$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تم الحصول على الموافقة الأخلاقية من مجلس مراجعة IATRC. جميع الإجراءات المتعلقة بعينات بول بشرية كانت تتوافق مع مبادئ إعلان هلسنكي. تم الحصول على موافقة مكتوبة مستنيرة من جميع المشاركين، وتم إخفاء هوية جميع العينات لحماية السرية.
تصميم المستشعرات والمحاكاة العددية
الخطوة الأولى في تصميم المستشعر هي تشغيل محاكاة كهرومغناطيسية. يستخدم CST Microwave Studio لتصميم التصميم، والذي يتضمن رنان مكون من ملف لولبي دائري (CSI) على التوالي مع مكثف بين الرقميين (IDC). هناك نقطة اتصال لعلاقة عن بعد بين هذين الجزئين تسمح لهما بالعملمعا بصريا. لتحسين الأداء، يضاف اثنان من قطع هيلبرت المفتوحة للكسور إلى وصلة CSI-IDC لتقليل التشوه والجوانب الكهرومغناطيسية. كما يضاف هيكل الحلقة الخلفية إلى مستوى الأرض لجعل استجابة مرشح الرافضة للنطاق أكثر استقرارا وتحسين دقة القياس26. يعمل التصميم بشكل أفضل على ركيزة FR4 قياسية منخفضة التكلفة (εr≈ 4.3، سمك 1.6 مم) وله رنين تشغيلي رئيسي عند 1.22 جيجاهرتز. استخدمنا برامج لإنشاء وتحليل نموذج دائرة مكافئة مكافئة للتحقق من معاملات S المحاكاة. وهذا ضمن أن نتائج محاكاة الكهرومغناطيسية والدوائر الكاملة الموجة كانت نفسها27. كان اختيار LDR كعنصر تحويل بصري مدفوعا بمزاياه المميزة في هذه البنية المحددة للاستشعار الميكروويف. على عكس الفوتوديودات أو الترانزستورات الضوئية، التي تتطلب دوائر تحيز معقدة وتوفر علاقة غير خطية بين التيار والضوء، يوفر LDR تعديلا مقاوميا سلبيا وخطيا وواسع النطاق استجابة لشدة الضوء الساقط. هذا التحول الخطي في المقاومة يعدل مباشرة S21 من الرنان المجاور للميكروويف دون إدخال ضوضاء دائرة نشطة أو الحاجة إلى تكييف إشارة إضافي. علاوة على ذلك، فإن تكلفة المسافة المنخفضة والمساحة المدمجة والتكامل السلس مع ركيزة FR4—التي لا تتطلب خطوط انحياز خارجية—تتماشى مع الهدف العام للتصميم المتمثل في حساس نقطة رعاية بسيط ومنخفض التكلفة وغير جراحي.
