يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

بصمات الحمض الريبي النووي الميكروي (microRNA) وبروتينات استقلاب المغذيات في متلازمة المبيض المتعدد الكيسات وصلاتها بمقاومة الإنسولين والالتهاب

81 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/71928

⸱

سبتمبر 8, 2026

 , 
1Department of Gynecology, Ganzhou Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine, 2Department of Gynecology, Ganzhou Women and Children's Health Care Hospital

في هذه المقالة

ملخص

قيمت هذه الدراسة الاسترجاعية التي تعتمد على مجموعة ضابطة مستويات miR-146a وmiR-642a وmiR-2861 في المصل، بالإضافة إلى المؤشرات الأيضية لدى النساء المصابات بمتلازمة تكيس المبايض. وقد لوحظت تغيرات منسقة في miRNAs، والأديبوكينات، ومقاومة الإنسولين، والالتهاب، والتستوستيرون، بينما أظهر نموذج المؤشرات الحيوية المدمج أداءً تمييزياً أقوى من المؤشرات الفردية.

الملخص

تُعد متلازمة المبيض متعدد الكيسات (PCOS) اضطرابًا غدديًا وأيضيًا شائعًا لدى النساء في سن الإنجاب، إلا أن العلاقات بين جزيئات الـ microRNAs (miRNAs) المتداولة في الدم والبروتينات المرتبطة بالتغذية لا تزال غير مفهومة بشكل كامل. بحثت هذه الدراسة في ارتباطات miR-146a وmiR-642a وmiR-2861 في المصل مع المؤشرات الأيضية والالتهابية في حالات متلازمة المبيض متعدد الكيسات. شملت الدراسة 62 امرأة مصابة بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات و71 من الأصحاء كمجموعة ضابطة. تم قياس مستويات miR-146a وmiR-642a وmiR-2861 في المصل باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (quantitative real-time PCR)، كما تم تقييم مستويات الأديبونكتين (ADPN)، واللبتين (LEP)، والبروتين الرابط للريتينول 4 (RBP4)، وتقييم نموذج الاستتباب لمقاومة الإنسولين (HOMA-IR)، والإنترلوكين-6 (IL-6)، والتستوستيرون (T). وقام التحقق المنهجي بتقييم ظروف معالجة العينات، ودقة المقايسة، ومدى التوافق بين الطرق التحليلية. وبالمقارنة مع المجموعة الضابطة، أظهرت النساء المصابات بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات زيادة في تعبير miR-146a وانخفاضًا في تعبير miR-642a وmiR-2861. كما انخفضت مستويات ADPN، بينما ارتفعت مستويات LEP وRBP4 وHOMA-IR وIL-6 وT. ارتبط miR-146a ارتباطًا سلبيًا مع ADPN وارتباطًا إيجابيًا مع LEP وRBP4 وHOMA-IR وIL-6 وT. وارتبط miR-642a ارتباطًا سلبيًا مع RBP4 وHOMA-IR وIL-6، بينما ارتبط miR-2861 ارتباطًا إيجابيًا مع ADPN. وأظهر التحقق المنهجي استقرارًا ودقة وموافقة مقبولة بين الطرق المستخدمة في المقايسة. حقق النموذج الذي يجمع بين الـ miRNAs الثلاثة مع ADPN وLEP وRBP4 وHOMA-IR وIL-6 وT مساحة تحت المنحنى بلغت 0.929، بحساسية قدرها 82.26% ونوعية بلغت 94.37%. وتثبت هذه النتائج وجود تغيرات منسقة في الـ miRNAs المتداولة والمؤشرات الأيضية في متلازمة المبيض متعدد الكيسات، وتدعم إجراء المزيد من التقييمات لإمكاناتها التشخيصية المشتركة.

المقدمة

تعد متلازمة تكيس المبايض (PCOS) الاضطراب الغدي والتمثيلي الأكثر شيوعاً لدى النساء في سن الإنجاب، حيث تُقدّر نسبة انتشارها عالمياً ما بين 6% و 20%. وتعاني حوالي 70% من النساء المصابات من مقاومة الأنسولين، بينما تعاني أكثر من نصفهن من زيادة الوزن أو السمنة1. وقد تؤدي هذه المتلازمة إلى خلل في الإباضة، والعقم، وداء السكري من النوع 2، وأمراض القلب والأوعية الدموية، ومضاعفات طويلة الأمد أخرى، مما يؤثر بشكل خطير على الصحة الإنجابية وجودة الحياة2. وعلى الرغم من أن مسببات المرض لم تُوضح بالكامل بعد، إلا أن متلازمة تكيس المبايض تُعتبر عموماً ناتجة عن عوامل متعددة، بما في ذلك القابلية الوراثية، والالتهابات المزمنة منخفضة الدرجة، واختلالات في مسارات إشارات الأنسولين، واضطراب البيئة المجهرية الموضعية للمبايض. وفي هذا السياق، يكتسب تحديد مؤشرات جزيئية محددة تعكس تطور المرض قيمة واضحة للتشخيص المبكر والتدخل الدقيق في حالات متلازمة تكيس المبايض3,4.

