يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

إصابة الخصية المتأخرة والتدريجية بعد التعرض لدى الفئران بسبب الجسيمات الدقيقة (PM2.5)

311 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/69626

⸱

ديسمبر 12, 2025

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Medicine, Fujian Health College

في هذه المقالة

ملخص

يؤدي التعرض ل PM2.5 إلى تأخير إصابة الخصية في نماذج الفئران من خلال استجابات التهابية مستمرة، وزيادة موت الخلايا الجرثومية، وانخفاض تنظيم Connexin-43/Occludin، وإشارات تتوافق مع تنشيط مسار JNK، مما يبرز تهديده طويل الأمد لصحة الإنجاب الذكرية.

الملخص

الجسيمات الدقيقة (PM2.5) أصبحت مرتبطة بشكل متزايد بضعف الإنجاب الذكري. ومع ذلك، نظرا لأن معظم الأبحاث لا تزال مركزة على الأضرار الحادة أو المتأخرة أو المستمرة أو التدريجية بعد التعرض، وهي الأضرار الحاسمة لتقييم المخاطر على المدى الطويل، لا تزال غير مفهومة بشكل جيد. أنشأنا نموذجا للفئران بالوقت لتحديد ما إذا كانت الإصابة تستمر أو تزداد سوءا بعد التعرض. تم تقسيم اثنين وسبعين ذكرا من فأر سبراج-داولي إلى تسع مجموعات (ضابطة؛ مركب في عمر 24 ساعة، 1، 2، و4 أشهر؛ PM2.5 في نفس النقاط الزمنية) وتلقيت PM2.5 عن طريق الأنف بجرعة 5 ملغ/كغ/يوميا لمدة 7 أيام. قمنا بقياس جودة المنوية ومؤشرات الأعضاء التناسلية، وفحصنا نسيج الخصية والبنية الفائقة، وقسنا هرمون التستوستيرون، FSH، LH، وE2، ونظمنا ملفات mRNA السيتوكينية الالتهابية (IL-1β، IL-6، TNF-α، IFN-γ)، وقمنا بتقييم الاستماتة الخلية الجرثومية بواسطة TUNEL، وقيمننا البروتينات الوصلية والمرتبطة بالتوتر (Connexin-43، Occludin، JNK). أدى التعرض ل PM2.5 إلى انخفاض مستمر في تركيز المنوية وحركتها، إلى جانب زيادة التشوهات وضمور الخصية والبربخ التي لم تتعاف خلال فترة التعرض التي استمرت 4 أشهر. أظهرت الأنسجة ترققا تدريجيا للظهارة المنوية والتنكس فوق البني. كان هناك أيضا اضطراب في الغدد الصماء، مع انخفاض التستوستيرون وتغير في الغدد التناسلية. ميكانيكيا، حافظ التعرض ل PM2.5 على ارتفاع تعبير IL-1β وIL-6، وعزز موت الخلايا الجرثومية، وخفض من تنظيم كونيكسين-43 وأوكلودين مع إظهار أنماط متوافقة مع تنشيط مسار JNK. تظهر هذه النتائج معا تأخرا وتدريجيا في تسمم الخصية بعد انتهاء التعرض ل PM2.5، وتشير إلى أن الحفاظ على سلامة الوصلات واستهداف JNK قد يقلل من الضرر التناسلي طويل الأمد.

المقدمة

PM2.5، وهو خليط معقد من الجسيمات الدقيقة بقطر هوائي قدره≤2.5 ميكرومتر، ينشأ من الانبعاثات الصناعية، وعادم المركبات، واحتراق الكتلة الحيوية، وقد برز كملوث بيئي عالمي رئيسي1. تربط الدراسات الوبائية التعرض ل PM2.5 بأمراض الجهاز التنفسي والأوعية الدموية2، بالإضافة إلى اضطرابات الجهاز التناسلي3. التأثير على خصوبة الرجال يثير قلقا خاصا بسبب الأدلة التي تشير إلى أن تلوث الهواء يمكن أن يقلل من جودة المنوية4. تساهم العوامل الذكورية في أكثر من نصف حالات العقم حول العالم، وأفادت العديد من الدراسات عن انخفاض كبير في معايير المنوية خلال العقود الأخيرة5. تؤكد التحليلات العالمية الحديثة أيضا تراجعا واسع النطاق في جودة المنوية عبر عدة مناطق6. بينما تعتبر عوامل مثل التدخين، واستخدام الكحول، والإشعاع، والتعرض للمواد الكيميائية من المخاطرالمعروفة 7، فقد ظهر PM2.5 كمادة سمية إضافية للتكاثر تستهدف الخصيتين8.

الخصيتان حساستان جدا للسموم البيئية بسبب بنيتها الفسيولوجية الفريدة ونشاطها المستمر في إنتاج المنوية. أشارت أبحاث سابقة إلى أن التعرض ل PM2.5 يمكن أن يسبب ضررا في الخصية عبر عدة مسارات، مثل الإجهاد التأكسدي، والاستجابات الالتهابية، واضطراب حاجز الدم والخصية. تتميز هذه التأثيرات الحادة بانخفاض جودة المنوية، وعدم انتظام نسيج الخصية، واختلالات هرمونية10. ومع ذلك، تركز معظم الدراسات على الإصابة الفورية، مما يترك التأثيرات طويلة الأمد أو المتأخرة غير محددة بشكل جيد.

نماذج التعرض الحالية ل PM2.5 لها قيود جوهرية: الشهيق الكامل للجسم يحاكي التعرض الطبيعي لكنه يتطلب معدات متخصصة ويفتقر إلى دقة الجرعة11، بينما يضمن الغرس داخل القصبة الهوائية التحكم في الجرعة لكنه غازي ويفشل في تكرار ترسيب الجسيماتالفسيولوجية 12. يتجنب نموذجنا النفسي عبر الأنف المحلول زمن هذه العيوب - حيث يتماشى توصيل الجهاز التنفسي غير الجراحي مع أنماط ترسيب الجهاز التنفسي العلوي، ويمكن من التحكم الدقيق في الجرعة، ويدعم أخذ عينات طويلة الأمد متعددة النقاط لالتقاط الإصابات المتأخرة، والتي تتجاوز قدرة النماذج التقليدية الحادة13.

جرعتنا 5 ملغ/كجم/يوم PM2.5 تتوافق مع نماذج التعرض تحت الحاد للقوارض المثبتة على تحفيز استجابات تكاثرية، ومن خلال تحويل مساحة سطح الجسم، تقترب جرعة مكافئة بشرية ~6 أضعاف أعلى من المستويات المحيطة القياسية لتسريع مظاهر السمية طويلة الأمد14. تنطبق اعتبارات الأنواع: بينما تشترك الفئران في فسيولوجيا الخصية المحفوظة مع البشر، فإن دورتها الممولة للحيوانات المنوية القصيرة قد تسرع من تقدم الإصابة التي لوحظت في النقاطالزمنية 15، ويختلف التوصيل عبر الأنف عن ترسيب الجهاز التنفسي السفلي البشري، رغم تأكيد انتشار السموم الجهازي إلى الخصيتين.

تعد التأثيرات المتأخرة للتعرض البيئي للسموم حاسمة لتقييم المخاطر الإنجابية طويلة الأمد، حيث قد تكشف عن أضرار لا يمكن إصلاحها لها غير واضحة في الملاحظات قصيرة الأمد16. على سبيل المثال، بعض المواد السامة يمكن أن تسبب إصابات كامنة في الخصيتين، والتي تظهر تدريجيا أو تزداد سوءا مع مرور الوقت، حتى بعد توقف التعرض، مما قد يؤدي إلى خللمزمن في الوظائف التناسلية. نظرا لانتشار واستمرارية PM2.5، فإن تحديد ما إذا كانت سمته التناسلية تستمر أو تزداد سوءا بعد التعرض أمر بالغ الأهمية18.

