مقالة منهجية

الفصل الآلي ل HPLC باستخدام LC-mate: جهاز أخذ آلي متكرر متكامل ومجمع كسور لتنقية المقياس المجهري

DOI:

10.3791/69685

⸱

فبراير 27, 2026

 , 
1Natural Product Research Center, Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences, 2University of Chinese Academy of Sciences

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تطوير جهاز السامبلر الآلي المتكامل ومجمع الكسور (LC-mate) لأتمتة الفصل المتكرر ل HPLC. متوافقة مع كواشف HPLC التي تخرج إشارات تناظرية، تعزز LC-mate أداء الأنظمة التي تعمل يدويا وتسرع سير العمل البحثي الذي يعتمد على الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تلعب تقنية الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) دورا حيويا في تنقية المركبات عالية القيمة، حيث تلبي المتطلبات المتزايدة للكيمياء وعلم الأحياء في البيئات الأكاديمية والصناعية. ومع ذلك، فإن الحقن اليدوي المتكرر وجمع الكسور أثناء التنقية على نطاق دقيق يحد بشكل كبير من الكفاءة وقابلية التكرار. لتجاوز هذا الاختناق، طورنا نظام سامبلر تلقائي متكامل ومجمع الكسور، أطلق عليه مؤقتا اسم LC-mate، والذي يقوم بأتمتة الفصل المتكرر من خلال الاستجابة مباشرة للإشارات التناظرية من كاشف HPLC. تم بناء الجهاز حول صمام تبديل عالي الضغط بستة منافذ لحقن العينات وصمام اختيار لجمع الكسور، مع تحكم في المعاملات التشغيلية عبر واجهة لمس بديهية. LC-mate متوافق مع كواشف HPLC التجارية القادرة على إخراج تناظري، ويمكنه أيضا تحقيق فصل متكرر لوضع التدرج من خلال تشغيل الإشارة المتزامنة. أكدت التجارب التجريبية التشغيل المستقر والفصل القابل للتكرار لتنقية المنتجات الطبيعية، مما أظهر انخفاضا واضحا في وقت التعامل اليدوي. يقدم النظام حلا عمليا ومتاحا لتعزيز الأتمتة في سير عمل HPLC التقليدي، مما يسد الفجوة بين أنظمة التنقية اليدوية والآلية بالكامل.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكروماتوغرافيا، التي ابتكرها م. س. تسيت في أوائل القرن العشرين، تطورت إلى الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء الحديثة (HPLC) في الستينيات مع تطورات في الأجهزة 1,2,3.

اليوم، يلعب HPLC دورا حيويا في تنقية المركبات عالية القيمة، ويلبي المتطلبات المتزايدة للطب الحيوي والكيمياء وعلم الأحياء في المجالات الأكاديمية والصناعية. في البحث الأكاديمي، يعتمد تنقية المنتجات الطبيعية على المستوى المجهري وحل الجزيئات الكيرالية بشكل حاسم على تقنيات HPLC شبه التحضيرية 4,5,6,7,8. في معظم الحالات العملية، يحقن الباحثون جزءا من محلول العينة في عمود HPLC في كل مرة بدلا من الجميع لتجنب فقدان العينة غير المتوقع أو بسبب محدودية حجم العمود، مما يجعل تكرار حقن العينات وجمع الكسور أمرا لا مفر منه. على الرغم من قدرته الاستثنائية على الفصل، لا يزال استخدام HPLC لتنقية العينات محدودا بسبب القيود الكامنة في الأجهزة الحالية وسير العمل. تكمن إحدى الزجاجات الرئيسية في الاعتماد الكبير على التدخل اليدوي، خاصة في حقن العينات وجمع الكسور. هذه العمليات ليست فقط مستهلكة للوقت وتتطلب جهدا كبيرا، بل أيضا عرضة للأخطاء البشرية، مما يؤثر على معدل الإنتاجية، وقابلية التكرار، والكفاءة التشغيلية العامة 9,10.

