يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

بديل منخفض التكلفة لفحص التفضيل الاجتماعي في سمك الزرد (Danio rerio) باستخدام مهمة السباحة الحرة ذات الخزان المفتوح ذات الثلاث غرف

194 مشاهدة

DOI:

10.3791/70610

أغسطس 7, 2026

في هذه المقالة

ملخص

تم تكييف مهام التفضيل الاجتماعي متعددة الغرف من القوارض إلى سمك الزرد، مما يسهل دراسة السلوك الاجتماعي في الكائنات النموذجية. يقوم هذا البروتوكول بالتحقق من مهمة منخفضة التكلفة من ثلاث غرف في حوض مفتوح باستخدام كاميرات الويب وبرامج مفتوحة المصدر لقياس التفضيل الاجتماعي لأسماك الزرد، مما يجعله متاحا للبحث والتدريس الجامعي.

الملخص

فهم السلوك الاجتماعي هو مسعى أساسي في أبحاث السلوكيات العصبية، وغالبا ما تدرس باستخدام مهام التفضيل الاجتماعي. هذه المهام، التي تم تطويرها في الأصل للقوارض ثم تم تكييفها لاحقا لأسماك الزرد، تستخدم على نطاق واسع لفحص الديناميكيات الاجتماعية والاستجابات. تتكون مهمة السباحة الحرة ذات الخزان المفتوح ذات الثلاث غرف (OTFST) من خزان مركزي محاط بخزانين محفزين، مع كاميرا موضوعة لتسجيل سلوك الموضوع في الخزان المركزي وفيلم استقطاب وإضاءة خلفية لتحسين جودة الفيديو وصحته. يستخدم هذا البروتوكول إعدادا منخفض التكلفة مع كاميرات ويب USB ومواد متوفرة بسهولة. نسلط الضوء على استخدام DeepLabCut، وهي أداة مفتوحة المصدر لتقدير وضعية بدون علامات تتيح تتبع حركات الحيوانات بدقة بالفيديو وتوفر بيانات زمنية موضعية لتحليل مقاييس مختلفة. تؤكد الجلسات التجريبية قدرة النظام على التقاط سلوك تفضيل اجتماعي قوي. يوفر هذا النهج الاقتصادي منصة سهلة الوصول وقابلة للتوسع للمختبرات التي تدرس التفاعل الاجتماعي في سمك الزرد، كما أن مرونة وبساطة جهاز OTFST ذو الثلاث غرف يجعله مناسبا لمختبرات التدريس الجامعية ومشاريع البحث.

المقدمة

التفضيل الاجتماعي هو ميل الفرد للانخراط أو البحث أو تجنب المحفزات الاجتماعية، وهو جانب أساسي من السلوك الاجتماعي يلعب دورا حاسما في إقامة الروابط والتسلسلات الهرمية داخل مجموعات الحيوانات، بما في ذلك البشر 1,2,3,4. فهم التفضيل الاجتماعي أمر أساسي لتوصيف الآليات العصبية والسلوكية التي تقوم عليها التفاعلات الاجتماعية. تشير أبحاث سابقة إلى أن نقص التفضيلات الاجتماعية يمكن أن يرتبط باضطرابات النمو العصبي والنفسية 5,6,7,8. يمكن لنماذج الحيوانات أن توفر رؤى حول الأساس البيولوجي للسلوك الاجتماعي وتساعد في تطوير أدوات ترجمية لتشخيص وعلاج الإعاقات الاجتماعية. توفر هذه النماذج الحيوانية، التي تتراوح من القوارض9،10 إلى الأنواع المائية11،12، أطرا مفيدة للاكتشاف.

تم استخدام القوارض لأول مرة في أبحاث سلوكية في أوائل القرن التاسع عشر،13، بسبب تشابهها الفسيولوجي مع البشر14،15. بينما تمت دراسة سلوكيات مثل العدوان في البداية، ظلت المقاييس المنهجية للتفضيل الاجتماعي محدودة. سد الباحثون هذه الفجوة من خلال تطوير مهمة التفضيل الاجتماعي ذات الثلاث غرف، التي قدمها نادلر وآخرون. يتكون الجهاز من ثلاث غرف مترابطة. عادة، تحتوي غرفة جانبية على نوع جديد بينما تبقى الحجرة الأخرى فارغة. يسمح للمشارك باستكشاف جميع الغرف بحرية، حيث يتم تسجيل الوقت في كل غرفة وتقييمه كمؤشر تفضيلي. هذا الجهاز والإجراء، إلى جانب عدة تنويعات، اكتسب شعبية واسعة واستخدم لدراسة جوانب مختلفة من الأداء الاجتماعي 17,18,19 والعجز الاجتماعي في نماذج القوارض لاضطراب طيف التوحد 5,20,21. ومع ذلك، فإن الدراسات على القوارض أكثر تكلفة وتتطلب مساحة كبيرة. وبالتالي، اتجه العديد من الباحثين بدلا من ذلك إلى استخدام الأنواع المائية في أبحاث السلوكيات العصبية.