الالتهاب المستمر، والإجهاد التأكسدي، وضعف آليات الإصلاح هي أسباب محتملة لتأخير التأثيرات. يمكن أن يؤدي التنظيم الناجم عن PM2.5 لمستويات IL-1β وIL-6 وTNF-α إلى الحفاظ على الالتهاب المزمن، ويعطل تكوين المنوية، ويعزز الاستماتة المبرمجة للخلايا الجرثومية. الضرر في البروتينات الرئيسية للوصل، مثل كونيكسين-43 وأوكلودين، يضعف حاجز الدم والخصية وقد يمنع التعافي الوظيفي20. تم أيضا الارتباط بتنشيط مسار كيناز الطرف الشمالي (JNK)، الذي يعد وسيطا للإجهاد والإشارات الاستماية،21.

على الرغم من الاعتراف المتزايد بسمية PM2.5 التناسلية، هناك فجوة معرفية كبيرة حول الديناميكيات الزمنية لتلف الخصية بعد التوقف عن التعرض. على وجه التحديد، لا يزال من غير الواضح مدة استمرار إصابات الخصية، وما إذا كانت تزداد سوءا مع مرور الوقت، وما هي المسارات الجزيئية التي تدفعهذه التأثيرات المتأخرة. معالجة هذه الأسئلة أمر بالغ الأهمية لتطوير استراتيجيات وقائية وعلاجية مستهدفة للحد من الأضرار الإنجابية الناتجة عن PM2.5 للذكور.

لا تزال هناك فجوات كبيرة فيما يتعلق بمدة وتقدم وآليات إصابة الخصية الناتجة عن PM2.5 بعد التوقف عن التعرض. تعالج هذه الدراسة هذه الفجوات من خلال تقييم نقاط النهاية الإنجابية؛ علم الأمراض النسيجية؛ ملفات الهرمونات - وبشكل خاص هرمون محفز الجريبات (FSH)، وهرمون اللوتيين (LH)، والإستراديول (E2)؛ إلتهاب; الاستماتة المبرمجة؛ وتعبير البروتين الحاجز في عدة نقاط زمنية بعد التعرض. توفر النتائج رؤى حول المخاطر الإنجابية طويلة الأمد ل PM2.5 وتوجه استراتيجيات الصحة العامة لحماية خصوبة الذكور.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم إجراء جميع إجراءات وفقا للوائح المؤسسات، وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات في كلية فوجيان الصحية (رقم الموافقة على المشروع: DW2024-01).

السلامة والنفايات الخطرة
تم التعامل مع الكواشف السامة بما في ذلك الفورمالين، ورباعي أكسيد الأوزميوم، والكلوروفورم باستخدام غطاء بخار معتمد مع ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة. تم جمع النفايات العضوية الهالوجينية والمحاليل التي تحتوي على الأوزميوم في حاويات مخصصة والتخلص منها وفقا لمتطلبات المؤسسات. تم تسجيل بنتوباربيتال الصوديوم كمادة خاضعة للرقابة، وتم التعامل مع القطع الحادة بأمان طوال الدراسة.

مادة PM2.5 والتعامل مع
تم استخدام مادة مرجعية قياسية ل PM2.5 للجرعة. وفقا لإجراءات تحضير الجسيمات المعتمدة، كان المسحوق الجاف يعلق في PBS معقم بالتركيز المطلوب ويضبط في حمام مائي لمدة 10-15 دقيقة مباشرة قبل الاستخدام، بدون مواد خافضة التوتر السطحي. تم تجهيز معلقات العمل جديدة كل يوم. تم تقييم مستويات السموم الداخلية بواسطة اختبار ليمولوس أميبوسيت ليزات ولم تكن قابلة للكشف. عند الضرورة، تم تضمين ضوابط polymyxin-B لاستبعاد التأثيرات المدفوعة ب LPS.

