يوصف نموذج جرح جلد الجرذ الذي يتيح تقييم عوامل علاجية مختلفة تحت ظروف فسيولوجية أو مرضية عبر مراحل مختلفة من عملية الشفاء. علاوة على ذلك، تم تفصيل بروتوكول لإجراء التخطيطات اليدوية لمراقبة معدل انقباض الجرح طوال فترة إصلاح الأنسجة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج جراحي لجروح جلدية للفئران: نهج لدراسات شفاء الجروح وتقييم المواد الحيوية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
شفاء جروح الجلد هو عملية بيولوجية معقدة تشمل مراحل منسقة من الالتهاب، والتكاثر، وإعادة التشكيل. نظرا للحاجة إلى فهم أفضل للآليات الأساسية لشفاء الجروح، تستخدم نماذج جروح الحيوانات الاستئصالية على نطاق واسع لتعميق المعرفة بهذه العملية وتسهيل تطوير أساليب علاجية جديدة. في مثل هذه النماذج، يستخدم استحث جروح الجلد باستخدام خزعات اللكمة بشكل متكرر لأنه ينتج آفات موحدة. ومع ذلك، فإن هذه التقنية تقيد الآفة إلى شكل دائري، وقد لا يكون ذلك مناسبا لبعض الأهداف التجريبية. في هذا السياق، يعرض بروتوكول جراحي بسيط وقابل للتكرار لتحفيز جروح استئصالية كاملة السماكة في الفئران، باستخدام نموذج مربع موحد على الجانب. تسمح هذه المنهجية بإنشاء آفات بأحجام وهندسات مختلفة، مما يوفر مرونة تجريبية أكبر مصممة لأهداف كل دراسة وتمكين مراقبة عملية الشفاء في ظل ظروف فسيولوجية أو مرضية. بالإضافة إلى ذلك، تم وصف طريقة لمراقبة معدل انقباض الجرح من خلال التخطيطات اليدوية. على الرغم من أن تنفيذ هذا البروتوكول يتطلب اهتماما بالتفاصيل والكفاءة التقنية، إلا أن المهارات الجراحية المتقدمة ليست مطلوبة.
المقدمة
شفاء الجروح الجلدية هو عملية بيولوجية معقدة ومنسقة تتكون من عدة أحداث منسقة تهدف إلى استعادة سلامة الأنسجة. تتطور هذه الظاهرة عبر مراحل مميزة لكنها متداخلة، تشمل النزيف الدموي والالتهاب، التكاثر، وإعادة التشكيل1. تبدأ المرحلة الالتهابية بعد دقائق من تكون الجرح، وتبلغ ذروتها بين 24 و48 ساعة بعد الإصابة، وتشمل تجنيد الخلايا المناعية وإطلاق وسطاء التهابيين. تتميز مرحلة التكاثر بإعادة الظهارة وتكوين نسيج الحبيبات، وتبدأ من 4 إلى 5 أيام بعد الإصابة وقد تستمر لأسابيع. أخيرا، يدخل الجرح مرحلة إعادة التشكيل، التي تبدأ في الأسبوع الثالث بعد الإصابة ويمكن أن تمتد لأشهر أو سنوات، وتتميز بإعادة تنظيم الأنسجة2. عندما لا يتقدم الشفاء بشكل طبيعي، قد يؤدي ذلك إلى إصابة إصابة مزمنة، مما يشكل عبئا كبيرا على كل من المريضونظام الرعاية الصحية، مما يبرز الحاجة إلى تطوير أساليب علاجية جديدة.
يسمح إنشاء جرح استئصالي من خلال إزالة جراحية لجميع طبقات الجلد (البشرة، الأدمة، والأنسجة تحت الجلدية) من الحيوان بفحص الالتهابات، وتكوين الأنسجة الحبيبية، وإعادة الظهارة، وتكوين الأوعية، وعملية إعادة التشكيل4. على مدى العقود الأخيرة، أتاح اعتماد نماذج شفاء الجروح العديد من الاكتشافات، مما وسع المعرفة والفهم للأحداث الجزيئية والخلوية التي تسهل هذه العملية5. تظل نماذج الداخل هي الأدوات التنبؤية الأكثر لدراسة إصلاح الجروح البشرية، حيث تمثل البيئة الدقيقة الكاملة للشفاء بدقة أكبر بسبب وجود أنواع خلايا متعددة، وإشارات بيئية، وتفاعلات باراكرين6. في هذا السياق، تستخدم الفئران والجرذان على نطاق واسع بسبب سهولة التعامل والصيانة التي تتعامل معها4.
في هذه النماذج، تستخدم الخزعات بالثقب بشكل متكرر لتحفيز الجروح الجراحية لأنها توفر استئصالات موحدة. وبالتالي، تعتمد معظم النماذج التجريبية الموصوفة في الأدبيات على تأسيس آفات دائرية7-12. على الرغم من أن هذا النهج مقبول على نطاق واسع، إلا أن استخدام الهندسات البديلة يمكن أن يتنوع الأساليب المنهجية المتاحة لدراسات شفاء الجروح. في هذا الصدد، فإن إنشاء الجروح بالمشرط يتيح تكوين آفات بأحجام مختلفة وبأشكال محددة خارج النمط الدائري القياسي المستخدم في خزعات الpunch 13,14,15,16,17,18. علاوة على ذلك، أظهرت الدراسات المقارنة في نماذج الحيوانات أن شقوق المشرط تسبب ضررا أقل للأنسجة الأوليةمقارنة بالتقنيات الأخرى.
يصف هذا البروتوكول منهجية جراحية بديلة لتحفيز جروح الجلد الاستئصالية كاملة السماكة في الفئران، باستخدام نموذج آفة مربعة على الجانب. يسهل النهج المعروض توحيد منطقة الآفة ومراقبة عملية إصلاح الأنسجة. علاوة على ذلك، ينطبق على الدراسات التي تهدف إلى تقييم تأثيرات الاستراتيجيات العلاجية المختلفة والمواد الحيوية عبر مراحل الشفاء الجلدي المميزة في ظروف فسيولوجية أو مرضية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية من قبل لجنة الأخلاقيات لاستخدام الحيوانات (CEUA) التابعة لجامعة سانتا كروز (UESC). تم الحصول على فئران ويستار (Rattus norvegicus) من مختبر تربية الحيوانات وصيانتها والتجارب (LaBIO)/منشأة الحيوانات في UESC، بموجب بروتوكول CEUA/UESC رقم 010/25. تم إجراء جميع إجراءات الحيوانات وفقا لدليل NIH لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية، ومتوافقة مع الإرشادات المؤسسية لرفاهية الحيوانات والاستخدام الأخلاقي. التصميم العام للبروتوكول التجريبي موضح في الشكل 1، والمواد والمعدات المستخدمة في هذا البروتوكول مفصلة في جدول المواد المتاحة كمواد تكميلية.
الشكل 1: التصميم التجريبي لبروتوكول تحفيز الجرح الجلدي في نماذج الفئران. (أ) بعد تخدير الحيوانات، احلق المنطقة التجريبية؛ (ب) تحفيز التخدير في غرفة تحتوي على إيزوفلوران، وعند فقدان ردود الفعل، الحفاظ على مستوى تخدير كاف عبر قناع وجهي؛ (ج) إجراء تعقيم المنطقة المحلوقة، وتحديد أبعاد الآفة باستخدام مقبض معقم، وإنشاء الجرح الجراحي باستخدام مشرط معقم؛ (د) حماية الآفة بطبقة شفافة من الطبقة وإجراء تخطيط يدوي باستخدام ورق الخلفية اللاصق؛ (ه) إعطاء مسكنات بعد العملية باستخدام ترامادول هيدروكلوريد كل 12 ساعة لمدة 3 أيام؛ (و) تطبيق العلاج التجريبي بعد 24 ساعة من تحفيز الجرح؛ (ز) إجراء القتل الرحيم في النقطة الزمنية التجريبية المحددة مسبقا والمضي قدما في جمع العينات وتتبع التخطيطات للتحليلات اللاحقة. تم إنشاء هذا الشكل بواسطة المؤلفين باستخدام BioRender. جالفاو، م. (2026) https://BioRender.com/jsiygmf. مرفق رخصة النشر. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
1. الحيوانات والتعامل مع الناس
- استخدم ذكر جرذان ويستر البالغة التي تتراوح أعمارها بين 2 إلى 3 أشهر.
- في اليوم السابق للجراحة، تأكد من أن أقفاص الحيوانات نظيفة ومعقمة، وقم بوضع علامات عليها وفقا للمجموعات التجريبية.
- في يوم العملية، قم بوزن كل حيوان باستخدام ميزان رقمي وسجل القيم.
- توزيع الحيوانات عشوائيا في أقفاص معقمة ومسمنة سابقا، مع احترام القدرة السكنية لضمان ظروف رفاهية الحيوان.
- باستخدام علامة دائمة ذات طرف دقيق، يمكنك تحديد كل حيوان على الذيل حسب مجموعته التجريبية وعدده، مما يضمن قابلية التتبع طوال التجربة.
ملاحظة: قد تستخدم الحيوانات الإناث أيضا في هذا البروتوكول، اعتمادا على توفر الحيوانات في المنشأة الحيوانية المؤسسية والأهداف المحددة للدراسة. يوصى بالتعرف الأبجدي الرقمي على الحيوانات، حيث يشير الحرف إلى المجموعة التجريبية والرقم إلى الحيوان. على سبيل المثال، تشير A1 إلى المجموعة A، الحيوان 1.
2. الإجراءات قبل الجراحة
- التخدير
- حضر مسبقا: قطن، 70٪ إيثانول، حقنة تحت الجلد بسعة 1 مل مع إبرة لكل حيوان، مورفين كبريتات (10 ملغ/مل)، وتحضير غرفة ثاني أكسيد الكربون.
- قم بإجراء تعقيم على منطقة بطن الحيوان باستخدام 70٪ إيثانول وقطن. كدواء ما قبل التخدير، أعطى كبريتات المورفين بجرعة 5 ملغ/كجم (10 ملغ/مل) داخل الصفاق في الربع السفلي الأيمن من البطن.
- بعد عشر دقائق من إعطاء دواء ما قبل التخدير، ضع الحيوان في غرفة ثاني أكسيد الكربون.
تحذير: يجب التعامل حصريا مع كبريتات المورفين، والإبر، وأنظمة التعرض لثاني أكسيد الكربون، و70٪ من الإيثانول بواسطة أفراد مدربين باستخدام معدات الحماية الشخصية المناسبة، بما في ذلك القفازات، ومعطف المختبر، والنظارات الواقية. يجب التخلص من الإبر والحقن في حاويات حادة معتمدة، بينما يجب التخلص من النفايات الكيميائية والبيولوجية وفقا للوائح السلامة البيولوجية والنفايات الخطرة المؤسسية.
ملاحظة: خلال فترة الانتظار البالغة 10 دقائق، قم بإجراء عملية التخدير في غرفة ثاني أكسيد الكربون وتحضير منطقة الجرح.
- إجراء التخدير
- جهز مسبقا: تخدير استنشاق الإيزوفلوران بنسبة 4 فولت (نسبة الحجم)، غرفة ثاني أكسيد الكربون، وبطانية حرارية واحدة.
- تحفز التخدير باستخدام الإيزوفلوران بتركيز 4 V٪ في غرفة CO₂.
- بعد فقدان الحيوان لردود الفعل، انقل الحيوان من غرفة CO₂ إلى قناع الوجه.
- حافظ على تخدير الحيوانات باستخدام الإيزوفلوران عند 2 فولت أو التركيز المطلوب للحفاظ عليه في مستوى تخدير جراحي مناسب، مع تدفق غاز طازج 50 مل/دقيقة.
- خلال العملية، حافظ على درجة حرارة جسم الحيوان باستخدام بطانية حرارية.
ملاحظة: يعتبر مستوى تخدير جراحي كاف عندما يظهر الحيوان غياب استجابات انعكاسية، بما في ذلك عدم وجود رد فعل انسحابي للتحفيز الميكانيكي بين الأرجيان، إلى جانب الحركات التنفسية المنتظمة وغياب الحركات الإرادية للجسم طوال الإجراء.
تحذير: الإيزوفلوران هو مخدر متطاير يشكل خطرا للتعرض للاستنشاق. لذلك، يوصى بشدة بإعطائه باستخدام نظام تخدير مع تهوية عادم مناسبة. بالإضافة إلى ذلك، يجب على المشغلين ارتداء معدات الحماية الشخصية، بما في ذلك الأرداء، القفازات، الكمامات، والقبعات. المراقبة المستمرة لمستوى التخدير ودرجة حرارة الجسم طوال فترة العملية ضرورية. يجب التخلص من المواد المخدرة المتبقية والمواد القابلة للتخلص من مرة واحدة ملوثة وفقا للوائح النفايات الكيميائية والبيولوجية المؤسسية.
- تحضير موقع الجرح
- جهز مسبقا: إسفنجات شاش، شفرة من الفولاذ المقاوم للصدأ، 70٪ إيثانول، و10٪ بوفيدون-يود أو 0.2٪ كلورهيكسيدين مائي.
- ضع إسفنجة شاش وصابون على منطقة الجانب الأيسر من الحيوان.
- على طاولة الجراحة، ضع الحيوان في الجانب الأيمن من العضلة الديكوبيتوس.
- احلق الجانب الأيسر باستخدام شفرة من الفولاذ المقاوم للصدأ أو ماكينة حلاقة كهربائية.
- قم بإجراء تعقيم قبل الجراحة للمنطقة المحلوقة باستخدام إسفنجة شاش و70٪ إيثانول (ثلاث مرات)، تليها إسفنجة شاش و10٪ بوفيدون-يودين أو 0.2٪ كلورهكسيدين مائي (ثلاث مرات).
تحذير: يجب التعامل مع القطع الحادة بحذر والتخلص منها في حاويات صلبة مناسبة بعد الاستخدام. علاوة على ذلك، يجب التعامل مع المواد الكيميائية الموصوفة باستخدام معدات الحماية الشخصية الموصى بها وتجنب ملامسة العينين والأغشية المخاطية. يجب التخلص من الشفرات المستخدمة في حاويات حادة معتمدة، بينما يجب التخلص من الشاش الملوث، وبقايا المطهر، والمواد البيولوجية وفقا للوائح السلامة البيولوجية والنفايات الخطرة المؤسسية.
3. تحفيز الجرح الجلدي
- جهز مسبقا: كالبر واحد، قلم تحديد دائم ذو طرف دقيق، شاش، وأدوات جراحية معقمة (شفرة المشرط رقم 23، مقص مايو، وملقط تشريحي)
- باستخدام الكاليبر والقلم الدائم، حدد أربع نقاط متساوية المسافة على الجلد، مع تحديد مربع بحجم 1 × 1 سم.
- قم بإنشاء الجرح الجراحي عن طريق إزالة الجلد بالكامل داخل المنطقة المحددة باستخدام شفرة مشرط رقم 23 المعقمة، ومقص مايو، وملقط تشريحي معقم، مما يكشف الأنسجة تحت الجلد والعضلات الأساسية.
- احقق النزيف في الموقع باستخدام شاش معقم، مع الضغط اللطيف مباشرة على الجرح حتى يتوقف النزيف.
تحذير: يجب اعتبار الدم والأنسجة نفايات بيولوجية محتملة العدوى. بعد الإجراءات، تأكد من التخلص السليم وفقا لمعايير السلامة البيولوجية المؤسسية.
ملاحظة: تأكد من تطبيق تقنيات المعقمة المناسبة طوال عملية تحفيز الجرح. المعدات الواقية الشخصية (PPE) الإلزامية للموظفين، بما في ذلك شبكة شعر، وقفازات، قناع، ومعطف مختبر، بالإضافة إلى استخدام أدوات جراحية معقمة.
4. التخطيطات اليدوية لمنطقة الجرح
- جهز مسبقا: طبقة شفافة من الأغلى، ورقة بيضاء (8.5 × 11 بوصة)، قلم تحديد دائم بطرف دقيق، وشريط لاصق شفاف.
- اقطع مستطيلات من ضمادة الفيلم الشفاف بأبعاد 5 × 3.5 سم وتغطي الجرح بالكامل.
- على ورقة بيضاء، حدد المجموعة (مثل المجموعة أ)، والحيوان (مثل A1، A2، A3، A4)، ويوم جمع مخطط الجرح. تعيين D0 للتخطيط المخطي الذي تم الحصول عليه في يوم تحفيز الجرح وDX للبلانيميترات التي جمعت في يوم القتل الرحيم المقابل (مثل D3، D7، D14، D21).
- استخدم ضمادة الفيلم الشفافة لتسجيل منطقة الجرح ونقلها إلى ورق الحروف. للقيام بذلك، ضع الفيلم فوق الجرح، وباستخدام قلم تحديد دائم ذو طرف دقيق، قم بتنفيذ تخطيط يدوي عن طريق تتبع كامل محيط الجرح.
- باستخدام شريط لاصق شفاف، تثبت المخطط المحصل على ورقة الرسائل حسب التعريف الخاص بها (مجموعة/حيوان/يوم). ستستخدم اللوحات لمراقبة منطقة الجرح وتحديد معدل الانقباضات طوال التجربة.
ملاحظة: ينصح باستخدام الضمادات لمنع القتال بين الحيوانات، واللعق المفرط للمنطقة المصابة، وأكل لحوم البشر، الذي قد يزيد من تفاقم الجروح أو يعيق الشفاء. D0 يتوافق مع يوم تحفيز الجرح (خط الأساس). تشير النقاط الزمنية D3، D7، D14، وD21 إلى أيام ما بعد التحفيز (3، 7، 14، و21) التي تجرى فيها عمليات القتل الرحيم وجمع الحيوانات، مما يسمح بمراقبة مراحل الشفاء خلال فترات الالتهاب، والتكاثر، وإعادة التشكيل.
5. الرعاية الفورية بعد العملية
- حضر هيدروكلوريد ترامادول مسبقا وخصص حقنة معقمة واحدة بسعة 1 مل تحت الجلد مع إبرة لكل حيوان، لضمان ظروف معقمة صارمة. أيضا، حضر ضمادات كريب وشريط طبي لحماية الجرح.
- ابدأ المسكنات بجرعة 5 ملغ/كغ من هيدروكلوريد ترامادول (50 ملغ/مل) تحت الجلد كل 12 ساعة وحافظ عليه لمدة 3 أيام.
- لف منطقة الجرح الجراحي بضمادة كريب وتثبيتها بشريط طبي لحماية موقع الجرح.
- ضع الفأر في قفص فردي وراقبه لضمان التعافي من التخدير والجراحة.
- بعد التعافي، أعد الحيوان إلى قفصه المعني.
6. العلاج
- بعد 24 ساعة من تحفيز الجرح، ابدأ العلاجات التجريبية المطلوبة، مع تغيير الضمادات يوميا.
ملاحظة: مدة العلاج تعتمد على كل بروتوكول تجريبي محدد.
7. القتل الرحيم
- إجراء القتل الرحيم على العينة المعينة من كل مجموعة وفقا للبروتوكول المعتمد من لجنة أخلاقيات الحيوان.
- بعد تأكيد الوفاة، قم بإجراء تخطيط يدوي للجرح كما هو موضح في الخطوة 4.
ملاحظة: في هذه الدراسة، تم تحفيز القتل الرحيم عن طريق قطع الرأس باستخدام جهاز المقصلة المناسب للقوارض، أجري بواسطة أفراد مدربين وفقا لإرشادات الأخلاقيات المؤسسية ورفاهية الحيوان. تم تأكيد الوفاة بغياب حركات التنفس، وضربات القلب، والاستجابات الانعكاسية بعد الإجراء.
8. قياس منطقة الآفة
- يتطلب الأمر برنامج تحليل الصور لتقييم منطقة الآفات. بالإضافة إلى ذلك، يتطلب قياس الجرح يدويا ومسطرة مليمتر لقياس الجرح ومراقبته.
- قم بتنزيل برنامج تحليل الصور المختار وأنشئ حسابا، إذا لزم الأمر، للوصول إلى المنصة.
- قبل بدء التحليل، اختر نقطتين ثابتتين (مثل A و B) في صورة التخطيط، وباستخدام مسطرة المليمتر، قس المسافة بين هاتين النقطتين وسجل القيمة المكتسبة بشكل منفصل (الشكل 2، الخطوة A).
- صور الخطوط المخططة سابقا مع النقاط المذكورة أعلاه. احفظ الملفات مع تعريف المجموعة التجريبية الخاصة بها (الشكل 2، الخطوة ب).
- افتح منصة تحليل الصورة وابدأ تقييم منطقة الجرح.
- مع فتح الصورة في البرنامج، استخدم المؤشر أو شاشة اللمس في الهاتف الذكي لتحديد نقاط جديدة، ووضعها فوق النقاط السابقة، وتحديدها كمناطق A وB (الشكل 2، الخطوة B).
- يقوم البرنامج تلقائيا بإنشاء خط بين النقطتين A و B ويطلب القياس، بالمليمترات أو السنتيمترات، الذي يتم الحصول عليه باستخدام المسطرة. أدخل هذا القياس في البرنامج، ثم اضغط على "قياس".
- سيقوم البرنامج باكتشاف منطقة الجرح تلقائيا وتوفير بيانات عن طول الجرح، عرضه، محيطه، المساحة والعمق. في التخطيط، لن تتوفر معلومات "العمق" (الشكل 2، الخطوة ج).
- احفظ الصور مع التحليلات المولدة وصدرها إلى الموقع المطلوب.