لوضع المستشعر المقترح في سياق أوسع لتقنيات كشف اليوريا، من الضروري إجراء مقارنة موجزة مع الطرق المعتمدة. تمثل الفحوصات الكيميائية الحيوية، مثل طريقة اليوراز الإنزيمي، المعيار الذهبي السريري، حيث تقدم دقة وحساسية عالية (حدود كشف منخفضة تصل إلى 1–5 ملغ/ديسيلتر) لكنها تتطلب معدات مختبرية متخصصة، وطاقم مدرب، وأوقات استجابة نموذجية تتراوح بين 30–60 دقيقة، مما يحد من فائدتها في أماكن الرعاية. توفر شرائط الاختبار الإنزيمية بديلا سريعا (2–5 دقائق)، منخفض التكلفة، شبه كمي مناسب للاستخدام المنزلي؛ ومع ذلك، فهي تعتمد على تفسير اللون، الذي قد يكون ذاتيا، ويوفر حساسية محدودة لقياس التركيز بدقة. الحساسات الكهروكيميائية، بما في ذلك حساسات اليوريا الأمبيرومتري والبوتنشيومترية، تحقق حساسية عالية وتتيح الكشف في الوقت الحقيقي، لكنها غالبا ما تتطلب تصنيع الأقطاب الكهربائية المعقدة وتثبيت الإنزيمات، وتعاني من مشاكل في الاستقرار بسبب تحلل الإنزيمات مع مرور الوقت. على النقيض من ذلك، يقدم مستشعر الموجات الدقيقة المتحكم بصريا المقترح مزيجا فريدا من السمات: الاقتران البصري غير الجراحي يلغي الاتصال المباشر للعينات مع عناصر الاستشعار، مما يقلل من خطر التلوث؛ وقت القياس أقل من 30 ثانية؛ التصنيع على ركيزة FR4 منخفضة التكلفة يقلل من التكاليف؛ وتبسط العلاقة الخطية بين تركيز اليوريا وفقدان الإدخال (S21) المعايرة. بينما الحساسية الحالية (1.42 × 10-4 لكل ملغ/مول/سم3) مناسبة لتصنيف تصنيف نطاقات اليوريا ذات الصلة سريريا (150–450 ملغ/ديسيلتر)، قد يعزز المزيد من التحسين حدود الكشف المماثلة لنظيراتها الكهروكيميائية. بشكل عام، يحتل المستشعر مكانة تكميلية، مع إعطاء الأولوية للبساطة والسرعة وقابلية النقل في تطبيقات نقاط الرعاية حيث لا تكون الدقة المختبرية ضرورية.
تصنيع المستشعرات
الطباعة الضوئية القياسية تنقل التصميم النهائي إلى لوحة FR4 مغطاة بالنحاس من جانب واحد. يستخدم قناع ضوئي عالي الدقة لصنع نمط الحساس على ركيزة تم تغليفه بفوتوريست. يتم بعد ذلك تطوير النمط ونقشه في محلول من كلوريد الحديديين (FeCl₃). بعد النقش والتنظيف، يتم لحام موصلات النسخة الفرعية A (SMA) بعناية على منافذ الشريط الصغير داخل ومخرج بحيث يمكن توصيل معدات القياسعلى 28. هذه العملية تصنع حساسا يعمل ومنخفض الملف وجاهز للاختبار.
الإعداد التجريبي والمعايرة
باستخدام كابلات محورية عالية الجودة، يتم توصيل المستشعر المصنوع بمحلل شبكة متجهات (VNA)، مثل سلسلة Agilent PNA. باستخدام مجموعة معايرة ميكانيكية، يتم إجراء معايرة كاملة ذات منفذين (مفتوح، قصير، حمل، عبور) في أطراف الكابل للتخلص من أخطاء القياس المنهجية. لقياس معايير S للحساس، تم إعداد VNA لمسح من 0.1 جيجاهرتز إلى 4 جيجاهرتز بقدرة خرج -10 ديسيبل بل29.
