Method Article

التقييم الوظيفي لحاجز ظهارية لثوية الفأر باستخدام أجهزة تتبع فلورية

DOI:

10.3791/70085

⸱

February 27th, 2026

 ,  ,  , 
1Department of Physiology and Pathophysiology, Peking University School of Basic Medical Sciences, State Key Laboratory of Vascular Homeostasis and Remodeling, 2State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Peking University

* These authors contributed equally

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هدف هذا البروتوكول هو توفير نهج موحد لتقييم كمي سلامة حاجز ظهارة اللثة في الفأر من خلال تطبيق موضعي لديكستران موسوم بالفلورة بأحجام جزيئية مختلفة على سطح اللثة في الجسم الحي، يليه التصوير خارج الجسم الحي باستخدام نظام مجهر فوتوني أحادي.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعمل حاجز الظهارة اللثية كدفاع أمامي حاسم في المناعة الفموية والتوازن الداخلي. الحاجز الظهاري السليم يمنع فعليا اختراق المواد الضارة من بيئة الفم، بينما يرتبط اضطرابه ارتباطا وثيقا بأمراض حالات مثل التهاب دواعم السن والطحالب الفموية. هنا، أنشأنا طريقة تطبيقية موضعية لتقييم سلامة الحاجز الظهاري اللثوي في الفئران. أولا، تم تطبيق خليط من الديكسترونات الموسومة بالفلورية بأوزان جزيئية مختلفة (40 أو 70 كيلو دالتون) في كربوكسي ميثيل سيلولوز الصوديوم بنسبة 2٪ على سطح اللثة الشفرية في المنطقة الضارية. بعد فترة حضانة مدتها 30 دقيقة، تم تشريح الفك العلوي وتثبيته في حامل مخصص للتصوير الفوري باستخدام نظام مجهر فوتوني واحد. يتيح هذا النهج تصور وقياس الآثار بأحجام مختلفة عبر طبقات الظهارة، مما يوفر قراءة وظيفية لسلامة حاجز الظهارة اللثية قابلة للتطبيق على دراسات التهاب الفم، شفاء الجروح، ونمذجة الأمراض.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يشكل الحاجز الطلائي اللثوي واجهة دفاعية حاسمة في تجويف الفم، حيث يحافظ على سلامة الأنسجة من خلال تنظيم نقل المواد بشكل انتقائي مع منع الغزو الميكروبي1. يتكون هذا الهيكل الديناميكي من ظهارة حرشفية طبقية مترابطة بمجمعات وصلات ضيقة، ويتحكم بدقة في نفاذية الخلايا المحيطة للحدود لتقييد الاختراق غير الانتقائي للكائنات الدقيقة والجزيئات الكبيرة والمذابات2. يمكن أن تؤثر عوامل متعددة على سلامة الحاجز اللثي. تستضيف تجويف الفم ثاني أكثر المجتمعات الميكروبية تنوعا في جسم الإنسان، حيث تستعمر أكثر من 700 نوع من البكتيريا أسطح الأسنان والشقوق اللثوية والمخاط الفموي 3,4. الخلايا الظهارية التي تبطن أنسجة اللثة معرضة باستمرار لهذه البيئة الميكروبية الكثيفة5.

لقد ثبت أن عوامل الضراوة التي تفرزها مسببات أمراض اللثة (مثل Porphyromonas gingivalis)، بما في ذلك الدهون الدهنية، تعطل وظيفة الحاجز الظهاري، مما يؤدي إلى استجابات التهابية في أنسجة اللثة ودفع التقدم المرضي 6,7. الوسطاء الالتهابيون والضغوط الميكانيكية تزيد من تفاقم خلل الحاجز، مما يزيد من قابلية الإصابة بأمراض الفم8. قد تساعد البروبيوتيك الفموي في الوقاية من أمراض اللثة من خلال تعزيز استقرار الحاجز الظهاري اللثوي. ومع ذلك، تبقى التفاعلات البيولوجية بين الكائنات الدقيقة وخلايا الظهارة اللثية في تعديل وظيفة الحاجز غير واضحة إلى حدكبير. لذا، فإن تطوير طرق موثوقة لتقييم وظيفة الحاجز الظهاري أمر بالغ الأهمية.

