يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة بحثية

حبوب زوغي (Zuogui Pill) تعدل الاقتران بين الخلايا البانية للعظم والخلايا الناقضة للعظم في الجرذان المستأصلة المبيضان: دراسة عاملية ثلاثية ثلاثية

83 مشاهدة

⸱

سبتمبر 11, 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1College of Traditional Chinese Medicine, Inner Mongolia Medical University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

تقيم هذه الدراسة تأثيرات حبوب Zuogui على هشاشة العظام بعد سن اليأس في جرذان مستأصلة المبيض باستخدام تصميم عاملي ثلاثي الثلاثة. وتدعم النتائج التأثيرات التآزرية لمكونات Yin وYang على استقلاب العظام وعلامات مسار EphB4/ephrinB2 المرتبطة بها، على الرغم من أن الأدلة الميكانيكية تظل ارتباطية وليست سببية.

الملخص

ينتج هشاشة العظام التالية لانقطاع الطمث عن فك الارتباط بين تكوين العظام وامتصاصها المرتبط بنقص الإستروجين. قامت هذه الدراسة بقياس التأثيرات المستقلة والتفاعلية لتركيبات "Zuogui Pill" الفرعية المغذية لـ Yin في نموذج جرذان مستأصلة المبيض، وبحثت في الارتباطات مع مسار EphB4/ephrinB2/RhoA/alkaline phosphatase. ووفقاً لمعايير ARRIVE 2.0، تم توزيع 130 جرذاً من إناث Sprague-Dawley الخالية من مسببات أمراض محددة عشوائياً على 13 مجموعة (10 لكل مجموعة)، بما في ذلك تسع مجموعات بتصميم عاملي ثلاثة في ثلاثة. وشملت نقاط النهاية P1NP، وCTX-1، وكثافة المعادن في عظم الفخذ المقاسة بواسطة قياس امتصاص الأشعة السينية ثنائي الطاقة (DXA)، ونسيج العظم التربيقي، وتعبير الحمض النووي الريبوزي المرسال والبروتين المقاس بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي باستخدام النسخ العكسي وبصمة ويسترن. وارتبطت التركيبة الكاملة (I2A2) بارتفاع P1NP، وانخفاض CTX-1، وكثافة معادن عظمية أعلى مقارنة بمجموعة النموذج. وحدد التحليل العاملي تفاعلاً بين Yin وYang بين P1NP وكثافة المعادن العظمية، مما يدعم التآزر الدوائي. كما ارتبطت التغيرات الجزيئية بزيادة تعبير EphB4/ephrinB2/ALP وانخفاض تعبير RhoA. وتدعم هذه النتائج وجود ارتباط بين العلاج بـ Zuogui Pill وتحسن الأنماط الظاهرية للعظام وتعديل مؤشرات المسار؛ ويتطلب إثبات الاعتماد السببي للمسار التحقق من ذلك باستخدام المثبطات، وتقنيات إسكات الجينات، والزراعة المشتركة.

المقدمة

يؤثر هشاشة العظام بعد سن اليأس (PMOP) على شريحة واسعة من النساء، ويتميز باختلال توازن عملية تكوين العظام وامتصاصها المرتبط بنقص الإستروجين1,2. ويتوسط نظام المستقبل والرابط EphB4/ephrinB2 التواصل بين الخلايا البانية للعظم والخلايا الناقضة للعظم؛ حيث يدعم إشارات EphB4 تمايز الخلايا البانية للعظم ونشاط الفوسفاتاز القلوي (ALP)، بينما يمكن للإشارات العكسية لـ ephrinB2 كبح تكوين الخلايا الناقضة للعظم من خلال آليات مرتبطة بـ RhoA3,4. ويوفر ضعف الاقتران في العظام التي تعاني من نقص الإستروجين مبرراً ميكانيكياً لتقييم التدخلات التي تؤثر على كلا الذراعين الخلويين لعملية إعادة تشكيل العظم.

تعمل علاجات هشاشة العظام الحالية، بما في ذلك العوامل المضادة للامتصاص والعوامل البنائية، على تقليل خطر حدوث الكسور، ولكن قد تكون محدودة بسبب الالتزام بالعلاج، أو التكلفة، أو موانع الاستعمال، أو تأثيرات الارتداد، أو الآثار الجانبية أثناء الاستخدام طويل الأمد5. ولذلك، تظل العلاجات المرشحة التي تعمل على تحسين تكوين العظام مع الحد من الامتصاص المفرط ذات أهمية علمية.