توفر أجهزة السامبلر الآلية التجارية وجامعات الكسور من شركات تصنيع HPLC الكبرى مثل Agilent وShimadzu وWaters أتمتة موثوقة ودقيقة، لكنها عادة ما تكون مقيدة ضمن أنظمة الأجهزة والبرمجيات المملوكة. على سبيل المثال، يتم دمج جهاز السامبلر التلقائي Agilent 1260 Infinity II وجامع الكسور G1364F بسلاسة داخل أنظمة HPLC من Agilent، مما يوفر قابلية إعادة إنتاج ممتازة ولكن مع توافق محدود بين المنصات. وبالمثل، توفر سامبلرات SIL-20A/40C وجامعات الكسور FRC-40/FRC-10A من شيمادزو قدرة نقل عالية ودقة ميكانيكية ممتازة، لكنها تعتمد على بنى التحكم LC-20 وNexera من شيمادزو. توفر وحدات ووترز ألاينس لجهاز السامبلر التلقائي HPLC ووحدة جامع الكسور III أداء قويا وصيغ جمع مرنة (حتى 300 مل/دقيقة)، لكنها تبقى مصممة لتناسب بيئات UHPLC وLC-MS الخاصة ب Waters. بالإضافة إلى ذلك، قد تقلل أجهزة الأخذ التلقائي التقليدية التي تعتمد على إبر الحقن من استرداد العينة، كما أن جامعات الكسور المعتمدة على الأنابيب قد تكون غير مريحة للتعامل مع كميات كبيرة من السائل. بالنسبة لمعظم أجهزة HPLC الأخرى، لا يزال الفصل شبه التحضيري يعتمد على التشغيل اليدوي الممل والمتكرر.

تسلط هذه التحديات الضوء على الحاجة إلى نهج مبتكر لأتمتة تنقية العينات في سير عمل HPLC. لتلبية هذه الحاجة، طورنا LC-mate، وهي أداة مدمجة ومتعددة الاستخدامات تدمج وحدات السامبلر التلقائي ووحدات جمع الكسور في منصة واحدة. يتكون النواة السائلة في LC-mate من مكونين رئيسيين: صمام تبديل عالي الضغط بستة منافذ (SKVA-3130-S) مصنوع من الفولاذ المقاوم للصدأ SUS 316 مع مسار تدفق 0.4 مم وضغط تشغيل يصل إلى 45 ميجاباكال، مع تصنيف للتحكم الدقيق في حقن العينات، وصمام تحديد متعدد المواضع ذو 10 قنوات يتميز بحجم ميت ضئيل (27.5 ميكرولتر من منفذ إلى منفذ، أخدود دوار بسعة 5 ميكرولتر) بقطر قناة تدفق 1.2 مم لجمع الكسور بكفاءة. يقلل هذا التكوين من الحجم الميت ويقلل من خطر التلوث المتبادل. للحصول على مواصفات تفصيلية للأجهزة، يرجى الرجوع إلى الجدول 1. قد يستقبل LC-mate مخرجا تناظريا من كواشف HPLC ويشغل جهاز HPLC عبر إشارة متزامنة، مما يتيح التحكم المستقل في حقن العينات وجمع الكسور.

الجدول 1: معلمات الأدوات المتعلقة ب LC-mate. يرجى الضغط هنا لتحميل هذا الجدول.

الآلة مزودة ببرنامج تحكم سهل الاستخدام وواجهة لمس بديهية تتيح التصور المباشر للإشارات الكروماتوغرافية التناظرية. يدعم LC-mate أوضاع الفصل المتساوي والتدرج، مما يسمح للمستخدمين بتكوين معلمات رئيسية - بما في ذلك حجم الحقن، وعدد أوقات التكرار، ووقت الحقن الفاصل لكل حقن، ووضع الجمع [يعتمد على العتبة، أو الزمن، أو جمع الجميع (جمع الكسور فوق وتحت العتبة)]، وإطلاق التشغيل الآلي بالكامل بأمر واحد. هذا يلغي الحاجة إلى التدخل اليدوي المتكرر ويعزز بشكل كبير كفاءة تنقية HPLC.