تحضير وقياس عينات البول
يطلب من المشاركين الذين يوافقون على إعطاء عينات بولهم القيام بذلك. يتم إعداد منصة اختبار ثابتة للقياس: يتم وضع فاصل عن بعد مباشرة أسفل شريحة زجاجية نظيفة مركزة فوق المنطقة النشطة من المستشعر. أولا، يتم أخذ قياس S21 الأساسي مع إضاءة المسافة الطويلة بمصدر ضوء بشدة ثابتة وبدون عينة. ثم يتم رش قطرة بول بحجم 0.01 مل على وسط شريحة الزجاج. يتم تسجيل طيف S21 مرة أخرى بنفس كمية الضوء. الخصائص البصرية للعينة التي تعتمد على اليوريا تغير مقاومة المسافة الطويلة، مما يسبب تغيرا ملموسا في الحساس |S21| على تردد 1.22 جيجاهرتز30. لتجنب التلوث المتبادل، يتم تنظيف شريحة الزجاج بالماء المقطر والإيثانول بين كل قياس للعينة. تم جمع عينات بول طازجة من عشرة متطوعين أصحاء (خمسة ذكور، خمس إناث؛ تتراوح أعمارهم بين 25 و45 عاما). تراوحت تركيزات اليوريا الأساسية، التي تم قياسها بواسطة محلل كيميائي سريري، بين 150 إلى 450 ملغ/ديسيلتر. لتحديد نطاق اختبار مضبوط، تم تصنيف العينات إلى ثلاث مجموعات تركيز: منخفضة (150–250 ملغ/ديسيلتر)، متوسطة (251–350 ملغ/ديسيلتر)، وعالية (351–450 ملغ/ديسيلتر)، مع عشر عينات لكل فئة. تم تحليل جميع العينات خلال ساعتين من الجمع، وتخزينها عند 4 درجات مئوية عند عدم الاستخدام، وتم توازنها مع درجة حرارة الغرفة قبل القياس. تم تطبيق طبقة 0.01 مل على شريحة زجاجية نظيفة في كل اختبار، مع تنظيف الشرائح باستخدام 70٪ إيثانول وماء مقطر بين القياسات لمنع التلوث المتقاطع30.
جمع البيانات وتحليلها
المعلومة الرئيسية المستخلصة من كل قياس هي حجم S21 (بالديسيبل) عند رنين 1.22 جيجاهرتز. تستخدم هذه المجموعة لتعليم خوارزمية K-أقرب الجيران (KNN) التي تعمل في برنامج مثل MATLAB. يستخدم النموذج مقدار S21 لتقسيم مستويات اليوريا إلى مجموعات مثل "منخفض"، "متوسط"، و"مرتفع"31. أيضا، يمكن قياس حساسية تركيز المستشعر من خلال رسم التغير في |S21| (Δ|S21|) ضد التغير في تركيز اليوريا (ΔC). ميل هذه العلاقة الخطية، C = ΔS / ΔC، يظهر الحساسية. لتقييم متانة المستشعرات وموثوقيتها للقياس، أجريت دراسة تكرارية مع 45 قياسا لكل فئة تركيز يوريا (منخفض: 150–250 ملغ/ديسيلتر، متوسط: 251–350 ملغ/ديسيلتر، عالي: 351–450 ملغ/ديسيلتر) على مدى ثلاثة أيام مستقلة، بمجموع 135 قياسا. تراوح معامل التباين بين 0.67٪ و1.07٪ عبر جميع الفئات، مما يشير إلى تكرار ممتاز للقياس. تم قياس عدم اليقين في القياس وفقا لإطار دليل التعبير عن عدم اليقين في القياس (GUM)، حيث جمع بين عدم اليقين من النوع A (التفاوت الإحصائي الناتج عن القياسات المتكررة) مع مساهمات النوع B من معايرة VNA (±0.05 ديسيبل)، وتقلبات درجة الحرارة (±0.01 ديسيبل/°C)، وتغيرات تموضع العينة (±0.02 ديسيبل). تراوحت فترة عدم اليقين الموسع (k=2، فترة ثقة 95٪) من ±0.38 ديسيبل إلى ±0.56 ديسيبل، حسب فئة التركيز. حساسية التركيز، المشتقة من الانحدار الخطي ل Δ|S21| مقابل ΔC، تم حسابه ك 1.42 × 10-4 لكل (ملغ/مول/سم3)، مع فترة ثقة 95٪ تتراوح بين 1.35 × 10-4 إلى 1.49 × 10-4 لكل (ملغ/مول/سم3) ومعامل تحديد (R2) مقداره 0.94. كان عدم اليقين الموسع النسبي في الحساسية هو ±6.2٪ (k = 2)، مما يؤكد أن الحساسية المبلغ عنها قوية إحصائيا، وأن المستشعر يظهر أداء قابلا للتكرار مناسبا لتطبيقات نقطة الرعاية.