يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

القيمة التشخيصية ل LINC00426 في مرض السكري من النوع الثاني ومرض الكلى السكري وتأثيراته التنظيمية على خلايا الكلى

69 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/70109

⸱

يونيو 26, 2026

 ,  ,  ,  , 
1Department of Nephrology, Tianyou Hospital, Wuhan University of Science and Technology, 2Department of Endocrinology, Changsha Central Hospital, 3Nephrology Department, Shanghai Putuo District People's Hospital, 4Cardiology Department, The Third Xiangya Hospital of Central South University, 5Health Clinic, General Office of Nanning Municipal People's Government

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

يؤدي تقليل تنظيم LINC00426 إلى تطور مرض الكلى السكري (DKD) عن طريق تحفيز الاستماتة المبرمجة في خلايا الكلى وزيادة الالتهاب.

الملخص

تبحث الدراسة في القيمة التشخيصية لل LINC00426 في داء السكري من النوع الثاني (T2DM) ومرض الكلى السكري (DKD)، إلى جانب تأثيراته التنظيمية على الخلايا الكلوية. شملت الدراسة 280 مريضا من النوع الثاني من النوع الثاني (146 حالة من DKD)، و186 ضابطا صحيا زاروا خلال نفس الفترة. أكد تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي بالنسخ العكسي (RT-qPCR) أن LINC00426 المصل يخفف في التنظيم لدى مرضى T2DM وDKD. تحليل خصائص تشغيل المستقبل (ROC) قيم القيمة التشخيصية LINC00426 ل T2DM وDKD. حدد الانحدار اللوجستي متعدد المتغيرات عوامل خطر مستقلة ل DKD. أظهر LINC00426 قيمة تشخيصية لكلا المرضين ومرتبطا سلبا بنسبة الألبومين إلى الكرياتينين في البول (UACR). تنبأ تخفيض تنظيمه بشكل مستقل بتطور DKD. البيئة عالية الجلوكوز (HG) تثبط التعبير LINC00426 في خلايا HK-2 وHGMC. أكدت اختبارات CCK8، وقياس تدفق السيلية، وفحوصات التوربنت المناعي المرتبطة بالإنزيمات أن HG يثبط أيضا التكاثر مع تعزيز الاستماتة والالتهاب. في المقابل، فإن التعبير المفرط عن LINC00426 يعزز القدرة على التكاثر لخلايا HK-2 وHGMC، ويثبط الاستماتة المبرمجة، ويقلل من الاستجابات الالتهابية. قد يؤدي تقليل تنظيم LINC00426 إلى تفاقم تقدم DKD من خلال تثبيط تكاثر الخلايا الكلوية (HK-2 وHGMC) وتعزيز الاستجابة المبرمجة والالتهابية.

المقدمة

داء السكري من النوع الثاني (T2DM) هو اضطراب أيضي مزمن1. تشير التقارير إلى أن مرض السكري من النوع الثاني ومضاعفاتهأصبح مصدر قلق عالمي كبير للصحة العامة، مما يشكل تهديدا لصحة الإنسان والتنمية المجتمعية. بسبب عادات نمط الحياة غير الصحية التي اكتسبهامع مرور الوقت، تزداد انتشار السكري من النوع الثاني سنويا. تم تغيير اسم اعتلال الكلى السكري (DN) إلى مرض الكلى السكري (DKD) في عام 2007 6,7. كأحد المضاعفات الشائعة لمرض السكري من النوعالثاني 8، تستمر معدلات الإصابة والوفيات بين مرضى السكري في الارتفاع سنويا. غالبا ما يبقى DKD كامنا لدى مرضى السكري10 المزمنين أو يظهر فجأة11. يمكن أن يسبب DKD خلل في وظائف الكلى وتلف البطانة12،13. يظهر DKD بشكل أساسي في فقدان الجزيئات البولية الكبيرة مثل البروتينات بعد تلف نظام ترشيح الكلى. ومع ذلك، بالنسبة للمرضى، تعد مؤشرات الدم الكيميائية الحيوية (الجلوكوز الصائم، والإنسولين) المعيار الذهبي لتشخيص السكري من النوع الثاني، ومع ذلك لا يزال من الصعب اكتشاف DKD. تفشل طرق العلاج التقليدية في تحديد أو تقييم تقدمDKD بسرعة 15. لذلك، فإن رفع الوعي بالمرض وتحديد مؤشرات تشخيصية جديدة أمر بالغ الأهمية للوقاية والعلاج من كل من السكري النوع الثاني ومرض الكوارث الدينغي.