يوضح الشكل 1 المظهر العام ومبدأ التشغيل والتكوين لجهاز LC-mate المدمج مع نظام HPLC.

figure-introduction-1
الشكل 1: تصميم وإعداد نظام LC-mate. (أ) التخطيط المخططي. (ب) مخطط الأداة. (ج) صورة عملية للتحضير. (د) ربط خط نقل الإشارة بين كاشف الأشعة فوق البنفسجية وجهاز LC-mate. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. التحقق من الاتصال

  1. تحقق من وصلات السباكة المذيبة بين HPLC، LC-mate، والعمود الكروماتوغرافي لضمان مسارات تدفق صحيحة (الشكل 1A).
  2. تحقق من اتصال خط نقل الإشارة بين كاشف الأشعة فوق البنفسجية وLC-mate، كما هو موضح في الشكل 1D.
    1. قم بتوصيل السلك الأسود بالطرف الأحمر والسلك الأبيض بالطرف الأسود ليطابق قطبية الإشارة التناظرية الخارجة.
    2. راقب عرض LC-mate. إذا ظهرت موجة الإشارة التناظرية، فإن الاتصال صحيح.
      ملاحظة: إذا لم يكن هناك شكل موجي مرئي، اعكس التوصيلات: اربط السلك الأسود بالطرف الأسود والسلك الأبيض بالطرف الأحمر.
  3. تحقق من اتصال الزناد بين كاشف الأشعة فوق البنفسجية وLC-mate.
    1. قم بتوصيل طرف كابل البيانات المفرد في منفذ إخراج كاشف الأشعة فوق البنفسجية.
    2. قم بتوصيل الأسلاك السوداء والبيضاء من الطرف الآخر إلى طرفي الزناد الأزرق والأسود في LC-mate على التوالي.
    3. شد الطرف والزناد لضمان اتصال قوي.

2. بدء نظام الفصل المتكامل

  1. تأكد من بدء تشغيل HPLC بشكل صحيح.
  2. تأكد من بدء تشغيل LC-mate بشكل صحيح.
    1. عند بدء تشغيل نظام LC-mate، انقر على أيقونة LC-mate في الواجهة لتنفيذ برنامج الاختبار الذاتي للنظام تلقائيا وتهيئة وحدات الأجهزة الرئيسية.
    2. انتظر نغمة المهمة القصيرة Di (حوالي 0.5 ثانية) واختفاء موجه "الاختبار الذاتي" على الشاشة بعد اكتمال الاختبار الذاتي، حيث تشير إلى انتهاء عملية التهيئة (Initialization).

3. تحسين الحالة

  1. قم بضبط شرط الفصل في HPLC وابدأ الإزالة لتحقيق توازن الأعمدة.
  2. انقر على أيقونة الاختبار على الجانب الأيسر من شاشة LC-mate، وستظهر الواجهة التالية على الشاشة (الشكل 2A). حجم حقن الإدخال، وقت الشفافية، وأوقات التكرار، واضغط على أيقونة البدء؛ سيتم بدء تشغيل السامبلر التلقائي، جامع الكسور، وHPLC. في هذه الحالة، يتدفق السائل فقط عبر المنفذ 10 من صمام الاختيار، ويمكن جمعه يدويا أو التخلص منه.
  3. تحديد شروط الفصل الممكنة، بما في ذلك الدقة، ووقت التشغيل، ووقت الاحتفاظ، وحجم الحقن، وطول موجة الأشعة فوق البنفسجية، وغيرها، لتسهيل الفصل وجمع الكسور اللاحق تحت الأنماط المناسبة.

4. التشغيل التلقائي

ملاحظة: استنادا إلى كروماتوغرام ظروف الفصل الممكنة، يمكن اختيار طريقة مناسبة لجمع الكسور من خيارات العتبة، وجمع التوقيت، وجمع كل على الجانب الأيسر من الواجهة.