بناء نماذج في الجسم الحي
تم إيواء اثنين وسبعين ذكرا من جرذ سبراج-داولي بتقنية SPF (عمره شهران، 190 ± 10 جرام) تحت ظروف قياسية وتم توزيعه عشوائيا إلى تسع مجموعات (n = 8 لكل مجموعة)، تتكون من مجموعة ضابطة، ومجموعات المركبات التي تم أخذ عينات منها في 24 ساعة و1 و2 و4 أشهر، ومجموعات تعرضت ل PM2.5 في نفس النقاط الزمنية. تم إعطاء PM2.5 عن طريق الأنف بجرعة 5 ملغ إلى 1∙ كجم يوميا في 10-20 ميكرولتر لكل ناريس تحت تخدير خفيف بالأيزوفلوران مرة واحدة يوميا لمدة 7 أيام. بعد العلاج، وضعت الفئران في وضعية الاستلقاء على ظهرها لمدة دقيقة إلى دقيقتين لتسهيل الاستنشاق. تم الحفاظ على حتى القتل الرحيم في النقاط الزمنية المحددة بعد التعرض، وتم تسجيل كتلة الجسم لحساب معاملات الأعضاء. شملت النقاط النهائية معاملات الأعضاء، جودة المنوية، علم النسيجة، البنية الفائقة، هرمونات التكاثر في المصل، والاختبارات الجزيئية.

تقييم شكل الأعضاء التناسلية وجودة المنوية
تم تشريح الخصيتين والبربختين تحت تخدير عميق بالبنتوباربيتال، وتم تطهيرهما، ووزنهما لحساب معاملات الأعضاء. تم جمع المنوية من الذيل البربخي عن طريق التقطيع في حاجز مسبق التسخين عند 37 درجة مئوية. تم تحديد التركيز باستخدام جهاز قياس الدم الخلوي. تم تقييم الحركة من خلال فحص ما لا يقل عن 200 منوي عبر خمسة مجالات أو أكثر غير متداخلة على شرائح تم تسخينها مسبقا. تم تقييم الشكل بعد التثبيت والتلطيخ والتلوين بالإيوزين-نيجروسين أو ديف-كويك، مع تسجيل ما لا يقل عن 200 منوي لكل فأر. تم تعميي جميع التقييمات، وتم حساب التكرارات التقنية للحصول على قيمة واحدة لكل.

التحليل النسيجي والفائق البنيوي لأنسجة الخصية
تم تثبيت الخصيتين في فورمالين مخزن ب 10٪ من الفورمالين المحايد، ومعالجا عبر الإيثانول والزيلين المتدرجين، وتم دمجه في البارافين، وقطعها عند 5 ميكرومتر لتلوين HE. تم تقييم المقاطع الملونة باستخدام أخذ عينات عشوائية منهجية، مع تطبيق استثناءات للجروح المائلة أو التشوهات أو التثبيت الضعيف. تم حساب أقطار الأدبية من محاور متعامدة (عمودي)، وتم قياس سمك الظهارة عند نقاط متباعدة بشكل متساو. تم تعميم التحليلات، وتم تقييم ما لا يقل عن 10 أنابيب لكل فأر.

بالنسبة ل TEM، تم تثبيت كتل الأنسجة الصغيرة في غلوتارالديهايد، ثم مثبتة لاحقا في رباعي أكسيد الأوزميوم، ثم تجفيفها، وترشحها بالراتنج، ثم تم بلمراتها. تم صبغ الأقسام فائقة الرقة بأسيتات اليورانيل وسيترات الرصاص وتصويرها عند 60-120 كيلوفولت تحت إعدادات متسقة. شمل مراقبة الجودة تقييم سلامة الغشاء والميتوكوندريا وتجنب القطع الناتجة عن الاستخلاص.

اختبار التغذية المناعية المرتبطة بالإنزيمات (ELISA)
تم جمع الدم من الشريان الأبهر البطني تحت التخدير خلال نافذة صباحية محددة للتحكم في التغيرات اليومية. بعد التجلط والطرد المركزي، تم استخراج المصل وتخزينه عند درجة حرارة −80 درجة مئوية. تم قياس التستوستيرون، FSH، LH، وE2 باستخدام منصة اختبار مناعي موثقة. تم تشغيل العينات بشكل مكرر مع ضوابط مناسبة، وكانت دقة الفحص تلتزم بمواصفات المنصة. تم استبعاد العينات المتحللة للدم أو الدهنية.

تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (RT-qPCR)
تم استخراج إجمالي الحمض النووي الريبي من أنسجة الخصية باستخدام الفينول-كلوروفورم ونقيه من خلال ترسيب الأيزوبروبانول وغسل الإيثانول. تم التحقق من جودة الحمض النووي الريبي الطيفيا الضوئيا. تم تصنيع cDNA، وأجري RT-qPCR باستخدام الكيمياء المعتمدة على الصبغة في ظروف دورة قياسية، تلاها تحليل منحنى الانصهار. تم تطبيع مستويات التعبير إلى GAPDH باستخدام طريقة 2−ΔΔCq .

تحليل البقع الغربية
تم تحضير ليزات البروتين في مخزن RIPA باستخدام مثبطات بروتيياز، وتم قياسها بواسطة اختبار BCA، وتم تفكيكها في مخزن التحميل. تم إجراء نقل SDS-PAGE وPVDF في ظروف مضبوطة. تم حجب الأغشية، وحضنتها بأجسام مضادة أولية لأجهزة كونيكسين-43، أوكلودين، JNK، وGAPDH، تلتها أجسام مضادة ثانوية متقاربة مع HRP. تم اكتشاف الأشرطة بواسطة الإضاءة الكيميائية، وشمل قياس الكثافة طرحا خلفيا، وتطبيع GAPDH، وتوسيع النطاق إلى مجموعة الضابطة.

التحليل الإحصائي
تم الإبلاغ عن البيانات كمتوسط ± SD. تم استخدام ANOVA أحادي الاتجاه مع اختبار توكي بعد الحدث أو اختبار Student t عند الاقتضاء، مع تحليل البيانات غير المعلمية بواسطة اختبار مان-ويتني U . تم اعتبار قيمة p < 0.05 ذات دلالة كبيرة.

الانتهاء والتنظيف
تم تسجيل جميع النفايات الكيميائية الخطرة والتخلص منها بشكل مناسب. تم أرشفة البيانات الخام، بما في ذلك مخرجات الأجهزة وملفات التحليل، مع ملاحظات مقابلة لضمان قابلية التتبع.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تدهور مستمر في وظيفة التكاثر الذكري لدى الفئران، يتميز بانخفاض جودة المنوية وضعف تطور الأعضاء التناسلية بسبب التعرض ل PM2.5

لدراسة تأثير PM2.5 على وظيفة الإنجاب لدى الذكور، تم فحص جودة المنوية، معاملات الأعضاء التناسلية، والمؤشرات ذات الصلة عبر تسع مجموعات من ذكور الفئران. تم إجراء تحليلات بالنسبة لنقطة زمنية 24 ساعة بعد التعرض. على الرغم من عدم تضمين وقت أخذ عينات في اليوم السابع، إلا أن الاستجابات الالتهابية والإصابات النسيجية كانت واضحة في النظام الحالي، مما يدعم صحة ظروف ا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تبع التعرض قصير المدى ل PM2.5 تدهور تدريجي في وظيفة التكاثر الذكري بعد التعرض على مدى 1-4 أشهر. تدعم هذه النتائج السمية التناسلية المعتمدة على الزمن التي تستمر بعد توقف الجرعة وتمدد الملاحظات السابقة لضعف التناسل المرتبط ب PM2.523.

لتعزيز قابلية التكرار، قمنا بتوحيد أربعة عناصر. أولا، تم الحفاظ على اتساق التعرض من خلال تطبيع الجرعة إلى كتلة الجسم، والتحكم في حجم ووضعية الأنف، واستخدام تخدير قصير مع تعافي الظهر. ثانيا، سجل جدول ما بعد ال...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

المؤلفون لا يفرضون أي تضارب مصالح.

شكر وتقدير

وقد دعم هذا العمل مؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة فوجيان في الصين (رقم المنحة:2023J01170).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1٪ رباعي أكسيد الأوزميومTCI، الصينO0308للتثبيت بعد التثبيت في تحليل TEM لأنسجة الخصية
الفورمالين المحايد 10٪سولاربيو، الصينPC0020لتثبيت عينات أنسجة الخصية في التلوين ب HE
2.5٪ جلوتارالديهيدسولاربيو، الصينG1102لتثبيت عينات أنسجة الخصية في تحليل TEM
75٪ إيثانولأكروس أورجانيكس، الولايات المتحدة الأمريكية61509-0040لتنقي الحمض النووي الريبي المتأصل في RT - qPCR
جهاز تصوير الإضاءة الكيميائية التلقائيبيو-راد، الولايات المتحدة الأمريكيةكيمي دوكيستخدم للتصوير التلقائي لإشارات الإضاءة الكيميائية في الطلاء الغربي.
مجموعة اختبار بروتين BCAسولاربيو، الصينPC0020لتحديد التركيز الكلي للبروتين في تحليل البلوت الغربي
مخزن الحجبغير محددT7131Aيستخدم في تحليل النقطة الغربية لإزالة الارتباط غير المحدد
الكلوروفورمأكروس أورجانيكس، الولايات المتحدة الأمريكية327270010يستخدم في فصل الحمض النووي الريبي أثناء RT - qPCR
كونيكسين - 43أبكام، الولايات المتحدة الأمريكيةab11370يكتشف تعبير وتوزيع بروتين حاجز الدم الرئيسي للخصية للمساعدة في تقييم سلامة الحاجز
مجموعة ECLبايوشاب، الصينBL520Bلتصوير أشرطة البروتين في تحليل البقع الغربية
مجموعات ELISA (للتستوستيرون، FSH، LH، E2)أبكام، المملكة المتحدةab108666؛ ab108702; ab108651; ab108667لاكتشاف هرمونات التكاثر في المصل
إيوسينسولاربيو، الصينG1002يستخدم في تلوين الخصية بالتلوين الهوائي
راتنج الإيبوكسيسولاربيو، الصينGP2001لتضمين عينات أنسجة الخصية في تحليل TEM
GAPDHأبكام، الولايات المتحدة الأمريكيةab128915يقيم الاستماتة المبرمجة لخلايا الخصية الناتج عن PM2.5 ويوفر أساسا شكليا لدراسة تأثيره على موت الخلايا المبرمجة في خلايا الخصية
الهيماتوكسيلينسولاربيو، الصينG1077يستخدم في تلوين الخصية بالتلوين الهوائي
نظام التصويرنيكون، الياباننيكون DS-U3يستخدم لتصوير العينات تحت المجهر.
إيزوبوبانولأكروس أورجانيكس، الولايات المتحدة الأمريكيةAC447080025يستخدم في ترسيب الحمض النووي الريبي أثناء RT - qPCR
JNK أبكام، الولايات المتحدة الأمريكيةab124956يستكشف الآلية الجزيئية لإصابة الخصية الناتجة عن PM2.5 ويحدد أنواع الخلايا التي يتم تنشيطه فيها
  قارئ اللوحة الدقيقةالأجهزة الجزيئية، الولايات المتحدة الأمريكيةسبيكترا ماكس iD3يستخدم لاكتشاف الإشارات في الصفائح الدقيقة (مثل الامتصاص، التألق).
أوكلودينأبكام، الولايات المتحدة الأمريكيةab31721يفهم درجة الضرر في حاجز الدم - الخصية ويستكشف التفاعلات بين البروتينات ذات الصلة
المجهر البصريتشونغتشينغ أوبتو - آلة إلكترونية، الصينBDS200يستخدم للمراقبة البصرية المجهرية العامة.
  الميكروتوم المرضيآلة شنغهاي كاييو، الصينRM2016يستخدم لقطع أجزاء من الأنسجة المرضية.
الصوديوم البنتوباربيتالسولاربيو، الصينG1102يستخدم للحقن داخل الصفاق في الفئران قبل جمع الدم
المادة المرجعية القياسية PM2.5المعهد الوطني للمترولوجيا، الصينGBW13643بالنسبة للتعرض ل PM2.5 في المجموعة التجريبية
غشاء بولي فينيليدين ثنائي فلوريد (PVDF)ثيرمو فيشر، الولايات المتحدة الأمريكية88585يستخدم في تحليل البلوت الغربي لنقل البروتين
مجموعة كاشف برايم سكريبت RTتاكارا، اليابانRR037Qلتخليق cDNA في RT - qPCR
نظام PCR في الوقت الحقيقيروش، سويسرالايت سايكلر 480يستخدم في تفاعل بوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي لتحليل التعبير الجيني.
مخزن تحليل RIPAتاكارا، اليابان  RR9161لاستخلاص البروتينات في تحليل البلوت الغربي
شاكرثيرمو، الولايات المتحدة الأمريكيةMAXQ-4000يستخدم لهز العينات في التجارب.
SPSSآي بي إم، الولايات المتحدة الأمريكية28لتحليل البيانات
محلول ملحي معقمسولاربيو، الصينS8160يستخدم في علاج مجموعة المركبات
مجموعة TB Green Premix Ex Taq IIتاكارا، اليابانRR820Sالمستخدم في RT - qPCR
المجهر الإلكتروني الناقل (TEM)هيتاتشي، اليابانHT7800/HT7700يستخدم للرصد فوق البنيوي على المستوى النانوي.
كاشف تريزولأمبيون، الصين15596018لاستخراج الحمض النووي الريبي الكلي في RT - qPCR
ألترا ميكروتوملايكا، ألمانيالايكا UC7يستخدم لقطع الأجزاء الرقيقة جدا لتقنية TEM.
نظام نقل البروتين الشامل / آلة نقل البروتينبيو-راد، الولايات المتحدة الأمريكيةترانس-بلوت تيربويستخدم لنقل البروتين في البلوتينغ الغربي.
المجهر البصري القائمنيكون، الياباننيكون إكليبس E100يستخدم للمراقبة المجهرية البصرية العمودية.
أسيتات يورانيلميرك، ألمانيا201030لصبغ المقاطع فائقة الرقة في تحليل TEM لأنسجة الخصية