في السنوات الأخيرة، أصبح تدخل الحمض النووي الريبي غير المشفر طويل الأمد (lncRNA) في وظائف متنوعة مثل المناعة16، وتنظيم السرطان، والتمثيلالغذائي معترفا به بشكل متزايد. الأدلة المتراكمة الآن تتورط في التعبير غير المنظم للرنا الريبي المختلط في التسبب في أمراض مزمنة معقدة، لا سيما DKD18,19. على سبيل المثال، حدد تشانغ وآخرون من خلال تسلسل عالي الإنتاجية أن lncRNA evf-2 يتفاعل مع hnRNP، مما يعزز تطور DKD من خلال تعزيز التعبير عن جينات وعوامل التهابية مرتبطة بدورة الخلية. في نموذج جرذان DKD، تم تحديد أن USR0000B2476D ال nncRNA يشارك في تنظيم المناعة21. LINC00426 هو رنا lncRNA مكتشف حديثا يلعب دورا مهما في تنظيم العوامل الالتهابية22. تشير الدراسات المقارنة الحديثة على المصفوفة الدقيقة إلى أن LINC00426 قد يحمل إمكانات كمؤشر حيوي لتطور T2DM2. علاوة على ذلك، التقطت استراتيجيات المعلوماتية الحيوية دور LINC00426 في تنظيم المناعة داخل سرطان الخلايا الكلوية. كما أبرزت العديد من الدراسات الدور المحوري للالتهاب في مرض السكريو25 ديلون داناري في السكري وDKD. أظهرت الدراسات الحالية أن السكري من النوع الثاني26 والحالات المرتبطة بما قبل السكري27، بما في ذلك متلازمة الأيض28، والسمنة29، ومرض القلب الأيضي30، جميعها مرتبطة بعبء التهابي مرتفع. بالإضافة إلى ذلك، فإن المضاعفات الميكروأوعية الدموية السكرية، مثل اعتلال الأعصاب31، واعتلال الكلى32، واعتلال الشبكية33، بالإضافة إلى المضاعفات الوعائية الكبيرة34، كلها استجابات التهابية مزمنة. لذلك، فإن دراسة العلاقة بين LINC00426 وT2DM وDKD مهمة جدا لاكتشاف علامات تشخيصية جديدة وكشف آليات DKD. ومع ذلك، لا تزال الأدبيات الحالية حول دور LINC00426 في TD2M وDKD محدودة، دون وجود أدلة سريرية توضح نمط تعبيره وقيمته المستقلة للمخاطرة وفعاليته التشخيصية لدى مرضى DKD.

لسد هذه الفجوة البحثية، شملت الدراسة الحالية 466 مشاركا، واكتشفت تعبير LINC00426 في الدم عبر RT-qPCR، وحددت عوامل خطر مستقلة ل DKD باستخدام الانحدار اللوجستي، وقيمت بشكل أكبر الإمكانات التشخيصية LINC00426 ل T2DM وDKD بواسطة تحليل ROC. توضح نتائجنا بشكل مبدئي خصائص التعبير والأهمية السريرية ل LINC00426 في DKD، مما يملأ فجوة المعرفة القائمة ويوفر رؤى جديدة حول مسببات مرض DKD واستكشاف العلامات الحيوية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة الأخلاقيات الطبية في مستشفى شيانغيا الثالث التابع لجامعة سنترال ساوث. أعرب جميع المرضى وعائلاتهم عن دعمهم ووقعوا على نماذج موافقة مستنيرة مكتوبة.

مجموعة عينات
تم حساب حجم العينة باستخدام برنامج G*Power. تم تحديد مستوى الدلالة (α) عند 0.05، والقدرة الإحصائية (1-β) عند 0.8، وحجم التأثير (f) عند 0.25، وتم النظر في معدل الانسحاب 10٪. أشارت نتائج الحساب إلى أن ما لا يقل عن 123 مشاركا في كل مجموعة كان مطلوبا عند دراسة مجموعة الضابطة، ومجموعات السكري من النوع الثاني ومرض الديكورد الدينغي. في الدراسة الفعلية، تم تضمين 186 مشاركا في مجموعة التحكم، و134 مريضا في مجموعة مرضى السكري من النوع الثاني، و146 مريضا في مجموعة DKD. كان جميعهم متطوعين تلقوا العلاج في مستشفى شيانغيا الثالث التابع لجامعة سنترال ساوث من يوليو 2022 إلى يونيو 2023. من بين هؤلاء، لم يعاني 72 مريضا من مضاعفات، في حين ظهر 208 مرضى مع مضاعفة أو أكثر. شملت المضاعفات بشكل أساسي اعتلال الأعصاب السكري، واعتلال الشبكية السكري، ومرض الكلى السكري (DKD)، حيث تم تشخيص 146 مريضا بمرض ديكورونا. تم تحديد تصنيف السكري بناء على مستويات الأنسولين الصائم ومستويات الجلوكوز في الدم أثناء الصيام؛ تم استبعاد مرضى السكري من النوع الأول لتجنب الغموض التشخيصي. تم استبعاد حالات السكري الحملي وحالات السكري الخاصة.

كانت معايير الإدراج كما يلي: العمر ≥ 18 سنة؛ السجلات الطبية الكاملة والوثائق المتاحة؛ الامتثال للإرشادات الصينية لعام 2020 للوقاية وعلاج مرض السكري من النوع الثاني37. شملت معايير الاستبعاد اضطرابات نفسية مصاحبة، أو ضعف معرفي، أو عدم القدرة على التعاون مع الدراسة؛ الحالات المعدية الحادة؛ فشل في الأعضاء؛ والأورام الخبيثة.

تم اختيار مجموعة ضابطة مكونة من 186 شخصا سليما يخضعون لفحوصات طبية روتينية خلال نفس الفترة. يجب أن يستوفي المشاركون في مجموعة الضابطة المعايير التالية: عدم وجود تاريخ للسكري أو اضطرابات أيضية أخرى؛ مستوى السكر في الدم الصائم الطبيعي (<6.1 ملليمول/لتر)، وجلوكوز بعد تناول الطعام لمدة ساعتين (<7.8 ملليمول/لتر)، والهيموغلوبين السكري (<5.7٪)؛ ولا يوجد تاريخ لأمراض أو مضاعفات كلوية، مع مؤشرات طبيعية لوظائف الكلى (معدل ترشيح الكبيبة، نسبة الألبومين إلى الكرياتينين في البول).

اختبار مؤشرات مرتبط بالسكري
تم تسجيل معلومات ديموغرافية أساسية لكل مشارك في دراسة عند القبول. في صباح اليوم التالي، تم جمع 5 مل من الدم الوريدي من كل شخص في حالة صيام لاختبار المؤشرات الكيميائية الحيوية. تم تحليل مستويات الجلوكوز الصائم (FBG) باستخدام جهاز قياس الجلوكوز في الدم35. تم قياس الهيموغلوبين السكري (HbA1c) باستخدام محلل HbA1c آلي بالكامل36. تم جمع عينات البول خلال 24 ساعة من إدراج الدراسة. تم قياس تركيز الألبومين في البول باستخدام محلل البروتين37 باستخدام الطريقة المناعية-التوربيديمترية38. تم تقييم درجة الضعف الكلوي لدى مرضى DKD بواسطة نسبة الألبومين البولي إلى الكرياتينين (UACR)، وهي مؤشر معروف جيدا لتقييم الإصابات الكلوية المبكرة وتطور المرض في DKD 3,39.

زراعة الخلايا ومعالجتها
تم شراء خلايا الظهارة الكلوية البشرية HK-2 والخلايا الميزانية الكبيبية HGMC. على وجه التحديد، تم زراعة خلايا HK-2 في وسط K-SFM يحتوي على 10٪ مصل بقري جنيني، مع إضافة محلول مضاد حيوي بنسبة 1٪. تم زراعة خلايا HGMC في وسط كامل للخلايا الأولية. تم الحفاظ على الخلايا في حاضنة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية و5٪ ثاني أكسيد الكربون 2. تم إجراء التمرير والانتقال عندما تجاوز التقاءات 70٪. في التحفيز عالي الجلوكوز (HG)، تم زرع الخلايا في صفائح ذات 6 آبار وتعرضت ل 30 ملليمول D-جلوكوز في 2 مل من وسط الزراعة لكل بئر لمدة 48 ساعة (HK-240 وHGMC41). تم علاج مجموعة ضابطة منخفضة الجلوكوز بجرعة 5.5 ملم D-جلوكوز + 24.5 ملليمولار مانيتول.

تم استنساخ تسلسل الطول الكامل من LINC00426 إلى بلازميد التعبير الحقيقي النواة pcDNA3.1 لبناء بلازميد pcDNA3.1 LINC00426 التعبير. تم استخدام متجه pcDNA3.1 الفارغ كعنصر تحكم سلبي. تم إجراء النقل الخلوي باستخدام كاشف ليبوفكتامين 3000 وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. باختصار، تم زرع خلايا HK-2 وHGMC الناتجة عن HG في صفائح ذات 6 آبار ونقلها عند التقاء بنسبة 70٪–80٪. لكل بئر، تم خلط 2.5 ميكروغرام من حمض نووي البلازميد (pcDNA 3.1 أو pcDNA3.1 LINC00426) مع 5 ميكرولتر من كاشف ليبوفكتامين 3000 في 250 ميكرولتر Opti-MEM لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة وفقا للأبحاث السابقة10. ثم أضيف مركب النقل بشكل قطري إلى الخلايا في وسط الزراعة الكامل. بعد 6 ساعات من الحضانة عند 37 درجة مئوية، تم استبدال الوسط بوسط جديد، وتم زراعة الخلايا لمدة 42 ساعة إضافية قبل التجارب اللاحقة.

استخراج الحمض النووي الريبي الكلي والنسخ العكسي
تم تطرد الدم المتبقي مرة أخرى عند 3000 x g لمدة 15 دقيقة، وتم جمع المادة الفائقة وتخزينها عند -80 درجة مئوية. تم استخراج الحمض النووي الريبي الكلي من عينات المصل والخلايا باستخدام طريقة تريزول-فينول-كلوروفورم، التي ترسبت بإيثانول متساوي الحجم وفقا للأبحاث السابقة42. تم تقييم تركيز ونقاء الحمض النووي الريبي باستخدام مطياف الأشعة فوق البنفسجية. تم تصنيع إجمالي cDNA من عينات باستخدام خليط كاشف RT عبر مضخم جيني PCR. كانت ظروف التفاعل 42 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة، تلتها 85 درجة مئوية لمدة 5 ثوان. تم تخزين العينات لفترة وجيزة عند 4 درجات مئوية.

