يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

التأثيرات العلاجية لمستخلص Acorus calamus L. على إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع في نموذج الفئران

467 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/69705

⸱

يناير 9, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Nuclear Medicine, General Hospital of Northern Theater Command, 2College of Medicine and Biological Information Engineering, Northeastern University, 3Shenzhen Institute for Advanced Study, University of Electronic Science and Technology of China

في هذه المقالة

ملخص

إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع هي مضاعفات شائعة وشديدة للعلاج الإشعاعي لمرضى السرطان. لا يوجد علاج سريري فعال. يقوم هذا البروتوكول بتقييم التأثير العلاجي لمستخلص Acorus calamus L. على إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع، بهدف توفير مرشحين أدوية واستراتيجيات علاجية جديدة للوقاية السريرية وعلاجه.

الملخص

إصابة الجلد الناتجة عن الإشعاع هي مضاعفات شائعة ومعطقة في علاج السرطان، وغالبا ما تؤدي إلى تأخير شفاء الجروح وزيادة انزعاج المريض. هناك بعض الأدوية العلاجية المتاحة للوقاية أو العلاج. أظهر الطب الصيني التقليدي، وخاصة Acorus calamus L.، إمكانات في علاج اضطرابات الجلد المختلفة، لكن فعاليته في إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع لا تزال غير مستكشفة.

استخدمت هذه الدراسة نموذج جرذان سبراج-داولي تعرض لإشعاع 45 جاير لإحداث إصابة جلدية. تمت معالجة الفئران بمستخلص 10٪، 20٪، و40٪ من Acorus calamus L. لمدة 45 يوما. تم تقييم شفاء الجرح، والالتهاب، والموت المبرمج، وتكوين الأوعية الدموية باستخدام معدلات شفاء الجرح، والتحليل النسيجي المرضي، وقياسات السيتوكينات، وتلوين TUNEL، والكيمياء المناعية النسيجية. أدى العلاج ب Acorus calamus L. إلى تسريع شفاء الجروح، حيث أظهرت مجموعة الجرعة المتوسطة أعلى معدل شفاء (88.97٪ بعد 45 يوما). كشف التحليل النسيجي المرضي عن انخفاض الالتهاب، وتحسن تنظيم الكولاجين، وتكوين أوعية دموية جديدة. انخفضت مستويات السيتوكينات الالتهابية في المصل (IL-1β، IL-6، TNF-α) بشكل ملحوظ، وانخفض الاستماتة المبرمجة، مع تعديل البروتينات المبوتة الرئيسية (P53, Bax, Bcl-2). تم تنظيم تعبير VEGF وbFGF، مما يعزز تكوين الأوعية الدموية وإصلاح الأنسجة. يعزز Acorus calamus L. شفاء إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع عن طريق تقليل الالتهاب، وتثبيط الاستماتة المبرمجة، وتعزيز تكوين الأوعية. تشير هذه النتائج إلى إمكاناته كعامل علاجي لإدارة تلف الجلد الناتج عن الإشعاع، مما يوفر بديلا واعدا لإدارة إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع في علم الأورام السريري. هناك حاجة إلى دراسات إضافية لتوضيح آلياته الجزيئية.

المقدمة

إصابة الجلد الناتجة عن الإشعاع هي مضاعفات متكررة وصعبة لكل من الحوادث النووية والعلاج الإشعاعي الورمي1. في العلاج الإشعاعي، يصاب حوالي 95٪ من المرضى بدرجة معينة من تلف الجلد، بما في ذلك الاحمرار، وفقدان الحرشف، وتقرحات نخرية متكررة، وألم مستمر، وزيادة خطر التقدم الخبيث2. غالبا ما تكون هذه الآفات مقاومة للعلاج، حيث تقلل بشكل كبير من جودة حياة المرضى وأحيانا تستدعي انقطاع العلاج الإشعاعي، مما يشكل تحديا سريريا كبيرا في علاج الأورام الإشعاعي3. الآليات الأساسية لتلف الجلد الناتج عن الإشعاع معقدة، حيث تتعلق بشكل أساسي بإنتاج الجذور الحرة داخل أنسجة الجلد، مما يعطل العمليات الخلوية ويفاقم عملية الشفاء 4,5. ينتج عن ذلك تعبير مطول لجينات مرتبطة بالموت المبرمج، واستجابات التهابية غير منظمة، ومسارات إشارات متغيرة، وكلها تساهم في استمرار الجروح الناتجة عن الإشعاع6.

لا يوجد حاليا علاج معترف به عالميا للإصابة الجلدية الناتجة عن الإشعاع. تركز الإدارة السريرية على الطرق المضادة للالتهابات أو مضادات الأكسدة7، لا سيما الكورتيكوستيرويدات الموضعية، التي تقلل من تفاعلات الجلد عبر التأثيرات المضادة للالتهابات، ومثبطات المناعة، وتضييق الأوعية، لكنها قد تسبب ترقق الجلدمع الاستخدام المطول. الأميفوستين، وهو عامل حماية إشعاعية معتمد من إدارة الغذاء والدواء، محدود الاستخدام السريري بسبب الآثار الجانبية الملحوظة9. تسرع عوامل النمو شفاء الجروح من خلال تعزيز تكاثر الخلايا، وتكوين الأوعية، وتكوين الأنسجة الحبيبية، ومع ذلك فإن أفعالها مركزة بشكل ضيق، وتوفر تحكما محدودا في إصابات الأنسجة العميقة والالتهابات، وتحمل خطر فرط التنسجالمفرط. وبالتالي، لفت الطب الصيني التقليدي (TCM) الانتباه لفلسفته الشمولية، ووجود مكونات نشطة متعددة ذات تأثيرات علاجية متنوعة، وملف أمان إيجابي. أظهرت دراسات سابقة أن المنتجات الطبيعية، مثل مستخلص عرقسوس، ومسكريدات الألوة، والكركمين، تخفف من الالتهاب الناتج عن الإشعاع وتلف الأنسجة عن طريق إزالة الجذور الحرة، وتثبيط الوسطاء الالتهابيين (TNF-α، IL-6)، وتعزيز تكاثر الأرومات الليفية 10,11,12. ومع ذلك، تفحص معظم هذه التحقيقات مركبات نشطة فردية أو أهدافا فردية، مما يوفر رؤية غير كافية حول آليات العمل التآزري متعدد المكونات. أظهر نبات Acorus calamus L.، المعروف بخصائصه المضادة للالتهابات، ومضادات الأكسدة، ومضادة للبكتيريا، وشفاء الجروح، إمكانات في العديد من اضطرابات الجلد.

