مقالة منهجية

بروتوكول موحد للتقييم القلب الاستقلابي المبكر في مرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الاستقلابي

0 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/70593

⸱

سبتمبر 29, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Clinical Research Department, Experimental Metabolism and Clinical Research Laboratory, 2Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado (ISSSTE), Laboratory of Biochemistry and Experimental Medicine, 3Cardiology Department, Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado (ISSSTE), 4Facultad de Enfermería y Nutrición, Universidad Autónoma de San Luis Potosí, 5Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada (CICATA), Instituto Politécnico Nacional (IPN)

في هذه المقالة

ملخص

يصف هذا البروتوكول سير عمل موحد للتقييم المبكر للتمثيل الغذائي القلبي لدى البالغين المصابين بمرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD)، حيث يدمج تقييم الالتهابات الغذائية، والمؤشرات الحيوية البيوكيميائية، وتخطيط صدى القلب، وتصوير الشريان السباتي بالموجات فوق الصوتية، جنباً إلى جنب مع إجراءات موحدة للاكتساب، ومراقبة الجودة، والتحقق من صحة البيانات لتحسين إمكانية إعادة إنتاج النتائج.

الملخص

يرتبط مرض الكبد الدهني المرتبط بخلل الأيض (MASLD) بالتهاب مزمن منخفض الدرجة وزيادة خطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية. ولا يزال التحديد المبكر للتغيرات القلبية الأيضية دون السريرية يشكل تحديًا نظرًا لمحدودية البروتوكولات الموحدة التي تدمج تقييم الالتهابات الغذائية مع التصوير الموضوعي للقلب والأوعية الدموية. يصف هذا البروتوكول سير عمل قابل للتكرار لتقييم الارتباط بين القدرة الالتهابية للنظام الغذائي والتغيرات القلبية الأيضية المبكرة لدى البالغين المصابين بمرض MASLD المؤكد. يتم تسجيل المشاركين وفقًا لمعايير أهلية موحدة، ويتم تأكيد التشحم الكبدي عن طريق التصوير بالموجات فوق الصوتية. يتم تقييم المدخول الغذائي باستخدام استبيان تكرار الأغذية (FFQ) شبه الكمي المعتمد، والذي يتم من خلاله حساب مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) باستخدام المنهجية الأصلية المستمدة من الدراسات الأدبية. يشمل التقييم القلبي الأيضي القياسات الأنثروبومترية، والتحليلات الكيميائية الحيوية في حالة الصيام، وحساب نسبة الثلاثي غليسيريد إلى كوليسترول البروتين الدهني عالي الكثافة (TG/HDL-C) ومؤشر بلازما تصلب الشرايين (AIP)، وتقدير المؤشرات الحيوية الالتهابية كميًا باستخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، وتقييم وظيفة الانبساط للبطين الأيسر عن طريق تخطيط صدى القلب عبر الصدر باستخدام E/e′ المستمد من دوبلر الأنسجة، والتصوير بالموجات فوق الصوتية للشريان السباتي الثنائي لقياس سمك الطبقة الداخلية المتوسطة للشريان السباتي (CIMT). تم إدراج إجراءات استحواذ موحدة، ونقاط تفتيش محددة مسبقًا لمراقبة الجودة، وخطوات التحقق من البيانات لضمان الاتساق المنهجي وقابلية التكرار. تعكس النتائج التمثيلية البيانات الموحدة الناتجة عن البروتوكول، بما في ذلك تصنيف DII، وملفات المؤشرات الحيوية الالتهابية، ومؤشرات تخطيط صدى القلب، وقياسات CIMT، ولا تعني وجود ارتباطات بيولوجية مؤكدة. يوفر هذا البروتوكول إطارًا منهجيًا مفصلاً وقابلًا للتكرار لإجراء الدراسات السريرية والترجمية التي تبحث في العلاقة بين العبء الالتهابي الغذائي والتغيرات القلبية الأيضية المبكرة لدى البالغين المصابين بمرض MASLD.

المقدمة

يُعد مرض الكبد الدهني المرتبط بخلل في التمثيل الغذائي (MASLD) أكثر أمراض الكبد المزمنة انتشاراً في جميع أنحاء العالم، حيث يصيب ما يقرب من ثلث السكان البالغين. وبالإضافة إلى الإصابة الكبدية التصاعدية، يتميز مرض MASLD بالالتهاب المزمن منخفض الدرجة، ومقاومة الإنسولين، والخلل الوظيفي البطاني، وتسارع تصلب الشرايين1,2. وتعتبر أمراض القلب والأوعية الدموية سبباً رئيسياً للمراضة والوفيات بين المصابين بمرض MASLD، مما يؤكد الحاجة إلى منهجيات موثوقة لتحديد التغيرات القلبية الاستقلابية المبكرة قبل تطور أمراض القلب والأوعية الدموية الظاهرة سريرياً3,4. يهدف هذا البروتوكول إلى توفير سير عمل موحد وقابل للتكرار للتقييم المتكامل لعبء الالتهاب الغذائي، والالتهاب الجهازي، والخلل الوظيفي القلبي الوعائي تحت الإكلينيكي المبكر لدى البالغين المصابين بمرض MASLD. هذا البروتوكول مخصص للدراسات السريرية والترجمية التي تبحث في المخاطر القلبية الاستقلابية المبكرة التي تسبق أمراض القلب والأوعية الدموية ذات الدلالة السريرية لدى هذه الفئة من السكان.

تشير الأدلة المتراكمة إلى أن النظام الغذائي يلعب دوراً محورياً في بدء وتطور مرض MASLD. فالأنماط الغذائية التي تتميز باستهلاك عالٍ من الأطعمة فائقة المعالجة، والدهون المشبعة، والكربوهيدرات المكررة، والسكريات المضافة تعزز من الإجهاد التأكسدي، والخلل الوظيفي المبطن للأوعية الدموية، والتنشيط المناعي، والالتهاب الجهازِي المزمن5,6. وعلى العكس من ذلك، فإن الأنماط الغذائية الغنية بالألياف، والبوليفينولات، وأحماض أوميغا-3 الدهنية، والمغذيات الدقيقة المضادة للأكسدة تخفف من مسارات الالتهاب المرتبطة بالخلل الوظيفي الأيضي وأمراض القلب والأوعية الدموية6,7.

تم تطوير مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) لتقدير القدرة الالتهابية للمدخول الغذائي المعتاد باستخدام نظام تسجيل مستمد من الدراسات السابقة بناءً على تأثيرات 45 مكونًا غذائيًا على المؤشرات الحيوية للالتهاب، بما في ذلك البروتين التفاعلي-C (CRP)، والإنترلوكين (IL)-1β، وIL-4، وIL-6، وIL-10، وعامل نخر الورم-α (TNF-α)8. وقد ارتبطت درجات DII الأعلى بزيادة الوسائط الالتهابية الدوارة، ومقاومة الأنسولين، والمتلازمة الأيضية، وداء السكري من النوع 2، وأمراض القلب والأوعية الدموية لدى مجموعات سكانية متنوعة9,10.

على الرغم من ارتباط مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) بنتائج أيضية سلبية، إلا أن عدداً قليلاً نسبياً من الدراسات دمجت تقييم الالتهابات الغذائية مع التصوير القلبي الوعائي الموضوعي للكشف عن التغيرات القلبية الوعائية المبكرة لدى الأفراد المصابين بمرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD)4,11. ومن بين أقدم مظاهر الإصابة القلبية الأيضية وجود خلل وظيفي انبساطي في البطين الأيسر دون سريري، والذي يتم تقييمه بواسطة نسبة E/e′ المستمدة من دوبلر الأنسجة، والتي تعكس ارتفاع ضغط ملء البطين الأيسر وتمثل سمة مبكرة لاعتلال عضلة القلب السكري والأيضي12,13، بالإضافة إلى سماكة الطبقة الداخلية المتوسطة للشريان السباتي (CIMT)، وهي علامة بديلة معتمدة لتصلب الشرايين دون السريري وتتنبأ بشكل مستقل بالأحداث القلبية الوعائية المستقبلية14,15.

بالمقارنة مع التقييم القلبي الاستقلابي التقليدي، الذي يعتمد بشكل أساسي على القياسات الأنثروبومترية، والاختبارات البيوكيميائية الروتينية، وعوامل خطر القلب والأوعية الدموية المنعزلة، يدمج هذا البروتوكول تقييم الالتهابات الغذائية، وتحديد سمات المؤشرات الحيوية للالتهاب، وتقييم الوظيفة الانبساطية عن طريق تخطيط صدى القلب، وتصوير الشرايين السباتية بالموجات فوق الصوتية في سير عمل موحد واحد. يتيح هذا النهج المتكامل التقييم المتزامن للتعرض الغذائي، والالتهاب الجهازي، وإعادة تشكيل القلب والأوعية الدموية دون السريرية باستخدام تقنيات غير جراحية متاحة على نطاق واسع في سياقات الأبحاث السريرية. ورغم اقتراح مناهج متعددة الوسائط لتحسين توصيف الخلل الوظيفي المبكر في القلب والأوعية الدموية في الأمراض الاستقلابية، إلا أن بروتوكولات التنفيذ الموحدة لا تزال محدودة.

لاستكمال تقييم ملف الدهون التقليدي، يتضمن هذا البروتوكول أيضاً نسبة الدهون الثلاثية إلى كوليسترول البروتين الدهني عالي الكثافة (TG/HDL-C) ومؤشر تصلب الشرايين في البلازما (AIP)، والذي يُحسب كقيمة log (TG/HDL-C). يعكس AIP التوازن بين البروتينات الدهنية المسببة لتصلب الشرايين وتلك المضادة لتصلب الشرايين، وقد ظهر كعلامة بديلة لجزيئات البروتين الدهني منخفض الكثافة (LDL) الصغيرة والكثيفة، ومقاومة الإنسولين، والخلل الوظيفي البطاني، والمخاطر المتبقية لأمراض القلب والأوعية الدموية. وبناءً على ذلك، يوفر AIP تقييماً أكثر شمولاً لخلل شحميات الدم المسبب لتصلب الشرايين، وقد أظهر قدرة تمييزية جيدة لتحديد الأفراد المعرضين لزيادة مخاطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية، لا سيما أولئك الذين يعانون من اضطرابات أيضية مثل MASLD16,17.

بالإضافة إلى ذلك، يشتمل هذا البروتوكول على مجموعة من المؤشرات الحيوية الالتهابية الدوارة لمزيد من التوصيف للآليات البيولوجية التي تربط الإمكانات الالتهابية الغذائية بالإصابة القلبية الاستقلابية في مرض MASLD. وقد تم اختيار هذه المؤشرات الحيوية لأنها تؤدي أدواراً مركزية في استقطاب الكريات البيضاء، وتنشيط المناعة الفطرية، وإشارات الالتهاب والمضادات الالتهابية، والخلل الوظيفي البطاني، ومقاومة الإنسولين. ويوفر التقييم المتزامن لهذه الوسائط توصيفاً أكثر شمولاً للالتهاب الجهازي مقارنةً بـ CRP وحده، ويعزز الرؤية الميكانيكية للعلاقة بين العبء الالتهابي الغذائي والإصابة القلبية الوعائية المبكرة في مرض MASLD1,18,19.

وبناءً على ذلك، يوفر هذا البروتوكول منهجية موحدة وقابلة للتكرار لتقييم الارتباط بين القدرة الالتهابية للنظام الغذائي والتغيرات القلبية الاستقلابية المبكرة لدى البالغين المصابين بـ MASLD، وذلك من خلال دمج التقييم الغذائي، وتحديد ملف المؤشرات الحيوية الالتهابية، والتحاليل البيوكيميائية، وتخطيط صدى القلب، وتصوير الشريان السباتي بالموجات فوق الصوتية. ومن خلال دمج إجراءات قياس موحدة ونقاط تفتيش محددة مسبقاً لمراقبة الجودة، تم تصميم سير العمل هذا لتسهيل إمكانية التكرار بين الباحثين ومواقع الدراسة، مع دعم الأبحاث السريرية والترجمية حول المخاطر القلبية الاستقلابية المبكرة في حالات MASLD.

البروتوكول

تمت الموافقة على بروتوكول الدراسة من قبل لجان البحوث وأخلاقيات البحث المؤسسية في المركز الطبي الوطني "20 de Noviembre"، ومعهد الضمان الاجتماعي والخدمات الاجتماعية لموظفي الدولة (ISSSTE)، بمدينة مكسيكو، المكسيك (رقم الموافقة: 04-118-2025). يجب تنفيذ جميع الإجراءات وفقاً لإعلان هلسنكي واللوائح الوطنية المعمول بها والتي تحكم الأبحاث التي تشمل مشاركين بشريين. يجب الحصول على موافقة كتابية مستنيرة من جميع المشاركين قبل إدراجهم في الدراسة. كما يجب حماية سرية المشاركين باستخدام معرفات دراسة مشفرة لجميع البيانات السريرية والمخبرية والغذائية وبيانات التصوير.

1. استقطاب المشاركين وتقييم الأهلية

  1. استقطاب المشاركين
    1. استقطاب البالغين الذين تبلغ أعمارهم ≥18 سنة والمشتبه في إصابتهم بمرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD) في الفترة ما بين 2025 و2026.
    2. شرح أهداف الدراسة، وإجراءاتها، والمخاطر المحتملة، وتدابير السرية قبل التسجيل.
    3. الحصول على موافقة كتابية مستنيرة من كل مشارك قبل إجراء أي من إجراءات الدراسة.
  2. تأكيد الإصابة بـ MASLD
    1. إجراء تصوير بالموجات فوق الصوتية للبطن باستخدام الإجراءات المؤسسية الموحدة.
    2. تأكيد التشحم الكبدي من خلال تحديد زيادة في صدى الكبد مقارنة بقشرة الكلية، بالتزامن مع توهين صوتي خلفي.
    3. تشخيص MASLD من خلال تأكيد التشحم الكبدي ووجود عامل خطر قلبي أيضي واحد على الأقل وفقاً لمعايير التوافق الحالية.
      ملاحظة: يجب إجراء جميع فحوصات الموجات فوق الصوتية باستخدام بروتوكول الاستحواذ نفسه، وبالاستعانة بنفس أخصائي الأشعة الخبير قدر الإمكان لتقليل التباين المعتمد على المشغل.
  3. تقييم الأهلية
    1. إدراج المشاركين الذين يستوفون جميع معايير الأهلية المحددة مسبقاً والذين قدموا موافقة كتابية مستنيرة.
    2. استبعاد المشاركين الذين يتناولون الكحول بشكل كبير.
    3. استبعاد المشاركين المصابين بالتهاب الكبد الفيروسي (HBV أو HCV)، أو أمراض الكبد المناعية الذاتية، أو إصابات الكبد الناجمة عن الأدوية، أو أمراض الكبد الوراثية، أو الحوامل، أو المصابين بأورام خبيثة نشطة، أو قصور القلب غير المعوض، أو أي أمراض كبدية مزمنة أخرى قد تتداخل مع التقييم القلبي الأيضي.
      ملاحظة: حماية سرية المشاركين عن طريق تعيين معرف دراسة مشفر لكل مشارك، وإزالة الأسماء وأرقام السجلات الطبية والمعرفات الشخصية الأخرى من قواعد بيانات البحث، وتخزين صور تخطيط صدى القلب والموجات فوق الصوتية للشريان السباتي في قاعدة بيانات مؤسسية آمنة.