تفاعل بوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي بالنسخ العكسي (RT-qPCR)
تم إجراء RT-qPCR باستخدام مزيج رئيسي SYBR qPCR. تم قياس تعبير LINC00426 المصل عبر أداة PCR الكمية. تم تطبيع البيانات باستخدام β-التوبولين كجين مرجعي داخلي، وتم حسابه باستخدام طريقة 2−ΔΔCt . كانت القيمة المتوسطة للسي تي ل β-تيوبولين حوالي 25، تراوحت بين 23 إلى 27 عبر جميع عينات المصل. كان معامل التباين القتالي (CV) 2.5٪. أظهر ANOVA أحادي الاتجاه عدم وجود فرق كبير في قيم Ct β-tubulin بين مجموعات الضابطة، T2DM، وDKD، مما أكد استقراره ومدى ملاءمته كمرجع داخلي لتطبيع LINC00426 المصل. تم سرد البادئات المشاركة في التفاعل في الجدول التكميلي 1. ظروف التفاعل: ما قبل التعقيم عند 95 درجة مئوية لمدة 10 دقائق؛ 40 دورة بدرجة حرارة 95 درجة مئوية لمدة 10 ثوان و60 درجة مئوية لمدة 30 ثانية؛ التمديد النهائي عند 60 درجة مئوية لمدة 15 ثانية.

تحليل البقع الغربية
تم إجراء تحليل البلوت الغربي وفقا لبروتوكولاتنا التجريبية المعتمدة. لفترة وجيزة، تم تحلل الخلايا باستخدام محلول تحلل RIPA مع مزيج مثبط بروتيز بنسبة 1٪. بعد الحضانة في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة، تم إجراء قياس كمية البروتين. تم تفتيت عينات البروتين عند 95 درجة مئوية، وتم فصل كميات متساوية من بروتين 30 ميكروغرام بواسطة SDS-PAGE، تلاها النقل الكهربائي إلى أغشية PVDF بقوة 0.45 ميكرومتر. تم حجب الأغشية بالحليب غير الدسم في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تم تخفيف الأجسام المضادة الأولية ضد باكس، Bcl-2، كاسباز-3، IκBα، وp-P65 عند 1:1000 باستخدام TBST، بينما تم تخفيف β-أكتين عند 1:3000. تم حضن الأغشية بالأجسام المضادة الأولية طوال الليل عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. لاحقا، تم حضن الأغشية بأجسام مضادة ثانوية متقاربة ببيروكسيداز الفجل الحار في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة. تم تصور أشرطة البروتين باستخدام ركيزة ECL على نظام تصوير هلامي. تم قياس قيم الرمادي الشريط باستخدام برنامج ImageJ.

مجموعة عد الخلايا-8 (CCK8)
هضم الخلايا المنقولة بنسبة 0.25٪ تريبسين (خال من EDTA) لمدة تقارب 3 دقائق، ثم الطرد المركزي عند 800 x g لمدة 5 دقائق. اجمع الحبيبات وأعد تعليقها في وسط زراعة الخلايا. زرع 100 ميكرولتر من تعليق الخلية (2 × 10خلايا 3 ) في صفيحة بسعة 96 بئر. بعد الحضانة لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربونللسماح بالتصاق الخلية، أضف 10 ميكرولتر من محلول CCK8. الإضافة الأولية لمحلول CCK8 تسمى 0 ساعة. يتم قياس الامتصاص عند 450 نانومتر باستخدام قارئ ميكرولوح عند 0، 24، 48، و72 ساعة.

قياس التدفق الخلوي
تم تقييم تأثير النقل المبرمج على الخلايا المبرمجة باستخدام محلول التلوين الملحق V-فلوريسيين إيزوثيوسيانات (FITC)/يوديد البروبيديوم (PI). بعد النقل، تم هضم الخلايا باستخدام نفس طريقة هضم التريبسين كما هو موضح أعلاه. تم غسل الخلايا باستخدام محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) وأعيد تعليقها. تم جمع حبيبات الخلايا بواسطة الطرد المركزي عند 800 × جرام لمدة 5 دقائق. نقل 100 ميكرولتر (حوالي 1 ×10 خلايا 5 ) إلى أنبوب قياس خلوي تدفق، وجهاز الطرد المركزي عند 800 × جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة وتخلص من الفائق. إعادة تعليق الخلايا في مخزن ربط Annexin V-FITC بسعة 195 ميكرولتر. أضف 5 ميكرولتر من محلول التلوين Annexin V-FITC ومحلول تلوين PI بسعة 10 ميكرولتر إلى الخليط، ثم اخلط جيدا. حضن في الظلام ودرجة حرارة الغرفة لمدة 20 دقيقة. بعد ذلك، وضع أنبوب قياس التدفق المعالج في حمام ثلج للتخزين المؤقت. قبل التحليل، قم بترشيح تعليق الخلية عبر فلتر شبك بحجم 200 ميكرون وأعد تعليقه. اجمع إشارات الخلايا باستخدام نظام قياس التدفق الخلوي تحت الإثارة عند 488 نانومتر/636 نانومتر.

اختبار التغذية المناعية المرتبطة بالإنزيمات (ELISA)
تم قياس السيتوكينات الالتهابية الخلوية باستخدام مجموعات ELISA المتوفرة تجاريا لعامل نخر الورم ألفا (TNF-α)، والإنترلوكين-6 (IL-6)، وIL-1 بيتا (IL-1β). إجراء الكشف المحدد هو كالتالي: إضافة 100 ميكرولتر من المعيار المخفف بشكل مناسب إلى الآبار المعيارية. أضف 100 ميكرولتر من وسط الخلية القاعدي إلى جميع الآبار الفارغة. أضف 50 ميكرولتر من سائل الخلية الفائق و50 ميكرولتر من مخزن الكشف 1x إلى آبار العينة. بعد ذلك، أضف 50 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة للكشف إلى الآبار المناسبة. غط الميكروبلوح وحضن الميكرو في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تخلص من السائل من الآبار واغسل 6 مرات باستخدام حاجز الغسيل. لتحقيق أفضل النتائج، تأكد من تجفيف الآبار تماما. أضف 100 ميكرولتر من محلول الستربتافيدين العامل إلى كل بئر مرة أخرى، ثم أغلق اللوحة، واحتضن المحلول في درجة حرارة الغرفة لمدة 45 دقيقة. وأخيرا، أضف 100 ميكرولتر من الركيزة الكروموجينية، ثم حضنها في الظلام لمدة 20 دقيقة. ثم أضف 100 ميكرولتر من محلول التوقف وامزج بلطف. سيظهر المحلول الآن كسائل شفاف مصفر بشدة متفاوتة. قس الكثافة البصرية (OD) للمحلول عند 450 نانومتر و630 نانومتر باستخدام قارئ ميكرولوتين. الفرق بين هاتين القيمتين يتوافق مع تركيز عامل الالتهاب في العينة.

التحليل الإحصائي
تمت معالجة البيانات وتحليلها باستخدام برامج إحصائية متاحة تجاريا. جميع نتائج التجارب تضمنت ثلاث نسخ صحيحة. استخدمت المقارنات بين المجموعات اختبارات t المستقلة للعينات وتحليل التباين (ANOVA). تم إجراء عدة مقارنات باستخدام طريقة توكي. تم استخدام منحنى ROC لتقييم القيمة التشخيصية ل LINC00426 لمرض T2DM وDKD. قام تحليل الانحدار اللوجستي بتقييم عوامل الخطر لمرض DKD. أشارت P < 0.05 إلى دلالة إحصائية لنتائج البيانات المعنية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

مقارنة الخصائص الأساسية بين الأفراد الأصحاء ومرضى السكري من النوع الثاني
شملت الدراسة 280 مريضا من النوع الثاني و186 فردا سليما كمجموعة ضبط. كشف تحليل السجلات الطبية للمشاركين (انظر الجدول 1) أن متوسط عمر المجموعة الضابطة كان 58.91 ± 17.63 سنة، مقارنة ب 59.50 ± 17.14 سنة لمرضى السكري من النوع الثاني. ومع ذلك، لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية في الجنس أو السمنة بين مجموعتي المرضى. كشفت المقارنة الإضافية أنه، مقارنة بمجموعة الضابطة، كان لدى مرضى السكر...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

DKD يمثل مضاعفة دقيقة وعية وعائية شديدة في مرض السكري من النوع الثاني. أقدم مظاهرها هي وجود الميكروألبومينوريا؛ اكتشاف ذلك في المراحل المبكرة قد يؤخر تقدم DKD. ومع ذلك، تفتقر البولية الدقيقة إلى حساسية في تحليل البول الروتيني، وبالتالي غالبا ما يتم تجاهلها43. وجدت هذه الدراسة أن LINC00426 يتم تقليل تنظيمه لدى مرضى السكري من النوع الثاني وله قيمة تشخيصية لكل من السكري من النوع الثاني ومرض ديكورو. علاوة على ذلك، قد يمنع LINC00426 ديكورونا من خلال تقليل الاستماتة الم...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لا يوجد تضارب مصالح في هذه الدراسة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
0.25% trypsinGibco25200056
Annexin V-FITC Apoptosis Detection KitBeyotimeC1062S
Antibiotics for cell cultureGibcoR-015-10
Aristo specific protein detectorGOLDSITEGPP-100
Bax AntibodyCell signaling Technology2772
BCA protein assay kitBeyotimeP0013B
Bcl-2 (124) Mouse Monoclonal AntibodyCell signaling Technology15071
beta-Actin (13E5) Rabbit Monoclonal AntibodyCell signaling Technology4970
Blood glucose monitorYuwell710
Caspase-3 AntibodyCell signaling Technology9662
CCK-8 reagentSigma96992
ChamQ Universal SYBR qPCR Master MixVazymeQ711
ChloroformSigma-AldrichC2432
Clarity Western ECL SubstrateBio-Rad1705061
Constant-temperature cell incubatorSaiLunDHP-9032
D-GlucoseMedChemExpressHY-B0389
Flow cytometerBeckman coultedCytoFLEXChloroform
Fluorescent quantitative PCR instrumentRocheLight Cycler 96
Foetal bovine serumSigma-AldrichF0193
Fully automated glycated haemoglobin analyserHanyu medicalHLC-723G11Phenol
Gene PCR amplifierBio RadS1000
Glomerular mesangial cells, HGMCSunncell Biotechnology Co., Ltd.SNP-H252
Human Basic IL-1 beta ELISA KitInvitrogenECH002
Human IL-6 ELISA KitInvitrogenEH2IL6
Human kidney epithelial cells, HK-2Sunncell Biotechnology Co., Ltd.SNL-165
Human TNF alpha ELISA KitInvitrogenKAC1751
IkappaB alpha (L35A5) Mouse Monoclonal AntibodyCell signaling Technology4814
K-SFM mediumInvitrogen17005-042
Lipofectamine 3000 InvitrogenL3000015
MannitolSigma-AldrichM9647
Multifunctional enzyme-linked immunosorbent assay readerTECANGENios Plus
NF-kappaB p65 (D14E12) Rabbit Monoclonal AntibodyCell signaling Technology8242
non-fat milkBiosharpBS102-500g
Opti-MEM™ I Reduced Serum MediumInvitrogen31985062
P3000 ReagentInvitrogenL3000-015
PBS bufferSangon BiotechE607080
PhenolSigma-AldrichP1037
Phospho-NF-kappaB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit Monoclonal AntibodyCell signaling Technology3033
Primary cell complete mediumSunncell Biotechnology Co., Ltd.SNPM-H252
Prime Script RT reagent KitTakaraRR037A
PVDF membranesMerck Millipore SE1M003M00
rotease and phosphatase inhibitor cocktailBeyotimeP1045
TrizolInvitrogen15596026CN
Ultraviolet spectrophotometerThermoNanodrop 2000

المراجع

  1. Amerkamp, J., Benli, S., Isenmann, E., Brinkmann, C. Optimizing the lifestyle of patients with type 2 diabetes mellitus - systematic review on the effects of combined diet-and-exercise interventions. Nutr Metab Cardiovasc Dis. 35 (5), 103746(2025).
  2. Mousavi, F. S., et al. Assessing renal function as a predictor of adverse outcomes in diabetic patients undergoing percutaneous coronary intervention. Acta Cardiol. 79 (7), 824-832 (2024).
  3. He, Y., et al. Predictive efficacy assessment of serum beta(2)-microglobulin combined with urinary albumin-to-creatinine ratio for renal function deterioration in type 2 diabetic patients with kidney disease. Am J Transl Res. 17 (12), 9982-9995 (2025).
  4. Wang, M., et al. Association of dietary live microbe intake with diabetic kidney disease in patients with type 2 diabetes mellitus in us adults: A cross-sectional study of nhanes 1999-2018. Acta Diabetol. 61 (6), 705-714 (2024).
  5. Saeedi, P., et al. Global and regional diabetes prevalence estimates for 2019 and projections for 2030 and 2045: Results from the international diabetes federation diabetes atlas, 9(th) edition. Diabetes Res Clin Pract. 157, 107843(2019).
  6. National Kidney Foundation. Kdoqi clinical practice guideline for diabetes and ckd: 2012 update. Am J Kidney Dis. 60 (5), 850-886 (2012).
  7. Tuttle, K. R., et al. Diabetic kidney disease: A report from an ada consensus conference. Am J Kidney Dis. 64 (4), 510-533 (2014).
  8. Du, N., Zhang, X., He, C., Zhang, Z. Mir-423-5p mediates linc00886 regulation of ovarian cancer aggressiveness and immune evasion via the tlr4/myd88/nf-kappab/pd-l1 pathway. Hereditas. 162 (1), 184(2025).
  9. Joshi, S. R., et al. Therapeutic potential of alpha-glucosidase inhibitors in type 2 diabetes mellitus: An evidence-based review. Expert Opin Pharmacother. 16 (13), 1959-1981 (2015).
  10. Chen, S., et al. Predicting and validating the regulation of podocyte injury and treatment of diabetic kidney disease by yinhuo tang. J Vis Exp. (220), e67939(2025).
  11. Zahra, S., et al. Prevalence of nephropathy among diabetic patients in north american region: A systematic review and meta-analysis. Medicine (Baltimore). 103 (38), e39759(2024).
  12. Wang, Y., Liu, T., Liu, W., Zhao, H., Li, P. Research hotspots and future trends in lipid metabolism in chronic kidney disease: A bibliometric and visualization analysis from 2004 to 2023. Front Pharmacol. 15, 1401939(2024).
  13. Shi, M., et al. Integrated transcriptomic and secretome proteomic analysis of hyperglycemia-stimulated endothelial cells and screening of target compounds. J Vis Exp. (226), e69578(2025).
  14. Sagoo, M. K., Gnudi, L. Diabetic nephropathy: An overview. Methods Mol Biol. 2067, 3-7 (2020).
  15. Kopel, J., Pena-Hernandez, C., Nugent, K. Evolving spectrum of diabetic nephropathy. World J Diabetes. 10 (5), 269-279 (2019).
  16. Chen, Y., Li, Z., Chen, X., Zhang, S. Long non-coding rnas: From disease code to drug role. Acta Pharm Sin B. 11 (2), 340-354 (2021).
  17. Yao, D., Zhang, B., Zhan, X., Zhang, B., Li, X. K. Predicting lncrna-disease associations based on a dual-path feature extraction network with multiple sources of information integration. ACS Omega. 9 (32), 35100-35112 (2024).
  18. Wang, Z., et al. Lncrna meg3 alleviates diabetic cognitive impairments by reducing mitochondrial-derived apoptosis through promotion of fundc1-related mitophagy via rac1-ros axis. ACS Chem Neurosci. 12 (13), 2280-2307 (2021).
  19. Ting, K. H., Yang, P. J., Tsai, P. Y., Lee, C. Y., Yang, S. F. Correlations between the long noncoding rna meg3 and clinical characteristics for diabetic kidney disease in type 2 diabetes mellitus. Diabetol Metab Syndr. 16 (1), 260(2024).
  20. Zhang, C., et al. Lncrna evf-2 exacerbates podocyte injury in diabetic nephropathy by inducing cell cycle re-entry and inflammation through distinct mechanisms triggered by hnrnpu. Adv Sci (Weinh). 11 (47), e2406532(2024).
  21. Lan, F., Zhao, J., Liang, D., Mo, C., Shi, W. Comprehensive analysis of cuproptosis-related cerna network and immune infiltration in diabetic kidney disease. Heliyon. 10 (16), e35700(2024).
  22. Zhou, B., et al. Linc00426 promotes the progression of atherosclerosis by regulating mir-873-5p/srrm2 axis. Cytokine. 191, 156938(2025).
  23. Ma, Q., et al. Long non-coding rna screening and identification of potential biomarkers for type 2 diabetes. J Clin Lab Anal. 36 (4), e24280(2022).
  24. Xiang, Z., et al. Potential prognostic biomarkers related to immunity in clear cell renal cell carcinoma using bioinformatic strategy. Bioengineered. 12 (1), 1773-1790 (2021).
  25. Mobeen, A., et al. Nf-kappab signaling is the major inflammatory pathway for inducing insulin resistance. 3 Biotech. 15 (2), 47(2025).
  26. Aktas, G. Exploring the link: Hemogram-derived markers in type 2 diabetes mellitus and its complications. World J Diabetes. 16 (7), 105233(2025).
  27. Balci, S. B., Atak, B. M., Duman, T., Ozkul, F. N., Aktas, G. A novel marker for prediabetic conditions: Uric acid-to-hdl cholesterol ratio. Bratisl Lek Listy. 125 (3), 145-148 (2024).
  28. Basaran, E., Aktas, G. J. O. E., Diseases, M. Waist-to-height ratio as a novel marker of metabolic syndrome in patients with type 2 diabetes mellitus. Exploration of Endocrine and Metabolic Diseases. , (2025).
  29. Duman, T. T., Tel, B. M. A., Bilgin, S., Dervisevic, A., Aktas, G. Evaluation of the effects of intermittent fasting on clinical and laboratory parameters in metabolic syndrome. Experimental Biomedical Research. 8 (2), (2025).
  30. Cosgun, M., Cosgun, Z., Kalfaoglu, M. E., Aktas, G. Systemic inflammatory markers and epicardial fat volume as predictors of cardiometabolic risk in type 2 diabetes. Postgrad Med J. , (2025).
  31. Aktas, G. Serum c-reactive protein to albumin ratio as a reliable marker of diabetic neuropathy in type 2 diabetes mellitus. Biomol Biomed. 24 (5), 1380-1386 (2024).
  32. Aktas, G., Duman, T. T., Atak Tel, B. Controlling nutritional status (conut) score is a novel marker of type 2 diabetes mellitus and diabetic microvascular complications. Postgrad Med. 136 (5), 496-503 (2024).
  33. Aktas, G. Association between the prognostic nutritional index and chronic microvascular complications in patients with type 2 diabetes mellitus. J Clin Med. 12 (18), (2023).
  34. Aktas, G. An overview of the role of serum uric acid to high-density lipoprotein cholesterol ratio in type 2 diabetes mellitus and in other inflammatory and metabolic conditions. Minerva Med. 116 (5), 405-415 (2025).
  35. Ohuche, I. O., Chikani, U. N., Oyenusi, E. E., Onu, J. U., Oduwole, A. Correlates of fasting blood glucose among children living with hiv in a nigerian tertiary hospital: A cross-sectional study. BMC Pediatr. 20 (1), 458(2020).
  36. Girlescu, N., et al. Thanatochemical study of glycated hemoglobin in diabetic status assessment. Medicina (Kaunas). 57 (4), (2021).
  37. Yu, G. Z., et al. Persistent hematuria and kidney disease progression in iga nephropathy: A cohort study. Am J Kidney Dis. 76 (1), 90-99 (2020).
  38. Zhao, H., et al. Branched-chain amino acids contribute to diabetic kidney disease progression via pkm2-mediated podocyte metabolic reprogramming and apoptosis. Nat Commun. 16 (1), 7846(2025).
  39. Mao, L., Yin, R., Yang, L., Zhao, D. Elucidating the function of clusterin in the progression of diabetic kidney disease. Front Pharmacol. 16, 1573654(2025).
  40. Cheng, D., et al. Moringa isothiocyanate activates nrf2: Potential role in diabetic nephropathy. AAPS J. 21 (2), 31(2019).
  41. Geng, Z., et al. Lncrna zfas1 regulates the proliferation, oxidative stress, fibrosis, and inflammation of high glucose-induced human mesangial cells via the mir-588/rock1 axis. Diabetol Metab Syndr. 14 (1), 21(2022).
  42. Dalmadi, A., Miloro, F., Abdu, A., Kis, A., Havelda, Z. Remote precursor elements can modulate rna induced silencing complex-loading efficiency of mir168 in arabidopsis. Plant J. 122 (3), e70195(2025).
  43. Vigersky, R. A. An overview of management issues in adult patients with type 2 diabetes mellitus. J Diabetes Sci Technol. 5 (2), 245-250 (2011).
  44. Zou, L. X., Hou, Z. L., Qian, C. H., Wang, X., Sun, L. Performance of novel biomarkers for prediction of diabetic kidney disease in patients with diabetes mellitus. Ann Med. 57 (1), 2562996(2025).
  45. Liu, T., et al. Serum high mobility group box 1 as a potential biomarker for the progression of kidney disease in patients with type 2 diabetes. Front Immunol. 15, 1334109(2024).
  46. Oshima, M., et al. Trajectories of kidney function in diabetes: A clinicopathological update. Nat Rev Nephrol. 17 (11), 740-750 (2021).
  47. Wang, S., et al. Grk2 protein mediates the anril, a lncrna, to affect the proliferation and apoptosis of kasumi-1 cells. Front Biosci (Landmark Ed). 29 (10), 362(2024).
  48. Yang, P. J., Ting, K. H., Tsai, P. Y., Su, S. C., Yang, S. F. Association of long noncoding rna gas5 gene polymorphism with progression of diabetic kidney disease. Int J Med Sci. 21 (11), 2201-2207 (2024).
  49. Li, B., Wu, Z., Xu, H., Ye, H., Yang, X. Downregulation of lncrna xloc_032768 in diabetic patients predicts the occurrence of diabetic nephropathy. Open Med (Wars). 19 (1), 20240903(2024).
  50. Liu, H., et al. A panel of four-lncrna signature as a potential biomarker for predicting survival in clear cell renal cell carcinoma. J Cancer. 11 (14), 4274-4283 (2020).
  51. Zhu, H., et al. Functional long noncoding rnas (lncrnas) in clear cell kidney carcinoma revealed by reconstruction and comprehensive analysis of the lncrna-mirna-mrna regulatory network. Med Sci Monit. 24, 8250-8263 (2018).
  52. Lu, X., et al. Glycemic status affects the severity of coronavirus disease 2019 in patients with diabetes mellitus: An observational study of ct radiological manifestations using an artificial intelligence algorithm. Acta Diabetol. 58 (5), 575-586 (2021).
  53. Wang, M. H., Liu, Z. H., Zhang, H. X., Liu, H. C., Ma, L. H. Hsa_circrna_000166 accelerates breast cancer progression via the regulation of the mir-326/elk1 and mir-330-5p/elk1 axes. Ann Med. 56 (1), 2424515(2024).
  54. Barutta, F., Bellini, S., Canepa, S., Durazzo, M., Gruden, G. Novel biomarkers of diabetic kidney disease: Current status and potential clinical application. Acta Diabetol. 58 (7), 819-830 (2021).
  55. Casagrande, V., Federici, M., Menghini, R. Timp3 involvement and potentiality in the diagnosis, prognosis and treatment of diabetic nephropathy. Acta Diabetol. 58 (12), 1587-1594 (2021).
  56. Ye, S., et al. Lipidomics profiling reveals serum phospholipids associated with albuminuria in early type 2 diabetic kidney disease. ACS Omega. 8 (39), 36543-36552 (2023).
  57. Thipsawat, S. Early detection of diabetic nephropathy in patient with type 2 diabetes mellitus: A review of the literature. Diab Vasc Dis Res. 18 (6), 14791641211058856(2021).
  58. Zhang, Z., et al. Association of estimated glomerular filtration rate from serum creatinine and cystatin c with new-onset diabetes: A nationwide cohort study in china. Acta Diabetol. 58 (9), 1269-1276 (2021).
  59. Yan, P., et al. Association of remnant cholesterol with chronic kidney disease in middle-aged and elderly chinese: A population-based study. Acta Diabetol. 58 (12), 1615-1625 (2021).
  60. Fonseca-Montano, M. A., Cisneros-Villanueva, M., Coales, I., Hidalgo-Miranda, A. Linc00426 is a potential immune phenotype-related biomarker and an overall survival predictor in pam50 luminal b breast cancer. Front Genet. 14, 1034569(2023).
  61. Li, H., et al. Author correction: Linc00426 accelerates lung adenocarcinoma progression by regulating mir-455-5p as a molecular sponge. Cell Death Dis. 15 (8), 564(2024).
  62. Wu, K., et al. Nf-kappab p65 mediated lnc-traf3ip2 exacerbates renal fibrosis in diabetic kidney disease. Acta Diabetol. 62 (11), 1915-1927 (2025).
  63. Wu, K., et al. Cytosolic hmgb1 accumulation in mesangial cells aggravates diabetic kidney disease progression via nfkappab signaling pathway. Cell Mol Life Sci. 81 (1), 408(2024).
  64. Hao, J., Li, H., Yu, W. Xanthohumol ameliorates diabetic kidney disease through suppression of renal fibrosis by regulating snhg10/mir-378b. Front Pharmacol. 16, 1532517(2025).
  65. Rodriguez, F., et al. Real-world diagnosis and treatment of diabetic kidney disease. Adv Ther. 38 (8), 4425-4441 (2021).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

الطبالعدد 232العدد 232هذا الشهر في JoVEعددداء السكري من النوع 2التشخيص
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.