تحليل عدوى فيروس الورم الحليمي البشري الذكوري وتصنيفه الجيني في منطقة هيوان

ملخص

حللت هذه الدراسة المرضى الذكور الذين زاروا قسم العيادات الخارجية في مستشفى هيوان الشعبي وخضعوا لاختبار حمض الحمض النووي لفيروس الورم الحليمي البشري (HPV)، مما قدم رؤى أولية حول الخصائص الوبائية وتوزيع النمط الجيني لعدوى فيروس الورم الحليمي الحليمي في المنطقة. توفر هذه النتائج دعما للوقاية والسيطرة على الأمراض المرتبطة بفيروس الورم الحليمي البشري.

الملخص

هدفت هذه الدراسة إلى دراسة انتشار وتوزيع النمط الجيني لفيروس الورم الحليمي البشري (HPV) بين الذكور في المرضى الخارجيين في هيوان ومقارنة معدلات العدوى عبر الفئات العمرية، لتوجيه استراتيجيات الوقاية والعلاج المحلية. تم تسجيل ما مجموعه 1,559 رجلا خضعوا لاختبار فيروس الورم الحليمي البشري في مستشفى شعب هيوان بين عامي 2021 و2024، ولم تدرج سوى نتائج الزيارات الأولية. تم تحديد ثلاثة وعشرين نمطا جينيا لفيروس الورم الحليمي البشري من خلال تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) - التهجين العكسي بالبقعة النقطية. تم إجراء تحليل مقطعي بأثر رجعي لتقييم الانتشار العام لفيروس الورم الحليمي البشري، ومعدلات العدوى حسب العمر، وأنماط الإصابة، وتوزيع الأنواع الفرعية، وتغطية النمط الجيني المرتبط باللقاح. تم إجراء تحليلات إحصائية باستخدام الإصدار 23.0 من SPSS. تم تلخيص بيانات العد كأرقام ونسب مئوية، وتم تقييم الفروق الجماعية باستخدام اختبار كاي-تربيع، مع تعريف الدلالة الإحصائية ك p < 0.05. بلغ معدل الإصابة الإجمالي بفيروس الورم الحليمي 45.3٪ (707 من 1,559). بلغت معدلات الإصابة عبر الفئات العمرية (≤24، 25–34، 35–44، 45–54، 55–64، و≥65 سنة) 42.8٪، 43.1٪، 45.8٪، 48.2٪، 68.3٪، و46.4٪ على التوالي. كانت العدوى من النوع الواحد هي النمط الأكثر شيوعا، حيث شكلت 57.0٪ من الحالات الإيجابية. كانت الأنماط الجينية الخمسة الأكثر شيوعا عالية الخطورة هي HPV52 (9.05٪)، 16 (5.90٪)، 53 (5.09٪)، 51 (5.01٪)، و59 (4.93٪)، بينما كانت الأنماط الجينية منخفضة الخطورة السائدة HPV6 (21.24٪)، 11 (9.85٪)، و43 (5.17٪). بلغت معدلات التغطية النظرية للقاحات ثنائية التكافؤ ورباعية التكافؤ وتسعة تكافؤ 8.65٪، 39.74٪، و55.41٪ على التوالي. كان انتشار عدوى فيروس الورم الحليمي البشري بين المرضى الخارجيين الذكور في هيوان مرتفعا نسبيا، مع وجود النمط السائد من عدوى النوع الواحد. كانت الأنماط الجينية عالية الخطورة الأكثر شيوعا هي HPV52، 16، 53، 51، و59، وكانت الأنماط الجينية منخفضة الخطورة الرائدة هي HPV6، 11، و43. لوحظ أعلى معدل إصابة في الفئة العمرية من 55 إلى 64 عاما. توفر هذه النتائج بيانات خاصة بالمنطقة قد تدعم تطوير استراتيجيات مخصصة للوقاية والتطعيم للذكور في هذه الفئة.