تمتلك الأنواع المائية، وأبرزها سمك الزرد (Danio rerio)، مجموعة سلوكية معقدة، بما في ذلك التفاعلات الاجتماعية المعقدة22. نظرا لفائدتها كنموذج بحثي طبي حيوي وأهمية التفاعل الاجتماعي في بيئتها السلوكية، توفر أسماك الزرد إطارا ذا معنى للاستجابات الاجتماعية يمكن استخدامه مقارنة بالبشر23. أصبحت أسماك الزرد أكثر شعبية في أبحاث علم الأعصاب السلوكية لأنها غير مكلفة في الصيانة وتتطلب مساحة احتجاز صغيرة نسبيا، مما يجعل هذا النوع نموذجا عمليا وفعالا من حيث التكلفة للدراسات واسعة النطاق للسلوك الاجتماعيوالتفضيل. في بعض الدراسات، تم استخدام تكوين حوض مجاور لدراسة التفاعلات الاجتماعية في الأنواع المائية25,26; ومع ذلك، وفر هذا الترتيب قدرة إنتاجية محدودة إلى حد ما لتقييم التفضيل الاجتماعي حيث تم تقديم محفز واحد فقط. تم معالجة هذا القيد من خلال تكييف مهمة الفئران ذات الثلاث حجرات لسمكة الزرد في عام 2018. تكون الجهاز المعدل لمهمة السباحة الحرة ذات الخزان المفتوح المكون من ثلاث غرف (OTFST) من خزان أكريلاميد واحد مقسم بحواجز ثابتة من الأكريلاميد لتوفير منطقة بداية محايدة وغرفتين جانبيتين، تحتوي كل غرفة جانبية على نوع مألوف أو جديد من نفس النوع. لقياس التفضيل الاجتماعي، تم تسجيل الوقت التراكمي الذي قضى بالقرب من كل حجرة جانبية، مما أظهر أن التعرض للإيثانول وإزالة السام2 قللا من تفضيل الجدة في سمك الزرد27. بينما يسمح اختبار التفاعل الاجتماعي ذو الثلاث غرف بتفاعلات متعددة الوسائط المعقدة بين الشخص المعني ونفس النوع من الاختبار من خلال الأساليب البصرية والكيميائية واللمسية والصوتية، فإن استخدام غرف منفصلة لاختبار OTFST المائي ذو الثلاث حجرات يقلل من التفاعل بين الموضوع والحيوانات المنبهة إلى الشكل البصري فقط. ورغم أن هذا التفاعل في النمط الواحد قد يكون أقل مصداقية بيئية، إلا أنه يوفر مزيدا من التحكم التجريبي ويعزز البساطة للمشاريع التي ينفذها الباحثون الجامعيون. في الأدبيات، استكشف باحثون مختلفون منذ ذلك الحين تكيفات لجهاز OTFST ذو الثلاث حجرات للتحقيق في العوامل الجينية والبيئية التي تؤثر على السلوك الاجتماعي في سمك الزرد 28,29,30,31,32.

التعديل الحالي لجهاز OTFST ذو الثلاث غرف مصمم ليكون نموذجا متعدد الاستخدامات وصديقا للطلاب الجامعيين. مختبر فيش لاب، وهو مختبر جامعي كامل، أنشأ واستخدم هذا الإعداد وأثبت فعاليته كأداة عالية الإنتاجية للتحقيق في التفضيل الاجتماعي في أسماك الزرد. استكشفت الدراسات التي تستخدم هذا الترتيب عدة جوانب لتفضيل أسماك الزرد الاجتماعية استجابة للتلاعب بمتغيرات مستقلة مختلفة. أظهرت الدراسة الأولى أن سمك الزرد يمكنه اكتشاف المحفزات الاجتماعية الحية مقابل المحاكاة33، بينما بحثت الثانية في تفضيل الشعاب الراسخة مقارنة بالأسماك الجديدة34. درست أحدث دراسة قدرة سمك الزرد على التمييز بين الشواب المتأثرة كيميائيا وغير المقلقة35. تتناول هذه الدراسات معا جوانب مختلفة من السلوك الاجتماعي، بما في ذلك الواقعية، والألفة، واكتشاف التهديدات، مع إظهار أوجه مشتركة في تفضيلات الجمع وتقييم الاستجابات لخطر الافتراس. ومع ذلك، استخدم النظام المستخدم في هذه الدراسات السابقة كاميرات IP رقمية مثبتة على تجهيزات كاميرا احترافية، ونظام رفوف مائية مخصص، وبرمجيات خاصة لالتقاط الفيديو والتحليلات، مع تكلفة إجمالية قد تكون باهظة على المحققين والمدربين ذوي الميزانيات التشغيلية الصغيرة. مع ظهور البرمجيات مفتوحة المصدر وكاميرات الويب عالية الجودة المعتمدة على USB، أصبح إصدار نسخة منخفضة التكلفة ممكنا الآن للباحثين الراغبين في استخدام هذه التقنية مع الباحثين الجامعيين، بسعر إجمالي (حوالي 2000 دولار أمريكي؛ باستثناء الكمبيوتر) أقل بكثير من تكلفة النظام عالي التكلفة (حوالي 20000+ دولار أمريكي، باستثناء الكمبيوتر).

يوضح البروتوكول التالي تطوير وتطبيق نسخة منخفضة التكلفة من OTFST ثلاثي الحجرات لأسماك الزرد. تجعله ميسورته التكلفة وبساطته وتنوعه أداة مفيدة للمختبرات الصغيرة أو البيئات التعليمية ذات التمويل المحدود. عند دمجها مع الإسكان منخفض التكلفة، مثل أكواريوم 10 جالونات المتوفرة شائعا، فإن تكلفة الإعداد الحالي أقل بكثير للنشر والصيانة. بالإضافة إلى ذلك، يوفر استخدام برامج الوصول المفتوح مثل نظام البث المفتوح (OBS) لتسجيل الجلسات التجريبية وتطبيقات التتبع المختلفة (مثل DeepLabCut وSLEAP وغيرها) إطارا منخفض التكلفة وسهل الوصول لالتقاط الفيديو وتوليد بيانات السلاسل الزمنية للتفاعلات الاجتماعية لأسماك الزرد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية (IACUC) في جامعة كريستوفر نيوبورت (البروتوكول #2025-23).

1. الحيوانات

  1. احصل على سمك البري قصير الزعنفة البالغ 23,36,37، رغم أنه يمكن استخدام سلالات أخرى. بدلا من ذلك، احصل على الأجنة وتربيها داخليا.
  2. ضع الأسماك في أحواض قائمة بذاتها بسعة 10 جالون (38 لتر) بكثافة تقارب سمكتين لكل جالون (3.8 لتر) من الماء. جهز الخزانات بمرشحات حيوية نشطة، وأحجار هواء، وسخانات غاطسة. بدلا من ذلك، أسماك المنزل على نظام رفوف مائي.
  3. الحفاظ على معايير جودة المياه ضمن النطاقات التالية: pH 7.0–8.0، التوصيل 400–700 ميكرو ث، درجة الحرارة 25–27 درجة مئوية، <40 جزء في المليون نترات، <0.2 جزء في المليون نتريتات، و0.01–0.1 جزء في المليون أمونيا.
  4. حافظ على الحيوانات تحت فترة ضوئية مظلمة لمدة 12 ساعة: 12 ساعة، وأطعمه مرة يوميا برقائق تجارية.
  5. اختر الحيوانات عشوائيا من هذه الأحواض لتعيينها التجريبي.
  6. عند الانتهاء من التجربة، أعد استخدام الحيوانات لأغراض بحثية أو تعليمية أخرى، أو قم بإعدامها بالغمر في ترايسين مخزن بجرعة 250-500 ملغ/مل لمدة 30 دقيقة، تليها طريقة فيزيائية (مثل قطع الرأس) لضمان الموت. استخدم الحيوانات التي تم قتلها في الاختبارات الحيوية اللاحقة و/أو التحليلات الكيميائية العصبية.