  1. جمع الكسور بناء على القيمة العتبية
    1. اختر وحدة وظيفة العتبة على الجانب الأيسر من الواجهة، وسيعرض النظام واجهة إعداد المعلمات كما هو موضح في الشكل 2B.
    2. أدخل حجم الحقن، أوقات التكرار، العتبة، ووقت الاستنتاج، واضغط على زر البدء؛ HPLC و LC-mate سيعمل تلقائيا. سيتم جمع الكسور التي تتجاوز ذروتها الكروماتوغرافية العتبة في زجاجات تجميع مختلفة.
    3. راقب مؤشرات الحالة المرتبة عموديا على الشاشة: راقب عملية الحقن للتأكد من بدء إدخال العينة. تحقق من الفصل قيد الحدوث للتحقق من أن الانفصال الكروماتوغرافي يحدث. لاحظ "إفراغ الحقنة" لتحديد متى تقوم الحقنة بتفريغ السائل المتبقي. راقب تمييز الأزرق للنص المقابل لتأكيد الحالة التشغيلية النشطة حاليا.
      ملاحظة: أثناء عملية الفصل، سيظهر الضغط على أيقونة "كروماتوغرام" الكروماتوجرام وخط العتبة على واجهة جديدة، ويكون الكروماتوجرام مطابقا للذلك المعروض على شاشة الكمبيوتر الذي يتحكم في HPLC.
  2. جمع الكسور بناء على الفترة الزمنية
    1. اختر وحدة جمع التوقيت من الجانب الأيسر من الواجهة لفتح قائمة إعداد المعلمات (الشكل 2C).
    2. أدخل المعايير المطلوبة: حجم الحقن، أوقات التكرار، وقت الاستنتاج، وسلسلة من وقت الجمع المطلوب.
    3. اضغط على زر البدء لبدء التسلسل الآلي، ثم سيعمل نظام HPLC وLC-mate بشكل متكرر وفقا للمعايير المحددة.
  3. جمع الكسور باستخدام وضع "جمع الكل"
    1. اختر وحدة وظائف جمع الجميع على الجانب الأيسر من الواجهة، وسيعرض النظام واجهة إعداد المعلمات كما هو موضح في الشكل 2D.
    2. إذا حدد قيمة عتبة الجمع، فسيتم جمع القمم الكروماتوغرافية التي تكون فوق أو تحت العتبة بشكل منفصل، مما قد يضمن عدم فقدان أي مركب في الخليط.
      ملاحظة: الأسيتونيتريل هو مذيب قابل للاشتعال وسام. يجب إجراء جميع الإجراءات التي تشمل الأسيتونونتريل أو المذيبات العضوية الأخرى في مساحة مختبرية جيدة التهوية. يجب على الأفراد ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة (PPE)، بما في ذلك نظارات الرش الكيميائية وقفازات مقاومة للمذيبات، في جميع الأوقات. يجب جمع نفايات الأسيتونونتريل والمذيبات العضوية الأخرى في حاويات محددة ومعلمة بشكل صحيح للنفايات الكيميائية الخطرة. تم التعامل مع هذه التدفقات وفقا لبروتوكول الصحة والسلامة البيئية الخاص بمؤسستنا من قبل خدمة تصريف مرخصة.

5. تنظيف خطوط الأنابيب

ملاحظة: تنظيف خط الأنابيب يضمن عدم بقاء أي عينة في خط الأنابيب عند استخدام السامبلر التلقائي في المرة القادمة.

  1. جهز زجاجة صغيرة من المذيب النظيف، وأدخل أنبوب الحقن الخاص بجهاز السامبلر الذاتي في المذيب.
  2. اختر وحدة التنظيف من واجهة الجانب الأيسر لفتح قائمة إعداد المعلمات (الشكل 2E).
  3. تنظيف خط أنابيب الحقن
    1. اضبط حجم الحقن بين 0-1000، وحدد أوقات التكرار (بدون حدود).
    2. انقر على التنظيف أسفل "تم الانتهاء من التنظيف" لبدء تنظيف أنبوب الحاقن.
    3. راقب عد "الدورات" لتتبع عدد دورات الغسيل المكتملة.
  4. تنظيف خط أنابيب الجمع
    1. حدد وقت التنظيف (بدون حدود).
    2. انقر على التنظيف أسفل "خط الأنابيب الحالي" لبدء عملية تنظيف خط أنابيب الجمع.
    3. راقب عرض خط الأنابيب الحالي لتأكيد أي خط أنابيب يتم تنظيفه، حيث يتعامل النظام بشكل متسلسل من خط الأنابيب 0 إلى خط الأنابيب 10.

figure-protocol-1
الشكل 2: واجهة شاشة اللمس LC-mate لتشغيل الطريقة. (أ) شاشة التحسين. (ب) وضع العتبة. (ج) وضع التوقيت. (د) وضع جمع الجميع. (ه) تنظيف خطوط الأنابيب. (F) الإعدادات. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

