مقالة منهجية

تقطيع الوتر بالإبر لعلاج داء الفقار الرقبي في الجرذان: بروتوكول مرئي لإنشاء النموذج والتدخل العلاجي

53 مشاهدة

DOI:

10.3791/72132

سبتمبر 3, 2026

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

تصف هذه الدراسة بالتفصيل طريقة لنمذجة داء الفقار الرقبي في الجرذان واستراتيجية تدخل باستخدام الوخز الإبري الجراحي (acupotomy)، مما يوفر بروتوكولاً تشغيلياً مرئياً للأبحاث ذات الصلة.

الملخص

يعد داء الفقار الرقبي (CS) مرضاً تنكسياً مزمناً. تؤثر التغيرات التنكسية في الأقراص بين الفقرات في العمود الفقري الرقبي، إلى جانب التغيرات المرضية اللاحقة، على الأنسجة والهياكل المحيطة، مما يؤدي إلى مظاهر سريرية مثل آلام الرقبة، والتيبس، ومحدودية الحركة، وأحياناً الخدر والأعراض الإشعاعية في الأطراف العلوية. ومن بين هذه المظاهر، يعد انضغاط جذور الأعصاب هو الأكثر شيوعاً. لذلك، قامت هذه الدراسة بإنشاء نموذج جرذ لداء الفقار الرقبي الناجم عن انضغاط جذور الأعصاب الرقبية. وقد أظهر علاج الوخز الإبري الجراحي (Acupotomy) إمكانات في علاج داء الفقار الرقبي سريرياً من خلال تحرير التصاقات الأنسجة الرخوة الموضعية وتخفيف انضغاط الأعصاب. ومع ذلك، هناك نقص حالي في البروتوكولات الإجرائية المرئية في التجارب الحيوانية. تقدم هذه الدراسة وصفاً تفصيلياً لطريقة موثوقة لإنشاء نموذج جرذ لداء الفقار الرقبي وبروتوكول التدخل بالوخز الإبري الجراحي المقابل. وفي هذا الإجراء، نفصل عملية تحريض النموذج، وخطوات مناورة الوخز الإبري الجراحي، وتحديد الموقع العلاجي، وتقنيات تقييد الجرذان، والاحتياطات الحرجة. بالإضافة إلى ذلك، استخدمت هذه الدراسة تخطيط كهربائية العضلات (EMG) للتأكد من النجاح في إنشاء نموذج داء الفقار الرقبي، وقيمت التدخل من خلال عتبات السحب الميكانيكي، وتحليل المشية، وعلم الأمراض النسيجي لجذور الأعصاب. لا يوفر هذا البحث مرجعاً لإنشاء نموذج جرذ داء الفقار الرقبي والتدخل بالوخز الإبري الجراحي فحسب، بل يقدم أيضاً إطاراً تجريبياً منهجياً وعملياً للدراسات المستقبلية التي تبحث في آليات العمل.

المقدمة

يُعد داء الفقار الرقبي (Cervical spondylosis) مرضاً تنكسياً شائعاً يصيب العمود الفقري. وتنشأ عمليته المرضية الأساسية من تنكس الأقراص بين الفقرات، مما يحفز سلسلة من التغيرات المرضية الثانوية، بما في ذلك تضيق المساحات بين الفقرات، وتكوين النتوءات العظمية، وتضخم الأربطة1,2. وتؤدي هذه التغيرات المرضية إلى مجموعة متنوعة من الأعراض السريرية، مثل التيبس والألم في الرقبة والكتفين، وتنميل إشعاعي في الأطراف العلوية. وفي الحالات الشديدة، قد تحدث اضطرابات عصبية، بما في ذلك خلل في الوظائف الحركية وحتى الشلل الرباعي2,3. ومن الملاحظ أن معدل الإصابة بداء الفقار الرقبي قد ازداد تدريجياً في السنوات الأخيرة، مع انخفاض مستمر في سن ظهور المرض، مما يفرض عبئاً اجتماعياً واقتصادياً كبيراً4. وقد يشمل تنكس الأقراص الرقبية بين الفقرات والتكاثر العظمي الهياكل العظمية والأنسجة الرخوة المجاورة، مما يؤدي إلى تضيق القناة الشوكية الرقبية أو الثقوب بين الفقرات، وبالتالي انضغاط الهياكل القريبة، بما في ذلك جذور الأعصاب الرقبية، والنخاع الشوكي، والشرايين الفقارية1,2,3,4. ومن بين هذه الحالات، يعد انضغاط جذور الأعصاب الرقبية هو الأكثر شيوعاً، حيث يمثل حوالي 60%–70% من جميع حالات داء الفقار الرقبي5,6,7. ورغم توفر عدة مقاربات علاجية في الممارسة السريرية، بما في ذلك العلاج الطبيعي والتدخل الدوائي والجراحة، فقد أصبحت العلاجات غير الجراحية الخيار المفضل لمعظم المرضى نظراً للتكلفة العالية، والصدمات الجسدية الكبيرة، والنتائج غير المضمونة لما بعد الجراحة4. وفي الممارسة الطبية المعاصرة، تُستخدم مضادات الالتهاب غير الستيرويدية والعوامل المغذية للأعصاب بشكل شائع. ورغم أن هذه الأدوية يمكن أن تخفف الألم وتؤخر تطور المرض إلى حد ما، إلا أنها تصحبها تفاعلات عكسية مثل إصابات الجهاز الهضمي وتلف الكلى8,9.

يعتبر العلاج بالوخز الإبري الجراحي (Acupotomy) نمطاً علاجياً مميزاً تم تطويره بناءً على نظريات الوخز الإبري الصينية التقليدية مدمجة مع تقنيات الجراحة الحديثة طفيفة التوغل. وهو يحقق تأثيراته من خلال تسليك وتحرير التصاقات الأنسجة الرخوة، وتنظيم عوامل الالتهاب الموضعية، وتحسين الدورة الدموية الدقيقة في المنطقة10,11,12. وفي السنوات الأخيرة، تم الاعتراف على نطاق واسع بالفعالية السريرية للوخز الإبري الجراحي في علاج داء الفقار الرقبي، حيث أظهر إمكانات واعدة في تخفيف انضغاط الأعصاب، وتسكين الألم، وتحسين الوظيفة الحركية للعنق13,14. ومع ذلك، عند تطبيقه في التجارب الحيوانية، تواجه تدخلات الوخز الإبري الجراحي تحديات مثل عدم دقة التحديد الموضعي وصعوبة التحكم في عمق الإجراء. وفي الوقت ذاته، ومن أجل تحويل هذه الملاحظات السريرية إلى استنتاجات قوية قائمة على الأدلة، يعد إنشاء نماذج حيوانية مستقرة وقابلة للتكرار شرطاً أساسياً. تؤدي طريقة خيط النايلون داخل الفقرات إلى إحداث انضغاط ميكانيكي مباشر عن طريق إدخال خيوط النايلون في الثقبة الوربية، مما يحاكي بدقة العملية المرضية الفيزيولوجية لانضغاط الجذور العصبية السريري15. كما يوفر نهج النمذجة هذا مزايا عدة، مثل قصر دورة النمذجة وإمكانية التحكم في قطاعات الانضغاط15. ومع ذلك، فإن إجراءه الجراحي يعتمد بشكل كبير على الخبرة الشخصية، وتفتقر حالياً المراجع إلى أوصاف تشغيلية مرئية ومفصلة.

