كان هدف هذه الدراسة هو إيجاد طريقة قابلة للتكرار لإجراء استئصال الجمجمة تليها انسداد دائم وانتقائي للشريان الدماغي الأوسط في الفئران لتطبيقها في الدراسات التجريبية لاضطرابات الذاكرة الحركية والمكانية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الإغلاق الانتقائي والدائم للشريان الدماغي الأوسط عند الفئران: نهج تجريبي لدراسة عجز الذاكرة الحركية والمكانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
وبفضل أهمية سريرية كبيرة، تتطلب السكتة الدماغية الإقفاري (IS) أساليب تجريبية تمكن من تطوير علاجات مساعدة جديدة. نظرا لتشابه تشريح الأوعية الدموية الدماغية مع البشر، تستخدم الفئران على نطاق واسع كنماذج تجريبية لنظام الأشعة الدماغية. ومع ذلك، لا تزال هناك حاجة لطرق قادرة على توليد بيئة إقفاري تشبه أكثر تلك التي تلاحظ عند البشر، مع اتباع نهج يعطي الأولوية للانسداد الشرياني الانتقائي. في هذا السياق، كان هدف هذه الدراسة هو إيجاد طريقة قابلة للتكرار لإجراء استئصال الجمجمة تليها انسداد دائم وانتقائي للشريان الدماغي الأوسط (MCA) في الفئران، لتوحيد النموذج وتقليل التحديات التقنية للتطبيق في دراسات عجز الذاكرة الحركية والمكانية. تم تقسيم فئران ويستار (N = 28) بالتساوي إلى مجموعتين، إحداهما تخضع لاستئصال الجمجمة وحدها (SHAM) والأخرى تلاه استئصال انتقائي لاستئصال الجمجمة (MCAO). في اليومين السابع والثامن بعد العملية، أجري اختبار الوضعية واختبار التعرف على موقع الجسم على الذاكرة على التوالي. بعد القتل الرحيم، تم جمع عينات دماغية، وتم تجهيز أقسام نسيجية مصبوغة ب Nissl. لإثبات جدوى وفعالية الطريقة، تم تطوير بروتوكول جراحي مفصل، يشمل التحضير قبل العملية، التخدير، تحديد الموضع، استئصال الجمجمة، MCAO، والإغلاق. أظهرت الطريقة المطبقة عيوبا في مجموعة MCAO، كما يتضح من اختبار الوضعية (p = 0.015) واختبار التعرف على موقع الجسم للذاكرة (p < 0.001). أكد التحليل النسيجي انتقائية النهج، حيث شملت الإصابة مناطق مرتبطة بالحصين مثل قشرة الحصين، والقشرة الدائرية، والقشرة الكمطرية، بالإضافة إلى الكبسولة الخارجية، بينما تم الحفاظ على هياكل دماغية أعمق. ثبت أن هذا البروتوكول طريقة قابلة للتكرار وفعالة لتحفيز نقص التروية الانتقائية في MCA في الفئران، ويمثل أداة صالحة وسهلة الفهم تقنيا للدراسات التجريبية التي تحقق في الآليات الفيزيولوجية المرضية والعلاجية في السكتة الدماغية الإقفاري.
المقدمة
النصف الداخلي الإقفاري المحيط بالمنطقة المحتمة في السكتة الدماغية الإقفاري (IS) قادر على التعافي إذا تم تقديم العلاجات في الوقت المناسب، بهدف الوقاية أو التخفيف من اضطرابات الحركة والذاكرة1. ومع ذلك، لا تزال علاجات مثل التحلل الكيميائي واستئصال الجلطة الميكانيكية غير متاحة بسهولة في الممارسة السريرية لشريحة كبيرة من السكان2، مما يدعم الحاجة إلى نماذج تجريبية لدراسة استراتيجيات علاجية أكثر انتشارا. تعد الدراسات الحيوانية ضرورية بسبب قابليتها للتكرار وقدرتها على تحليل الدورة الجانبية3، حيث تستخدم الفئران على نطاق واسع في نماذج IS4. نظرا لارتب....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
اتبع البروتوكول الإرشادات الخاصة برعاية واستخدام الحيوانات المخبرية التي وضعها المجلس الوطني لمراقبة تجارب الحيوانات (CONCEA)، وتمت الموافقة عليه من قبل لجنة الأخلاقيات للتجارب الحيوانية (CEUA) التابعة لجامعة ولاية بارانا الغربية (UNIOESTE)، البروتوكول رقم 25-23.