المقدمة

فيروس الورم الحليمي البشري (HPV) هو فيروس DNA ينتقل بشكل أساسي عن طريق الاتصال الجنسي، مع وجود البشر كمضيف وحيد. انتشار فيروس الورم الحليمي البشري مشابه بين الذكور والإناث حول العالم، حيث يتراوح بين 3.5٪ إلى 45٪ بين الذكور و2٪ إلى 44٪ بين الإناث^. ما يقرب من 80٪ من الرجال والنساء النشطين جنسيا يصابون بالفيروس مرة واحدة على الأقل خلال حياتهم، حيث تشمل طرق الانتقال ليس فقط الاتصال الجنسي بل أيضا الاحتكاك أو الاتصال بأسطح الجلد والأغشية المخاطية، والانتقال العمودي من الأم إلى الرضيع، وما إلى^ذلك. حتى الآن، تم وصف أكثر من 200 نمط جيني مختلف لفيروس الورم الحليمي البشري، مصنفة على أنها عالية الخطورة بناء على ارتباطها بظهور سرطانات عنق الرحم والمهبل والفرج والشرج والرأس والرقبة والقضيب، ومنخفضة الخطورة المرتبطة بالثآليل التناسلية أو الورم الكونديلي^{الأكبر 3}. في معظم الحالات، يمكن للجهاز المناعي التخلص تماما من العدوى خلال 12 إلى 24 شهرا دون مضاعفات سريرية. ومع ذلك، إذا فشل الجهاز المناعي في التخلص من الفيروس، يتطور عدوى مستمرة، مما يمهد الأساس لظهور آفات فرط التلونة^{الناتجة عن} الأورام 4. على وجه التحديد، يرتبط فيروس الورم الحليمي البشري عالي الخطورة المستمر (HR-HPV) بتطور آفات داخل الظهارة الحرشفية (SILs) بالإضافة إلى أورام الظهارة القضيبية (PeiN); هاتان الآفتان هما حالات ما قبل السرطانية لسرطان عنق الرحم لدى النساء وسرطان القضيب لدى الرجال^5،6. بالإضافة إلى ذلك، قد تؤدي عوامل نمط الحياة مثل الاستخدام طويل الأمد لمنع الحمل الفموي، التدخين، نقص المناعة، أو العدوى المنقولة جنسيا المتزامنة إلى تكاثر الأورام⁷.

حاليا، هناك العديد من الدراسات حول انتشار وعوامل الخطر واستراتيجيات الوقاية من العدوى لدى النساء في الصين، كما أن معدل الوعي ومعدل التطعيم باللقاح لدى المجموعات النسائية قد ارتفع بشكل ملحوظ. ينتشر فيروس الورم الحليمي البشري بسهولة بين الشركاء الجنسيين، وفي كثير من الحالات قد تحدث أحداث انتقال متعددة غير مكتشفة بين الزوجين⁸. تعطي أحدث الإرشادات السريرية في الصين الأولوية لتطعيم فيروس الورم الحليمي البشري للإناث من عمر 9 إلى 26 سنة، مع تركيز خاص على الفتيات اللواتي تتراوح أعمارهن بين 9 و14 سنة. بالإضافة إلى ذلك، يوصى بالتطعيم للإناث من عمر 27 إلى 45 سنة والذكور الذين تتراوح أعمارهم بين 9 و26 عاما للدفاع عن جهود الوقاية المشتركة بين الجنسين⁹.

قد تكون عدوى فيروس الورم الحليمي البشري لدى الذكور سبب العدوى وتكرار العدوى لدى الشريكات الجنسيات^{الإناث 10}. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن تسبب عدوى فيروس الورم الحليمي البشري أمراضا مثل الثآليل الشائعة لدى الذكور، وثآليل الأعضاء التناسلية، وسرطانات الأعضاء التناسلية، وسرطانات الفم والبلعوم والشرج¹¹، وقد ترتبط أيضا بالعقم عند الذكور¹². ومع ذلك، هناك عدد قليل نسبيا من الدراسات حول عدوى فيروس الورم الحليمي البشري لدى الرجال في الصين. علاوة على ذلك، تمتلك الصين أراضي واسعة وعدد كبير من المجموعات العرقية. تختلف مفاهيم الزواج وعادات الحياة بين المناطق. عدوى فيروس الورم الحليمي البشري لها أيضا تنوع إقليمي وعرقي^{ومتنوع 13}. أظهرت دراسات أخرى أن لقاح فيروس الورم الحليمي البشري لدى الرجال يظهر إمكانات وقائية كبيرة ضد آفات عنق الرحم بين الشركاء^{الجنسيين 14}. يمكن أن يعزز الفهم الشامل لأنماط العدوى الذكورية وملفات التصنيف الجيني أنظمة الصحة العامة ويقلل التكاليف المرتبطة بإدارة وعلاج المرضى من الذكور والإناث. تشير التقارير إلى أن الأمراض المرتبطة بفيروس الورم الحليمي البشري لدى الذكور تفرض عبئا اقتصاديا أكبر على الإنفاق العام للرعاية الصحية^{في إيطاليا}.