المجهر المسح بالليزر بفوتون واحد، المعروف بدقته العالية ونظام الكشف الراسخ، أثبت قيمته الخاصة في فحص عينات الأنسجة خارج الجسم الحي 10. تحسن منهجيات التصوير المتقدمة بشكل كبير تقييم خصائص الحواجز اللثية. الطبيعة السطحية للأنسجة اللثية، حيث تقع خلايا الظهارة على بعد حوالي 100 ميكرومتر من السطح، تجعلها مناسبة تماما لمثل هذه الطرق التصويرية. أنشأت أبحاثنا تقنية تقييم خارج الجسم باستخدام دكسترونات موسومة بالفلورية بأوزان جزيئية مختلفة كمتتبعات نفاذية ما بعد الخلية. بالاقتران مع المجهر الليزر الفوتوني الواحد، تتيح هذه الطريقة قياس دقيق لوظيفة حاجز الظهارة اللثية، مما يوفر رؤى حول آليات أمراض اللثة والتدخلات العلاجية المحتملة.

البروتوكول الذي تم وضعه في هذه الدراسة، والذي يجمع بين توصيل التتبع الموضعي القائم على الجل مع التصوير ثلاثي الأبعاد خارج الجسم الحي، تم تحسينه خصيصا لمعالجة التحديات الفريدة لتقييم حاجز الظهارة اللثية. أولا، طرق حقن التتبع الوريدي الحالية (الجدول 1) غير قادرة على تقييم نفاذية المواقع الظهارية الدقيقة المحلية بدقة للعوامل الخارجية11. ثانيا، تتطلب الطرق النسيجة التقليدية إزالة الكالسية والتقسيم، مما يعطل بنية الأنسجة ويتطلب جهدا كبيرا ويستغرق وقتاطويلا 12,13,14. على النقيض من ذلك، يستخدم بروتوكولنا جل عالي اللصق لتحقيق احتفاظ فعال بأجهزة التتبع على السطح المحلي المعقد. علاوة على ذلك، من خلال صورة ثلاثية الأبعاد، يضمن ذلك قياسا دقيقا وغير مدمر لعمق وتوزيع اختراق التتبع داخل الظهارة اللثية، مما يحافظ بالكامل على البنية المكانية للنسيج. وبالتالي، فإن هذه الطريقة مناسبة بشكل خاص لتقييم عالي الدقة في مكانية وزمان لوظيفة حاجز الظهارة اللثية داخل البيئة الفموية المعقدة والمحصورة.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية من قبل لجنة أخلاقيات أبحاث الحيوان، مركز علوم الصحة بجامعة بكين، وامتثلت لدليل العناية واستخدام الحيوانات المخبرية (منشور NIH رقم 85-23، معدل 1996). خلال العملية، تم التعامل مع الحيوانات التجريبية بعناية لتقليل ألمها وعدم ارتياحها.

تفاصيل كل خطوة عمل لتقييم نفاذية الجسم في الجسم الحي في ظهارة اللثة للفئران موصوفة أدناه (الشكل 1A). هنا، قدمنا مثالا على اكتشاف وظيفة حاجز الظهارة في كل من نماذج التهاب دواعم السن الناتجة عن الربط ونماذج التهاب دواعم السن للفئران التي تسببها Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis). تلقى جميع الأفراد تدريبا شاملا في رعاية الحيوانات المختبرية وتقنيات التعقيم الطبيعية.

