التزمت الأبحاث بالإرشادات الأخلاقية المنصوص عليها في إعلان الجمعية الطبية العالمية لهيلسنكي (مدونة الأخلاقيات) للتجارب البشرية. التصريح الأخلاقي (رقم الموافقة. تم الحصول على نان بو زان تش كو-LL-2020-047) من لجنة الأخلاقيات في المستشفى العام لقيادة المسرح الجنوبي لجيش التحرير الشعبي الصيني، وتم الحصول على موافقة مستنيرة من جميع المرضى المشاركين وعائلاتهم.
هدف البحث
امتدت هذه الدراسة المستقبلية لأربع سنوات وأجريت في قسم المرضى الداخليين وقسم الفحص البدني في المستشفى العام للمسرح الجنوبي تحت إشراف جيش التحرير الشعبي الصيني. ركز على مجموعة من النساء بعد سن اليأس اللواتي تتراوح أعمارهن بين 45 و70 عاما، باستخدام تصميم مقطع عرضي صارم. شملت معايير الاستبعاد الحالات التي قد تؤثر على أيض العظام، بما في ذلك: أ) اضطرابات الجهاز المناعي مثل التهاب الفقار اللاصق، الذئبة الحمراء الجهازية، والتهاب المفاصل الروماتويدي؛ ب) السل العظمي؛ ج) اضطرابات تؤثر على وظيفة الغدة الكظرية، أو قصور الكبد أو الكلى الشديد؛ د) اضطرابات الغدد الصماء بما في ذلك خلل الغدة الجاردة الدرقية، اضطرابات الغدة الدرقية، والسكري؛ ه) العادات التاريخية للتدخين واستهلاك الكحول؛ وو) الاستخدام الحديث (خلال ال 12 شهرا السابقة) للأدوية التي قد تؤثر على أيض العظام، مثل الجلوكوكورتيكويدات، ومستحضرات الكالسيوم، ومكملات فيتامين د، والبيسفوسفونات، ومدرات البول، ومضادات التشنجات، وعوامل الفلورايد.
وفقا لمعايير التشخيص التي وضعتها منظمة الصحة العالمية، شملت الدراسة ما مجموعه 345 مشاركا، مقسمين إلى ثلاث مجموعات مميزة بناء على حالة صحة العظام: مجموعة التحكم (تتميز بمعدل كتلة عظمي طبيعي، درجة t-t ≥-1.0 SD، n = 99)، مجموعة هشاشة العظام (-2.5 SD < t-score <-1.0 SD، n = 153)، ومجموعة هشاشة العظام (درجة t ≤-2.5 SD أو كسر هشاشة متزامنة، n = 93).
العينات السريرية
المرضى الذين تم تشخيصهم بهشاشة العظام في التشخيص السريري للمستشفى العام لقيادة المسرح الجنوبي لجيش التحرير الشعبي الصيني من سبتمبر 2020 إلى يونيو 2025، والذين يجب عليهم استيفاء المعايير التالية: مرضى التهاب العظام وهشاشة العظام وفقا لمعايير التشخيص التابعة لمنظمة الصحة العالمية؛ طبيعيا في سن اليأس، وطبيعيا في سن اليأس لمدة ≥1 سنة، ومرضى يعانون من أمراض ما بعد انقطاع الطمث؛ العمر 45 سنة ≤ العمر < 70؛ المشاركة الطوعية في التحقيق. يمكن تضمين من يستوفي جميع الشروط السابقة ضمن الحالات التجريبية. مجموعة كتلة العظم الطبيعية: في سن اليأس الطبيعية، ومرحلة انقطاع الطمث الطبيعية لمدة ≥سنة واحدة، وأولئك الذين لديهم مؤشرات فحص جسدي طبيعية (بما في ذلك كثافة العظام والاختبارات الدموية).
بالنسبة للمرضى السريريين الذين يستوفون المعايير السابقة، يجب استبعاد المرضى الذين يعانون من أمراض أخرى أخرى. معايير الاستبعاد هي كما يلي: خلل في وظيفة الغدة الجار درقية، أمراض الغدة الدرقية، السكري، أمراض الغدة الكظرية، وخلل شديد في وظائف الكبد والكلى، تاريخ الأورام الخبيثة، أمراض الجهاز المناعي مثل التهاب الفقار اللاصق، الذئبة الحممرة الجهازية، والتهاب المفاصل الروماتويدي، متلازمة فشل المبيض المبكر واستئصال المبيض، سل العمود الفقري، سل المفاصل، التهاب المفاصل القحلية، تحلل العظام، وغيرها. يمكن أيضا استبعاد المرضى الذين تناولوا أدوية تؤثر على أيض العظام (خلال الاثني عشر شهرا الماضية)، مثل الجلوكوكورتيكويدات، أدوية الكالسيوم، فيتامين د، مستحضرات البيسفوسفونات، مدرات البول، مضادات التشنجات، الفلورايد، وغيرها. وجود أي من هذه الحالات يمكن أن يؤدي إلى الاستبعاد.