2. استبيان تكرار تناول الأغذية

  1. اختيار أداة التقييم الغذائي
    1. اختر استبيان تكرار تناول الأغذية (FFQ) شبه كمي مُصادق عليه ويكون مناسباً لمجتمع الدراسة.
      ملاحظة: استخدم استبيانات FFQs التي تم التحقق من صحتها مسبقاً مقابل استذكارات غذائية متكررة لمدة 24 ساعة أو سجلات غذائية. في هذا البروتوكول، تم استخدام استبيان ENSANUT شبه الكمي المكون من 140 بنداً لتقييم التناول المعتاد خلال الأيام السبعة الماضية20,21.
  2. تجهيز التقييم الغذائي
    1. قم بتدريب جميع القائمين على المقابلات باستخدام تعليمات مكتوبة وموحدة قبل البدء في استقطاب المشاركين.
    2. قم بتوحيد طريقة إدارة الاستبيان، وتقدير حجم الحصة، وتفسير الاستجابات، وتسجيل البيانات بين جميع القائمين على المقابلات.
  3. تطبيق استبيان تكرار تناول الأغذية (FFQ)
    1. أجرِ استبيان FFQ من خلال مقابلة شخصية وجهاً لوجه.
    2. وجّه المشاركين للإبلاغ عن تناولهم المعتاد من الأطعمة والمشروبات خلال الفترة المرجعية المحددة في استبيان FFQ.
    3. اشمل الأطعمة المستهلكة في كل من أيام الأسبوع وعطلات نهاية الأسبوع.
    4. استثنِ التغييرات الغذائية المؤقتة المرتبطة بالأمراض الحادة، أو دخول المستشفى، أو التدخلات العلاجية قصيرة المدى.
  4. تسجيل التناول الغذائي
    1. سجل استهلاك الطعام باستخدام فئات التكرار المحددة مسبقاً في استبيان FFQ.
    2. قدّر أحجام الحصص باستخدام أدوات منزلية موحدة، أو نماذج أطعمة، أو صور فوتوغرافية، أو أدلة مرجعية لحجم الحصص.
    3. استوضح بشأن الأطعمة غير المألوفة، أو أحجام الحصص، أو فئات التكرار دون التأثير على استجابات المشارك.
      ملاحظة: تحقق من جودة البيانات من خلال مراجعة كل استبيان FFQ مكتمل فور انتهاء المقابلة. حدد الاستجابات المفقودة أو الإجابات غير المتسقة، وعالج التناقضات مباشرة مع المشارك قبل إدخال البيانات في قاعدة بيانات الدراسة.
  5. حساب التناول الغذائي اليومي
    1. حوّل تكرارات الاستهلاك المبلغ عنها إلى متوسط تناول يومي (حصة/يوم).
    2. حوّل أحجام الحصص إلى جرامات أو مليلترات في اليوم وفقاً لدليل استبيان FFQ.
    3. احسب التناول اليومي من العناصر الغذائية باستخدام قاعدة بيانات تركيب الأغذية المناسبة وبرامج التحليل الغذائي.
    4. طبق إجراء حساب العناصر الغذائية نفسه على جميع المشاركين.
      نقطة توقف: احفظ استبيانات FFQ المكتملة بشكل آمن بعد التحقق من الجودة، وقم بمعالجتها لاحقاً لتحليل العناصر الغذائية وحساب مؤشر الالتهاب الغذائي (DII).

3. تقدير مؤشر الالتهاب الغذائي

ملاحظة: يُعد مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) خوارزمية مستمدة من الدراسات المرجعية لتقدير القدرة الالتهابية لمدخول الغذاء المعتاد بناءً على البيانات التي تم جمعها باستخدام أداة تقييم غذائية معتمدة8.

  1. تجهيز بيانات المدخول الغذائي
    1. تحويل جميع استجابات استبيان تكرار الغذاء (FFQ) إلى مدخولات غذائية يومية باستخدام قاعدة بيانات قياسية لتركيب الأغذية وبرنامج لتحليل القيم الغذائية.
    2. تطبيق إجراء حساب المغذيات نفسه على جميع المشاركين.
  2. اختيار المكونات الغذائية
    1. تحديد المكونات الغذائية المتاحة لحساب مؤشر الالتهاب الغذائي (DII).
    2. حساب DII باستخدام المكونات الغذائية التي تم رصدها بدقة فقط بواسطة استبيان FFQ المختار وقاعدة بيانات تركيب الأغذية.
    3. تطبيق المجموعة نفسها من المكونات الغذائية على جميع المشاركين.
      ملاحظة: لا يتم تعيين قيمة صفر للمكونات الغذائية التي لم يتم قياسها.
  3. حساب الدرجات المعيارية
    1. مقارنة مدخول كل مكون غذائي مع المتوسط المرجعي العالمي والانحراف المعياري المقابل الموضح في منهجية DII الأصلية8.
    2. حساب الدرجة المعيارية باستخدام المعادلة التالية:
    3. الدرجة المعيارية = (مدخول المشارك − المتوسط المرجعي العالمي) ÷ الانحراف المعياري المرجعي العالمي
  4. حساب المئويات المركزية
    1. تحويل كل درجة معيارية إلى مئوية مركزية وفقاً لمنهجية DII الأصلية.
    2. حساب المئوية المركزية باستخدام المعادلة التالية:
    3. المئوية المركزية = (المئوية × 2) − 1
  5. حساب درجات DII للمكونات
    1. ضرب المئوية المركزية في درجة التأثير الالتهابي المخصصة لكل مكون غذائي في قاعدة بيانات DII الأصلية8.
    2. تكرار الحساب لجميع المكونات الغذائية المتاحة.
    3. درجة DII للمكون = المئوية المركزية × درجة التأثير الالتهابي
  6. حساب مؤشر الالتهاب الغذائي الإجمالي
    1. جمع درجات DII للمكونات للحصول على درجة DII الإجمالية لكل مشارك.
    2. تفسير القيم السالبة على أنها نمط غذائي أكثر مضاداً للالتهاب.
    3. تفسير القيم الموجبة على أنها نمط غذائي أكثر محفزاً للالتهاب.
  7. تصنيف المشاركين
    1. ترتيب المشاركين وفقاً لدرجات DII الخاصة بهم.
    2. تقسيم المشاركين إلى أرباع بناءً على توزيع مجتمع الدراسة.
  8. إجراء ضبط الجودة
    1. استخدام استبيان FFQ نفسه، وقاعدة بيانات تركيب الأغذية نفسها، وبرنامج تحليل القيم الغذائية نفسه، وطريقة حساب DII نفسها لجميع المشاركين.
    2. مراجعة جميع السجلات الغذائية للتحقق من وجود معلومات مفقودة، أو مدخول طاقة غير منطقي، أو أخطاء في إدخال البيانات قبل التحليل.
    3. إعادة حساب DII بشكل مستقل لعينة عشوائية من المشاركين للتحقق من دقة الحسابات.
    4. توثيق جميع المكونات الغذائية المدرجة في حساب DII والإبلاغ عن المكونات التي لم تكن متاحة.

4. تقييم مرض MASLD

  1. تأكيد وجود تشحم الكبد كما ورد في 1.2.2.
    ملاحظة: كلما أمكن ذلك، يُفضل أن يقوم نفس أخصائي الأشعة المتمرس بإجراء جميع الفحوصات باستخدام معايير الحصول على الصور ذاتها لتقليل التباين المرتبط بمشغل الجهاز.
  2. تقييم استهلاك الكحول
    1. تقييم استهلاك الكحول باستخدام مقابلة سريرية معيارية.
    2. استبعاد المشاركين الذين يتجاوز استهلاكهم للكحول العتبات التشخيصية الحالية لمرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD).
  3. استبعاد الأسباب الثانوية لتشحم الكبد
    1. استبعاد المشاركين المصابين بالتهاب الكبد الفيروسي المزمن (HBV أو HCV).
    2. استبعاد المشاركين المصابين بأمراض الكبد ذات المناعة الذاتية، أو إصابات الكبد الناجمة عن الأدوية، أو أمراض الكبد الوراثية، أو الحوامل، أو المصابين بأورام خبيثة نشطة، أو غيرها من اضطرابات الكبد المزمنة التي قد تتداخل مع التقييم القلبي الأيضي.
  4. تقييم عوامل الخطر القلبية الأيضية
    1. تقييم مؤشر كتلة الجسم (BMI) وتصنيف زيادة الوزن أو السمنة عندما يكون BMI ≥25 kg/m2.
    2. تقييم داء السكري من النوع 2 باستخدام مستوى جلوكوز البلازما صائماً >125 mg/dL.
    3. تقييم الخلل الأيضي من خلال تأكيد وجود اثنين على الأقل من المعايير التالية: زيادة محيط الخصر، أو ضغط الدم ≥130/85 mmHg، أو الدهون الثلاثية ≥150 mg/dL، أو HDL-C <40 mg/dL لدى الرجال أو <50 mg/dL لدى النساء، أو جلوكوز البلازما صائماً 100–125 mg/dL أو HbA1c 5.7%–6.4%، أو ارتفاع مؤشرات مقاومة الإنسولين، مثل HOMA-IR.
  5. تشخيص MASLD عند تأكيد تشحم الكبد بالتزامن مع وجود عامل خطر قلبي أيضي واحد على الأقل وفقاً لمعايير التوافق الحالية.