تقدم هذه الدراسة بروتوكولاً تجريبياً كاملاً ومفصلاً ومصوراً يغطي إنشاء نموذج جرذ لداء الفقار الرقبي (cervical spondylosis) والإجراء الكامل لتدخل الوخز الإبري الجراحي (acupotomy). ونظراً لأن العوامل المخدرة قد تؤثر على قياس عتبة السحب الميكانيكي وبالتالي تتدخل في النتائج التجريبية16,17,18,19، فقد تم اعتماد جهاز مخصص لتقييد الجرذ في هذه الدراسة. يوفر هذا المقال وصفاً مفصلاً لعملية تحفيز نموذج الجرذ، وخطوات تنفيذ الوخز الإبري الجراحي، والتحديد الدقيق لمواقع العلاج، وطرق تقييد وتثبيت الجرذ، وغيرها من الاحتياطات التجريبية الرئيسية. تم اعتماد أبعاد تقييم متعددة، بما في ذلك قياس عتبة السحب الميكانيكي، والتسجيلات الفيزيولوجية الكهربائية، وتحليل المشية، والملاحظة الهيستوباثولوجية لجذور الأعصاب. تهدف هذه الدراسة إلى توفير بروتوكول مصور لتحفيز النموذج وتدخل الوخز الإبري الجراحي في نموذج جرذ لداء الفقار الرقبي، وبذلك تقدم دعماً منهجياً للتحقيقات الميكانيكية وتقييم فعالية علاج الوخز الإبري الجراحي في علاج داء الفقار الرقبي (CS).

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التجريبية والموافقة عليها ومراقبتها بدقة من قبل لجنة أخلاقيات حيوانات التجارب في شركة Beijing MDKN Biotech (رقم الموافقة: MDKN-2025-096). وقد أُجريت جميع البروتوكولات وفقاً صارماً لدليل رعاية واستخدام حيوانات التجارب الصادر عن المعاهد الوطنية للصحة (NIH). الكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

1. الحيوانات التجريبية والمجموعات

  1. اختر ذكور جرذان Sprague–Dawley (SD) بالغة تزن 230.0 g ± 20 g لإدراجها في التجربة.
  2. أوِ الحيوانات في مرفق مخصص لحيوانات المختبر.
  3. حافظ على درجة الحرارة المحيطة عند 24 °C ± 2 °C والرطوبة النسبية عند 50%–60%، تحت دورة ضوء/ظلام مدتها 12 h. وفر وصولاً غير محدود ad libitum إلى العلف القياسي والماء طوال فترة الدراسة.
  4. بعد فترة تأقلم مدتها 7 أيام، وزع 24 جرذاً عشوائياً على أربع مجموعات (n = 6 لكل مجموعة): مجموعة الضبط الطبيعية (Control)، ومجموعة الجراحة الصورية (Sham)، ومجموعة نموذج متلازمة تضيق القناة الشوكية (Model)، ومجموعة قطع الوتر بالإبر (acupotomy). يوضح المخطط الزمني للتصميم التجريبي في الشكل 1.

2. إنشاء نموذج CS

ملاحظة: يتم منع الطعام والماء عن جميع الجرذان لمدة 12 h قبل البدء في عملية النمذجة. يتم وزن الجرذان وتسجيل وزن الجسم. تُعقم جميع الأدوات الجراحية باستخدام جهاز التعقيم بالبخار عالي الضغط (الشكل 2A).

  1. قم بتجهيز خيوط النايلون قبل يوم واحد من الجراحة عن طريق قطعها إلى قطع بقطر 0.5 مم وطول 1 سم تقريباً. اغمر الخيوط في إيثانول بتركيز 75% لمدة 4 ساعات، وجففها في ظروف معقمة، ثم انقعها في محلول بولي-إل-لايسين (poly-L-lysine) بتركيز 0.1% لمدة 8 ساعات لتعزيز الالتصاق بالأنسجة.
  2. ضع الجرذ في غرفة التحريض. قم بتحريض التخدير باستخدام الإيزوفلوران بنسبة 4%، ثم حافظ على التخدير بنسبة 1.5% إلى 2.0% من الإيزوفلوران. عبر قناع للوجه. يتم تثبيت الحيوان في وضعية الانكفاء (وفقاً للبروتوكولات المعتمدة مؤسسياً).
  3. احلق منطقة الرقبة الظهرية للكشف الكامل عن المجال الجراحي. قم بتطهير المنطقة الجراحية ثلاث مرات باستخدام بوفيدون أيودين من الداخل إلى الخارج، وكرر إجراء التطهير باستخدام إيثانول بتركيز 75%.
  4. قم بجس وتحديد أعلى نتوء شوكي (T2) على ظهر الجرذ. قم بإجراء شق جلدي ظهري في الخط الناصف بطول 3 سم تقريبًا، يمتد من الناحية القحفية بدءًا من قمة النتوء الشوكي T2. قم بتشريح الأنسجة تحت الجلد وعضلات الرقبة الخلفية تشريحًا كليلًا (الشكل 2B).
  5. قم بكشف القوس الفقري الأيسر تماماً من الفقرة العنقية الخامسة (C5) إلى الفقرة الصدرية الأولى (T1)، واكشط الأنسجة العضلية والضامة التي تعلوه بشكل شامل (الشكل 2ج).
  6. قم بتشريح الرباط الأصفر والأنسجة الضامة في المسافات بين الفقرات C6–C7 وC7–T1 برفق باستخدام ملقط دقيق. افتح القوس الفقري الأيسر للفقرة C7 باستخدام ملقط mosquito لكشف الحبل الشوكي.
  7. أزح الحبل الشوكي برفق نحو الجانب الأيمن باستخدام مفرق أعصاب عيني. ضع خيط النايلون المعقم أسفل الجذور العصبية C6–C7 وC7–T1 على طول المحور الطولي للحبل الشوكي باستخدام ملقط جراحة مجهرية؛ وتجنب الضغط المفرط لمنع حدوث إصابة في الأوردة الفقرية.
    ملاحظة: يتم كشف الحبل الشوكي عند الموقع التشريحي ذاته في المجموعة الشاهدة (sham group) دون إدخال خيط النايلون.
  8. أغلق الشق الجراحي وخِطه طبقة تلو الأخرى عند الانتهاء من الإجراء.
  9. انقل الجرذان إلى وسادة تدفئة ذات تحكم حراري يتم الحفاظ عليها عند 37 °C، ومراقبة العلامات الحيوية حتى استعادة الوعي الكامل.
  10. يُعطى حقن عضلي من محلول بنسيلين الصوديوم بجرعة 50,000 وحدة في الطرف الخلفي للوقاية من العدوى بعد الجراحة. ثم تُعاد الحيوانات إلى أقفاصها الأصلية للتعافي بعد الجراحة.

3. إجراء التقييد

  1. ثبّت الجرذ في كم شبكي أسود للتقييد.
  2. ثبّت رباطين من النايلون على إطار بلاستيكي. يثبت الرباط العلوي عند المنطقة الإبطية والرباط السفلي حول منطقة الحوض (الشكل 3B).
    ملاحظة: استخدم لوحة بلاستيكية بمقاس 200 mm × 300 mm × 5 mm، مثقبة بفتحات مقاس 20 mm × 4 mm متباعدة بمسافات 10 mm على طول الحواف الطويلة ومسافات 3 mm على طول الحواف القصيرة، ومجهزة بخمس أرجل دعم تقع في المركز والزوايا الأربع (الشكل 3A).
  3. بعد استحثاث النموذج، كرر إجراء التقييد المذكور أعلاه لكل جرذ في جميع المجموعات لمدة ثلاثة أيام متتالية لضمان التعود الكافي. حافظ على كل جلسة تقييد لمدة لا تقل عن 5 min يومياً.

