مقالة منهجية

تأسيس بروتوكول موحد لتقنية التلاعب بقرص العمود الفقري (Spine-Pinching) لنموذج جرذان مصابة بربو الأطفال

9 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/70623

⸱

أكتوبر 1, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Acupuncture and Massage, Nanjing University of Chinese Medicine

في هذه المقالة

ملخص

تقدم هذه المقالة بروتوكولاً معيارياً لعملية التلاعب بقرص العمود الفقري (SP) في نموذج من الجرذان الصغيرة المصابة بالربو. وقد أدى هذا البروتوكول إلى تخفيف التهاب الممرات الهوائية، وفرط الاستجابة، وإعادة تشكيل الأنسجة في نموذج الربو المستحث بواسطة OVA. قد تضع هذه الدراسة الأساس للاستكشاف الميكانيكي والترجمة السريرية.

الملخص

يعد الربو المرض الالتهابي المزمن الأكثر شيوعاً في الممرات الهوائية لدى الأطفال، ويتميز بالتهاب مزمن في الممرات الهوائية، وفرط استجابة الممرات الهوائية (AHR)، وإعادة تشكيل الممرات الهوائية. وفي الطب الصيني التقليدي (TCM)، تُعد تقنية تدليك "قرص العمود الفقري" (SP) تقنية تدليك للأطفال شائعة الاستخدام لعلاج الربو وأمراض الأطفال الأخرى. وعلى الرغم من تاريخ استخدامها السريري الذي يمتد لأكثر من 1,000 عام، لا تزال تقنية SP غير معروفة إلى حد كبير خارج الصين. علاوة على ذلك، لا تزال الآليات الكامنة وراء تقنية SP غير موصوفة بشكل كافٍ. تصف هذه المقالة بروتوكولاً مجدياً ومعيارياً لتقنية SP يحاكي الإجراءات الأساسية المستخدمة في الممارسة السريرية. وقد أدى تطبيق هذا البروتوكول إلى تحسين التهاب الممرات الهوائية، وفرط استجابة الممرات الهوائية، وإعادة تشكيل الممرات الهوائية في نموذج جرذان صغيرة مصابة بالربو. ولتعزيز إمكانية التكرار، تم توحيد معايير المعلمات الإجرائية الرئيسية، بما في ذلك ضغط الأصابع، وتكرار التدليك، وعدد مرات التكرار، ومدة التدخل. وقد يعمل البروتوكول المعياري في هذه الدراسة كمرجع لمزيد من الأبحاث حول تقييس تقنية SP والآليات الكامنة وراءها في نماذج الربو التجريبية لدى الأطفال.

المقدمة

يتميز الربو لدى الأطفال بالالتهاب المزمن في المجاري التنفسية، وفرط الاستجابة القصبي (AHR)، وإعادة تشكيل المجاري التنفسية1,2. وغالباً ما يبدأ في مرحلة الطفولة المبكرة، وهو المرض المزمن الأكثر شيوعاً بين الأطفال في سن المدرسة. وتشمل العلاجات التقليدية الحالية الكورتيكوستيرويدات المستنشقة، ومحفزات مستقبلات β₂، ومضادات مستقبلات الليوكوتريين، والعلاجات البيولوجية3,4. ومع ذلك، فإن 44.1% فقط من الأطفال و 55.4% من المراهقين المصابين بالربو يحققون سيطرة كافية على المرض في جميع أنحاء العالم5. علاوة على ذلك، فإن الإعطاء المتكرر للكورتيكوستيرويدات الجهازية أو المستنشقة قد يساهم في تأخر النمو لدى الأطفال الذين يعانون من ربو غير منضبط بشكل جيد6.

يُعد التدليك (المعروف باسم "توينا" في الصين) علاجاً خارجياً تقليدياً يتميز بفعاليته من حيث التكلفة، وقدرة المرضى على تحمله، ويُعتبر عموماً آمناً للأطفال. وقد استُخدم التدليك لفترة طويلة في كل من الصين والدول الغربية للوقاية من الربو لدى الأطفال وعلاجه7. كما أفادت المراجعات المنهجية والتحليلات التلوية بوجود نتائج إيجابية للعلاج بالتدليك في إدارة الربو لدى الأطفال7,8. وتُعتبر تقنية قرص العمود الفقري (SP) تقنية كلاسيكية وممارسة على نطاق واسع في التدليك التقليدي الصيني للأطفال. ووفقاً لنظرية الطب الصيني التقليدي (TCM)، فإن تحفيز مسارات وعاء الحاكم (GV) والمثانة (BL) على طول الظهر ينظم وظيفة أعضاء Zang-Fu، مما يحافظ على التوازن الداخلي للجسم ويقي من الأمراض أو يعالجها9,10,11. وقد أظهرت الدراسات السابقة أن تقنية SP لا تكتفي بتحسين الأعراض والعلامات التأتبية لدى الأطفال فحسب، بل قللت أيضاً من التهاب الممرات الهوائية المزمن في نموذج جرذان صغيرة مصابة بالربو12,13,14. وبالإضافة إلى استخدامها السريري، تُمارس تقنية SP عادةً كتدخل للرعاية الصحية المنزلية11,15. وعلى الرغم من تاريخ سريري يمتد لأكثر من ألف عام، لا تزال تقنية SP غير معروفة نسبياً خارج الصين، ولم يتم استقصاء آلياتها الكامنة بشكل مكثف. لذلك، تبرز الحاجة إلى نماذج حيوانية معيارية لتوضيح آليات عمل SP ودعم تقييمها وتطبيقها العلمي على نطاق أوسع.

أرست عدة دراسات بروتوكولات تدليك معيارية للأبحاث الحيوانية. فقد طورت دراسة سابقة بروتوكولاً معيارياً للمسح الظهرى أو البطني بسرعة تبلغ حوالي 20 cm/s وضغط قدره 100 mm H₂O لتثبيط الاستجابات الاستثارية القلبية الوعائية16. وفي الآونة الأخيرة، تبيّن أن التحفيز اللمسي الشوكي أحادي الاتجاه والمتكرر على طول GV باستخدام محفز ميكانيكي يعزز إعادة تشكيل المشابك العصبية في القشرة الجبهية المتوسطة في نموذج فئران مراهقة مصابة بالتوحد. وفي ذلك البروتوكول، تم تطبيق ضغط متوسط يبلغ حوالي 30–50 g بسرعة تقريبية تصل إلى 15.3 cm/s دون التسبب في انزعاج أو إصابة. وقد قُدم التحفيز بطريقة أحادية الاتجاه من المنطقة الذيلية إلى القفا (المنطقة القذالية) مرتين يومياً لمدة 10 min على مدار فترة 21 يوماً17. ومع ذلك، فإن التلاعب اليدوي يختلف جوهرياً عن التحفيز الميكانيكي، ولا يوجد جهاز ميكانيكي حالياً يعيد إنتاج الحركات المميزة لـ SP. وعلاوة على ذلك، وعلى الرغم من أن عدة دراسات بحثت في آليات SP في نماذج الجرذان المصابة بالربو وغيرها من الاضطرابات لدى الأطفال18، إلا أنه لم يتم وضع بروتوكول معياري لتحديد قوة وسرعة التحفيز المطلوبة لـ SP في الدراسات الحيوانية. لذلك، يعد تطوير بروتوكول معياري لـ SP أمراً ضرورياً لتحسين القابلية للتكرار وتسهيل الدراسات الآلية.

يعد الربو التحسسي النمط الظاهري الأكثر شيوعاً للربو لدى الأطفال19. وبناءً على ذلك، فإن التحسيس والتحدي باستخدام الأوفالبومين (OVA) هما الطريقتان الأكثر استخداماً لإنشاء نموذج تجريبي لربو الأطفال20. وتعتبر الجرذان مناسبة بشكل خاص لاستقصاء التدخلات القائمة على التدليك لأن حجم جسمها الأكبر يسهل التعامل اليدوي. بالإضافة إلى ذلك، تحاكي نماذج الجرذان بشكل موثوق السمات المرضية الرئيسية للربو التحسسي، بما في ذلك الالتهاب المائل نحو خلايا Th2، وفرط استجابة القصبات (AHR)، وإعادة تشكيل المسالك الهوائية21.

أظهرت الدراسات السابقة أن SP قلل من التهاب الممرات الهوائية في الجرذان الصغيرة بعد التحسيس والتحدي بـ OVA11,14. وبناءً على ذلك، هدفت الدراسة الحالية إلى وضع بروتوكول موحد لـ SP لنموذج الجرذان الصغيرة المصابة بالربو لدى الأطفال لتسهيل الاستقصاءات المستقبلية حول الآليات الكامنة وراء SP. يوفر هذا البروتوكول الموحد إطارًا تجريبيًا قابلاً للتكرار للدراسات الميكانيكية والأبحاث الانتقالية المستقبلية حول SP في النماذج الحيوانية لربو الأطفال.

البروتوكول

تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان في جامعة نانجينغ للطب الصيني (رقم 202306A032). وقد أُجريت جميع الإجراءات وفقاً لإرشادات المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام حيوانات المختبر وإرشادات ARRIVE 2.0.

استُخدم ثلاثون جرذًا من سلالة Sprague-Dawley (SD) الذكور، خالية من مسببات الأمراض النوعية (SPF)، بعمر 3 أسابيع وتزن ما بين 45–55 g. وُضعت الجرذان (ثلاثة في كل قفص) في منشأة حاجز SPF تحت دورة ضوئية/مظلمة مدتها 12 h، ودرجة حرارة 22 ± 2 °C، ورطوبة نسبية تتراوح بين 30%–40%، مع إتاحة الوصول الحر إلى العلف القياسي والماء. وبناءً على دراسات سابقة استخدمت نماذج لمرض الربو في الجرذان الصغيرة11,14، تم تحديد حجم العينة لتقليل استخدام الحيوانات وفقًا لمبدأ الحد (reduction) من قواعد الـ 3Rs. وبعد فترة تأقلم استمرت 7 أيام، سُجل وزن الجسم الأساسي، ومُنح كل جرذ رقم تعريف فريد. صُنفت الجرذان وفقًا لوزن الجسم الأساسي، ثم وُزعت داخل كل طبقة على واحدة من خمس مجموعات باستخدام جدول أرقام عشوائية، بنسبة توزيع 1:1:1:1:1 (العدد = 6 لكل مجموعة): المجموعة الضابطة (CN)، ومجموعة الربو (AS)، ومجموعة الربو + SP (AS+SP)، ومجموعة الربو + ميثيل بريدنيزولون (AS+MP)، ومجموعة الربو + SP + ميثيل بريدنيزولون (AS+SP+MP). وقد تم إنشاء تسلسل العشوائية وتوزيع المجموعات بواسطة باحث لم يشارك في التدخلات اللاحقة أو تقييمات النتائج.

تمثلت معايير الاشتمال في ذكور جرذان SD من نوع SPF الأصحاء، بعمر 3 أسابيع، وبوزن يتراوح بين 45–55 g عند خط الأساس، مع إظهار نمط تنفس طبيعي ونشاط بدني منتظم. وقد استُبعدت الجرذان التي ظهرت عليها علامات المرض أو التي انحرف وزن جسمها بنسبة >20% عن متوسط المجموعة خلال فترة التأقلم، أو تلك التي نفقت قبل اكتمال مرحلة التدخل. تم ارتداء معدات الوقاية الشخصية المناسبة، بما في ذلك معطف المختبر وقناع قابل للتخلص منه وقفازات، طوال فترة الإجراء. وُضعت جثث الحيوانات وأنسجتها في أكياس مخاطر بيولوجية مزدوجة الطبقة وخُزنت عند −20 °C قبل التخلص منها. كما تم التخلص من الفرشة الملوثة كنفايات صلبة ذات مخاطر بيولوجية، وأُلقيت الأدوات الحادة في حاويات معتمدة ومقاومة للثقب مخصصة للأدوات الحادة. ولجمع الأنسجة النهائي، تم إعطاء 20% urethane (بجرعة 5 mL/kg، حقنًا داخل الصفاق i.p.)، وتم التأكد من التخدير العميق من خلال غياب منعكس سحب الطرف ومنعكس القرنية.

1. إنشاء نموذج الربو في الجرذان الصغيرة

ملاحظة: تم استخدام الإجراء التالي لإنشاء نموذج ربو في الجرذان الصغيرة12.

  1. قم بتحضير معلق OVA/Al(OH)₃ مباشرة قبل كل عملية حقن. أذب 2 mg من OVA من الدرجة الخامسة (Grade V) مباشرة في 1 mL من هلام Al(OH)₃ بتركيز 4%، واستخدم جهاز الرج (vortex) حتى يتم الحصول على معلق متجانس.
    ملاحظة: تأكد من أن المعلق متجانس قبل الحقن. في حالة حدوث ترسيب، قم بالرج لفترة وجيزة لإعادة تعليق الخليط. احفظ المعلق على الثلج واستخدمه في غضون ساعتين (2 h) من التحضير.
  2. احقن 1 mL من معلق OVA/Al(OH)₃ داخل الصفاق (intraperitoneally) في الأيام التجريبية 1 و8 و15. احقن 1 mL من المحلول الملح الفسيولوجي المعقم (0.9% NaCl) في الجرذان ضمن مجموعة CN وفقاً للجدول الزمني نفسه.
  3. قم بتعريض الجرذان لمحلول OVA من الدرجة الثانية (Grade II) بتركيز 2% من اليوم التجريبي 21 إلى اليوم 42 باستخدام جهاز رذاذ بالموجات فوق الصوتية. قم بإعطاء آخر تحديين متتاليين بتركيز 3% من OVA لتحفيز تفاقم الحالة بعد التحسس.
  4. أجرِ عملية الرذاذ كل يومين لمدة 30 min على مدار فترة 3 أسابيع. ضع كل جرذ بشكل فردي في غرفة تعريض محكمة الغلق متصلة بجهاز الرذاذ بالموجات فوق الصوتية (تردد الموجات فوق الصوتية: 1.7 MHz ± 10%؛ معدل الرذاذ: ≥3 mL/min؛ قطر الجزيئات: <5 µm).
    ملاحظة: تأكد من نجاح إنشاء نموذج الربو من خلال ملاحظة العطس، وهز الرأس أثناء التنفس، والتنفس من الفم المفتوح، وانقباض العضلات البطنية، والأزيز.

2. تشغيل وتطبيق برنامج نظام Finger TPS

  1. أدخل قابس المستشعر رأسيًا في واجهة لوحة الدوائر. قم بتوصيل لوحة الدوائر بالكمبيوتر باستخدام كابل USB-C بطول 40 cm تقريبًا للسماح بمرونة كافية في التشغيل.
  2. قم بتطهير اليدين وواقيات الأصابع. أدخل إبهام وسبابة اليد اليمنى للمُشغّل في أكمام الأصابع المجهزة بالمستشعرات. ضع المستشعرات المرنة فوق مركز وسائد الأصابع وتأكد من تلامسها الوثيق مع الجلد دون وجود تجاعيد.
  3. أجرِ معايرة النظام ومراقبة الجودة لقياس القوة
    1. افحص المستشعرات وكابلات التوصيل قبل كل جلسة تدريب للمُشغل وتحقق من توصيل الجهاز بشكل صحيح.
    2. اختر “N” كوحدة قياس واضبط نطاق القياس من −3.5 إلى 32 N.
    3. تأكد من عدم تطبيق أي قوة خارجية على المستشعرات. نفذ وظيفة "Tare" لتصفير النظام.
    4. سجل الخط القاعدي غير المحمل لمدة 30 s. ابدأ قياس القوة فقط عندما يظل تباين الخط القاعدي أقل من 0.02 N.
    5. كرر إجراء التصفير كلما تم تعديل وضع المستشعر أو إحكام الأكمام أو عند ملاحظة انزياح في الخط القاعدي.
    6. استخدم نظام Finger TPS لمراقبة القوة المطبقة أثناء تدريب المُشغل. حافظ على قوة قدرها 5 ± 0.6 N أثناء المسح الخلفي و 12 ± 2 N أثناء SP مع الحفاظ على السرعة والتردد المحددين.
    7. اقبل منحنى القوة فقط عندما يظل الخط القاعدي مستقرًا، ولا يحدث انقطاع أو تشبع في الإشارة، وتظل القوة المطبقة ضمن النطاقات المستهدفة المحددة.
  4. أجرِ مناورة المسح الخلفي و SP مع مراقبة منحنى القوة الديناميكي. اضبط إحكام أكمام الأصابع حسب الحاجة حتى يتم الحصول على منحنى قوة مستقر.
  5. تدرب على المناورات أثناء مراقبة منحنى القوة في الوقت الفعلي. حافظ على قوة مستهدفة قدرها 5 ± 0.6 N وسرعة تقريبية تبلغ 5 cm/s أثناء المسح الخلفي، وحافظ على قوة مستهدفة قدرها 12 ± 2 N بتردد يتراوح بين 6–8 تكرارات/دقيقة أثناء SP. يُعتبر المُشغل كفؤًا فقط بعد استيفاء خمس محاولات تدريبية متتالية لمعايير تقنية المناورة وقوة الإصبع وتردد SP.
    ملاحظة: يُعتبر المُشغل مؤهلاً فقط بعد تحقيق القوة المستهدفة ومعايير الحركة باستمرار. قم بإزالة واقيات الأصابع قبل إجراء عملية SP الرسمية لتجنب التحفيز اللمسي الإضافي للجرذان. ومع ذلك، يجب عدم اعتبار أي من اختبارات قابلية التكرار بين المُشغلين في هذه الدراسة عند اعتماد هذا البروتوكول كمرجع لدراسة SP.

3. الإجراء التفصيلي لعملية تدليك قرص العمود الفقري

  1. أمسك الجرذ برفق في وضعية الانبطاح على راحة يد واحدة. ادعم الأطراف الأمامية عن طريق إحاطة الإبطين الأماميين برفق باستخدام الإبهام والسبابة، واترك الأطراف الأمامية تتدلى بشكل طبيعي. تأكد من بقاء الجرذ هادئاً مع تنفس منتظم. في حال حدوث إصدار أصوات، أو مقاومة، أو تبرز، حرر الجرذ واتركه يتأقلم لمدة 2–3 min قبل إعادة ضبط وضعيته (الشكل 1).
  2. قم بتمسيد الظهر مرتين من منطقة الكتف إلى قاعدة الذيل على طول الوعاء الحاكم (GV) باستخدام سبابة اليد اليمنى والوسطى والبنسر. طبق قوة تبلغ حوالي 5 N لتهدئة الجرذ قبل عملية SP.
  3. اقرص الجلد عند جذر الذيل باستخدام إبهام اليد اليمنى في الوضع الخلفي والسبابة والوسطى في الوضع الأمامي. ارفع الجلد برفق، ثم قم بتدوير وتحريك الأصابع نحو الرأس على طول العمود الفقري باتجاه نقطة Dazhui (GV14). تجنب التسبب في علامات واضحة للانزعاج. حافظ على ضغط بالأصابع يبلغ حوالي 12 N وقم بالتدليك بتردد 6–8 تكرارات/min. قم بإجراء 15 تكراراً من اليوم التجريبي 1 إلى اليوم 21، و25 تكراراً من اليوم 22 إلى اليوم 44.
  4. كرر إجراء تمسيد الظهر الموضح في الخطوة 3.2 لختام جلسة العلاج وتهدئة الجرذ.
    ملاحظة: وفقاً لنظرية الطب الصيني التقليدي (TCM)، يتم إجراء SP على طول العمود الفقري لتحفيز مسارات GV وBL (الشكل 2). يمتد مسار GV على طول الخط الناصف الظهري من جذر الذيل إلى Dazhui (GV14)، بينما يقع مسار BL على بعد 3–6 mm تقريباً جانبياً من الخط الناصف، اعتماداً على حجم الجسم22. تقع نقطة Dazhui (GV14) في المنتصف بين الفقرة العنقية السابعة والفقرة الصدرية الأولى. قم بزيادة عدد تكرارات SP مع تقدم العمر لمحاكاة نظام العلاج السريري. أثناء تمسيد الظهر، تأكد من بقاء الجرذ مسترخياً، ويتنفس بهدوء، ولا يظهر أي سلوك دفاعي. أثناء SP، يُتوقع حدوث تقوس طفيف في الظهر وانتشار للشعيرات (الشاربين) دون حدوث تبول أو تبرز ناتج عن التوتر، أو مقاومة عنيفة، أو إصدار أصوات، أو محاولات هروب.

4. بروتوكولات التدخل

  1. يتم تخصيص الجرذان في مجموعة CN لعدم تلقي أي تدخل خاص بالمرض. يتم التعامل مع الجرذان برفق لنفس المدة المستخدمة مع مجموعة AS+SP للتحكم في آثار المناولة. يتم إعطاء محلول ملحي طبيعي عن طريق الحقن داخل الصفاق (1 mL/kg) وفقاً لنفس الجدول الزمني المستخدم لحقن الميثيل بريدنيزولون.
  2. تخضع الجرذان في مجموعة AS لعمليتي التحسس والتحدي ببروتين OVA. تُطبق نفس إجراءات المناولة والتحكم في الحقن الملحي المستخدمة مع مجموعة CN.
  3. تخضع الجرذان في مجموعة AS+SP لعمليتي التحسس والتحدي ببروتين OVA. يُطبق بروتوكول SP مرة واحدة يومياً قبل تحفيز النموذج.
  4. تخضع الجرذان في مجموعة AS+MP لعمليتي التحسس والتحدي ببروتين OVA. يتم إعطاء الميثيل بريدنيزولون (10 mg/kg؛ بتركيز 2 mg/mL مُحضّر في محلول ملحي) عن طريق الحقن داخل الصفاق قبل 30 دقيقة من كل تحدٍ ببروتين OVA.
  5. تخضع الجرذان في مجموعة AS+SP+MP لنفس الإجراءات المستخدمة مع مجموعة AS+MP. يُطبق بروتوكول SP مرة واحدة يومياً قبل حقن الميثيل بريدنيزولون.
    ملاحظة: باستثناء مجموعتي AS+SP و AS+SP+MP، تُطبق نفس إجراءات المناولة على جميع المجموعات الأخرى للتحكم في آثار المناولة غير النوعية. تُستخدم محاقن معقمة ذات استخدام واحد لجميع عمليات الحقن، وتُلقى الإبر في حاويات الأدوات الحادة المقاومة للثقب. تُدخل إبرة الحقن داخل الصفاق جانبياً بالنسبة لخط منتصف البطن لتقليل خطر إصابة الأحشاء. وللتحكم في التحفيز اللمسي في المجموعات التي لم تخضع لـ SP، يتم مسح الجرذان أربع مرات خلال نفس فترة التدخل الخاصة بمجموعة SP يومياً. يُستخدم نفس إجراء مسح الظهر المستخدم مع مجموعات SP.

النتائج

يعد وزن الجسم مؤشراً هاماً للنمو في الجرذان الصغيرة. لم تلاحظ أي فروق ذات دلالة إحصائية في وزن الجسم بين المجموعات الخمس قبل المعالجة التجريبية. وعقب استحثاث نموذج الربو، أظهرت مجموعة AS انخفاضاً ملحوظاً في وزن الجسم مقارنة بمجموعة CN (P = 0.000؛ الشكل 3A). ومقارنة بمجموعة AS، أظهرت مجموعة AS+SP زيادة معنوية في وزن الجسم (P = 0.008؛ الشكل 3A)، بينما لم تظهر مجموعة AS+MP أي فرق معنوي (P = 0.975؛ الشكل 3A). وبالمثل، لم تظهر مجموعة AS+SP+MP أي زيادة معنوية في وزن الجسم مقارنة بمجموعة AS (P = 0.925؛ الشكل 3A). وتشير هذه النتائج إلى أن SP يعزز زيادة الوزن أثناء نمذجة ربو الأطفال والعلاج بـ methylprednisolone (MP) في الجرذان الصغيرة.

بعد تحريض OVA، لم تظهر على الجرذان في مجموعة CN أي علامات على الضيق التنفسي، بما في ذلك ضيق التنفس، أو العطس، أو إيماء الرأس، أو التنفس من الفم المفتوح، أو انقباض العضلات البطنية، أو الأزيز. وفي المقابل، أظهرت الجرذان في مجموعة AS المظاهر النموذجية لربو الأطفال، بما في ذلك ضيق التنفس، والعطس، وإيماء الرأس، والتنفس من الفم المفتوح. وقد خفت هذه العلامات السريرية بشكل ملحوظ بعد العلاج بـ SP، أو MP، أو استخدامهما معاً.

لتقييم التأثيرات المضادة للالتهابات لـ SP في الجرذان الصغيرة المصابة بالربو التجريبي، تم جمع أنسجة الرئة بعد التخدير العميق باستخدام اليوريثان بتركيز 20% (5 mL/kg، حقنًا داخل الصفاق) وفقًا للإجراءات الموصوفة سابقًا12. تم إجراء صبغ الهيماتوكسيلين والإيوسين (HE) وتحليل تعبير الجينات المحفزة للالتهابات لتقييم التهاب الممرات الهوائية المزمن، بينما استُخدم صبغ ماسون لتقييم إعادة تشكيل الممرات الهوائية. كما تم تقييم فرط استجابة الممرات الهوائية (AHR) باستخدام تخطيط حجم الجسم الكامل (WBP) عن طريق قياس تعزيز التوقف (Penh).

بعد اتباع إجراءات الصبغ الروتينية بـ HE وMasson23، صُبغت مقاطع الرئة بالهيماتوكسيلين والإيوزين، وتم تقييم الالتهاب حول القصبات باستخدام مقياس معدل من 0–424. أظهرت مجموعة نموذج الربو درجات التهاب أعلى بكثير من مجموعة CN (P = 0.000). ومقارنة بمجموعة AS، أظهرت مجموعات AS+SP وAS+MP وAS+SP+MP جميعاً انخفاضاً ملحوظاً في درجات الالتهاب (P = 0.005، و P = 0.006، و P = 0.000، على التوالي)، مع عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين مجموعات العلاج الثلاث (الشكل 4A، الجدول 1).

تم تقييم إعادة تشكيل المسالك الهوائية عن طريق قياس ترسب الكولاجين حول القصيبيات باستخدام صبغة ماسون. وتم التعبير عن ترسب الكولاجين كمنطقة موجبة للكولاجين مطبعة إلى محيط الغشاء القاعدي (µm2/µm). وأظهرت مجموعة AS ترسباً للكولاجين أكبر بكثير من مجموعة CN (P = 0.000). ومقارنة بمجموعة CN، أظهرت مجموعتا AS+SP وAS+MP ترسباً أعلى للكولاجين بدرجة متوسطة (P = 0.050 و P = 0.051، على التوالي) ولكن ترسباً أقل بكثير للكولاجين من مجموعة AS (P = 0.001 لكلا المقارنتين). ولم تظهر مجموعة AS+SP+MP أي فرق معنوي عن مجموعة CN (P = 0.105)، ولكنها أظهرت انخفاضاً معنوياً في ترسب الكولاجين مقارنة بمجموعة AS (P = 0.001). ولم تُلاحظ فروق ذات دلالة إحصائية بين مجموعات التدخل الثلاث (الشكل 4B، الجدول 1).

تظهر منحنيات القوة التمثيلية التي تم الحصول عليها باستخدام نظام Finger TPS في الشكل 5. خلال تدريب المشغل، ظل منحنى القوة المسجل أثناء عملية السحب الخلفي مستقرًا عند حوالي 5 N (الشكل 5A)، بينما أظهر منحنى القوة المسجل أثناء عملية SP ذروات قوة متكررة تقابل مناورة القرص، مع الحفاظ على القوة المطبقة ضمن النطاق المستهدف المحدد مسبقًا (الشكل 5B). وتوضح ملامح القوة هذه خصائص القوة الموحدة المستخدمة أثناء تدريب المشغل.

تم تلخيص الجدول الزمني العام للتجربة في الشكل 6. بعد فترة تأقلم استمرت 7 أيام، تم إجراء تحسيس OVA وفقاً للجدول المحدد، متبوعاً بتحديات OVA متكررة. تم إعطاء SP لمجموعتي AS+SP و AS+SP+MP خلال فترة التدخل المحددة، بينما تم إعطاء methylprednisolone قبل تحدي OVA في مجموعات العلاج المقابلة. وقد تم إجراء تقييم WBP وجمع الأنسجة بعد التحدي النهائي (الشكل 6).

يُستخدم قياس حجم التنفس للجسم كاملاً على نطاق واسع لتقييم Penh في القوارض الواعية وغير المقيدة دون التسبب في إصابة أو ضيق ملحوظ25. وعلى الرغم من أن Penh يعد مؤشراً غير مباشر يتأثر بتوقيت التنفس والعوامل البيئية، إلا أن القياس المباشر لمقاومة المجرى الهوائي يتطلب التخدير وبضع الرغامي، وهو ما قد يغير من فسيولوجيا المجرى الهوائي26. ومع ذلك، فقد أُفيد بوجود ارتباط بين Penh والقياسات الغازية لمقاومة الرئة27. بعد أربع وعشرين ساعة من التحدي الأخير بـ OVA، وُضعت الجرذان في غرف غير مقيدة وعُرّضت بالتتابع لرذاذ PBS يليه الأسيتيل كولين (Ach) بتركيزات 3.125 و6.25 و12.5 و25 و50 mg/mL. استمر كل تحدٍ بالرذاذ لمدة 2 min وتلت ذلك فترة تسجيل مدتها 5-min28. أظهرت مجموعة AS قيم Penh أعلى بكثير من مجموعة CN، بينما أدى العلاج بـ SP أو MP أو تطبيقهما معاً إلى تقليل قيم Penh بشكل ملحوظ (P = 0.005؛ الشكل 3B). أشارت هذه النتيجة إلى أن SP عزز الوظيفة التنفسية في الجرذان المصابة بالربو، وهي نتيجة لا تزال بحاجة إلى مزيد من التحقق، مقترنة بقياسات مقاومة المجرى الهوائي المباشرة (Raw).

يؤدي إنترلوكين-4 (IL-4) إلى بدء الالتهاب اليوزيني بوساطة الخلايا Th2، بينما يساهم عامل نخر الورم-ألفا (TNF-α) في فرط استجابة المسالك الهوائية (AHR) وإعادة تشكيل المسالك الهوائية، حيث يلعب كلاهما أدواراً مركزية في نشوء الربو لدى الأطفال29. ولتقييم التهاب المسالك الهوائية بشكل أكبر، تم قياس مستويات تعبير IL-4 و TNF-α في أنسجة الرئة باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qRT-PCR). وبالمقارنة مع مجموعة CN، أظهرت مجموعة AS زيادة معنوية في تعبير IL-4 و TNF-α (P = 0.000 و P = 0.000، على التوالي؛ الشكل 3C,D). وقد انخفض تعبير كلا السيتوكينين بشكل ملحوظ بعد العلاج بـ SP أو MP، وحقق الجمع بين SP و MP أكبر انخفاض (P = 0.001 و P = 0.000، على التوالي؛ الشكل 3C,D).

figure-results-1
الشكل 1: الإجراء التفصيلي لعملية تدليك قرص العمود الفقري (SP) في الجرذان. (A) تثبيت الجرذ في وضعية الانبطاح على راحة يد المشغل. (B) قرص الجلد عند قاعدة الذيل. (C) رفع الجلد المقروص. (D) تدوير الأصابع وتحريكها باتجاه الرأس على طول العمود الفقري نحو نقطة Dazhui (GV14). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-2
الشكل 2: رسم تخطيطي يوضح وعاء الحاكم (GV)، ومسار المثانة (BL)، ونقطة دازوي (GV14) في الجرذان. يوضح الرسم الموقع التشريحي لوعاء الحاكم (GV)، ومسار المثانة (BL)، ونقطة دازوي (GV14)، والتي تمثل المواقع المستهدفة لعملية تدليك قرص العمود الفقري. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-3
الشكل 3تأثيرات تقنية تدليك قرص الشوكة على وزن الجسم، وفرط استجابة الممرات الهوائية، وعوامل الالتهاب الرئوي في الجرذان الصغيرة. (A) مقارنة وزن الجسم بين المجموعات التجريبية. (B(مقارنة قيم وقفة التنفس المعززة (Penh).)سي (C)) التعبير الجيني النسبي لإنترلوكين-4 (IL-4) في نسيج الرئة. (دالتعبير الجيني النسبي لعامل نخر الورم-α (عامل نخر الورم-α) في أنسجة الرئة. وتُعرض البيانات كمتوسط ± الانحراف المعياري.P < 0.05 و **P < 0.01 مقابل مجموعة CN؛ #P < ٠.٠٥ و ##P < 0.01 مقارنة بمجموعة AS. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-4
الشكل 4: تغيرات نسيجية مرضية ممثلة في أنسجة الرئة. (A) صبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين (HE) توضح وجود التهاب حول القصيبيات. (B) صبغة ماسون تريكروم توضح ترسب الكولاجين وإعادة تشكيل المسالك الهوائية. تم الحصول على الصور بتكبير 200×. أشرطة المقياس = 100 µm. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-5
الشكل 5: منحنيات قوة تمثيلية تم تسجيلها أثناء مناولة قرص العمود الفقري باستخدام نظام Finger TPS. (A) منحنى القوة المسجل أثناء مناولة المسح الخلفي. (B) منحنى القوة المسجل أثناء مناولة قرص العمود الفقري (SP). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-6
الشكل 6الجدول الزمني للتجربة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

مجموعةدرجة التهاب صبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين (HE)مساحة الكولاجين/محيط الغشاء القاعدي (μm²/μm)
سيانيد (CN)1.10 ± 0.252.50 ± 0.43
تصلب الشرايين2.32 ± 0.50**4.23 ± 0.53**
AS+SP1.66 ± 0.27##3.12 ± 0.56*##
AS+MP1.67 ± 0.31##3.12 ± 0.50*##
تصلب الشرايين + البروتين المفسفر + البروتين المفسفر1.34 ± 0.27##3.01 ± 0.33##

الجدول 1: درجات الفحص النسيجي المرضي للرئة. تم تقييم الالتهاب حول القصيبي باستخدام صبغة HE، وتم قياس إعادة تشكيل الممرات الهوائية كمنطقة موجبة للكولاجين تمت معايرتها وفقاً لمحيط الغشاء القاعدي (µm2/µm). البيانات معروضة كمتوسط ± الانحراف المعياري (n = 5 لكل مجموعة). *P < 0.05 و **P < 0.01 مقارنة بمجموعة CN؛ #P < 0.05 و ##P < 0.01 مقارنة بمجموعة AS.

المناقشة

يعد التحسيس والتحدي بالألبومين البيضي (OVA) أحد أكثر النماذج التجريبية استخداماً لدراسة الربو لدى الأطفال30,31. وقد أظهرت الدراسة الحالية أن بروتوكول التلاعب بالقرص الشوكي (SP) الموحد قد خفف من التهاب المجاري التنفسية المزمن، وفرط استجابة المجاري التنفسية (AHR)، وإعادة تشكيل المجاري التنفسية. وقد أظهرت الدراسات السريرية السابقة أن التدليك التقليدي للأطفال، بما في ذلك SP، يحسن حالات الربو والأمراض التحسسية الأخرى لدى الأطفال11,13,32. بالإضافة إلى ذلك، أثبتت الدراسات الحيوانية السابقة أن SP قلل من التهاب المجاري التنفسية في نماذج الجرذان الصغيرة المصابة بالربو عن طريق تعديل ميكروبات الأمعاء12,15. كما أظهرت الدراسة الحالية أن تطبيق بروتوكول SP الموحد أدى إلى تحسين التهاب المجاري التنفسية المزمن، وAHR، وإعادة تشكيل المجاري التنفسية في نموذج جرذ صغير مصاب بالربو. علاوة على ذلك، عزز SP التأثيرات العلاجية للميثيل بريدنيزولون (MP) مع تقليل آثاره الجانبية المسببة لتأخر النمو.

لقد تمت ممارسة تقنية SP في الصين لأكثر من 1,000 عام، ولا تزال واحدة من أكثر تقنيات تدليك الأطفال استخداماً للوقاية من الربو وأمراض الطفولة الأخرى وعلاجها12,15,33,34,35. وعلى الرغم من تاريخها الطويل في التطبيق السريري، إلا أن تقنية SP لا تزال غير معروفة نسبياً خارج الصين. وفقاً لنظرية الطب الصيني التقليدي، فإن مسارات GV وBL تمتد على طول العمود الفقري أو بجواره وتتصل بالأعضاء الداخلية. وبناءً على ذلك، يُعتقد أن تحفيز مسارات GV وBL يعمل على تنظيم وظائف الأحشاء، وتعديل النشاط المناعي، وتعزيز مقاومة الأمراض. وتتكون تقنية SP من قرص الجلد ورفعه وتدويره ودفعه للأمام على طول العمود الفقري، مما يؤدي إلى تحفيز كل من مساري GV وBL. يطبق هذا الإجراء قوى ضغط وشد في آن واحد على الجلد واللفافة الكامنة تحته، مما ينتج عنه تحفيز ميكانيكي متوسط. وفي الممارسة السريرية، يتم إجراء تدليك لطيف للظهر بشكل روتيني قبل وبعد تقنية SP لتقليل التحفيز وتحسين راحة المريض. ويتكون تدليك الظهر من مسح لطيف للأسفل على طول الظهر، وهو مستخدم على نطاق واسع في تدليك الأطفال. لذا، واستناداً إلى مبادئ الصلة السريرية، والجدوى، والبساطة، وقابلية التكرار، يدمج البروتوكول الموحد كلاً من تقنية SP وتدليك الظهر.

أظهرت الدراسات السابقة أن SP يقلل من الالتهاب في كل من الرئتين والحصين من خلال آليات تعديل مناعي12,36. ويتميز الربو لدى الأطفال بالتهاب مائل نحو Th2 يرتبط ارتباطاً وثيقاً بخلل التنظيم المناعي37. وقد أفادت دراسات تجريبية سابقة أن المسح باليد أو بالفرشاة ينظم الاستجابات المناعية في الفئران عند تنفيذه بضغط يتراوح بين 100–150 mmH₂O (7–11 mmHg) وسرعة تبلغ حوالي 3 cm/s38. بالإضافة إلى ذلك، أفادت دراسة سريرية أن المسح الذي يتم بسرعة تتراوح بين 1–10 cm/s تقريباً يُنظر إليه على أنه أكثر إمتاعاً39. وبناءً على هذه النتائج، اعتمد البروتوكول الموحد قوة مسح للظهر تبلغ 5 ± 0.6 N وسرعة 5 cm/s لتحقيق تأثير مهدئ مناسب. وقد تم تحديد الضغط والتردد وعدد تكرارات SP بناءً على دراسات سابقة12,15 وأبحاث ذات صلة أجرتها مجموعات بحثية أخرى40,41. وعلى الرغم من أن الدراسات السابقة قد وحدت إما المسح اليدوي للظهر (20 cm/s؛ حوالي 100 mmH₂O) أو التحفيز الميكانيكي لـ GV (30–50 g؛ حوالي 15.3 cm/s) لتحقيق تثبيط قلبي وعائي أو تعزيز إعادة التشكيل المشبكي في القوارض، إلا أن SP اليدوي يمثل تدخلاً ميكانيكياً حيوياً متميزاً يعتمد على التغذية الراجعة اللمسية والحسية العميقة، وبالتالي لا يمكن تكراره بالكامل بواسطة الأجهزة الميكانيكية الحالية. ويسلط هذا التمييز الضوء على أهمية البروتوكولات الموحدة للممارسين في الأبحاث الانتقالية المستقبلية حول التدخلات اللمسية للربو التحسسي.

أظهرت دراسات عديدة منشورة باللغة الصينية أن SP ينظم الوظيفة المناعية ويثبط الالتهابات42,43,44. ومع ذلك، وبناءً على المعرفة الحالية، لم تقم أي دراسة سابقة خارج المجموعة البحثية للمؤلف بتوحيد الضغط والسرعة في SP للتحقيق في مرض معين في النماذج الحيوانية لربو الأطفال. وقد بحثت الدراسات السابقة في الآليات الكامنة وراء SP في نماذج الجرذان الصغيرة المصابة بالربو، بما في ذلك تنظيم ميكروبيوم الأمعاء، وزيادة إنتاج الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة، وتعزيز وظيفة العضلات التنفسية (على سبيل المثال، قوة الحجاب الحاجز)، وتخفيف التهاب المسالك الهوائية والخلل الوظيفي الرئوي11. ركزت الدراسة الحالية بشكل أساسي على وضع بروتوكول موحد بدلاً من توضيح آليات العمل الكامنة بشكل شامل. تم استخدام نظام قياس وتسجيل الضغط اللمسي عالي الدقة لتوحيد القوة المطبقة أثناء كل من مسح الظهر وSP، بينما تم توحيد سرعة وتكرار هذه الإجراءات وفقاً للدراسات السابقة. تم اختيار الجرذان لأن حجم أجسامها يسهل التعامل المستقر والتطبيق اليدوي لـ SP مع محاكاة الإجراء السريري بدقة. تم إجراء مسح الظهر باستخدام أصابع يد واحدة، كما هو الحال في الممارسة السريرية للأطفال. ونظراً لصغر حجم أجسام الجرذان، تم تنفيذ SP بثلاثة أصابع من يد واحدة بدلاً من كلتيهما، مع الحفاظ على الخصائص الميكانيكية الحيوية الأساسية للتقنية السريرية. يعيد هذا التعديل إنتاج تحفيز مسارات GV وBL بدقة في نموذج الجرذان. ونظراً لأن معاملات القياس قد تختلف بين أنظمة قياس الضغط اللمسي، فإن توحيد التعامل اليدوي بناءً على الاستجابات السلوكية للجرذان أثناء مسح الظهر وSP قد يحقق قابلية تكرار أكبر من الاعتماد فقط على قياسات القوة الخاصة بالجهاز. كما أثبتت الدراسات السابقة أن مسح الظهر له تأثيرات مضادة للاكتئاب في الجرذان الصغيرة المصابة بـ CUMS9، على الرغم من أن SP حقق تأثيرات علاجية أكبر بكثير. وبالتالي، فإن التأثيرات المفيدة الملحوظة في الدراسة الحالية قد تعكس جزئياً مساهمة عملية مسح الظهر بالإضافة إلى التأثيرات الأساسية لـ SP.

يجب الإقرار بوجود عدة قيود. أولاً، كان حجم العينة صغيراً نسبياً، مما قد يحد من قوة النتائج وإمكانية تعميمها. ثانياً، ركزت الدراسة الحالية بشكل أساسي على وضع والتحقق من صحة بروتوكول معياري لـ SP؛ وبناءً على ذلك، فقد بحثت في مجموعة محدودة فقط من النتائج الآلية بدلاً من التحديد الشامل للآليات البيولوجية الكامنة. وفقاً لذلك، لم يتم إجراء التحقق الآلي، بما في ذلك تعداد الخلايا الالتهابية في سائل غسيل القصبات والأسناخ (BALF)، ومستويات IgE النوعية لـ OVA، وتوصيف سيتوكينات Th2 (مثل IL-5 و IL-13)، وتحليل مسارات الإشارات داخل الخلايا. أشارت هذه النتيجة إلى أن SP عزز الوظيفة التنفسية في الجرذان المصابة بالربو، وهي نتيجة لا تزال بحاجة إلى مزيد من التحقق، مقترنة بقياسات مقاومة المجرى الهوائي المباشرة (Raw). ثالثاً، تم تنفيذ جميع العمليات بواسطة مشغل واحد مدرب، ولم يتم تقييم إمكانية التكرار بين مشغلين مدربين مختلفين. وأخيراً، لم يتم إدراج مجموعة تدخل تعتمد على المسح الظهري فقط للتمييز بين التأثيرات المستقلة للمسح الظهري وتأثيرات SP. يجب أن تتضمن الدراسات المستقبلية أحجام عينات أكبر، وتقييم إمكانية التكرار بين المشغلين، ودمج مجموعات ضبط إضافية، ومزيد من البحث في الآليات الجزيئية الكامنة وراء التأثيرات العلاجية لـ SP.

الإفصاحات

يصرح المؤلفون بأنه ليس لديهم ما يفصحون عنه. خلال عملية إعداد المخطوطة، لم يتم استخدام أي أدوات ذكاء اصطناعي في تحضير هذه المخطوطة. يتحمل المؤلفون المسؤولية الكاملة عن اكتمال ودقة المخطوطة النهائية.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (قائد المشروع Xiong Ying، رقم 81973970، بالاعتماد على جامعة نانجينغ للطب الصيني). يتوجه المؤلفون بالشكر إلى معهد طب الأطفال، ومختبر جيانغسو الرئيسي لصحة الأطفال والطب الصيني، والمختبر الرئيسي لأبحاث الوخز بالإبر والطب التابع لوزارة التربية والتعليم لتوفير المقرات والأدوات والمعدات.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
هلام 4%Al(OH)3Shanxi ZHHC Biomedical Technology Co., LTD, ChinaBS010غير متاح
Ach(acetylcholine)Sigma, USAA2251غير متاح
شرائح مجهرية لاصقةCitotest, Jiangsu, ChinaREF.188105
P/N.80312-3161		غير متاح
أكياس نفايات المخاطر البيولوجيةNanjing Xinyuan plastic Co., Ltd.HJ421-2008غير متاح
جهاز تجفيف الأنسجة البيولوجيةKedee, Zhejiang, ChinaKD-HIIغير متاح
جهاز طمر الأنسجة البيولوجيةKedee, Zhejiang, ChinaKD-BMغير متاح
جهاز فرد الأنسجة البيولوجيةKedee, Zhejiang, ChinaKD-PIغير متاح
Buxco Research SystemsDSI Buxco,Wilmington, NC,USAPFTغير متاح
خلاط قابل للتعديل (MX-S)DLAB, Beijing, China8031102000غير متاح
جهاز طرد مركزي للأطباق الدقيقةScilogex, USASCI-CF2800M E050S11B000798غير متاح
كابينة تدفق هوائي نظيف Sanfa, Shanghai, ChinaSF-CJ-1Aغير متاح
جهاز طرد مركزي تقليديDLAB, Beijing, ChinaD100BE: 9031001011غير متاح
قفازات معقمة مخصصة للاستخدام مرة واحدةShanghai Kebang Medical Latex Equipment Co., Ltd.22010739https://www.sh-kebang.com/products_detail/6.html
ميزان إلكترونيJinghai, ShanghaiYP3001Nغير متاح
ميزان إلكترونيJinghai,  Shanghai, ChinaYP3001Nغير متاح
نظام Finger TPSPressure Profile System, Inc, USAApplicable software version: Chameleon 2018https://pressureprofile.com/body-pressure-mapping/finger-tps
 مجهر ضوئي فلوريOlympus, Tokyo, JapanDP70غير متاح
جهاز تعقيم بالبخار عالي الضغطTomy, JapanSX-500غير متاح
جهاز طرد مركزي للتجميد عالي السرعةEppendorf5418Rغير متاح
طقم صبغ ماسون ثلاثي الألوانSolarbio, Shanghai, ChinaG1340غير متاح
ماصات دقيقة ورؤوس معقمةeppendorfJ48931Lhttps://www.eppendorf.com/hk-en/Products/Liquid-Handling/All-Pipettes-Dispensers-Automated-Liquid-Handlers/Eppendorf-Reference2-p-PF-222171
أجهزة الميكروتومLeica, GermanRM2145غير متاح
MP(methylprednisolone sodium succinate)Shyndec, Shanghai, ChinaH20070007غير متاح
مقياس طيف ضوئي NanoDrop LiteThermo Fisher Scientific, USAnd-ndl-pr-2yrw-cccغير متاح
 وحدة تحكم في الإرذاذEmka, FranceVENT4:14554غير متاح
مظاريف مختومة معتمةNanjing Kongdu printing Co., Ltd201701غير متاح
OVA (الدرجة II)Sigma, USAA5253غير متاح
OVA (الدرجة V)Sigma, USAA5503غير متاح
طقم PCRYeasen, Shanghai, China11201ES08غير متاح
حاوية أدوات حادة مقاومة للثقبNanjing Xinyuan plastic Co., Ltd.KMT-15Yغير متاح
طقم النسخ العكسيBio.vazyme, Nanjing, ChinaR323غير متاح
أجهزة طرد مركزي صغيرةHettich, GermanMIKRO 220R D-78532غير متاح
كرات قطنية جافة معقمةZHENDE, Zhejiang, China202203121Bhttps://www.zhende.com/index.php?g=product&m=index&a=info&id=13
TrizolBio.vazyme, Nanjing, ChinaR771غير متاح
مجمد تخزين شديد البرودةThermo Fisher Scientific, USA950GP-ULTSغير متاح
مرذذ فوق صوتيJiangsu Yuwell Medical Instruments Co., Ltd., China402AIغير متاح
نظام ViiATM7 للـ PCR في الوقت الحقيقيLife TechnologiesTM , Singapore278882021غير متاح
جهاز قياس تذبذب الجسم بالكاملScrieq, Canada1185162,1184031,1185898FV-FXM1-01, خرطوشة الزفير FX1: FV-FXM1 ET, خرطوشة الشهيق FX1: FV-FXM1-IA

المراجع

  1. Bateman ED, et al. Global strategy for asthma management and prevention: GINA executive summary. Eur Respir J. 2008;31(1):143-178.
  2. Lizano-Barrantes C, et al. Impact of treatment adherence and inhalation technique on asthma outcomes of pediatric patients: A longitudinal study. Front Pharmacol. 2024;15:1340255.
  3. Vähätalo I, et al. Long-term adherence to inhaled corticosteroids and asthma control in adult-onset asthma. ERJ Open Res. 2021;7(1).
  4. Yılmaz İ, et al. Biological therapy management from the initial selection of biologics to switching between biologics in severe asthma. Tuberk Toraks. 2023;71(1):75-93.
  5. García-Marcos L, et al. Asthma management and control in children, adolescents, and adults in 25 countries: A Global Asthma Network phase I cross-sectional study. Lancet Glob Health. 2023;11(2):e218-e228.
  6. Kelly HW, et al. Effect of inhaled glucocorticoids in childhood on adult height. N Engl J Med. 2012;367(10):904-912.
  7. Wu J, Yang XW, Zhang M. Massage therapy in children with asthma: A systematic review and meta-analysis. Evid Based Complement Alternat Med. 2017:5620568.
  8. Yue QJ, et al. Effect of pediatric massage in the treatment of chronic persistent asthma in children: A systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. J Hainan Med Univ. 2019;25:1260-1266.
  9. Wu R, et al. Traditional pediatric massage enhanced hippocampal GR, BDNF, and IGF-1 expressions and exerted an antidepressant effect in an adolescent rat model of CUMS-induced depression. Neuroscience. 2024;542:47-58.
  10. Lin L, Yu L, Zhang S, Liu J. The positive effect of mother-performed infant massage on infantile eczema and maternal mental state: A randomized controlled trial. Front Public Health. 2022;10:1068043.
  11. Lin L, et al. Traditional pediatric massage enhanced skeletal muscle mass in OVA-exposed adolescent rats via regulating the SCFAs-FFAR2-IGF-1/AKT pathway. Front Microbiol. 2024;15:1492783.
  12. Xiong Y, Noraas AU, Yang X. The effect of chiropractic manipulation on atopic symptoms and gut microbiota in children with atopy. J Li Shizhen Tradit Chin Med. 2017;28:2440-2442.
  13. Liu Y, Gu Y, Xiong Y. Wrist-ankle acupuncture combined with spine-pinching manipulation for allergic rhinitis in children: A randomized controlled trial. World J Acupunct Moxibustion. 2019;29:259-263.
  14. Zhu Y, et al. Chiropractic therapy modulated gut microbiota and attenuated allergic airway inflammation in an immature rat model. Med Sci Monit. 2020;26:e926039.
  15. Lu W, Fang M, Yang X. Observation on the influence of parent-child massage on children's psychological and behavioral problems. Chin Med Mod Distance Educ China. 2025;23(4):75-78.
  16. Lund I, Lundeberg T, Kurosawa M, Uvnäs-Moberg K. Sensory stimulation (massage) reduces blood pressure in unanesthetized rats. J Auton Nerv Syst. 1999;78(1):30-37.
  17. Chen YN, et al. Repetitive unidirectional spinal tactile stimulation engages microglial BMAL1 pathways to promote synaptic remodeling in the medial prefrontal cortex of adolescent VPA-exposed mice. J Neuroinflammation. 2025;23(1):23.
  18. Gorrell LM, et al. Spinal manipulation characteristics: A scoping literature review of force-time characteristics. Chiropr Man Therap. 2023;31(1):36.
  19. Papadopoulos NG, Miligkos M, Xepapadaki P. A current perspective of allergic asthma: From mechanisms to management. Handb Exp Pharmacol. 2022;268:69-93.
  20. Nials AT, Uddin S. Mouse models of allergic asthma: Acute and chronic allergen challenge. Dis Model Mech. 2008;1(4-5):213-220.
  21. Martin JG, Tamaoka M. Rat models of asthma and chronic obstructive lung disease. Pulm Pharmacol Ther. 2006;19(6):377-385.
  22. QDV, et al. Construction of an acupoint atlas for experimental rats. Acupunct Res. 2025;50(11):1339-1351.
  23. Dong L, et al. Hypoxic hUCMSC-derived extracellular vesicles attenuate allergic airway inflammation and airway remodeling in chronic asthma mice. Stem Cell Res Ther. 2021;12(1):4.
  24. Muhamad SA, et al. Intranasal administration of Lignosus rhinocerotis (Cooke) Ryvarden (Tiger Milk Mushroom) extract attenuates airway inflammation in a murine model of allergic asthma. Exp Ther Med. 2019;17(5):3867-3876.
  25. Vaickus LJ, Bouchard J, Kim J, Natarajan S. Assessing pulmonary pathology by detailed examination of respiratory function. Am J Pathol. 2010;177(4):1861-1869.
  26. Glaab T, Taube C, Braun A, Mitzner W. Invasive and noninvasive methods for studying pulmonary function in mice. Respir Res. 2007;8(1):63.
  27. Lomask M. Further exploration of the Penh parameter. Exp Toxicol Pathol. 2006;57(Suppl 2):13-20.
  28. Leung SY, et al. Effect of transforming growth factor-beta receptor I kinase inhibitor 2,4-disubstituted pteridine (SD-208) in chronic allergic airway inflammation and remodeling. J Pharmacol Exp Ther. 2006;319(2):586-594.
  29. Ogulur I, et al. Type 2 immunity in allergic diseases. Cell Mol Immunol. 2025;22(3):211-242.
  30. Lee JH, Son SH, Kim NJ, Im DS. NJK14047 suppression of the p38 MAPK pathway ameliorates OVA-induced allergic asthma during sensitization and challenge periods. Biomol Ther (Seoul). 2023;31(2):183-192.
  31. Li J, et al. Establishment of a juvenile mouse asthma model induced by postnatal hyperoxia exposure combined with early OVA sensitization. Heliyon. 2024;10(1):e23291.
  32. Wei J, Yang X. Efficacy of pediatric tuina on spleen deficiency syndrome and allergic constitution in children with bronchial asthma during the remission period: A study of 29 cases. J Pediatr Tradit Chin Med. 2023;19(3):86-89.
  33. Gao J, He J. Fifty-eight cases of allergic rhinitis treated with spine-pinching manipulation and acupuncture in Switzerland. World J Acupunct Moxibustion. 2010;20(3).
  34. Hu Y, et al. Clinical study of Yupingfeng Powder combined with spine-pinching manipulation for cough variant asthma in children. Heilongjiang J Tradit Chin Med. 2024;53(2):369-371.
  35. Yao D, Zhang Y, Deng L. Effect of spine-pinching manipulation on asthma control in children. Heilongjiang J Tradit Chin Med. 2020;49(2):157-158.
  36. Zhang X, et al. Traditional pediatric massage exerted an antidepressant effect and activated the IGF-1/NRF2 pathway in CUMS-exposed adolescent rats. J Neuroimmunol. 2025;400:578554.
  37. Lan J, McCray A, Brown E, Eddens T. Early-life viral infections and asthma: New cells and ideas. Curr Opin Pediatr. 2025;37(6):597-605.
  38. Major B, et al. Massage-like stroking boosts the immune system in mice. Sci Rep. 2015;5:10913.
  39. Ackerley R, Carlsson I, Wester H, Olausson H, Backlund Wasling H. Touch perceptions across skin sites: Differences between sensitivity, direction discrimination, and pleasantness. Front Behav Neurosci. 2014;8:54.
  40. Li Q, et al. Experimental study on the effects of different durations of spine-pinching manipulation on immune function in rats with Wei Qi deficiency. Jiangsu J Tradit Chin Med. 2017;49(9):75-77.
  41. Tang Q, Shen L, Lin L. Effects of spine-pinching manipulation with different stimulation intensities on hippocampal inflammation-related factors and behavioral disorders in autistic rats. J Hunan Univ Chin Med. 2025;45(7):1264-1270.
  42. Li Z, et al. Effects of spine-pinching therapy on thoracic duct lymph flow and mesenteric lymphatic microcirculation in rats with spleen deficiency. China J Tradit Chin Med Pharm. 2025;40(8):4246-4250.
  43. Ma W, et al. Effects of spine-pinching intervention on anorexia in young rats based on the 2-AG/CB1/AMPK1 pathway. Shaanxi J Tradit Chin Med. 2025;46(2):159-164.
  44. Tang Q, et al. Effects of spine-pinching manipulation on BDNF and CREB protein expression in different brain regions of rats with autism spectrum disorder. J Hunan Univ Chin Med. 2025;45(2):259-266.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

نموذج الربو في الجرذانالتهاب المجاري التنفسيةفرط استجابة المجاري التنفسيةإعادة تشكيل المجاري التنفسيةالتدليك للأطفالالطب الصيني التقليديتقنين البروتوكولالربو التجريبي

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.