1. التعامل مع الحيوانات

  1. طوال الدراسة، كانت الحيوانات المنزلية تحت ظروف خالية من مسببات الأمراض المحددة (SPF) مع دورة ضوء/ظلام مدتها 12 ساعة وتوفر الطعام والماء بحرية الاختيار.
  2. تحضير وإعطاء المخدرات والمواد المتحركة
    1. حافظ على ظروف معقمة طوال فترة البروتوكول واستخدم أدوات نظيفة بنسبة 75٪ إيثانول.
    2. استخدم الفئران الذكور من النوع البري (WT) C57BL/6J في الفئة العمرية الناضجة من 8 إلى 10 أسابيع للتجربة. قسم الفئران إلى ثلاث مجموعات: مجموعة ضابطة (غير معالجة) ومجموعتين تجريبيتين (نماذج التهاب دواعم الوثث الناتجة عن الربط والتهاب دواعم الفئران الناتج عن الربط وP. gingivalis).
      ملاحظة: في المجموعة، يجب اختيار فئران ذات وزن جسم وعمر أسبوع مماثل لتقليل تأثير العمر والوزن على نفاذية الظهارة اللثية. نماذج التهاب دواعم السن الناتجة عن الربط ونتيجة P. gingivalis تمثل نماذج الفئران الشائعة الاستخدام لالتهاب دواعم السن. للحصول على بروتوكولات النمذجة التفصيلية، يرجى الرجوع إلى الأدبيات حول نماذج التهاب دواعم الفئران15 و16 فأر الناجم عن الربط و16 فأر ناتجة عن الربط النباتي.
    3. اختر متتبعات فلورية ذات أطياف غير متداخلة، مثل الديكستران الموسوم ب FITC (40 كيلو دالتون؛ FD40) ورودامين الموسوم ب B dextran (70 كيلو دالتون؛ RD70)، لضمان اكتشاف إشارة مميز باستخدام مرشحات FITC والرودامين المقابلة.
    4. خفف الترامترات. لاتباع هذا البروتوكول، اخلط FD40 (1 جم/لتر) وRD70 (1 جم/لتر) في جل كربوكسي ميثيل سليولوز بنسبة 2٪ وخزنها عند 4 درجات مئوية.
    5. حقن 1.25٪ من تريبروموإيثانول داخل الصفاق (200 ملغ/كجم وزن الجسم، 15-17 ميكرولتر/جم وزن الجسم) لتخدير الفئران.
      ملاحظة: محاليل التريبروموإيثانول حساسة للضوء. الكحول التير-أميل هو مذيب عضوي قابل للاشتعال، متطاير، ومهيج. يجب تنفيذ جميع الإجراءات التي تشمل التحضير والتعامل مع والإدارة في غطاء بخار كيميائي أو في منطقة شديدة التهوية، بعيدا تماما عن أي مصادر إشعال. يجب على الموظفين ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة، بما في ذلك القفازات، ونظارات الرش الكيميائية، ومعطف المختبر. التخلص من النفايات: يجب جمع وتخلص من محلول تريبروموإيثانول النفايات، وكحول تيرت-أميل، وجميع المواد الملوثة (مثل الحقن، رؤوس الماصات، القفازات) والتخلص منها كنفايات كيميائية خطرة وفقا صارمة للوائح وبروتوكولات الصحة والسلامة البيئية (EHS) الخاصة بمؤسستك للمواد الكيميائية القابلة للاشتعال والسامة.
  3. أثناء التخدير، حافظ على درجة حرارة الجسم الأساسية عند 37 ± 0.5 درجة مئوية باستخدام وسادة تسخين يتم التحكم بها بالتغذية الراجعة. ضع مرهم العين الإريثروميسين لمنع جفاف القرنية.
    ملاحظة: قدم الرعاية المناسبة لجميع الحيوانات طوال فترة الدراسة.
  4. بعد الإجراءات الجراحية، تأكد من أن الحيوانات موضوعة بمفردها على فراش طري في قفص دافئ وهادئ للتعافي حتى تصبح قادرة على المشي بالكامل. راقب الحيوانات مرتين يوميا لمدة 48 ساعة وأعدها إلى قفص المنزل فقط بعد التعافي التام، حسب الوضعية الطبيعية، والنشاط، وسلوك التغذية.
  5. حافظ على تجويف الفم مفتوحا باستخدام كمامة فم وطبق خليطا من 5 ميكرولتر إلى 50 ميكرولتر من اثنين أو أكثر من متتبعات نفاذية الخلايا بأوزان جزيئية مختلفة موضعيا على سطح اللثة الشفية في المنطقة الضاربية (الشكل 1B). اتركها لمدة 30 دقيقة. إذا ابتلع الحيوان الخليط، أعد تطبيقه.
  6. عزل الفك العلوي
    1. بعد 30 دقيقة من تطبيق متتبعات النفاذية، ثبت الفئران على الكرتون، وضعها على الظهر، وثبط أطرافها بشريط لاصق.
    2. بعد التثبيت، افتح تجويف الفم لعزل الفك العلوي. قم بإزالة الأنسجة المحيطة بلطف وشطف العينة جيدا باستخدام PBS.
    3. ضع الفك العلوي على شريحة زجاجية، مع وضع طين النمذجة على الجانبين لتسهيل تثبيت غطاء فوق العينة.

2. إعداد المجهر بفوتون واحد

  1. ضع فك الفأر المفكك بعناية على حامل العينات المصمم خصيصا، لضمان استقرار وضعه أثناء التصوير.
  2. التقاط الصور باستخدام مجهر فوتون واحد قائم مزود بهدف غمر مائي 25×/NA 1.0، مع التركيز على منطقة الدعم المثبتة تحت الفك العلوي.
    ملاحظة: يجب أن تكون إشارات التألق مرئية فور إزالة جل التتبع.

3. تصوير الفك العلوي

  1. ابدأ التصوير فورا بعد اختيار المنطقة المعنية على السطح الخزقي للضرس الثاني داخل الفك العلوي.
  2. احصل على صور مكدس Z بحجم خطوة 1 ميكرومتر، بدءا من سطح اللثة الفكية إلى عمق 100-200 ميكرومتر، لإعادة البناء ثلاثي الأبعاد (3D).
  3. إجراء تصوير من سلسلة Z لتقييم نفاذية الحاجز الظهاري في الفك العلوي. قم بتكوين معلمات البرمجيات في البرنامج المشار إليه كما يلي:
    1. في قائمة الملفات ، أنشئ مجلدا جديدا وخصص له اسما وصفيا لمجموعة البيانات.
    2. تحت تبويب الاكتساب، اضبط صيغة XY على 512 × 512 بدقة 0.99 ميكرومتر/بكسل.
    3. اضبط عامل التكبير على 1.
    4. اضبط أطوال موجات الإثارة إلى 488 نانومتر (FD40) و561 نانومتر (RD70)، مع نوافذ انبعاث بين 500-550 نانومتر و570-620 نانومتر على التوالي.
      ملاحظة: تم ضبط قيم الكسب على 50 (488 نانومتر) و60 (561 نانومتر) على التوالي.
    5. للتصوير من سلسلة Z وثلاثية الأبعاد، اختر وضع اكتساب ND. اضبط خطوة Z على 1 ميكرومتر (قم بالتعديل حسب الحاجة).
  4. بمجرد تكوين المعلمات، اختر وضع Live لعرض مساحة اللثة في قنوات الفلورة الفردية والمدمجة داخل نافذة التصوير.
  5. انقر على تشغيل الآن لبدء عملية الاستحواذ بعد تكوين المعلمات.

4. قياس النفاذية

  1. قسم شدة الفلورة في FD40 وRD70 إلى قنوات مختلفة. لا حاجة للطرح في الخلفية؛ دمج شرائح محور Z. ثم استخدم برنامج ImageJ لحساب شدة الفلورة لتقييم النفاذية والإشارة إلى دالة الحاجز الظلائي.
    1. انقر على ملف واختر فتح لفتح صورة الفك العلوي الملتقطة تحت مجهر فوتون واحد.
    2. اذهب إلى قائمة الصورة وغير نوع الصورة إلى صيغة 8-بت للتحليل.
      ملاحظة: الصور التي تلتقطها المجاهر الفلورية والأنظمة الكونفوكالية عادة ما تكون بصيغة RGB ولا يمكن استخدامها مباشرة لقياس شدة الفلورة. يجب تقسيمها إلى قنوات فردية أو يجب استيراد الصور أحادية اللون مباشرة.
    3. افتح قائمة التحليل ، اختر تعيين القياسات، وتحقق من المنطقة والمتوسط وIntDen. تأكد بالنقر على موافق.
    4. اختر القناة التي سيتم تحليلها وضبط العتبة: اذهب إلى الصورة | تعديل | عتبة. سيقوم النظام بتطبيق قيمة وخوارزمية افتراضية تلقائيا، وعادة ما يستخدم اللون الأحمر للإشارة إلى المناطق المختارة.
      ملاحظة: بما أن الصور الفلورية عادة ما تحتوي على خلفيات سوداء، اختر أيضا خيار الخلفية الداكنة .
    5. حدد معايير القياس: اذهب إلى التحليل واختر تعيين القياسات. في مربع الحوار، اختر متوسط القيمة الرمادية وتحديد الحد إلى العتبة. وأخيرا، اضغط موافق.
      ملاحظة: ينصح بالتحقق من تسمية العرض حتى يظهر اسم الصورة في جدول النتائج، مما يسهل تحديد المجموعة التجريبية.
    6. قم بالقياس: اختر أداة الاختيار الحر. استخدم المؤشر لتتبع مخطط منطقة الإشارة الفلورية يدويا ودقة على جانب الأنسجة اللثية. انقر على التحليل | قياس. سيظهر جدول النتائج، حيث يمثل IntDen شدة الفلورة.
  2. انسخ النتائج إلى جدول بيانات للحسابات واستيرادها للرسم البياني.
  3. حساب شدة التألق النسبية: أولا، احسب متوسط شدة التألق لمجموعة التحكم. ثم نقسم قيمة شدة الفلورة لكل مجموعة تجريبية على متوسط مجموعة التحكم للحصول على شدة التألق النسبية.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وفقا للبروتوكول الموحد، تم تركيب فك الفأر الذي يحتوي على أنسجة اللثة على حامل مصمم خصيصا (الشكل 1C). أظهر الفحص المجهري إشارات فلورية خضراء (FD40) وحمراء (FD70) في اللثة، مما أظهر نفاذا للمتتبعات عبر الحاجز الظهاري. بعد تحديد المنطقة المهتمة تحت العدسة العينية، تم التقاط الصور باستخدام البرنامج. في المجموعة الضابطة، كان كل من المتتبعين الفلوريين محصورين إلى حد كبير في سطح اللثة. تسربت كميات صغيرة من FD40 وRD70 عبر الظهارة اللثية، مما يوضح بوضوح الخصائص الميك...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تعمل ظهارة اللثة كحاجز فيزيائي أساسي ضد الغزو البكتيري، بينما تظهر الكائنات الدقيقة الفموية قدرة تنظيمية مزدوجة إما من خلال تعطيل سلامة الحاجز بعوامل الضراوة أو تعزيز صيانته. تحدد هذه التفاعلات البيولوجية في النهاية توازن الأنسجة أو تقدم المرض17,18. وبناء على هذا الأساس، طورنا نهجا منهجيا مبتكرا لمزيد من التحقيق في هذه الآليات. تجمع هذه التقنية بين تطبيق المتتبع الموضعي والتصوير المجهري بفوتون واحد لإنشاء نظام تجريبي قادر على تقي...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لا يوجد تضارب مصالح لدى المؤلفين.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد دعمت هذه الدراسة المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (منح 32030010، 31972908، 81991500، 81991502).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
40 kDa FITC-labeled dextranSigma Aldrich78331
70 kDa rhodamine B-labeled dextranSigma AldrichR9379
Blunt tissue separation nickelBejinghuabo CompanyNZW28
carboxymethylcelluloseMREDAM049898
Disposable sterile syringeZhiyu Company1 mL
ImageJ softwareNational Institutes of Health
MicrotubesAxygenMCT-150-C1.5 mL
NIS-Elements AR Image SoftwareNikon
Phosphate buffered saline 1xServicebioG4207-500
Single photon microscope Nikon A1 MP+Nikon
Tissue scissorsBejinghuabo CompanyM286-05