تُعد حبوب زوغوي (ZGP; Zuo Gui Wan) وصفة كلاسيكية متعددة المكونات تُستخدم في الطب الصيني التقليدي لعلاج نقص جوهر الكلى، وهو نمط نظري مرتبط بضعف العظام. وتتضمن المكونات المغذية لـ Yin كلاً من Rehmannia glutinosa (الجذر المُحضر، Shu Di Huang، 24 g)، وDioscorea opposita (الريزوم، Huai Shan Yao، 12 g)، وCornus officinalis (الثمار، Shan Zhu Yu، 12 g)، وLycium barbarum (الثمار، Gou Qi Zi، 12 g)، وجيلاتين درع سلحفاة Chinemys reevesii (جيلاتين مشتق من الدرع، Gui Ban Jiao، 12 g)، وCyathula officinalis (الجذر، Chuan Niu Xi، 9 g). أما المكونات المعززة لـ Yang فتشمل Cuscuta australis (البذور، Tu Si Zi، 12 g) وجيلاتين قرن Cervus elaphus (جيلاتين مشتق من القرن، Lu Jiao Jiao، 12 g). وفي النظرية الكلاسيكية، يتوقع مبدأ "البحث عن Yang داخل Yin" أن الأعشاب المعززة لـ Yang قد تعزز القاعدة المغذية لـ Yin بدلاً من العمل كمجرد إضافات مستقلة بسيطة. وقد أفادت الأدلة السريرية والدراسات قبل السريرية بوجود نشاط مضاد لهشاشة العظام لـ ZGP أو التدخلات التي تحتوي على ZGP، بما في ذلك التأثيرات على كثافة المعادن في العظام (BMD)، وتكون العظام، والسلوك الدوائي الحركي6,7,8,9,10.

تكمن جدة هذه الدراسة في الفصل العاملي المنهجي (ثلاثة في ثلاثة) للمكونات المغذية لـ Yin والمعززة لـ Yang في جرذان مستأصلة المبيض (OVX)، مع التقييم المتزامن للأنماط الظاهرية للعظام ومؤشرات مسار EphB4/ephrinB2/RhoA/ALP. ويختبر هذا التصميم نظرية توافق التركيبة بشكل مباشر أكثر من الدراسات التي تستخدم الوصفة الكاملة فقط أو مقارناً واحداً، مع الإقرار بأن التغيرات في مؤشرات المسار تظل ارتباطية ما لم يتم حصرها أو إسكَاتها آلياً11.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع الإجراءات في هذه الدراسة من قبل لجنة الرعاية والاستخدام المؤسسية للحيوانات في جامعة منغوليا الداخلية الطبية (رقم الموافقة YKD202404105) وأجريت وفقاً لمعايير ARRIVE 2.012.

تصميم الدراسة

أُجريت الدراسة في منصة التجارب الحيوانية بجامعة منغوليا الداخلية الطبية. تم تطبيق تصميم عاملي كامل ثلاثة في ثلاثة مع عاملين: تركيب القاعدة المغذية لـ Yin (I؛ ثلاثة مستويات من الجرعات: 0، 27، 54 g من مكافئ الدواء الخام) وتركيبة تعزيز Yang (A؛ ثلاثة مستويات من الجرعات: 0، 8، 16 g من مكافئ الدواء الخام)، مما نتج عنه تسع خلايا عاملية بالإضافة إلى أربع مجموعات مرجعية. يظهر التصميم العاملي في الجدول 1. تمثل I2A2 تركيبة ZGP الكاملة بجرعة مكافئة سريريًا. اعتمد تحويل الجرعة على طريقة مساحة سطح الجسم (عامل الجرذ: الإنسان = 6.25)13.

الحيوانات، والتوزيع العشوائي، والتعمية

تم توزيع مائة وثلاثين من إناث جرذان Sprague-Dawley الخالية من مسببات الأمراض النوعية (عمرها 6 أشهر، وبوزن 220–250 g) باستخدام جدول أرقام عشوائية تم توليده حاسوبياً. وقد وُضعت رموز التوزيع في أظرفة مختومة بالتسلسل من قبل باحث غير مشارك في تقييم النتائج. وُضعت الجرذان في أقفاص مهواة بمعدل 3–4 جرذان لكل قفص، تحت دورة ضوء/ظلام مدتها 12 h عند درجة حرارة 22 ± 2 oC ورطوبة 50–60%، مع توفير المياه والغذاء القياسي للقوارض بمحتوى موثق من الكالسيوم والفسفور حسب الرغبة، مع السماح بالنشاط داخل القفص وتوفير الإثراء البيئي. أجرى باحثون لم يكن لديهم علم بالتوزيع عمليات المقايسات الجزيئية، والتقييم النسيجي، والتقدير الكمي للصور، وقياس الكثافة الضوئية. وتم تحديد حجم العينة من خلال تحليل القوة المسبق، مما نتج عنه n = 10 لكل مجموعة.