جمع البيانات
تم توثيق التركيبة السكانية للمشاركين، بما في ذلك العمر، والسنوات منذ انقطاع الطمث، والطول، والوزن. تم حساب مؤشر كتلة الجسم (BMI) باستخدام الصيغة
مؤشر كتلة الجسم = الوزن (كجم) / الطول(م2).
جمع عينات المصل
بعد صيام ليلي، تم الحصول على عينات دم من جميع المشاركين. لاحقا، تم فصل المصل فورا عن طريق الطرد المركزي عند حوالي 850 × جرام لمدة 5 دقائق، ثم تم تجفيفه وتخزينه عند -80 درجة مئوية للتحليل اللاحق.
حساب حجم العينة
تم إجراء تحليل مسبق للقدرة باستخدام G*Power. استنادا إلى بيانات أولية تظهر متوسط مستويات IGF-1 في المصل بمقدار 89.46 ± 18.89، 72.52 ± 16.32، و60.23 ± 15.63 نانوغرام/مل للمجموعات الطبيعية من كتلة العظم، وضعف العظم، وهشاشة العظام، على التوالي، كان حجم التأثير المحسوب (كوهين f) 0.86. مع α = 0.05 والقدرة = 0.80 لتحليل التحليل المبكر أحادي الاتجاه، كان الحد الأدنى من 9 مشاركين لكل مجموعة (27 إجمالا) مطلوبا. لضمان متانة التصميم المقطعي لدينا - مع الأخذ في الاعتبار التعديل متعدد المتغيرات وتحليلات المجموعات الفرعية والمشكلات المحتملة في البيانات - استهدفنا عينة أكبر. شملت المجموعة النهائية 345 امرأة بعد انقطاع الطمث (99 بكتلة عظمية طبيعية، 153 مصابة بالتهاب العظام، 93 مع هشاشة العظام)، متجاوزة بكثير المتطلبات المحسوبة.
تقييم البيانات السريرية
قياس كثافة المعادن العظمية
تم تقييم كثافة المعادن العظمية (BMD) باستخدام مسح DEXA في العمود الفقري القطني (L 1-4)، والرقبة اليسرى الفخذية، والطرف العلوي من الرقبة الفخذية. أجريت فحوصات للرقبة والجزء العلوي من الفخذ مع ثني الركبتين، بينما تم الحفاظ على وضعية الاستلقاء أثناء فحوصات العمود الفقري القطني (L 1-4). أجرى محترفون مدربون من قسم الطب النووي في المستشفى العام لقيادة المسرح الجنوبي لجيش التحرير الصيني جميع الاختبارات. قبل كل قياس، كان يتم إجراء فحص لمراقبة الجودة للطرف الصناعي، لضمان تحقيق معايير صارمة قبل المضي قدما في فحوصات المشاركين. تم تسجيل معامل التباين عند 0.40٪. تم التعبير عن قيم BMD بوحدة g/cm².
قياس مؤشر المصل
أجريت قياسات مؤشرات المصل في قسم المختبر بالمستشفى العام لقيادة المسرح الجنوبي لجيش التحرير الشعبي الصيني. تضمنت لجنة المؤشرات المقيمة بشكل رئيسي GH، IGF-1، 25-هيدروكسي فيتامين د [25(OH)D]، منتجات تحلل الكولاجين β (β-CTX)، بروببتيد الكولاجين من النوع الأول الأميني النهائي (PI.NP)، هرمون الغدة الجار درقية (PTH)، أوستيوكالسين N-terminal (BGP)، الكالسيوم (Ca)، والإستراديول (E2). تجرى العمليات وفقا لتعليمات المجموعة، وتستخدم العملية معدات آلية من قسم المختبر (GE). تم ضمان تسجيل نتائج الاختبار في الوقت المناسب بعد تحليلها.
كانت المنهجيات التجريبية المستخدمة للمؤشرات المعنية كما يلي: تم قياس كمية GH من خلال اختبار المناعة الكيميائي الكهروكيميائي للومينول؛ تم تحديد مستويات IGF-1 باستخدام تقنيات اختبار التشذير المناعي المرتبط بالإنزيمات وتقنيات التلوين الكيميائي. تم قياس مستوياتE2 باستخدام مجموعة اختبار مناعي تجارية. تم إجراء قياسات الكالسيوم في المصل باستخدام طريقة قياس الألوان على محلل كيمياء حيوية آلي. تم قياس تحليل 25(OH)D، β-CTX، PI.NP، PTH، وBGP باستخدام اختبار المناعة الكهروكيميائي (ECLIA) مع مجموعات التحليل التجارية.
الأدوات والكواشف
تم سرد الأدوات التجارية الرئيسية، ومجموعات الاختبار، والكواشف المستخدمة في هذه الدراسة بشكل شامل في جدول المواد.
التحليل الإحصائي
استخدم تحليل البيانات حزمة البرمجيات الإحصائية SPSS 20.0 وGraphPad Prism7. تم تقديم النتائج كمتوسط ± جنوب شرق (SE). تم تطبيق تحليل التباين الأحادي المتغير (ANOVA)، وتحليل الارتباط لبيرسون، وتحليل الارتباط الجزئي، وتحليل ROC بشكل مناسب. تم اعتماد مستوى دلالة P < 0.05.