4. علاج الوخز الإبري الجراحي (Acupotomy)

  1. ابدأ تدخل عملية القطع بالإبر في النقطة 4th اليوم التالي لإنشاء النموذج.
  2. قم بتجهيز إبر الوخز الجراحي (acupotomy) المعقمة والمخصصة للاستخدام مرة واحدة (القطر: 0.40 مم؛ الطول: 40 مم).
  3. أزل الفراء عن المنطقة الرقبية للكشف تماماً عن المجال الجراحي.
  4. قم بجس الأنسجة الرخوة على جانبي النتوءات الشوكية الرقبية لتحديد العقد المتصلبة أو الهياكل التي تشبه الحبال. حدد نقطة نتوء شوكي واحدة عند الفقرة العنقية السادسة (C6) أو السابعة (C7)، ثم حدد نقطتين إضافيتين تبعدان حوالي 0.5 سم جانبيًا عن كل طرف من هذا النتوء الشوكي.
  5. حدد هذه المواقع الثلاثة كنقاط لإدخال الوخز الجراحي وقم بتأشيرها (الشكل 3ج).
  6. قم بتطهير مواقع الإدخال المحددة باستخدام بوفيدون أيودين طبي، يليه إيثانول طبي بتركيز 75%.
  7. وجه الحافة القاطعة لإبرة الـ acupotomy بحيث تكون موازية للخط الناصع الخلفي، وحافظ على عمود الإبرة عمودياً على المستوى الإكليلي العنقي الخلفي أثناء الإدخال.
  8. قم بتطبيق ضغط خفيف فوق موقع الإدخال باستخدام إبهام اليد اليسرى، مع تثبيت إبرة البضع الوخزي (acupotomy) بإحكام بين إبهام اليد اليمنى وسبابتها. اخترق الأنسجة تحت الجلد بسرعة في اتجاه عمودي، ثم دفع الإبرة ببطء حتى الوصول إلى السطح العظمي.
  9. أجرِ قطعاً طولياً موضعياً ثلاث مرات، وتحريراً للأنسجة الرخوة عرضياً مرتين داخل المنطقة المصابة، مع حصر النطاق الجراحي في حدود 1 مم. اسحب الإبرة عند الانتهاء من هذه المناورة (الشكل 3D).
  10. قم بتطبيق ضغط قوي على موقع الإدخال لمدة 3 دقائق لتحقيق الإرقاء. قم بإجراء تدخل الوخز الإبري الجراحي (acupotomy) مرة واحدة كل 5 أيام، وبإجمالي ثلاث جلسات.
    ملاحظة: باستثناء مجموعة الوخز الإبرِي الجراحي، لا تتلقى المجموعات الثلاث الأخرى أي تدخل علاجي. ومع ذلك، يتم تثبيت الحيوانات في هذه المجموعات بنفس الطريقة ولمدة مماثلة لتلك المستخدمة في مجموعة الوخز الإبرِي الجراحي.

5. اختبار عتبة السحب الميكانيكي (MWT)

ملاحظة: أجرِ القياس في اليوم الذي يسبق جراحة إنشاء النموذج، وهو اليوم الثالث.البحث والتطوير يوم، والـ 14th في اليوم التالي للجراحة، باستخدام محفز ألم ميكانيكي أخمصي للجرذان والفئران.

  1. ضع كل جرذ في غرفة اختبار شفافة مثبتة على أرضية من الشبكة المعدنية في بيئة هادئة يتم الحفاظ عليها عند 24 °C ± 2 °C.
  2. اترك الجرذ يتأقلم داخل الغرفة لمدة 5 min على الأقل، أو حتى تهدأ سلوكيات الاستكشاف والتنظيف إلى حد كبير.
  3. ضع طرف خيط von Frey بشكل عمودي على السطح الأخمصي للقائمة الأمامية اليسرى، بين عظمي مشط اليد الثالث والرابع. قم بتطبيق التحفيز من الأسفل عبر الشبكة المعدنية حتى يتم استثارة استجابة سريعة تتمثل في سحب القائمة، أو اللعق، أو الهز.
  4. سجل القيمة المعروضة لحظة السحب باعتبارها عتبة الألم الميكانيكية.
  5. بعد اختبار كل جرذ، امسح أرضية الشبكة المعدنية والجدران الداخلية للغرفة جيدًا باستخدام كحول طبي بتركيز 75%، ثم جففها بشاش نظيف لإزالة الروائح المتبقية التي قد تؤثر على الاختبارات السلوكية اللاحقة. لا تدخل الجرذ التالي إلا بعد أن يجف الجهاز تمامًا.
    ​ملاحظة: اختبر جميع الجرذان بالتتابع وبترتيب دوري لثلاث جولات. حافظ على فاصل زمني لا يقل عن 10 min بين قياسين متتاليين لـ MWT في الجرذ نفسه. استخدم متوسط القياسات الثلاثة كقيمة MWT النهائية لكل جرذ.

6. تسجيل تخطيط كهربائية العضلات (EMG)

ملاحظة: يتم إجراء تخطيط كهربائية العضلات (EMG) في حالة الراحة في اليوم الثالث بعد إنشاء النموذج باستخدام نظام الحصول على الإشارات البيولوجية وتحليلها.

  1. يتم تخدير الجرذ عن طريق استنشاق الإيزوفلوران (تركيز التحريض 3%–4%، وتركيز الحفاظ 1.5%–2.0%). يتم تثبيت الحيوان في وضعية الانبطاح على منصة التجارب وكشف الطرف الأمامي الأيسر بالكامل.
  2. يتم توصيل أسلاك التوصيل الخاصة بأقطاب التسجيل بقنوات الاستحواذ المخصصة. يتم تشغيل برنامج الاستحواذ، واختيار وضع إشارة EMG، وضبط تردد أخذ العينات على 20 kHz مع نطاق مرشح تمرير نطاقي يتراوح بين 15 Hz–5 kHz.
  3. تُطهر عضلات الطرف الأمامي الأيسر (العضلة ثانية رأسية الرضفة، والعضلة ثانية رأسية الزندية، والعضلة ذات الرأسين العضدية، والعضلة ثلاثية الرؤوس العضدية) باستخدام كرات قطنية منزوعة الدسم ومبللة بإيثانول طبي بتركيز 75%.
  4. يُدخل قطب التسجيل الإبري بشكل عمودي في بطن العضلة، بحيث يكون موجهاً بشكل متعامد مع اتجاه الألياف العضلية. يُدخل قطب إبري ثانٍ على بعد 3–5 mm ليكون قطب مرجع، ويُدخل قطب التأريض في قاعدة الذيل.
  5. يتم رصد نشاط الإدخال مباشرة بعد إدخال الإبرة. وبمجرد اختفاء جهود الإدخال واسترخاء العضلة تماماً، يتم تسجيل إشارة EMG في حالة الراحة لمدة 1 min لكل جرذ.
    ملاحظة: يجب الحفاظ على بيئة هادئة طوال فترة التسجيل وتقليل التداخل الكهرومغناطيسي الخارجي. تشمل التداخلات الشائعة تداخل تردد الطاقة الناتج عن التيار المتردد والضوضاء عالية التردد الصادرة عن معدات المختبر الأخرى، والتي تظهر في شكل موجات جيبية منتظمة متراكبة على مخططات كهربية العضلات. يمكن تقليل هذه التداخلات من خلال التأريض، وإعدادات المرشح، والإدارة البيئية.
  6. تُسحب جميع الأقطاب الإبرية بعناية ويُعاد الجرذ إلى قفصه، مع السماح له بالتعافي تلقائياً من التخدير.
  7. بعد الانتهاء من تسجيل EMG لكل جرذ، تُنظف الأقطاب الإبرية بإيثانول طبي بتركيز 75% باستخدام كرات قطنية منزوعة الدسم، وتُجفف جيداً باستخدام شاش معقم لمنع التلوث الخلطي.

7. تحليل المشية في الجرذان

ملاحظة: يتم إجراء تحليل المشية في اليوم الأول بعد إتمام تدخل الـ acupotomy (اليوم 15 بعد الجراحة النموذجية). يتكون نظام تحليل المشية من جهاز سير كهربائي مزود بحزام شفاف، وكاميرا رقمية عالية السرعة موضوعة أسفل الحزام، ومحطة عمل حاسوبية.

  1. ضع الجرذ على مسار جهاز المشي واتركه ليتكيف بحرية لمدة 3 min.
  2. قم بتشغيل سير جهاز المشي وزد السرعة تدريجياً من 5.0 cm/s حتى يظهر الجرذ مشية مستقرة دون سلوك استكشافي.​
  3. التقط فيديو للمشي من المنظر البطني (من الأسفل) لمدة 10 s للجرذ باستخدام الكاميرا عالية السرعة.
  4. بعد الانتهاء من اختبار كل جرذ، امسح سير جهاز المشي وغرفة الاختبار جيداً باستخدام ethanol بتركيز 75% للقضاء على الروائح المتبقية التي قد تؤثر على التقييمات السلوكية اللاحقة. اترك السير ليجف تماماً قبل إدخال الجرذ التالي.
  5. استورد الفيديوهات المسجلة إلى برنامج التحليل. استخدم البرنامج لتحديد موضع وضع القوائم لكل طرف واستخراج سلسلة من معاملات المشية.
  6. عند الانتهاء من التحليل الآلي، قم بتصدير بيانات معاملات المشية لإجراء التحليل الإحصائي اللاحق.
  7. قم بتضمين معاملات المشية التالية في الدراسة الحالية: متوسط مساحة بصمة القائمة الأمامية اليسرى (متوسط حجم بصمة القدم على مدار فترة الارتكاز بأكملها)، والحد الأقصى لمساحة ارتكاز القائمة الأمامية اليسرى (أقصى حجم لبصمة القدم على مدار فترة الارتكاز بأكملها)، وضغط الارتكاز للقائمة الأمامية اليسرى (الذي يعكس الشدة النسبية لضغط القائمة أثناء مرحلة الارتكاز كما سجلها نظام تحليل المشية).
    ​ملاحظة: سجل ثلاث تسلسلات مشي صالحة لكل جرذ واستخدم متوسط القياسات الثلاثة للتحليل.

8. صبغ أنسجة الجذر العصبي بصبغة HE

ملاحظة: بعد إجراء الاختبارات السلوكية في اليوم 15 بعد الجراحة النموذجية، يتم جمع عينات من أنسجة الجذر العصبي لصبغها بصبغة HE.

  1. يتم تخدير الجرذان عن طريق الحقن داخل الصفاق بـ sodium pentobarbital بتركيز 2% (0.3 mL/100 g)، ثم يتم إجراء تروية عبر القلب باستخدام paraformaldehyde.
  2. يتم تشريح جذور الأعصاب الشوكية C6–T1 وغمر النسيج في 4% paraformaldehyde عند درجة حرارة 4 °C للتثبيت اللاحق لمدة 48 h.
    تنبيه: يجب التعامل مع paraformaldehyde كمادة مهيجة في بيئة جيدة التهوية أو داخل خزانة استخلاص الغازات الكيميائية.
  3. يُشطف نسيج جذر العصب المثبت تحت مياه الحنفية الجارية لمدة 1 h لإزالة المثبت المتبقي.
  4. يخضع النسيج لعملية تجفيف متدرجة بالإيثانول، ثم يتم ترويقه بالتتابع في xylene (I) وxylene (II)، ثم يُطمر في البارافين، ويُقطع بسمك 3–5 µm. تُجفف القطاعات حرارياً عند 65 °C.
  5. يتم إزالة الشمع من القطاعات بالتتابع في xylene (I) وxylene (II)، لمدة 8 min لكل منهما. ثم يُعاد ترطيب القطاعات عبر سلسلة متدرجة من الإيثانول (100% لمدة 15 min، و95% لمدة 5 min، و80% لمدة 5 min، و70% لمدة 3 min)، ثم تُغمر في ماء مقطر لمدة 2 min.
  6. تُصبغ القطاعات بمحلول hematoxylin لمدة 5 s، ثم تُشطف في مياه جارية لمدة 2 min لإزالة الصبغة الزائدة.
  7. يتم تمايز القطاعات في ماء مقطر لمدة 30 s. ثم تُغمر القطاعات في إيثانول 70% لمدة 10 s، يليه إيثانول 80% لمدة 10 s.
  8. تُصبغ القطاعات بمحلول eosin لمدة 4 min، ثم تُشطف تحت مياه جارية لإزالة الصبغة السطحية. تُجفف القطاعات عبر إيثانول متدرج (70% لمدة 10 s، و80% لمدة 10 s، و95% لمدة 10 s، و100% لمدة 160 s)، ثم تُروق في xylene لمدة 4 min.
  9. تُثبت الشرائح باستخدام راتنج متعادل.
  10. تُفحص التغيرات الباثولوجية والمورفولوجية لنسيج جذر العصب الشوكي تحت مجهر ضوئي بتكبير 400×، ويتم التقاط صور مجهرية من حقول مستهدفة ممثلة.

9. التحليل الإحصائي

  1. أجرِ التحليلات الإحصائية باستخدام برنامج SPSS. وعبر عن المتغيرات المستمرة التي تتبع توزيعاً طبيعياً في صورة المتوسط ± الانحراف المعياري.
  2. بناءً على افتراضات التوزيع الطبيعي وتجانس التباين، حلل عتبات السحب الميكانيكي باستخدام تحليل التباين للقياسات المتكررة، وحلل معايير المشي باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (one-way ANOVA). ثم أجرِ مقارنات زوجية لاحقة بين المجموعات باستخدام اختبار أقل فرق معنوي (LSD).
  3. طبق الاختبارات اللامعلمية إذا لم تتحقق افتراضات التوزيع الطبيعي أو تجانس التباين.
  4. تُعتبر الفروق ذات دلالة إحصائية عندما تكون قيمة p < 0.05.

النتائج

أظهرت تقييمات عتبة السحب الميكانيكي (MWT) قيمًا أساسية متقاربة في جميع المجموعات قبل تحفيز النموذج. وفي اليوم الثالث بعد النمذجة والعملية الصورية، لم يُلاحظ وجود فرق معنوي بين المجموعة الصورية ومجموعة التحكم (p > 0.05). وفي المقابل، أظهرت كل من مجموعة النموذج ومجموعة الوخز الجراحي انخفاضًا ملحوظًا في MWT مقارنة بالمجموعة الصورية (p < 0.01، الشكل 4). وعند اكتمال العلاج، أظهرت مجموعة الوخز الجراحي ارتفاعًا معنويًا في MWT مقارنة بمجموعة النموذج (p < 0.05، الشكل 4).

كشفت تسجيلات تخطيط كهربائية العضلات (EMG) أنه في اليوم الـ 3بحث وتطوير في اليوم التالي لعملية النمذجة والعملية الوهمية، كان من الممكن اكتشاف أنشطة تلقائية غير طبيعية، مثل جهود الرجفان والموجات الحادة الموجبة، أثناء الراحة في تخطيط كهربية العضلات بالإبرة (needle EMG) لكل من مجموعة النموذج ومجموعات الوخز الإبري الجراحي (acupotomy). وفي المقابل، لم تُلاحظ أي تفريغات تلقائية غير طبيعية في مخططات تخطيط كهربية العضلات بالإبرة أثناء الراحة لمجموعات الضبط أو المجموعات الوهمية (الشكل 5). وفي حال عدم وجود جهود تلقائية غير طبيعية في الجانب المصاب، فإن ذلك يشير إلى أن النموذج قد لا يكون قد نجح في إتلاف الجذر العصبي المستهدف، مما يستوجب إعادة مراجعة الإجراء الجراحي.

كشف تحليل المشية أنه بعد إتمام العلاج، لم تختلف متوسط مساحة البصمة، وأقصى مساحة للثبات، وضغط الثبات في المجموعة الوهمية بشكل ملحوظ عن مثيلاتها في المجموعة الضابطة (p > 0.05). وفي المقابل، انخفضت جميع معاملات المشية بشكل ملحوظ في مجموعة النموذج مقارنة بالمجموعة الوهمية (p < 0.001). وبالنسبة لمجموعة النموذج، أظهرت مجموعة الوخز الجراحي ارتفاعات ملحوظة في كل من مؤشرات المشية هذه (p < 0.05، الشكل 6). تمثل متوسط مساحة البصمة متوسط حجم بصمة القدم على مدار كامل مرحلة الثبات. بينما تمثل أقصى مساحة للثبات أكبر حجم لبصمة القدم خلال كامل مرحلة الثبات. ويعكس ضغط الوقوف الكثافة النسبية لضغط المخلب خلال مرحلة الثبات كما سجلها نظام تحليل المشية.

أظهر صبغ HE لأنسجة جذر العصب الرقبي أنه في مجموعتي الضبط والمجموعة الوهمية، بدت مورفولوجيا أنسجة جذر العصب طبيعية أساساً؛ حيث كانت الألياف العصبية وأجسام الخلايا العصبية مرتبة بشكل منظم ومدمج نسبياً، مع حدود هيكلية محددة جيداً وعدم وجود وذمة خلالية واضحة. وفي مقابل المجموعة الوهمية، أظهرت مجموعة النموذج تغيرات مرضية واضحة تشير إلى إصابة جذر العصب، تميزت بترتيبات مفككة وغير منظمة للألياف العصبية وأجسام الخلايا، وتمزق وتشوه في مجموعة فرعية من الخلايا العصبية، وتجزؤ جزئي للألياف، ووذمة خلالية ملحوظة. وبالمقارنة مع مجموعة النموذج، أدى علاج القطع الإبري إلى تحسين هذه الآفات المرضية بشكل ملحوظ، وهو ما ظهر من خلال محاذاة أكثر انتظاماً للألياف العصبية وأجسام الخلايا، وتخفيف الوذمة الخلالية، واستعادة جزئية للسلامة الهيكلية للنسيج العصبي (الشكل 7).

مخطط زمني لعملية العلاج بالوخز الجراحي مع اختبارات عتبة سحب الميكانيكية (MWT)، وتسجيل تخطيط كهربائية العضلات (EMG)، وتحليل المشية.
الشكل 1مخطط المحور الزمني للتصميم التجريبي. بعد فترة تغذية تكيفية لمدة 7 أيام، تم إنشاء نماذج متلازمة الضغط المزمن (CS) في كل من مجموعة النموذج ومجموعة الوخز الإبري الجراحي من الجرذان. أما مجموعة التحكم الشكلي، فقد تعرضت منطقة النخاع الشوكي فيها لنفس الإجراء الذي خضعت له مجموعة النموذج، ولكن دون وضع خيط الصيد. بدأ تدخل الوخز الإبري الجراحي في اليوم الرابع...th يوم واحد بعد نجاح النمذجة في مجموعة الوخز الإبري الجراحي. تم قياس عتبات الألم الميكانيكية للفئران في اليوم السابق للنمذجة، وفي اليوم الثالث بعد الجراحة، وعند نهاية التدخل في اليوم الرابع عشر بعد الجراحة. وأُجري تقييم تخطيط كهربائية العضلات في اليوم الثالث بعد الجراحة لتقييم انضغاط جذر العصب. كما أُجري تحليل المشية في اليوم الخامس عشر بعد الجراحة عقب التدخل لتقييم وظيفة التنسيق الحركي للفئران. جُمعت عينات الكشف بعد الاختبارات السلوكية في اليوم الخامس عشر بعد الجراحة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

إعداد الأدوات الجراحية، وعملية تشريح القارض، ومخطط توضيحي يحدد كشف الفقرات لدراسة التشريح.
الشكل 2: إنشاء نموذج جرذ CS. (A) الأدوات الجراحية المستخدمة لتحفيز النموذج. (B) الشق العنقي الظهري وتشريح الأنسجة. (C) الصفائح الفقارية العنقية C5–T1 اليسرى. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

تجهيز أبحاث الحيوان، بما في ذلك مخطط تثبيت الجرذ، لإعداد إجراء طبي.
الشكل 3إجراء تدخل التشريط الإبري. (Aلوح بلاستيكي يستخدم لتقييد الجرذان.B) رسم تخطيطي يوضح عملية تقييد الجرذات. (كربون) المعالم السطحية التشريحية المقابلة للنتوءات الشوكية للفقرات العنقية السادسة (C6) والسابعة (C7) في الجرذان. (دتمثيل تخطيطي لعلاج الوخز الإبرِي الجراحي (acupotomy) في الجرذان. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

مخطط بياني شريطي يوضح عتبة السحب الميكانيكي عبر المجموعات: الضابطة، والوهمية، والنموذجية، ومجموعة قطع الوصلات العصبية.
الشكل 4: مقارنة عتبة السحب الميكانيكي بين مجموعات الجرذان التجريبية الأربع (العدد = 6 لكل مجموعة). **p < 0.01 مقابل مجموعة العملية الوهمية؛ #p < 0.05 مقابل مجموعة النموذج. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

مقارنة سعة شكل الموجة؛ يظهر A و B ضوضاء عالية؛ يظهر C و D ضوضاء منخفضة؛ مخطط تحليل الإشارة الصوتية.
الشكل 5: مخططات كهربية العضلات للطرف الأمامي في حالة الراحة في المجموعات التجريبية الأربع بعد استحثاث النموذج. (A) مخطط كهربية العضلات للطرف الأمامي في مجموعة النموذج. (B) مخطط كهربية العضلات للطرف الأمامي في مجموعة الوخز الإبري الجراحي. (C) مخطط كهربية العضلات للطرف الأمامي في مجموعة الضبط. (D) مخطط كهربية العضلات للطرف الأمامي في مجموعة الإجراء الصوري. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

مخطط شريطي يقارن متوسط مساحة البصمة، وأقصى مساحة للوقوف، وضغط الوقوف بين أربع مجموعات.
الشكل 6: مقارنة بارامترات المشية بين مجموعات الجرذان التجريبية الأربع (n = 6 لكل مجموعة). (A) مقارنة متوسط مساحة البصمة. (B) مقارنة أقصى مساحة للوقوف. (C) مقارنة ضغط الوقوف. ***p < 0.001 مقارنة بمجموعة العملية الوهمية؛ #p < 0.05 مقارنة بمجموعة النموذج. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

مقارنة لأنسجة علم الأنسجة، أربع شرائح، صورة مجهرية، مقياس 100μm للتحليل الخلوي.
الشكل 7: صبغ HE لأنسجة الجذر العصبي من مجموعات الجرذان التجريبية الأربع بتكبير 400×. (A) صبغ HE للمجموعة الضابطة. (B) صبغ HE لمجموعة الشام. (C) صبغ HE لمجموعة النموذج. (D) صبغ HE لمجموعة الوخز الجراحي. شريط المقياس = 100 µm. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

المناقشة

يُعد اختيار النموذج الحيواني المناسب شرطاً أساسياً لتوضيح مسببات داء الفقار الرقبي (CS) وللتقييم الدقيق للتدخلات العلاجية. حالياً، تُعتمد طريقة خياطة النايلون داخل الفقرات على نطاق واسع نظراً لمزاياها المتمثلة في البساطة النسبية، وقصر دورة إنشاء النموذج، والقدرة العالية على التكرار والموثوقية15,20. في هذا النهج، يتم زرع مادة ضاغطة في القناة الشوكية للجرذ لإحداث ضغط مستمر على جذور الأعصاب الشوكية الرقبية، مما يحاكي الحالة المرضية لانحشار جذر العصب الناتج عن الانزلاق الغضروفي بين الفقرات أو تضخم النتوءات العظمية في الحالات السريرية. ومن بين الإصابات الثانوية المرتبطة بداء الفقار الرقبي، يُعد انضغاط جذر العصب هو الأكثر شيوعاً ويشكل سبباً رئيسياً للمظاهر السريرية الواضحة، والتي تظهر عادةً على شكل ألم في الرقبة، وتصلب، وأعراض إشعاعية في الأطراف العلوية5,7,21. وبناءً على ذلك، اعتمدت هذه الدراسة طريقة خياطة النايلون داخل الفقرات لإنشاء نموذج جرذ مصاب بداء الفقار الرقبي، وقدمت بروتوكولاً تشغيلياً مرئياً لإنشاء النموذج والتدخل عن طريق الوخز الإبري الجراحي (acupotomy) في الجرذان المصابة بداء الفقار الرقبي.

بعد انضغاط الجذر العصبي، قد يؤدي نقص التروية الموضعي، والاستجابات الالتهابية، والتهيج الميكانيكي إلى إحداث تحسس محيطي ومركزي، مما يؤدي في النهاية إلى فرط التألم22,23,24,25,26. وقد أظهرت النتائج الحالية انخفاضاً ملحوظاً في عتبة الألم الميكانيكي للقائمة الأمامية في الجانب المصاب لدى الجرذان بعد استحثاث النموذج، مما يشير إلى أن الإجراء نجح في إحداث فرط تألم ميكانيكي. وفي الجرذان التي تلقت تدخل العلاج بالوخز الجراحي (acupotomy)، استعادت عتبة السحب الميكانيكي مستواها بشكل ملحوظ، مما يشير إلى أن تحرير الوخز الجراحي يخفف بفعالية من حالة تحسس الألم. لا يؤثر الألم على عتبات الحس فحسب، بل يغير أيضاً أنماط الحركة التلقائية للحيوانات. وتوفر أنظمة تحليل المشية، من خلال التقاط المعاملات الزمانية والمكانية لآثار القوائم أثناء الحركة، تقديراً كمياً موضوعياً لتغيرات المشية التعويضية الناجمة عن الألم، وبذلك تتجاوز الذاتية الواضحة المتأصلة في طرق تسجيل السلوك التقليدية27. في هذه الدراسة، أظهرت الجرذان في مجموعة النموذج انخفاضاً في متوسط مساحة الأثر، وأقصى مساحة للارتكاز، وضغط الارتكاز للقائمة الأمامية في الجانب المصاب، مما يعكس سلوك تجنب الحمل وتغيرات المشية الحمائية الثانوية للألم. وفي المقابل، أظهرت الجرذان التي خضعت لتدخل الوخز الجراحي ميلاً نحو التطبيع في معاملات المشية هذه، مما يشير إلى أن العلاج بالوخز الجراحي، مع تخفيفه للألم، يعمل أيضاً على تحسين التنسيق الحركي. كما كشفت الملاحظات النسيجية الشكلية عن وجود اختلافات بين المجموعات في ترتيب ومورفولوجيا الألياف العصبية وأجسام الخلايا العصبية داخل الجذر العصبي، وكذلك في درجة الوذمة الخلالية. وتشير هذه النتائج إلى أن العلاج بالوخز الجراحي قد يخفف من التغيرات المرضية في الجذر العصبي.

لا يؤدي انضغاط الجذر العصبي إلى إحداث اضطرابات في التوصيل الحسي فحسب، بل قد يؤدي أيضاً إلى فقدان التعصيب أو فرط استثارة غير طبيعي في العضلات التي يغذيها العصب. يوفر تخطيط كهربائية العضلات (EMG) في حالة الراحة، من خلال تسجيل النشاط الكهربائي التلقائي (مثل جهود الرجفان والموجات الحادة الإيجابية) في عضلة مسترخية تماماً، مؤشراً حساساً للاستثارة غير الطبيعية في الغشاء الساركوليمي الثانوية للإصابة عصبية المنشأ، ويشكل وسيلة كهرومغناطيسية محورية لتقييم اعتلالات الجذور العصبية في كل من السياقين السريري والتجريبي28,29,30. وفي الظروف الفسيولوجية، تظهر العضلة المسترخية تماماً صمتاً كهربائياً، مع غياب التفريغات التلقائية. وفي هذه الدراسة، تم اكتشاف تفريغات تلقائية واضحة في العضلات المستريحة للطرف الأمامي في نفس الجانب لدى الجرذان بعد استحثاث النموذج. ويعد نشاط تخطيط كهربائية العضلات غير الطبيعي في حالة الراحة مظهراً مميزاً للتلف عصبي المنشأ، ويشير إلى أن الجذور العصبية العنقية لهذه الجرذان قد تكون تعرضت لانضغاط مستمر31. وقد أكدت نتائج تخطيط كهربائية العضلات غير الطبيعية في مجموعتي النموذج وقطع الوتر (acupotomy) بعد النمذجة نجاح إنشاء نموذج الجرذ المصاب بـ CS من منظور كهرومغناطيسي.