6. تعليمات حفظ البيانات

  1. تفعيل الحفظ التلقائي. يقوم النظام تلقائيا بحفظ الكروماتوجرام بعد إكمال كل دورة إخفاء.
  2. قم بإجراء الحفظ اليدوي. انقر على زر الحفظ بعد اكتمال التشطيب. أدخل البيانات الوصفية المطلوبة في مربع الحوار لحفظ الملف.
  3. اختر موقع التخزين. اختر حفظ الملفات في التخزين المحلي للجهاز، أو بطاقة SD، أو محرك USB خارجي.
    ملاحظة: استخدم محرك USB خارجي لجميع تخزين البيانات لتجنب قيود السعة وضمان سهولة الوصول إلى البيانات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تنقية 2"-O-جالويل-هيبروزيد
2"-O-جالويل-هيبروسيد (2-GH) هو مكون رئيسي قابل للذوبان في الماء في Euphorbia helioscopia L.، وهو طب صيني تقليدي له تاريخ طويل في الاستخدام لعلاج البلغم والرطوبة11. تم عرض تركيبه الكيميائي في الشكل 3. تم مؤخرا اكتشاف أن 2-GH لديه تأثير مضاد للألياف في نموذجحيواني 12. لتحضير عينة نقية كافية من 2-GH لمزيد من...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تظهر هذه النتائج أن نظام LC-mate يمكنه تنفيذ حقن عينات مستمر وجمع الكسور بشكل مستقل وفقا لمعايير المجموعة، مما يقلل بشكل كبير من التدخل اليدوي ويعزز كفاءة الفصل. يتميز النظام بواجهة سهلة الاستخدام، تتطلب فقط إعداد الأجهزة الأولي يتبعه تشغيل شاشة لمس بديهية.

لضمان نجاح التجريب، تتطلب ثلاثة جوانب حاسمة الانتباه. أولا، يجب توصيل كابلات الإشارة التناظرية وكابلات الزناد بشكل صحيح بين كاشف HPLC وكابل LC-mate (كما هو موضح في خطوة البروتوكول 1.2.2) لتمكين عرض الإشارة ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

اقترح ويمين تشاو تصميم LC-mate، الذي نفذه مهندسو شركة شنغهاي بيتيرن للتكنولوجيا الطبية، المحدودة. براءة اختراع لهذه الأداة مملوكة بشكل مشترك بين شركة شنغهاي بيتيرن للتكنولوجيا الطبية المحدودة ومعهد شنغهاي للمواد الطبية والأكاديمية الصينية للعلوم.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يشكر المؤلفون بصدق شركة شنغهاي بيتيرن للتكنولوجيا الطبية المحدودة على كل مساهماتهم في تحويل فكرة تحرير الكيميائيين من التشغيل اليدوي الممل ل HPLC إلى واقع، والسيد شوهونغ هي من شركة ويلش ماتيلز إنك على اختبار تكرار LC-mate.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
كروماتوغرافيا سائل عالي الأداء - إيزي سبتمبر 1050شركة شنغهاي تونغوي لتقنية التحليل المحدودة. الصفحة الإلكترونية للآلة EasySep®-1050 https://www.instrument.com.cn/netshow/sh100522/C140238.htm1009992نظام HPLC تحضيري معياري يستخدم في البروتوكول. يشمل مضخة توصيل المذيبات، وكاشف للأشعة فوق البنفسجية/الأشعة فوق البنفسجية، وصمام حقن يدوي. يشكل هذا النظام وحدة الفصل الأساسية التي يقوم LC-mate بأتمتتها.
(عمود كروماتوغرافي سائل) شاربيل-يو C18 150 مم (لتر) &مرة؛ 30 مم (تحديد) S-10 وميكرو؛ m، 100Aشركة شنغهاي شوانمي للتطوير الصناعي المحدودة.U180110-300150عمود كروماتوغرافي معكوس - طور C18 بحجم جسيمات 10 & mu؛ m وحجم مسام 100 & Aring;. تم تصميمه لفصل الجزيئات الصغيرة (مثل الأدوية والمركبات العضوية) وله قابلية إعادة إنتاج واستقرار جيدان. أبعاد العمود (طول 150 مم، قطر داخلي 30 مم) تجعله مناسبا للكروماتوغرافيا التحضيرية أو شبه التحضيرية.
LC-mateشركة شنغهاي بيتيرن للتكنولوجيا الطبية، المحدودة. لأي استفسار عن  الأداة LC-mate، يرجى التواصل مع المؤلف المقابل عبر البريد الإلكتروني: wmzhao@simm.ac.cn GD202200337معدات مساعدة لأنظمة الكروماتوغرافيا السائلة، والتي من المحتمل استخدامها لحقن العينات، إدارة الطور المتنقل، أو جمع البيانات. يمكن دمجه مع أنظمة HPLC لتحسين أتمتة وكفاءة العمليات التجريبية