أكوروس كالاموس L.، عشب معمر من عائلة Araneae، يحتوي على عدة مركبات نشطة بيولوجيا، بما في ذلك التربينات، والفينيل بروبانويدات، والفلافونويدات، والستيرويدات، والقلويدات. تسمح تركيبتها متعددة المكونات بالعمل المتزامن على أهداف متعددة، مما ينتج تأثيرات دوائية متآزرة13. تظهر الدراسات أنه يثبط مسارات الإشارات الالتهابية مثل NF-κB وMAPK، ويخفض بشكل يعتمد على الجرعة تعبير mRNA للعوامل الالتهابية مثل TNF-α وIL-6، بينما يزيد من نشاط إنزيمات مضادات الأكسدة مثل SOD وGSH-Px، مما يسبب تأثيرات مضادة للالتهابات ومضادات الأكسدة ومضادة للبكتيريا14,15. على الرغم من فوائده الموثقة في علاج الحالات الجلدية الناتجة عن العدوى والحساسية، لا يزال دور Acorus calamus L. في إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع غير مستكشف بشكل كاف. أظهرت الدراسات الحديثة تأثيراته الوقائية ضد الأضرار الناتجة عن الإشعاع، مما يعزز شفاء الجروح ويقلل الالتهاب. ومع ذلك، لم يتم توضيح الآليات العلاجية المحددة لأكروس كالاموس إل. في إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع بشكل كامل.

الهدف العام من هذه الدراسة هو تقييم التأثيرات العلاجية لمستخلص Acorus calamus L. في نماذج لإصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع. نقوم بتقييم شفاء الجروح، والاستجابات الالتهابية، والسلوك الخلوي لتوضيح آليات عمل المستخلص من عدة وجهات نظر. تهدف النتائج إلى تأسيس أساس نظري لاستخدام Acorus calamus L. في الإدارة السريرية لآفات الجلد الناتجة عن العلاج الإشعاعي بالسرطان. بالإضافة إلى ذلك، ستعرض الدراسة الخصائص الوظيفية للمستخلص، وسيناريوهات التدخل المناسبة، وبيانات الفعالية الأساسية لمساعدة القراء على الحكم على ما إذا كان هذا النهج القائم على المنتجات الطبيعية يكمل احتياجاتهم البحثية أو السريرية. في النهاية، يسعى هذا العمل إلى خيارات علاجية فعالة لتحسين جودة حياة المرضى الذين يتلقون العلاج الإشعاعي بالورم.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على التجارب الحيوانية الموصوفة في هذه الدراسة من قبل لجنة أخلاقيات البحث الطبي الحيواني في مستشفى القيادة العامة للمسرح الشمالي (رقم الموافقة الأخلاقية: 2018-03). تم استخدام ذكور من نوع SPF من نوع SD (6-8 أسابيع، وزن 190-220 جرام) في الدراسة. تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة مدرجة في جدول المواد.

1. إسكان التجريبية

  1. اختيار 108 فئران ذكر من نوع SPF من نوع SD، تتراوح أعمارهم بين 6 إلى 8 أسابيع ووزنهم بين 190 إلى 220 جرام.
  2. حافظ على درجة حرارة غرفة عند 22 ± 2 درجة مئوية، ورطوبة نسبية بين 50 ± 5٪، ودورة ضوء وظلام لمدة 12 ساعة. السماح للفئران بالحصول على الطعام والماء دون قيود. بعد فترة تأقلم مدتها أسبوع، انتقل إلى التجارب المتابعة.

2. تجميع

  1. قسم الفئران عشوائيا إلى خمس مجموعات مميزة: المجموعة الطبيعية (الطبيعي، n = 18)، المجموعة النموذجية (النموذج، n = 18)، مجموعات الأدوية الإيجابية (إيجابية، n = 18، كريم بيتميثازون)16، مجموعة الجرعة المنخفضة التجريبية (تجريبية-L، n = 18)، مجموعة الجرعة المتوسطة (تجريبية-M، n = 18)، ومجموعة الجرعة العالية (تجريبية-H، n = 18). باستثناء المجموعة الطبيعية، تعرضت جميع المجموعات للإشعاع.

3. إنشاء نموذج حيواني لإصابة الجلد المشعة

  1. أعط التخدير بدقة وبأقل انزعاج من خلال حقن محلول بنتوباربيتال صوديوم بنسبة 1٪ داخل الصبريتون (I.p.) (40 ملغ/كغ). تأكد من عمق التخدير من خلال ملاحظة غياب رد الفعل القرني وعدم الاستجابة لضغط الأصابع. ضع المرهم على عيون الفئران لمنع الجفاف.
  2. أزل شعر ظهر الفئران باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية. ثم عقم منطقة الظهر باليود والكحول بنسبة 75٪.
  3. ضع كل فأر في وضعية الاستلقاء. ثبت جهاز التغذية 32P-β (معدل جرعة السطح: 0.9 Gy/min) فوق المنطقة الثنائية للعمود الفقري (2 سم × 2 سم) في المنتصف على بعد 1 سم من الجانب إلى الخط الأوسط، لضمان أن المصدر يلامس البشرة بدون فراغ. ثبت جهاز التطبيق بشريط طبي معقم لمنع الإزاحة أثناء الإشعاع. قم بتعريض منطقة الجلد المستهدفة لمدة 50 دقيقة لتحقيق جرعة امتصاص كلية تبلغ 45 جيج17.
  4. بمجرد استعاد الجرذ وعيه بعد الإشعاع، أعده إلى قفصه الفردي، مع ضمان الوصول إلى الماء والطعام بحرية اللازم، مع الحفاظ على درجة الحرارة بين 22 ± 2 درجة مئوية، والرطوبة النسبية بين 50 ± 5٪، ودورة ضوء وظلام لمدة 12 ساعة.
    ملاحظة: يجب أن تلتزم عملية التجربة بدقة بالمبادئ المعتمدة للحماية البيولوجية والإشعاعية من المهن. بالإضافة إلى ذلك، يجب أن تتبع جميع الإجراءات التشغيلية الإرشادات الخاصة بالتخلص السليم والمتوافق من النفايات الطبية والإشعاعية لضمان سلامة وصحة جميع الأفراد المعنيين.