لتجنب تداخل التقييمات السلوكية مع التأثيرات التراكمية للتخدير المتكرر، تم إجراء تدخل القطع بالإبر (acupotomy) في هذه الدراسة باستخدام جهاز تقييد على حيوانات مستيقظة32. وقد أظهرت تقارير سابقة أن التدريب الكافي على التعود والتعرض المتكرر يمكن أن يقلل بشكل ملحوظ من استجابات الإجهاد الناجم عن التقييد33,34,35,36. وهذا يشير إلى أن التدريب على التعود قبل التدخل في هذا البروتوكول يمكن أن يقلل بفعالية من تداخل إجهاد التقييد الحاد مع المؤشرات التجريبية.

لا تخلو هذه الدراسة من بعض القيود. أولاً، تعيد طريقة خياطة النايلون داخل الفقرات إنتاج الضغط الميكانيكي الحاد أو تحت الحاد بشكل أساسي، في حين أن تضيق القناة الشوكية (CS) لدى البشر يتبع عادةً مساراً تنكسياً مزمناً. ثانياً، وعلى الرغم من تصميم بروتوكول التقييد الحالي لتقليل الإجهاد، إلا أنه ينبغي في البحوث المستقبلية تقييم المؤشرات الحيوية المرتبطة بالإجهاد، مثل الكورتيزول في المصل، لتقييم تأثير جهاز التقييد بشكل أكثر شمولاً.

وفي الختام، توفر هذه الدراسة إجراءً تشغيلياً مفصلاً لإنشاء نموذج جرذ لداء التضيق الشوكي (CS) ومن ثم معالجته باستخدام الوخز الإبري الجراحي (acupotomy). وتشير النتائج إلى أن تحرير الوخز الإبري الجراحي يرفع بشكل ملحوظ عتبات الألم الميكانيكية، ويحسن أنماط المشي المتجنبة للألم، ويخفف من التغيرات المرضية في جذر العصب. وبذلك، يوفر هذا العمل إطاراً تجريبياً منهجياً وعملياً لتوضيح الآليات الكامنة وراء العلاج بالوخز الإبري الجراحي لعلاج داء التضيق الشوكي (CS).

الإفصاحات

أقر جميع المؤلفين بعدم وجود أي تضارب محتمل في المصالح.

شكر وتقدير

تم دعم هذه الدراسة من قبل البرنامج الوطني الرئيسي للبحث والتطوير في الصين (منحة رقم 2023YFC3502703) والمشروع الرئيسي للصندوق المشترك للابتكار والتطوير التابع لمؤسسة العلوم الطبيعية بمقاطعة هوبي (منحة رقم 2024AFD271).

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
حقنة سعة 0.5 ملشركة Hebei Yunsheng Biotechnology Co., LtdSN-04442
سرنجة سعة 1 ملشركة شنغهاي تشييو للمعدات الطبية المحدودة (Shanghai Zhiyu Medical Equipment Co., LTD)ZSQ-1
خيط جراحي 4-0 مع إبرة، أحادي الذراع (4×12)زجاجJZZSX193
كحول بتركيز 75%شركة Shandong Anjie Gaoke Disinfection Technology Co. LTD٧٥-٥٠٠ مل
إبرة الوخز الجراحي (Acupotomy Needle)شركة بكين هواشيا بلو تشيب للتكنولوجيا الحيوية المحدودة (Beijing Huaxia Blue Chip Biotechnology Co., Ltd.)HY0440
شريحة التصاقسيتوتست (CITOTEST)188105
نظام الحصول على الإشارات البيولوجية وتحليلهاتكمانBL-420N
نظام استحواذ وتحليل الإشارات البيولوجية (برمجيات)تيكمان (Techman)BL-420N الإصدار 3.0.0.237
غطاء شريحةشركة Citotest Labware Manufacturing Co.,Ltd لتصنيع الأدوات المختبرية10212432C
مجففDIAPATHدوناتيلو
ميزان إلكترونيMettler-ToledoME203E/02
فرن تجفيف بالنفخ الكهروحراريالمختبرGEL-70
جهاز التضمينشركة Wuhan Junjie Electronics Co., LtdJB-P5
سائل شفاف صديق للبيئة لإزالة الشمعServicebioG1128-1L
ملقط من الفولاذ المقاوم للصدأ الأسود الآمن من التفريغ الإلكتروستاتيكي (طرف منحني)سولومونESD-15
إيثانولمركز أبحاث السرطان (SCRC)100092683
كرة قطنية خالية من الدهونشركة Caoxian Hualu للمواد الصحية المحدودةTZMQ-500
طقم صبغة Hematoxylin-eosin (HE) HD الثابتة ServicebioG1076
ملاقط إرقاء الدمسولومينB0557
برنامج IBM SPSS Statisticsشركة IBMالإصدار 22.0
نظام التصويرNikonNIKON DS-U3
يودوفورشركة شاندونغ آنجي غاوكه لتكنولوجيا التطهير المحدودة (Shandong Anjie Gaoke Disinfection Technology Co. LTD)DF-500
أيزوفلورانRWD لعلوم الحياةR510-22-10
قفازات لاتكسشركة بكين رويجينج للمنتجات اللاتكس المحدودة (Beijing Ruijing Latex Products Co. LTD)RJJC-S
جهاز اختبار وخز المخلب الميكانيكيقاعدة كيو (Kew basis)KW-CT-1
الملاقط الطبيةآيزانتشنغAZN00008
ملاقط البعوض المرقئةServicebioQX1310D
الصمغ المتعادلمركز أبحاث السرطان (SCRC)10004160
محلول ملحي طبيعيشيمينSLYS-500مل
مقصات جراحة العيونسليمانB0754
بارافين سائلماكلين8012-95-1
مثبت البارافورمالدهيد (متعادل)ServicebioG1101
قطاعة العينات الباثولوجيةشركة شنغهاي لايكا للأجهزة المحدودة (Shanghai Leica Instrument Co., Ltd)RM2016
بنسلين جي الصوديوم للحقنشركة جيلين هوامو لمنتجات صحة الحيوان المحدودةرقم اعتماد الدواء البيطري 070011248
محلول بولي-إل-لايسينشركة شنغهاي يواني بيوتكنولوجي المحدودة (Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.)R23126-50مل
ماكينة حلاقة القوارضسولومونB1564
نظام تصوير وتحليل مشية القوارضذكيTreadScan؛ BCamCapture
نظام تصوير وتحليل مشية القوارض (برنامج)ذكيTreadScan الإصدار 4.00؛ BCamCapture الإصدار 3.00
جرذان Sprague-Dawleyشركة بكين سيبيفي للتكنولوجيا الحيوية المحدودة (Beijing Sibefei Biotechnology Co., Ltd)A102
جهاز تخدير الحيوانات الصغيرة يويان النمذجة القائمة على الوكلاء
جهاز التعقيم بالبخار (الأوتوكلاف)YamatoSQ810C
شفرة جراحيةسولومونB1177
قناع جراحيالفائزWJKZ-1
حامل إبر جراحيسولومنB0772
مقصات جراحيةزجاجJZZSX-ZC544R
مباعدة الأنسجةشركة Zhejiang Kehua Instrument المحدودة KD-P
نظام تنقية المياه فائقة النقاءإلي آيكن ووترAK-RO-C2
مثبت أنسجة عام (متعادل)ServicebioG1101-15ML
مجهر ضوئي رأسيNikonNIKON ECLIPSE E100
زايلينمركز أبحاث السرطان التابع لمركز الملك عبد الله العالمي للأبحاث الطبية (SCRC)10023418

المراجع

  1. Theodore N. Degenerative cervical spondylosis. N Engl J Med. 2020;383(2):159-68.
  2. Yeshna, Singh M, Monika, Kumar A, Garg V, Jhawat V. Pathophysiology and emerging therapeutic strategies for cervical spondylosis: the role of pro-inflammatory mediators, kinase inhibitors, and organogel-based drug delivery systems. Int Immunopharmacol. 2025;151:114350.
  3. Nouri A, Tetreault L, Singh A, Karadimas SK, Fehlings MG. Degenerative cervical myelopathy: epidemiology, genetics, and pathogenesis. Spine (Phila Pa 1976). 2015;40(12):E675-93.
  4. Lakhapate SS, Devade OA, Redasani VK. A brief review on cervical spondylosis. J Drug Deliv Ther. 2025;15(7):144-149.
  5. Chen B, et al. Acupotomy versus acupuncture for cervical spondylotic radiculopathy: protocol of a systematic review and meta-analysis. BMJ Open. 2019;9(8):e029052.
  6. Yang F, Li WX, Liu Z, Liu L. Balance chiropractic therapy for cervical spondylotic radiculopathy: study protocol for a randomized controlled trial. Trials. 2016;17(1):513.
  7. Woods BI, Hilibrand AS. Cervical radiculopathy: epidemiology, etiology, diagnosis, and treatment. J Spinal Disord Tech. 2015;28(5):E251-259.
  8. Kartha S, Weisshaar CL, Philips BH, Winkelstein BA. Pre-treatment with meloxicam prevents the spinal inflammation and oxidative stress in DRG neurons that accompany painful cervical radiculopathy. Neuroscience. 2018;388:393-404.
  9. Harirforoosh S, Asghar W, Jamali F. Adverse effects of nonsteroidal anti-inflammatory drugs: an update of gastrointestinal, cardiovascular and renal complications. J Pharm Pharm Sci. 2013;16(5):821-847.
  10. Jiang G, Wan B, Huang W, Chen L, Duan B, Wang Y. Influence of acupotomy loosing on IL-6, IL-10 and TNF-α in synovial fluid of rheumatoid arthritis patients with elbow joint stiffness. World J Acupunct Moxibustion. 2018;28(2):91-96.
  11. Sun J, et al. Acupotomy therapy for knee osteoarthritis pain: systematic review and meta-analysis. Evid Based Complement Alternat Med. 2020;2020:2168283.
  12. Hu J, Tong H, Zhang J, Jiang L. Acupotomy for musculoskeletal pain: exploring therapeutic potential and future directions. J Pain Res. 2025;18:3027-3036.
  13. Kwon CY, Yoon SH, Lee B. Clinical effectiveness and safety of acupotomy: an overview of systematic reviews. Complement Ther Clin Pract. 2019;36:142-152.
  14. Lijian Z, Zhen Z, Yuan Y, Nachuan Z. Ultrasound-guided acupotomy for cervical spondylosis: a systematic review and meta-analysis based on GRADE quality assessment. Front Pain Res (Lausanne). 2025;6:1654265.
  15. Shi T, et al. Acupuncture relieves cervical spondylosis radiculopathy by regulating spinal microglia activation through MAPK signaling pathway in rats. J Pain Res. 2023;16:3945-3960.
  16. Mogil JS. Animal models of pain: progress and challenges. Nat Rev Neurosci. 2009;10(4):283-294.
  17. Yamauchi M, Sekiyama H, Shimada SG, Collins JG. Halothane suppression of spinal sensory neuronal responses to noxious peripheral stimuli is mediated, in part, by both GABA(A) and glycine receptor systems. Anesthesiology. 2002;97(2):412-417.
  18. Li Q, Mathena RP, Eregha ON, Mintz CD. Effects of early exposure of isoflurane on chronic pain via the mammalian target of rapamycin signal pathway. Int J Mol Sci. 2019;20(20):5102.
  19. Boegel K, Gyulai FE, Moore KK, Gold MS. Deleterious impact of a γ-aminobutyric acid type A receptor-preferring general anesthetic when used in the presence of persistent inflammation. Anesthesiology. 2011;115(4):782-790.
  20. Liguo Z, Bin T, Xu W, He Y. Research progression and evaluation of an animal model of cervical radiculopathy. Chin J Tissue Eng Res. 2018;22(35):5700-5705.
  21. Caridi JM, Pumberger M, Hughes AP. Cervical radiculopathy: a review. HSS J. 2011;7(3):265-272.
  22. Liu DL, et al. Chronic cervical radiculopathic pain is associated with increased excitability and hyperpolarization-activated current (Ih) in large-diameter dorsal root ganglion neurons. Mol Pain. 2017;13:1744806917707127.
  23. Rothman SM, Winkelstein BA. Chemical and mechanical nerve root insults induce differential behavioral sensitivity and glial activation that are enhanced in combination. Brain Res. 2007;1181:31-43.
  24. Rothman SM, Huang Z, Lee KE, Weisshaar CL, Winkelstein BA. Cytokine mRNA expression in painful radiculopathy. J Pain. 2009;10(1):90-99.
  25. Hubbard RD, Winkelstein BA. Transient cervical nerve root compression in the rat induces bilateral forepaw allodynia and spinal glial activation: mechanical factors in painful neck injuries. Spine (Phila Pa 1976). 2005;30(17):1924-1932.
  26. Costigan M, Scholz J, Woolf CJ. Neuropathic pain: a maladaptive response of the nervous system to damage. Annu Rev Neurosci. 2009;32:1-32.
  27. Vrinten DH, Hamers FFT. "CatWalk" automated quantitative gait analysis as a novel method to assess mechanical allodynia in the rat: a comparison with von Frey testing. Pain. 2003;102(1-2):203-209.
  28. Gonçalves LI, Oliveira Junior PH, Baima JPS. Cervical radiculopathy for neurologists: the role of electrodiagnosis. Arq Neuropsiquiatr. 2025;83(10):s00451812893.
  29. Tong HC. Incremental ability of needle electromyography to detect radiculopathy in patients with radiating low back pain using different diagnostic criteria. Arch Phys Med Rehabil. 2012;93(6):990-992.
  30. Lee SJ, Han TR, Hyun JK, Jeon JY, Myong NH. Electromyographic findings in nucleus pulposus-induced radiculopathy in the rat. Spine (Phila Pa 1976). 2006;31(18):2053-2058.
  31. Fisher MA. Electrophysiology of radiculopathies. Clin Neurophysiol. 2002;113(3):317-35.
  32. Miller AL, Golledge HDR, Leach MC. The influence of isoflurane anaesthesia on the rat grimace scale. PLoS One. 2016;11(11):e0166652.
  33. Medeiros MA, Canteras NS, Suchecki D, Mello LEAM. c-fos expression induced by electroacupuncture at the Zusanli point in rats submitted to repeated immobilization. Braz J Med Biol Res. 2003;36(12):1673-1684.
  34. Grissom N, Kerr W, Bhatnagar S. Struggling behavior during restraint is regulated by stress experience. Behav Brain Res. 2008;191(2):219-226.
  35. Grissom N, Bhatnagar S. Habituation to repeated stress: get used to it. Neurobiol Learn Mem. 2009;92(2):215-224.
  36. Gray M, Bingham B, Viau V. A comparison of two repeated restraint stress paradigms on hypothalamic-pituitary-adrenal axis habituation, gonadal status and central neuropeptide expression in adult male rats. J Neuroendocrinol. 2010;22:92-101.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم