يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

آلية والتحقق التجريبي للفلافونويدات الكلية في مرض الريزوما دريناريا في علاج التهاب المفاصل النقرس

111 مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/70849

⸱

يونيو 5, 2026

 ,  , 
1School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, 2Quality department, Beijing Tongrentang Kangyang Industry Development Co., Ltd, 3Engineering Research Center of Good Agricultural Practice for Chinese Crude Drugs, Ministry of Education

في هذه المقالة

ملخص

تخفف الفلافونويدات الكلية من Rhizoma Drynariae (TFRD) من التهاب المفاصل النقري (GA) عن طريق تثبيط تسرب الخلايا الالتهابية وتقليل مستويات TNF-α وIL-6 وIL-17A، بشكل أساسي من خلال تثبيط مسارات الإشارات AKT وMAPK وNF-κB، مما يبرز إمكاناتها العلاجية المضادة للالتهابات وتعديل المناعة.

الملخص

التهاب المفاصل النقرس (GA) هو مرض التهابي في المفاصل ناتج عن ترسيب بلورات اليورات أحادية الصوديوم (MSU) داخل مساحة المفصل والأنسجة المحيطة. في الطب الصيني التقليدي، يستخدم ريزوما دريناريا (غوسويبو) على نطاق واسع في العلاج السريري لالتهاب الحمض الغامضي (GA)، وتعتبر الفلافونويدات من المكونات الحيوية الرئيسية فيه. استخدم هذا البحث علم الأدوية الشبكي لبناء شبكة من الفلافونويدات الكلية في مرض الجثور الدرينارية (TFRD) ضد GA، وبالتالي تحديد المكونات الرئيسية والأهداف الأساسية والمسارات ذات الصلة. تم تأسيس نماذج الجرذان عن طريق الحقن داخل المفصل لتعليق بلورة اليورانات أحادية الصوديوم وعالجت ب TFRD أو الضابط الإيجابي، الكولشيسين، بواسطة التجويز الفموي. بعد جمع العينات، تم التحقق من صحة نتائج التنبؤ المعتمدة على علم الأدوية الشبكي باستخدام استقلاب مصل الفئران، واختبار المقاومة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA)، وتحليل الصبغة الغربية. أشارت تحليلات علم الأدوية الشبكي إلى أن تأثيرات TFRD المضادة للGA تتوسط من خلال أهداف رئيسية، بما في ذلك IL6، AKT1، TNF، EGFR، JUN، وPTGS2، وترتبط بشكل رئيسي بالمسارات المرتبطة بالالتهاب والمناعة والخلايا المبرمجة، مثل IL-17، TNF، NF-κB، MAPK، PI3K-AKT، JAK-STAT، ومسارات إشارات مستقبلات الخلايا التائية. وبالمثل، كشف علم الأيض أيضا عن الأدوار المحورية للاستجابة الالتهابية. أكد تلوين الهيماتوكسيلين والإيوزين (H&E) أن TFRD قلل من تسرب الخلايا الالتهابية. أكد اختبار ELISA أن مجموعة TFRD تثبط بشكل كبير تعبير العوامل الالتهابية TNF-α وIL-6 وIL-17A في الأنسجة الزليلية. كشف تحليل البلوت الغربي أن TFRD يثبط فرط الفسفرة الناتج عن GA لأنواع AKT وMAPK p38 وNF-κB p65 في نسيج الجرذان السيلفي. يمكن ل TFRD أن يخفف بشكل فعال من التغيرات الناتجة عن الالتهاب في فئران GA من خلال تعديل العوامل والمسارات الالتهابية المرتبطة مباشرة.

المقدمة

التهاب المفاصل النقرس (GA) هو مرض التهابي في المفاصل يحدث نتيجة ترسيب بلورات اليورات أحادية الصوديوم (MSU) داخل وحول المفاصل، والتي تحفز منطقة المفصل 1,2. يتضمن المرض لالتهاب الغرومي تداخلا معقدا بين الاستعداد الجيني، والتأثيرات البيئية، واضطراب الأيض، والذي يتميز بشكل رئيسي بفرط يوريسميا الناتج إما عن إنتاج مفرط لحمض اليوريك أو إخراج الكلى غير كاف 3,4. يؤدي ذلك إلى تراكم جهازي لبلورات اليورات في أنسجة الكلى والمساحات المفصلية، حيث تنشط الجهاز المناعي الفطري وتحفز سلاسل التهابية شديدة5،6. في السنوات الأخيرة، أظهرت سلسلة من الدراسات أن انتشار مرض التهاب المفرغ المزمنة على مستوى العالم قد ارتفع بالتوازي مع تزايد معدل السمنة ومتلازمة الأيض، مما أدى إلى ضعف وظيفي وفرض عبء اجتماعي واقتصادي كبير على المصابين7. تركز استراتيجية علاج التهاب المفاصل النقرسي على السيطرة على التهاب المفاصل الحاد في المفاصل وإدارة مستويات حمض اليوريك طويلة الأمد 8,9. ومع ذلك، غالبا ما تكون فائدة العلاجات الدوائية الحالية مقيدة بملفات الآثار الجانبية وموانع الطب المحددة لها. على سبيل المثال، عادة ما يتم تجنب الأدوية المضادة للالتهاب غير الستيرويدية لدى مرضى مرض الكلى المزمن بسبب خطر التسبب أو تفاقم إصابة الكلى الحادة10,11. وبالمثل، يحمل عامل خفض اليرات ألوبورينول خطرا موثقا جيدا لحدوث ردود فعل جلدية شديدة مثل متلازمة ستيفنز-جونسون، في حين قد يسبب بنزبرومارون سمية كبدية كبيرة 11,12,13,14,15. لذلك، لا تزال هناك حاجة ملحة لتطوير علاجات أكثر أمانا وتطبيقا أوسع ومستهدفة ميكانيكيا لإدارة فعالة لالتهاب الشكل النفسي الكبير.