المراجع

  1. Li, F., et al. Environmental pollution and human fertility: investigating the relationship between PM2.5 exposure and assisted reproductive technology outcomes. BMC Public Health. 25 (1), 1357(2025).
  2. Hayes, R. B., et al. PM2.5 air pollution and cause-specific cardiovascular disease mortality. Int J Epidemiol. 49 (1), 25-35 (2020).
  3. Montano, L., et al. Air pollution and COVID-19: a possible dangerous synergy for male fertility. Int J Environ Res Public Health. 18 (1), 1-15 (2021).
  4. Nassan, F. L., et al. Residential distance to major roadways and semen quality, sperm DNA integrity, chromosomal disomy, and serum reproductive hormones among men attending a fertility clinic. Int J Hyg Environ Health. 221 (6), 830-837 (2018).
  5. Aliakbari, F., et al. A review of methods for preserving male fertility. Zygote. 30 (3), 289-297 (2022).
  6. Santi, D., et al. Seasonal variation of semen parameters correlates with environmental temperature and air pollution: a big data analysis over 6 years. Environ Pollut. 235 (1), 806-813 (2018).
  7. Gabrielsen, J. S., Tanrikut, C. Chronic exposures and male fertility: the impacts of environment, diet, and drug use on spermatogenesis. Andrology. 4 (4), 648-661 (2016).
  8. Wang, C., et al. Exposure to automobile exhaust-derived PM2.5 induces spermatogenesis dysfunction by damaging UPR(mt) of prepubertal rats. Ecotoxicol Environ Saf. 245 (1), 114087(2022).
  9. Lafuente, R., García-Blàquez, N., Jacquemin, B., Checa, M. A. Outdoor air pollution and sperm quality. Fertil Steril. 106 (4), 880-896 (2016).
  10. Li, D., et al. Multiple organ injury in male C57BL/6J mice exposed to ambient particulate matter in a real-ambient PM exposure system in Shijiazhuang, China. Environ Pollut. 248 (1), 874-887 (2019).
  11. Chen, T., Jia, G., Wei, Y., Li, J. Beijing ambient particle exposure accelerates atherosclerosis in ApoE knockout mice. Toxicol Lett. 223 (2), 146-153 (2013).
  12. Liu, F., Li, W., Pauluhn, J., Trübel, H., Wang, C. Lipopolysaccharide-induced acute lung injury in rats: comparative assessment of intratracheal instillation and aerosol inhalation. Toxicology. 304 (1), 158-166 (2013).
  13. Seo, Y., et al. Optimizing anesthesia and delivery approaches for dosing into lungs of mice. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 325 (3), L262-L269 (2023).
  14. Liu, B., et al. Spermatogenesis dysfunction induced by PM2.5 from automobile exhaust via the ROS-mediated MAPK signaling pathway. Ecotoxicol Environ Saf. 167 (1), 161-168 (2019).
  15. Fang, F., et al. Changes in the antioxidant level, cell cycle progression and apoptosis of testicular cells in rats with diet-induced impaired glucose regulation. Zhonghua Nan Ke Xue. 19 (5), 403-408 (2013).
  16. Zhou, L., et al. PM2.5 exposure impairs sperm quality through testicular damage dependent on NALP3 inflammasome and miR-183/96/182 cluster targeting FOXO1 in mouse. Ecotoxicol Environ Saf. 169 (1), 551-563 (2019).
  17. McCue, K., DeNicola, N. Environmental exposures in reproductive health. Obstet Gynecol Clin North Am. 46 (3), 455-468 (2019).
  18. Yang, R., et al. Chemical composition and transgenerational effects on Caenorhabditis elegans of seasonal fine particulate matter. Toxics. 11 (4), 1-12 (2023).
  19. Wong, E. W., Cheng, C. Y. Impacts of environmental toxicants on male reproductive dysfunction. Trends Pharmacol Sci. 32 (5), 290-299 (2011).
  20. Zheng, S., et al. Fine particulate matter (PM2.5) and the blood-testis barrier: an in vivo and in vitro mechanistic study. Environ Health Perspect. 133 (4), 47006(2025).
  21. Zhang, B. Y., et al. Schisandrin B alleviates testicular inflammation and Sertoli cell apoptosis via AR-JNK pathway. Sci Rep. 14 (1), 18418(2024).
  22. Allard, E. K., Boekelheide, K. Fate of germ cells in 2,5-hexanedione-induced testicular injury. II. Atrophy persists due to a reduced stem cell mass and ongoing apoptosis. Toxicol Appl Pharmacol. 137 (1), 149-156 (1996).
  23. Wei, X., et al. Inter- and trans-generational impacts of real-world PM2.5 exposure on male-specific primary hypogonadism. Cell Discov. 10 (1), 44(2024).
  24. Liu, J., et al. Maternal exposure to PM2.5 disrupting offspring spermatogenesis through induced Sertoli cells apoptosis via inhibin B hypermethylation in mice. Ecotoxicol Environ Saf. 241 (1), 113760(2022).
  25. Ren, L., et al. Maternal exposure to PM2.5 induces the testicular cell apoptosis in offspring triggered by the UPR-mediated JNK pathway. Toxicol Res (Camb). 11 (2), 226-234 (2022).
  26. Liu, J., et al. Fine particle matter disrupts the blood-testis barrier by activating TGF-beta3/p38 MAPK pathway and decreasing testosterone secretion in rat. Environ Toxicol. 33 (6), 711-719 (2018).
  27. Thangavel, P., Park, D., Lee, Y. C. Recent insights into particulate matter (PM2.5)-mediated toxicity in humans: an overview. Int J Environ Res Public Health. 19 (1), 1-20 (2022).
  28. Curbani, F., de Oliveira Busato, F., do Nascimento, M. M., Olivieri, D. N., Tadokoro, C. E. Inhale, exhale: why particulate matter exposure in animal models are so acute. Environ Pollut. 251 (1), 230-237 (2019).
  29. Mruk, D. D., Cheng, C. Y. The mammalian blood-testis barrier: its biology and regulation. Endocr Rev. 36 (5), 564-591 (2015).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

التعرض لـ PM2.5جودة الحيوانات المنويةالسُمية التناسليةنموذج الجرذانموت الخلايا المبرمج في الخلايا الجرثوميةالسيتوكينات الالتهابيةالاضطراب الغديمسار JNK
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.