5. تقييم المخاطر القلبية الاستقلابية

  1. الحصول على القياسات الديموغرافية والأنثروبومترية
    1. تسجيل عمر المشارك، وجنسه، وتاريخه الطبي، والأدوية الحالية، والأمراض القلبية الاستقلابية المشخصة، بما في ذلك داء السكري من النوع 2 وارتفاع ضغط الدم.
    2. قياس الطول ووزن الجسم باستخدام معدات معايرة.
    3. حساب مؤشر كتلة الجسم (BMI) عن طريق قسمة وزن الجسم (kg) على مربع الطول (m2).
    4. قياس محيط الخصر في منتصف المسافة بين الحافة السفلية للضلع الأخير والعرف الحرقفي باستخدام شريط قياس غير قابل للتمدد.
  2. تحديد المؤشرات البيوكيميائية لمخاطر القلب والاستقلاب باستخدام طرق المختبرات السريرية الآلية الروتينية.
    1. جمع عينات دم صائم وفقاً لإجراءات المختبر المؤسسية.
    2. قياس المؤشرات البيوكيميائية، بما في ذلك الكوليسترول الكلي، وHDL-C، وLDL-C، والدهون الثلاثية، وجلوكوز البلازما الصائم، وHbA1c، والأنسولين الصائم، باستخدام الفحوصات المخبرية السريرية الآلية الروتينية.
      ملاحظة: تحدد الفحوصات المخبرية السريرية الآلية عادةً الكوليسترول الكلي والدهون الثلاثية باستخدام مقايسات تلوينية إنزيمية؛ وHDL-C وLDL-C باستخدام مقايسات تلوينية إنزيمية متجانسة مباشرة؛ وجلوكوز البلازما الصائم باستخدام طريقة الهيكسوكينيز الإنزيمية؛ وHbA1c باستخدام تحليل الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC)؛ والأنسولين الصائم باستخدام المقايسة المناعية الكيميائية المضيئة.
    3. حساب تقييم النموذج الاستتبابي لمقاومة الأنسولين (HOMA-IR).
    4. حساب نسبة الدهون الثلاثية إلى كوليسترول HDL (TG/HDL-C).
    5. حساب مؤشر تصلب الشرايين في البلازما (AIP) كما يلي:
      AIP = log (TG/HDL-C)
  3. قياس المؤشرات الحيوية الالتهابية في البلازما
    ملاحظة: يجب التعامل مع العينات البيولوجية البشرية وفقاً للوائح السلامة البيولوجية المؤسسية والاحتياطات القياسية. ارتدِ معدات الوقاية الشخصية (PPE) المناسبة، واستخدم مواد معقمة وتقنيات تعقيم، وانقل العينات في حاويات محكمة الإغلاق، وتخلص من النفايات البيولوجية وفقاً للوائح المؤسسية.
    1. الحصول على عينات الدم ومعالجتها
      1. جمع 15 mL من الدم الوريدي الصائم من الوريد المرفقي باستخدام تقنية تعقيم في أنابيب مناسبة تحتوي على مضاد تخثر.
      2. قلب الأنابيب بلطف من 8 إلى 10 مرات. ثم إجراء الطرد المركزي عند 2,000 × g لمدة 10 min عند 4 °C.
      3. نقل السائل الطافي من البلازما إلى أنبوب معقم وموسوم وتقسيمه إلى حصص حسب الحاجة. تُخزن الحصص عند −80 °C حتى التحليل.
    2. إجراء تحليل ELISA
      1. تحضير المعايير وتخفيفات العينات. إضافة 100 µL من المعايير، والضوابط، وعينات البلازما المخففة بشكل مناسب في مكررات إلى الفجوات المخصصة والمطلية بالأجسام المضادة.
      2. التحضين لمدة 2.5 h في درجة حرارة الغرفة، مع التقليب اللطيف. سحب المحتويات وغسل الفجوات 3 مرات باستخدام 300 µL من PBS يحتوي على 0.05% polysorbate 20 (PBST)، بأس هيدروجيني pH 7.2–7.4، مع إزالة السائل المتبقي بعد الغسلة الأخيرة.
      3. إضافة 100 µL من الجسم المضاد الكاشف والتحضين لمدة 1 h في درجة حرارة الغرفة. غسل الصفيحة، ثم إضافة 100 µL من streptavidin-HRP والتحضين لمدة 30–60 min في درجة حرارة الغرفة. تكرار خطوة الغسيل.
      4. إضافة 100 µL من ركيزة TMB لتطوير اللون. التحضين لمدة 20–30 min في درجة حرارة الغرفة في الظلام. إضافة محلول الإيقاف.
      5. قياس الامتصاصية عند 450 nm باستخدام قارئ الصفائح الدقيقة. حساب تركيزات المادة المراد تحليلها من منحنى المعايير.
      6. تحليل كل عينة بلازما في مكررات وحساب القيمة المتوسطة للتحليل الإحصائي.
      7. إدراج معايير المعايرة وعينات مراقبة الجودة في كل عملية تحليلية.
      8. التحقق من أن القياسات المكررة تستوفي معيار معامل التباين المحدد مسبقاً. تكرار القياسات إذا تم تجاوز المعيار أو في حالة اكتشاف أخطاء تقنية.
      9. تسجيل النتائج النهائية باستخدام معرفات مشفرة للمشاركين. الحفاظ على سرية العينات طوال فترة التحليل المخبري.
  4. تقييم الوظيفة الانبساطية للبطين الأيسر عن طريق تخطيط صدى القلب
    1. تحضير المشارك والمعدات
      1. السماح للمشارك بالراحة بهدوء لمدة 10 min على الأقل قبل الحصول على الصور.
      2. وضع المشارك في وضعية الاستلقاء الجانبي الأيسر وتوصيل أقطاب تخطيط كهربائية القلب (ECG) لمزامنة الدورة القلبية.
      3. الحصول على جميع الصور أثناء التنفس الهادئ مع تقليل حركة التنفس إلى أدنى حد.
      4. استخدام نظام موجات فوق صوتية عالي الدقة مجهز بمحول مصفوفة طوري 2–5 MHz قادر على إجراء تصوير دوپلر بالموجة النبضية وتصوير دوپلر للأنسجة.
      5. الحفاظ على تماثل معدات الموجات فوق الصوتية، وإعدادات المحول، ومعلمات الحصول على الصور طوال فترة الدراسة كلما أمكن ذلك.
        ملاحظة: إجراء جميع الفحوصات وفقاً للتوصيات الحالية للجمعية الأمريكية لتخطيط صدى القلب والجمعية الأوروبية للتصوير القلبي الوعائي12,22.
    2. الحصول على صور تخطيط صدى القلب القياسية
      1. الحصول على مناظر قياسية للمحور الطولي بجانب القص، والمحور القصير بجانب القص، وأربعة حجرات قمي، وحجرتين قميتين، ومحور طويل قمي.
      2. تحسين الكسب (gain)، والعمق، وعرض القطاع، ومعدل الإطارات قبل الحصول على قياسات دوپلر.
    3. قياس التدفق الميترالي
      1. وضع حجم عينة دوپلر بالموجة النبضية بين أطراف الشرفات الميتراالية في منظر الأربع حجرات القمي.
      2. تسجيل سرعات التدفق عبر الميترالي المبكرة (E) والمتأخرة (A).
      3. الحصول على ثلاث دورات قلبية متتالية على الأقل للتحليل.
    4. إجراء تصوير دوپلر للأنسجة
      1. تفعيل تصوير دوپلر للأنسجة بالموجة النبضية في منظر الأربع حجرات القمي.
      2. وضع حجم العينة بالتتابع عند الحلقة الميتراالية الحاجزية والجانبية.
      3. الحفاظ على شعاع الموجات فوق الصوتية موازياً قدر الإمكان لحركة عضلة القلب.
      4. تسجيل ثلاث دورات قلبية متتالية عند كل موضع حلقي.
    5. حساب السرعات الحلقية
      1. قياس سرعات e′ الحاجزية والجانبية.
      2. حساب متوسط ثلاث دورات قلبية لكل موقع حلقي.
      3. حساب متوسط سرعة e′ الحلقية.
    6. حساب نسبة E/e′
      1. حساب متوسط نسبة E/e′ عن طريق قسمة سرعة E الميتراالية على متوسط سرعة e′ الحلقية.
      2. الإبلاغ عن نسب E/e′ الحاجزية والجانبية بشكل منفصل عند توفرها.
        ملاحظة: لمراقبة الجودة، يتم الحصول على ثلاث دورات قلبية متتالية على الأقل أثناء التنفس المستقر وحساب متوسط ثلاث قياسات مستقلة لكل متغير من متغيرات تخطيط صدى القلب. تُخزن جميع الصور الرقمية للتحليل غير المتصل (offline) بواسطة مشغلين مدربين اثنين على الأقل يكونان معميين عن البيانات المخبرية والغذائية، ويتم تقييم إمكانية تكرار النتائج بين المشغلين قبل التحليل النهائي للبيانات.
  5. تقييم تكوين اللويحات العصبي تحت الإكلينيكي عن طريق قياس سمك الطبقة الداخلية والمتوسطة للشريان السباتي
    1. تحضير المشارك والمعدات
      1. إجراء تصوير الشريان السباتي بالموجات فوق الصوتية باستخدام نظام موجات فوق صوتية عالي الدقة مجهز بمحول وعائي ذو مصفوفة خطية 7–15 MHz.
      2. السماح للمشارك بالراحة في وضعية الاستلقاء على الظهر لمدة 10 min على الأقل قبل الحصول على الصور.
      3. وضع الرقبة في تمدد طفيف وتدوير الرأس بزاوية 30–45° تقريباً بعيداً عن الجانب الذي يتم فحصه.
      4. تجنب تدوير الرأس المفرط للحفاظ على هندسة الوعاء وتحسين جودة الصورة.
      5. استخدام نفس نظام الموجات فوق الصوتية، والمحول، وإعدادات الحصول على الصور، وبرنامج التحليل لجميع المشاركين كلما أمكن ذلك.
    2. إجراء تصوير الشريان السباتي بالموجات فوق الصوتية
      1. فحص الشرايين السباتية اليمنى واليسرى بشكل مستقل.
      2. تحديد الشريان السباتي المشترك، والبصلة السباتية، والشريان السباتي الداخلي، والشريان السباتي الخارجي في المستوى المستعرض.
      3. تدوير المحول للحصول على صورة طولية ذات واجهات محددة بوضوح بين التجويف والطبقة الداخلية (lumen–intima) وبين الطبقة المتوسطة والبرانية (media–adventitia).
      4. تحسين عمق الصورة، والمنطقة البؤرية، والكسب العام قبل أخذ القياسات.
    3. قياس سمك الطبقة الداخلية والمتوسطة للشريان السباتي (CIMT)
      1. تعريف CIMT على أنه المسافة بين الحافة الرائدة لواجهة التجويف–الطبقة الداخلية والحافة الرائدة لواجهة الطبقة المتوسطة–البرانية.
      2. اختيار جزء خالٍ من اللويحات من الجدار البعيد للشريان السباتي المشترك القاصي على بعد 10 mm تقريباً من البصلة السباتية.
        ملاحظة: لا تدرج البصلة السباتية أو الشريان السباتي الداخلي في قياس CIMT الأساسي للشريان السباتي المشترك ما لم تكن هذه المناطق من نتائج الدراسة المحددة مسبقاً.
    4. حساب CIMT
      1. الحصول على ثلاثة قياسات على الأقل من كل شريان سباتي.
      2. حساب متوسط CIMT للشرايين السباتية اليمنى واليسرى بشكل منفصل.
      3. حساب المتوسط العام لـ CIMT كمتوسط للقيم المتوسطة اليمنى واليسرى.
      4. تسجيل أقصى قيمة لـ CIMT الخالية من اللويحات في كل جانب كمتغير وصفي ثانوي.
    5. تفسير CIMT
      1. تحليل CIMT بشكل أساسي كمتغير مستمر.
      2. تطبيق حد CIMT محدد مسبقاً وخاص بالدراسة (<0.7 mm أو ≥0.7 mm) فقط للتحليلات الفئوية التمثيلية، عند الاقتضاء.
      3. تسجيل اللويحات السباتية بشكل منفصل عن قياسات CIMT.
        ملاحظة: استخدم حد CIMT بقيمة ≥0.7 mm للتحليلات التمثيلية فقط؛ واستخدم قيماً مرجعية خاصة بالعمر والجنس عند توفرها. ضمان مراقبة الجودة باستخدام أخصائيي تصوير صوتي مدربين، وصور مشفرة، وتحليل مستقل ومعمى بواسطة محققين اثنين على الأقل. تقييم الموثوقية بين الملاحظين وداخل الملاحظ الواحد باستخدام ICCs مع فواصل ثقة 95%، وتكرار القياسات عندما لا تكون الواجهات الشريانية مرئية بشكل كافٍ.

6. التحليل الإحصائي

  1. تقدير حجم العينة
    1. قم بتقدير حجم العينة المطلوب وفقاً للهدف الرئيسي للدراسة وحجم التأثير المتوقع.
    2. استخدم مستوى دلالة (αقيمة احتمالية (p-value) قدرها 0.05 وقوة إحصائية لا تقل عن 80%.
  2. قَيِّم توزيع المتغيرات المستمرة باستخدام اختبار ملاءمة للتوزيع الطبيعي، مثل اختبار شابيرو-ويلك (Shapiro–Wilk test).
  3. اختيار الاختبارات الإحصائية
    1. تحليل المتغيرات المستمرة ذات التوزيع الطبيعي باستخدام اختبار Student's ت-اختبار.
    2. تحليل المتغيرات المستمرة غير الموزعة توزيعاً طبيعياً باستخدام اختبار مان-ويتني U اختبار.
    3. قارن بين أكثر من مجموعتين باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) أو اختبار كروسكال-واليس (Kruskal–Wallis)، حسبما يكون مناسباً.
    4. حلل المتغيرات الفئوية باستخدام اختبار مربع كاي أو اختبار فيشر الدقيق.
    5. قيّم الارتباطات بين المتغيرات ذات التوزيع الطبيعي باستخدام تحليل ارتباط بيرسون.
    6. تقييم الارتباطات بين المتغيرات ذات التوزيع غير الطبيعي باستخدام تحليل ارتباط رتب سبيرمان23,24,25.
  4. التعديل للمتغيرات المربكة
    1. أجرِ تحليلات الانحدار متعدد المتغيرات، عند الاقتضاء، لتقييم الارتباط المستقل بين المؤشر الالتهابي الغذائي والنتائج القلبية الاستقلابية.
    2. يجب تعديل نماذج الانحدار لتشمل المتغيرات المربكة ذات الصلة سريرياً، بما في ذلك العمر، والجنس، ومؤشر كتلة الجسم، ومحيط الخصر، والأمراض المصاحبة، وحالة التدخين، والنشاط البدني، والأدوية التي قد تؤثر على المؤشرات الحيوية للالتهاب.26.
  5. لننظر في حالة ثنائية الجوانب p قيمة <دلالة إحصائية عند 0.05.
  6. تقرير التحليلات الإحصائية
    1. عرض المتغيرات المستمرة في صورة متوسط حسابي ± الانحراف المعياري أو الوسيط (المدى الربيعي)، حسبما يكون مناسباً.
    2. يتم عرض المتغيرات الفئوية في شكل تكرارات ونسب مئوية.
    3. يجب تقديم تقديرات التأثير جنباً إلى جنب مع فواصل الثقة بنسبة 95% المقابلة لها، كلما كان ذلك قابلاً للتطبيق.

النتائج

تم تأكيد إصابة جميع المشاركين بمرض MASLD عن طريق التصوير بالموجات فوق الصوتية للكبد وفقًا للمعايير القياسية. كانت مجموعة الدراسة متطابقة من حيث العمر والجنس، وكانت الأمراض المصاحبة الأكثر شيوعًا هي داء السكري من النوع 2، وارتفاع ضغط الدم الشرياني الجهازي، واعتلال الدهون، كما هو ملخص في الجدول 1. البيانات الخام التي تستند إليها التحليلات التمثيلية متوفرة في الملف التكميلي 1.