2. جهاز وبرمجيات السباحة الحرة ذات الخزان المفتوح بثلاث حجرات

  1. بناء غرف الاختبار
    1. قم بإزالة الحواف البلاستيكية بعناية من قاع كل حوض سعة 5.5 جالون. استخدم أداة دوارة مع عجلة قطع لشق البلاستيك عند الزوايا لتسهيل إزالته. بمجرد شق الحواف البلاستيكية، افصل البلاستيك عن لاصق السيليكون باستخدام سكين معجون مشترك.
    2. لتخفيف الإضاءة الخلفية، غط الجزء الخلفي من جميع الأحواض الثلاثة، والطرف الأيسر لأحد الدبابات، والطرف الأيمن من الخزان الآخر ببطانة رف لاصقة بيضاء. اترك الأطراف مكشوفة على الخزان التي ستستخدم كغرفة مركزية.
    3. ضع خطا أفقيا أسود للدلالة على مستوى الحشو على عمق 4.5 سم أسفل الحافة العلوية في مقدمة كل غرفة باستخدام علامة مينا أو بشريط تخطيط رسومي أسود.
    4. اقطع ورقة واحدة من فلتر الاستقطاب لتناسب الجانب الجانبي المكشوف من كل خزان جانبي. وجه صفائح الترشيح 90° مع بعضها البعض. استخدم شريط شفاف على جميع الحواف الأربعة لمنع دخول الماء إلى الفراغ بين زجاج الحوض ومادة الفلتر.
      ملاحظة: الاتجاه المنحني للمرشحات المستقطبة سيمنع الحيوانات المنبهة في غرفة منبهات جانبية من رؤية الحيوانات (أو محفزات أخرى) في غرفة التحفيز الجانبية الأخرى، مع السماح لها برؤية الموضوع. يمكن للشخص في الحوض المركزي رؤية المحفزات البصرية في كلا الحجرتين الجانبين.
    5. قم ببناء قاعدة بولي فينيل كلوريد (PVC) لمحاذاة الموقع الدقيق للخزانات على طاولة الإعداد. اقطع أسفل القاعدة من لوح PVC الأبيض بسماكة 1/4 بوصة (0.635 سم) بحجم 21 سم × 122.5 سم، وقطع القطع النهائية من لوح تقليم PVC 1×2 بطول 21 سم.
    6. قم باختبار تركيب الأطراف على القاعدة مع تثبيت الخزانات الثلاثة في مكانها. تأكد من سهولة إدخال وإزالة ألواح الفاصل (أدناه) وتأكد من أن الخزانات الجانبية لا تلتصق بإحكام بجوانب الخزان المركزي. بعد اكتمال التركيب الاختباري، اربط القطع النهائية بقاعدة PVC باستخدام أسمنت PVC.
    7. لصنع أغطية شفافة لكل غرفة، قم بقطع صفيحة البولي كربونات إلى ثلاث قطع بحجم الحافة الخارجية للحافة العلوية لخزان سعة 5.5 جالون (40 سم × 21 سم). اقطع قناة ربيت (6 مم × 4 مم) حول حافة كل غطاء لتوفير وضع آمن للغطاء فوق الحجرة.
    8. غط الغرف بالأغطية كلما تم وضع الحيوانات في الحجرات. ضع سخان غاطس وحجر هوائي متصلين بمضخة هواء حوض أثناء احتجاز الحيوانات في غرفها لتوفير التحكم في درجة الحرارة والتهوية. استخدم صمام هواء ثلاثي الاتجاهات لموازنة تدفق الهواء عبر جميع الأحجار الهوائية الثلاثة.
    9. اصنع فواصل بسيطة معتمة لوضعها بين الحجرة المركزية وكل غرفة جانبية للتحكم في متى يتعرض المستخدمون للمحفزات الاجتماعية بصريا عن طريق تغليف ورقتين من ورق الورق A4 فاتح اللون.
    10. جهز الفواصل للتعليق والإزالة عن بعد عن طريق ثقب ثقبين بعمق 85 مم و125 مم على طول حافة 210 مم لكل صفيحة مصفحة.
    11. اقطع طولين من الخيط عالي القوة بطول 75 سم وامرر الخيط عبر كل ثقب واربط الأطراف المتبقية معا، لربط الورقتين في نير مركزي.
    12. اقطع خيطا طوله 6 أمتار. اربط أحد طرفي الخيط الذي يبلغ طوله 6 أمتار باليوك لإنشاء خط مركزي مربوط، وامرر الطرف الحر من الخيط عبر بكرة عين دوارة.
    13. ثبت بكرة العين الدوارة على السقف فوق الخزان الأوسط وتأكد من أن نهاية الخيط معلقة على الخارج من الإعداد التجريبي (الشكل 1A).
  2. بناء نظام الإضاءة
    1. اصنع إطارا من لوح PVC الأبيض بسماكة 1/4 بوصة (0.635 سم) لإضاءة اللوحة. اقطع قطعتين نهائيتين (10 سم × 31.5 سم) وقطعة علوية وأخرى سفلية (10 سم × 122 سم). اختبار تركيب قطع الإطار معا بحيث يتناسب اللوح داخل الإطار. بعد اختبار التركيب، قم بربط قطع الإطار باستخدام أسمنت PVC.
    2. اطلب من كهربائي مؤهل إضافة سلك بثلاثة موصلات إلى ضوء اللوحة.
    3. اطلب كهربائيا مؤهلا توصيل جهاز التعتيم المنزلق للتحكم في مقبس الإخراج في الصندوق المقاوم للماء. وصل ضوء اللوحة بهذا المقبس.
    4. قم بضبط جهاز التعتيم المنزلق لضبط سطوع الإضاءة الخلفية إلى 350 لوكس. املأ الغرف بالماء وحرك جهاز التعتيم المنزلق لضبط الساطع في مقدمة الغرف إلى 15 لوكس.
      ملاحظة: يجب على الباحثين التحقق من الإضاءة قبل وأثناء وبعد الدراسة لضمان الحفاظ على إعدادات السطوع.
  3. بناء الستارة وإطار الكاميرا
    1. جهز طاولة الاختبار مع ضوء اللوحة، ولوحة قاعدة الخزان، والغرف الثلاث. ضع وضبط عمودي القماش عموديا بحيث يتناسب كل منهما بإحكام من الأرض إلى السقف، على بعد لا يقل عن 75 سم من مقدمة الخزانات.
    2. اصنع جيب علوي لكل ستارة عن طريق طي أحد طرفي الغطاء أكثر من 60 سم وخياطة غرزة مستقيمة بطول 6 سم من الطية العلوية لتكوين جيب يمكن لجزء الإطار أن ينزلق فيه.
    3. قس أبعاد الأجزاء المتقاطعة والمثبتة لإعداد الإطار وفقا لعرض وعمق المنطقة المستخدمة في الإعداد.
      ملاحظة: في الإعداد الحالي في مختبر الأسماك، تم وضع أعمدة القماش الرأسية على بعد 146.5 سم من الجدار الخلفي في زاوية المختبر. عمود الغطاء الداخلي موضوع على بعد 6.5 سم من الجدار الجانبي، بينما عمود الغطاء الخارجي على بعد 142.5 سم من الجدار الجانبي.
    4. تم قطع ثلاثة أقسام من أنابيب أنابيب معدنية كهربائية (EMT) بقطر 143 سم لاستخدامها كأقسام تثبيت لجوانب الإطار. مرر أحد الأقسام عبر الجيب العلوي للستارة المتحركة وضعه أفقيا على ارتفاع 190 سم فوق الأرض.
    5. ثبت القسم على عمود القماش الخارجي باستخدام مشبك T في أحد الطرفين والمقبس المطبوع ثلاثي الأبعاد المخصص في الطرف الآخر. ثبت المقبس المطبوع ثلاثي الأبعاد على الجدار الخلفي باستخدام براغي. ثبت القسمين الآخرين على عمود الغطاء الداخلي.
    6. مرر الجزء العلوي من الجيب العلوي لإحدى الستائر الثابتة وضعه على ارتفاع 190 سم فوق الأرض. قم بتثبيته على عمود القماش الداخلي باستخدام مشبك T في أحد الطرفين والمقبس المطبوع ثلاثي الأبعاد في الطرف الآخر.
    7. ثبت المقبس المطبوع ثلاثي الأبعاد على الجدار الجانبي باستخدام البراغي. ضع القسم النهائي للتثبيت على ارتفاع 120 سم فوق الأرض وثبته بطريقة مشابهة لقسمي التثبيت الآخرين.
    8. اقطع جزءا آخر من قناة EMT بطول 127 سم ليستخدم كقسم تثبيت لمقدمة الإطار. مرر هذا القسم عبر الجيب العلوي للستارة الثابتة الثانية وركبها على ارتفاع 193 سم فوق الأرض عن طريق تثبيت كل طرف على أعمدة القماش باستخدام مشبك T في كل طرف.
    9. اقطع الجزء المتبقي من أنبوب EMT بقطر 145 سم ليستخدم كقضيب تثبيت الكاميرا. ضع هذا القسم أفقيا على ارتفاع 88 سم فوق الأرض لمحاذاة الكاميرات مع مركز الخزانات. ضع أحد الأطراف في مقبس مطبوع ثلاثي الأبعاد، مثبت على الحائط، واستخدم المشابك المتقاطعة المخصصة المطبوعة ثلاثية الأبعاد لتثبيت قضيب الكاميرا بإحكام على أعمدة القماش (الشكل 1B).
  4. بناء إعداد الكاميرا
    1. ثبت حامل كاميرا واحد على قضيب الكاميرا بحيث تتوافق المراكز الأفقية والعمودية للكاميرا مع المراكز الأفقية والعمودية المقابلة لغرفة الوسط.
      ملاحظة: يمكن تركيب كاميرات إضافية أمام كل غرفة جانبية إذا رغب الباحثون في الحصول على فيديو رقمي لاستجابات الحيوانات الحية المستخدمة كمحفزات بصرية. أبسط إعداد يتضمن وضع كاميرا واحدة لالتقاط فيديو لغرفة التجربة المركزية. بالنسبة للمحفزات الاجتماعية الحية في غرف التحفيز، قد يرغب الباحثون أيضا في جمع فيديو للغرف.
    2. ثبت كل كاميرا على عمود ملولب لكل حامل كاميرا. اضبط كل كاميرا بحيث تكون الصورة مركزة حول منطقة المراقبة في غرفتها الخاصة.
    3. ثبت كابلات USB لكل كاميرا على شريط الكاميرا باستخدام الأحزمة أو الأربطة لمنع تدلي الأسلاك، مما قد يسبب اختلاط الكاميرات.
    4. اقطع جزءا من رفوف الأسلاك بطول 140 سم وربطه عموديا على الجزء الخارجي من مقدمة الإطار لمنع الكاميرات من أن تخرج عن المحاذاة. قم بتركيب "قفص الكاميرا" باستخدام مشابك T مثبتة على أعمدة القماش المشمع (القماش العلوي).
      ملاحظة: يمكن تركيب قفص كاميرا ثان داخل الإطار لمنع خروج الكاميرات عن المحاذاة؛ قد يحتاج جزء صغير من شبكة الأسلاك إلى إزالة إذا كان مقدمة الكاميرات "مغلقة" لمنع انسداد صور الدبابة.
  5. تحميل وتكوين برنامج الاستحواذ - استوديو البث المفتوح (OBS)
    1. قم بتحميل OBS وثبته على جهاز كمبيوتر محلي يعمل بنظام ويندوز. شغل OBS Studio وشغل معالج التكوين التلقائي لتحسين الإعدادات لاحتياجات التسجيل المحددة، وموارد العتاد، وظروف الشبكة.
      ملاحظة: هذه الأداة متاحة تحت معالج التكوين التلقائي > أدوات اللعبة.
    2. تحقق من الإعدادات الأساسية قبل إعداد الكاميرا. اضبط دقة القاعدة (Canvas) لتتناسب مع دقة العرض، وضبط دقة الإخراج (المعدلة) على دقة التسجيل (مثل 720 بكسل).
    3. أنشئ مشهدا بالنقر بزر الفأرة الأيمن في مربع المشاهد (أو استخدم العلامة العرضية في الأسفل). حدد اسما للموقع. استخدم المشهد لتحديد تخطيط الجدول.
    4. أضف مصدرا جديدا بالنقر بزر الفأرة الأيمن على مربع المصادر (أو استخدم رمز الجمع في الأسفل). اختر جهاز التقاط الفيديو لإضافة كاميرا ويب. خصص لكل كاميرا اسما مميزا (مثلا: "يسار الكاميرا"، "مركز الكاميرا"، "الكاميرا يمين"). كرر هذه العملية للحصول على كاميرات أو مصادر إضافية حسب الحاجة.
    5. مصادر الموقع وتغيير الحجم في نافذة المعاينة. تأكد من أن الكاميرا مرئية من خلال التأكد من أنها مدرجة فوق المصادر الأخرى في قائمة المصادر . لمركز عرض الكاميرا على القماش، اختر المصدر في قائمة المصادر (سيظهر مربع أحمر للمحيط)، واضغط CTRL+D (من المركز إلى الشاشة).
    6. املأ الشاشة بالكامل بمصدر بالضغط على CTRL+F (ملاءمة للشاشة) أو CTRL+S (تمديد إلى الشاشة)، إذا رغبت. قم بقص المصدر بالضغط المستمر على مفتاح Alt أثناء سحب صندوق الإطار. تحقق من القص بالتأكد من أن الحواف تتحول إلى اللون الأخضر.
    7. قم بضبط خصائص الفيديو مثل السطوع والتباين عن طريق النقر المزدوج على الكاميرا المحددة في قائمة المصادر واختيار تكوين الفيديو. عدل الإعدادات باستخدام قائمة الخصائص .