تعد الـ miRNAs فئة من الحمض النووي الريبوزي غير المشفر، ويبلغ طولها حوالي 22 نيوكليوتيد. تنظم هذه الجزيئات التعبير الجيني بعد عملية النسخ إما عن طريق تحفيز تكسير الـ mRNA أو تثبيط عملية الترجمة. وبناءً على ذلك، فإن هذه الجزيئات ضرورية للعديد من العمليات الخلوية، بما في ذلك نمو الخلايا، والتمايز، والاستجابات للالتهابات، والتنظيم الأيضي5,6. وقد أظهرت الدراسات السابقة خللاً تنظيمياً مميزاً في كل من miR-146a وmiR-642a وmiR-2861 في مصل المرضى المصابين بمتلازمة تكيس المبايض (PCOS). وقد يؤدي ارتفاع تنظيم miR-146a إلى التوسط في الاستجابات الالتهابية المزمنة من خلال التنظيم المستهدف لمسار TLR4/NF-κB7، بينما ارتبط انخفاض تعبير miR-642a وmiR-2861 ارتباطاً وثيقاً بمقاومة الإنسولين وضعف وظيفة خلايا الحبيبية في المبيض8,9. وتلعب بروتينات ADPN وLEP وRBP4، وهي بروتينات مرتبطة بالتغذية، دوراً حاسماً في تنظيم التوازن الأيضي؛ حيث يمكن أن تؤثر التغيرات في مستوياتها بشكل مباشر على كيفية معالجة الدهون، ومدى حساسية الجسم للإنسولين، وحالة الالتهاب. ويعتبر هذا جزءاً رئيسياً من الأساس الجزيئي للمشكلات الأيضية الملاحظة في حالات PCOS10,11. ومع ذلك، فإن معظم الدراسات المنشورة بحثت إما في الـ miRNAs أو البروتينات المرتبطة بالتغذية بشكل منفصل فيما يتعلق بـ PCOS12,13، ولم يتم توضيح العلاقة الجزيئية بين الاثنين بطريقة منهجية بعد.

قمنا في هذه الدراسة بقياس مستويات تعبير ثلاثة من الـ miRNAs وستة من المؤشرات الحيوية الأساسية لدى المريضات المصابات بمتلازمة تكيس المبايض (PCOS)، وحللنا الارتباطات بين هذه المؤشرات وعلاقتها بالمؤشرات الكيميائية الحيوية السريرية، كما استقصينا مدى إمكانية مشاركة الـ miRNAs في العملية المرضية لمتلازمة تكيس المبايض من خلال ارتباطها بالبروتينات المتعلقة بالتغذية. ومن شأن نتائج هذه الدراسة أن تثري الفهم الحالي للأساس الجزيئي لمتلازمة تكيس المبايض، وتوفر أهدافاً محتملة للعلاجات التي تستهدف التنظيم الغذائي والأيضي، وتقدم أدلة مخبرية للفحص المبكر، ومراقبة الفعالية، والإدارة الفردية لمتلازمة تكيس المبايض.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

بيان الأخلاقيات
أُجريت هذه الدراسة وفقاً لإعلان هلسنكي، واعتمدتها لجنة الأخلاقيات الطبية في مستشفى غانتشو للطب الصيني التقليدي (رقم الموافقة GZSZYYKYLL20240092، بتاريخ 20-12-2024).

جميع المواد والكواشف وأطقم المقايسة والمعدات المستخدمة في هذا البروتوكول مدرجة في جدول المواد.

تصميم الدراسة
شملت هذه الدراسة الاسترجاعية المعتمدة على مجموعة ضابطة 62 مريضة مصابة بمتلازمة تكيس المبايض (PCOS) تم تشخيصهن في عيادة أمراض النساء الخارجية بمستشفى غانزو للطب الصيني التقليدي في الفترة ما بين يونيو 2024 وأغسطس 2025، و71 امرأة سليمة في سن الإنجاب خضعن للفحص في مركز الإدارة الصحية بالمستشفى خلال الفترة نفسها. تم اختيار المجموعة الضابطة لتحقيق التكافؤ على مستوى المجموعات من حيث العمر؛ ولم يُستخدم مؤشر كتلة الجسم (BMI) كمتغير للمطابقة، بل تم تقييمه كخاصية أساسية.

أفراد الدراسة
معايير الاشتمال: كانت معايير الاشتمال لمجموعة متلازمة تكيس المبايض (PCOS) كما يلي: (1) العمر >18 سنة؛ (2) تشخيص الإصابة بمتلازمة تكيس المبايض وفقاً لمعايير روتردام المعدلة المعتمدة في الدليل الإرشادي الدولي القائم على الأدلة لعام 2023، والتي تتطلب توفر اثنين على الأقل من الميزات الثلاث التالية بعد استبعاد الاضطرابات ذات الصلة: قلة التبويض أو انعدامه، والذي يُعرف بأن تكون الدورات الشهرية أطول من 35 يوماً أو أقل من ثماني دورات في السنة؛ وفرط أندروجين سريري و/أو فرط أندروجين كيميائي حيوي، حيث يُعرَّف فرط الأندروجين الكيميائي الحيوي بأنه تركيز T الكلي في المصل أعلى من الحد المرجعي العلوي الخاص بالمقايسة؛ ومورفولوجيا المبيض المتكيس، والتي تُعرَّف بوجود 20 جريبًا على الأقل في مبيض واحد أو حجم مبيض لا يقل عن 10 mL عندما لا يكون العد الكامل للجريبات ممكناً14؛ (3) اكتمال السجلات الطبية الإلكترونية؛ (4) عدم استخدام العلاج الهرموني البديل، أو خافضات السكر، أو مثبطات المناعة خلال الأشهر الثلاثة السابقة؛ (5) توفر عينة مصل صائمة تم جمعها عند التسجيل وحُفظت في البنك الحيوي المؤسسي.

تمثلت معايير الاشتمال لمجموعة الضبط فيما يلي: (1) الحضور لإجراء فحص صحي خلال الفترة نفسها؛ (2) انتظام الدورات الشهرية؛ (3) طبيعية مورفولوجيا المبيض عند التصوير بالموجات فوق الصوتية عبر المهبل؛ (4) عدم وجود تاريخ من الاضطرابات الغدد الصماء، أو الأمراض النسائية، أو العقم، أو خلل وظيفي كبدي أو كلوي ذو أهمية سريرية؛ (5) توفر عينة مصل صائم تم جمعها في يوم الفحص وتخزينها في البنك الحيوي للمؤسسة.

كانت معايير الاستبعاد كما يلي: (1) بطانة الرحم المهاجرة، أو الأورام الليفية الرحمية، أو أورام المبيض، أو مرض التهاب الحوض، أو غيرها من الاضطرابات النسائية؛ (2) خلل وظائف الغدة الدرقية، أو متلازمة كوشينج، أو فرط برولاكتين الدم، أو تضخم الغدة الكظرية الخلقي، أو أي اضطراب غدد صماء آخر يمكن أن يفسر خلل الإباضة أو فرط أندروجين الدم؛ (3) خلل شديد في وظائف القلب أو الكبد أو الكلى أو الرئتين، أو الأورام الخبيثة، أو أمراض المناعة الذاتية، أو الاضطرابات الدموية؛ (4) الحمل أو الولادة أو الإجهاض خلال الأشهر الستة السابقة؛ (5) استخدام الجلوكوكورتيكويدات، أو حبوب منع الحمل الفموية، أو غيرها من الأدوية التي تؤثر على استقلاب الجلوكوز أو الدهون خلال الأشهر الثلاثة السابقة؛ (6) الاضطرابات النفسية أو القصور المعرفي؛ (7) فقدان المعلومات السريرية الأساسية؛ (8) التحلل الدموي الشديد في المصل، والذي عُرف بتركيز هيموجلوبين >2.0 g/L، أو وجود الدهون في الدم، أو اليرقان، أو التعرض لأكثر من دورة تجميد وإذابة واحدة، أو انقطاع تخزين العينات. تم استبعاد خلل وظائف الغدة الدرقية، وفرط برولاكتين الدم، وتضخم الغدة الكظرية الخلقي غير التقليدي باستخدام قياسات الهرمون المنبه للدرقية، وبرولاكتين المصل، و17-hydroxyprogesterone، على التوالي؛ كما تمت مراجعة الهرمون المنبه للجريب عند الاقتضاء، بينما تم البحث عن متلازمة كوشينج أو ورم كظري عندما استدعت الحالة سريرياً. طُبقت نفس الإجراءات التحليلية الأولية على جميع العينات السريرية، ولم تخضع أي عينة مدرجة في التحليل الأولي لأكثر من دورة تجميد وإذابة واحدة.

جمع عينات المصل وتخزينها
جُمعت عينة من الدم الوريدي في حالة صيام (10 mL) في الصباح في أنابيب خالية من مضادات التخثر، وتُركت لتتجلط في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 min، ثم جرى طردها مركزياً بسرعة 1,505 x g لمدة 15 min عند درجة حرارة 4 °C. قُسّم المصل إلى حصص قدرها 200 µL وخُزنت عند درجة حرارة −80 °C حتى موعد التحليل. طُبّق الإجراء التحضيري نفسه على جميع العينات السريرية، ولم تخضع أي عينة أُدرجت في التحليل الأولي لأكثر من دورة تجميد وإذابة واحدة.

تحضير العينات للتحقق من صحة المنهجية
استُخدمت عشر عينات مجمعة من مصل الدم لمتطوعين أصحاء لتقييم تأثيرات سرعة الطرد المركزي (1,505 و3,000 و4,000 x g لمدة 15 min)، وتكرار التجميد والإذابة (0 و1 و3 و5 دورات)، ودرجة حرارة التخزين (4 °C و−20 °C و−80 °C لمدة 7 days)، ومدة التخزين (1 و3 و6 و12 months عند −80 °C)، والتحلل الدموي (<0.1 و0.1–0.5 و0.5–2.0 g/L من الهيموجلوبين).

الاختبارات المختبرية
أجرى فني مختبر مدرب جميع المقاييس المختبرية تحت ظروف بيئية موحدة ووفقاً لإجراءات تشغيل محددة مسبقاً. تم قياس كمية miRNAs في المصل عن طريق qRT-PCR؛ وقِيست مستويات ADPN و LEP و RBP4 باستخدام تقنية sandwich ELISA؛ كما قِيست مستويات T و IL-6 باستخدام المقايسات المناعية القائمة على التلألؤ الكيميائي؛ وحُصل على متغيرات استقلاب الجلوكوز باستخدام الطرق المختبرية الآلية الروتينية.

تقدير كمية miRNA في المصل بواسطة qRT-PCR
استُخلص إجمالي RNA من 200 µL من المصل باستخدام كاشف TRIzol. لم تتوفر بيانات تركيز RNA المقاسة طيفياً وبيانات نقاوة A260/A280 لتحضيرات RNA المصل المؤرشفة. وبناءً على ذلك، تم تقييم قبول مقايسة qRT-PCR من خلال وجود ذروة واحدة محددة لمنحنى الانصهار والتوافق بين ثلاث مكررات تقنية. وبعد فصل طور الكلوروفورم، والترسيب باستخدام الإيزوبروبانول، وغسلتين بإيثانول 75%، أُذيبت كتلة RNA في ماء خالٍ من الإنزيمات. احتوى نظام التفاعل بحجم 20 µL على 4 µL من منظم 5x، و1 µL من إنزيم النسخ العكسي، و1 µL من بادئ stem-loop بتركيز 10 µM، و5 µL من قالب RNA. كانت ظروف التفاعل 16 °C لمدة 30 min، و42 °C لمدة 30 min، و85 °C لمدة 5 s. خُزنت نواتج النسخ العكسي عند −20 °C. أُجري تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي باستخدام طقم TaKaRa SYBR Premix Ex Taq II. احتوى كل تفاعل بحجم 20 µL على 10 µL من خليط 2× SYBR، و0.8 µL من كل من البادئين الأمامي والعكسي (10 µM)، و2 µL من قالب cDNA. أُجري التضخيم على نظام Applied Biosystems 7500 real-time PCR وفقاً للظروف التالية: ما قبل المسخ عند 95 °C لمدة 30 s؛ و40 دورة من 95 °C لمدة 5 s و60 °C لمدة 30 s؛ ثم أُجري تحليل منحنى الانصهار لتأكيد خصوصية التضخيم. استُخدم U6 snRNA كجين مرجعي داخلي، وحُسبت مستويات التعبير النسبي لكل من miR-146a وmiR-642a وmiR-2861 باستخدام طريقة 2-ΔΔCt. اختُبرت كل عينة في ثلاث مكررات. تسلسلات جميع البادئات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في Table 1.

الكشف عن مؤشرات بروتين المصل
تم قياس تركيزات ADPN وLEP وRBP4 في المصل باستخدام تقنية ELISA بطريقة الساندويتش ثنائية الأجسام المضادة، وذلك باستخدام Human Total ADPN/Acrp30 Quantikine ELISA Kit (الحساسية التحليلية 0.891 ng/mL؛ ونطاق المقايسة 3.9–250 ng/mL)، وHuman Leptin Quantikine ELISA Kit (الحساسية التحليلية 7.8 pg/mL؛ ونطاق المقايسة 15.6–1,000 pg/mL)، وHuman RBP4 Quantikine ELISA Kit (الحساسية التحليلية 0.628 ng/mL؛ ونطاق المقايسة 1.56–100 ng/mL)، على التوالي. وكانت كل مقايسة محددة للمادة المراد تحليلها البشرية المقابلة، كما تم تخفيف عينات المصل وفقاً لتعليمات الشركة المصنعة. تم قياس الامتصاصية عند 450 nm، وحُسبت التركيزات باستخدام منحنيات قياسية لوجستية رباعية المعلمات. بلغت قيم معامل الاختلاف (CV) داخل المقايسة الواحدة أو بين المقايسات 2.5% أو 3.2% لـ ADPN، و2.7% أو 3.4% لـ LEP، و2.6% أو 3.3% لـ RBP4.

قياس T
تم قياس T في المصل عن طريق المقايسة المناعية الكيميائية الكهربائية باستخدام محلل المقايسة المناعية الآلي Roche Cobas e601.

قياسات التمثيل الغذائي للجلوكوز والالتهاب
تم الحصول على قيم جلوكوز البلازما الصائم، والأنسولين الصائم، وHbA1c من سجلات المختبر السريرية الروتينية لنفس اليوم، بدلاً من حصص المصل المؤرشفة المستخدمة في فحوصات miRNA والبروتين الاستقلابي. تم قياس جلوكوز البلازما الصائم بطريقة جلوكوز أوكسيديز، والأنسولين الصائم عن طريق القياس المناعي العكر، وHbA1c عن طريق تحليل الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء. حُسب HOMA-IR وفق المعادلة: [جلوكوز البلازما الصائم (mmol/L) × الأنسولين الصائم (mIU/L)]/22.5. كما تم قياس IL-6 في المصل عن طريق المقايسة المناعية الكيميائية الضوئية.

التحقق المنهجي
أُجريت مقارنات الطرق البديلة لتحديد ما إذا كانت القياسات الأساسية قوية ومستقرة تجاه منصة المقايسة، ولم تُستخدم هذه المقارنات لإنتاج النتائج الرئيسية بين المجموعات. تم قياس مستويات تعبير ثلاثة miRNAs وخمسة مؤشرات كيميائية حيوية في ظل ظروف المعالجة المختلفة الموضحة أعلاه، وحُسب معامل الاختلاف لكل مؤشر وفق المعادلة: CV = (standard deviation/mean) x 100%. واعتُبر معامل الاختلاف CV <15% مقبولاً لتقييم استقرار نتائج المقايسة تحت ظروف معالجة وتخزين العينات المختلفة. كما تم تقييم الدقة ضمن اليوم الواحد عن طريق القياس المتكرر لنفس عينة المصل المجمعة 10 مرات في يوم واحد، بينما حُددت الدقة بين الأيام من القياسات التي أُجريت مرة واحدة يومياً على مدار خمسة أيام متتالية. ولأجل كل مؤشر، حُسب المتوسط، والانحراف المعياري، ومعامل الاختلاف CV المقابل. ولاختبار الاتفاق التحليلي، تم قياس خمسة من المحللات الكيميائية الحيوية—ADPN وLEP وRBP4 وIL-6 وT—في عينات التحقق باستخدام المقايسة الأساسية ومنصة مقايسة مناعية تعتمد على التألق الكيميائي من شركة Roche. واستُخدم تحليل Bland–Altman لحساب حدود الاتفاق بنسبة 95%. كما استُخدمت مقايسة qRT-PCR الأساسية لجميع قياسات miRNA السريرية، بينما استُخدمت مجموعة miScript SYBR Green PCR Kit كطريقة متعامدة فقط في تجربة الاتفاق التحليلي؛ وحُسبت معاملات ارتباط Pearson بين نظامي qRT-PCR.