في الطب الصيني التقليدي (TCM)، يندرج GA تحت فئات تشخيصية مثل "مرض ليجي" (ألم جريان المفاصل)، "نقرس بي" (عائق النقرس)، و"يو زو بي" (عوائق السكون والعكارة). تقدم تدخلات الطب الصيني الصيني لعلاج التهاب المفعول المزمنة تأثيرات تآزرية من خلال التأثيرات المضادة للالتهابات والمسكنات، وتعديل استقلاب حمض اليوريك، وتحسين الدورة الدموية الدقيقة، والحفاظ على وظيفة المفاصل، مما يجعلها مجالا بارزا في البحث المعاصر 16,17,18,19. الجنزور الدرينارية (Gusuibu) المستمدة من الجذور المجففة لسرخس Drynaria fortunei (Kunze) J.Sm.، وهي سرخس معمرة من عائلة Polypodiaceae، تستخدم عادة في الممارسة السريرية لعلاج التهاب الوراثة الوراثية. تحتوي المركبات النشطة حيويا في Rhizoma Drynariae بشكل أساسي على الفلافونويدات، والفينيل بروبانويدات، والتريتيربينويدات، والأحماض الفينوليكية، والجليكوسيدات الخاصة بها20,21. من بين هذه الفئة، تمثل الفلافونويدات أكثر فئة مركبات دراسة في السنوات الأخيرة22، 23، 24. أظهرت دراسات سابقة أن الفلافونويدات تمتلكخصائص مضادة للالتهاب ومضادات أكسدة بارزة.

وجدت الأبحاث الأولية أن إجمالي الفلافونويدات في مرض الجذور الدريناريائية (TFRD) يمكن أن يثبط بشكل فعال الاستجابات الالتهابية في التهاب المفاصل العظمي، والتهاب المفاصل الروماتويدي، وحالات المفاصل الالتهابية الأخرى26،27،28. ومع ذلك، لم يتم التحقيق بشكل كامل في الآليات الأساسية ل TFRD ضد GA بعد. لذلك، تهدف هذه الدراسة إلى تطبيق نهج متكامل يجمع بين علم الأدوية الشبكي، وعلم الأيض، وتجارب علم الأحياء الجزيئي لاستكشاف والتحقق من الآليات المحددة والفعالية العلاجية ل TFRD في علاج التهاب الحمض الجوي. من المتوقع أن يؤدي التحقيق المنهجي في آليات متعددة المكونات والأهداف والمسارات المتعددة التي تقوم عليها علاج TFRD ضد التهاب الجلد المفصلي إلى تعزيز اكتشاف الأدوية وتوفير خيارات مبتكرة وحلول عملية للإدارة السريرية لالتهاب الحمض الوريدي المزمن.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت مراجعة هذه الدراسة والموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان في مستشفى الصداقة الصيني-الياباني (رقم الموافقة: zryhyy21-22-08-10) وأجريت وفقا للإرشادات المؤسسية للرعاية الأخلاقية واستخدام الحيوانات المختبرية.

التنبؤ والفحص للأهداف المرتبطة ب TFRD وGA المرتبطة
تم استرجاع المكونات الكيميائية لمرض الجذور الدرينارياي من قاعدة بيانات وتحليل أنظمة الأدوية التقليدية للطب الصيني (TCMSP) باستخدام مصطلح البحث "Rhizoma Drynariae" كمصطلحبحث 29. تم إجراء فحص المكونات النشطة بيولوجيا المحتملة بناء على معايير التوافر البيولوجي الفموي (OB) ≥ 30٪ والشبيهة بالأدوية (DL) ≥ 0.18،30، 31، 32. من بين مجموعة المركبات الناتجة، تم تحديد واختيار مكونات الفلافونويد وفقا لهياكلها الكيميائية. تم دمج هذه المكونات الفلافونويدية، التي يشار إليها لاحقا باسم إجمالي الفلافونويدات في Rhizoma Drynariae (TFRD)، في التحليل اللاحق. عند استرجاع الجينات المستهدفة المرتبطة ب TFRD من قاعدة بيانات TCMSP، تم تدوين رموز الجينات الموحدة المقابلة باستخدام قاعدة بيانات UniProtرقم 33. باستخدام مصطلح "نقرس" كمصطلح بحث، تم استرجاع أهداف مرتبطة بالأمراض من قاعدة بيانات GeneCards لتحديد مجموعة من الجينات المرشحة34.

إنشاء شبكة مركبة مستهدفة
تم تحديد وتعريف التقاطع بين الأهداف المرتبطة ب TFRD والأهداف المرتبطة ب GA، كأهداف علاجية رئيسية تتوسط تأثيرات TFRD المضادة ل GA، وتم تصور مجموعة التداخل باستخدام مخطط فين. علاوة على ذلك، تم بناء وتحليل شبكة تنظيمية من "TFRD - الأهداف - GA" باستخدام برنامج Cytoscape35.

شبكة تفاعل البروتين والبروتين
تم استيراد الأهداف العلاجية الرئيسية ل TFRD ضد GA إلى قاعدة بيانات إلكترونية لإنشاء شبكة تفاعل بروتين وبروتين (PPI)، مع تحديد الحد الأدنى لدرجة التفاعل المطلوبة على "ثقة عالية (0.700)"36. تم تحسين شبكة PPI باستخدام برنامج Cytoscape، وتم اختيار أفضل 30 هدفا أساسيا مصنفا حسب مركزية الدرجة لتوليد مخطط شريط37,38.

تحليل إثراء مسارات KEGG
تم إجراء تحليل إثراء مسار KEGG على هذه الأهداف الأساسية باستخدام برنامج R وقاعدة بيانات Bioconductor38,39. تم اعتبار المسارات ذات القيمة p < 0.05 ذات دلالة إحصائية. بعد استبعاد المسارات المرتبطة بالمرض والتمثيل الغذائي، تم تصور شبكة تفاعل المسار مع الهدف في Cytoscape. من بين هذه المسارات، تم عرض أفضل 20 مسارا مصنفا بقيمة P تصاعدية في مخطط الشريط.

تحضير الأدوية
لتحضير تعليق بلورات اليورات أحادي الصوديوم (MSU)، تم وزن 500 ملغ من بلورات MSU باستخدام ميزان تحليلي، موزعة في 10 مل من المحلول الملحي العادي و2 مل من Tween 80، وتم تسخينها أثناء التحريك مغناطيسيا. ثم تم تعديل الخليط إلى حجم نهائي 20 مل مع محلول ملحي عادي للحصول على تعليق 25 ملغ/مل. بعد التعقيم الداخلي، كان التعليق يخزن عند 4 درجات مئوية حتى الاستخدام. الجرعة السريرية الشائعة لعلاج TFRD هي 750 ملغ يوميا لبالغ يزن 70 كجم، وهي ما يعادل جرعة 67.5 ملغ/كجم من وزن الجسم يوميا. تم إذابة TFRD في ماء مقطر بتركيز 6.75 ملغ/مل وتخزينه عند 4 درجات مئوية للاستخدام لاحقا. وفقا لطريقة تطبيع مساحة سطح الجسم، فإن الجرعة الفموية المكافئة للكولشيسين (الدواء الإيجابي) في الفئران المحولة من الجرعة السريرية البشرية (0.6 ملغ/60 كجم) هي 0.062 ملغ/كغ. تم تحضير محلول الكولشيسين في ماء مقطر بتركيز 0.0062 ملغ/مل وتم تخزينه عند 4 درجات مئوية للاستخدام لاحقا.

الحيوانات
تم استخدام ما مجموعه 36 ذكرا من نوع سبريغ-داولي (SD) عمره ستة أسابيع (220 ± 10 جرام) في هذه الدراسة (رقم رخصة الحيوان. SCXK [جينغ] 2025-0008). تم إسكان الحيوانات في مركز الحيوانات المختبرية بمستشفى الصداقة الصين-الياباني وفقا لظروف غذائية قياسية بدرجة حرارة 22–24 درجة مئوية ورطوبة 50–70٪.

تأسيس نموذج وتدخل
بعد أسبوع من التأقلم، تم تقسيم الفئران عشوائيا إلى أربع مجموعات (n = 9 لكل مجموعة): ضابطة، نموذج، TFRD، ودواء إيجابي. تم إجراء العشوائية باستخدام جدول أرقام عشوائي. تم جمع البيانات وتحليلها في ظروف عمياء. جميع العلاجات كانت تعطى مرة واحدة يوميا عن طريق التمقم الفموي. تم إجراء جميع التدخلات مرة واحدة يوميا عن طريق التمقم الفموي في الساعة 08:00 مساء لمدة سبعة أيام متتالية. تلقت مجموعات التحكم الفارغ والنماذج محلول ملحي طبيعي (10 مل/كغ)، بينما تم إعطاء مجموعات TFRD والدواء الإيجابية تعليقات دوائية بحجم مكافئ (10 مل/كغ). في اليوم الرابع من التدخلات، تلقت مجموعة الضابط الفارغة حقنة داخل المفصل من محلول ملحي طبيعي معقم، بينما تم حقن الفئران في النموذج، TFRD، والمجموعات الدوائية الإيجابية بمادة تعليق بلورات MSU لتحفيز التهاب المفاصل النقرس الحاد. قبل الحقن، كانت الفئران تخدر باستخدام نظام تخدير إيزوفلوران. كل فأر في النموذج، TFRD، ومجموعات الأدوية الإيجابية تلقى 200 ميكرولتر من تعليق MSU في تجويف مفصل الكاحل الأيسر. بعد سحب الإبرة، تم تطبيق ضغط لطيف في موقع الحقن باستخدام مسحة قطنية معقمة لعدة ثوان لمنع التسرب.

جمع العينات ومعالجتها
بعد 72 ساعة من تحفيز النموذج، تم تخدير الفئران ووضعها مستلقيا. بعد التعقيم البطني، تم فتح تجويف الصفاق، وسحب الأمعاء بلطف لكشف الشريان الأبهر البطني. تم إدخال إبرة جمع دم موازية للوعاء لسحب دم الأبهر البطني، والذي ينقل فورا إلى أنابيب مزينة بهيبارين مبردة مسبقا في حمام ماء مثلج. تم طرد العينات على حرارة 3000 × جرام لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية للحصول على المصل، الذي تم تجميده وتخزينه عند -80 درجة مئوية لإجراء تحليل أيضي لاحق. ثم تم قتل الحيوانات بالقتل الرحيم عن طريق الاختناق بثاني أكسيد الكربون. تم حلق الفرو حول مفصل الكاحل الأيسر، وتمت إزالة الجلد والعضلات المحيطة بعناية لكشف البنية السليمة للمفصل. تم عزل النسيج الزللي، الذي يظهر كغشاء أبيض رقيق يغطي كبسولة المفصل، بلطف من اللفافة المجاورة باستخدام ملقط دقيق. تم تثبيت عينات المفاصل المجمعة في 4٪ بارافورمالديهيد عند 4 درجات مئوية لمدة 72 ساعة. ثم تم إزالة الكلسية من جزء من نسيج المفصل في محلول إزالة الكالسين من EDTA، مع تجديد المحلول أسبوعيا لمدة 8 أسابيع. تم تأكيد إزالة الكلب الكامل من خلال اختبار ثقب الإبرة: إذا واجهت مقاومة، يستمر إزالة الكلب حتى يصبح النسيج قابلا للاختراق بالكامل.

بعد إزالة الكالسية، تم تقسيم مفاصل الكاحل بشكل قوسي، ووضعها في أشرطة المعالجة، وتعرضها لتجفيف الإيثانول التدرجي. تم تنظيف الأنسجة من الزيلين، وتم تغليبها بالبارافين، وغرسها في كتل البارافين. تم قطع مقاطع بسماكة 6 ميكرومتر باستخدام ميكروتوم آلي، وطفوت على حمام مائي بدرجة حرارة 40 درجة مئوية، وركبت على شرائح لاصقة. بعد التجفيف عند 60 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة، تم إزالة البارافين، وصبغها بالهيماتوكسيلين والإيوزين (H&E) وفقا للبروتوكولات القياسية، وأخيرا غطيت بالبلسم المحايد. تم التقاط صور شرائح كاملة باستخدام ماسح شرائح رقمي.

تحليل أيض المصل
تم إذابة عينات المصل من مجموعة النموذج وTFRD عند 4 درجات مئوية قبل المعالجة. لكل عينة، تم نقل 100 ميكرولتر من المصل إلى أنبوب طرد مركزي دقيق ودمجها مع 400 ميكرولتر من مذيب الاستخلاص المبرد مسبقا (الميثانول: الأسيتونيتريل 1:1، v/v) الذي يحتوي على معايير داخلية. تم تدوير الخليط لمدة دقيقة واحدة، تليها عملية السوتيكشن في حمام ماء مثلج لمدة 10 دقائق. ثم تم حضنه عند -40 درجة مئوية لمدة ساعة لتسهيل ترسيب البروتين، ثم تم طرد مركزه عند 12,000 × جرام لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية. تم جمع المادة الفائقة التي تم الحصول عليها بعد الطرد المركزي بعناية ونقلها إلى قوارير العينات الذاتية لتحليل UHPLC–MS. بالإضافة إلى ذلك، تم تجميع أحجام متساوية من الفائق من كل عينة ضمن نفس المجموعة لتوليد عينات مراقبة الجودة (QC).

بعد اكتشاف المستقلبات في عينات المصل من المجموعتين، تمت معالجة بيانات مطيافية الكتلة الخام بواسطة برنامج مخصص للكشف الآلي عن الذروة، واستخراجها، ومحاذاتها، والتكامل، مما أنتج مصفوفة بيانات منظمة لميزات الطيف الأيوني. تمت مطابقة السمات الطيفية المكتشفة مع مكتبات الطيف المعروفة في علم الأيض لتحديد المستقلبات المشتقة من TFRD والتي دخلت الدورة الجهازية. تمت إزالة الميزات غير المحددة وتلك التي تحتوي على قيم مفقودة بشكل مفرط من مجموعة البيانات. تم إعادة فهرسة مجموعة البيانات المنسقة وهيكلتها إلى صيغةموحد 40.

تم تقييم التعبير التفاضلي للمستقلبات بين المجموعتين من خلال حساب كل من تغير الطية (FC، المعبر عنه كنسبة بين المجموعات) والدلالة الإحصائية (قيمة p). المستقلبات التي تفي بعتبة |log₂FC| تم تعريف ≥ 1 وP < 0.05 كمستقلبات معبرة بشكل تفاضلي (DEMs). تم تلخيص نتائج الفحص بصريا باستخدام طرق مثل مخططات البراكين. تم استيراد المستقلبات التفاضلية التي تم فحصها لاحقا إلى قاعدة بيانات PubChem للحصول على معرفاتها القانونية (CIDs)41. ثم تم الحصول على معرفات KEGG المقابلة بناء على CIDs. وأخيرا، تم استيراد معرفات KEGG إلى منصة تحليل الأيض لإجراء تحليل إثراء المسارات الأيضية وتحديد مسارات الإشارات المرتبطة بشكل كبير ب DEMs.

إليسا
تم تجميد عينات الأنسجة الزلزية بسرعة في النيتروجين السائل وطحنتها إلى مسحوق ناعم. تم وزن حوالي 100 ملغ من المسحوق باستخدام ميزان إلكتروني دقيق، وخلطه مع 1 مل من PBS البارد جدا، وتم توحيده على الثلج باستخدام مجانس زجاجي. تم تطرد المادة المتجانسة على حرارة 10,000 × جرام لمدة 5 دقائق عند 4 درجات مئوية، وتم جمع المادة الفائقة للكشف لاحقا عن طريق ELISA. قبل التحليل، كان يسمح لمجموعة ELISA بالتوازن مع درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة. تم تجهيز جميع المواد الكيميائية، بما في ذلك المعايير المخففة بشكل متسلسل، ومخزن الغسيل، ومحلول الأجسام المضادة الموسوم بالبيوتين، ومحلول الإنزيم المرتبط، وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. لاحقا، أضيفت 100 ميكرولتر من المعايير بتركيزات وعينات مختلفة إلى الآبار المخصصة للصفيحة الدقيقة المطلية مسبقا. تم إغلاق اللوحة وحضانها عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 90 دقيقة. بعد الحضانة، تم التخلص من المحتويات، وغسل الآبار أربع مرات. ثم أضيف 100 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة البيوتينيلية إلى كل بئر، تلاها الحضانة عند 37 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة وخطوة غسيل أخرى. بعد ذلك، تم إدخال 100 ميكرولتر من محلول الإنزيم المرافق العامل، وحضن اللوح على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة، تلاها غسل إضافي. ثم أضيف ركيزة كروموجينية، وتم حضن الصفيحة في الظلام عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. تم إنهاء التفاعل بإضافة 100 ميكرولتر من محلول التوقف، وتم قياس الامتصاص عند 450 نانومتر باستخدام قارئ الميكرولوح. تم بناء منحنى معياري عن طريق مطابقة قيم الكثافة البصرية (OD) للمعايير مع تركيزاتها المقابلة، وتم حساب تركيزات العينات وفقا لذلك.

البقعة الغربية
كانت الأنسجة الزلية تجمد بسرعة وتطحن ميكانيكيا إلى مسحوق ناعم. تم تحلل جزء مقياس من المسحوق في حجم مناسب من محلول RIPA البارد جدا مع إضافة مثبطات للبروتياز والفوسفاتاز (1:100، v/v)، تلاها الحضانة على الجليد لمدة 30 دقيقة. ثم تم طرد المركزي للليزاتات عند 10,000 × جرام لمدة 5 دقائق عند 4 درجات مئوية، وتم جمع المواد الفائقة بعناية. تم قياس تركيزات البروتين باستخدام اختبار BCA، وتم تعديل جميع العينات إلى تركيزات متساوية باستخدام مخزن RIPA. تم فصل البروتينات عبر SDS-PAGE ونقلها إلى أغشية PVDF. تم حجب الأغشية ثم حضنتها بالأجسام المضادة الأولية (تخفيف 1:1000)، تليها الأجسام المضادة الثانوية (تخفيف 1:5000). تم تصور إشارات البروتين باستخدام نظام كشف ECL، وتم قياس شدة النطاق باستخدام برنامج Image Lab (الإصدار 5.2.1). تم تطبيع مستويات التعبير النسبية مقابل β-أكتين.

التحليل الإحصائي
أجريت تحليلات إحصائية باستخدام برنامج SPSS (الإصدار 20.0). تعرض البيانات كمتوسط ± انحراف معياري (SD). للمقارنات بين مجموعات متعددة، استخدم تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) عند تحقيق افتراض تجانس التباين، تلاه اختبار LSD للمقارنات الزوجية بعد الواقع. إذا لم يتم تحقيق التجانس في التباين، كان يتم إجراء تحليل النوفاع المبكر لويلش، يليه اختبار دانيت T3 للمقارنات المتعددة. تم اعتبار قيمة p < 0.05 ذات دلالة إحصائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

المكونات الرئيسية ل TFRD
تم استرجاع المكونات النشطة الحيوية المحتملة لمرض ريزوما دريناريا من قاعدة بيانات TCMSP، مما أسفر عن 71 مرشحا. ثم خضع هؤلاء ال71 مكونا نشطا لعملية فحص تعتمد على التوافر البيولوجي الفموي (OB ≥ 30٪) والشبه الدوائي (DL ≥ 0.18)، مما أدى إلى تحديد 18 مركبا. كشفت المراجعة الإضافية لهذه القائمة أن 10 من هذه المركبات الفعالة كانت فلافونويدات، بما في ذلك: (2R)-5,7-ديهيدروكسي-2-(4-هيدروكسي فينيل) كرومان-4-ون، أوريوسيدين، إريوديكتيول (فلافانون)، ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

التهاب المفاصل الالتهابي هو شكل شائع من التهاب المفاصل الالتهابي. حاليا، يعتمد الإدارة السريرية بشكل رئيسي على الأدوية المضادة للالتهابات غير الستيرويدية (NSAIDs)، والكورتيكوستيرويدات، وعوامل خفض اليورانات42. ومع ذلك، فإن الإعطاء المشترك لهذه الأدوية يسبب مجموعة من الآثار الجانبية للمرضى ويفرض عبئا أيضيا كبيرا على الكبد والكلى. وهذا يضر بشكل خاص للمرضى الذين يعانون من ضعف كبدي أو كلوي مسبق. الفلافونويدات، وهي فئة من المركبات متعددة الفينولا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يذكر المؤلفون أنه لا توجد تضارب مصالح في هذا العمل.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
4٪ بارافورمالديهيدسولاربيولوجياP1110
مخزن تحميل البروتين 5XسولاربيولوجياP1040
الأجسام المضادة AKTتقنية الإشارة الخلوية4691S
محلول مخفف الأجسام المضادةبيوتايم بيوتكنولوجيP0268
قاعدة بيانات الموصلات الحيوية  https://www.bioconductor.org/
الكولشيسينشركة شنغهاي يوانيه المحدودة
قاعدة بيانات GeneCards https://www.genecards.org/
الهيماتوكسيلين والإيوزين (H&) ه) مجموعة التلوينسولاربيولوجياG1120
منصة MetaboAnalyst 6.0 الإلكترونية  https://www.metaboanalyst.ca/
مجموعة ELISA Mouse IL-17Aشركة 4a Biotech Co LtdCME0041
مجموعة ELISA IL-6 من ماوسشركة 4a Biotech Co LtdCME0006
فأرة TNF-&; مجموعة إليساشركة 4a Biotech Co LtdCME0004
NF-& kappa; الجسم المضاد B p65تقنية الإشارة الخلوية8242T
الحليب الجاف خالي الدسمسولاربيولوجياD8340
p38 الأجسام المضادة MAPKأبكلونالA14401
كوكتيل مثبط الفوسفاتازبيوتايم بيوتكنولوجيP1081
الجسم المضاد فوسفو-AKT (Ser473)تقنية الإشارة الخلوية4060S
فوسفو-NF-& كابا؛ الجسم المضاد B p65تقنية الإشارة الخلوية3031S
الجسم المضاد MAPK فوسفو-p38أبكلونالAP0526
فلوريد فينيل ميثيل سلفونيل (PMSF)سولاربيولوجياR0010
غشاء بولي فينيليدين فلوريد (PVDF)ميليبورIPVH00010
PubChem databashttps://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
R software www.r project.org/
مخزن تحليل RIPAسولاربيولوجياR0010
مياه خالية من RNaseأمبيونAM9937
فئران SDمختبر نهر بكين فيتال لتقنية الحيوانات، المحدودة؛
مخزن الرحلان الكهربائي SDS-PAGEسيرفيسبيوG2144
قاعدة بيانات السلاسل النصيةhttps://string-db.org/
مخزن TBST (10X)سولاربيولوجياT1085
TCMSPhttps://old.tcmsp-e.com
مخزن نقل تريس-جلايسينسيرفيسبيوG2017
TFRDشركة بكين تشيهوانغ للأدوية المحدودة.
قاعدة بيانات UniProt  https://www.uniprot.org/
β-الأجسام المضادة للأكتينشركة تشونغشان جينغتشياو للتكنولوجيا الحيويةTA-09

المراجع

  1. Keller, S. F., Mandell, B. F. Management and cure of gouty arthritis. Rheum Dis Clin North Am. 48 (2), 479-492 (2022).
  2. Ma, C., et al. Metabolic reprogramming of macrophages by biomimetic melatonin-loaded liposomes effectively attenuates acute gouty arthritis in a mouse model. Adv Sci (Weinh). , e2410107 (2024).
  3. Li, C., et al. Targeting neutrophil extracellular traps in gouty arthritis: insights into pathogenesis and therapeutic potential. J Inflamm Res. 17, 1735-1763 (2024).
  4. Zhang, Y., Chen, S., Yuan, M., Xu, Y., Xu, H. Gout and diet: a comprehensive review of mechanisms and management. Nutrients. 14 (17), 3525 (2022).
  5. Wang, R., et al. Sulforaphane-driven reprogramming of gut microbiome and metabolome ameliorates the progression of hyperuricemia. J Adv Res. 52, 19-28 (2023).
  6. Zhang, S., et al. Mechanism of reactive oxygen species-guided immune responses in gouty arthritis and potential therapeutic targets. Biomolecules. 14 (8), 978 (2024).
  7. GBD 2021 Gout Collaborators. Global, regional, and national burden of gout, 1990-2020, and projections to 2050: a systematic analysis of the Global Burden of Disease Study 2021. Lancet Rheumatol. 6 (8), e507-e517 (2024).
  8. Towiwat, P., Li, Z. Long-term remission in gout: challenges and future opportunities. Rheumatol Autoimmun. 6, 7-15 (2026).
  9. Chen, S., Li, Z., Deng, X., Gao, L. Advances in understanding the mechanisms of treatment for gouty arthritis: a comprehensive review. Physiol Res. 74 (5), 693-710 (2025).
  10. LaForge, J. M., et al. Non-steroidal anti-inflammatory drugs: clinical implications, renal impairment risks, and AKI. Adv Ther. 40 (5), 2082-2096 (2023).
  11. Klomjit, N., Ungprasert, P. Acute kidney injury associated with non-steroidal anti-inflammatory drugs. Eur J Intern Med. 101, 21-28 (2022).
  12. Anis, T. R., Meher, J. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome (SJS). Clin Pharmacol. 15, 99-105 (2023).
  13. Hasegawa, A., Abe, R. Stevens-Johnson syndrome and toxic epidermal necrolysis: updates in pathophysiology and management. Chin Med J (Engl). 137 (19), 2294-2307 (2024).
  14. Gupta, S. S., Sabharwal, N., Patti, R., Kupfer, Y. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome. Am J Med Sci. 357 (4), 348-351 (2019).
  15. Sun, W., et al. Risk of hepatotoxicity in patients with gout treated with febuxostat or benzbromarone: a propensity score-matched cohort study. Arthritis Care Res (Hoboken). 77 (9), 1149-1156 (2025).
  16. Guo, J. W., et al. Therapeutic potential and pharmacological mechanisms of traditional Chinese medicine in gout treatment. Acta Pharmacol Sin. 46 (5), 1156-1176 (2025).
  17. Jiang, Z., et al. The correlation between traditional Chinese medicine constitution and hyperuricemia and gout: a systematic review and meta-analysis. Evid Based Complement Alternat Med. 2023, 5097490 (2023).
  18. Wang, S., et al. Traditional herbal medicine: therapeutic potential in acute gouty arthritis. J Ethnopharmacol. 330, 118182 (2024).
  19. Wang, Y. B., Jin, C. Z. Roles of traditional Chinese medicine extracts in hyperuricemia and gout treatment: mechanisms and clinical applications. World J Gastroenterol. 30 (47), 5076-5080 (2024).
  20. Jingying, G., et al. A comprehensive review of Drynariae Rhizoma: botany, traditional applications, and active flavonoid components. J Pharm Pharmacol. 77 (10), 1319-1337 (2025).
  21. Chen, G. Y., et al. Prediction of Rhizoma Drynariae targets in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology and experimental verification. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5233462 (2021).
  22. Zhang, Y., et al. Total flavonoids from Rhizoma Drynariae (Gusuibu) for treating osteoporotic fractures: implication in clinical practice. Drug Des Devel Ther. 11, 1881-1890 (2017).
  23. Yu, X. B., et al. Chondroprotective effects of Gubitong Recipe via inhibiting excessive mitophagy of chondrocytes. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 8922021 (2022).
  24. Zhang, F., et al. Total flavonoids of Drynariae Rhizoma improve glucocorticoid-induced osteoporosis of rats: UHPLC-MS-based qualitative analysis, network pharmacology strategy and pharmacodynamic validation. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 920931 (2022).
  25. Liu, F., et al. Mechanism of flavonoids in the treatment of gouty arthritis (review). Mol Med Rep. 30 (2), 132 (2024).
  26. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology analysis and experimental validation to investigate the mechanism of total flavonoids of Rhizoma Drynariae in treating rheumatoid arthritis. Drug Des Devel Ther. 16, 1743-1766 (2022).
  27. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae restore the MMP/TIMP balance in models of osteoarthritis by inhibiting the activation of the NF-λB and PI3K/AKT pathways. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6634837 (2021).
  28. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae treat osteoarthritis by inhibiting arachidonic acid metabolites through AMPK/NFλB pathway. J Inflamm Res. 16, 4123-4140 (2023).
  29. Ru, J., et al. TCMSP: a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines. J Cheminform. 6, 13 (2014).
  30. Chen, G. Y., et al. Mechanisms of total glucosides of paeony in alleviating methotrexate-induced liver injury. Drug Des Devel Ther. 19, 3407-3423 (2025).
  31. Zhang, P., et al. Network pharmacology: towards the artificial intelligence-based precision traditional Chinese medicine. Brief Bioinform. 25 (1), bbad518 (2023).
  32. Luo, W., et al. Integration of molecular docking, molecular dynamics, and network pharmacology to explore the multi-target pharmacology of fenugreek against diabetes. J Cell Mol Med. 27 (14), 1959-1974 (2023).
  33. UniProt Consortium. UniProt: the universal protein knowledgebase in 2023. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D523-D531 (2023).
  34. Stelzer, G., et al. The GeneCards suite: from gene data mining to disease genome sequence analyses. Curr Protoc Bioinformatics. 54, 1.30.1-1.30.33 (2016).
  35. Chen, G. Y., et al. Integrating network pharmacology and experimental validation to explore the key mechanism of Gubitong Recipe in the treatment of osteoarthritis. Comput Math Methods Med. 2022, 7858925 (2022).
  36. Szklarczyk, D., et al. The STRING database in 2023: protein-protein association networks and functional enrichment analyses for any sequenced genome of interest. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D638-D646 (2023).
  37. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1826299 (2022).
  38. Robinson, M. D., McCarthy, D. J., Smyth, G. K. edgeR: a Bioconductor package for differential expression analysis of digital gene expression data. Bioinformatics. 26 (1), 139-140 (2010).
  39. Jin, Q., et al. Network and experimental pharmacology to decode the action of Wendan Decoction against generalized anxiety disorder. Drug Des Devel Ther. 16, 3297-3314 (2022).
  40. Pang, Z., et al. MetaboAnalyst 6.0: towards a unified platform for metabolomics data processing, analysis, and interpretation. Nucleic Acids Res. 52 (W1), W398-W406 (2024).
  41. Kim, S., et al. PubChem in 2021: new data content and improved web interfaces. Nucleic Acids Res. 49 (D1), D1388-D1395 (2021).
  42. Pillinger, M. H., Mandell, B. F. Therapeutic approaches in the treatment of gout. Semin Arthritis Rheum. 50 (3S), S24-S30 (2020).
  43. Yao, T. K., et al. Advances in gouty arthritis management: integration of established therapies, emerging treatments, and lifestyle interventions. Int J Mol Sci. 25 (19), 10853 (2024).
  44. Li, W., et al. Effects of total flavonoids of Rhizoma Drynariae on biochemical indicators of bone metabolism: a systematic review and meta-analysis. Front Pharmacol. 15, 1443235 (2024).
  45. Mohammed, H. S., et al. Investating the involvement of the NLRP3/ASC/caspase-1 and NF-λB/MAPK pathways in the pathogenesis of gouty arthritis: insights from irradiated and non-irradiated Trifolium alexandrium L. extracts and some metabolites. J Ethnopharmacol. 334, 118566 (2024).
  46. Shi, M. F., et al. Study on the effect and mechanism of Zexie Decoction in treating MSU-induced acute gouty arthritis model through PI3K-AKT-mTOR signaling pathway. Int Immunopharmacol. 150, 114214 (2025).
  47. Cui, L., et al. Selenium suppressed the LPS-induced inflammation of bovine endometrial epithelial cells through NF-λB and MAPK pathways under high cortisol background. J Cell Mol Med. 27 (10), 1373-1383 (2023).
  48. Balakin, E., et al. Regulation of stress-induced immunosuppression in the context of neuroendocrine, cytokine, and cellular processes. Biology (Basel). 14 (1), 76 (2025).
  49. Chen, L., et al. AMPK signaling in osteoarthritis: from mechanisms to targeted therapeutics. Front Pharmacol. 16, 1681610 (2025).
  50. FitzGerald, J. D., et al. 2020 American College of Rheumatology guideline for the management of gout. Arthritis Care Res (Hoboken). 72 (6), 744-760 (2020).
  51. Limbachia, V., et al. The effect of different types of oral or intravenous corticosteroids on capillary blood glucose levels in hospitalized inpatients with and without diabetes. Clin Ther. 46 (2), e59-e63 (2024).
  52. Xue, Y., et al. Association of serum glucocorticoids with various blood pressure indices in patients with dysglycemia and hypertension: the Henan Rural Cohort Study. Biomed Environ Sci. 34 (12), 952-962 (2021).
  53. Uson, J., et al. EULAR recommendations for intra-articular therapies. Ann Rheum Dis. 80 (10), 1299-1305 (2021).
  54. Lucenti, L., et al. Do preoperative corticosteroid injections increase the risk of infection after shoulder arthroscopy or shoulder arthroplasty? A systematic review. Healthcare (Basel). 12 (5), 543 (2024).
  55. Feng, W., Cui, D., Yang, T. Interpretation of key points of Chinese guidelines for diagnosis and management of hyperuricemia and gout (2019). J Clin Intern Med. 37 (07), 528-531 (2020).
  56. Lin, Y., et al. Luteolin-4'-O-glucoside and its aglycone, two major flavones of Gnaphalium affine D. Don, resist hyperuricemia and acute gouty arthritis activity in animal models. Phytomedicine. 41, 54-61 (2018).
  57. Wang, Y., et al. A luteolin-loaded electrospun fibrous implantable device for potential therapy of gout attacks. Macromol Biosci. 16 (11), 1598-1609 (2016).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.