يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

الآثار السريرية لإزيم ميتالوبروتيناز مصفوفة المصل 12 وورم كاديرين-13 في التصنيف الجزيئي والعلاج الشخصي في سرطان الرئة

131 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/70633

⸱

أبريل 28, 2026

 ,  ,  ,  , 
1Department of Respiratory and Critical Care Medicine IV (RICU), Xingtai People's Hospital, 2Department of Respiratory and Critical Care Medicine I, Xingtai People's Hospital, 3Department of Medical Oncology II, Xingtai People's Hospital, 4Department of Respiratory and Critical Care Medicine, Huanghua Development Zone Boai Hospital

في هذه المقالة

ملخص

تقيم هذه الدراسة مصفوفة الميتالوبروتيناز 12 (MMP-12) والورم كاديرين-13 (CDH13) كمؤشرات حيوية مكملة في سرطان الرئة. ترتبط هذه العلامات بالأنواع الجزيئية، والاستجابة للعلاج، والبقاء على قيد الحياة، مما يدعم استخدامها المحتمل في تصنيف التصنيف الفرعي، وتقسيم العلاج، والتقييم التنبؤي.

الملخص

لا يزال سرطان الرئة سببا رئيسيا للوفيات المرتبطة بالسرطان في جميع أنحاء العالم، ويرجع ذلك إلى تباين بيولوجيا، وتشخيصه المتأخر المتكرر، وقيوده في الاختبارات الجزيئية الشاملة. غالبا ما تكون المؤشرات الحيوية الفردية غير كافية لتوجيه اتخاذ القرار السريري، مما يبرز الحاجة إلى مؤشرات تكميلية وقابلة للتطبيق سريريا تدمج البيولوجيا الجهازية والبيولوجية الخاصة بالورم. في هذه الدراسة الجماعية التي شملت مركزا واحدا، تم تسجيل 262 مريضا مصابين بسرطان الرئة. تم قياس مستويات مناضي-بروتيناز مصفوفة المصل (MMP-12) باستخدام اختبار التورم المناعي المرتبط بالإنزيمات (ELISA)، وتم تقييم تعبير كاديرين-13 (CDH13) في ورم بواسطة الكيمياء المناعية (IHC) باستخدام درجة مناعية مؤكدة (IRS). تم الحصول على التصنيف الجزيئي من خلال الاختبارات السريرية الروتينية، وتم تقييم الروابط مع استجابة العلاج ونتائج البقاء باستخدام نماذج لوجستية متعددة المتغيرات ونماذج انحدار كوكس. أظهرت MMP-12 وCDH13 توزيعات عكسية عبر الأنواع الجزيئية الفرعية (P < 0.001)، بحيث أظهرت الأورام المعدلة بمستقبل عامل النمو الجلدي (EGFR)/كيناز اللمفوما التنبلسية (ALK) أقل MMP-12 وارتفاع CDH13، بينما أظهرت أورام الورم المتحولة والوايلد نمط معاكس. كان التعبير الأعلى من رابطة الموت المبرمجة 1 (PD-L1) مرتبطا باستمرار بزيادة MMP-12 وانخفاض CDH13 (جميع الفروسوتريون < 0.05). ارتبط ارتفاع MMP-12 بشكل مستقل بانخفاض معدل الاستجابة الموضوعي (ORR) (نسبة الاحتمالات المعدلة [OR] = 0.662، P < 0.001) وانخفاض معدل البقاء (نسبة الخطر للبقاء بدون تقدم [PFS] [HR] = 1.382؛ معدل البقاء الكلي [OS] HR = 1.421؛ كلاهما P < 0.001)، بينما تنبأت نسبة CDH13 الأعلى بتحسن الاستجابة (معدل OR = 1.201، P < 0.001) والبقاء على قيد الحياة (معدل نسبة الدم (PFS HR = 0.884؛ معدل ضربات النظام = 0.862; كلاهما P < 0.001). حدد التوقيع العالي MMP-12/CDH13 المنخفض مجموعة فرعية ذات نتائج أسوأ بشكل ملحوظ (معدل ضربات القلب = 2.281؛ معدل ضربات النظام = 2.506; P < 0.001). تشير هذه النتائج إلى أن مصل MMP-12 وورم CDH13 قد يعملان كمؤشرات حيوية مكملة لتصنيف الجزيئات الفرعية، والطبقات العلاجية، والتقييم التنبؤي في سرطان الرئة.

المقدمة

لا يزال سرطان الرئة عبئا صحيا عالميا رئيسيا، حيث يشكل ما يقرب من 2.5 مليون حالة جديدة وحوالي 1.8 مليون حالة وفاة حول العالم في عام 2022. على الرغم من التقدم الكبير في الفحص والتصوير والعلاج الجهازي، لا تزال فترة البقاء على قيد الحياة محدودة لكثير من المرضى لأن سرطان الرئة غير متجانس بيولوجيا وغالبا ما يتم تشخيصه في المراحل المتقدمة2،3،4،5. لذلك أصبح علم الأورام الدقيق مركزيا في رعاية سرطان الرئة المعاصرة، خاصة لسرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC)، حيث تحدد التغيرات القابلة للتنفيذ المحركات مجموعات جزيئية ذات تاريخ طبيعي وحساسية علاجية مميزة6. توصي إرشادات الممارسة السريرية بتحليل جزيئي واسع في الأمراض المتقدمة، بما في ذلك EGFR، ALK، KRAS، ROS1، BRAF، تخطي MET exon 14، RET، ERBB2 (HER2)، واندماجات NTRK، إلى جانب تقييم المؤشرات الحيوية المناعية مثل PD-L1 7,8,9,10. لقد غيرت هذه التطورات نتائج مجموعات محددة، لكنها أيضا خلقت عنق زجاجة سريرية جديدة. قد تكون الأنسجة غير كافية للفحوصات الشاملة، وقد يؤخر وقت الانتهاء اتخاذ قرارات علاجية، كما أن الوصول إلى تسلسل الجيل القادم عالي الجودة يختلف بين أنظمة الصحة 7,9. حتى عندما تتوفر الاختبارات الجزيئية، يظل العلاج الموجه بالمؤشرات الحيوية غير كامل لأن الحالة الجزيئية لا تلتقط بشكل كامل الحالات الميكروبيئية للورم التي تؤثر على استجابة العلاج ومقاومته. يستخدم تعبير PD-L1 على نطاق واسع لكنه له قيود معروفة جيدا كمتنبئ مستقل، وعبء الطفرات الورمية له تباين وعدم يقين كبير في استخدامه الأمثل 6,9,10. تسلط هذه الحقائق الضوء على الحاجة العملية إلى مؤشرات حيوية مكملة قابلة للتوسع، وغنية بالمعلومات البيولوجية، وقادرة على إثراء التصنيف الجزيئي الفرعي وطبقات العلاج عندما تكون المعلومات الجينومية غير كاملة أو متأخرة أو غامضة.

إعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلية والبيئة الدقيقة للورم ببروتيوليكي هو أحد هذه الأبعاد البيولوجية التي تقدر بشكل متزايد كعلامة بارزة للخبيثة ومحدد الاستجابة العلاجية. تنظم ماتريكسات البروتينات المعدنية (MMPs) الغزو، وتكوين الأوعية، وحركة الخلايا المناعية، وإشارات السيتوكينات، مما يربط البرامج الداخلية للأورام بسياقات الالتهاب والسترومية11. من بين هذه الإنزيمات، جذب إنزيم ماتريكس ميتالوبروتيناز-12 (MMP-12)، المعروف أيضا باسم إيلاستاز البلعم، الانتباه في سرطان الرئة لأنه يعبر عبر طيف من أورام الرئة البشرية ويبدو مرتبطا بأنماط ظاهرية عدوانيةونتائج أسوأ. بعيدا عن تعبيره الأنسجي، يمكن قياس MMP-12 في الدورة الدموية، مما يجعله جذابا كمؤشر حيوي طفيف التوغل مع إمكانية الاستفادة من المراقبة التسلسلية13. وقد دعمت التحليلات الحديثة متعددة السرطانات الأهمية السريرية ل MMP-12 في سرطان الغدة في الرئة، مما يشير إلى أدوار تنبؤية وتنبؤية تستحق استكشافا أعمق في المجموعات الفرعية القابلة للتنفيذسريريا 14. من المهم أن المؤشرات الحيوية المنتشرة تستخدم بشكل متزايد لتكملة الفحوصات النسيجية في علم الأورام، وهناك اهتمام متزايد بالمؤشرات المعتمدة على الدم التي تعكس ليس فقط عبء الأورام بل أيضا ديناميكيات المناعة والعضلات التي تشكل الحساسية للعلاج الجهازي15. في سرطان الرئة، حيث يستخدم العلاج المناعي والعلاج الموجه بشكل متكرر، قد تكون العلامات الحيوية التي تعكس البيئة الدقيقة للورم ذات قيمة خاصة لفهم تباين العلاج، والمقاومة المبكرة، والحاجة إلى نهج الدمج16. هذا السياق البيولوجي والسريري يحفز تقييما مركزا ل MMP-12 في المصل يتجاوز الإشارة التشخيصية، وتحديدا كمؤشر مرشح مرتبط بالأنواع الجزيئية والمسارات العلاجية.

بالتوازي، يمثل كاديرين 13 (CDH13)، المعروف أيضا باسم T كاديرين أو H كاديرين، محورا ميكانيكيا مميزا ذا صلة بتمييز الأورام، وإشارات الالتصاق، واللدونة الظهارية. CDH13 هو كاديرين غير نمطي مثبت على الغشاء عبر جزء من الجليكوزيل فوسفاتيديلينوسيتول، وقد وصف على نطاق واسع بأنه مثبط للورم في عدة أورامخبيثة 17. في NSCLC، تم الإبلاغ مرارا عن كتم الصمت فوق الجيني ل CDH13 عبر فرط المثيلة المروج، وتم ربطه بتقدم الورم وخصائص سريرية مرضية سلبية18,19. تدعم الأدلة التحليلية الفوقية والتكاملية أن فرط مثيلة CDH13 أكثر شيوعا في NSCLC مقارنة بأنسجة الرئة الطبيعية وقد يكون له صلة تشخيصية20,21. بعيدا عن قيمته كمؤشر على التحول الخبيث، قد تتقاطع حالة CDH13 بشكل معقول مع حساسية العلاج. ربطت الأعمال التجريبية مثيلة منشط CDH13 وتعبيره المعدل بأنماط مقاومة السيسبلاتين في نماذج سرطان الرئة، مما يثير احتمال أن يعكس CDH13 برامج بيولوجية مرتبطة باستجابة العلاج وتكيف الأورامتحت ضغط العلاج. تضع هذه البيانات مجتمعة CDH13 كمؤشر حيوي قائم على الأنسجة مع آثار محتملة على بيولوجيا المخاطر والطبقات العلاجية. على عكس اختبارات متعددة الأوميكس المعقدة، يمكن تقييم CDH13 بواسطة الكيمياء المناعية في سير العمل الروتيني لعلم الأمراض، مما يتيح الترجمة العملية إذا قدم معلومات إضافية تتجاوز العلامات السريرية والجزيئية الموجودة.

عند النظر إليهما معا، يمثل MMP-12 وCDH13 أقسام وآليات بيولوجية تكميلية. MMP-12 هو قراءة دورانية قد تلتقط تنشيط المناعة والسماح البتروماتية وإعادة التشكيل المدفوعة بالبروتياز، بينما CDH13 هو مؤشر على مستوى الأنسجة يعكس التصاق الورم المثبط والتنظيم اللاجيني. نفترض أن دمج هذه المحاور يمكن أن يحسن الاستدلال السريري في مجالين رئيسيين يحددان الأورام الدقيقة في سرطان الرئة. أولا، قد يوفر إطار عمل مشترك لمؤشر المصل والأنسجة معلومات تكميلية لتصنيف الجزيئات الفرعية، إما من خلال الربط بتغيرات المحركات القابلة للتنفيذ وحالات المؤشرات المناعية أو من خلال تحديد الأنماط الظاهرية المتماسكة بيولوجيا التي تتبع الفئات الجزيئية المحددة عندما تكون الاختبارات الجينومية محدودة 2,6,8,10 . ثانيا، قد يساعد التوقيع المتكامل في توجيه العلاج الشخصي من خلال تحسين تصنيف المخاطر والارتباط باختيار العلاج والنتائج عبر نماذج العلاج والعلاج المناعي المستهدف، حيث تكون المقاومة متعددة العوامل والمؤشرات الفردية غير كافية 9,10,23. في هذا السياق، نهجنا مقصود أن يكون عمليا. بدلا من استبدال التشخيصات الجزيئية، يهدف إلى تكاملها من خلال توفير قياسات قابلة للتوسع ومتوافقة مع العيادات يمكن الحصول عليها بسرعة وتفسيرها جنبا إلى جنب مع النمط الجيني، وPD-L1، والمرحلة. قد تكون هذه الاستراتيجية مفيدة بشكل خاص في البيئات الواقعية حيث الأنسجة نادرة، أو الخزعات المتكررة غير عملية، أو السؤال السريري ليس فقط ما إذا كان هناك عامل موجود، بل كيف يمكن توقع حساسية العلاج ومخاطر التقدم لدى المريض الفردي.

وبناء عليه، في هذه الدراسة الجماعية، نقوم بتقييم الآثار السريرية لمصل MMP-12 وورم CDH13 عبر الأنواع الجزيئية ومسارات العلاج لسرطان الرئة. على وجه التحديد، نفحص ما إذا كانت هذه العلامات الحيوية، بشكل فردي ومجتمع، مرتبطة بالفئات الجزيئية الرئيسية والمجموعات العلاجية، وما إذا كانت تضيف معلومات تنبؤية ذات صلة بالإدارة الشخصية. نضع هذا العمل أيضا ضمن منظومة أوسع من الأساليب البديلة، بما في ذلك الحمض النووي الورمي المتداول، والتحليل الميثيل، والنمذجة متعددة الوسائط التي تدمج الميزات السريرية والتصويرية والجزيئية24,25. تكمن حداثة دراستنا ليس في اقتراح علامات حيوية فردية جديدة، بل في دمج إشارة بروتياز متداولة مع علامة التصاق وعلم فوق جيني قائم على الأنسجة لمعالجة سؤال سريري قابل للتنفيذ: كيفية تكمل التصنيف الجزيئي وتخصيص العلاج باستخدام قياسات ممكنة في الممارسة الروتينية. من خلال التقاط الأبعاد التكميلية للتفاعلات الجهازية بين الورم والمضيف وعلم الأحياء الجوهري للورم، يمتد هذا الإطار التكاملي إلى ما هو أبعد من الدراسات السابقة التي قيمت MMP-12 أو CDH13 بشكل منفصل. قد يوفر هذا النهج جسرا عمليا بين علم الأمراض التشخيصي والعلاجات الدقيقة، مع تطبيقات محتملة في إعطاء الأولوية للاختبارات الجزيئية، ووضع التناقضات في المؤشرات الحيوية في سياقها، وتحسين تخطيط العلاج الفردي القائم على المخاطر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

جميع الإجراءات امتثلت للوائح المؤسسية والوطنية وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة الأخلاقيات في مستشفى شعب شينغتاي (رقم 2024-124). تم التنازل عن شرط الموافقة المكتوبة المستنيرة لأن البيانات السريرية التي جمعت بشكل روتيني وتم استخدام عينات متبقية. تم إخفاء هوية جميع البيانات قبل التحليل.

تصميم الدراسة، الإعداد، والمخطط العام
أجريت هذه الدراسة كمجموعة رصدية مركزية واحدة تهدف إلى تقييم الآثار السريرية ل MMP-12 في المصل وورم CDH13، بشكل فردي ومجتمع، في تصنيف جزيئات سرطان الرئة والعلاج الشخصي. أجريت الدراسة في مستشفى شينغتاي الشعبي. تم تحديد المرضى المؤهلين الذين أداروا بين يناير 2021 ويونيو 2022، وتم تسجيل 262 مريضا متتاليا استوفوا معايير الإدراج والاستبعاد المحددة مسبقا.

يتم توضيح سير العمل العام للدراسة في الشكل 1. يعرض المخطط العملية الكاملة من تحديد هوية المريض إلى التحليل، بما في ذلك فحص المرضى وتسجيله، والتوصيف السريري المرضي الأساسي والتحليل الجزيئي المستمد من الاختبارات السريرية الروتينية، وجمع ومعالجة المصل قبل العلاج، وتحضير أنسجة الورم لكيمياء المناعة CDH13، وقياس كمية MMP-12 في المصل، وتقييم CDH13 المناعي، وتصنيف العلاج الخط الأول ومسارات العلاج اللاحقة، والنتيجة الطولية التأكيد، بما في ذلك الاستجابة للعلاج، والبقاء بدون تقدم، والبقاء على قيد الحياة بشكل عام. يميز المخطط بين تحليلات التشخيص والتحليل الجزيئي عن تحليلات العلاج والنتائج، ويشير إلى النقاط الزمنية التي تم فيها جمع العينات الحيوية، وتوليد النتائج الجزيئية، وبدء العلاج، وإجراء تقييمات المتابعة.

فحص المشاركين، معايير الأهلية، وتجريد البيانات السريرية
تم تحديد المرضى المؤهلين المحتملين من نظام معلومات المستشفى وسجل علم الأمراض خلال نافذة التسجيل المحددة مسبقا (يناير 2021 إلى يونيو 2022). تم تأكيد وجود سرطان رئة أولي باستخدام علم الأمراض النسيجي، مع دعم مراجعة سريرية متعددة التخصصات عند الحاجة. تم تسجيل المرضى البالغين المتتاليين الذين استوفوا جميع معايير الأهلية. شملت معايير الإدراجة وجود سرطان رئة أولي مؤكد نسيجيا، وتوفر عينة مصل قبل العلاج تم الحصول عليها قبل بدء أي علاج مضاد للورم (وقبل الجراحة لدى المرضى الذين يخضعون للاستئصال الأولي)، وتوفر نسيج ورمي كاف لكيمياء المناعة النسيجية CDH13، وتوفر معلومات النوع الجزيئي الفرعي التي تم توليدها كجزء من الرعاية السريرية الروتينية. تم استبعاد المرضى الذين لديهم تاريخ موثق لورم خبيث آخر قبل التسجيل، والمرضى الذين لم يكن لديهم حجم مصل كاف أو تدهور سلامة العينة، والمرضى الذين لم يكن لديهم نسيج ورمي مقيم لتقييم CDH13، والمرضى الذين تلقوا علاجا جهازيا مضادا للسرطان قبل جمع الدم في المرحلة الأساسية.

تم استخراج البيانات السريرية المرضية والعلاج من السجلات الطبية الإلكترونية باستخدام نموذج تقرير حالة موحد مع تعريفات متغيرات محددة مسبقا وقواعد ترميز. شملت المتغيرات المسجلة التركيبة السكانية (العمر والجنس)، التعرض للتدخين، حالة أداء مجموعة الأورام التعاونية الشرقية (ECOG)، الأمراض المصاحبة، نتائج التصوير الأساسية، النوع النسيجي، مرحلة الورم والعقدة-النقائل (TNM) (وفقا لنظام المراحل المستخدم في الممارسة السريرية الروتينية خلال فترة الدراسة)، معايير المختبر الأساسية، ومعلومات العلاج التفصيلية (بما في ذلك النظام الأول، وتواريخ البدء، وتعديلات الجرعة، وانتقالات العلاج). تم قياس التعرض للتدخين بسنوات العلبة كما يلي: سنوات العلبة = (سجائر يوميا ÷ 20) × سنوات التدخين. عندما يكون تاريخ التدخين غير مكتمل أو غير متسق عبر السجلات، يتم تصنيف متغير التدخين على أنه غير معروف، وتم توثيق المصدر كاختلاف في سجل التجريد؛ تم التعامل مع الاختفاء وفقا لخطة التحليل الإحصائي المحددة مسبقا.

جمع العينات ومعالجتها وتخزينها
تم جمع دم الأوردة الطرفية في البداية قبل بدء أي علاج مضاد للأورم. تم فصل المصل عن طريق الطرد المركزي بحرارة 1,500 × جرام لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. تم نقل المادة الفائقة في المصل إلى الكريوفيالات منخفضة الارتباط دون إزعاج الطبقة الخلوية. تم توزيع المصل إلى أجزاء تتراوح بين 200–500 ميكرولتر لتقليل دورات التجمد والذوبان، وتم تخزين الكميات عند −80 درجة مئوية حتى تحليل الدفعات. تم تسجيل الفترة من جمع الدم إلى التجميد لكل عينة، وتم استبعاد العينات التي تجاوز وقت الجمع إلى التجميد ساعتين.

تم تطبيق إجراءات مراقبة جودة محددة مسبقا قبل التحليل من خلال توثيق تحلل الدم والدهون في مرحلة المعالجة. تم استبعاد العينات التي ظهرت بشكل واضح من قياس ELISA. تم إذابة أليكوات المصل على الثلج مباشرة قبل الاختبار، وخلطها بعكس لطيف، وطرد مركزها عند 2000 × جرام لمدة 5 دقائق لإزالة الجسيمات عند الحاجة. تم تجنب التحريك القوي والدوامات لمنع تكون الفقاعات والتشوهات البصرية أثناء قياسات الامتصاص.

اكتساب وتحضير أنسجة الورم
تم الحصول على نسيج ورمي من إجراءات تشخيصية روتينية (الخزعة، تنظير القصبات، خزعة الإبرة الأساسية، أو الاستئصال الجراحي). تم تثبيت الأنسجة في فورمالين محايد ومخزن وفقا لممارسة علم الأمراض القياسي وتم دمجها في البارافين. تم إعداد مقاطع (3–4 ميكرومتر) على شرائح مشحونة للكيمياء المناعية النسيجية. تم تخزين الشرائح غير المصبوغة في بيئة جافة بدرجة حرارة الغرفة وصبغها خلال فترة محددة مسبقا لتقليل تحلل المستضدات. تم الاحتفاظ بسجل سلسلة الحجز يربط معرفات العينات برموز الدراسة التي تم إلغاء التعريف. تم إعماء الطبيب الشرعي الذي أجرى تقييم CDH13 عن قيم MMP-12 في المصل، والنوع الجزيئي، والعلاج، والنتائج.

قياس كمية مصل MMP-12 باستخدام اختبار التوربنت المناعي المرتبط بالإنزيمات (ELISA)
تم جمع دم الأوردة الطرفية قبل أي علاج مضاد للأورم، ويفضل أن يكون ذلك خلال 7 أيام قبل الخزعة أو بدء العلاج. تم قياس مصل MMP-12 باستخدام مجموعة ELISA تجارية بشرية من نوع MMP-12. تم إذابة كل قطعة مصل مرة واحدة على الثلج، وخلطها برفق، واختبارها في نسخة طبق تعليمات المجموعة. تم توليد منحنى قياسي على كل لوحة باستخدام تخفيفات تسلسلية للمعيار المؤتلف المرفق، وتمت قراءة الامتصاص عند 450 نانومتر مع تصحيح مرجعي باستخدام قارئ الميكروبلايت. تم حساب التكثفات عن طريق تركيب منحنى معيار الانحدار اللوجستي المكون من أربعة معاملات. لضمان المتانة التحليلية، تم تضمين مصل مراقبة الجودة الداخلية (QC) على كل لوحة وتمت مراقبته للتأكد من دقة الفحص داخل الاختبار وبين الاختبارات (معاملات التغير المستهدفة المتوافقة مع التحقق من صحة الاختبار). إذا انخفضت النتائج إلى ما دون الحد الأدنى للكمية، يتم تخصيص نصف هذا الحد للتحليل الإحصائي؛ إذا تجاوزت النتائج الحد الأعلى، يعاد القياس بعد التخفيف المناسب. لتقليل تأثيرات الدفعات، تم تخصيص عينات عشوائيا عبر اللوحات، وتم تضمين مجموعة مطابقة من مصل QC على كل لوحة لتتبع التغير بين الصفائح. كان موظفو المختبر الذين أجروا ELISA غير معينين عن التجميع السريري والنتائج.

كيمياء المناعة النسيجية للورم CDH13 والتسجيل المناعي النشط
تم إجراء الكيمياء المناعية النمطية لمادة CDH13 على أقسام أورام مثبتة بالفورمالين ومدمجة بالبارافين باستخدام جسم مضاد أولي مضاد CDH13 موثق. تم اكتشاف مركبات المستضدات-الأجسام المضادة باستخدام نظام كشف قائم على البوليمر، وتم رؤية التلوين باستخدام 3,3′-ديامينوبينزيدين (DAB). تم تطبيق سير عمل مماثل للصبغ على جميع عينات الدراسة؛ تمت معالجة الشرائح على دفعات وتضمنت عناصر التحكم المناسبة.

تم تقسيم كتل البارافين بعمق 3–4 ميكرومتر، وتم إزالة البارافين من الزيلين، وإعادة ترطيبها عبر الإيثانول المصنف إلى ماء مقطر. تم استرجاع الملحمة الناتج عن الحرارة في مخزن سترات (10 مللي مول، درجة حموضة 6.0) باستخدام فرن ميكروويف عند 95–100 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة، تلاها التبريد إلى درجة حرارة الغرفة لمدة 20 دقيقة. تم تبريد نشاط البيروكسيداز الداخلي ب 3٪ بيروكسيد الهيدروجين لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة، وتم إجراء حجب البروتين باستخدام محلول حجب المصل العادي لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. تم حضن الأقسام بالجسم المضاد الأساسي لمادة CDH13 طوال الليل عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. بعد الغسيل، تم تطبيق كاشف الكشف الثانوي القائم على البوليمر لمدة 20–30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، تلاها الرؤية بكروموجين 3,3′ DAB لمدة 3–5 دقائق تحت مراقبة مجهرية. تم طلاء الأقسام بالهيماتوكسيلين، وتجفيفها عبر الإيثانول المتدرج، وتطهيرها بالزيلين، وتركيبها على وسط تثبيت دائم.

تم تضمين ضوابط جودة داخلية في كل عملية تلوين. تمت معالجة قسم نسيج معروف إيجابي ل CDH13 بالتوازي كضابط إيجابي، وتم حذف الجسم المضاد الأساسي في الضابط السلبي. تم قبول السحب فقط عندما أظهر العنصر المثبت نمط التلوين المتوقع بشدة مناسبة، أما الضابط السلبي فلم يظهر أي صبغة محددة. تم تكرار التلوين في الفترات التي تحتوي على خلفية مفرطة، أو فشل في أداء التحكم، أو مع إشارة غير محددة تؤثر على التفسير.

تم قياس تعبير CDH13 باستخدام درجة النشاط المناعي (IRS) المستمدة من شدة التلوين ونسبة الخلايا الورمية الإيجابية. قام اثنان من أخصائيي علم الأمراض المدربين بتقييم جميع الشرائح بشكل مستقل بينما كانوا عميان عن قياسات مؤشرات المصل الحيوية، والنوع الجزيئي، والعلاج، والنتائج. تم حل الدرجات المتباينة من خلال مراجعة مشتركة على مجهر متعدد الرؤوس، وتم تسجيل مصلحة الضرائب الأمريكية التي تم البت عليها. تم تحديد شدة التلوين على أنها 0 (بدون صبغ)، 1 (ضعيف)، 2 (متوسط)، أو 3 (قوي). تم تعيين نسبة الخلايا الورمية الإيجابية إلى 0 (0٪)، 1 (1–10٪)، 2 (11–50٪)، 3 (51–80٪)، أو 4 (81–100٪). تم حساب مصلحة الضرائب كما يلي: IRS = درجة الشدة × درجة النسبة. تراوحت قيم مصلحة الضرائب بين 0 و12. تم تعريف التعبير المنخفض ل CDH13 بأنه IRS ≤ 3، استنادا إلى عتبة شائعة الاستخدام للتقييم المناعي. تم الاحتفاظ بنظام IRS كمتغير مستمر وفئة ثنائية للتحليلات اللاحقة، بما في ذلك المقارنات بين المجموعات الفرعية ونمذجة المؤشرات الحيوية المجمعة. تم تقييم اتفاق المراقبين في عينة عشوائية محددة مسبقا تتكون من 30٪ من الحالات باستخدام إحصائية كابا مرجحة، وتم توثيق إجراءات العينة، وتقدير الاتفاق، وقرارات الفصل في سجل تدقيق.

التصنيف الجزيئي وتصنيف المعالجة
تم الحصول على معلومات عن النوع الجزيئي من خلال اختبارات سريرية روتينية أجريت على نسيج ورمي تشخيصي. تم توليد النتائج من خلال اختبارات تم التحقق منها سريريا وتم تنفيذها في الرعاية القياسية، بما في ذلك اختبارات مستهدفة تعتمد على PCR، ولوحات تسلسل الجيل القادم المستهدفة، والكيمياء المناعية، والتهجين الفلوري في الموقع. لكل مريض، تم تسجيل نوع الاختبار، ومصدر العينة، وبيان كفاية العينة، وتاريخ التقرير. تم تصنيف المرضى بناء على حالة تغيير المحرك القابلة للتنفيذ، بما في ذلك الطفرات التي تنشط EGFR، إعادة ترتيب ALK، إعادة ترتيب ROS1، طفرات KRAS، طفرات BRAF، تغييرات تخطي إكسون 14 في MET، إعادة ترتيب RET، تعديلات ERBB2، واندماجات NTRK. تم تسجيل نسبة الورم في PD-L1 حيث تم إجراءه، وتم تصنيف تعبير PD-L1 حسب الطبقات المستخدمة في الممارسة الروتينية خلال فترة الدراسة. تم تحديد جميع فئات التصنيف الجزيئي مسبقا قبل التحليل. عندما تم الإبلاغ عن أكثر من تغيير قابل للتنفيذ، تم تعيين المرضى وفقا لقاعدة تصنيف هرمية محددة مسبقا تحدد أولويات التعديلات ذات الدلالات العلاجية الموجهة بالنمط الجيني بالترتيب التالي: طفرات EGFR، إعادة ترتيب ALK، إعادة ترتيب ROS1، طفرات BRAF، تغييرات تخطي إكسون 14 في MET، إعادة ترتيب RET، تغييرات ERBB2، اندماجات NTRK، وطفرات KRAS.

تم استخراج معلومات العلاج من السجلات الطبية، بما في ذلك النظام الأول، وتواريخ البدء والانتهاء، وخطوط العلاج اللاحقة. تم تصنيف الإدارة الأولية إلى فئات علاجية متعارضة ومحددة مسبقا: العلاج الموجه بالنمط الجيني، العلاج القائم على مثبطات نقاط التفتيش المناعي، العلاج الكيميائي، وإدارة متعددة الأساليب التي تدمج الجراحة مع العلاج الجهازي المحيط بالجراحة حسب الاقتضاء. تم تعريف تاريخ المؤشر بأنه تاريخ بدء العلاج الجهازي الخط الأول؛ بالنسبة للمرضى الذين أداروا باستئصال أولي، كان تاريخ المؤشر هو تاريخ الجراحة، وتم تصنيف العلاج الجهازي اللاحق كعلاج مساعد وفقا للسجل السريري. لتحليلات تناولت العلاج الشخصي، تم تصنيف المرضى بشكل مشترك حسب النوع الجزيئي وفئة العلاج، وتمت مقارنة تركيزات MMP-12 في المصل وتعبير CDH13 في الأورام بين المرض الإيجابي للسائق والمرض السلبي للسائق، وبين مجموعات العلاج الموجه ومجموعات العلاج المعتمدة على مثبطات نقاط التفتيش المناعية.

تعريفات النتائج والمتابعة
تم تعريف تاريخ المؤشر بأنه تاريخ بدء العلاج المضاد للأورم من الخط الأول. بالنسبة للمرضى الذين تم إدارتهم بعملية استئصال جراحية مقدمة، تم تعريف تاريخ المؤشر بأنه تاريخ الجراحة؛ تم تصنيف العلاج الجهازي اللاحق كمساعد أو تلطيف وفقا للسجل الطبي. تمت متابعة كل مريض من تاريخ المؤشر حتى الوفاة، أو تاريخ آخر اتصال مؤكد، أو تاريخ الرقابة الإدارية، أيهما يحدث أولا. تم تسجيل مدة المتابعة بالشهور، ولكل نقطة نهاية، تم الاحتفاظ بمؤشر الحدث وتاريخ الحدث أو الرقابة المقابل. تم تحديد النتائج من خلال التجريد المنظم للسجل الطبي الإلكتروني، بما في ذلك تقارير الأشعة، وتوثيق عيادة الأورام، وسجلات المرضى الداخليين، والمتابعة الهاتفية عند الحاجة. تم استخدام نموذج تقرير حالة محدد مسبقا، وطبقت قواعد هرمية موحدة للمصدر. عندما اختلفت التواريخ أو التصنيفات بين السجلات، تم حل التناقضات من خلال إعطاء الأولوية لتقارير الأشعة المعاصرة وملاحظات اتخاذ قرارات العلاج؛ تم توثيق القيمة النهائية المقسمة ومصادرها الداعمة. تم الاحتفاظ بسجل متابعة يسجل تواريخ التصوير، وانتقالات العلاج، وحالات الاستشفاء، ومحاولات الاتصال لتقليل فقدان المتابعة وضمان إمكانية التتبع.

تم تقييم استجابة الورم لدى المرضى الذين يعانون من مرض قابل للقياس وفقا لإصدار RECIST 1.1. تم تصنيف أفضل استجابة شاملة على أنها استجابة كاملة، استجابة جزئية، مرض مستقر، أو مرض تقدمي. تم تعريف معدل الاستجابة الموضوعية بأنه استجابة كاملة أو جزئية، ومعدل السيطرة على المرض بأنه استجابة كاملة، استجابة جزئية، أو مرض مستقر. تم تحديد تواريخ الاستجابة والتقدم بناء على أقدم الأدلة الموثقة.

تم تعريف البقاء بدون تقدم (PFS) بأنه الفترة من تاريخ المؤشر إلى أول ظهور لتقدم المرض أو الوفاة من أي سبب، أيهما يحدث أولا. تم تحديد التقدم بشكل أساسي من خلال تقارير الأشعة التي توثق التقدم وفقا ل RECIST 1.1. عندما لا تتوفر الأشعة في وقت التدهور السريري، كان يقبل التقدم الموثق من الأطباء إذا كان مرتبطا صراحة بسوء عبء الورم ويؤدي إلى تغيير في إدارة مكافحة السرطان. تم فرض رقابة على المرضى الذين لم يحدث حدث في تاريخ آخر تقييم موضوعي، مما يؤكد عدم وجود تقدم. إذا تم بدء خط علاج جهازي جديد دون توثيق صريح لتقدم المرضى، يتم مراجعة التصوير وتقديم توثيق سريري متزامن. إذا لم يكن بالإمكان تأكيد تقدم المرضى، يتم فرض رقابة على المرضى في آخر تقييم شعاعي قبل تغيير العلاج، ويتم تسجيل قاعدة القرار المطبقة.

تم تعريف فترة البقاء الكلي (OS) بأنها الفترة من تاريخ المؤشر إلى الوفاة لأي سبب. تم تحديد الحالة الحيوية باستخدام سجلات المستشفى وملاحظات المتابعة الخارجية، مدعومة بتأكيد هاتفي منظم عند الحاجة. كان تاريخ الوفاة يسجل كما هو موثق في السجل الطبي أو، عندما لا يكون متاحا، كتاريخ أكد من قبل العائلة أثناء التواصل المتابع، مع تسجيل الوثائق الداعمة في سجل المتابعة. تم فرض رقابة على المرضى الذين كانوا على قيد الحياة في تاريخ آخر اتصال مؤكد.

تم تنفيذ سير عمل متابعة موحد يتماشى مع مسارات الرعاية الروتينية. خلال العلاج الجهازي النشط، تم توثيق التقييمات السريرية في كل دورة علاج، وتم تسجيل إعادة التقييمات الإشعاعية على فترات منتظمة تحددها البروتوكول السريري، مع تسجيل طريقة التصوير والتاريخ لكل تقييم. بعد الانتهاء من العلاج الأول أو أثناء المراقبة بعد العملية، تم تسجيل زيارات المتابعة وتقييمات التصوير وفقا للجدول المؤسسي. عندما لم يكن بالإمكان إكمال المتابعة الشخصية، تم إجراء متابعة هاتفية منظمة لتأكيد استمرار العلاج، وتوثيق فترات الاستشفاء المتقطعة، وتأكيد حالة المرض كما هو موثق بالتصوير الخارجي، حيثما كان ذلك مناسبا، وتأكيد حالة البقاء. تم توثيق جميع الزيارات الفائتة، والمحاولات غير القابلة للوصول، وأسباب وقف المتابعة. قبل تصنيف المريض على أنه مفقود للمتابعة، كان يتم محاولة الاتصال مرتين إضافيتين على الأقل في أيام مختلفة، ويتم تسجيل كل محاولة.

تم الحفاظ على الفصل الإجرائي بين تقييم المؤشرات الحيوية وتحديد النتائج. كان الأفراد الذين أجروا قياس MMP-12 في المصل وتسجيل CDH13 عميين عن النتائج السريرية. تم إجراء تجريد النتائج دون الوصول إلى نتائج المؤشرات الحيوية كلما أمكن ذلك. تم تطبيق عملية تقييم من مرحلتين لنقاط النهاية للتقدم والاستجابة. قام ملخص مدرب أو بتعيين تصنيف الأحداث والتواريخ باستخدام القواعد المحددة مسبقا، وبعد ذلك قام أخصائي أول بمراجعة التعيينات بشكل مستقل. تم حل التناقضات من خلال مراجعة مشتركة لتقرير الأشعة الأصلي، وملاحظات الأورام، والجدول الزمني للعلاج، وتم الحفاظ على سجل تدقيق لجميع قرارات الفصل.

تم إجراء فحوصات اتساق لتحديد التسلسلات غير المعقولة، بما في ذلك الأحداث المؤرخة قبل تاريخ الفهرس، أو انتقالات العلاج بدون تقييمات متوافقة، أو تواريخ الوفاة بدون وثائق داعمة. تم التوفيق بين الحالات التي تم الإبلاغ عنها بالعودة إلى الوثائق الأصلية وتحديث مجموعة البيانات بملاحظة تصحيحية مؤرخة تحدد سبب التغيير والأدلة الداعمة.

التحليل الإحصائي
تم إجراء تحليلات إحصائية باستخدام SPSS (الإصدار 26.0) وR (الإصدار 4.3.0). تم تقديم المتغيرات المستمرة كمتوسط ± انحراف معياري أو وسيط (نطاق رباعي)، حسب الاقتضاء، وتم تقديم المتغيرات التصنيفية كأعداد ونسب مئوية. استخدمت المقارنات الجماعية اختبارات بارامترية أو غير بارامتري حسب الحاجة، مع اختبارات كاي-تربيع أو اختبارات فيشر الدقيقة للبيانات الفئوية. كانت جميع الاختبارات ذات الجانبين المختلفين، حيث اعتبر P < 0.05 دلالة إحصائية.

تم اختيار المتغيرات المشتركة مسبقا بناء على الصلة السريرية والأدلة السابقة، وتم تطبيق نفس مجموعة المتغيرات عبر النماذج ذات الصلة لدعم المقارنة. شملت المتغيرات الأساسية العمر، الجنس، التعرض للتدخين، مرحلة TNM، حالة أداء ECOG، والنوع الفرعي النسيجي، مع تعديل إضافي لمجموعة العلاج عندما يكون هدف التحليل هو النوع الجزيئي ضمن السكان المعالجين. تم تقييم التعدد التعاوني باستخدام عوامل تضخم التباين، وتم معالجة التوازي الإشكالي باستخدام قواعد تقليل المتغيرات المحددة مسبقا. تم الإبلاغ عن نسب احتمالات معدلة مع فترات ثقة 95٪ وقيم P ثنائية الوجه. تم تحديد عدد المتغيرات المشتركة المدرجة في نماذج الانحدار اللوجستي متعددة المتغيرات ونموذج كوكس المحدد مسبقا وتقييدا بالنسبة لعدد أحداث النتائج لتقليل خطر التوافق الزائد. ظلت نسبة الأحداث لكل متغير مقبولة (≥10) لجميع النماذج. بالنسبة لنتائج الأنواع الجزيئية متعددة الفئات، تم تركيب نماذج الانحدار اللوجستي متعددة الحدود، أو تم إجراء مجموعة من المقارنات اللوجستية الثنائية باستخدام فئة مرجعية محددة مسبقا، وتم توضيح استراتيجية النمذجة بوضوح.

تم تحليل البقاء بدون تقدم والبقاء الكلي باستخدام تقديرات كابلان-ماير، وتمت مقارنة منحنيات البقاء باستخدام اختبار السجل اللوغاريتمي. تم قياس الروابط بين المؤشرات الحيوية والنتائج باستخدام انحدار المخاطر النسبي كوكس، حيث أبلغ عن نسب المخاطر بفواصل ثقة 95٪. تم بناء نماذج كوكس متعددة المتغيرات باستخدام متغيرات سريرية مرضية محددة مسبقا، بما في ذلك النوع الجزيئي وفئة العلاج، لتقييم الآثار على العلاج الشخصي. تم التحقق من افتراض المخاطر النسبية باستخدام تشخيصات شونفيلد المتبقية ومخططات البقاء اللوغاريتمية ناقص اللوغاريتمية. إذا تم انتهاك افتراض المخاطر النسبية للمتغيرات المشتركة، يتم معالجة المشكلة باستخدام نهج محدد مسبقا مثل التدرج على ذلك المتغير أو تضمين مصطلح تفاعل يعتمد على الزمن، ويتم الإبلاغ عن المواصفات النهائية للنموذج.

تم التعامل مع البيانات المفقودة باستخدام استراتيجية محددة مسبقا. عندما كان النقص ضئيلا، أجريت تحليلات حالة كاملة؛ وإلا، تم استخدام الحساب المتعدد بالمعادلات المتسلسلة، بما في ذلك جميع المتغيرات في النماذج التحليلية. تم توليد عشر مجموعات بيانات محسوبة، وتم حساب التقديرات المجمعة باستخدام قواعد روبين. بالنسبة للتحليلات التي تتضمن مقارنات متعددة بين الأنواع الفرعية أو عدة نقاط نهاية، كان معدل الاكتشاف الخاطئ يضبط باستخدام إجراء محدد مسبقا، أو تم تحديد التحليلات بوضوح كاستكشافية لضمان الشفافية فيما يتعلق بالتعددية.

تم قفل مجموعة بيانات التحليل قبل ملاءمة النموذج، وتم الحفاظ على قاموس بيانات شامل يحدد كل متغير ووحدة ونظام ترميز ونطاق مسموح به. تم تضمين عينات مراقبة جودة مكررة عبر ألواح الفحص لقياس التغير بين الألواح ومراقبة الانحراف. بالنسبة لتقييم الكيمياء المناعية، تم توثيق معايير التقييم، وإجراءات التسمية، وتقييم الاتفاق بين المراقبين، وتم الاحتفاظ بسجلات الفصل للحالات المتناقضة. تم تنفيذ فحوصات النطاق المبرمجة وفحوصات الاتساق المنطقي عبر المتغيرات الرئيسية، بما في ذلك تاريخ الفهرس، وتاريخ جمع العينة، وتاريخ بدء العلاج، وتواريخ النتائج. تم الحفاظ على جميع السكريبتات الإحصائية وسجلات الإخراج التي يتم التحكم بها بالإصدارات لتمكين تكرار سير العمل التحليلي بالكامل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تجميع المجموعات وتوزيع الأنواع الجزيئية
يتم تلخيص سير سير العمل العام للدراسة في الشكل 1. في المجمل، تم تضمين 262 مريضا متتاليا مصابين بسرطان الرئة وتصنيفهم إلى أربعة أنواع جزيئية ذات صلة سريرية: EGFR (n = 92)، ALK (n = 48)، KRAS (n = 54)، والنوع البري (n = 68). اختلفت الخصائص السريرية المرضية الأساسية بين الأنواع الفرعية (الجدول 1). كان المرضى الذين لديهم تغييرات في EGFR و ALK أصغر سنا في المتوسط من أولئك في مجموعتي KRAS ونوع البرية (P = 0.006)،...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تقيم هذه الدراسة الأدوار التكميلية ل MMP-12 في المصل ورم CDH13 كنهج متكامل للمؤشرات الحيوية لدعم التفسير السريري للأنواع الجزيئية الفرعية وطبقات العلاج في سرطان الرئة. تنبع الفرضية الأساسية من الأدوار البيولوجية المكملة لهذين العلامتين الحيويتين: MMP-12، وهو بروتياز يدور في الدورة الدموية يعكس إعادة تشكيل المناعة-البضيضية وعدوانية الأورام، وCDH13، وهو مثبط أورام قائم على الأنسجة مرتبط بتنظيم الجينات فوق الجينية والمرونة الظهارية 26,27,28,29,30

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون أنهم لا يملكون تضارب مصالح.

شكر وتقدير

نشكر بصدق مساهمات الطاقم الطبي والتمريضي في مستشفى شينغتاي الشعبي لدعمهم في استقطاب المرضى، وجمع البيانات السريرية، ومعالجة العينات الحيوية. وقد دعمت هذه الدراسة مشروع برنامج البحث والتطوير الرئيسي لشينغتاي (رقم 2024ZC116).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الأجسام المضادة، مضاد CDH13 (تي-كاديرين)أبكام، كامبريدج، المملكة المتحدةab15126الجسم المضاد الأساسي للكيمياء المناعية النسيجية؛ تم التحقق منه لنسيج FFPE
الطرد المركزي (مبرد عالي السرعة)إبندورف، هامبورغ، ألمانيا5424 Rيستخدم لفصل المصل وتنقية العينة
مجموعة ركيزة DABZSGB-Bio، بكين، الصينZLI-9017للكشف الكروموجيني في الكيمياء المناعية النسيطية
قارئ الميكروبليت ELISAبيوتيك إنسترومنتس، وينوسكي، الولايات المتحدة الأمريكيةELx800يستخدم لقراءة الامتصاص عند 450 نانومتر مع تصحيح مرجعي
الفورمالين (10٪ حيادي مخزن)شركة سينوفارم للمواد الكيميائية، شنغهاي، الصين10009218لتثبيت عينات الخزعة والأنسجة الجراحية
مجموعة تلوين الهيماتوكسيلين وإيوسينسولاربيو، بكين، الصينG1120للطلاء المضاد ومراقبة جودة شرائح IHC
مجموعة ELISA البشرية MMP-12أبكام، كامبريدج، المملكة المتحدةAB246533القياس الكمي لمصفوفة مصل معدني البروتيناز 12
المجهر (الحقل الساطع)نيكون، طوكيو، اليابانإكليبس E200يستخدم لتقييم تلطيخ المناعة وتقييم CDH13
ميكروتوملايكا بيوسيستمز، فيتزلار، ألمانياRM2235لتقسيم الأنسجة المدمجة بالبارافين عند 3– 4 & سمك m
وسيط التركيبسولاربيو، بكين، الصينS2100لتركيب الشرائح الدائمة بعد تلوين IHC
محطة تضمين البارافينلايكا بيوسيستمز، فيتزلار، ألمانياEG1150لتحضير كتلة الأنسجة من FFPE
محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS)جيبكو، ثيرمو فيشر ساينتيفيك، الولايات المتحدة الأمريكية10010023يستخدم للغسل أثناء تلوين IHC
نظام كشف البوليمراتMXB Biotechnologies، فوزهو، الصينDAB-0031مجموعة الكشف الثانوية لجهاز IHC
برنامج R الإحصائيمؤسسة R للحوسبة الإحصائية، فيينا، النمساالإصدار 4.3.0يستخدم في التحليل الإحصائي والنمذجة
أنابيب فاصل المصلبي دي فاكوتينر، فرانكلين ليكس، الولايات المتحدة الأمريكية367988لجمع الدم الوريدي المحيطي
برنامج إحصاءات SPSSشركة آي بي إم، أرمونك، الولايات المتحدة الأمريكيةالإصدار 26.0يستخدم للتحليل الإحصائي للبيانات المستمرة والتصنيفية
مبردات التخزينشركة كورنينغ، الولايات المتحدة الأمريكية430488التجميد منخفض الارتباط لجمع عينات المصل
حمام مائي (لاسترجاع المستضدات)غرانت إنسترومنتس، كامبريدج، المملكة المتحدةJBN26يحافظ على درجة حرارة ثابتة أثناء سحب المستضدات

المراجع

  1. Bray, F., et al. Global cancer statistics 2022: Globocan estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 74 (3), 229-263 (2024).
  2. Bhatt, A., Yone, N., Lalla, M., Jeon, H., Cheng, H. Molecular diagnosis, clinical trial representation, and precision medicine in minority patients with oncogene-driven lung cancer. Cancers (Basel). 17 (12), 1950(2025).
  3. Cognigni, V., et al. Molecular heterogeneity of small cell lung cancer and new therapeutic possibilities: A narrative review of the literature. Transl Lung Cancer Res. 14 (4), 1441-1455 (2025).
  4. Herbst, R. S., et al. Molecular residual disease analysis of adjuvant osimertinib in resected egfr-mutated stage ib-iiia non-small-cell lung cancer. Nat Med. 31 (6), 1958-1968 (2025).
  5. Huang, D., et al. Molecular subtypes and targeted therapeutic strategies in small cell lung cancer: Advances, challenges, and future perspectives. Molecules. 30 (8), 1731(2025).
  6. Luo, J., et al. Hiding in plain sight: Nut carcinoma is an unrecognized subtype of squamous cell carcinoma of the lungs and head and neck. Nat Rev Clin Oncol. 22 (4), 292-306 (2025).
  7. Mosleh, B., et al. Sex-based differences in lung cancer susceptibility and molecular genetics in the 2020s. Heliyon. 11 (2), e42089(2025).
  8. Skoulidis, F., et al. Molecular determinants of sotorasib clinical efficacy in kras(g12c)-mutated non-small-cell lung cancer. Nat Med. 31 (8), 2755-2767 (2025).
  9. Wang, Y., et al. Immunotherapy for advanced-stage squamous cell lung cancer: The state of the art and outstanding questions. Nat Rev Clin Oncol. 22 (3), 200-214 (2025).
  10. Zhu, Y., et al. Heterogeneity of molecular subtyping and therapy-related marker expression in primary tumors and paired lymph node metastases of small cell lung cancer. Virchows Arch. 486 (2), 243-255 (2025).
  11. Cesar, M. C. M., et al. Peptides derived from the pou domain of brn2 show antitumor activity against murine melanoma model cells in vitro and in vivo. Cancer Chemother Pharmacol. 95 (1), 67(2025).
  12. Chang, Z., et al. Simultaneous detection of mmp-1 and mmp-12 using au-se nanoprobe for advancing nsclc diagnosis. Anal Chem. 97 (8), 4452-4460 (2025).
  13. Fan, X., et al. The mir-23a/27a/24-2 cluster promotes postoperative progression of early-stage non-small cell lung cancer. Mol Ther Oncolytics. 24, 205-217 (2022).
  14. Fung, N. H., et al. Targeting the human β(c) receptor inhibits inflammatory myeloid cells and lung injury caused by acute cigarette smoke exposure. Respirology. 27 (8), 617-629 (2022).
  15. Ji-Hong, Y., et al. Baicalein attenuates bleomycin-induced lung fibroblast senescence and lung fibrosis through restoration of sirt3 expression. Pharm Biol. 61 (1), 288-297 (2023).
  16. Kumar, S., Parveen, S., Swaroop, S., Banerjee, M. Tnf-α and mmps mediated mucus hypersecretion induced by cigarette smoke: An in vitro study. Toxicol In Vitro. 92, 105654(2023).
  17. Li, Y. Q., et al. Prediction and validation of common targets in atherosclerosis and non-small cell lung cancer influenced by atorvastatin. BMC Complement Med Ther. 23 (1), 415(2023).
  18. Mitsune, A., et al. Upregulation of leukocyte immunoglobulin-like receptor b4 on interstitial macrophages in copd; their possible protective role against emphysema formation. Respir Res. 22 (1), 232(2021).
  19. Spix, B., et al. Lung emphysema and impaired macrophage elastase clearance in mucolipin 3 deficient mice. Nat Commun. 13 (1), 318(2022).
  20. Ando, F., et al. Combination of plasma mmps and pd-1-binding soluble pd-l1 predicts recurrence in gastric cancer and the efficacy of immune checkpoint inhibitors in non-small cell lung cancer. Front Pharmacol. 15, 1384731(2024).
  21. Colmenares, V., Hedman, A., Hesslow, A., Wahlin, B., Södergren, A. Cohort study of serological biomarkers for interstitial lung disease in patients with rheumatoid arthritis. Scand J Rheumatol. 53 (6), 386-395 (2024).
  22. Gonzalez-Avila, G., et al. Matrix metalloproteinases and stress hormones in lung cancer progression. J Oncol. 2022, 5349691(2022).
  23. Hung, W. Y., et al. Blocking mmp-12-modulated epithelial-mesenchymal transition by repurposing penfluridol restrains lung adenocarcinoma metastasis via upa/upar/tgf-β/akt pathway. Cell Oncol (Dordr). 44 (5), 1087-1103 (2021).
  24. Kowalczyk, A., et al. Effective voltammetric tool for simultaneous detection of mmp-1, mmp-2, and mmp-9; important non-small cell lung cancer biomarkers. Biosens Bioelectron. 229, 115212(2023).
  25. Lam, T. Y. W., et al. Ism1 protects lung homeostasis via cell-surface grp78-mediated alveolar macrophage apoptosis. Proc Natl Acad Sci U S A. 119 (4), e2019161119(2022).
  26. Li, J., et al. Development of a coagulation‑related gene model for prognostication, immune response and treatment prediction in lung adenocarcinoma. Oncol Lett. 29 (6), 290(2025).
  27. Ratajczak-Wielgomas, K., Kmiecik, A., Dziegiel, P. Role of periostin expression in non-small cell lung cancer: Periostin silencing inhibits the migration and invasion of lung cancer cells via regulation of mmp-2 expression. Int J Mol Sci. 23 (3), 1240(2022).
  28. Sakamoto, S., et al. Claudin-11 enhances invasive and metastatic abilities of small-cell lung cancer through mt1-mmp activation. Cancer Sci. 116 (6), 1773-1784 (2025).
  29. Spix, B., et al. Endolysosomal cation channels and lung disease. Cells. 11 (2), 304(2022).
  30. Ding, P., Peng, B., Li, G., Sun, X., Wang, G. Glucosamine-phosphate n-acetyltransferase 1 and its DNA methylation can be biomarkers for the diagnosis and prognosis of lung cancer. J Clin Lab Anal. 36 (9), e24628(2022).
  31. Hsu, J. L., Leu, W. J., Hsu, L. C., Hsieh, C. H., Guh, J. H. Doxazosin inhibits vasculogenic mimicry in human non‑small cell lung cancer through inhibition of the vegf‑a/ve‑cadherin/mtor/mmp pathway. Oncol Lett. 27 (4), 170(2024).
  32. Hwang, K. E., et al. Salinomycin suppresses tgf-β1-induced emt by down-regulating mmp-2 and mmp-9 via the ampk/sirt1 pathway in non-small cell lung cancer. Int J Med Sci. 18 (3), 715-726 (2021).
  33. Kim, S. Y., et al. Inhibition of a549 lung cancer cell migration and invasion by ent-caprolactin c via the suppression of transforming growth factor-β-induced epithelial-mesenchymal transition. Mar Drugs. 19 (8), 465(2021).
  34. Li, C., et al. Foxp3 facilitates the invasion and metastasis of non-small cell lung cancer cells through regulating vegf, emt and the notch1/hes1 pathway. Exp Ther Med. 22 (3), 958(2021).
  35. Lu, T., Zheng, C., Fan, Z. Cardamonin suppressed the migration, invasion, epithelial mesenchymal transition (emt) and lung metastasis of colorectal cancer cells by down-regulating adrb2 expression. Pharm Biol. 60 (1), 1011-1021 (2022).
  36. Xu, F., et al. Inhibition of non-small cell lung cancer by ferroptosis and apoptosis induction through p53 and gsk-3β/nrf2 signal pathways using qingrehuoxue formula. J Cancer. 14 (3), 336-349 (2023).
  37. Xu, S., et al. Diallyl disulfide attenuates ionizing radiation-induced migration and invasion by suppressing nrf2 signaling in non-small-cell lung cancer. Dose Response. 19 (3), 15593258211033114(2021).
  38. Zheng, Y., et al. Shashen-maidong decoction inhibited cancer growth under intermittent hypoxia conditions by suppressing oxidative stress and inflammation. J Ethnopharmacol. 299, 115654(2022).
  39. Malmros, K., et al. Diagnostic gastrointestinal markers in primary lung cancer and pulmonary metastases. Virchows Arch. 485 (2), 347-357 (2024).
  40. Zhou, H., et al. Metformin inhibits migration and epithelial-to-mesenchymal transition in non-small cell lung cancer cells through ampk-mediated gdf15 induction. Eur J Pharmacol. 985, 177127(2024).
  41. Mangang, K. N., Rao, G. S. N. K. Lung cancer biomarkers. Clin Chim Acta. 580, 120707(2026).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.