1. التحضير قبل العملية
- جهز الأدوات الجراحية، الشاش، الوسادات القطنية، ووضع المجهر المجسم (الشكل 1).
- نظف طاولة الجراحة والمعدات بنسبة 70٪ إيثانول.
2. التخدير
- تحفز التخدير بمزيج من الكيتامين (3.75 مل)، والزيلازين (2.5 م....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم تقسيم ما مجموعه 28 ذكرا من جرذ ويستر (عمرهم 10–12 أسبوعا، متوسط الوزن 349 جم) عشوائيا ومتساويا إلى مجموعتين: MCAO (تم تقديمه للبروتوكول الكامل الموصوف) وSHAM (تم تقديمه فقط إلى مرحلة استئصال الجمجمة). في هذه الدراسة، تم استبعاد 3 حيوانات أثناء العملية واستبدالها أثناء الجراحة بسبب نزيف وريدي (2 MCAO) أو إصابة قشرية طفيفة أثناء استئصال الجمجمة (1 SHAM). توفي حيوان MCAO إضافي في اليوم الخامس بعد العملية. كان معدل الوفيات الإجمالي للنموذج 3.6٪. تكونت العينة النهائية التي تم تحليلها من 27.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تم استخدام نموذج MCAO في الفئران منذ عام 197516,17 كنموذج تجريبي لنقص التروية الدماغية، وتم تحسينه على مر السنين، مما أظهر فعاليته في تحفيز الضرر العصبي 8,22,23,24,25,26,27,28
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن المؤلفون عدم وجود مصالح متنافسة.
شكر وتقدير
وقد دعم هذا العمل برنامج دعم الدراسات العليا (PROAP) من خلال مشروع المساعدة المالية للتعليم أو البحث، رقم العملية 88881.594204/2020-01، رقم المنحة 1359/2020. نشكر الأساتذة والفنيين وطلاب مختبرات الفسيولوجيا والتمثيل الغذائي والتشريح البشري في UNIOESTE (جامعة ولاية بارانا، كاسكافيل، البرازيل) على دعمهم التقني والأكاديمي طوال المشروع.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Adson toothed forceps | ABC stainless | L47-P4-164 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Castroviejo needle holder | Golgran | 135-3 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Electrocautery | Chunguang medical | 128 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Freer elevator | ABC stainless | 47P4-819 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Halsted curved | ABC stainless | AI1055 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Micro drill | Nail drill | ZS-710 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Mini trichotomizer | Kemei | KM-666 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Prolene | Ethicon | 8730H | غرز مقاس 8-0 |
| Stereomicroscope | Alltion | ASM-112 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Straight scissor | ABC stainless | L23-W4 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Surgical compresse | Cremer | 158595 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Surgical gauze | Cremer | 198669 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Thermometer | G-Tech | DMT-2027 | قد تكون خيارات أخرى متاحة من شركات مختلفة |
| Vicryl | Ethicon | VCP346H | غرز مقاس 4-0 |
المراجع
- Fisher, M. The ischemic penumbra: identification, evolution and treatment concepts. Cerebrovasc Dis. 17 (1), 1-6 (2004).
- Tawil, S. E., Muir, K. W. Thrombolysis and thrombectomy for acute ischaemic stroke. Clin Med (Lond). 17 (2), 161-165 (2017).<....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