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Snyder, L. R., Kirkland, J. J., Dolan, J. W. Introduction to modern liquid chromatography. , 3rd ed, John Wiley & Sons. Hoboken, NJ. (2010).
  2. Georges, A. Preparative liquid chromatography. J Chromatogr A. 965 (1-2), 129-161 (2002).
  3. Hostettmann, K., Marston, A., Hostettmann, M. Preparative chromatography techniques: applications in natural product isolation. , Springer. Berlin. (1998).
  4. Queiroz, E. F., Guillarme, D., Wolfender, J. L. Advanced high-resolution chromatographic strategies for efficient isolation of natural products from complex biological matrices: From metabolite profiling to pure chemical entities. Phytochem Rev. 23 (5), 1415-1442 (2024).
  5. Glowniak, K., Zgórka, G., Józefczyk, A., Furmanowa, M. Sample preparation for taxol and cephalomannine determination in various organs of Taxus sp. J Pharm Biomed Anal. 14 (8-10), 1215-1220 (1996).
  6. Gumustas, M., Ozkan, S. A., Chankvetadze, B. Analytical and preparative scale separation of enantiomers of chiral drugs by chromatography and related methods. Curr Med Chem. 25 (33), 4152-4188 (2018).
  7. Wu, T., et al. Preparative separation of four isomers of synthetic anisodamine by HPLC and diastereomer crystallization. Chirality. 31 (1), 11-20 (2019).
  8. Aguilar, M. I. HPLC of peptides and protein: Methods and protocols. , Humana Press. Totowa, NJ. (2004).
  9. Dong, M. W. Modern HPLC for practicing scientists. , John Wiley & Sons. Hoboken, NJ. (2006).
  10. Meyer, V. R. Practical high-performance liquid chromatography. , 5th ed, John Wiley & Sons. Chichester, UK. (2010).
  11. Ding, J., et al. Research progress on modern pharmacological effects and clinical applications of Euphorbia helioscopia L. World Chin Med. 20 (14), 2588-2594 (2025).
  12. Wang, J. Q., et al. Hypericin ameliorates renal tubulointerstitial fibrosis by inhibiting YAP. Acta Med Univ Sci Technol Huazhong. 54 (2), 190-197 (2025).
  13. Li, W. J., et al. Research progress on the hypoglycemic effects of Litsea coreana leaves. Mod Food Sci Technol. 38 (4), 292-297 (2022).
  14. 1260 Infinity Variable Wavelength Detector User Manual. Document G1314-90013. , Agilent Technologies Inc. https://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/Public/G1314-90013_VWD-B-C_USR_EN.pdf (2010).
  15. 2487 Dual λ absorbance detector operator's guide. Document WAT048740, Rev. 2. , Waters Corporation. (2004).
  16. UltiMate 3000 series variable wavelength detectors VWD-3100 and VWD-3400RS operating instructions. Document 4820.7451, Rev. 1.7. , Thermo Fisher Scientific. https://conquerscientific.com/wp-content/uploads/2023/01/waters-2487-dual-absorbance-detector_operators-guide.pdf (2013).
  17. UltiMate 3000 VWD-3400RS detector product specifications. , Thermo Fisher Scientific. https://www.thermofisher.cn/order/catalog/product/cn/zh/5074.0010 (2013).
  18. Vargas Medina, D. A., Lozada-Blanco, A., García Rodríguez, J. P., Lanças, F. M., Santos-Neto, ÁJ. An open-source smart fraction collector for isocratic preparative liquid chromatography. HardwareX. 15, e00462(2023).
  19. Caputo, M., Lyles, J. T., Salazar, M. S., Quave, C. L. LEGO MINDSTORMS fraction collector: A low-cost tool for a preparative high-performance liquid chromatography system. Anal Chem. 92 (4), 1687-1690 (2020).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة