$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
دراسة التحقق – الطرق
في هذه الدراسة التحققية، نعيد إنتاج نتائج أعمالنا السابقة التي نشرت في مجلة الطب السريري والترجمي2. تم إجراء المجهر البصري التقليدي وADM على 328 مسحة BM. شملت بيانات التحليل معلومات صورة لجميع الخلايا المحللة ونتائج التصنيف، بما في ذلك الحالات الشكلية النادرة وغير النمطية. تم تقسيم الحالات إلى ست مجموعات تشخيصية: أورام خلل النخاع (MDN: 15٪)، ورم نخاعي متعدد (MM: 14٪)، أورام الخلايا B/T الناضجة (لمفوما B/T: 13٪)، سرطان الدم الحاد وسرطان الدم النخاعي الأحادي المزمن (AL+CMML: 9٪)، الأورام الميالوتكاثرية (MPN: 8٪)، وتقوية الدم التفاعلي (تفاعلي: 41٪). تم تقييم قدرات التعرف على خلايا ADM من خلال تقييم قدرتها على تصنيف الخلايا بشكل صحيح ضمن واحدة من 25 فئة، مقارنة بالتعليقات الخبيرة المستقلة باتفاق النفس مع القراءة المزدوجة2.
تمت مراجعة كل حالة من قبل خبيرين، مع تطابق تصنيف (تعليق توضيحي) في >99٪ من الخلايا. كان الخبراء ذوي خبرة كبيرة، وشاركوا بانتظام في تقييمات الجودة الخارجية الناجحة. بالنسبة للخلايا ذات التصنيفات المختلفة (<1٪)، تم التوصل إلى توافق بين المراقبين. كان مبدأ تحليل الاتساق هو مقارنة التصنيف المسبق التلقائي لكل خلية مع التصنيف النهائي للخبير لكل خلية؛ اعتبر تصنيف الخبراء التوافقي المرجع الحقيقي للتصنيف (الحقيقة الأساسية)2.
تم تقييم الاتساق الخلوي والسريري، وتم تحديد التصنيفات الخاطئة الحرجة. تم تحديد اتساق تصنيف الخلايا من مصفوفة الالتباس، بناء على اتفاق التصنيف لأنواع الخلايا الفردية. تم تطبيق طرق إحصائية قياسية واستخراج بيانات بصرية. تم حساب معامل ارتباط ماثيوز (MCC) لكل نوع من الخلايا وكقيمة متوسطة، وتم تفسيره بطريقة قياسية. قيمة MCC 0.400 وما فوق اعتبرت مرضية 2,18.
لكل مريض، تم تحديد اتساق التصنيف السريري كنسبة العناصر المصنفة مسبقا بشكل صحيح بين جميع الخلايا التي تم تقييمها في الحالة، بعد القضاء على الخلايا غير القابلة للتصنيف. اعتبر تصنيف الخبراء المرجع الحقيقي (الحقيقة الأساسية)2.
تعتبر التصنيفات الخاطئة غير ذات صلة عندما تكون محايدة تشخيصيا ولا تؤثر على التشخيص النهائي. تشمل هذه التصنيفات الخاطئة المتبادلة بين اللمفاوات، والخلايا النخاعية، والأحادية البلاست؛ الخلايا النخاعية/الخلايا النخاعية العدلية، الحيضية، والقاعدية الغازية؛ الخلايا النخاعية/الخلايا الميتاميلوسياتي؛ الخلايا الميتانية/الشريط؛ عدلات شريطية/مجزأة؛ برويثروبلاست/إريثروبلاست المبكر؛ إريثروبلايست المبكر/الوسيط والمتوسط/المتأخر؛ البرومونوسيت/مونوسيت؛ الخلايا البرمنفية/اللمفاويات؛ خلية بلازما غير ناضجة/بلازما؛ وخلية البلازما غير الناضجة/خلية البلازما الناضجة. جميع التصنيفات الخاطئة الأخرى تعتبر ذات صلة، لأنها غير مقبولة تشخيصيا وقد تؤدي إلى عواقب سريرية خطيرة (الشكل 4)2.
تم حساب الاتساق العام للتصنيف السريري كمتوسط لقيم الحالات الفردية، مع الأخذ في الاعتبار فقط التصنيفات الخاطئة ذات الصلة. تم تعريف التصنيف الخاطئ الحرج بأنه حالة كانت فيها قيمة الاتساق السريري للتصنيف الفردي أقل من 80٪. تم تحديد هذا الحد التعسفي بإجماع الخبراء، مع الأخذ في الاعتبار الحد الأدنى من متطلبات تقييم الجودة الخارجية في جولات التحليل الخلوي2.
تشمل الاختلافات الرئيسية على المنصة سير عمل BM من خطوتين (هدف 40× و100×)، مما يضيف تعقيدا إضافيا غائبا عن بروتوكول PB، وأهداف محددة لعدد الخلايا (100 خلية في PB، 500 خلية في BM)، وفئات تصنيف متغيرة. العامل المشترك الأكثر أهمية في المقارنة بين المنصات وأنواع العينات هو إجراء تحضير المسحة.
مقاييس الأداء الكمية المبلغ عنها مرتبطة بوضوح بمجموعة التحقق الموصوفة في الطرق (n = 328 فحص BM). كانت نسبة الخلايا ذات الصلة المصنفة بشكل صحيح من بين جميع الخلايا المصنفة (اتساق التصنيف الخلوي) 95.4٪. كانت قيم الارتباط المرضية، كما أشار إليها MCC، ≥0.400 ل 22 من أصل 25 نوعا (88.0٪) من الخلايا، بينما لوحظت قيم MCC غير مرضية (<0.400) ل3 من أصل 25 نوعا (12.0٪) من الخلايا (اللمفاويات، الخلايا البروليمفونية، والخلايا الأولية). كان الاتساق السريري الإجمالي ذي الصلة 97.1٪ (المتوسط)، مع 94.5٪ من الحالات التي أظهرت معدلات اتساق بين 80٪ و100٪. في 5.5٪ من المرضى، لوحظ تصنيف خاطئ حرج، مع قيم اتساق سريري ذات صلة تتراوح بين 36٪ و79٪، بسبب الفشل في التعرف على الخلايا الورمية2.
سوء تصنيف الخلايا يضر بموثوقية ADM في تحليل الأمور الجنائية ويمثل قيدا رئيسيا للطريقة في تشخيص الأورام الدموية (الجدول 1). في الحالات التي تتضمن تصنيفا خاطئا ذا صلة، تم فحص شكل الخلايا المصنفة بشكل صحيح وغير صحيح. الخلايا المصنفة بشكل صحيح تظهر عادة ميزات خلوية نموذجية. على النقيض من ذلك، تحدث التصنيفات الخاطئة غالبا عند التمييز بين الخلايا المتشابهة شكليا أو غير النمطية، خصوصا الخلايا اللمفاوية غير النمطية والانفجارات؛ الخلايا النخاعية والخلايا اللمفاوية؛ اللمفاويات والخلايا اللمفاوية؛ الأحادي البلاست أو الخلايا الأولية والخلايا النخية الأولية؛ وخلايا البلازما غير الناضجة والانفجارات. غالبا ما تظهر الخلايا المصنفة خطأ الشكل الخلوي غير النمطية. في الأورام اللمفاوية، تميل الخلايا اللمفاوية الورمية المصنفة بشكل خاطئ، مثل تلك الموجودة في لمفوما المنطقة الهامشية وسرطان الدم المشعر، إلى أن تكون متوسطة الحجم، مع وفرة من السيتوبلازم القاعدي أو الشاحب، وبروزات سيتوبلازمية، وكروماتين أدق مع نواة. تختلف هذه الخصائص عن تلك الخاصة بالخلايا الورمية المصنفة بشكل صحيح. في لمفوما خلايا الوشاح، قد تظهر الخلايا اللمفاوية غير النمطية مظهرا بلاستيويا، مما يزيد من احتمال سوء التصنيف. وبالمثل، في المتغير متعدد الأشكال من سرطان الدم اللمفاوي المزمن، قد يتم التعرف خطأ على الخلايا اللمفاوية الورمية على أنها انفجارات. نعرض أمثلة تمثيلية نوعية في الشكل 4 والشكل 5.
في سرطان الدم الحاد واللوكيميا النخاعية المزمنة (CMML)، تكون الخلايا اللمفاوية والأروميات النخاعية المصنفة بشكل خاطئ صغيرة جدا، مع نسبة عالية من النواة إلى السيتوبلازمية، والكروماتين الخشن، والنوى النوية. قد يتم تصنيف العديد من الخلايا الأحادية الحبيبية بشكل خاطئ على أنها خلايا نخاعي. في CMML، غالبا ما يرتبط التصنيف الخاطئ بالخلايا الأحادية الخلل التنسمي. في الورم النخاعي المتعدد، تحدث تصنيفات خاطئة داخل سلالة خلايا البلازما، خاصة فيما يتعلق بالخلايا البلازمية وخلايا البلازما غير الناضجة. نعرض أمثلة تمثيلية نوعية في الشكل 5.
التصنيفات الخاطئة الحرجة للخلايا اللمفاوية الأوتامية، والأرومات اللمفاوية الصغيرة/الأرومية النخاعية، والأبلاستات الأحادية الحبيبية، والخلايا الأولية والوحيدة الخلل التناسقي، والبلاستات البلازمية، وخلايا البلازما غير الناضجة—والتي قد تظهر جميعها شكلا غير نمطيا—تشكل خطر التشخيص الخاطئ. الخلط بين اللمفوما واللوكيميا الحادة والعكس يحمل احتمال عواقب خطيرة أو حتى قاتلة لإدارة المرضى. قد تؤدي النتائج السلبية الكاذبة، مثل الفشل في التعرف على سرطان الدم النخاعي الحاد (خصوصا سرطان الدم البلي مييليوسيتي الحاد) أو التشخيص الخاطئ ل CMML أو الورم النخاعي المتعدد، إلى قرارات علاجية غير مناسبة أو تأخيرات في العلاج.

الشكل 1. جهاز تلوين آلي، أيقونات الشاشة الرئيسية. بإذن من Sysmex؛ مواد معلومات الشركة المصنعة (دليل التشغيل الأساسي). يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الشكل 2. تصنيفات خاطئة لخلايا الدم البيضاء الزائدة الفول السوداني. في لقطات الشاشة للبرنامج، يتم تمييز الخلايا المصنفة بشكل خاطئ في مربعات حمراء. في عدوى فيروس إبشتاين، تم تصنيف الخلايا اللمفاوية التفاعلية بشكل خاطئ على أنها وحيدة (A، الصندوق الأحمر). في سرطان الدم اللمفاوي المزمن، تم تصنيف بعض الخلايا اللمفاوية بشكل خاطئ على أنها بلاستات (B، الصندوق الأحمر). في CMML، تم تصنيف الخلايا الأحادية غير اللاستلجية بشكل خاطئ كعدلات مقسمة (C، الصندوق الأحمر)، وتم تصنيف المونوبلاست بشكل خاطئ كخلية نخاعية خلل تنسجي (D، صندوق أحمر). PB، CellaVision DC-1، برنامج المراجعة، التلوين الآلي May–Grünwald وGiemsa–Romanowski باستخدام جهاز صبغ Sysmex SP-50، تكبير 1000×، خبير: فني معتمد. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الشكل 3. تصنيف خاطئ لخلايا اللمفاوية الورمية في الأخم الورمي. لقطة شاشة للبرنامج. تم تصنيف الخلايا اللمفاوية الورمية في لمفوما الخلايا البائية عالية الدرجة في الورم الورمي بشكل خاطئ على أنها أروى نخاعية. التصنيف البديل المقترح مع أكثر خمسة خيارات احتمالا ("قائمة أفضل خمسة احتمالات"), بما في ذلك الاحتمالات المئوية، يشار إليه بسهم أصفر. بالنسبة للخلية الموجودة في الصندوق الأصفر، يظهر الملصق نسبة الاحتمالات للمييلوبلاست، ومونوبلاست، ولمفاوبلاست، وبروإريثروبلاست، والإيثروبلاست المبكر، دون خيار لوجود اللمفاويات. BM، Morphogo، برنامج المراجعة، التلوين الآلي May–Grünwald وGiemsa–Romanowski باستخدام جهاز صبغ Sysmex SP-50، تكبير 1000×، خبير: عالم معتمد، طبيب معتمد. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الشكل 4. تصنيفات خاطئة غير ذات صلة وغير ذات صلة. (أ) تظهر أمثلة على تصنيفات خاطئة غير ذات صلة في سلالات النخاع والأحمر الأحمر في مقارنة بين تصنيف الخبراء والتصنيف المسبق ل ADM. (ب) تظهر أمثلة على التصنيفات الخاطئة ذات الصلة في السلالات اللمفوية وخلايا البلازما والخلايا الأحادية في مقارنة بين تصنيف الخبراء وتصنيف ADM المبدئي. كان تصنيف بعض العناصر صعبا حتى على خبير. تم استخراج صور الخلايا من البرنامج. BM، Morphogo، برنامج المراجعة، التلوين الآلي May–Grünwald وGiemsa–Romanowski باستخدام جهاز صبغ Sysmex SP-50، تكبير 1000×، خبير: عالم معتمد، طبيب معتمد. تمت إضافة شريط مقياس لكل خلية. تمثل أشرطة السلم 10 ميكرومتر. المعايرة تعتمد على كاميرا ToupCam (حجم بكسل 1.85 ميكرومتر) مع هدف 100× أوليمبوس بلان N.
تم التعديل من: المواد الإضافية، ستاروستكا د، دوليزيليك ر، كفاسنيكا إتش إم، كوديلكا م، ميتشكوفا ب، كريغوفا إي، وآخرون. فائدة علم الخلايا الرقمية المؤتمتة بمساعدة الذكاء الاصطناعي لتحليل نخاع العظم في أمراض الدم والأورام التشخيصية. ترجمة كلين، الطب. 2025؛ 15:e70364. https://doi.org/10.1002/ctm2.70364. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الشكل 5. أمثلة تمثيلية على أكثر التصنيفات الخاطئة شيوعا لخلايا الأخم الجنائية لدى المرضى المصابين بالأورام الدموية. تم تصنيف الخلايا اللمفاوية الورمية بشكل خاطئ، والأروميات النخاعية، والأرميات اللمفاوية، والأبلاستات الأحادية، وخلايا البلازما في حالات مختارة من لمفوما المنطقة الهامشية (MZL)، لمفوما خلايا الوشاح (MCL)، لوكيميا الخلايا المشعرة (HCL)، اللوكيميا اللمفاوية المزمن (CLL)، اللوكيميا النخاعي الحادة (AML)، اللوكيميا اللمفاوية T الحادة (T-ALL)، والورم النخاعي المتعدد (MM). كان الخطأ الخاطئ في تصنيف الخلايا اللمفاوية غير النمطية/الانفجار هو الخطأ الأكثر شيوعا. شملت الخصائص الخلوية الرئيسية للخلايا اللمفاوية الورمية المصنفة بشكل خاطئ الحجم متوسطة الحجم، والكروماتين الأدق (الأسهم الحمراء)، والنوى (الأسهم الزرقاء)، ووجود سيتوبلازم قاعدي أو شاحب مع بروزات (سهام خضراء)، ومظهر بلاستويد (سهم برتقالي). كانت الخلايا اللامفاوية والأرومات النخاعية المصنفة بشكل خاطئ صغيرة، مع نسبة عالية من النوى إلى السيتوبلازم، وكروماتين أكثر خشونة مع نوى (سهام رمادية). تم تصنيف الخلايا البلازمية وخلايا البلازما غير الناضجة بشكل خاطئ على أنها لمفاويات أو لم يتم التعرف عليها على أنها تنتمي إلى سلالة خلايا البلازما (مصنفة ك "انفجار، غير محدد"). تم استخراج صور الخلايا من البرنامج. برنامج مراجعة BM Morphogo، تلوينات آلية لماي-غرونوالد وجيمسا-رومانوسكي باستخدام جهاز صبغ Sysmex SP-50، تكبير 1000×، خبير: عالم معتمد، طبيب معتمد. تمت إضافة شريط مقياس لكل خلية. تمثل أشرطة السلم 10 ميكرومتر. المعايرة تعتمد على كاميرا ToupCam (حجم بكسل 1.85 ميكرومتر) مع هدف 100× أوليمبوس بلان N.
تم تعديل الصورة من: المواد الإضافية، ستاروستكا د، دوليزيليك ر، كفاسنيكا إتش إم، كوديلكا م، ميتشكوفا ب، كريغوفا إي، وآخرون. فائدة علم الخلايا الرقمية المؤتمتة بمساعدة الذكاء الاصطناعي لتحليل نخاع العظم في أمراض الدم والأورام التشخيصية. ترجمة كلين، الطب. 2025؛ 15:e70364. https://doi.org/10.1002/ctm2.70364. يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
| التشخيص | عدد الحالات | الخلايا المصنفة بشكل خاطئ |
| | تصنيف الخبراء | تصنيف ADM |
| أورام الخلايا البائية الناضجة | 9/43 | | |
| لمفوما المنطقة الهامشية | 4/8 | الخلايا اللمفاوية غير النمطية | انفجار، اللجنة الوطنية للسلامة |
| لمفوما خلايا الوشاح | 2/5 | الخلايا اللمفاوية غير النمطية | انفجار، اللجنة الوطنية للسلامة |
| CLL | 1/14 | الخلايا اللمفاوية غير النمطية | انفجار، اللجنة الوطنية للسلامة |
| سرطان الدم المشعرة | 2/2 | الخلايا اللمفاوية غير النمطية | بلاست، NOC / مونوسايت |
| الورم النخاعي المتعدد | 5/46 | خلية البلازما | انفجار، اللجنة الوطنية للسلامة |
| AML | 3/16 | البلاست النخاعي / الأحادي الأعلى | الخلايا اللمفاوية / الخلايا النخاعية |
| ت-أول | 1/1 | اللمفوبلاست | الخلايا اللمفاوية |
الجدول 1: التصنيفات الخاطئة الحرجة من قبل ADM. لوحظ خطأ تصنيفي حرج في 18 من أصل 328 (5.5٪) من المرضى. شملت مجموعة التصنيفات الخاطئة الحرجة التي أجرتها ADM تسعة من أصل 43 مريضا يعانون من أورام الخلايا البائية الناضجة، وخمسة من أصل 46 مريضا مصابين ب MM، وثلاثة من كل 16 مريضا مصابين ب AML، وواحد (من كل واحد) مريض مصاب ب T-ALL. كان تصنيف الخلايا اللمفاوية غير النمطية هو الأكثر شيوعا. المركز الوطني للكبسول: لا يوجد أي تصنيف آخر.
تم النشر من: المواد الإضافية، ستاروستكا د، دوليزيليك ر، كفاسنيتكا إتش إم، كوديلكا م، ميتشكوفا ب، كريغوفا إي، وآخرون. فائدة علم الخلايا الرقمية المؤتمتة بمساعدة الذكاء الاصطناعي لتحليل نخاع العظم في أمراض الدم والأورام التشخيصية. ترجمة كلين، الطب. 2025؛ 15:e70364. https://doi.org/10.1002/ctm2.70364.