مقالة منهجية

التحفيز السلكي لتضيق الحالبية القطاعي في الفئران عبر فتح البطن في منتصف الخط

235 مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/70726

⸱

أبريل 17, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Urology and Urosurgery, University Medical Center Mannheim, Medical Faculty of the University of Heidelberg, 2Department of General, Visceral, and Transplantation Surgery, Heidelberg University Hospital, 3Division of Intelligent Systems and Robotics in Urology (ISRU), German Cancer Research Center (DKFZ) Heidelberg, 4DKFZ Hector Cancer Institute at the University Medical Center Mannheim, 5Department of Urology, University Hospital Leipzig, 6Department of Plastic Surgery and Hand Surgery, TUM University Hospital Munich, 7ORSI Academy

في هذه المقالة

ملخص

يصف هذا البروتوكول نموذج جرذان قابل للتكرار لتحفيز تضيق الحاليل القطاعي المتدرج باستخدام الربط الجزئي السلكي عبر فتح البطن في منتصف الخط. يولد رباط 6-0 حول الحالب وسلك معايرة معدني تلومن متبقي محدد، مما يتيح تأكيدا وظيفيا فوريا لشدة الانسداد.

الملخص

تظل تضيق الحالبية تحديا كبيرا في جراحة المسالك البولية الترميمية وقد تنشأ من الإصابة العلاجية، أو الالتهاب المزمن، أو الصدمات، أو التشوهات الخلقية، أو الإشعاع. غالبا ما تؤدي هذه الآفات إلى اعتلال مسالك بولية انسدادي تقدمي وفقدان وظائف الكلى. على الرغم من التقدم في تقنيات التنظير والجراحة، لا تزال تضييق الحالب تحديا في المعالجة، ولا تزال تأثيراتها على إعادة التشكيل على النسيج الكلوي موضوع أبحاث مستمرة، مما يؤكد الحاجة إلى نماذج ما قبل سريرية قوية. تؤسس هذه الدراسة نموذجا قابلا للتكرار للفئران لتحفيز متحكم به لدرجات مختلفة من تضيق الحالب القطاعي باستخدام الربط الجزئي السلكي عبر بطن منتصف الخط. يتيح البروتوكول تضييق الحاب بشكل مقطعي وغير مقطعي، ويهدف إلى تقريب تضيق التليف على المستوى الوظيفي والتشريحي مع تقليل الضرر الإقفاري الواضح والحفاظ على قدرة الأنسجة الكبيرة على البقاء مع استمرارية الحالب. من خلال توفير منصة تجريبية موثوقة مع تباين منخفض بين الحيوانات والجراحين، يدعم هذا النهج البحث الانتقالي حول الآليات الجزيئية الحيوية، والمواد الحيوية، وطرق التصوير، وتقنيات إعادة البناء لمرض تضيق الحالب.

المقدمة

تضيق الحالب شائع نسبيا ويشكل تحديا كبيرا في المسالك البولية. تم الإبلاغ عنها في ما يصل إلى 4.9٪ من المرضى الذين يتبعون إجراءات التنظير لأمراض الحصى 1,2,3، مع معدلات أعلى حتى بين الفئات عالية الخطورة، مثل متلقي زراعة الكلى، حيث قد يتأثر ما يصل إلى 7٪4. على الرغم من أن العديد من التضيقات ناتجة عن إصابات جراحية أو تدخلات طبية، إلا أن الأسباب غير المسببة للعلاج تشكل أيضا نسبة مهمة. تشمل هذه الالتهابات المزمنة، التهابات المسالك البولية، الإصابات الجسدية، التشوهات الخلقية، والعلاج الإشعاعي 5,6. كل من هذه الأسباب يمكن أن تؤدي في النهاية إلى انسداد في البول، والتهابات متكررة، وألم، وتكون حصوى، وإذا لم تعالج - فقدان لا رجعة فيه لوظيفة الكلى. غالبا ما يعاني المرضى المصابون من المراضة وانخفاض جودة الحياة، كما هو موضح في كل من مجموعات المؤسسات والمراجعات المنهجية 5,7,8. العبء طويل الأمد كبير؛ في مجموعة متعددة المؤسسات من المرضى الذين يعانون من تضيق الحالب بعد جراحة حصى الحالبين، كان من الضروري استئصال الكلى للجانب المصاب في 25٪ من الحالات، مما يبرز مدى المرض الكبير لهذه الحالة9.

يؤكد هذا العبء السريري الحاجة إلى نماذج ما قبل سريرية قوية يمكن أن تمكن من البحث في العمليات الجزيئية الحيوية المرتبطة بها وتوجيه تحسين العلاج. أكثر طرق العلاج شيوعا هي الطرق المنظارية، مثل التوسيع أو الشق بالليزر، بالإضافة إلى الدعامات، مع تخصيص إعادة البناء الجراحي للحالات الأكثر تعقيدا10. على الرغم من تحسن النتائج المبكرة، لا تزال الانتكاس والنوبة النوبة مشكلة. تتراوح معدلات التكرار المبلغ عنها بعد التدخل بين 11٪ إلى 40٪، ويحتاج العديد من المرضى إلى عمليات متعددة أو تركيب دعامات طويلة الأمد لتخفيف دائم وحماية الأعضاء 11,12. يتأثر نجاح العلاج بموقع التضيق، وطوله، وسببه، وتفاصيل العلاجات السابقة؛ تؤكد عدة مراجعات حديثة ودراسات جماعية كبيرة الحاجة إلى تقنيات محسنة وفهم ميكانيكي أعمق 4,5,13.

يتطلب البحث الانتقالي الفعال نماذج تجريبية تحاكي بشكل وثيق الآليات الليفية، والخصائص النسيجية، والسياق التشريحي، والعمليات الكلوية العليا لمرض تضيق الحالب البشري. من بين هذه النماذج أصبحت منصات موثوقة لدراسة تليف الحالب وفقدان الوظائف الكلوية وتقييم التدخلات المضادة للتليف واستراتيجيات إعادة البناء 6,14,15,16,17. وضع شيفالييه وآخرون الأساس المرضي لهذه النماذج، حيث راجعوا استراتيجيات مختلفة لانسداد الحالب، مع التركيز على انسداد الحالب أحادي الجانب (UUO) كنموذج قابل للتكرار للتليف الخلالي الكلوي والاعتلال الكلى الانسدادي لدى الفئران6.

استنادا إلى هذا الأساس، قامت النماذج المعاصرة بتحسين مستوى ونمط العوائق. قدم فرومن وآخرون نهجا تقنيا آمنا يستخدم التسامح الكهربائي غير القابل للعكس لتحفيز انسداد بولي جزئي أحادي الجانب مع ندوب كلوية14. وبالمثل، طور تشين وآخرون نموذجا عكسيا للعكاس في الوحدة الهوائية يتيح دراسة ديناميكية لانحدار التليف تحت ظروف متغيرة الديناميكيةالدموية 15. أوضح نان وآخرون وخاتر وآخرون بشكل أكبر التسلسلات الجزيئية التي تدفع تقدم تليف الحالب والتعديل العلاجي في الانسداد الجزئي16,17.

النماذج السابقة التي اعتمدت على الربط الكامل في الحالب، أو الاستئصال الجزئي، أو الدفن في عضلة البسوا، أو الإصابة الحرارية غالبا ما أدت إلى درجات انسداد غير موحدة وموحدة، ونقص تروية واسعة، ونخر، مما أدى إلى ضمور شديد في الحلب الكلوي بدلا من انسداد متدرج. قدمت هذه الأساليب، كما وصفها شيفالييه وآخرون وثورنهيل وآخرون، رؤى ميكانيكية قيمة حول اعتلال الكلى الانسدادي، لكنها لم تلخص التضيق الليفي الموضعي المميز لمرض تضيق الحالب الحميد السريري 6,18. لا يزال هناك نقص في نماذج القوارض البسيطة والموحدة التي تولد تضيقا مقطعيا معايرا وغير مقطعية مع الحفاظ على صلاحية الأنسجة ودرجات محددة من انسداد البول الكلوي.

لمعالجة هذه الفجوة، تضع هذه الدراسة بروتوكولا جراحيا موحدا لتحفيز تضيق الحالب الجزئي في الفئران. تم تصميم النموذج ليكون قابلا للتكرار، دقيقا تشريحيا، ومتعدد الاستخدامات للاستخدام في الأبحاث ما قبل السريرية التي تشمل جراحة المسالك البولية الترميمية، وتقييم التصوير أثناء العمليات، وتطبيقات هندسة الأنسجة. من خلال تقليل التباين بين المشغلين وتكرار تضيق الليف السريري المناسب، يوفر هذا النموذج منصة ترجمية لتعزيز الفهم الميكانيكي وتسريع تطوير العلاجات لمرض تضيق الحالب.

في الاستخدام العملي، يمكن تخصيص درجة الانسداد من خلال اختيار قطر سلك المعايرة المناسب ليتناسب مع سؤال البحث. الأقطار الأكبر (مثل 0.65 مم) تقارب انسداد جزئي خفيف مع تدفق بول قريب من الفسيولوجيا، بينما الأقطار الأصغر (0.30–0.20 مم) تمثل انسدادا عالي الدرجة مع انخفاض ملحوظ في التدفق. علاوة على ذلك، يمكن تطبيق هذا النهج الجراحي إما كنموذج نهائي حاد لدراسة التغيرات الديناميكية الدموية والوظيفية الفورية أو كتعديل لتجارب البقاء لدراسة إعادة تشكيل الأنسجة المزمنة، وتطور التليف، والتكيف الكلوي طويل الأمد.

في هذا النموذج، يتم تحقيق انسداد جزئي عن طريق ربط رباط 6-0 حول الحالب مع سلك معايرة معدني بقطر محدد، ثم إزالة السلك، تاركا تجويف متبقي يتوافق مع حجم السلك. يتيح هذا التصميم تضيقا متدرجا ومضبوطا هندسيا، ويمكن ربطه مباشرة بتدفق البول الوظيفي للكلوة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

جميع الأنشطة الحيوانية الموصوفة هنا أجريت في منشآت معتمدة وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوانات المؤسسية (IACUC) التابعة لمجلس بادن-فورتمبيرغ الإقليمي في كارلسروه، ألمانيا. تم التعامل مع الحيوانات التجريبية وفقا للبروتوكولات المؤسسية والامتثال للتشريعات الألمانية التي تحكم رفاهية الحيوان، بالإضافة إلى الإرشادات التي وضعتها مجلس المجتمع الأوروبي (2010/63/EU) وإرشادات أبحاث الحيوان: الإبلاغ عن التجارب في الجسم الحي (ARRIVE). تم استخدام ذكور فئران سبراج داولي (متوسط الوزن: 400 جم) بعد فترة تأقلم مدتها 7 أيام في منشأة الحيوانات وتحت ظروف موحدة. المواد المستخدمة والمواد المستخدمة مدرجة في جدول المواد.

1. التخدير وتخفيف الألم

  1. تحفز التخدير باستخدام إيزوفلوران 4٪ فوليم يتم توصيله في 100٪ أكسجين عبر غرفة الحث بمعدل تدفق 5 لتر/دقيقة.
  2. عند فقدان رد الفعل الصحيح، أعط حقنة تحت الجلد بجرعة 100 ملغ/كغ كيتامين (محلول 10٪؛ حوالي 0.35 مل) و4 ملغ/كغ زيلازين (تخفيف 1:10 من محلول 2٪؛ حوالي 0.75 مل) للتخدير الانفصامي، المسكن، والتهدئة.
  3. تأكد من عمق التخدير بعدم الاستجابة لمحفز قرص إصبع القدم باستخدام الملقط.
  4. ضع مرهم العيون على كلتا العينين لمنع جفاف القرنية.
  5. تحقيق مسكنات إضافية من خلال حقن تحت الجلد بجرعة 5 ملغ/كغ من الكاربروفين (تخفيف بنسبة 1:10 من محلول 5٪؛ حوالي 0.35 مل).
  6. حافظ على التخدير مع إضافة إيزوفلوران مكمل بنسبة 4 فوليوم عبر قناع وجه لحديثي الولادة حسب الحاجة طوال الإجراء.
  7. حافظ على درجة حرارة الجسم بين 36.5–37.5 درجة مئوية باستخدام وسادة تسخين محكومة حراريا طوال الإجراء.

2. موقع التشغيل وتحضير الأدوات

  1. جهز طاولة الفرك بجميع الأدوات المطلوبة، بما في ذلك ملقط التحضير غير المقاوم للصدمات، ومشابك التثبيت غير الحادة، ومقص التحضير، وروابط أحادية غير قابلة للامتصاص 6-0، وأسلاك معايرة معدنية (سبيكة ذات سطح مصقول ونهايات مزيفة؛ 0.65، 0.55، 0.30، 0.20 مم قطر؛ معقمة (معقم قبل الاستخدام)، مسحات قطن رطبة، مسحات شاش، حقنة 1 مل مع إبرة مدمجة 30 جيلون، ميثيلين بلو (محلول 0.5٪ غير مخفف)، محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر (0.9٪ NaCl)، وأنابيب شعرية شعرية.
  2. ركبوا الحيوان على جهاز التعرض الجراحي للقوارض كما هو موضح في التقارير السابقة19,20.
  3. احلق منطقة الوصول البطني وقم بإزالة التنظيف الثلاثي بالتناوب باستخدام 70٪ إيثانول وبوفيدون-يود أو كلورهيكسيدين في دوائر متحدة المركز من موقع الشق إلى الخارج. كرر ذلك ثلاث مرات.
  4. غط الحيوان بستائر معقمة، مع ترك المجال الجراحي مكشوفا فقط.
  5. التعامل مع المخدرات المتطايرة، والقطع الحادة، والأصباغ الكيميائية وفقا للوائح السلامة البيولوجية المؤسسية، باستخدام أنظمة إزالة الغاز المناسبة، ومعدات الحماية، وحاويات التخلص من الغازات الحادة المعتمدة.

3. الوصول الجراحي عبر فتح البطن في منتصف الخط

  1. قم بإجراء شق وسطي للجلد البطني بحجم حوالي 3 سم باستخدام مقص دقيق.
  2. شق الخط الألبي طوليا في الخط الأوسط للوصول إلى التجويف الصفاقي.
  3. استخدم خطاطيف تحضير وكمادات رطبة لسحب جدار البطن وكشف الخلف الصفاقي.

4. تحديد وتحريك الحالب الأيسر

  1. حدد المساحة الكلوية والخلفية الصفاقية وتحريك الدهون الخلفية للصفاق بلطف باستخدام التشريح القوي باستخدام الملقط ومسحات قطنية مرطبة (الشكل 1A).
  2. اثقب الحوض الكلوي عبر النسيج الكلوي بإبرة دقيقة 30 جرام (الشكل 1B).
  3. حقن 0.01–0.2 مل من الميثيلين الأزرق غير المخفف لتسهيل التعرف البصري على الحالب (الشكل 1B.5).
  4. راقب الفصل التدريجي للصبغة لتتبع مسار الحالبين بصريا من الحوض الكلي نحو المثانة (الشكل 1B.6–10).
  5. افصل بلطف الأنسجة الضامة والدهنية المحيطة عن الحالب المميز بالصبغة باستخدام ملقط دقيق ومسحات قطنية رطبة بحركة نتف (الشكل 1C). تجنب الإمساك المباشر أو الضغط أو الشد المفرط لجدار الحالب لمنع التمزق أو الناسور. حرك الحاب حتى يمكن تتبعه باستمرار من الحوض الكلوي نحو نقطة التوصيل الحيلية (الشكل 1D).

figure-protocol-1
الشكل 1: التعرف على الحالب الأيسر بمساعدة الصبغة وتحريكها. السهم الأخضر يصور موقع حقن الكلى. السهم الرمادي يصور الحالبين الساذج. السهم الأزرق يصور حالبا محددا بالصبغة. يصور الصندوق الأسود منطقة مكبرة لاحقا. (أ) التعرض للخلف الصفاقي الأيسر بعد استئصال البطن في منتصف الخط. (ب) تحديد الحالبين بمساعدة الصبغة. (ج) يقوم التشريح العريض بتحريك الحاب من الأنسجة المحيطة. (د) الحالب الأيسر مكشوف بالكامل من الحوض الكلوي إلى الوصلة الحالية. (ه) رسم تخطيطي للخطوات الموصوفة، بما في ذلك الحقنة والميثيلين الأزرق. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

5. ربط جزئي معاير بعيد للحالب الأيسر باستخدام سلك معدني

  1. رفع قطعة متحركة من الحالب البعيد باستخدام ملقط غير مصاب دون ضغط الحالب (الشكل 2A.1–2).
  2. مرر خيط أحادي بحجم 6-0 تحت الحالب باستخدام ملقط غير حاد (الشكل 2A.3).
  3. ضع سلك معايرة معدني بالقطر المطلوب (0.65، 0.55، 0.30، أو 0.20 مم) موازيا للحالب داخل حلقة الربط (الشكل 2B.1–6).
  4. شد الربط تدريجيا باستخدام عقدة منزلقة مع عدة رميات حلقية في نفس الاتجاه حتى يتكيف حزام الغرز بإحكام مع مركب سلك الحالب دون ارتخاء، وهذا يتطلب على الأقل 4 رميات مع حركات أصابع مرتدة بطيئة للسماح بتثبيت الغرز بين الرميات.
    ملاحظة: يجب أن يكون شد الخياطة أقل بقليل من قوة كسر الشد، والتي تتراوح بين 5–7 نيوتن للدرز غير القابل للامتصاص 6-0، لذا ينصح ب 3 نيوتن. وهذا يعني وزن سحب حوالي 306 جرام ويمكن قياسه باستخدام ميزان زنبركي أو يقارن بالقوة الرقمية عند حمل هاتف محمول عادي بإصبعين في قبضة ضيقة. الجانب الأساسي هو أن الغرز مغلقة تماما عن مركب الأسلاك الحالبية وأن هناك عددا كبيرا من الرميات الحلقية بحيث لا تتراخى قبل أن تتابع رميات القفل. نظرا للطبيعة الهشة للغرز 6-0، لا يوجد "ضيق جدا" لأن الغرز سينكسر قبل أن يصبح ضيقا جدا بحيث لا يتدهور نسيج الحالب. الآن ثبت العقدة بثلاث رميات قفل معاكس لمنع العقد الهوائية (الشكل 2B.7–10).
  5. اسحب سلك المعايرة بحذر بحركة بطيئة ومستقيمة لتجنب إصابات القص على جدار الحالب، مما يترك تجويف حالبي متبقي موحد يتوافق مع قطر السلك (الشكل 2C.1–5). سطح السلك المصقول يقلل الاحتكاك أثناء الإزالة ويقلل من خطر تلف الأنسجة.

figure-protocol-2
الشكل 2: ربط جزئي معاير بعيد للحالب الأيسر باستخدام سلك معدني. (أ) الحالب البعيد معزول ومرتفع باستخدام مشابك فوقية؛ غرزة 6-0 تحت السطح. (ب) سلك معايرة موضوع بشكل مواز للحالب داخل الربط والربط باستخدام عقدة منزلقة. (C) سحب السلك، مما يترك تلومن متبقي موحد. (د) رسم تخطيطي للخطوات الموصوفة باستخدام الحالب (الأزرق)، وسلك المعايرة (الرمادي)، والرباط (الأسود). يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

6. تحديد وتحريك الحالب الأيمن

  1. كرر الخطوات على غرار الجانب المقابل (الشكل 3).

figure-protocol-3
الشكل 3: تحديد وتحريك الحالب الأيمن بمساعدة الصبغة. (أ) التعرض الخلفي للبيتوني الأيمن مع تمييز الحالب بمساعدة الصبغة. (ب) تشريح غير حاد يحرك الحاب من الأنسجة المحيطة. (ج) رسم تخطيطي للخطوات الموصوفة. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

7. ربط كامل قريب من الحالب الأيمن باستخدام عقدة منزلقة بدون سلك

  1. رفع الجزء المتحرك من الحالب القريب باستخدام ملقط غير مصاب دون ضغط الحالب (الشكل 4A.1–3).
  2. مرر خيط أحادي 6-0 غير قابل للامتصاص تحت الحاب باستخدام ملقط حاد (الشكل 4A.4,5).
  3. شد الرباط تدريجيا باستخدام عقدة منزلقة مع عدة حلقات في نفس الاتجاه حتى تربط حمالة الغرز الحالب بإحكام دون أن ترتخي كما هو موضح أعلاه. ثم يتم تثبيته برميات قفل معاكسة لتحقيق إغلاق ضوئي شبه كامل (الشكل 4B.1–4).

figure-protocol-4
الشكل 4: ربط كامل قريب من الحاب الأيمن باستخدام عقدة منزلقة بدون سلك. (أ) الحلب القريب معزول ومرتفع باستخدام مشابك أوفرهولت؛ غرزة 6-0 تحت السطح. (ب) الربط الكامل بدون سلك باستخدام عقدة منزلقة. (ج) رسم تخطيطي للخطوات الموصوفة. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

8. التحقق الوظيفي من الانسداد الجزئي والكامل في الحالب

  1. للتحقق من وجود انسداد جزئي في الجانب الأيسر، قم بحقن 0.2 مل من الميثيلين الأزرق غير المخفف بشكل شفاف في الحوض الكلوي باستخدام حقنة ولاحظ الحشو التمهيدي للحالب البعيد إلى موقع الربط (الشكل 5A.1–3).
  2. حقن 1.0 مل محلول ملحي في الحوض الكلوي لإزالة إشارة الصبغة تدريجيا عن طريق الغسل وتأكيد استمرار التوقف في الحالب (الشكل 5A.3). لزيادة اليقين في انسداد الحالب غير المكتمل، استمر في الحقن حتى تتجاوز سعة حجم المثانة وملاحظة تدفق سائل مرئي من الإحليل (الشكل 5A.4–5).
  3. للتحقق من وجود انسداد كامل في الجانب الأيمن، حقن 0.2 مل من الميثيلين الأزرق غير المخفف بشكل شفاف في الحوض الكلوي وتأكد من غياب ممر الصبغة البعيد (الشكل 5B.1,2).
  4. حدد توسع عيار الحالب القريب أعلى موقع الربط كمؤشر على كتلة التدفق الكاملة (الشكل 5B.3).
  5. للحصول على تأكيد إضافي يتجاوز قابلية استخدام نموذج الحيوان، قم بقطع كلا الحالبين من البعيد ووضع نهايات الحالبين المفتوحة بجوار الشعيرات الدموية الزجاجية لقياس تجمع البول (الشكل 5C).
  6. للتحقق من صحة هذا النموذج، قم بقياس إنتاج البول لكل كلية خلال فترة 30 دقيقة تحت ظروف فسيولوجية وبعد الربط الجزئي باستخدام أسلاك معايرة بأقطار 0.65، 0.55، 0.30، و0.20 مم (الشكل 5C.2).

figure-protocol-5
الشكل 5: التحقق الوظيفي من انسداد الحاليل الجزئي والكامل. (أ) انسداد جزئي: يظهر تلوين الصبغة وغسل المحلول الملحي ملء الحالب البعيد وتدفق الإحليل، مما يشير إلى بقايا الحالب. (ب) انسداد شبه كامل: غياب الصبغة البعيدة، مع وجود حالب قريب منتفخ أعلى الرابط. (ج) يظهر تجمع الشعيرات الدموية لحجم بول أحادي الجانب أكثر من 30 دقيقة لكل كلية انخفاضا تدريجيا في إخراج البول من الحالات الفسيولوجية إلى الإغلاق الكامل. (د) القياسات المجهرية (1) قطر الرباط، (2) قطر الحالب الخارجي، (3) قطر الحاب الداخلي، و(4) سمك جدار الحالب. تشير النجوم إلى مستويات دلالة استكشافية. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

9. الخطوات النهائية والاعتبارات

  1. أغلق جدار البطن بطبقات متعددة تحت ظروف معقمة كما هو موضح في التقارير السابقة 19,20,21.
  2. بعد الجراحة، راقب كل حيوان باستمرار حتى يستعيد استلقاء عظم القص والحركة التلقائية. إعادة توطين الحيوانات فقط بعد أن تكون متيقظة تماما وقادرة على الحركة المنسقة. أعط مسكنات الألم بعد العملية باستخدام الكاربروفين تحت الجلد بجرعة 5 ملغ/كغ مرتين يوميا لمدة 48 ساعة، وتأكد من أن الطاقم البيطري يجري تقييمات سريرية يومية لمراقبة التعافي واكتشاف المضاعفات المحتملة.
  3. وثق رفاهية الحيوان باستخدام أنظمة تقييم موحدة مثل مقياس جريم الجرذان22 ودرجة حالة الجسم23. تشمل النقاط الإنسانية درجة جريم ≥ 6 أو درجة حالة الجسم 1 رغم وجود مسكنات كافية. قم بإنهاء العلاج بالحيوانات التي تظهر هذه النتائج، وكذلك تلك التي تظهر عليها عدوى جرح بعد العملية أو انفصال جدار البطن، فورا وفقا لمعايير الرعاية المؤسسية.
  4. في تجارب عدم البقاء أو للإجهاض بعد المتابعة، قم بقتل الحيوان عن طريق استئصال القلب الحاد تحت التخدير العميق أو عن طريق خلع عنق الرحم (وفقا للبروتوكولات المعتمدة من المؤسسات). اختياريا، استئصال الكلى والحالب بشكل جماعي للفحص التشريحي لاحقا أو التحليل الجزيئي الحيوي أو التصوير النسيجي المرضي.
  5. التخلص من جثث الحيوانات، والأنسجة المستأصلة، والسائف الحاد، والمحاليل الكيميائية المتبقية وفقا لإرشادات المؤسسات والسلامة الحيوانية للحيوانات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

أنتجت تقنية الربط المعايرة انخفاضا يعتمد على القطر في تدفق البول عبر جميع المجموعات التجريبية. تم تقييم تدفق البول في 14 فأرا باستخدام كلتي الكلية، مما أدى إلى قياسات من 5 أعضاء لكل مستوى انسداد جزئي (0.65، 0.55، 0.30، و0.20 مم قطر). بالإضافة إلى ذلك، تم تضمين 4 حيوانات تلقت علاج شامي من جهة (تم تحريك الحالب، وربط عقدة هوائية غير ضيقة بدون سلك) وانسداد كامل من الجهة الأخرى (رباط بدون وضع سلك للإغلاق الكامل) لأغراض التحقق. تم قياس إنتاج البول عن طريق جمع البول من جذع الحالب المقطوع إلى شع...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تؤسس هذه الدراسة طريقة جراحية قابلة للتكرار لتحفيز تضيق الحالب أحادي الجانب في الفئران من خلال استئصال البطن في منتصف الخط والربط الجزئي المعاير، مما يؤدي إلى تضيق الحالب القطاعي مع الحفاظ على صلاحية الأنسجة الكبيرة التي تشبه وظيفيا وتشريحيا تضيق الحالب البشري الحميد.

سريريا، يظل مرض تضيق الحالب مساهما رئيسيا في انسداد الجهاز العلوي وأمراض الكلى مع فقدان وظيفي طويل الأمد، وغالبا ما ينشأ بعد الإصابة العلاجية أو الصدمات أو الالتهاب24.

...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن أي تضارب مصالح. لم يتم استلام تمويل محدد. استخدام الحيوانات معتمد من قبل مجلس منطقة بادن-فورتمبيرغ (IACUC 35-9185.81/G-62/23).

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون بكل امتنان خدمة تخزين البيانات SDS@hd بدعم من وزارة العلوم والبحث والفنون في بادن-فورتمبيرغ (MWK) ومؤسسة البحوث الألمانية (DFG) من خلال منحة INST 35/1314-1 FUGG وINST 35/1503-1 FUGG. علاوة على ذلك، يشكر المؤلفون بكل امتنان الدعم من NCT (المركز الوطني لأمراض الأورام في هايدلبرغ، ألمانيا) من خلال برنامج ما بعد الدكتوراه المنظم وبرنامج جراحة الأورام. كما نعترف بالدعم من خلال الأموال الحكومية التي أقرها برلمان ولاية بادن-فورتمبيرغ لتحالف الابتكار في الصحة الجامعية + علوم الحياة في هايدلبرغ مانهايم من برنامج ما بعد الدكتوراه المنظم لألكسندر ستوديير-فيشر: الذكاء الاصطناعي في الصحة (AIH) - تعاون بين DKFZ، EMBL، جامعة هايدلبرغ، مستشفى جامعة هايدلبرغ، مستشفى جامعة مانهايم، المعهد المركزي للصحة النفسية. ومعهد ماكس بلانك للأبحاث الطبية. علاوة على ذلك، نشكر الدعم من خلال معهد DKFZ هيكتور للسرطان في المركز الطبي الجامعي في مانهايم.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
ملقط تحضير غير رضحيةإيسكولابFB395Rدي باكي أتروماتا ملاقط غير رضحية، مستقيم
مشابك الأوفرهولت غير الحادةإيسكولابBJ012Rتحضير بيبي-ميكستر ومشبك الربط، مثني، 180 مم
الكانيولابي دي (بيكتون، ديكنسون)301300بي دي ميكرولانس 3 كانولا 20 جيلون
الأنابيب الشعريةسيغما ألدريتشP1174أنبوب شعيرات دموية دقيقة، معاير 100 وميكرو؛ L
كاربروفينسي بي فارما115كاربروفين 0.5٪ (5٪ مع 50 ملغ/مل مخفف بنسبة 1:10) (Carprosol®)
تبادل قطن وولأمازونASIN: B0FPDB8ZGSتبادل القطن غير المعقم وهول
(معقم لتجارب البقاء)
قضبان التثبيتالمكتب القانوني‎ 500343896شوك الضبط المستخدمة كقضبان تثبيت معدنية على شكل حرف Y
تبديل الشاشميدولASIN: B09164D1JGتبديل الشاش المعقم
وسادة التدفئةرويال جاردينيرIP67حجم وسادة التدفئة رويال غاردينير، 20 واط
إيزوفلورانالعناية المركزة بيرامالPZN / EAN 09714675 / 4150097146757100٪ إيزوفلوران 250 مل
تبخير الإيزوفلورانUNO ROESTVASTSTAAL BV180000002تبخير الإيزوفلوران
محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوترب. براونASIN: B007PZJOQ4محلول كلوريد الصوديوم 0.9٪
الكيتامينسي بي فارما1202كيتامين 10٪ (100 ملغ/مل)
سلك معايرة معدني
(قطر 0.20 مم)		كواركزمانASIN: B0DCZBT4LWسلك Cr20Ni80-نيكروم المعدني
(قطر 0.20 مم)
سلك معايرة معدني
(قطر 0.30 مم)		راير4006166052859سلك Cr20Ni80-نيكروم المعدني
(قطر 0.30 مم)
سلك معايرة معدني
(قطر 0.55 مم)		سكايبروUPC: 792138793816سلك معدني Cr20Ni80-Nichrom
(قطر 0.55 مم)
سلك معايرة معدني
(قطر 0.65 مم)		تويبASIN: B07WFWNNRMسلك معدني Cr20Ni80-نيكروم
(قطر 0.65 مم)
ميثيلين بلو 0.5٪بروففارمPZN / EAN 10179678 / 4150101796787ميثيثينيوم كلوريد بروفبلو 5 ملغ/مل في قوارير 10 مل
أربطة أحادية الخيط غير القابلة للامتصاص 6-0كوفيدينVP-889-Xخياطة جراحية أحادية الخيط من بولي بروبيلين غير قابل للامتصاص؛ يمكن إزالة الإبرة
مرهم العيونباير فيتال جي إم بي إتش15786815٪ ديكسبان ثينول
أنبوب الترفيزر البلاستيكيشركة إم. شيلينغ GmbHS702NC150أنبوب التوصيل COEX 150 سم
مقص التحضيرإيسكولابBC177Rمقص تحضير JAMESON، مثني، نموذج دقيق، غير حاد/غير حاد، 150 مم (6")
الصفائح الفولاذيةشركة ماشيننباو فيلد GmbHC010206صفائح مجلفنة، 40 × 50 سم، سمك 4.0 مم
حقنة بإبرة مدمجةBLPRKOTBL2509L3yici08حقنة سعة 1 مل مع إبرة مدمجة بقوة 30 جالون
زيلازينسي بي فارما1206زيلازين 0.2٪ (2٪ مع 20 ملغ/مل مخفف بنسبة 1:10) (زيلافيت)

المراجع

  1. Moretto, S., et al. Ureteral stricture rate after endoscopic treatments for urolithiasis and related risk factors: systematic review and meta-analysis. World J Urol. 42 (1), 234(2024).
  2. Sahin, C., et al. Ureteral stricture formation after endoscopic removal of obstructing stones: could it be predicted with well-assessed radiological parameters. Urolithiasis. 52 (1), 34(2024).
  3. Sunaryo, P. L., et al. Ureteral strictures following ureteroscopy for kidney stone disease: A population-based assessment. J Urol. 208 (6), 1268-1275 (2022).
  4. Minkovich, M., et al. Ureteral strictures post-kidney transplantation: Trends, impact on patient outcomes, and clinical management. Can Urol Assoc J. 15 (10), E524-E530 (2021).
  5. Rosenfeld, J., et al. A review of complications after ureteral reconstruction. Asian J Urol. 11 (3), 348-356 (2024).
  6. Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy. Kidney Int. 75 (11), 1145-1152 (2009).
  7. Reicherz, A., et al. Ureteral obstruction promotes ureteral inflammation and fibrosis. Eur Urol Focus. 9 (2), 371-380 (2023).
  8. Li, Z., et al. Health-related quality of life (HRQoL), anxiety and depression in patients with ureteral stricture: A multi-institutional study. World J Urol. 41 (1), 275-281 (2023).
  9. May, P. C., et al. The morbidity of ureteral strictures in patients with prior ureteroscopic stone surgery: multi-institutional outcomes. J Endourol. 32 (4), 309-314 (2018).
  10. Contreras, P., et al. Ureteral stricture: Endoscopic management. Eur Urol Focus. 11 (5), 730-732 (2025).
  11. Su, B., et al. Long-term outcomes of Allium ureteral stent as a treatment for ureteral obstruction. Sci Rep. 14 (1), 21958(2024).
  12. Kowalski, F., et al. Endourological treatment of ureteral strictures with the use of self-expanding stents: Is it possible to completely cure the stricture endoscopically? a retrospective study with two-year follow-up. World J Urol. 43 (1), 201(2025).
  13. Bourillon, A., et al. Robotic upper urinary tract reconstruction for ureteral stricture: A single-center series. J Robot Surg. 19 (1), 573(2025).
  14. Vroomen, L., et al. A new intrasurgical technique to safely and reproducibly induce partial unilateral urinary obstruction and renal scarring in a rat model. Int Urol Nephrol. 52 (7), 1209-1218 (2020).
  15. Chen, T., Zhang, Z., Lai, C. Improvement of the reversible unilateral ureteral obstruction model. Ren Fail. 47 (1), 2454721(2025).
  16. Nan, Q. Y., et al. Pathogenesis and management of renal fibrosis induced by unilateral ureteral obstruction. Kidney Res Clin Pract. 43 (5), 586-599 (2024).
  17. Khater, Y., Barakat, N., Shokeir, A., Samy, A., Karrouf, G. Renal fibrosis progression following partial unilateral ureteral obstruction: mechanisms and therapeutic insights. World J Urol. 43 (1), 229(2025).
  18. Thornhill, B. A., Burt, L. E., Chen, C., Forbes, M. S., Chevalier, R. L. Variable chronic partial ureteral obstruction in the neonatal rat: A new model of ureteropelvic junction obstruction. Kidney Int. 67 (1), 42-52 (2005).
  19. Studier-Fischer, A., et al. Endotracheal intubation via tracheotomy and subsequent thoracotomy in rats for non-survival applications. J Vis Exp. (205), e66684(2024).
  20. Studier-Fischer, A., et al. Controlled reversible visceral arterial ischemia, venous congestion and combined malperfusion via midline laparotomy in rats. J Vis Exp. (209), e67171(2024).
  21. Studier-Fischer, A., et al. 5/6 nephrectomy using sharp bipolectomy via midline laparotomy in rats. J Vis Exp. (218), e67322(2025).
  22. Sotocinal, S. G., et al. The rat grimace scale: A partially automated method for quantifying pain in the laboratory rat via facial expressions. Mol Pain. 7, 55(2011).
  23. Hickman, D. L., Swan, M. Use of a body condition score technique to assess health status in a rat model of polycystic kidney disease. J Am Assoc Lab Anim Sci. 49 (2), 155-159 (2010).
  24. Gild, P., et al. Adult iatrogenic ureteral injury and stricture-incidence and treatment strategies. Asian J Urol. 5 (2), 101-106 (2018).
  25. Luo, J., et al. marrow mesenchymal stem cells reduce ureteral stricture formation in a rat model via the paracrine effect of extracellular vesicles. J Cell Mol Med. 22 (9), 4449-4459 (2018).
  26. Maruschke, M., et al. Development of a rat model for investigation of experimental splinted uretero-ureterostomy, ureteral stenting and stenosis. In Vivo. 27 (2), 245-249 (2013).
  27. Demirhan, K., Saglam, H. S., Cimen, H. I., Elcin, B., Cokluk, E. Effect of the location and severity of partial ureteral obstruction on urinary system stone disease formation. Sci Rep. 15 (1), 11560(2025).
  28. Wen, J. G., Chen, Y., Frøkiaer, J., Jørgensen, T. M., Djurhuus, J. C. Experimental partial unilateral ureter obstruction I pressure flow relationship in a rat model with mild and severe acute ureter obstruction. J Urol. 160 (4), 1567-1571 (1998).
  29. Li, P., et al. An immature murine model of reversible unilateral ureteral obstruction. J Vis Exp. (218), e67238(2025).
  30. Martínez-Klimova, E., Aparicio-Trejo, O. E., Tapia, E., Pedraza-Chaverri, J. Unilateral ureteral obstruction as a model to investigate fibrosis-attenuating treatments. Biomolecules. 9 (4), 141(2019).
  31. Mohammadi, A., et al. Effects of the surgical ligation of the ureter in different locations on the kidney over time in the rat model. Adv Urol. 2024, 6611081(2024).
  32. Narváez Barros, A., et al. Reversal unilateral ureteral obstruction: A mice experimental model. Nephron. 142 (2), 125-134 (2019).
  33. Nakazawa, R., et al. Renal replacement strategies: dual benefits of hydrogen gas inhalation and hydrogen-enriched dialysate. Med Gas Res. 15 (3), 444-445 (2025).
  34. Cheng, J., Shi, M., Sun, X., Lu, H. Therapeutic effect of hydrogen and its mechanisms in kidney disease treatment. Med Gas Res. 14 (2), 48-53 (2024).
  35. Liu, B., et al. Hyperbaric oxygen therapy for male infertility: a systematic review and meta-analysis on improving sperm quality and fertility outcomes. Med Gas Res. 15 (4), 529-534 (2025).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة