هنا، نقدم بروتوكولا يستخدم مشبك ربط يمكن التخلص منه لإنشاء نموذج لاستئصال المعدة بغلاف الفأر. يظهر هذا النموذج انخفاض معدل الوفيات بعد العملية، وقصر وقت العملية، ونتائج علاجية مماثلة لتقنيات الخياطة التقليدية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
هنا، نقدم بروتوكولا يستخدم مشبك ربط يمكن التخلص منه لإنشاء نموذج لاستئصال المعدة بغلاف الفأر. يظهر هذا النموذج انخفاض معدل الوفيات بعد العملية، وقصر وقت العملية، ونتائج علاجية مماثلة لتقنيات الخياطة التقليدية.
نماذج الفأر الحالية لاستئصال المعدة بأكمام (SG) تعتمد بشكل كبير على الخياطة اليدوية — وهي إجراء تقني يتطلب وقتا طويلا للجراحة، ومعدل وفيات مرتفع حول العملية، ومنحنى تعلم حاد. وهذا يحد من وصولها للباحثين غير الجراحيين. لمعالجة هذا الاختناق، طورنا بروتوكول SG مبسط باستخدام مشابك رباط قابلة للتصرف، تستخدم عادة في الجراحة السريرية للجهاز الهضمي. في فئران C57BL/6J السمنة الناتجة عن النظام الغذائي، قلل النهج القائم على المقطع متوسط وقت العملية بنسبة >50٪ (20.9 ± 3.2 مقابل 43.9 ± 3.0 دقيقة) وحسن بشكل ملحوظ فترة البقاء خلال 12 أسبوعا مقارنة بالخياطة التقليدية. حققت الطريقة نتائج أيضية متكافئة تشمل فقدان الوزن المستمر، وتحسين تحمل الجلوكوز، وزيادة حساسية الأنسولين، وتقليل تعقيم الكبد. ومن الجدير بالذكر أن النموذج لا يتطلب خبرة متخصصة في الجراحة المجهرية أو أجهزة التدبيس، والتي غالبا ما تكون غير متوفرة لتطبيقات الفئران. نوصي بهذه الطريقة المعتمدة على المقطع للباحثين، خصوصا أولئك الذين ليس لديهم تدريب جراحي متقدم، الذين يعطون الأولوية للكفاءة الإجرائية وقابلية التكرار في الدراسات الميكانيكية لجراحة السمنة. بالنسبة للجراحين الذين يبحثون عن قابلية ترجمة سريرية مباشرة، تظل تقنيات الخياطة مفضلة، وإن كانت مع إدارة أكثر صرامة حول العملية.
تعتبر جراحة السمنة على نطاق واسع التدخل الأكثر فعالية للسمنة الشديدة ومضاعفاتها المرتبطةبها 1. نموذج استئصال المعدة بكم الفأر (SG) هو أداة قيمة لدراسة التغيرات الفسيولوجية المرضية والآليات المحتملة المرتبطة بجراحة السمنة. هذا النموذج مفيد لأنه يسمح باستخدام سلالات الفئران المعدلة وراثيا، مثل تلك التي تحتوي على تعطيل جيني أو زيادة في التعبير. نماذج الفئران التي يسهل تكرارها، وتمكن من التحكم الصارم في ظروف التجريب، وتسهل التلاعب التجريبي، ضرورية للترجمة السريرية2.
يستخدم نموذج SG التقليدي للفئران تقنيات تعتمد على الغرز لصنع كيس معدي أنبوبي. تتضمن هذه المنهجية عدة خطوات جراحية دقيقة وعادة ما تتطلب كفاءة تقنية كبيرة. تشمل التقنيات التمثيلية SG-طبقةواحدة 3,4 وSG-Lembert 5,6، مع متوسط وقت جراحي يتراوح بين 30 إلى 45 دقيقة7. وبالتالي، يتطلب إجراء الجرعة النفسية في مجموعة من عشرة فئران عادة ما 5-7.5 ساعات من وقت العمليات. في الدراسات التي تشمل عدة مجموعات تجريبية، قد تمتد الجلسات الجراحية التراكمية على مدى 2-3 أيام متتالية. يمكن أن تؤدي الجداول الإجرائية الطويلة إلى إدخال قيود لوجستية وتغيرات في ظروف ما قبل العملية، مما يؤثر على الاتساق التجريبي والمراقبة بعد العملية. استكشف الباحثون طرقا بديلة لتطوير نماذج فأر-SG أكثر سهولة في الوصول. تمثل الأساليب المدعومة بالدبابيس (SG-stapler)7,8 والقائمة على المشبك (SG-clip)9,10,11 تحسينات ملحوظة. تسهل هذه الطرق جوانب محددة من تكوين كيس المعدة وتقلل من المتطلبات التقنية المرتبطة بالخياطة اليدوية، مما يدعم التبني الأوسع عبر بيئات البحث ذات مستويات الخبرة الجراحية المتفاوتة. تواجه تقنية دباسة SG محدودية عملية في تطبيقات الفأر بسبب محدودية توفر أجهزة التدبيس بالحجم المناسب، مما أدى إلى استخدامها بشكل أكثر تكرارا في نماذج الفئران. فيما يتعلق بمنهج مشبك SG، كانت الدراسات السابقة تستخدم عادة مشابك إلى اثنين من التيتانيوم مع غرز إضافية 9,10,11. يوفر السطح الداخلي الأملس لمشابك التيتانيوم القياسية توازنا غير مثالي للأنسجة، مما يتطلب تثبيتا إضافيا لضمان موثوقية الإجراءات وسلامة المعدة.
استنادا إلى ميزات نماذج SG-stapler وSG-clip، يقدم هذا البروتوكول نموذج SG للفئران تم تطويره باستخدام مشابك ربط قابلة للتصرف. تستخدم هذه المشابك عادة في استئصال المرارة، واستئصال الزائدة الدودية، وغيرها من جراحات الجهاز الهضمي. في هذه الإجراءات، يتم تثبيت نسيج مثل القناة الكيسية المتبقية، وجذر الزائدة الدودية، والأوعية الدموية بإحكام، مما يلغي الحاجة إلى تعزيز إضافي بالخياطة. تتوفر أحجام تناسب طول بطن الفأر. هذا النموذج الجديد لمشبك SG بسيط وموثوق ويظهر فعالية علاجية مماثلة لنموذج الغرز التقليدي.
ومن الجدير بالذكر أن الدماغ القائم على الغرز يظل مفضلا عندما يهدف البحث إلى تكرار تقنية الجراحة السريرية، أو دراسة التأثيرات البيوميكانيكية أو البيولوجية الخاصة بالخياطة، أو عندما يتطلب دقة تشريحية قصوى. بالنسبة للباحثين ذوي المهارات المتقدمة في الجراحة الدقيقة، تعكس طرق الخياطة اليدوية الإجراءات البشرية، وبالتالي فهي أكثر ملاءمة للدقة الانتقالية. على النقيض من ذلك، يقدم نموذج المشبك المربوط بديلا مبسطا وفعالا وسهل الوصول يحافظ على الدقة التجريبية مع توسيع قابلية تطبيق مشابك الجرور في بيئات بحثية متنوعة - خاصة عندما تكون الخبرة الجراحية محدودة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يلتزم هذا البروتوكول بإرشادات أخلاقيات رعاية الحيوان الدولية وقد تمت الموافقة عليه من قبل لجنة رعاية وأخلاقيات الحيوان التجريبية بجامعة جينان (رقم الموافقة: 20240227-0073).
ملاحظة: تم إيواء ثلاثين فأرا بري من نوع C57BL/6J (عمره ثمانية أسابيع)، يزن 22-25 جرام، في بيئة خالية من مسببات الأمراض (SPF) مع درجة حرارة غرفة تتراوح بين 20-26 درجة مئوية و12/12 ساعة بالتناوب بين النهار والليل. بعد التكيف مع نظام غذائي عالي الدهون لمدة 4 أسابيع، تم توزيع الفئران عشوائيا إلى مجموعات SC (SG مع clip)، SS (SG مع خياطة)، وSH (الوهم) مع 10 فئران في كل مجموعة.
1. التحضير قبل العملية
2. الإجراءات الجراحية
3. الرعاية بعد العملية
4. مؤشرات الكشف
ملاحظة: البقاء على قيد الحياة لمدة 4 أسابيع دون مضاعفات كبيرة بعد العملية في الفئران يعتبر جراحة ناجحة.
5. التحليل الإحصائي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم تعريف معيار نجاح الجراحة بأنه الفئران التي تعيش لأكثر من 4 أسابيع بعد الجراحة دون التعرض لمضاعفات خطيرة. الوفاة التي حدثت بعد الأسبوع الرابع بعد العملية تعزى إلى مضاعفات. خلال 12 أسبوعا متتاليا من المراقبة بعد العملية، تم تسجيل وفاة واحدة في مجموعة SC في اليوم الرابع والعشرين بعد العملية بسبب عدوى في الجرح والبطن ناجمة عن الغرز، بينما نجت الفئران التسعة المتبقية حتى الأسبوع الثاني عشر. في مجموعة SS، مات خمسة فئران إجمالا، وكانت نقاط الوفاة في الأيام الخامسة والسابعة والثانية عشرة بعد ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم إنشاء نموذج للفأر باستخدام مشابك رباط ذات مرة واحدة، مما أدى إلى إجراء جراحي بسيط وفعال وقابل للتكرار. أظهرت التقنية المعتمدة على المقطع فعالية علاجية مماثلة لنموذج SG التقليدي المعتمد على الخياطة، مع تقليل كبير من وقت العملية وتحسين معدلات البقاء بعد العملية.
التقنية الجراحية لنموذج غرز SG للفأر ليست معقدة بطبيعتها، ويمكن للعديد من الجراحين ذوي الخبرة في خياطة الأوعية الدموية إجراء هذه العملية بنجاح. أفادت مراجعة شملت 82 دراسة عن معدل وفيات متوسط بعد العمل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المؤلفون لا يفرضون أي تضارب مصالح.
وقد دعم هذا العمل مؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة قوانغدونغ (2021A1515011261)، ومؤسسة قوانغتشو للبحوث الأساسية والتطبيقية (2024A03J0659)، ومشروع قوانغتشو للعلوم والتكنولوجيا الصحية (20251A011020).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الحل الأنيردي | بروسبيريش | HC-3566 | تعقيم جلد الصدر والبطن |
| 75٪ كحول | ماكلين | E885996-500 مل | نظف طاولة الجراحة |
| آلة تخدير الحيوانات | يويان بايو | يويان-ABS | معدات تخدير الفئران |
| المطبق | هانغتشو كانغجي | Φ 10 مم ومرة؛ 330 مم | أداة تطبيق مشبك رباط ذات مرة واحدة |
| مشبك رباط قابل للتخلص | هانغتشو كانغجي | KJ-JZJ02XL | أنشئ كمة معدية |
| قلم الرصاص الكهربائي الجراحي | يويان بايو | جيميني (تعمل بالبطارية) | التخثر الكهربائي أثناء العملية. |
| تأكد | مختبرات أبوت | H20181147 | النظام الغذائي السائل |
| جهاز قياس الجلوكومتر وشرائط الاختبار | ACCU-CHEK | أرشدني | مراقبة سكر الدم |
| برنامج جراف باد | سان دييغو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية | جراف باد بريزم 9 | إحصائيات البيانات والتحليل |
| وسادة التدفئة | RTtech | RT-jr01 | حافظ على درجة حرارة جسم الفأر دافئة أثناء الجراحة |
| النظام الغذائي عالي الدهون | شركة ريسيرش دييتس، إنك | D12492 | 60 كيلو سائل نسبة دهون |
| إيزوفلوران | الدفع الخلفي | R510-22 | أدوية التخدير |
| ميلوكسيكام | علاء الدين | M129228-25 جرام | أدوية مسكنة بعد العملية |
| أدوات الجراحة المجهرية | بيوتايم | FS500 | إجراء جراحة حيوانية |
| مسحب الفأرة | تشيو بوك | CP-ckq | سحب البطن الجراحي في الفئران |
| الغرز الجراحية | جينهوان الطبي | CR537/KCR631 | الغرز الجراحية |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.