لذلك، تهدف هذه الدراسة إلى فهم انتشار ومعدل الإيجابية حسب العمر وتكرار النمط الجيني، وتوزيع أنماط العدوى، وتغطية نوع اللقاحات للمرضى الذكور الخارجيين الذين خضعوا للاختبارات في منطقة هيوان من 2021 إلى 2024، مما يوفر أساسا مهما للفحص المبكر والتشخيص والوقاية والعلاج للعدوى الذكورية بفيروس الورم الحليمي البشري في المنطقة.

البروتوكول

تمت مراجعة هذه الدراسة والموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات البحث الطبي في مستشفى شعب هيوان (رقم الموافقة: YXYJLL-SFKJ202461؛ تاريخ الموافقة: 15 مايو 2024). تم رفع شهادة الأخلاق كملف إضافي. وقع المريض أو الوالد أو ولي أمر القاصر على بيان أثناء التسجيل ينص على "أوافق على أن عيناتي البيولوجية السريرية وبياناتي ستستخدم في البحث العلمي، والابتكار التكنولوجي، والأبحاث السريرية المعتمدة من لجنة أخلاقيات البحث الطبي بعد إزالة المعلومات الشخصية القابلة للتعريف"، ولن يشكل هذا التحليل أي مخاطر إضافية على المريض ويتوافق مع اللوائح ذات الصلة. جميع المواد المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

المواد

تم تضمين ما مجموعه 1,559 مريضا ذكورا زاروا قسم العيادات الخارجية في مستشفى شعب هيوان وخضعوا لاختبار فيروس الورم الحليمي البشري بين يناير 2021 وديسمبر 2024 في الدراسة. كان عمر المشاركين من سنتين إلى 80 عاما (تتكون مجموعة الدراسة من جميع المرضى الذكور الذين حصلوا على نتائج اختبار حمض الورم الحليمي البشري النووي السارية من زيارات خارجية في هذه المؤسسة الطبية بين عامي 2021 و2024؛ الهدف الأساسي هو تقديم نظرة شاملة على اختبارات فيروس الورم الحليمي البشري وأنماط العدوى بين المرضى الذكور في المنطقة؛ علاوة على ذلك، لا تشمل طرق الإصابة بفيروس الورم الحليمي البشري النشاط الجنسي فقط، بل تشمل أيضا الاحتكاك أو الاتصال بسطح الجلد والأغشية المخاطية، بالإضافة إلى الانتقال العمودي من الأم إلى الطفل. لذلك، لم تفرض قيود عمرية، حيث كان متوسط العمر (34.2 ± 10.7) سنة.

الطرق

استخدمت هذه الدراسة تصميما عرضيا استعاديا لتحليل جميع المرضى الذكور الذين زاروا قسم العيادات الخارجية في مستشفانا وخضعوا لاختبار فيروس الورم الحليمي البشري؛ تم تضمين نتائج العينة الأولية فقط لأولئك الذين خضعوا لاختبارات متكررة.

مجموعة العينات

تم الحصول على عينات الخلايا المقشرة بواسطة أطباء مدربين باستخدام فرش عينات معقمة ومتخصصة. شملت مواقع الجمع الأسطح الظهرية والبطنية للقضيب، والتلصات الإكليلية الداخلية والخارجية، ورأس القضيب، والإحليل البعيد، وأي آفات سحرية ظاهرة، مع تحديد الموقع بناء على نتائج المرضى الفردية؛ بعد الجمع، تم كسر رؤوس الفرشاة في محلول مخصص لحفظ العينات. ظروف حفظ العينة: بعد أخذ العينات، يتم تخزين العينات فورا في ثلاجة عند درجة حرارة تتراوح بين 2–8 درجات مئوية، ويتم الانتهاء من الاختبار خلال 3 أيام.

استخراج الحمض النووي

بعد تذبذب وخلط كل عينة، تمت إضافة 200 ميكرولتر بشكل متسلسل إلى مادة استخراج أو تنقية حمض النووي. تم استخراج الحمض النووي باستخدام تقنية الخرزات المغناطيسية باستخدام مادة الاستخراج في جهاز استخراج الأحماض النووية الآلي بالكامل SP96.

كشف فيروس الورم الحليمي البشري

تم إجراء اختبار فيروس الورم الحليمي البشري للحمض النووي باستخدام مجموعة الكشف عن النمط الجيني لفيروس الورم الحليمي البشري (النوع 23)، والتي تستخدم مزيجا من التضخيم الصناعي المعتمد على PCR وتهجين الحمض النووي العكسي بنقطة النقطة لتحديد النمط الجيني للفيروس البشري. تم تصميم بادئات محددة بناء على الخصائص الوراثية للفيروس الورم الحليمي البشري، وتم تضخيم شظايا الأهداف من 23 نموذجا جينيا للفيروس الحليمي الحليمي البشري. تم تهجين المنتجات المضخمة مع مجسات الطباعة المثبتة على الغشاء، بما في ذلك 17 HR-HPV (HPV16,51,52,53,18,58,59,31,33,45,56,66,35,39,68,73,82) و6 LR-HPV (HPV6,11,42,43,81,83). استنادا إلى وجود أو غياب إشارات التهجين، تم تحديد حالة العدوى لهذه الأنماط الجينية لفيروس الورم الحليمي البشري. تضمنت العملية المخبرية المحددة استخدام طرف ماصة مصفى لإضافة 5 ميكرولتر من الحمض النووي المستخرج إلى خليط تفاعل PCR، مما رفع الحجم الكلي إلى 25 ميكرولتر. لاحقا، تم إجراء تضخيم PCR. بعد التضخيم، أضيفت جميع المنتجات المضخمة إلى الهجين المتساوي الحراري الذي يحتوي على شرائط غشاء لإجراء التهجين اللوني. عند اكتمال تطوير اللون، يمكن تفسير النتائج.

التحليل الإحصائي

تم استخدام برنامج SPSS 23.0 للتحليل الإحصائي. تم التعبير عن بيانات العد كعدد الحالات (n) والنسبة المئوية (٪). تم إجراء المقارنة بين المجموعات بواسطة اختبار χ² . تم اعتبار P < 0.05 ذات دلالة إحصائية. من بين 23 نموذجا جينيا للفيروس البشري الحليمي البشري، تشير الإيجابية لأي نمط جيني واحد إلى إصابة بفيروس الورم الحليمي البشري؛ تشير الإيجابية لنمط جيني واحد فقط إلى وجود عدوى واحدة؛ والإيجابية لنوعين جينيين أو أكثر تشير إلى وجود عدوى متعددة. يتم تصنيف الإصابات المتعددة بناء على عدد الأنماط الجينية المتزامنة إلى عدوى مزدوجة، عدوى ثلاثية، عدوى رباعية، عدوى خماسية، عدوى سداسية، وأعلى." تم حساب النسبة إلى تكرار الاكتشاف الكلي باستخدام إجمالي عدد اكتشافات النمط الجيني (1,238) كمقام، حيث ساهم المرضى الذين لديهم عدة عدوى بعدة أنماط جينية.

النتائج

الانتشار العام للإيجابية بفيروس الورم الحليمي البشري في مجموعة الدراسة

من بين 1559 مريضا خارجيا ذكرا، كانت 707 حالات إيجابية للحمض النووي فيروس الورم الحليمي البشري، بمعدل إيجابي بلغ 45.3٪. كانت معدلات الإصابة السنوية بفيروس الورم الحليمي البشري في 2021 (44.8٪، 100/223)، 2022 (45.5٪، 231/508)، 2023 (45.3٪، 182/402)، و2024 (45.5٪، 194/426). لم يكن هناك فرق معنوي في معدل الإصابة بفيروس الورم الحليمي الحليمي بين السنوات المختلفة (χ²

المناقشة

فيروس الورم الحليمي البشري هو الفيروس الأكثر شيوعا المنقولة جنسيا بين الرجال والنساء. العدوى عالية الخطورة مرتبطة ارتباطا وثيقا بسرطان عنق الرحم والفرج والمهبل لدى النساء، وسرطان القضيب والشرج والبلعوم الفمي لدى الرجال. يمكن أن تؤدي الأنواع المستمرة منخفضة الخطورة إلى معظم الثآليل التناسلية الشرجية والورم الحليمي التنفسي¹⁶. أظهر تحليل الأمراض المرتبطة بعدوى فيروس الورم الحليمي البشري لدى الرجال انتشار عال في القضيب الذكري، رأس القضيب / الثلب التاجي، السائل المنوي ...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
Detection of Mycoplasma pneumoniae nucleic acid and drug resistance gene	Guangzhou Da 'an Gene Co., Ltd.	Stream SP96
Filter Tips	Coring Life Science Co., Ltd.	29822001	0–10 µL
Filter Tips	Coring Life Science Co., Ltd.	05623001	5–300 µL
Human papillomavirus genotyping ( type 23 ) detection kit	Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd.	20193401918
Nuclear acids extracting reagent(magnetic beads method)	Guangzhou Da'an Gene Co., Ltd.	20170583
PCR amplification instrument	Thermo Fisher Scientific	ABI Veriti DX 96
PCR Hybridizer	Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd.	YN-H16
Sampling brush	Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd.
Sample preservation solution	Shenzhen Ya Neng Biotechnology Co., Ltd.