4. تحضير مستخلص Acorus calamus L. وإعطاء الدواء

  1. وزن جذور Acorus calamus L.، وتأكد من التنظيف الكامل، واتركها تجف بالهواء، ثم طحنها إلى مسحوق خشن (40 شبكة). قم بدمج 10-20 مجلد من الإيثانول بنسبة 50٪ وقم بالتجانس في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة
  2. بعد السماح للمستخلص بالترسب لمدة 30 دقيقة، قم بفرج المادة الفائقة وإجراء الترشيح الأولي عبر 4-8 طبقات من الشاش لإزالة الشوائب الخشنة. بعد ذلك، يتم الترشيح باستخدام ورق الترشيح، ثم تبخر الترشيح تحت ضغط منخفض في مبخر دوار عند 50-60 درجة مئوية لاستعادة المذيب، مما ينتج عنه بقايا صلبة خالية من المذيب (AE، محتوى الرطوبة < 5٪).
  3. تحضير المرهم AE18
    ملاحظة: صيغ مراهم 10٪ (تجريبي-L، مع مرهم/أسود)، 20٪ (Experimental-M، مع مرهم)، و40٪ (Experimental-H، مع مرهم Acorus calamus L. وفقا لطبعة الأدوية الصينية 2020 (الفصل العام 0109)19.
    1. قم بوزن AE بدقة (مثلا 20 جرام لمرهم 20٪) والبترولاتوم الصيدلانية المقابل (مثلا 80 جرام لمرهم 20٪).
    2. أضف 10٪ من إجمالي البترولاتوم إلى AE، ثم قم بالتثبيث بقوة لمدة 5 دقائق لتكوين معجون متجانس (طريقة تخفيف هندسية لضمان انتشار AE بشكل متساو في القاعدة المحبة للدهون).
    3. قم بإذابة البترولاتوم المتبقية عند 60 درجة مئوية، ثم برد إلى 55 درجة مئوية، وأضف ببطء إلى معجون AE-petrolatum.
    4. تحرك مغناطيسيا عند 250 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة عند 55 درجة مئوية، ثم تحرك بشكل مستمر أثناء التبريد إلى درجة حرارة الغرفة للحصول على مرهم ناعم خال من الجزيئات.
    5. تحضير التحكم الفارغ: إذابة البترولاتوم عند 60 درجة مئوية، تحريك بسرعة 250 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة، وتبريده إلى درجة حرارة الغرفة (مطابقة لقاعدة المرهم AE).
    6. تخزين جميع المراهم والبترولاتوم الفارغ عند درجة حرارة 4 درجات مئوية في حاويات معقمة محكمة الإغلاق.
  4. تم إعطاء جميع المجموعات عوامل موضعية مرتين يوميا في الساعة 09:00 و17:00 لمدة 45 يوما متتالية بعد الإشعاع (أما المجموعة الطبيعية، غير المصابة بالإشعاع، فقد تلقت نفس جدول الإعطاء بشكل متزامن). كانت الجرعة المطبقة 0.2 جم/سم²، موزعة بالتساوي على منطقة الجلد الظهري بحجم 2 سم × 2 سم. حصلت المجموعة العادية على مركبة (بترولاتوم)، وحصلت مجموعة الطراز على مركبة (بترولاتوم). تلقت المجموعة الضابطة الإيجابية كريم بيتاميثازون. تلقت مجموعات التجارب L وM وH كريمات تحتوي على AE بنسبة 10٪، 20٪، و40٪ (مع الأبيض/الأبيض) على التوالي. بعد كل تطبيق، تم تدليك المنطقة المعالجة بلطف لمدة 10 ثوان لتعزيز الامتصاص، وتم تقييد الفئران لمدة 5 دقائق لمنع اللعق.

5. جمع أنسجة جلد ودم الفئران

  1. قم بتخدير الفئران باستخدام محلول بنتوباربيتال صوديوم بنسبة 1٪ (40 ملغ/كجم، i.p.). قم بتعقيم الأدوات الجراحية وقم بإزالة الجلد على طول موقع الجرح.
  2. ثبت جزء من النسيج في 4٪ بارافورمالديهيد (10 مل)، وجزء آخر في جلوتارالديهايد/رباعي أكسيد الأوزميوم (5 مل، 2.5٪)، وحفظ الباقي في النيتروجين السائل لمزيد من التحليل (راجع جدول المواد).
  3. جمع عينات دم من الشريان الأبهر البطني للفأر. الطرد المركزي عند 3,000 × جرام عند 4 درجات مئوية لمدة 15 دقيقة؛ يتم استنشاق المادة الفائقة إلى أنابيب EP؛ التخزين عند -80 درجة مئوية.

6. تقييم الشفاء

  1. راقب الجرح في الأيام السابعة والخامسة عشرة والثلاثين والخامسة والأربعين بعد الإشعاع والتقط صورا لسطح الجرح بكاميرا عالية الدقة. استورد الصور إلى ImageJ وارسم منطقة الجرح على طول حافة الجرح. احسب المساحة في الصورة. تأكد من أن كل عملية متسقة لتجنب أخطاء القياس. احسب وقت شفاء الجرح ومعدل الشفاء.
    ملاحظة: معدل شفاء الجرح (٪) = (المنطقة المشعة الأولية - منطقة الجرح غير الملئمة) / المنطقة المشعة الأولية. معايير شفاء الجرح: يعرف الشفاء الكامل بأنه إما منطقة متقشرة < 5٪ من مساحة الجرح أو منطقة ملتئمة > 95٪ من مساحة الجرح. المنطقة المشعة الأولية: منطقة الجرح المقاسة في الوقت الذي أظهرت فيه المشعة جرح مستقر (خط أساس).

7. فحص المجهر الإلكتروني

  1. أخذ عينات الأنسجة السريعة والتثبيت
    1. استخدم شفرة حادة لاستئصال كتلة نسيج جلدية بحجم 1 ملم مكعب، تغطي طبقة البشرة والجلد.
    2. اغمر العينة فورا في محلول فوسفات غلوتارالديهايد مبرد مسبقا بنسبة 2.5٪ (0.1 م، درجة حموضة 7.4) عند 4 درجات مئوية لمدة 24 ساعة للتثبيت.
  2. غسل المخزن
    1. قم بثلاث غسلات باستخدام حاجز فوسفات 0.1 متر (pH 7.4)، مع السماح ب 15 دقيقة لكل غسلة.
  3. التثبيت بعد الانتشار
    1. نقل العينة إلى محلول رباعي أكسيد الأوزميوم بنسبة 1٪ عند 4 درجات مئوية لتثبيت لمدة 1.5 ساعة.
  4. الجفاف التدرج
    1. مرر تدريجيا تركيزات الأسيتون 50٪، 70٪، 80٪، 90٪، و100٪، مع تخصيص 15 دقيقة لكل خطوة.
    2. كرر العلاج باستخدام الأسيتون 100٪ ثلاث مرات، مع كل غمر لمدة 10 دقائق.
  5. تضمين راتنج الإيبوكسي
    1. نقع العينة في خليط بنسبة 2:1 من الأسيتون وراتنج الإيبوكسي لمدة ساعتين، تليها غمر الريفي طوال الليل في راتنج الإيبوكسي النقي.
    2. قم بلمرة العينة عند درجة حرارة 60 درجة مئوية لمدة 48 ساعة لتكوين كتلة صلبة.
  6. التقسيم والتلوين
    1. أنتج مقاطع فائقة الرقة بحجم 70 نانومتر باستخدام فائق الميكروتوم.
    2. صبغ بأسيتات اليورانيوم لمدة 15 دقيقة، ثم بسترات الرصاص لمدة 5 دقائق عند 60 درجة مئوية.

8. صبغة الهيماتوكسيلين-إيوزين (HE)

  1. قم بتضمين البارافين
    1. يتم إزالة عينات الجلد من البشرة، ويتم تجفيفها باستخدام تدرج كحول (مثل 70٪، 80٪، و95٪ إيثانول، كل منها لمدة 15 دقيقة، ثم تغييرين من 100٪ إيثانول، كل منها لمدة 15 دقيقة)، ثم تنقل إلى الزيلين حتى يصل النسيج إلى حالة شفافة.
    2. اغمر في البارافين لضمان الغرس، ثم اترك التصلب.
  2. نفذ إزالة الشمع وإعادة الترطيب
    1. اغمر أقسام البرافين في زيلين I/II لمدة 10 دقائق لكل منها.
    2. اشطف الزيلين ب 100٪ إيثانول، ثم اغمس في 95٪ إيثانول لمدة 3 دقائق، 80٪ إيثانول لمدة 3 دقائق، 70٪ إيثانول لمدة 3 دقائق، وأخيرا اشطف بالماء المقطر.
  3. توصيل صبغة الهيماتوكسيلين النووية
    1. انقع في محلول الهيماتوكسيلين الخاص بهاريس لمدة 7 دقائق في درجة حرارة الغرفة.
    2. اشطف تحت الماء الجاري لمدة 10 دقائق حتى يظهر اللون الأزرق.
  4. تنفيذ التميز والتلوين المضاد
    1. قم بالتميز باستخدام حمض الهيدروكلوريك بنسبة 1٪ في الإيثانول لمدة 3 ثوان (لاحظ وضوح النواة تحت المجهر).
    2. صبغ مضاد بمحلول أمونيا 0.5٪ لمدة 30 ثانية.
  5. قم بإجراء تلوين مضاد الإيوسين
    1. صبغ بمحلول إيوزين بنسبة 0.5٪ (يحتوي على 1٪ حمض الخليك الجليدي) لمدة 90 ثانية.
    2. اشطف بسرعة بالماء المقطر لمدة 5 ثوان لإزالة البقع الزائدة.
  6. تنفيذ عملية الجفاف والتنظيف.
    1. مرر بالتتابع عبر 70٪، 80٪، 95٪، 100٪ إيثانول I/II (دقيقة واحدة لكل منهما).
    2. نظف باستخدام الزيلين I/II لمدة دقيقتين لكل منهما.
  7. تطبيق الإغلاق والمراقبة
    1. ضع الراتنج المحايد باتجاه القطر، ثم غطه بغطاء داخلي.
    2. جففها في فرن بدرجة حرارة 60 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة قبل الفحص المجهري.

9. صبغة ماسون الثلاثية الألوان

  1. قم بإزالة الشمع بشكل روتيني مشابه للصبغ قبل HE.
  2. التلوين النووي
    1. انقع في محلول الهيماتوكسيلين لمدة 10 دقائق.
    2. اشطف تحت الماء الجاري لمدة 5 دقائق حتى يعود اللون الأزرق.
  3. صبغة ألياف الكولاجين
    1. اغمر في مزيج من أليزارين الأحمر وحمض الفوخسين لمدة 5 دقائق.
  4. تمايز حمض الفوسفوموليبد
    1. انقله إلى محلول مائي من حمض الفوسفوموليبد بنسبة 1٪ لمدة دقيقة واحدة.
  5. التلوين المضاد لألياف العضلة
    1. انقله مباشرة إلى محلول أزرق أنيلين بنسبة 2.5٪ لمدة 5 دقائق.
    2. اشطف بسرعة بمحلول مائي بحمض الخليك الجليدي بنسبة 0.5٪ لمدة 5 ثوان.
  6. الجفاف والتركيب
    1. نفذ تجفيف الإيثانول بتدرج: 95٪ إيثانول I، 100٪ إيثانول II (30 ثانية لكل منهما).
    2. نظيف مع الزيلين.
    3. تم تركيبه باستخدام راتنج محايد، وجففه عند 60 درجة مئوية، ثم فحصه تحت المجهر.

10. كشف ELISA لمستويات IL-1β وIL-6 وTNF-α

ملاحظة: IL-1β وIL-6 وTNF-α هي سيتوكينات التهابية مهمة تستخدم عادة لتقييم وجود وشدة الالتهاب. مراقبة مستوياتها أمر بالغ الأهمية لاكتساب فهم حول العمليات الالتهابية وتحديد فعالية العلاجات المضادة للالتهابات.

  1. تحضير عينات المصل
    1. اتبع البروتوكول الموضح في الخطوة 5.3 لجمع عينات المصل.
  2. المعايير المخففة والعينات
    1. إنشاء تخفيف تدرج للمعايير باستخدام مخفف العينة؛ تخفف عينات المصل بنسبة 1:4.
  3. أضف عينات واحتضن
    1. إدخال 100 ميكرولتر من المعيار/العينة في كل بئر؛ تغطية الآبار بغشاء؛ الحضانة عند 37 درجة مئوية لمدة 90 دقيقة؛ ثم تخلص من السائل وامسح الآبار حتى تجف.
  4. اكتشاف تفاعل الأجسام المضادة مع الإنزيم
    1. توزيع 100 ميكرولتر من الكاشف الموسوم بالإنزيمات الخاص ب IL-1β وIL-6 وTNF-α في كل بئر؛ الحضانة عند 37 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة؛ أزل السائل وجفف الماء؛ اغسل الطبق أربع مرات باستخدام 200 ميكرولتر من محلول الغسيل.
    2. أضف 100 ميكرولتر من محلول العمل ستربتافيدين-HRP (تخفيف بنسبة 1:100) إلى كل بئر؛ يحتضن عند 37 درجة مئوية في الظلام لمدة 30 دقيقة؛ اغسل الطبق أربع مرات باستخدام 200 ميكرولتر من محلول الغسيل.
  5. تطوير اللون وإنهاء اللعبة
    1. إدخال 100 ميكرولتر من محلول الركيزة TMB لكل بئر؛ يحتضن في درجة حرارة الغرفة في الظلام لمدة 10 دقائق؛ ثم أضف 50 ميكرولتر من محلول التوقف إلى كل بئر.
  6. اقرأ البيانات
    1. قس الامتصاص عند 450 نانومتر (مع طول موجة معايرة 630 نانومتر) باستخدام قارئ اختبار مناعي مرتبط بالإنزيم خلال 30 دقيقة؛ حساب التركيز (pg/mL) باستخدام المنحنى القياسي.

11. اختبار التونيل

  1. معالجة المقطع قبل
    1. قم بإزالة الشمع وتجفيف أجزاء البارافين حتى تصل إلى ماء مقطر.
    2. أدخل محلول يعمل من بروتيناز K بتركيز 20 ميكروغرام/مل، وحضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.
    3. اغسل الأقسام ثلاث مرات باستخدام PBS، وكل غسلة تستغرق دقيقتين.
  2. تفاعل التصنيف
    1. تطبيق خليط تفاعل TUNEL الذي يحتوي على إنزيم TdT وdUTP الموسوم بالفلورسين.
    2. حضانه في حجرة رطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في الظلام لمدة 60 دقيقة.
  3. تحويل الإشارة
    1. اغسل ثلاث مرات باستخدام PBS، مع السماح ب 5 دقائق لكل غسل.
    2. قدم جسما مضادا مضادا مضادا للفلوريسين موسوما ب HRP عند تخفيف 1:500.
    3. حضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
  4. تطور الكروموجين DAB
    1. بعد غسل PBS، ضع محلول الكروموجيني DAB وراقب تطور المحلول تحت المجهر لمدة 1 إلى 3 دقائق.
    2. أوقف التفاعل باستخدام الماء المقطر.
  5. التلوين المضاد والتركيب
    1. ضع النوى المضادة للصبغ بالهيماتوكسيلين لمدة دقيقة واحدة.
    2. جفف باستخدام الإيثانول المتدرج، ثم نظف بالزيلين، وركب بالراتنج المحايد.
  6. تفسير النتائج
    1. حدد النوى الموتمة على أنها بنية مائلة إلى الأصفر، بينما تظهر النوى الطبيعية زرقاء.
    2. اختر عشوائيا خمسة حقول عالية القدرة (400×) لكل شريحة لحساب معدل الاستماتة المبرمجة.

12. التلوين الكيميائي المناعي

  1. إزالة الشمع واسترجاع المستضدات
    1. انقع شرائح البرافين في زيلين I لمدة 10 دقائق، ثم انقله إلى زيلين II لمدة 10 دقائق أخرى. بعد ذلك، جفف الجيوب باستخدام سلسلة إيثانول متدرجة، تبدأ ب 5 دقائق في 100٪ إيثانول I، تليها 5 دقائق في 100٪ إيثانول II، 3 دقائق لكل منها 95٪، 80٪، و70٪ إيثانول، وأخيرا اشطف بالماء المقطر لمدة دقيقتين.
    2. قم بإجراء إصلاح حرارة عالي الضغط باستخدام حاجز سترات الصوديوم بمقدار 0.01 مليون عند درجة حموضة 6.0، مع الحفاظ على درجة حرارة 121 درجة مئوية لمدة 3 دقائق.
  2. حجب التداخل الداخلي
    1. أدخل محلول H2O بنسبة 3٪ في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق لتعطيل الإنزيمات الداخلية.
    2. ضع محلول حاجب BSA بنسبة 5٪ على النسيج وحضنه في حجرة رطبة عند 37 درجة مئوية لمدة 45 دقيقة؛ استنشق أي محلول حاجز زائد دون شطف.
  3. حضانة الأجسام المضادة
    1. أعط محلول حجب BSA بنسبة 5٪ وحضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
    2. أضف محلول الأجسام المضادة الأساسي العامل عند التركيز الأمثل (مثل P53، Bax، Bcl-2، VEGF، وbFGF) وحضنه طوال الليل في غرفة رطبة عند 4 درجات مئوية؛ اغسله ثلاث مرات باستخدام محلول PBS-T يحتوي على 0.1٪ Tween-20 لمدة 5 دقائق لكل مرة.
    3. إدخال جسم مضاد ثانوي موسوم ب HRP مخفف بنسبة 1:200؛ يحتضن في غرفة رطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة؛ اغسله ثلاث مرات باستخدام مخزن PBS-T لمدة 5 دقائق لكل مرة. ثم أضف محلول ABC المزدوج وحضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة، تليها ثلاث غسلات باستخدام محلول PBS لمدة 5 دقائق لكل منها.
  4. تطور ألوان DAB
    1. أضف محلول تطوير DAB يحتوي على 0.02٪ H₂O₂ وراقب التطور تحت المجهر في درجة حرارة الغرفة لمدة 1-4 دقائق.
    2. أنهي التفاعل فورا بالماء المقطر.
  5. التلوين المضاد والتركيب
    1. اغمر العينة في محلول الهيماتوكسيلين من هاريس لمدة دقيقة واحدة ثم اشطفها تحت ماء جاري لمدة 10 دقائق لتحقيق استعادة اللون الأزرق.
    2. اغمر بشكل تسلسلي في الحلول التالية: 70٪ إيثانول لمدة 30 ثانية، 80٪ إيثانول لمدة 30 ثانية، 95٪ إيثانول لمدة 30 ثانية، 100٪ إيثانول I لمدة دقيقة واحدة، و100٪ إيثانول II لمدة دقيقة واحدة.
    3. لتنظيف كامل وتثبيت، اغمر في الزيلين I لمدة دقيقتين، ثم انقله إلى زيلين II لمدة دقيقتين. أضف تركيب الراتنج المحايد باتجاه السقوط المتوسط، غطه بطبقة غطاء، وجفف في فرن بدرجة حرارة 60 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
  6. كمية النتائج
    1. اللون البني يشير إلى رد فعل إيجابي؛ يجب أن تكون الإشارات الموجبة (بني-أصفر) متباينة مع الخلفية السلبية.
    2. استخدم برنامج Image-Pro Plus لحساب نسبة الخلايا الموجبة عبر خمسة مجالات رؤية على الأقل.

13. كشف البلوتينغ الغربي

  1. تحضير تحليل الأنسجة
    1. إدخال نسيج الجلد المجمد بالنيتروجين السائل في هاون من الفولاذ المقاوم للصدأ مبرد مسبقا عند -80 درجة مئوية؛ أضف النيتروجين السائل تدريجيا على ثلاث مراحل للحد من التبخر؛ الطحن بشكل عمودي حتى تختفي جميع الجزيئات؛ انقل المسحوق الناتج إلى أنبوب EP يحتوي على مخزن تحلل.
    2. أضف مثبط البروتيز (1:100) ومثبط الفوسفاتاز (1:50)؛ دوامة على الجليد لمدة 30 ثانية؛ وإجراء تعطيل بالموجات فوق الصوتية؛ الحضانة عند 4 درجات مئوية في حاضنة تهز لمدة ساعتين؛ جهاز طرد مركزي عند 4 درجات مئوية، 14,000 × جرام لمدة 20 دقيقة؛ استنشق السوبرناتانت بحذر.
  2. قياس البروتين ومعالجته
    1. يتم توزيع 5 ميكرولتر من المادة الفائقة في صفيحة ذات 96 بئر؛ أضف 200 ميكرولتر من محلول BCA العامل؛ يحتضن عند 37 درجة مئوية في الظلام لمدة 30 دقيقة؛ قياس الامتصاص عند 562 نانومتر باستخدام قارئ الميكرولوتين؛ حدد التركيز وفقا للمنحنى القياسي.
    2. اجمع بين 5× تقليل تحميل البروتين مع محلول البروتين بنسبة 4:1؛ تبدد الطبعة بوضعها في حمام ماء مغلي لمدة 15 دقيقة؛ خزن عند -20 درجة مئوية للاستخدام المستقبلي.
  3. الرحلان الكهربائي SDS-PAGE
    1. حضر جل محلول بنسبة 12٪ أكريلاميد؛ اسكب الجل حتى يصل إلى 1 سم تحت أسنان المشط؛ غطه بالأيزوبروبانول لمنع التعرض للهواء؛ بعد التصلب، إزالة الأيزوبروبانول؛ صب جل تركيز بنسبة 4٪؛ أدخل مشطا ب 15 بئرا؛ يسمح بالتصلب في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة؛ أضف 5 ميكرولتر من علامة البروتين المصبوغ مسبقا إلى بئر التحميل 1؛ أضف 20 ميكرولتر من الليستات الفارغ إلى البئر 2؛ أضف 10 ميكرولتر من العينة التي تحتوي على 40 ميكروغرام بروتين إلى كل بئر من 3 إلى 14.
    2. بدء الرحلان الكهربائي عند 80 فولت؛ التحول إلى 120 فولت عندما يهاجر البروموفينول الأزرق إلى الجل الفاصل؛ الحفاظ على درجة حرارة تتراوح بين 10-15 درجة مئوية مع دوران ماء مثلج؛ اعمل حتى يصل اللون الأزرق للبروموفينول إلى 0.5 سم من قاع الجل.
  4. إجراء البقع الرطب
    1. تحضير مخزن نقل يحتوي على 20٪ ميثانول؛ قبل التبريد إلى 4 درجات مئوية. فعل غشاء PVDF عن طريق غمره في الميثانول لمدة دقيقة واحدة؛ تسوية غشاء NC في المخزن المؤقت. قم بتجميع مشبك النقل بهذا الترتيب: "صفيحة الكاثود - وسادة الإسفنج - ورق الترشيح - الجل - الغشاء - ورق الترشيح - وسادة الإسفنج - صفيحة الأنود"; قم بإزالة أي فقاعات جيدا باستخدام الأسطوانة؛ اضبط المعلمات وفقا لوزن جزيء البروتين المستهدف: للبروتينات < 50 كيلو دالتون، استخدم نقل جهد ثابت عند 100 فولت لمدة 60 دقيقة؛ بالنسبة لبروتينات 50-100 كيلو دالتون، تطبيق نقل تيار ثابت عند 250 مللي أمبير لمدة 90 دقيقة؛ بالنسبة للبروتينات > 100 كيلو دالتون، تنفيذ نقل تيار ثابت عند 300 مللي أمبير لمدة 120 دقيقة؛ اتصل بحمام ماء يدور بدرجة حرارة 4 درجات مئوية.
  5. إجراء كشف المناعة
    1. بعد النقل، اغمر غشاء PVDF في الميثانول لمدة دقيقة واحدة؛ أغسل ثلاث مرات باستخدام TBST لمدة 5 دقائق لكل مرة؛ تغطية سطح الغشاء بنسبة 3٪ H₂O₂/TBST؛ يحضن في درجة حرارة الغرفة في الظلام لمدة 15 دقيقة؛ استنشاق السائل؛ أضف حل حجب BSA/TBST بنسبة 5٪؛ حجب لمدة ساعة واحدة في حاضنة اهتزاز بدرجة حرارة 37 درجة مئوية؛ اغسل الغشاء ثلاث مرات باستخدام TBST لمدة 5 دقائق لكل مرة.
    2. أضف محلول الجسم المضاد الأساسي العامل (مثل P53، Bax، Bcl-2، VEGF، وbFGF)؛ يحتضن طوال الليل عند درجة حرارة 4 درجات مئوية في حاضنة تهز؛ اغسل الغشاء أربع مرات باستخدام TBST لمدة 10 دقائق لكل مرة؛ أضف الأجسام المضادة الثانوية الموسومة ب HRP; الحضانة على حاضنة تهز في درجة حرارة الغرفة لمدة 90 دقيقة؛ اغسل الغشاء ست مرات باستخدام TBST + 0.5٪ SDS لمدة 8 دقائق لكل مرة.
  6. تصوير الإضاءة الكيميائية
    1. اخلط أحجام متساوية من حلول ECL A و B؛ تغطي سطح الغشاء بشكل متساو؛ السماح للتفاعل بأن يحدث في الظلام لمدة 60 ثانية؛ يستنشق أي سائل زائد؛ حدد وقت تعرض واحد بين 1-5 ثانية لبروتينات الإشارة القوية؛ ينفذ تعرضا تراكميا في خمسة أجزاء (10/30/60/120/300 ثانية) للبروتينات الضعيفة الإشارية؛ التقط الصور باستخدام جهاز تصوير كيميائي للتوليخ.
  7. سير عمل تحليل البيانات
    1. قياس البروتينات باستخدام برنامج ImageJ؛ تحديد عتبة طرح خلفية موحدة؛ احسب نسبة التدرج الرمادي للبروتين المستهدف إلى البروتين المرجعي (β-أكتين أو GAPDH)
    2. استورد البيانات إلى GraphPad Prism للتحليل.

14. التحليل الإحصائي

  1. عرض البيانات حسب المتوسط ± الخطأ المعياري في المتوسط. استخدم اختبارات t العينات المستقلة للمقارنات بين مجموعتين، واستخدم تحليل النوفاع الأحادي الاتجاه للمقارنات بين مجموعات متعددة.
  2. تحليل البيانات باستخدام SPSS 26.0 وGraphPad Prism 8.0.2.
  3. اعتبر P < 0.05 دلالة على فروق ذات دلالة إحصائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

التأثير العلاجي لأكروس كالاموس إل. على إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع
بعد 15 يوما من الإشعاع، أظهرت جميع مجموعات الفئران تقشرا جافا، احمرارا موضعيا، تورما، تقرحا، وقشرة. بعد 30 يوما من الإشعاع، أظهرت مجموعة النماذج أشد ضرر جلدي، حيث بلغت القشور والتقرحات في الموقع المشع ذروتها. بعد 45 يوما، أظهرت مجموعة النماذج تساقط قشور طفيفة جدا، وأظهر الجرح بعض الانقباض. أما مجموعات Acorus calamus L. ومجموعات العلاج الدوائي الإيجابي فقد أظهرت انخفاضا ملحوظا في تلف الجلد، وتقرحات أخف، وتحسن في شفاء الجروح، وتغطية ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تظل إصابات الجلد الناتجة عن الإشعاع من أكثر المضاعفات شيوعا وتحديا في العلاج الإشعاعي السريري للسرطان. باعتباره أكبر عضو وأول هدف للإشعاع، يكون الجلد عرضة للتلف الناتج عن الجذور الحرة وأنواع الأكسجين التفاعلية الناتجة عن الإشعاع، مما قد يعيق وظائف الخلية، بما في ذلك انقسام الخلايا، والهجرة، والتمايز، مما يؤدي في النهاية إلى تأخير شفاء الجروح وتلف الأنسجة. غالبا ما تظهر هذه الإصابات على شكل احمرارة، وذمة، وقرح متكررة، ونخر، وفي ال...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

وقد دعم هذا العمل خطة مشتركة لخطة العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة لياونينغ (مشروع معالجة تقنية) (2024JH2/102600273) ومشروع البحث المستقل لمستشفى المسرح العام الشمالي (ZZKY2024001، ZZKY2024002، ZZKY2024003).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
4٪ محلول بارافورمالديهايد Fixشركة بيوتايم بيوتيك (بيوتايم)، الصينP0099
مستخلص Acorus calamus L.تم إعدادها داخلياغير متوفر  يتم وصف بروتوكول التحضير التفصيلي في القسم 4 من البروتوكول.
الأجسام المضادة المضادة لباكس   شركة ووهان لتقنية السيرفيسبايو، المحدودة (ووهان، هوبي، الصين)GB11690
الأجسام المضادة المضادة لل Bcl-2شركة ووهان لتقنية السيرفيسبايو، المحدودة (ووهان، هوبي، الصين)GB113375
الأجسام المضادة المضادة لbFGFمجموعة بروتين تيك (ووهان، هوبي، الصين)11234-1-AP
الأجسام المضادة المضادة لمضاد P53 شركة ووهان لتقنية السيرفيسبايو، المحدودة (ووهان، هوبي، الصين)GB111740
الأجسام المضادة المضادة ل VEGF  شركة ووهان لتقنية السيرفيسبايو، المحدودة (ووهان، هوبي، الصين)GB111971
مجموعة اختبار بروتين BCA  شركة ووهان لتقنية السيرفيسبايو، المحدودة (ووهان، هوبي، الصين)G2026-200T
كريم بيتاميثازون  شركة يونايتد فارماسيوتيكال المحدودة (الصين)غير متوفرالتركيز: 0.1٪ مع < الدواء/> رقم الموافقة الوطنية للأدوية: H19994057
الإيثانولشركة شنغهاي علاء الدين للتكنولوجيا الكيميائية الحيوية المحدودةE111991يستخدم كمذيب استخلاص لمستخلص Acorus calamus L.
نظام تصوير الجل والبقعمختبرات بيو-راد، إنك. (هيركوليس، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية)عضو مجلس كيمي دوك
مجموعة صبغ الهيماتوكسيلين-إيوزينبكين سولاربيو للعلوم والطاقة الشمسية شركة تكنولوجي المحدودة، (بكين، الصين)   G1120
معالج IgG مضاد للأرانب الماعز (H+L) المرتبط ب HRPشركة ووهان لتقنية السيرفيسبايو، المحدودة (ووهان، هوبي، الصين)GB23303
المجهر الفلوري المقلوبشركة أوليمبوس (طوكيو، اليابان)IX83   
ماسون مجموعة التلوين الثلاثية الألوانبكين سولاربيو للعلوم والطاقة الشمسية شركة تكنولوجي المحدودة، (بكين، الصين)   G1340
قارئ الميكروبليت (للامتصاص، والفلورة، والكشف عن التوضيع)الأجهزة الجزيئية (سان خوسيه، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية)سبيكترا ماكس iD3
البترولاتومشركة سينوفارم للكاشف الكيميائي المحدودة (شنغهاي، الصين)غير متوفر  البترولاتوم الأبيض الصيدلاني؛ نقطة الانصهار: 45-60 ودرجة مئوية؛ C;  رقم الموافقة الوطنية على الدواء: H31022350
Rat IL-1β مجموعة إليسا    شركة بيوتايم بيوتيك (بيوتايم)، الصينPI303
مجموعة RAT IL-6 ELISA & nbsp;  شركة بيوتايم بيوتيك (بيوتايم)، الصينPI328
رات TNF-&; مجموعة إليسا    شركة بيوتايم بيوتيك (بيوتايم)، الصينPT516
مجموعة كشف الاستماتة الخلوية TUNEL (DAB)شركة بيوتايم بيوتيك (بيوتايم)، الصينC1091

المراجع

  1. Piffkó, A., et al. Radiation-induced amphiregulin drives tumour metastasis. Nature. 643 (8072), 810-819 (2025).
  2. Wang, K., Tepper, J. E. Radiation therapy-associated toxicity: Etiology, management, and prevention. CA Cancer J Clin. 71 (5), 437-454 (2021).
  3. Grosu-Bularda, A., et al. Navigating the complexities of radiation injuries: therapeutic principles and reconstructive strategies. J Pers Med. 14 (11), 1100(2024).
  4. Kemin, L., Rutie, Y. A critical review of the progress in prevention and treatment of radiation-induced skin damage. Front Oncol. 14, 1395778(2024).
  5. Borrelli, M. R., et al. Radiation-induced skin fibrosis: Pathogenesis, current treatment options, and emerging therapeutics. Ann Plast Surg. 83 (4S Suppl 1), S59-S64 (2019).
  6. Xu, Y., Liu, Q., Li, W., Hu, Z., Shi, C. Recent advances in the mechanisms, current treatment status, and application of multifunctional biomaterials for radiation-induced skin injury. Theranostics. 15 (7), 2700-2719 (2025).
  7. Deng, G. M., He, W. S., Liu, W. Y., Wu, F. S., Chen, J. B. Evolution of radiation-induced dermatitis treatment. Clin Transl Oncol. 26 (9), 2142-2155 (2024).
  8. Bian, X. W., et al. Epigenetic memory of radiotherapy in dermal fibroblasts impairs wound repair capacity in cancer survivors. Nat Commun. 15 (1), 9286(2024).
  9. Singh, V. K., Seed, T. M. The efficacy and safety of amifostine for the acute radiation syndrome. Expert Opin Drug Saf. 18 (11), 1077-1090 (2019).
  10. Wang, Z., Chen, R., Chen, J., Su, L. 18β-glycyrrhetinic acid alleviates radiation-induced skin injury by activating the Nrf2/HO-1 signaling pathway. Biol Chem. 405 (6), 407-415 (2024).
  11. Wang, Z. W., et al. Aloe polysaccharides mediated radioprotective effect through the inhibition of apoptosis. J Radiat Res. 45 (3), 447-454 (2004).
  12. Kongkham, B., Duraivadivel, P., Hariprasad, P. Acorus calamus L. rhizome extract and its bioactive fraction exhibits antibacterial effect by modulating membrane permeability and fatty acid composition. J Ethnopharmacol. 331, 118323(2024).
  13. Abdeahad, H., et al. Therapeutic potency of curcumin on radiodermatitis: A systematic review. Avicenna J Phytomed. 14 (3), 297-304 (2024).
  14. Kim, H., Han, T. H., Lee, S. G. Anti-inflammatory activity of a water extract of Acorus calamus L. leaves on keratinocyte HaCaT cells. J Ethnopharmacol. 122 (1), 149-156 (2009).
  15. Zhao, Y., et al. botanic, phytochemistry and pharmacology of the Acorus L. genus: A review. Molecules. 28 (20), 7117(2023).
  16. Kuan, C., et al. Rice bran extract alleviates inflammation and promotes wound healing in radiation dermatitis. Exp Dermatol. 34 (9), e70162(2025).
  17. Salgueiro, M. J., et al. Biological effects of brachytherapy using a (32)P-patch on the skin of Sencar mice. Appl Radiat Isot. 67 (32), 1769-1774 (2009).
  18. Jain, N., Jain, R., Jain, A., Jain, D. K., Chandel, H. S. Evaluation of wound-healing activity of Acorus calamus Linn. Nat Prod Res. 24 (6), 534-541 (2010).
  19. Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People's Republic of China, 2020 Edition. , China Medical Science Press. Beijing. (2020).
  20. Chen, Y., et al. Senescent fibroblast facilitates re-epithelization and collagen deposition in radiation-induced skin injury through IL-33-mediated macrophage polarization. J Transl Med. 22 (1), 176(2024).
  21. Milam, E. C., Rangel, L. K., Pomeranz, M. K. Dermatologic sequelae of breast cancer: From disease, surgery, and radiation. Int J Dermatol. 60 (4), 394-406 (2021).
  22. Haran, P., Shanmugam, R., Deenadayalan, P. Free radical scavenging, anti-inflammatory and antibacterial activity of Acorus calamus leaves extract against Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. Cureus. 16 (3), e55987(2024).
  23. Sytykiewicz, H., Łukasik, I., Goławska, S. Chemical composition, anti-tyrosinase and antioxidant potential of essential oils from Acorus calamus (L.) and Juniperus communis (L.). Molecules. 30 (11), 2417(2025).
  24. Liu, Y., et al. Proteomics and transcriptomics explore the effect of mixture of herbal extract on diabetic wound healing process. Phytomedicine. 116, 154892(2023).
  25. Zhou, L., Zhu, J., Liu, Y., Zhou, P. K., Gu, Y. Mechanisms of radiation-induced tissue damage and response. MedComm. 5 (10), e725(2020).
  26. Elgellaie, A., Thomas, S. J., Kaelle, J., Bartschi, J., Larkin, T. Pro-inflammatory cytokines IL-1α, IL-6 and TNF-α in major depressive disorder: Sex-specific associations with psychological symptoms. Eur J Neurosci. 57 (11), 1913-1928 (2023).
  27. García-García, M. L., et al. Fluoxetine modulates the pro-inflammatory process of IL-6, IL-1β and TNF-α levels in individuals with depression: A systematic review and meta-analysis. Psychiatry Res. 307, 114317(2022).
  28. Yan, T., et al. Single-cell RNA-seq analysis of molecular changes during radiation-induced skin injury: The involvement of Nur77. Theranostics. 14 (15), 5809-5825 (2024).
  29. Tu, W., et al. Integrative multi-omic analysis of radiation-induced skin injury reveals the alteration of fatty acid metabolism in early response of ionizing radiation. J Dermatol Sci. 108 (3), 178-186 (2022).
  30. Mukherjee, S., Dutta, A., Chakraborty, A. The cross-talk between Bax, Bcl2, caspases, and DNA damage in bystander HepG2 cells is regulated by γ-radiation dose and time of conditioned media transfer. Apoptosis. 27 (3-4), 184-205 (2022).
  31. Avadanei-Luca, S., et al. Tissue regeneration of radiation-induced skin damages using protein/polysaccharide-based bioengineered scaffolds and adipose-derived stem cells: A review. Int J Mol Sci. 26 (13), 6469(2025).
  32. Hartono, S. P., et al. Vascular endothelial growth factor as an immediate-early activator of ultraviolet-induced skin injury. Mayo Clin Proc. 97 (1), 154-164 (2022).
  33. Guangmei, D., Weishan, H., Wenya, L., Fasheng, W., Jibing, C. Evolution of radiation-induced dermatitis treatment. Clin Transl Oncol. 26 (9), 2142-2155 (2022).
  34. Gupta, S., et al. Exploring anticancer properties of medicinal plants against breast cancer by downregulating human epidermal growth factor receptor 2. J Agric Food Chem. 72 (17), 9717-9734 (2024).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

مستخلص Acorus Calamusالتئام الجروحالطب الصيني التقليديالسيتوكينات الالتهابيةتثبيط موت الخلايا المبرمجتعزيز تكوين الأوعية الدمويةالتحليل النسيجي المرضيالكيمياء النسيجية المناعية
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.