كتطبيق نموذجي لهذا البروتوكول، تم تحليل مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) كمؤشر على القدرة الالتهابية للنظام الغذائي. وقد أظهرت التحليلات الاستكشافية وجود ارتباط إيجابي متوسط بين DII ونسبة E/e′ (معامل ارتباط سبيرمان ρ = 0.50, p < 0.05)، في حين لم يُلاحظ أي ارتباط معنوي بين DII وسمك intima-media للشريان السباتي (CIMT) (معامل ارتباط سبيرمان ρ = 0.40, p = 0.81؛ الشكل 1). وبناءً على ذلك، يجب تفسير الارتباط بين DII وCIMT على أنه نتيجة استكشافية غير معنوية.

أظهرت التحليلات البيوكيميائية التمثيلية أن المشاركين المصابين بـ MASLD أظهروا ارتفاعاً في مستويات جلوكوز البلازما، وHbA1c، وتركيزات الثلاثي جليسيريد، وزيادة في مخاطر القلب والأوعية الدموية، وهو ما انعكس في ارتفاع نسب الثلاثي جليسيريد إلى كوليسترول HDL (TG/HDL-C) ومؤشر تصلب الشرايين في البلازما. كما تم تقييم تصلب الشرايين دون السريري بشكل أكبر من خلال تقسيم المشاركين وفقاً لـ CIMT. وأظهرت التحليلات التمثيلية أن زيادة CIMT لم تكن مرتبطة بوزن الجسم، أو مؤشر كتلة الجسم، أو محيط الخصر، ولكنها كانت مرتبطة بوجود MASLD (الجدول 2).

تتضح قابلية تطبيق البروتوكول بشكل أكبر من خلال معايير تصنيف المشاركين المحددة مسبقاً. فقد مثل المشاركون الذين تم تعيينهم في الربع الرابع الأعلى من مؤشر الالتهاب الغذائي (Q4) المجموعة الفرعية التي تعاني من أكبر عبء التهابي غذائي، بينما مثل أولئك الذين تم تعيينهم في الربع الأول (Q1) أدنى مستوى من التعرض الالتهابي. وبالمثل، صُنِّف المشاركون الذين لديهم CIMT ≥0.7 mm على أنهم يعانون من زيادة في تصلب الشرايين تحت الإكلينيكي، بينما أشارت قيم E/e′ >14 إلى ارتفاع ضغط امتلاء البطين الأيسر والخلل الوظيفي الانبساطي. وتوفر هذه العتبات المحددة مسبقاً إطاراً معيارياً لتفسير النتائج الغذائية والوعائية والقلبية، وتسهل إجراء مقارنات قابلة للتكرار لمخاطر التمثيل الغذائي القلبي عبر مجموعات المشاركين.

figure-results-1
الشكل 1: علاقات تمثيلية بين مؤشر الالتهاب الغذائي والمقاييس القلبية الاستقلابية المبكرة. (A) الارتباط بين مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) ونسبة E/e′، وهي علامة تخطيط صدى القلب لضغط امتلاء البطين الأيسر. (B) الارتباط بين DII وسمك الطبقة الداخلية والمتوسطة للشريان السباتي (CIMT)، والتي تم تحليلها كمتغير مستمر. استُخدمت عتبة CIMT المحددة مسبقاً بـ 0.7 mm فقط للتحليلات الفئوية التمثيلية ولا ينبغي تفسيرها كنقطة فصل تشخيصية عالمية. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

بدون MASLDمع MASLDالقيمة الاحتمالية p-value
(n = 10)(n = 15)
العمر (years) 42 (37 – 48)41 (39 – 43)0.37
الجنس الذكري n (%)4 (40.0)8 (53.3)0.4
جلوكوز الصيام (mg/dL)88 (83 – 94)105 (98 – 125)0.01
HbA1c5.9 (5.5 - 6.1)6.4 (6.0 – 7.2)0.02
TG (mg/dL)120 (74 – 147)219 (108 – 297)0.02
HDLc (mg/dL)41 (37 – 46)48 (30 – 57)0.43
نسبة TG/HDL-C2.5 (1.8 – 4.9)5.1 (2.6 – 6.7)0.04
AIP0.32 (0.24 – 0.41)0.42 (0.35 – 0.62)0.04
CRP (mg/dL)0.8 (0.4 – 1.0)1.1 (0.2 – 1.3)0.23

الجدول 1: الخصائص الديموغرافية والكيميائية الحيوية والقلبية الاستقلابية التمثيلية وفقاً لحالة MASLD. الخصائص الديموغرافية الأساسية والمعايير الكيميائية الحيوية والقلبية الاستقلابية التمثيلية في المشاركين غير المصابين بـ MASLD والمصابين بـ MASLD. يتم عرض المتغيرات المستمرة في شكل وسيط (المدى الربيعي)، والمتغيرات الفئوية في شكل n (%). أُجريت مقارنات المجموعات باستخدام اختبار Student's t-test أو اختبار Mann–Whitney U للمتغيرات المستمرة، واختبار Fisher's exact للمتغيرات الفئوية. الاختصارات: MASLD = مرض الكبد الدهني المرتبط بخلل الوظائف الاستقلابية؛ HbA1c = الهيموغلوبين السكري؛ TG = الدهون الثلاثية؛ HDL-C = كوليسترول البروتين الدهني عالي الكثافة؛ AIP = مؤشر تصلب الشرايين في البلازما؛ CRP = البروتين التفاعلي C.

تكون التصلب العصيدي المبكرتصلب الشرايين المتقدمالقيمة الاحتمالية (p-value)
قياس سمك intima-media للشريان السباتي < 0.7 (العدد = 18)سمك البطانة الداخلية للشريان السباتي ≥ 0.7 (العدد = 7)
الوزن (كجم) 73.4 ± 18.070.0 ± 10.60.4
مؤشر كتلة الجسم (كجم/م2) 30.0 ± 5.2429.0 ± 4.430.46
محيط الخصر (سم)90.5 ± 7.596.5 ± 2.890.48
مرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي8 (44.4)7 (100)0.01

الجدول 2: الخصائص الأنثروبومترية التمثيلية وفقاً لسماكة الطبقة الداخلية المتوسطة للشريان السباتي.الخصائص الأنثروبومترية التمثيلية ومعدل انتشار مرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD) مصنفة وفقاً لسماكة الطبقة الداخلية المتوسطة للشريان السباتي (CIMT). تم تصنيف المشاركين إلى فئتي تصلب الشرايين تحت الإكلينيكي المبكر (CIMT <0.7 mm) أو زيادة تصلب الشرايين تحت الإكلينيكي (CIMT ≥0.7 mm). عُرضت المتغيرات المستمرة في صورة المتوسط ± الانحراف المعياري، وعُرضت المتغيرات الفئوية في صورة n (%). أُجريت مقارنات المجموعات باستخدام اختبار Student's t-test، أو اختبار Mann–Whitney U test، أو اختبار مربع كاي (chi-square test)، حسبما كان مناسباً. الاختصارات: BMI = مؤشر كتلة الجسم؛ WC = محيط الخصر؛ CIMT = سماكة الطبقة الداخلية المتوسطة للشريان السباتي.

الملف التكميلي 1: البيانات الخام المستخدمة في التحليلات الموصوفة في هذه الدراسة. يرجى النقر هنا لتنزيل هذا الملف.

المناقشة

توفر الطرق الموصوفة هنا سير عمل موحد للتحقق مما إذا كانت الأعباء القلبية الاستقلابية والمسببة لتصلب الشرايين مرتبطة بمرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الاستقلابي (MASLD)، وذلك بناءً على فرضية أن الخلل الاستقلابي المرتبط بالكبد يساهم في التصلب الشرياني المبكر27,28. يضع سير العمل المقترح إجراءات موحدة لاختيار المشاركين، والتقييم الغذائي، وقياس المؤشرات الحيوية، والتصوير القلبي الوعائي، ومراقبة الجودة، والتحقق من صحة البيانات لتحسين الاتساق المنهجي وقابلية التكرار. وتُجرى جميع القياسات، كلما أمكن ذلك، باستخدام معدات متطابقة، ومعايير اكتساب موحدة، وموظفين مدربين، وتحقق مكرر، وتحليل صور تعمى فيه هوية العينات لتقليل التباين المعتمد على المشغل بين الباحثين والمؤسسات. ويعد التقييم الغذائي باستخدام استبيان تكرار الطعام (FFQ) المنظم والمدعوم بالصور مكوناً أساسياً لأن حساب مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) يعتمد على دقة المدخول الغذائي المبلغ عنه ذاتياً. كما أن استخدام حصص مرجعية موحدة ووسائل مساعدة بصرية يقلل من انحياز الذاكرة ويحسن القابلية للمقارنة بين الأفراد29,30. وبالمثل، فإن تقدير مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) باستخدام قاعدة بيانات مرجعية عالمية تضم 45 معياراً غذائياً يتيح تقييماً موحداً لإمكانية الالتهاب الغذائي عبر مجموعات سكانية مختلفة8,9. وقد يؤدي الخطأ في تصنيف المدخول الغذائي في هذه المرحلة إلى إضعاف الارتباطات مع النتائج القلبية الاستقلابية. علاوة على ذلك، فإن دمج المؤشرات البيوكيميائية، وتقييم وظيفة الانبساط للبطين الأيسر عن طريق تخطيط صدى القلب (E/e′)، وسمك الطبقة الداخلية الوسطى للشريان السباتي (CIMT) يوفر تقييماً شاملاً للمخاطر القلبية الاستقلابية المبكرة. ويقلل الالتزام الصارم بالبروتوكولات الموصى بها في الإرشادات من التباين المعتمد على المشغل ويضمن قياسات قلبية وعائية موثوقة وقابلة للتكرار12,15,22.