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhang, C., et al. Study on the protection of gingival epithelial barrier by interleukin-22 through regulating microbiota and E-cadherin expression. Zhonghua Kou Qiang Yi Xue Za Zhi. 59 (7), 653-662 (2024).
  2. Presland, R. B., Jurevic, R. J. Making sense of the epithelial barrier: what molecular biology and genetics tell us about the functions of oral mucosal and epidermal tissues. J Dent Educ. 66 (4), 564-574 (2002).
  3. Costello, E. K., et al. Bacterial community variation in human body habitats across space and time. Science. 326 (5960), 1694-1697 (2009).
  4. Aas, J. A., Paster, B. J., Stokes, L. N., Olsen, I., Dewhirst, F. E. Defining the normal bacterial flora of the oral cavity. J Clin Microbiol. 43 (11), 5721-5732 (2005).
  5. Meyle, J., Chapple, I. Molecular aspects of the pathogenesis of periodontitis. Periodontol 2000. 69 (1), 7-17 (2015).
  6. Oriuchi, M., et al. Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide damages mucosal barrier to promote gastritis-associated carcinogenesis. Dig Dis Sci. 69 (1), 95-111 (2024).
  7. Takeuchi, H., Nakamura, E., Yamaga, S., Amano, A. Porphyromonas gingivalis infection induces lipopolysaccharide and peptidoglycan penetration through gingival epithelium. Front Oral Health. 3, 845002(2022).
  8. Abe, T., Hajishengallis, G. Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice. J Immunol Methods. 394 (1-2), 49-54 (2013).
  9. Chatterjee, A., Bhattacharya, H., Kandwal, A. Probiotics in periodontal health and disease. J Indian Soc Periodontol. 15 (1), 23-28 (2011).
  10. Shin, D., et al. Photon-efficient imaging with a single-photon camera. Nat Commun. 7, 12046(2016).
  11. Yang, X., et al. Targeting endothelial tight junctions to predict and protect thoracic aortic aneurysm and dissection. Eur Heart J. 44 (14), 1248-1261 (2023).
  12. Cai, Y., et al. Foxf1 maintains endothelial barrier function and prevents edema after lung injury. Sci Signal. 9 (424), ra40(2016).
  13. Hou, A., Mohamed Ali, S., Png, E., Hunziker, W., Tong, L. Transglutaminase-2 is critical for corneal epithelial barrier function via positive regulation of claudin-1. Ocul Surf. 28, 155-164 (2023).
  14. Kitsuki, T., et al. Enhanced junctional epithelial permeability in trpv4-deficient mice. J Periodontal Res. 55 (1), 51-60 (2020).
  15. Chen, W., et al. Porphyromonas gingivalis impairs oral epithelial barrier through targeting grhl2. J Dent Res. 98 (10), 1150-1158 (2019).
  16. Lemaitre, M., et al. Periodontal tissue regeneration using syngeneic adipose-derived stromal cells in a mouse model. Stem Cells Transl Med. 6 (2), 656-665 (2017).
  17. Takahashi, N., et al. Gingival epithelial barrier: regulation by beneficial and harmful microbes. Tissue Barriers. 7 (3), e1651158(2019).
  18. Ye, P., Chapple, C. C., Kumar, R. K., Hunter, N. Expression patterns of E-cadherin, involucrin, and connexin gap junction proteins in the lining epithelia of inflamed gingiva. J Pathol. 192 (1), 58-66 (2000).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Gingival Epithelial BarrierFluorescent TracersOral ImmunityBarrier IntegrityMouse GingivaSingle Photon MicroscopyDextran TracersOral InflammationWound HealingDisease Modeling

Related Articles