3. الاختبارات السلوكية

  1. التكيف
    1. املأ جميع الغرف الثلاث بالماء من خزانات السكن. ضع حواجز معتمة بين كل غرفة واتركها في مكانها طوال فترة التكيف الكاملة. انقل أحد الموضوعين إلى غرفة التجربة المركزية ودعه يتكيف لمدة ساعة واحدة على الأقل قبل الاختبار.
      ملاحظة: تم تحديد فترة التكيف للنتائج التمثيلية عند 3 ساعات. فترة التكيف ضرورية للحيوانات للتعافي من أي ضغط نقل مؤقت والتكيف مع بيئة الغرفة قبل الاختبارات السلوكية.
    2. في بداية فترة التكيف، ضع المحفزات الاجتماعية في غرف التحفيز الجانبية. قم بتمركز المنبهات الاجتماعية الصناعية في غرفة المنبهات اليسرى وانقل مجموعة صغيرة من 4 أسماك (ذكران وأنثى متشابهتان في الحجم والعمر والألفة) إلى غرفة التحفيز اليمنى.
      ملاحظة: تم تثبيت مواقع المنبهات الاجتماعية الاصطناعية والمحفزات الاجتماعية الحية في البروتوكول الحالي، حيث لم تكتشف الدراسات السابقة33,34 أي تأثير لموقع المنبه باستخدام OTFST. التوازن المضاد في هذه الحالة يتطلب مضاعفة عدد الحيوانات المستخدمة في البحث بشكل غير ضروري، وهو ما يتعارض مع "3Rs" في أبحاث الحيوانات. يوفر هذا البروتوكول مرونة في طبيعة المحفزات التي سيتم اختبارها، مثل النماذج الثابتة، الأنواع التعايش أو الجديدة، وغيرها.
    3. أثناء التكيف، قم بتزويد جميع الغرف التي تحتوي على حيوانات حية بسخان غاطس (مضبوط على 26 درجة مئوية)، وحجر فقاعات متصل بمضخة هواء الحوض، وغطاء خزان للحفاظ على ظروف احتجاز مستقرة. قم بإزالة السخانات وأحجار الفقاعات قبل بدء جلسة تجريبية.
  2. الاختبارات التجريبية
    1. تحقق من حالة نشاط المحفزات الاجتماعية التي يتم اختبارها في كل من الدبابات الجانبية وموضوع الاختبار في الخزان المركزي. استخدم الكاميرا الوحيدة في الخزان الأوسط لتسجيل الفيديو لكل موضوع اختبار.
      ملاحظة: النتائج الممثلة في هذا البروتوكول هي تكرار حالة واحدة من فيلكي وآخرون لاختبار تفضيل سمك الزرد بين المحفزات الاجتماعية منخفضة الدقة (النماذج المتنقلة) والمحفزات الاجتماعية عالية الدقة (الجواء الحية).
    2. افتح استوديو OBS لبدء تسجيل الجلسة. قم بتغيير حجم عرض الكاميرا الوسطى لملء الشاشة عن طريق النقر والسحب على زوايا الفيديو. اختر بدء التسجيل تحت قسم التحكم في أسفل يمين الشاشة.
    3. فور بدء التسجيل، قم بإزالة الحواجز المعتمة عبر نظام البكرة-الخيط. استمر في التسجيل لمدة 10 دقائق ودع المشارك يتعرض في نفس الوقت لكلا المحفزات الاجتماعية أثناء تحركه بحرية داخل الحجرة التجريبية المركزية.
    4. أنه الجلسة باختيار إيقاف التسجيل تحت التحكم. يمكنك الوصول إلى الجلسات المسجلة باختيار ملف في القائمة العلوية اليسرى واختيار عرض التسجيلات من القائمة المنسدلة.
      ملاحظة: توفر الفيديوهات الناتجة بيانات غير منظمة مناسبة لمجموعة متنوعة من التحليلات.
    5. انقل الأسماك الحية إلى الأحواض التخزينية، وأخرج الماء من جميع الغرف الثلاث، واشطفه جيدا بالماء (تجنب دخول الماء بين الأفلام المستقطبة)، ورش كل غرفة بحمض الستريك بنسبة 5٪ للتعقيم، واترك الغرف تجف في الهواء طوال الليل، واشطف في بداية اليوم التجريبي التالي قبل أن تعيد إلى طاولة الاختبار.