ملاحظة: تم إجراء تقييم منطقة الجرح الموضح في هذا البروتوكول باستخدام برنامج تحليل الصور التجاري المدرج في جدول المواد. ومع ذلك، يمكن أيضا استخدام منصات تحليل الصور المكافئة القادرة على قياس الجروح والتخطيطات الرقمية حسب تفضيل المستخدم وتوفر المؤسسات. إذا لم يكتشف البرنامج تلقائيا صورة المخطط الخطي، أو إذا اختلف المخطط عما يلاحظ بصريا في التخطيط، ينصح بتعزيز المخطط لتسهيل تعرف البرنامج على المنطقة. يمكن تحقيق ذلك باستخدام لون متباين (مثل الأحمر) وتطبيق نسيج على المنطقة الخارجية على مساحة تقريبية تبلغ 4 سممربع. يمكن رفع صور تتبع المخطط مباشرة من معرض الجهاز أو التقاطها بالكاميرا لتحليل البرمجيات لاحقا.
الشكل 2: قياس منطقة الآفة باستخدام ImitoWound. (أ) في المخطط اليدوي، حدد نقطتين (A و B)، وقس المسافة (x) بينهما باستخدام مسطرة مليمتر؛ (ب) رفع صورة الآفة إلى البرنامج، وتحديد نفس النقاط المحددة مسبقا (أ و ب)، مع وضعها فوق النقاط الأصلية؛ إدخال القياس المجمع سابقا (x) لمعايرة المقياس؛ (ج) يطلب من البرنامج المضي قدما في قياس منطقة الآفات؛ انتظر حيث يتم حساب قيمة المساحة تلقائيا وتقديمها النظام. تم إنشاء هذا الشكل بواسطة المؤلفين باستخدام BioRender. ليسا دا سيلفا، م. (2026) https://BioRender.com/dzko62t. مرفق رخصة النشر. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
9. تحديد معدل انقباض الجرح
- بعد تحديد منطقة الجرح عند النقاط الزمنية المقيمة، استخدم البيانات لحساب معدل انقباض الجرح20 باستخدام المعادلة التالية:
FF (٪) = [(A0 - A x) ÷ A0 ] × 100 (1)
حيث A₀ = منطقة الجرح في اليوم 0 ؛ Ax = منطقة الجرح في يوم القتل الرحيم; FF = نسبة إغلاق الجرح
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
في هذه التجربة، تم استخدام سلفاديازين الفضة كمعالجة مرجعية. تم تطبيق المنتج موضعيا على سرير الجرح بعد 24 ساعة من تحفيز الآفات. استند اختيار سلفاديازين الفضة إلى استخدامه السريري الراسخ كعامل مضاد للميكروبات وفي إدارة الجروح الجلدية. تعرض البيانات كنطاق متوسط وبين الربع، مع n = 5 حيوانات لكل نقطة زمنية تجريبية. يوضح الشكل 3A التطور الكبير للجرح الجلدي في يوم الحث (D0) وفي الأيام 3 و7 و14 و21، وهو اليوم المناسب ليوم القتل الرحيم لكل حيوان. يعرض
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
على الرغم من أن المعرفة حول شفاء الجروح البشرية قد تقدمت بشكل كبير، إلا أن الصعوبات والقيود الكامنة تجعل استخدام النماذج التجريبية أمرا لا غنى عنه للبحث فيهذا المجال. في هذا السياق، كان البروتوكول الحالي يهدف إلى وصف نموذج جرح استئصالي كامل السماكة يتم تحفيزه بمشرط على جانب الفئران كبديل للتقنيات التقليدية. المنطقة الظهرية المرتبطة باستخدام خزعات الثقب الدائرية هي الطريقة الأكثر استخداما في دراسات الشفاء الجلدي. ومع ذلك، فإن استخدام الجانب كمنطقة تشريحية بديلة موث...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن المؤلفون عدم وجود مصالح متنافسة.
شكر وتقدير
نشكر بكل امتنان مؤسسة أمبارو إلى بيسكيسا دو إيستادو دا باهيا (FAPESB)، ولجنة مساعدي الطيران في بيسولات نيفيل سوبيريور (CAPES)، على دعمهم في الزمالة؛ برنامج الدراسات العليا في علم الأحياء والتكنولوجيا الحيوية للكائنات الدقيقة (PPGBBM/UESC)، وذلك للدعم المالي. ونشكر أيضا مستشفى الطب البيطري (HVET/UESC) على توفير غرفة العمليات والمعدات.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
```html
```
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الكحول (إيثانول 70%) | Dinâmica | P.01.0024.006.06.81 | تطهير |
| ملقط تشريحي | Sigma-Aldrich | F3892 | الفولاذ المقاوم للصدأ |
| ضمادة | أي | غير مطبق | حماية الجروح |
| مقاييس | Mitutoyo | 530-104 | تحديد الجرح |
| محلول مطهر مائي من الكلورهيكسيدين 0.2% | Riohex | غير مطبق | تطهير |
| غرفة CO2 | Bonther | D149F1LYSZ | تخدير استنشاقي |
| ضمادة كريب | Cremer | 818765 | 15 سم × 1.25 متر |
| قفازات لاتكس يمكن التخلص منها | Descarpak | e0530101 | غير معقم |
| قطعة شاش | Cremer | 819342 | 7.5 × 7.5 سم |
| محقنة تحت الجلد | Dercarpack | e0324201 | 1 مل مع إبرة |
| ImageJ | Image J | https://imagej.net/ij/ | قياس مساحي |
| ImitoWound | ImitoWound | https://imito.io/pt/imitowound | قياس مساحي |
| منديل ورقي متجعد | Scott Smart | 48260 | التنظيف العام |
| Isoflurane | Cristália | 7.89668E+12 | تخدير استنشاقي |
| قفازات لاتكس للإجراء | قفازات لاتكس للإجراء قفازات لاتكس للإجراء | معدات حماية شخصية | |
| صابون سائل | أي | غير مطبق | تنظيف منطقة الجرح |
| مقص مايو، مستقيم، حاد/حاد | Fine Science Tools | 14001-12 | الفولاذ المقاوم للصدأ |
| مقاييس ملليمتر | أي | غير مطبق | |
| مورفين سلفات | Sigma-Aldrich | M8777 | محلول حقن 1 ملغ/مل |
| ورقة ورق | أي | غير مطبق | |
| قلم ماركر دائم | أي | غير مطبق | تدوين على الجلد |
| Povidone-iodine | Rioquimica | ZK48BN72E | مطهر |
| نصل مشرط رقم 23 | Descarpak | 740801 | الفولاذ المقاوم للصدأ |
| مقبض مشرط رقم 4 | Sigma-Aldrich | غير مطبق | الفولاذ المقاوم للصدأ |
| شفرة حلاقة من الفولاذ المقاوم للصدأ | Wilkinson | N/A | إزالة الشعر |
| قفازات جراحية معقمة | Descarpak | e0212101 | معقم |
| قناع جراحي | أي | غير مطبق | غير معقم |
| هيدروكلوريد الترامادول | UniãoQuímica | 7.89601E+12 | محلول للحقن 50 ملغ/مل |
| ضمادة فيلم شفاف | Vital derme | 1503 | 15 سم × 10 متر |
| شريط لاصق بولي بروبيلين شفاف | شريط لاصق بولي بروبيلين شفاف شريط لاصق بولي بروبيلين شفاف | حماية الجروح | |
| بطانية حرارية بيطرية مع غطاء PVC | Prevtech | MSO2VT001 | الحفاظ على درجة حرارة الجسم |
| شريط لاصق مقاوم للماء | Cremer | 819113 | 10 سم × 4.5 متر |
المراجع
- Lin X, Lai Y. Skin scarring: mechanisms and therapies. Int J Mol Sci. 2024;25(3):1458.
- Desjardins-Park HE, Mascharak S, Longaker MT, Wan DC. Endogenous mechanisms of craniomaxillofacial repair: toward novel regenerative therapies. Front Oral Health. 2021;2:676258.
- Han G, Ceilley R. Chronic wound healing: a review of current management and treatments. Adv Ther. 2017;34(3):599-610.
- Benito-Martínez S, Pérez-Köhler B, Rodríguez M, Izco JM, Recalde JI, Pascual G. Wound healing modulation through the local application of powder collagen-derived treatments in an excisional cutaneous murine model. Biomedicines. 2022;10(5):960.
- Elliott S, Wikramanayake TC, Jozic I, Tomic-Canic M. A modeling conundrum: murine models for cutaneous wound healing. J Invest Dermatol. 2018;138(4):736-740.
- Chen JS, Longaker MT, Gurtner GC. Murine models of human wound healing. Methods Mol Biol. 2013;1037:265-274.
- Rowland MB, Moore PE, Bui C, Correll RN. Assessing wound closure in mice using skin punch biopsy. STAR Protoc. 2023;4(1):101989.
- De Moura Estevão LR, et al. Morphological evaluation of wound healing events in the excisional wound healing model in rats. Bio-protocol. 2019;9(13):e3285.
- Ansell DM, Campbell L, Thomason HA, Brass A, Hardman MJ. A statistical analysis of murine incisional and excisional acute wound models. Wound Repair Regen. 2014;22(2):281-287.
- Masson-Meyers DS, Andrade TAM, Caetano GF, Guimaraes FR, Leite MN, Leite SN, et al. Experimental models and methods for cutaneous wound healing assessment. Int J Exp Pathol. 2020;101(1-2):21-37.
- Chen Y, Chen X, Zhou Q. Different effects of a perioperative single dose of dexamethasone on wound healing in mice with or without sepsis. Front Surg. 2023;10:927168.
- Zhao J, Zhang S, Gong Z, Mao W, Bao W, Li Q, et al. NLRP3: a key regulator of skin wound healing and macrophage-fibroblast interactions in mice. Cell Commun Signal. 2025;23:55.
- Liu T, Qiu C, Ben C, Li H, Zhu S. One-step approach for full-thickness skin defect reconstruction in rats using minced split-thickness skin grafts with Pelnac overlay. Burns Trauma. 2019;7:19.
- Nayak BS, Maiya A, Kumar P. Influence of Helium-Neon laser photostimulation on excision wound healing in Wistar rats. Online J Biol Sci. 2007;7:89-92.
- Adhirajan N, Shanmugasundaram N, Shanmuganathan S, Babu M. Collagen-based wound dressing for doxycycline delivery: in vivo. evaluation in an infected excisional wound model in rats. J Pharm Pharmacol. 2009;61(12):1617-1623.
- Goorani S, Zangeneh MM, Koohi MK, Seydi N, Zangeneh A, Souri N, Hosseini MS. Assessment of antioxidant and cutaneous wound healing effects of Falcaria vulgaris aqueous extract in Wistar male rats. Comp Clin Pathol. 2019;28(2):435-445.
- Yassine KA et al. A topical ointment formulation containing powder of Lawsonia inermis leaves accelerates excision wound healing in Wistar rats. Vet World. 2020;13(7):1280-1287.
- Kuma DN, et al. Wound healing properties and antimicrobial effects of parkia clappertoniana keay fruit husk extract in a rat excisional wound Model. Biomed Res Int. 2022;2022:9709365.
- Wu AY, et al. Comparison of skin incision healing in swine made with a cold steel scalpel, a standard electrosurgical blade, and a novel tissue dissector. Med Res Innov. 2017;1(5):1000124.
- Ahmadi H, et al. Photobiomodulation-preconditioned diabetic stem cell transplantation accelerates ischemic wound healing in diabetic rats. Stem Cell Res Ther. 2020;11(1):494.
- Zhou Q, et al. Porous sodium carboxymethylamide microspheres for hemostasis and skin wound healing. ACS Appl Bio Mater. 2025;8(4):3076-3085.
- Corrêa JMX, et al. Treatment of surgical wounds in rats with copaiba oil-resin (Copaifera reticulata). Rev Bras Ciênc Vet. 2021;28(4):184-189.
- Huang L, et al. Topical administration of acyl homoserine lactone improves epithelialization of cutaneous wounds in hyperglycemic rats. PLoS One. 2016;11(7):e0158647.
- Dunn L, Prosser HC, Tan JT, Vanags LZ, Ng MK, Bursill CA. Murine model of wound healing. J Vis Exp. 2013;(75):e50265.
- Davidson JM, Yu F, Opalenik SR. Immobilization strategies to overcome wound contraction in experimental animal models. Adv Wound Care. 2013;2(4):142-148.
- Zhang Y, et al. Establishment and translational evaluation of animal models for skin wound healing: a systematic review. Front Physiol. 2026;17:1800001.
- Rizzo AE, Beckett LA, Baier BS, Isseroff RR. The linear excisional wound: an improved model for human ex vivo wound epithelialization studies. Skin Res Technol. 2012;18(1):125-132.
- Can H, et al. Clinical, histopathological, and immunohistochemical investigations of the effects of Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) on open wound healing in rats. Pak Vet J. 2025;45(3):1135-1145.
- Shehasina KA, et al. Comparison of manual and digital planimetry techniques in full-thickness cutaneous wounds in dogs. Int J Vet Sci Anim Husb. 2024;9(2):603-607.
- Gill R, Poojar B, Bairy LK, Praveen KSE. Comparative evaluation of wound healing potential of Manuka and Acacia honey in diabetic and non-diabetic rats. J Pharm Bioallied Sci. 2019;11(2):116-126.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