التحليل الإحصائي
أُجري تحليل البيانات باستخدام برمجيات إحصائية. تم اختبار جميع المتغيرات المستمرة أولاً للتأكد من طبيعية التوزيع باستخدام اختبار Shapiro-Wilk. وعُبر عن البيانات ذات التوزيع الطبيعي بصيغة المتوسط ± الانحراف المعياري. وأُجريت المقارنات بين مجموعتين باستخدام اختبار t للعينات المستقلة، بينما أُجريت المقارنات بين عدة مجموعات باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (one-way analysis of variance)، متبوعاً باختبار LSD-t للمقارنات الزوجية. أما البيانات التي لم تتبع توزيعاً طبيعياً فقد عُرضت بصيغة الوسيط (المدى الربيعي) [M (P25, P75)]. ومن ثم أُجريت المقارنات بين مجموعتين باستخدام اختبار Mann-Whitney U، والمقارنات بين عدة مجموعات باستخدام اختبار Kruskal-Wallis H. وعُرضت البيانات الفئوية على شكل تكرارات ونسب مئوية. واستخدمنا اختبار χ2 أو اختبار فيشر الدقيق (Fisher’s exact test) للمقارنة بين المجموعات. كما تم تقييم الارتباطات بين المتغيرات باستخدام تحليل ارتباط بيرسون (Pearson correlation analysis) أو تحليل ارتباط رتب سبيرمان (Spearman rank correlation analysis) وفقاً لتوزيع البيانات. وكتحليل استكشافي، كُررت ارتباطات بيرسون بين كل miRNA والمؤشرات الأيضية الستة ضمن المجموعات الفرعية لمتلازمة تكيس المبايض (PCOS) غير المصابة بالسمنة (BMI <28 kg/m2) والمصابة بالسمنة (BMI ≥28 kg/m2). وتمت مقارنة معاملات الارتباط باستخدام تحويل Fisher’s r-to-z، وعُدلت قيم p الناتجة بين المجموعات الفرعية باستخدام إجراء Benjamini–Hochberg لمعدل الاكتشاف الخاطئ. وقمنا بتقييم الأداء التشخيصي باستخدام منحنيات خصائص تشغيل المستقبل (ROC) والمساحة تحت المنحنى (AUC). بالإضافة إلى ذلك، حللنا الكشف المشترك باستخدام نموذج الانحدار اللوجستي. كانت جميع الاختبارات ثنائية الطرف، واعتُبرت قيمة p < 0.05 ذات دلالة إحصائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

الخصائص الأساسية لمجتمع الدراسة
شملت هذه الدراسة إجمالي 62 مريضة مصابة بمتلازمة تكيس المبايض (PCOS) و71 من الأصحاء كمجموعة ضابطة. وكانت المجموعتان متقاربتين من حيث العمر، والتركيب العرقي، والخصائص الأساسية الأخرى (p > 0.05). وفي المقابل، كانت الدورات الشهرية أطول بشكل ملحوظ في مجموعة مريضات PCOS مقارنة بالمجموعة الضابطة (p < 0.001)، وهو ما يتفق مع العرض السريري النموذجي لمتلازمة تكيس المبايض (الجدول 2).

مستويات تعبير miR...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

باستخدام مقايسات الكيمياء الحيوية القياسية للمصل وتقنية qRT-PCR، حللت هذه الدراسة عينات مصل من 62 مريضة مصابة بمتلازمة تكيس المبايض (PCOS) و71 من الأصحاء كمجموعة ضابطة. وقد وجدنا نمطاً مميزاً من الخلل في تعبير miRNA والبروتينات المرتبطة بالتغذية في حالات PCOS، إلى جانب وجود ارتباطات معنوية بعد النسخ بين الاثنين. وقد خضعت جميع التجارب لعملية تحقق منهجية صارمة؛ حيث استوفت دقة نظام الكشف واستقراره والتوافق بين الطرق المستخدمة المعايير المتوقعة من المختبرات عالية الجودة، مما يدعم موثوقية النتائج الحالية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون عن عدم وجود تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مجمد فائق انخفاض الحرارة -80 °CThermo Fisher (USA)Forma 900التخزين طويل الأمد لعينات المصل في درجات حرارة منخفضة
طقم ELISA لـ Adiponectin (ADPN)R&D Systems (USA)DY1065الكشف الكمي عن تركيز ADPN في المصل
محلل كيميائي حيوي أوتوماتيكيBeckman Coulter (USA)AU5800كشف جلوكوز الدم الصائم، والأنسولين، والهيموجلوبين السكري
قارئ أطباق مجهرية أوتوماتيكيTecan (Switzerland)Infinite M200 Proقياس الامتصاصية عند 450 nm لتجارب ELISA
طقم كشف جلوكوز الدمBeckman Coulter (USA)A11A01كشف جلوكوز الصيام في المصل بطريقة أكسيداز الجلوكوز
محلل المقايسة المناعية بالومضان الكيميائي Cobas e601Roche (Germany)Cobas e601كشف التستوستيرون و IL-6 في المصل بالومضان الكيميائي الكهربائي
أنبوب حفظ تجميدي خالٍ من الإنزيماتAxygen (USA)MCT-150-Cتقسيم عينات المصل، والتخزين في درجة حرارة فائقة الانخفاض -80 °C
ماصة Eppendorf Research plusEppendorf (Germany)Research plus 0.5-1,000 μLسحب المصل، وسحب RNA/الكواشف، وتقسيم العينات
طقم الهيموجلوبين السكري (HbA1c)Beckman Coulter (USA)A11A03كشف HbA1c في المصل باستخدام تحليل السائل عالي الأداء (HPLC)
طقم كشف IL-6Roche (Germany)5200057190تقدير كمية الإنترلوكين-6 في المصل
طقم كشف الأنسولينBeckman Coulter (USA)A11A02كشف أنسولين الصيام في المصل عن طريق قياس العكارة المناعي
طقم ELISA لـ Leptin (LEP)R&D Systems (USA)DY398الكشف الكمي عن تركيز LEP في المصل
جهاز طرد مركزي عالي السرعة منخفض الحرارةXiangyi Instrument (China)TDZ5-WSطرد العينات مركزياً عند القوى الطاردة المحددة
طقم miScript SYBR Green PCRQiagen (Germany)218073التحقق من الاتساق المنهجي لكشف miRNA
طقم PrimeScript RT للنسخ العكسيTaKaRa (Japan)RR036Aالنسخ العكسي لـ miRNA لتخليق cDNA
جهاز PCR الكمي بالفلورة في الوقت الحقيقيApplied Biosystems (USA)7500تضخيم qRT-PCR لـ miRNA والكشف عن الفلورة
طقم ELISA لـ Retinol binding protein 4 (RBP4)R&D Systems (USA)DY6005الكشف الكمي عن تركيز RBP4 في المصل
برنامج SPSS للتحليل الإحصائيIBM (USA)25اختبار طبيعية البيانات، والمقارنة بين المجموعات، والارتباط، وتحليل ROC
طقم SYBR Premix Ex Taq IITaKaRa (Japan)RR420Aتضخيم PCR الكمي بالفلورة لـ miRNA
طقم كشف التستوستيرون (T)Roche (Germany)5200067190تقدير مستويات التستوستيرون في المصل
كاشف TRIzol لاستخلاص RNA الكليInvitrogen (USA)15596026استخلاص RNA الكلي من عينات المصل
أنبوب جمع دم مفرغ بدون مضاد للتخثرBD Biosciences (USA)367812جمع دم الوريد المرفقي في حالة الصيام لفصل المصل

المراجع

  1. Stener-Victorin E, et al. Polycystic ovary syndrome. Nat Rev Dis Primers. 2024;10(1):27.
  2. Dokras A, Luque-Ramírez M, Escobar-Morreale HF. Polycystic ovary syndrome: origins and implications: Long-term health outcomes in polycystic ovary syndrome. Reproduction. 2025;170(2):e250118.
  3. Ma YC, Law KS, Wang WS, Chang HM. Phenotypic variations in polycystic ovary syndrome: metabolic risks and emerging biomarkers. J Endocrinol. 2025;267(1):e250226.
  4. Nandi A, Singh K, Sharma K. Advancement in early diagnosis of polycystic ovary syndrome: biomarker-driven innovative diagnostic sensor. Mikrochim Acta. 2025;192(5):331.
  5. Qu J, Lin Z. Autophagy regulation by crosstalk between miRNAs and ubiquitination system. Int J Mol Sci. 2021;22(21):11912.
  6. Bell-Hensley A, Das S, McAlinden A. The miR-181 family: wide-ranging pathophysiological effects on cell fate and function. J Cell Physiol. 2023;238(4):698-713.
  7. Wei R, et al. Qingfei Litan decoction alleviated Klebsiella pneumoniae-induced pneumonia by targeting the TLR4/MyD88/NF-κB axis via miR-146a-5p. J Ethnopharmacol. 2025;349:119947.
  8. Beveridge DJ, et al. The tumor suppressor miR-642a-5p targets Wilms tumor 1 gene and cell-cycle progression in prostate cancer. Sci Rep. 2021;11(1):18003.
  9. Yu K, Cui S, Xue T. LncRNA MIR22HG is downregulated in adenomyosis and upregulates miR-2861 through demethylation to inhibit endometrial cell proliferation. J Obstet Gynaecol Res. 2021;47(5):1837-1845.
  10. Orszulak D, et al. Adipokines as biochemical marker of polycystic ovary syndrome in adolescents - review. Front Endocrinol (Lausanne). 2025;16:1475465.
  11. Koleva-Tyutyundzhieva D, Ilieva-Gerova M, Deneva T, Orbetzova M. Metabolic and inflammatory adipokine profiles in PCOS: a focus on adiposity, insulin resistance, and atherogenic risk. Int J Mol Sci. 2025;26(19):9702.
  12. Dymanowska I, et al. MicroRNAs as biomarkers for metabolic disorders in polycystic ovary syndrome (PCOS): a review. Med Sci Monit. 2024;30:e946480.
  13. Ramaswamy P, et al. Circulating cell-free microRNAs in women with polycystic ovary syndrome: advancing towards biomarker discovery and therapeutic targets. Reprod Sci. 2025;32(7):2137-2179.
  14. Teede HJ, et al. Recommendations from the 2023 international evidence-based guideline for the assessment and management of polycystic ovary syndrome. J Clin Endocrinol Metab. 2023;108(10):2447-2469.
  15. Szukiewicz D, Trojanowski S, Kociszewska A, Szewczyk G. Modulation of the inflammatory response in polycystic ovary syndrome (PCOS): searching for epigenetic factors. Int J Mol Sci. 2022;23(23):14663.
  16. Kim JJ. Obesity and polycystic ovary syndrome. J Obes Metab Syndr. 2024;33(4):289-301.
  17. Gu X, Wang L, Liu S, Shan T. Adipose tissue adipokines and lipokines: functions and regulatory mechanism in skeletal muscle development and homeostasis. Metabolism. 2023;139:155379.
  18. Abdalla MMI. Therapeutic potential of adiponectin in prediabetes: strategies, challenges, and future directions. Ther Adv Endocrinol Metab. 2024;15:20420188231222371.
  19. Yang Q, et al. Serum retinol binding protein 4 contributes to insulin resistance in obesity and type 2 diabetes. Nature. 2005;436(7049):356-362.
  20. Ost A, et al. Retinol-binding protein-4 attenuates insulin-induced phosphorylation of IRS1 and ERK1/2 in primary human adipocytes. FASEB J. 2007;21(13):3696-3704.
  21. Zhu F, et al. MiR-146a alleviates inflammatory bowel disease in mice through systematic regulation of multiple genetic networks. Front Immunol. 2024;15:1366319.
  22. Aydin S, et al. An overview of ELISA: a review and update on best laboratory practices for quantifying peptides and proteins in biological fluids. J Int Med Res. 2025;53(2):3000605251315913.
  23. Candia J, et al. Effects of in vitro hemolysis and repeated freeze-thaw cycles in protein abundance quantification using the SomaScan and Olink assays. J Proteome Res. 2025;24(5):2517-2528.
  24. Liang X, et al. Quality assessment from biobank plasma and serum specimens: a systematic review. PeerJ. 2025;13:e20122.
  25. Singh I, Moar K, Maurya PK. Diagnostic and prognostic biomarkers in polycystic ovary syndrome. Clin Chim Acta. 2025;576:120425.
  26. Hadi S, et al. Extracellular fluid miRNAs in PCOS. Clin Chim Acta. 2025;576:120404.
  27. Insenser M, et al. Validation of circulating microRNAs miR-142-3p and miR-598-3p in women with polycystic ovary syndrome as potential diagnostic markers. Hum Reprod. 2023;38(5):951-960.
  28. Schofield LC, Dialpuri JS, Murshudov GN, Agirre J. Post-translational modifications in the Protein Data Bank. Acta Crystallogr D Struct Biol. 2024;80(Pt 9):647-660.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

بصمات microRNAمؤشرات الالتهاببروتينات استقلاب العناصر الغذائيةmicroRNAs المصليةتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقيمستويات الأديبونكتينمستويات اللبتينالبروتين الرابط للريتينول
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.