من المهم التأكيد على أن مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) مخصص لتوصيف التباين بين الأفراد في القدرة الالتهابية للنظام الغذائي، وليس لتشخيص مرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD) أو للتنبؤ بشكل مستقل بالأمراض القلبية الاستقلابية. بناءً على ذلك، لا يُتوقع أن يظهر جميع الأفراد المصابين بـ MASLD درجات مرتفعة في مؤشر DII، كما أن ارتفاع قيمة DII لا يشير بالضرورة إلى وجود تشوهات قلبية استقلابية متقدمة. وبدلاً من ذلك، يستخدم هذا البروتوكول مؤشر DII كمتغير تقسيم لاستقصاء ما إذا كانت زيادة العبء الالتهابي الغذائي ترتبط بتغيرات قلبية وعائية تحت إكلينيكية تدريجية عبر طيف مرض MASLD. ولتعزيز الجدوى التطبيقية، يدمج البروتوكول استبيان تكرار الغذاء (FFQ) مكيفاً وفقاً لمجتمع الدراسة، مما يسهل تنفيذه في الإعدادات السريرية. ورغم أن أدوات التقييم الغذائي الشاملة ترصد نطاقاً أوسع من العناصر الغذائية، إلا أن استبيانات FFQ المبسطة قد أظهرت صلاحية مقبولة لتقدير DII والأنماط الالتهابية المرتبطة بالنظام الغذائي31.

يتضمن البروتوكول أيضاً إجراءات معيارية لضبط الجودة لتحسين قابلية التكرار أثناء التقييمات المختبرية والتصويرية. حيث تساهم عمليات جمع الدم المعيارية، ومعالجة العينات في الوقت المناسب، وظروف التخزين المناسبة، وتحديد العينات بنظام التكويد، والقياسات المختبرية المكررة، وإدراج عينات ضبط الجودة في تقليل التباين التحليلي. وبالمثل، فإن توحيد وضعية المريض، ومحاذاة Doppler، ومستويات الحصول على الصور، وحساب متوسط دورات قلبية متعددة يقلل من التباين في قياسات تخطيط صدى القلب، بينما يؤدي تقييم CIMT ثنائي الجانب باستخدام جزء معياري من الجدار البعيد للشريان السباتي المشترك الخالي من اللويحات، والمراجعة المستقلة والمعماة للصور، إلى تحسين قابلية تكرار القياسات الوعائية. هذا سير العمل قابل للتكيف مع بيئات بحثية مختلفة، مما يسمح للمراكز ذات البنية التحتية المختبرية المحدودة بتنفيذ التقييم الغذائي، والتقييم الأنثروبومتري، وتقييم القلب والأوعية الدموية القائم على الموجات فوق الصوتية قبل دمج مؤشرات حيوية جزيئية أو التهابية إضافية، وذلك بناءً على الموارد المتاحة وأهداف الدراسة.

تتمثل إحدى نقاط القوة الإضافية لسير العمل هذا في قدرته على تحديد المشاركين ذوي الأنماط الظاهرية المتناقضة، مثل الأفراد الذين يتبعون نمطاً غذائياً يحفز الالتهابات بشكل كبير ولكن لا تظهر عليهم أدلة على وجود اختلالات في التمثيل الغذائي القلبي، أو على العكس، أولئك الذين لديهم قيم DII منخفضة نسبياً على الرغم من وجود ضعف مثبت في التمثيل الغذائي القلبي. قد توفر مثل هذه النتائج رؤية حول التفاعلات المعقدة بين الأنماط الغذائية، وحساسية الإنسولين، والسمنة الحشوية، والنشاط البدني، والعوامل الوراثية وفوق الجينية، والعلاج الدوائي، وجودة النوم، والمحددات البيئية الأخرى للصحة القلبية الاستقلابية. كما قد تساهم الدراسات الطولية التي تطبق هذا البروتوكول الموحد في توضيح العلاقة بين العبء الالتهابي الغذائي وتطور الأمراض القلبية الاستقلابية في حالات MASLD.

يجب مراعاة العديد من محددات هذا البروتوكول؛ حيث إن التصميم المقطعي يمنع الاستنتاج السببي فيما يتعلق بالعلاقة بين القدرة الالتهابية للنظام الغذائي والإصابة القلبية الاستقلابية. بالإضافة إلى ذلك، يعكس مؤشر الالتهاب الغذائي (DII) الأنماط الغذائية المعتادة بدلاً من الاستجابات الالتهابية الحادة، كما أن تقييم النظام الغذائي المبلغ عنه ذاتياً يكون عرضة لانحياز التذكر32. وقد يؤدي الاعتماد على البروتين التفاعلي C (CRP) كعلامة التهابية جهازية إلى التقليل من تقدير التغيرات الالتهابية الطفيفة مقارنة بتوصيف السيتوكينات الأكثر شمولاً33. وبالمثل، تعتمد إمكانية تكرار قياس سمك intima-media للشريان السباتي (CIMT) على القطعة الشريانية التي يتم تقييمها، واختيار الجدار، وتوقيت الدورة القلبية، وعدد القياسات التي تم الحصول عليها. لذلك، يفضل إجراء تحليل مستمر لـ CIMT وتفسير النتائج بناءً على المئويات الخاصة بالمجتمع المدروس، بينما يجب اعتبار عتبة ≥0.7 mm المستخدمة في النتائج التمثيلية نقطة فصل تحليلية محددة مسبقاً للدراسة بدلاً من كونها عتبة سريرية عالمية. ومن المهم الإشارة إلى أن هذا البروتوكول مخصص كمسار عمل للتقييم المبكر لمخاطر القلب والاستقلاب وليس كخوارزمية تشخيصية أو تنبؤية. وبخلاف نهج الفرز القلبي الاستقلابي التقليدي للمرضى المصابين بمرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الاستقلابي (MASLD)، والذي يعتمد بشكل أساسي على القياسات الأنثروبومترية، وتقييم ضغط الدم، وحالة سكر الدم، والاختبارات الكيميائية الحيوية المتعلقة بالكبد، وتوصيف الدهون لتقدير مخاطر القلب والأوعية الدموية34,35، فإن مسار العمل هذا يدمج خمسة مجالات متكاملة: (1) العبء الالتهابي الغذائي المقاس بواسطة DII، (2) التوصيف الكيميائي الحيوي القلبي الاستقلابي، (3) المؤشرات الحيوية الالتهابية الدورية، (4) التقييم بالموجات فوق الصوتية للقلب لوظيفة الانبساط في البطين الأيسر باستخدام نسبة E/e′، و(5) CIMT كعلامة على تصلب الشرايين تحت الإكلينيكي المبكر. وتوفر هذه التقييمات المتكاملة معاً إطاراً موحداً وغير جراحي وقابلاً للتكرار لتحديد التغيرات الاستقلابية والوعائية المبكرة قبل تطور أمراض القلب والأوعية الدموية الواضحة سريرياً، مع كونها مكملة لعمليات الفرز القلبي الاستقلابي التقليدية وليست بديلاً عنها1,3,12,15,34,35,36,37,38,39.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تعارض في المصالح للإفصاح عنه.