نموذج استئصال المبيض (OVX) والعلاج الدوائي

أُجري استئصال المبيضين الثنائي (Bilateral OVX) تحت تأثير تخدير بالآيزوفلورين المستنشق الذي تم توفيره بواسطة مبخر دقيق. تم تحفيز التخدير بنسبة 3–4% في الأكسجين والحفاظ عليه بنسبة 1.5–2.5% عبر قمع أنفي. تم التأكد من العمق الكافي للتخدير من خلال فقدان منعكس سحب الطرف ومنعكس الجفن مع استقرار التنفس. تم تقييم نجاح عملية استئصال المبيضين من خلال غياب دورة الشبق المهبلية في اليوم الخامس وانخفاض كثافة المعادن في العظام (BMD) بعد 12 أسبوعاً من الجراحة. بعد التحقق من صحة النموذج، تم إعطاء العلاج عن طريق التزقيم لمدة 8 أسابيع (1 mL/100 g/day). حُضّرت المغليات عن طريق الاستخلاص المائي المتسلسل عند الغليان المستمر (100 °C، تكثيف عكسي)، بـ 10 أضعاف الحجم لمدة 2 h، يليه 8 أضعاف الحجم لمدة 1.5 h، ثم رُشحت عبر أربع طبقات من الشاش الطبي، ورُكزت تحت ضغط منخفض لتصل إلى 0.968 g من العقار الخام/mL. خُزّن المستخلص المركز عند 4 °C واستُخدم في غضون 7 أيام من التحضير. وكانت الضوابط الإيجابية هي حبيبات Gusukang (1.8 g/kg/day) والديإيثيلستيلبيستيرول (0.04 mg/kg/day). عند الإنهاء، خُدرت الجرذان تخديراً عميقاً بنسبة 5% من الآيزوفلورين حتى فقدان المنعكسات الطرفية والقرنية، ثم أُفرغت من دمها وأُجري لها خلع رقبي. تم تأكيد الوفاة بتوقف ضربات القلب والتنفس. تخلص من الجثث والأنسجة كنفايات بيولوجية، ورواسب المواد الكيميائية كنفايات خطرة، ووضعت الإبر أو الشفرات في حاويات الأدوات الحادة المعتمدة.

مقاييس النتائج

تم قياس مستويات P1NP وCTX-1 في المصل بواسطة تقنية ELISA الساندوتشية (Jiyinmei)14. وتم تقدير كثافة المعادن في العظام (BMD) للفخذ بواسطة تقنية DXA. كما تم تقييم النسيج التربيقي (Trabecular histology) باستخدام صبغ الهيماتوكسيلين والإيوزين عند تكبير 200x. وقُيِّم التعبير الجيني بواسطة تقنية RT-qPCR باستخدام طريقة 2-ΔΔCt، مع المعايرة بالنسبة لإنزيم glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH). كما قُيِّم التعبير البروتيني بواسطة لطخة ويسترن (Western blot) والتقدير الكمي باستخدام برنامج ImageJ (راجع جدول المواد). وتتوفر الأوزان الجزيئية المرصودة ومعلومات كتالوج الأجسام المضادة في الجدول التكميلي 1. وكانت تسلسلات البادئات كما يلي: EphB4 الأمامي/العكسي، 5'-CTAGACTCTTTCCTGCGGCT/GGGAACTTGTGTAGGTGGGA-3'؛ وephrinB2، 5'-CGGACAAGGCCTGGTACTAT/ACAGTTGAGCAGTGGGGTAT-3'؛ وRhoA، 5'-GTTTATGTGCCCACGGTGTT/ACTATCAGGGCTGTCGATGG-3'؛ وALP، 5'-CGGACACAAGCATTCCCAGA/TGGTGGAGCTGAACAGGCTT-3'؛ وGAPDH، 5'-ACAGCAACAGGGTGGTGGAC/TTTGAGGGTGCAGCGAACTT-3'.

التحليل الإحصائي

تم تقييم التوزيع الطبيعي باستخدام اختبار Shapiro-Wilk، كما تم تقييم تجانس التباين باستخدام اختبار Levene قبل إجراء التحليل البارامتري. البيانات معبر عنها كمتوسط ± SD، وتشير جميع أشرطة الخطأ في الأشكال الكمية إلى SD. تم تطبيق تحليل التباين الثنائي (Two-way factorial ANOVA) على الخلايا العاملية التسع لتقدير التأثيرات الرئيسية والتفاعل بين I و A، مع استخدام مربع إيتا الجزئي (ηp2) كمقياس لحجم التأثير. وأجريت المقارنات الزوجية عبر جميع المجموعات الـ 13 باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (one-way ANOVA) مع تصحيح Bonferroni. أجريت التحليلات الإحصائية باستخدام برنامج GraphPad Prism. وقد تم تعريف رموز الدلالة الإحصائية بشكل ثابت على النحو التالي: تشير *, **, ***, **** إلى p <0.05، p <0.01، p <0.001، p <0.0001 مقارنة بالنموذج (model)؛ بينما تشير #, ##, ###, #### إلى نفس العتبات مقارنة بـ full-formula ZGP.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

التحقق من صحة النموذج عن طريق علم الخلايا المهبلي

تم تأكيد نجاح عملية استئصال المبيض (OVX) في جميع الحيوانات التي خضعت للعملية، وهو ما استُدل عليه بفقدان دورة الشبق في غضون 5 أيام بعد الجراحة (الشكل 1A)، بينما احتفظت الحيوانات التي خضعت لعملية وهمية بدورة مدتها 4 أيام (الشكل 1B). وعند الأسبوع 12، أظهر قياس امتصاص الأشعة السينية ثنائي الطاقة (DXA) انخفاضاً في كثافة المعادن في عظم الفخذ (BMD) في مجموعة نموذج OVX مقارنة ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يدعم مصطلح التفاعل العاملي وجود علاقة غير تراكمية بين المكونات المغذية لـ Yin والمكونات المعززة لـ Yang في تركيبة ZGP. وتتوافق هذه النتيجة مع المبدأ التقليدي المتمثل في "البحث عن Yang داخل Yin"، حيث يُتوقع من المكونات المعززة لـ Yang أن تنشط أو تعزز القاعدة المغذية لـ Yin15. وينبغي تفسير هذه النتيجة على أنها تآزر فارماكولوجي على مستوى التركيبة، وهي لا تحدد المكونات النشطة الفردية المسؤولة عن هذا التأثير.

يُعد كل من EphB4 و ephrinB2 وسائط منطقية بيولوجياً لعملية الاقتران...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم في منغوليا الداخلية (منحة رقم 2025LHMS08047)، والمشروع العام لجامعة منغوليا الداخلية الطبية (منحة رقم YKD2025MS015)، وصندوق بدء الدكتوراه بجامعة منغوليا الداخلية الطبية (منحة رقم YKD2023BSQD007). ولم يكن للممولين أي دور في تصميم الدراسة، أو جمع البيانات، أو التحليل، أو قرار النشر، أو إعداد المخطوطة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
محلول أمونيا 1%N/AN/Aمحلول تزهير بعد تمايز الهيماتوكسيلين.
كحول حمض الهيدروكلوريك 1%N/AN/Aمحلول تمايز لصبغة الهيماتوكسيلين.
خليط 2x qPCR MixN/AN/Aخليط رئيسي لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي. حجم التفاعل المصدر: 12.5 uL لكل تفاعل.
محلول بارافورمالدهيد 4%N/AN/Aتثبيت عينات عظم الفخذ والظنبوب اليسرى للتحليل النسيجي.
منظم تحميل 5x loading bufferN/AN/Aمسخ العينة قبل الرحلان الكهربائي.
الأجسام المضادة الأولية لـ ALPAffinity BiosciencesN/Aأجسام مضادة لتقنية ويسترن بلوت. التخفيف المصدر: 1:2000. يتطلب JoVE رقم RRID ورقم التشغيلة.
زوج بادئات ALPN/AN/Aتم قياس ALP mRNA بواسطة qRT-PCR، ولكن جدول البادئات الأصلي لا يوفر تسلسلات بادئات ALP. مطلوب تأكيد المؤلف.
كاشف أجسام مضادة البيوتينمرفق مع طقم ELISA، Jiyinmeiمكون الطقميضاف إلى آبار العينات أثناء ELISA.
جيلاتين قرن Cervus elaphus، Lu Jiao JiaoBeijing TongrentangN/Aمكون لتعزيز yang. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 12 g، بنسبة 4. تم إذابة الجيلاتين في المغلي.
جيلاتين درع Chinemys reevesii، Gui Ban JiaoBeijing TongrentangN/Aمكون لتغذية yin. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 12 g، بنسبة 4. تم إذابة الجيلاتين في المغلي.
كلوروفورمN/AN/Aفصل الأطوار أثناء استخلاص RNA.
مرحلة التبريدLeica1150دعم تجميد أو تبريد لسير عمل التقطيع.
Cornus officinalis، Shan Zhu YuBeijing TongrentangN/Aمكون لتغذية yin. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 12 g، بنسبة 4.
Cuscuta australis، Tu Si ZiBeijing TongrentangN/Aمكون لتعزيز yang. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 12 g، بنسبة 4.
Cyathula officinalis، Chuan Niu XiBeijing TongrentangN/Aمكون لتغذية yin. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 9 g، بنسبة 3.
PBS معالج بـ DEPCN/AN/Aشطف الفقرات القطنية L4 إلى L5 قبل التجميد بالنيتروجين السائل.
دي إيثيل ستيلبيسترولN/AN/Aضابط موجب من الطب الغربي. الجرعة المصدر: 0.04 mg/kg/يوم، 1 mL/100 g/يوم. تحتوي الوثيقة الأصلية أيضاً على تعارض في التسمية الصينية يجب توحيده ليكون دي إيثيل ستيلبيسترول.
Dioscorea opposita، Huai Shan YaoBeijing TongrentangN/Aمكون لتغذية yin. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 12 g، بنسبة 4.
خليط dNTPN/AN/Aمدرج في تفاعل النسخ العكسي.
كاشف ECL للمعان الكيميائيN/AN/Aكاشف كشف لتقنية ويسترن بلوت.
كاشف ELISA الملون Aمرفق مع طقم ELISA، Jiyinmeiمكون الطقمكاشف لتطوير اللون في ELISA.
كاشف ELISA الملون Bمرفق مع طقم ELISA، Jiyinmeiمكون الطقمكاشف لتطوير اللون في ELISA.
محلول إيقاف ELISAمرفق مع طقم ELISA، Jiyinmeiمكون الطقميستخدم لإنهاء تفاعل اللون في ELISA.
كاشف ELISA موسوم بالإنزيممرفق مع طقم ELISA، Jiyinmeiمكون الطقميضاف إلى الآبار غير الفارغة في ELISA.
الأجسام المضادة الأولية لـ EphB4ProteintechN/Aأجسام مضادة لتقنية ويسترن بلوت. التخفيف المصدر: 1:2000. يتطلب JoVE رقم RRID ورقم التشغيلة.
زوج بادئات EphB4N/Aناتج PCR بحجم 232 bpالأمامي CTAGACTCTTTCCTGCGGCT؛ العكسي GGGAACTTGTGTAGGTGGGA. خطأ مطبعي في الجدول الأصلي Rat RphB4 يجب أن يقرأ Rat EphB4.
الأجسام المضادة الأولية لـ ephrinB2Affinity BiosciencesN/Aأجسام مضادة لتقنية ويسترن بلوت. التخفيف المصدر: 1:2000. يتطلب JoVE رقم RRID ورقم التشغيلة.
زوج بادئات ephrinB2N/Aناتج PCR بحجم 172 bpالأمامي CGGACAAGGCCTGGTACTAT؛ العكسي ACAGTTGAGCAGTGGGGTAT.
إيثانول، مطلق وتدريجي 95%، 85%، 75%N/AN/Aتجفيف وإماهة متدرجة أثناء صبغ الهيماتوكسيلين والإيوسين.
جرذان Sprague-Dawley إناثBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.شهادة الحيوان ورقم الترخيص غير متوفرين في المقال المصدرخالية من مسببات الأمراض النوعية، عمر 6 أشهر، إناث صحيحات غير حاملات. يذكر المصدر الصيني 230 إلى 270 g؛ بينما تذكر المسودة الإنجليزية السابقة 220 إلى 250 g. يجب التحقق من النطاق النهائي قبل التسليم.
الأجسام المضادة الأولية لـ GAPDHServicebioN/Aأجسام مضادة لضبط التحميل. التخفيف المصدر: 1:2000. يتطلب JoVE رقم RRID ورقم التشغيلة.
زوج بادئات GAPDHN/Aناتج PCR بحجم 253 bpالأمامي ACAGCAACAGGGTGGTGGAC؛ العكسي TTTGAGGGTGCAGCGAACTT.
برنامج GraphPad PrismGraphPad Softwareإصدار 9.4.1؛ RRID:SCR_002798التحليل الإحصائي والرسم البياني. يجب الاحتفاظ بالاعتدالية، وتجانس التباين، وANOVA، وتصحيح Bonferroni، وأحجام التأثير في ملفات المخرجات.
حبيبات GusukangLiaoning Wohua Kangchen Pharmaceutical Co., Ltd.N/Aضابط موجب من الطب الصيني التقليدي. الجرعة المصدر: 1.8 g/kg/يوم أو 0.5 mL/100 g/يوم.
محلول صبغ الهيماتوكسيلينZhuhai Beisuo Biotechnology Co., Ltd.N/Aصبغ نسيجي. استخدم الإجراء المصدر صبغ الهيماتوكسيلين لمدة 5 دقائق.
جهاز طرد مركزي دقيق عالي السرعةN/ATG16Wالطرد المركزي لإجراءات المصل والأحماض النووية.
جهاز Hologic لقياس امتصاص الأشعة السينية ثنائية الطاقةHologicN/Aتحليل كثافة المعادن في العظام. يذكر المصدر مسح عظم الفخذ داخل الجسم وخارجه.
برنامج ImageJNational Institutes of HealthRRID:SCR_003070القياس الكمي للكثافة لنطاقات ويسترن بلوت. الإصدار غير متوفر في المقال المصدر.
موقد حثيMideaN/Aمذكور في جدول الأجهزة في المصدر الصيني.
إيزوفلورانN/AN/Aتخدير لاستئصال المبيضين الثنائي وتحديد وضعية DXA. يجب أن يحدد البروتوكول المنقح التحريض، والصيانة، والطريقة، ومعايير عمق التخدير.
إيزوبروبانولN/AN/Aترسيب RNA أثناء الاستخلاص.
نيتروجين سائلN/AN/Aالتجميد السريع لعينات الفقرات القطنية.
Lycium barbarum، Gou Qi ZiBeijing TongrentangN/Aمكون لتغذية yin. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 12 g، بنسبة 4.
قارئ الأطباق الدقيقةN/AAMR-100كشف امتصاص ELISA عند 450 nm.
غسالة الأطباق الدقيقةN/AAPW-200خطوة الغسيل لأطباق ELISA.
إنزيم MMLV reverse transcriptaseN/AN/Aإنزيم النسخ العكسي.
مادة صمغية محايدة للتثبيتSinopharm GroupN/Aوسط تثبيت للشرائح المصبوغة بالهيماتوكسيلين والإيوسين.
محلول ملحي عاديN/AN/Aوسيط للتغذية القسرية للمجموعات الضابطة الفارغة، والمجموعات التي خضعت لعملية وهمية، ومجموعات النموذج.
بادئة Oligo(dT)18N/AN/Aتستخدم للنسخ العكسي.
بنسلينN/AN/Aوقاية من العدوى بعد العملية الجراحية. الجرعة المصدر: 20,000 U/kg عضلياً لمدة 3 أيام.
قدر ضغطXinfeiN/Aمذكور في جدول الأجهزة في المصدر الصيني.
مثبط البروتيازN/AN/Aيضاف أثناء استخلاص البروتين.
منظم تحلل البروتينN/AN/Aاستخلاص البروتين من أنسجة العظام لتقنية ويسترن بلوت.
غشاء PVDFN/AN/Aغشاء نقل لتقنية ويسترن بلوت يتم تفعيله بالميثانول.
جهاز qRT-PCRN/AN/Aتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي ذو النسخ العكسي لـ EphB4 و ephrinB2 و RhoA و ALP و GAPDH.
طقم ELISA لـ Rat CTX-1JiyinmeiJYM0026RaELISA ساندويتش لـ C-terminal telopeptide للكولاجين من النوع 1 في المصل. الكشف عند 450 nm.
طقم ELISA لـ Rat P1NPJiyinmeiJYM0030RaELISA ساندويتش لـ procollagen type 1 N-terminal propeptide في المصل. الكشف عند 450 nm.
Rehmannia glutinosa، Shu Di HuangBeijing TongrentangN/Aمكون لتغذية yin. جرعة التركيبة الكاملة في المصدر: 24 g، بنسبة 8.
الأجسام المضادة الأولية لـ RhoAProteintechN/Aأجسام مضادة لتقنية ويسترن بلوت. التخفيف المصدر: 1:2000. يتطلب JoVE رقم RRID ورقم التشغيلة.
زوج بادئات RhoAN/Aناتج PCR بحجم 177 bpالأمامي GTTTATGTGCCCACGGTGTT؛ العكسي ACTATCAGGGCTGTCGATGG. تم توحيد المصطلحات من RHoA إلى RhoA.
مثبط RNaseN/AN/Aمدرج في تفاعل النسخ العكسي.
ماء خالٍ من RNaseN/AN/Aإذابة RNA بعد التجفيف.
ميكروتوم دوارLeica2245التقطيع النسيجي.
جسم مضاد ثانوي لتقنية ويسترن بلوتN/AN/Aالتخفيف المصدر: 1:15000. يتطلب JoVE تفاعلية المضيف ورقم RRID.
مسحوق حليب خالي الدسم، 5%N/AN/Aكاشف حجب لتقنية ويسترن بلوت، في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين.
جهاز فرد وتجفيف الشرائحJinhua YidiN/Aتحضير الشرائح للتحليل النسيجي.
بنتوباربيتال الصوديوم، 3%N/AN/Aتخدير نهائي قبل جمع دم الشريان الأورطي البطني في الوثيقة الصينية الأصلية. يجب التحقق من إجراء القتل الرحيم النهائي وطريقة التأكيد.
مخفف عينة قياسيمرفق مع طقم ELISA، Jiyinmeiمكون الطقميستخدم للتخفيف القياسي المتسلسل في إجراء ELISA.
منظم TBSTN/AN/Aمنظم غسيل لتقنية ويسترن بلوت.
حضانة هزازة ثرموستاتيةShanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.N/Aالحضن والرج المختبري.
كاشف TRIzolN/AN/Aاستخلاص RNA من 100 mg من أنسجة العظام.
مجهر رأسيLeicaDM1000تصوير نسيجي بالهيماتوكسيلين والإيوسين عند تكبير 200x.
حضانة ثرموستاتية بغلاف مائيN/AGNP-9080الحضن لإجراءات المقايسة.
محلول صبغ الإيوسين القابل للذوبان في الماءZhuhai Beisuo Biotechnology Co., Ltd.N/Aصبغة تباين نسيجية. استخدم الإجراء المصدر صبغ الإيوسين لمدة 3 دقائق.
نظام الرحلان الكهربائي لويسترن بلوتN/AN/Aفصل البروتين. الرحلان الكهربائي المصدر: 80 V في البداية، ثم 120 V.
نظام تصوير ويسترن بلوتN/AN/Aتصوير الأغشية باللمعان الكيميائي. مطلوب تقديم أغشية غير مقصوصة.
نظام نقل ويسترن بلوتN/AN/Aنقل البروتين إلى غشاء PVDF. شرط النقل المصدر: 400 mA، 90 دقيقة، حمام ثلجي.
زايلينN/AN/Aإزالة الشمع وتصفية الأنسجة أثناء التحليل النسيجي.
أعشاب مكونات حبوب ZuoguiBeijing TongrentangN/Aتركيبة من ثماني أعشاب: Rehmannia glutinosa و Dioscorea opposita و Cornus officinalis و Lycium barbarum و جيلاتين درع Chinemys reevesii و Cyathula officinalis و Cuscuta australis و جيلاتين قرن Cervus elaphus.

المراجع

  1. Compston JE, McClung MR, Leslie WD. Osteoporosis. Lancet. 2019;393(10169):364-376. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(18)32112-3
  2. Shen Y, Huang X, Wu J, et al. The global burden of osteoporosis, low bone mass, and its related fracture in 204 countries and territories, 1990-2019. Front Endocrinol (Lausanne). 2022;13:882241. https://doi.org/10.3389/fendo.2022.882241
  3. Zhao C, Irie N, Takada Y, et al. Bidirectional ephrinB2-EphB4 signaling controls bone homeostasis. Cell Metab. 2006;4(2):111-121. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2006.05.012
  4. Wu Z, Li W, Jiang K, et al. Regulation of bone homeostasis: signaling pathways and therapeutic targets. MedComm (2020). 2024;5(8):e657. https://doi.org/10.1002/mco2.657
  5. Reid IR, Billington EO. Drug therapy for osteoporosis in older adults. Lancet. 2022;399(10329):1080-1092. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21)02646-5
  6. Li J, Sun K, Qi B, et al. An evaluation of the effects and safety of Zuogui pill for treating osteoporosis: current evidence for an ancient Chinese herbal formula. Phytother Res. 2021;35(4):1754-1767. https://doi.org/10.1002/ptr.6908
  7. Shi T, Liu T, Kou Y, et al. The synergistic effect of Zuogui Pill and eldecalcitol on improving bone mass and osteogenesis in type 2 diabetic osteoporosis. Medicina (Kaunas). 2023;59(8):1414. https://doi.org/10.3390/medicina59081414
  8. Yang S, Zhang B, Wang YG, et al. Zuo Gui Wan promotes osteogenesis via PI3K/AKT signaling pathway: network pharmacology analysis and experimental validation. Curr Med Sci. 2023;43(5):1051-1060. https://doi.org/10.1007/s11596-023-2782-x
  9. Qiu J, Zhu Y, Xing J, Wang L, Zhang J, Yin H. Comparative pharmacokinetic study of 5 active ingredients after oral administration of Zuogui Pill in osteoporotic rats with different syndrome types. Int J Anal Chem. 2023;2023:1473878. https://doi.org/10.1155/2023/1473878
  10. Gong W, Zhang N, Cheng G, et al. Rehmannia glutinosa Libosch extracts prevent bone loss and architectural deterioration and enhance osteoblastic bone formation by regulating the IGF-1/PI3K/mTOR pathway in streptozotocin-induced diabetic rats. Int J Mol Sci. 2019;20(16):3964. https://doi.org/10.3390/ijms20163964
  11. Wang K, Kou Y, Rong X, Wei L, Li J, Liu H, Li M, Song H. ED-71 improves bone mass in ovariectomized rats by inhibiting osteoclastogenesis through EphrinB2-EphB4-RANKL/OPG axis. Drug Des Devel Ther. 2024;18:1515-1528. https://doi.org/10.2147/DDDT.S454116
  12. Percie du Sert N, Hurst V, Ahluwalia A, et al. The ARRIVE guidelines 2.0: updated guidelines for reporting animal research. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410. https://doi.org/10.1371/journal.pbio.3000410
  13. Reagan-Shaw S, Nihal M, Ahmad N. Dose translation from animal to human studies revisited. FASEB J. 2008;22(3):659-661. https://doi.org/10.1096/fj.07-9574LSF
  14. Eastell R, Szulc P. Use of bone turnover markers in postmenopausal osteoporosis. Lancet Diabetes Endocrinol. 2017;5(11):908-923. https://doi.org/10.1016/S2213-8587(17)30184-5
  15. Yao ZY, Fan SY, Song ZF, Li ZC. Network pharmacology-based and molecular docking-based analysis of You-Gui-Yin for the treatment of osteonecrosis of the femoral head. Medicine (Baltimore). 2023;102(43):e35581. https://doi.org/10.1097/MD.0000000000035581
  16. Wang J, Xu C, Zhang J, Bao Y, Tang Y, Lv X, Ma B, Wu X, Mao G. RhoA promotes osteoclastogenesis and regulates bone remodeling through mTOR-NFATc1 signaling. Mol Med. 2023;29(1):49. https://doi.org/10.1186/s10020-023-00638-1
  17. Noviana E, Indrayanto G, Rohman A. Advances in fingerprint analysis for standardization and quality control of herbal medicines. Front Pharmacol. 2022;13:853023. https://doi.org/10.3389/fphar.2022.853023
  18. Fischer V, Haffner-Luntzer M. Interaction between bone and immune cells: implications for postmenopausal osteoporosis. Semin Cell Dev Biol. 2022;123:14-21. https://doi.org/10.1016/j.semcdb.2021.05.014
  19. Komori T. Animal models for osteoporosis. Eur J Pharmacol. 2015;759:287-294. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2015.03.028
  20. Dempster DW, Compston JE, Drezner MK, et al. Standardized nomenclature, symbols, and units for bone histomorphometry: a 2012 update of the report of the ASBMR Histomorphometry Nomenclature Committee. J Bone Miner Res. 2013;28(1):2-17. https://doi.org/10.1002/jbmr.1805

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

هشاشة العظام بعد سن اليأسكثافة المعادن في العظاممسار EphB4تفاعل الين واليانغالأشعة السينية ثنائية الطاقةتحليل لطخة ويسترنتفاعل البوليميراز المتسلسل بالنسخ العكسي
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.