2250373 |
| مجموعة SA-β-gal | C0602 | بيوتايم، شنغهاي، الصين | |
| مجموعة اختبار حمض اليوريك | C012-2-1 | جيانتشنغ، نانجينغ، الصين | |
| مجموعة كشف البروتين البولي | C035-2-1 | جيانتشنغ، نانجينغ، الصين | |
| فيتامين E | S27812 | يواني بيو، شينغيانغ، الصين | |
| Strong) لاختبار PCR | |||
| اسم الجين | مقدمة مقدمة | الأساس العكسي | |
| كاسباس-1 | 5'-TACAGACAAGGGTGCTGAACAA-3' | 5'-CGGAATAACGGAGTCAATCAAA-3' | |
| GAPDH | 5'-AGAAGGTGTGAAGCAGGCGTCGTC-3' | 5'-AAAGGTGGAGGAGTGTGTGTGTCG-3' | |
| NLRP3 | 5'-GATCTTCGCTGGCAACAG-3' | 5'-CGTGCATTATCTGAACCCC-3' |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.