شكر وتقدير

يقر المؤلفون بتلقي دعم مالي من البرنامج المؤسسي E015.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
طقم مقايسة ELISA Abcamab65328ELISA Assay Kits, Colorimetric, Abcam for 96-well plates
قارئ الصفائح الدقيقة لقياس الامتصاصية، SunriseTecan 30190079وضع الكشف: Absorbance؛ نطاق الطول الموجي: 340 nm - 750 nm؛ الطول الموجي للمرشح: 405 nm, 450 nm, 492 nm, 620 nm؛ تنسيق الصفيحة: 96 well plates
جهاز قياس ضغط الدمHomecareANEROIDE 1000سوار من القطن 100% قابل للتعديل الذاتي مع خطاف، كم مؤشر شرياني للبالغين.
جهاز الموجات فوق الصوتية لقياس CIMTPhilips EPIQ7L12-3 Broadband Linear Array Transducerمحول طاقة خطي (Broadband Linear Array Transducer)

المراجع

  1. Rinella ME, et al. A multisociety Delphi consensus statement on new fatty liver disease nomenclature. J Hepatol. 2023;79(6):1542-1556.
  2. Younossi ZM, et al. The global epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease and nonalcoholic steatohepatitis: a systematic review. Hepatology. 2023;77(4):1335-1347.
  3. Byrne CD, Targher G. NAFLD: a multisystem disease. J Hepatol. 2015;62(1 Suppl).
  4. Paik JM, et al. Changes in the global burden of chronic liver diseases from 2012 to 2017: the growing impact of NAFLD. Hepatology. 2020;72(5):1605-1616.
  5. Monteiro CA, Cannon G, Lawrence M, Costa Louzada ML. Ultra-processed foods, diet quality, and health using the NOVA classification system. Food and Agriculture Organization of the United Nations; Rome; 2019.
  6. Schwingshackl L, et al. Adherence to healthy dietary patterns and risk of chronic diseases: an updated umbrella review of meta-analyses of prospective cohort studies. Nutrients. 2021;13(10):3395.
  7. Medina-Remón A, et al. Polyphenol intake from a Mediterranean diet decreases inflammatory biomarkers related to atherosclerosis: a substudy of the PREDIMED trial. Br J Clin Pharmacol. 2017;83(1):114-128.
  8. Shivappa N, et al. Designing and developing a literature-derived, population-based Dietary Inflammatory Index. Public Health Nutr. 2014;17(8):1689-1696.
  9. Shivappa N, et al. Dietary inflammatory index and cardiovascular risk and mortality: a meta-analysis. Nutrition. 2019;59:56-64.
  10. Vissers LET, et al. The relationship between the Dietary Inflammatory Index and risk of cardiovascular disease, cardiovascular mortality, and all-cause mortality: a prospective cohort study. Am J Clin Nutr. 2017;105(5):1113-1119.
  11. Mazidi M, et al. Dietary inflammatory index and cardiometabolic risk in US adults. Atherosclerosis. 2018;276:23-27.
  12. Nagueh SF, et al. Recommendations for the evaluation of left ventricular diastolic function by echocardiography: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. J Am Soc Echocardiogr. 2016;29(4):277-314.
  13. Paulus WJ, Tschöpe C. A novel paradigm for heart failure with preserved ejection fraction: comorbidities drive myocardial dysfunction and remodeling through coronary microvascular endothelial inflammation. J Am Coll Cardiol. 2013;62(4):263-271.
  14. Lorenz MW, et al. Prediction of clinical cardiovascular events with carotid intima-media thickness: a systematic review and meta-analysis. Circulation. 2007;115(4):459-467.
  15. Touboul PJ, et al. Mannheim carotid intima-media thickness and plaque consensus (2004-2006-2011): an update on behalf of the Advisory Board of the 3rd, 4th and 5th Watching the Risk Symposia. Cerebrovasc Dis. 2012;34(4):290-296.
  16. Dobiásová M. Atherogenic index of plasma [log(triglycerides/HDL-cholesterol)]: theoretical and practical implications. Clin Chem. 2004;50(7):1113-1115.
  17. Niroumand S, et al. Atherogenic index of plasma: a marker of cardiovascular disease. Med J Islam Repub Iran. 2015;29:240.
  18. Tilg H, Moschen AR. Evolution of inflammation in nonalcoholic fatty liver disease: the multiple parallel hits hypothesis. Hepatology. 2010;52(5):1836-1846.
  19. Francque SM, et al. Non-alcoholic fatty liver disease: a patient guideline. JHEP Rep. 2021;3(5):100322.
  20. Denova-Gutiérrez E, et al. Validity of a food frequency questionnaire to assess food intake in Mexican adolescent and adult population. Salud Publica Mex. 2016;58(6):617-628.
  21. Denova-Gutiérrez E, et al. Relative validity of a food frequency questionnaire to identify dietary patterns in an adult Mexican population. Salud Publica Mex. 2016;58(6):608-616.
  22. Lang RM, et al. Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 2015;16(3):233-270.
  23. Cohen J. Statistical power analysis for the behavioral sciences. 2nd ed. Lawrence Erlbaum Associates; Hillsdale, NJ; 1988.
  24. Shapiro SS, Wilk MB. An analysis of variance test for normality: complete samples. Biometrika. 1965;52(3-4):591-611.
  25. Benjamini Y, Hochberg Y. Controlling the false discovery rate: a practical and powerful approach to multiple testing. J R Stat Soc Series B Stat Methodol. 1995;57(1):289-300.
  26. Greenland S, Pearce N. Statistical foundations for model-based adjustments. Annu Rev Public Health. 2015;36:89-108.
  27. Targher G, et al. Increased prevalence of cardiovascular disease in type 2 diabetic patients with non-alcoholic fatty liver disease. Diabet Med. 2006;23(4):403-409.
  28. Lonardo A, et al. Hypertension, diabetes, atherosclerosis and NASH: Cause or consequence J Hepatol. 2018;68(2):335-352.
  29. Willett W. Nutritional epidemiology. 3rd ed. Oxford University Press; New York; 2013.
  30. Thompson FE, Subar AF. Dietary assessment methodology. In: Coulston AM, Boushey CJ, Ferruzzi MG, Delahanty LM, editors. Nutrition in the prevention and treatment of disease. 4th ed. Academic Press; London; 2017:5-48.
  31. Cavicchia PP, et al. A new dietary inflammatory index predicts interval changes in serum high-sensitivity C-reactive protein. J Nutr. 2009;139(12):2365-2372.
  32. Freedman LS, et al. Pooled results from 5 validation studies of dietary self-report instruments using recovery biomarkers for energy and protein intake. Am J Epidemiol. 2014;180(2):172-188.
  33. Pearson TA, et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease: application to clinical and public health practice: a statement for healthcare professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association. Circulation. 2003;107(3):499-511.
  34. European Association for the Study of the Liver, European Association for the Study of Diabetes, European Association for the Study of Obesity. EASL-EASD-EASO clinical practice guidelines on the management of metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease. J Hepatol. 2024;81(3):492-542.
  35. Arnett DK, et al. 2019 ACC/AHA guideline on the primary prevention of cardiovascular disease: a report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Clinical Practice Guidelines. Circulation. 2019;140(11).
  36. Ruiz-Canela M, Bes-Rastrollo M, Martínez-González MA. The role of dietary inflammatory index in cardiovascular disease, metabolic syndrome and mortality. Curr Cardiol Rep. 2016;18(7):60.
  37. Targher G, Day CP, Bonora E. Risk of cardiovascular disease in patients with nonalcoholic fatty liver disease. N Engl J Med. 2010;363(14):1341-1350.
  38. Calder PC, et al. Dietary factors and low-grade inflammation in relation to overweight and obesity. Br J Nutr. 2011;106(Suppl 3).
  39. Estruch R, et al. Primary prevention of cardiovascular disease with a Mediterranean diet supplemented with extra-virgin olive oil or nuts. N Engl J Med. 2018;378(25).

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

مؤشر الالتهاب الغذائيالتشحم الكبديالتصوير بالموجات فوق الصوتية للشريان السباتيالتقييم بتخطيط صدى القلبالمؤشرات الحيوية الالتهابيةنسبة الدهون الثلاثية إلى الكوليسترول مرتفع الكثافةالمؤشر المسبب لتصلب الشرايين

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.