4. الحصول على بيانات منظمة للتحليلات

  1. اختر تطبيق لتحليل الحركة (مثل DeepLabCut؛ انظر https://www.mackenziemathislab.org/deeplabcut). قم بتثبيت DeepLabCut على الكمبيوتر، باتباع دليل المستخدم في https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/installation.html. يرجى الرجوع إلى معلومات البرنامج المختار ودليل المستخدم لمزيد من التوجيهات إذا لم تكن تستخدم DeepLabCut.
  2. قم بتحميل أربعة إلى خمسة فيديوهات في DeepLabCut لتدريب النماذج، واستخراج 20–30 إطارا لكل فيديو. حدد على الأقل ثلاث نقاط تتبع رئيسية (مثل الرأس، الجذع، الذيل) ودرب الشبكة على تتبع هذه النقاط عبر الإطارات.
    ملاحظة: لمزيد من المعلومات، راجع دليل مستخدم DeepLabCut على https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/standardDeepLabCut_UserGuide.html. تستخدم النتائج التمثيلية 22 إطارا معنونة من خمسة فيديوهات مع 3 نقاط تتبع.
  3. استخدم شبكة عصبية قائمة على ResNet-101 لتدريب النموذج. حدد عدد التكرارات المطلوبة لإكمال التدريب (يقترح بين 100,000 و200,000). حدد قيمة قطع p بين 0.5 و1.
    ملاحظة: بالنسبة للنتائج التمثيلية، تم استخدام 150,000 تكرار لتدريب النموذج بحد p 0.7. إذا انخفض المعدل إلى أقل من حد 0.7 p، فإن زيادة تباين الفيديو أو تغيير نظام التصنيف سيحل هذه المشكلة.
  4. نشر نموذج DeepLabCut المدرب بالكامل على الفيديوهات التجريبية المتبقية. استخلاص بيانات موقعية لكل تجربة. تابع دليل المستخدم على https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/beginner-guides/Training-Evaluation.html.
    ملاحظة: بالنسبة للنتائج الممثلة، قمنا بالتحقق من ذلك بخلطين ووجدنا أن خطأ الاختبار كان 2 بكسل: قطار 4 بكسل (بحجم صورة 1600 × 820 بكسل). ثم استخدمت الشبكة لتحليل مقاطع الفيديو التجريبية التي تم الحصول عليها من الإعداد التجريبي الحالي.
  5. استخدم برامج البرمجة مثل بايثون لتعريف وتحليل الحركة عبر المناطق الثلاث العمودية ذات العرض المتساوي لقياس التفضيل. قس الوقت في المنطقة بنقطتين على الأقل في الجسم ضمن المنطقة المحددة لتقليل ضوضاء التتبع. استخدم الصيغة: إجمالي الوقت في المنطقة = (إجمالي الإطارات في المنطقة)/(إجمالي عدد الإطارات).
  6. إذا كان هناك مقياس للذيظ الوحوش، قم بقياس المناطق بطول كامل لسمكة الزرد من جدران الحوض، مما يوفر مقياسا للميل السلبي للمواضيع للبقاء بالقرب من حدود عمودية. هذا الإجراء مناسب جدا للخزانات التجريبية الأكبر نسبيا.
  7. استخدم نفس برنامج البرمجة لتعريف وقياس الوقت الذي يقضيه ساكنا (مثل التجميد). حدد عتبة الحركة عند 2–5 بكسل لكل إطار مع حد أدنى لعدد إطارات متتالي يبلغ 15 إطارا.
    ملاحظة: بالنسبة للنتائج التمثيلية، تم تحديد التجميد بحد 3 بكسل لكل إطار لمدة 15 إطارا.
  8. تجميع وتصدير مقاييس للتحليل الإحصائي والتصورات.
    ملاحظة: لتحليل البيانات، راجع https://github.com/farhanaugustine/DeepLabCut-Analysis-Jupyter-Scripts. نحن

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

للتحقق من الطرق منخفضة التكلفة المذكورة أعلاه، هناك شرط من التجارب التي أجريت في فيلكي و... تم تكرار AL.33 باستخدام الإعداد منخفض التكلفة الحالي. تم عرض المحفزات الاجتماعية الاصطناعية المتحركة (منخفضة الدقة) على المشاركين (N = 23، 11 ذكرا و12 أنثى) على اليسار ومحفزات اجتماعية حية (عالية الدقة) على اليمين (الشكل 2)؛ نظرا لأن الدراساتالسابقة 33,34 لم تكتشف أي تأثيرات أو تفاعلات ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يظهر البروتوكول الحالي أن التكيف منخفض التكلفة الحالي لتقنية OTFST ذات الثلاث حجرات يمكن استخدامه لتوصيف التفضيل الاجتماعي لدى أسماك الزرد البالغة بشكل موثوق كما يقاس بالوقت الذي يقضيه في المنطقة. باستخدام مواد بناء رخيصة، وكاميرا ويب متصلة ب USB، وتطبيقات برمجيات الشراء والتحليل مفتوحة المصدر، نجح النظام الحالي في تكرار النتيجة التي تفيد بأن أسماك الزرد تفضل مجموعة من الأسماك المشابهة على النماذج المتحركة ذات الدقة المنخفضة. تؤكد هذه النتائج تطبيق نموذج OTFST منخفض التكلفة بثلاث حجرات ل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون عدم وجود تضارب مصالح. لم يكن للممولين أي دور في تصميم الدراسة؛ في جمع البيانات أو تحليلها أو تفسيرها؛ في كتابة المخطوطة؛ أو في قرار نشر النتائج.

شكر وتقدير

يرغب المؤلفون في شكر روميل باغكاليناوان، روبي باك، إليزابيث هيلتز، هايلي ديويت، مايا تانكرسلي، أليكسيس تاي-نغوين، غريدي فليمنغ، جاكوب يونغ، وجاك ميدلين من فريق TheFishLab في جامعة كريستوفر نيوبورت على مساهماتهم في تربية الحيوانات وجمع البيانات لتجربة التحقق. كما يرغب المؤلفون في شكر سامانثا كومنز على مساعدتها خلال برنامج قادة المجتمع الصيفي 2025، بما في ذلك جرد جميع مكونات الإعداد الحالي عالي التكلفة بالإضافة إلى الإعداد منخفض التكلفة. كما يرغب المؤلفون في شكر مكتب أبحاث الطلاب والنشاط الإبداعي في جامعة كريستوفر نيوبورت على التمويل المقدم ل K.K. ضمن برنامج العلماء الصيفيين الجامعيين. تم إنشاء الشكل 2 في BioRender بواسطة كينسلو، ك. (2025). https://BioRender.com/wbf0wph.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
10-Gallon AquariumAqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100110010تم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (1 إلى 4)
12 Pieces 1-inch T-Pipe ClampsJoyHua Trade, ChinaASIN #B0DF19DJF1تم شراؤها من Amazon.com (1)
2-gang electrical boxSigma Engineered Solutions, Raleigh, NC, USA# 14350تم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
3/4" Silver-Metallic electrical metallic(EMT) Conduit - 10-footWheatland Tube, Inc., Wheatland, PA, USA #0550110000تم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (3)
3-conductor cordUtilitech, Inc., Charlotte, NC, USAUT010710تم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
3-prong receptacleEaton, Inc., Beachwood, OH, USA#270W-SP-LWتم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
3-way Air ValvePenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAModel VN3تم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (1)
A4 Cardstock (white), laminatedvariesvariesتم شراؤها من مكتبة الحرم الجامعي (2)
Active bio-filter Penguin 100Spectrum Brands Pet, LLC, Blacksburg, VA, USA#PF00100Bتم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (1 إلى 4)
Air stonesPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAModel AS6Qتم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (3)
Aquarium Air TubingPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAModel STD8تم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (1)
Black Fabric Twin Sheets (167.6 cm X 243.8 cm)Royale Linens, Inc., Melville, NY, USA#00011342258875تم شراؤها من Amazon.com (3)
Brio 4k WebcamLogitech International S.A., Lausanne, Switzerland960-001419تم شراؤها من Amazon.com (1 إلى 3)
Computer (sufficient for running Open Broadcaster Studio & 1-3 Webcams)Dell, Inc., Round Rock, TX, USAOptiPlex Micro 7010تم شراؤها من dell.com (1)
Dimmable light-emitting diode (LED) flat-panel lightLithonia Lighting-Acuity Brands, Inc. Conyers, GA, USACTCL-153P-WHتم شراؤها من Amazon.com (1)
E-Z Up Dust Containment Pole (2 Pack)Trimaco, Inc., Cary, NC, USA# 00047034547330تم شراؤها من Amazon.com (1)
Feet Hardware TwinevariesVariesتم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
Linear polarizing filtersB&H Foto & Electronics, Inc., New York, NY USARosco #7300تم شراؤها عبر الإنترنت (7)
Open Broadcaster SoftwareOBS Projectv32.0.0تم تنزيلها من https://obsproject.com (1)
Polycarbonate Sheet (0.38"/9.6mm thick)Spectraglass, ltd., Perth, ScotlandUPC # 608037376817تم شراؤها من Amazon.com (1)
polyvinyl chloride (PVC) Cement, 4 oz canisterThe AZEK Co, Chicago, IL, USA#ARAD0004OZتم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
Rimless 5.5-Gallon AquariumAqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100541424تم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (3)
Self-adhesive white plastic film CON-TACT Brand, La Miranda, CA, USA#16F-C9A952-06تم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
Slider Dimmer switchLutron, Inc., Cooperburg, PA, USA#LECL-150H-WHتم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
small pulleyvariesVariesتم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
Submersible 50W heaters (preset to 26C)Aqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100106251تم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (3 إلى 7)
Super Clamp Camera MountJINSUI, ChinaX0040GEYLRتم شراؤها من Amazon.com (1 إلى 3)
Tetra Whisper 10 Aquarium Air PumpSpectrum Pet, Home & Garden, Inc., Middleton, WI, USAUPC #046798778516تم شراؤها من محل بيع حيوانات أليفة محلي (1)
Weatherproof 2-gang electrical enclosureHubbell, Inc., Shelton, CT, USA#MM2420Cتم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)
White PVC Sheet 1/4" x 24" 48"Royal Building Products, Bristol, TN, USA#3101تم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (2)
White PVC Trim Board, nominal 1 x 2 (0.75" x 1/5" x 96")Royal Building Products, Bristol, TN, USA#7832-8تم شراؤها من محل بيع أجهزة محلي (1)

المراجع

  1. Seo, H., Lee, D. Neural basis of learning and preference during social decision-making. Curr Opin Neurobiol. 22 (6), 990-995 (2012).
  2. Bray, J., et al. Social bonds predict dominance trajectories in adult male chimpanzees. Anim Behav. 179, 339-354 (2021).
  3. Tibbetts, E. A., Pardo-Sanchez, J., Weise, C. The establishment and maintenance of dominance hierarchies. Philos Trans R Soc B. 377 (1845), 20200450(2022).
  4. Chase, I. D., Tovey, C., Spangler-Martin, D., Manfredonia, M. Individual differences versus social dynamics in the formation of animal dominance hierarchies. Proc Natl Acad Sci U S A. 99 (8), 5744-5749 (2002).
  5. DeLorey, T. M., et al. Gabrb3 gene deficient mice exhibit impaired social and exploratory behaviors, deficits in non-selective attention and hypoplasia of cerebellar vermal lobules: a potential model of autism spectrum disorder. Behav Brain Res. 187 (2), 207-220 (2008).
  6. Lee, J., Green, M. F. Social preference and glutamatergic dysfunction: underappreciated prerequisites for social dysfunction in schizophrenia. Trends Neurosci. 39 (9), 587-596 (2016).
  7. Fortier, A. V., et al. Prefrontal circuits guiding social preference: implications in autism spectrum disorder. Neurosci Biobehav Rev. 141, 104803(2022).
  8. Weiner, J. Social Relationships of Individuals with ADHD Across the Lifespan. Clinical Handbook of ADHD Assessment and Treatment Across the Lifespan. Matson, J. , Springer. Cham. (2023).
  9. Toth, I., Neumann, I. D. Animal models of social avoidance and social fear. Cell Tissue Res. 354, 107-118 (2013).
  10. Guo, M., Sun, L. From rodents to humans: rodent behavioral paradigms for social behavioral disorders. Brain Circ. 9 (3), 154-161 (2023).
  11. Geng, Y., Peterson, R. T. The zebrafish subcortical social brain as a model for studying social behavior disorders. Dis Model Mech. 12 (8), dmm039446(2019).
  12. Ogawa, S., Pfaff, D. W., Parhar, I. S. Fish as a model in social neuroscience: conservation and diversity in the social brain network. Biol Rev. 96 (3), 999-1020 (2021).
  13. Moss, S. M. Notes on the habits of a domesticated white rat, and a terrier dog (Flora), that lived in harmony together. Mag Nat Hist. 9, 182-185 (1836).
  14. Kietzman, H. W., Gourley, S. L. How social information impacts action in rodents and humans: the role of the prefrontal cortex and its connections. Neurosci Biobehav Rev. 147, 105075(2023).
  15. Bryda, E. C. The mighty mouse: the impact of rodents on advances in biomedical research. Mo Med. 110 (3), 201-211 (2013).
  16. Nadler, J. J., et al. Automated apparatus for quantitation of social approach behaviors in mice. Genes Brain Behav. 3 (5), (2004).
  17. Yang, M., Silverman, J. L., Crawley, J. N. Automated three-chambered social approach task for mice. Curr Protoc Neurosci. 56, 8.26.1-8.26.16 (2011).
  18. Zhao, C., Gammie, S. C. The circadian gene Nr1d1 in the mouse nucleus accumbens modulates sociability and anxiety-related behaviour. Eur J Neurosci. 48 (3), 1924-1943 (2018).
  19. Arakawa, H. Revisiting sociability: factors facilitating approach and avoidance during the three-chamber test. Physiol Behav. 272, 114373(2023).
  20. Crawley, J. N. Designing mouse behavioral tasks relevant to autistic-like behaviors. Ment Retard Dev Disabil Res Rev. 10 (4), 248-258 (2004).
  21. Ehninger, D., et al. Gestational immune activation and Tsc2 haploinsufficiency cooperate to disrupt fetal survival and may perturb social behavior in adult mice. Mol Psychiatry. 17 (1), 62-70 (2012).
  22. Ward, A. J. W., Kent, M. I. A., Webster, M. M. Social recognition and social attraction in group-living fishes. Front Ecol Evol. 8, 15(2020).
  23. Gerlai, R. Misbehaving fish: the role of these simple vertebrates in the analysis of human brain function and dysfunction. Brain Res. 1863, 149795(2025).
  24. Norton, W., Bally-Cuif, L. Adult zebrafish as a model organism for behavioural genetics. BMC Neurosci. 11 (1), 90(2010).
  25. Faustino, A. I., Tacão-Monteiro, A., Oliveira, R. F. Mechanisms of social buffering of fear in zebrafish. Sci Rep. 7, 44329(2017).
  26. Akinrinade, I. D., Varela, S. A. M., Oliveira, R. F. Sex differences in social buffering and social contagion of alarm responses in zebrafish. Anim Cogn. 26 (4), 1307-1318 (2023).
  27. Ariyasiri, K., et al. Pharmacological (ethanol) and mutation (sam2 KO) induced impairment of novelty preference in zebrafish quantified using a new three-chamber social choice task. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 88, 53-64 (2018).
  28. Angiulli, E., et al. Increase in environmental temperature affects exploratory behaviour, anxiety and social preference in Danio rerio. Sci Rep. 10 (1), 5385(2020).
  29. Lindeyer, C. M., et al. Nonapeptide influences on social behaviour: effects of vasotocin and isotocin on shoaling and interaction in zebrafish. Behaviour. 152 (7-8), 897-915 (2015).
  30. Landin, J., et al. Oxytocin receptors regulate social preference in zebrafish. Sci Rep. 10 (1), 5435(2020).
  31. Aslanzadeh, M., et al. The body size of stimulus conspecifics affects social preference in a binary choice task in wild-type, but not in dyrk1aa mutant, zebrafish. Zebrafish. 16 (3), 262-267 (2019).
  32. Ribeiro, D. Oxytocin receptor signalling modulates novelty recognition but not social preference in zebrafish. J Neuroendocrinol. 32 (4), e12834(2020).
  33. Velkey, A. J., et al. High fidelity: assessing zebrafish (Danio rerio) responses to social stimuli across several levels of realism. Behav Processes. 164, 100-108 (2019).
  34. Velkey, A. J., Koon, C. H., Danstrom, I. A., Wiens, K. M. Female zebrafish (Danio rerio) demonstrate stronger preference for established shoals over newly-formed shoals in the three-tank open-swim preference test. PLoS One. 17 (9), e0265703(2022).
  35. Velkey, A. J., et al. Zebrafish (Danio rerio) prefer undisturbed shoals over shoals exposed to the synthetic alarm substance hypoxanthine-3N-oxide (C5H4N4O2). Biology. 14 (3), 233(2025).
  36. Canzian, J., Fontana, B. D., Quadros, V. A., Rosemberg, D. B. Conspecific alarm substance differently alters group behavior of zebrafish populations: putative involvement of cholinergic and purinergic signaling in anxiety- and fear-like responses. Behav Brain Res. 320, 255-263 (2017).
  37. Do Nascimento, B. G., Maximino, C. Social investigation and social novelty in zebrafish: roles of salience and novelty. Behav Processes. 210, 104903(2023).
  38. Bolgan, M., O’Brien, J., Gammell, M. The behavioural repertoire of Arctic charr (Salvelinus alpinus (L.)) in captivity: a case study for testing ethogram completeness and reducing observer effects. Ecol Freshw Fish. 25 (2), 318-328 (2016).
  39. Thomsen, H., Jensen, T. H., Ydesen, K., Madsen, N. Use of ethograms to analyse shoaling behaviour of mackerel (Scomber scombrus) in an aquarium. Genet Biodivers J. , (2020).
  40. Rodriguez, A., et al. ToxTrac: a fast and robust software for tracking organisms. Methods Ecol Evol. 9 (3), 460-464 (2018).
  41. Pereira, T. D., et al. SLEAP: a deep learning system for multi-animal pose tracking. Nat Methods. 19 (4), 486-495 (2022).
  42. Mathis, A., et al. DeepLabCut: markerless pose estimation of user-defined body parts with deep learning. Nat Neurosci. 21 (9), 1281-1289 (2018).
  43. Gerlai, R. Social behavior of zebrafish: from synthetic images to biological mechanisms of shoaling. J Neurosci Methods. 234, 59-65 (2014).
  44. Collar, D. C., Thompson, J. S., Ralston, T. C., Hobbs, T. J. Fast-start escape performance across temperature and salinity gradients in mummichog Fundulus heteroclitus. J Fish Biol. 96 (3), 755-767 (2020).
  45. Collar, D. C., Hobbs, T. J., Thompson, J. S. Scaling of fast-start performance and its thermal dependence in mummichog Fundulus heteroclitus. J Fish Biol. 104 (3), 611-623 (2024).
  46. Collar, D. C., Stanley, K. L., Thompson, J. S. Fast-start performance and its dependence on temperature and salinity in sheepshead minnow (Cyprinodon variegatus). Environ Biol Fishes. 108 (10), 1515-1530 (2025).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

السلوك الاجتماعي لسمكة الزيبرااختبار الغرف الثلاثتتبع DeepLabCutتقدير الوضعية بدون علاماتتحليل فيديو السلوكإعداد منخفض التكلفةالتفاعل الاجتماعيالأبحاث السلوكية العصبية