يصف هذا البروتوكول نظام أقفاص مخصص لجمع عينات براز طوعية، صديقة للرفاهية، وبشكل متزامن وفردي من فئران مقيدة في مجموعات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يصف هذا البروتوكول نظام أقفاص مخصص لجمع عينات براز طوعية، صديقة للرفاهية، وبشكل متزامن وفردي من فئران مقيدة في مجموعات.
يتطلب القياس الموثوق لمستقلبات الكورتيكوستيرون البرازية عينات براز يمكن تعيينها لحيوانات فردية وجمعها ضمن نافذة زمنية محددة. وهذا يمثل تحديا في الفئران الجماعية، حيث لا تسمح عينات الأقفاص المجمعة بتوزيع الأفراد على حدة، وقد يؤثر الانفصال المؤقت على رفاهية الحيوان ونتائج الدراسة. هدف هذا البروتوكول هو تقديم نظام أقفاص بسيط وغير مكلف يتيح جمع عينات براز طوعية ومتزامنة وفردية من فئران مقيدة في مجموعات. يتكون النظام من قفص منزلي مكون من البولي كربونات بسقف سلكي، متصل بثلاثة صناديق جمع فردية. بعد التعود والتدريب، تدخل الفئران الصناديق طوعا للحصول على مكافأة طعام صغيرة. يمكن بعد ذلك إغلاق الأبواب دون مطاردة أو التعامل أو النقل القسري. يتم جمع حبيبات البراز من كل صندوق بشكل منفصل، مما يسمح بتخصيص عينات للحيوانات الفردية مع الحفاظ على السكن الاجتماعي خارج فترة أخذ العينات. يدعم هذا البروتوكول أخذ عينات طولية غير جراحية وهو مناسب للدراسات التي تقيس مستقلبات الكورتيكوستيرون البرازية أو مؤشرات حيوية أخرى في البراز. التصميم سهل البناء من مادة أقفاص قياسية وزجاج أكريليك، ويمكن تفكيكه للتنظيف، ويسمح بأخذ عينات من عدة أقفاص بالتوازي. من خلال تقليل الاضطرابات المرتبطة بالتعامل وتحسين توحيد نافذة العينة، توفر الطريقة تحسينا عمليا لمراقبة الغدد الصماء في الفئران الجماعية.
تحد كبير في تقييم تركيزات كورتيكوستيرون البلازما هو أن إجراء أخذ العينة نفسه قد يؤدي إلى زيادة حادة في الكورتيكوستيرون، مما يربك القياس ويؤثر على تفسير نتائج الدراسة 1,2,3. يوفر قياس مستقلبات الكورتيكوستيرون البرازية (FCMs) بديلا غير جراحي، حيث تعكس تركيزات FCM مستويات الجلوكوكورتيكويد المتداولة قبل عدة ساعات من أخذ العينة، وذلك حسب النوع والسلالة والجنس ووقت مرور الأمعاء 4,5. ومع ذلك، لا يزال التحليل الموثوق للركوب الوظيفي في الفئران المجمعة أمرا صعبا. لا يمكن تخصيص عينات البراز المجمعة من القفص المنزلي لحيوانات فردية وقد تظهر تنوعا كبيرا بسبب الفروق بين الأفراد في إفراز الجلوكوكورتيكويد وعدم اليقين في نافذة الأخذ الدقيقة للعينات. فصل الحيوانات لفترات طويلة قد يتداخل مع أهداف الدراسة، بينما الفصل قصير الأمد لجمع العينات الفردية يتطلب جهدا كبيرا، ويحد من معدل الإنتاجية، وقد يسبب بحد ذاته توترا2.
لتمكين جمع عينات براز فردية من فئران مقيدة في مجموعات مع التعامل البسيط، تم تطوير قفص جمع براز مخصص (الشكل 1A-E). تم تعديل التصميم من قفص جمع براز موصوف سابقا للفئران الشوكية6 وتم تعديله لاستخدامه مع فئران المختبر. يتكون النظام من قفص بولي كربونات عادي من النوع الثالث متصل بثلاثة صناديق جمع فردية، يمكن للحيوانات الوصول إليها طوعا وإغلاقها باستخدام أبواب منزلقة. يتيح هذا النظام جمع عينات البراز من فئران فردية دون التعامل المباشر خلال فترة أخذ العينات، كما يتيح أخذ عينات متزامنة من عدة حيوانات. لذلك، يوفر القفص نهجا عمليا لأخذ عينات FCM غير جراحية وتنسب فرديا في الفئران الجماعية.
يصف البروتوكول التالي نظام أخذ عينات من البراز يسمح بجمع وتحديد عينات البراز من فئران فردية مع الحفاظ على بيئة إسكان جماعي، باستخدام أقفاص مخصصة لأخذ عينات البراز بدون تلامس.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم استشارة لجنة أخلاقيات الحيوانات المسؤولة في جامعة فيينا الطبية قبل إجراء الدراسة وأبلغت بعدم الحاجة إلى ترخيص رسمي لتجارب الحيوانات؛ لذلك، لا يتوفر رقم موافقة أو بروتوكول. شملت الدراسة فقط ممارسات التربية والتربية المعتمدة، إلى جانب جمع عينات براز غير جراحية. لم تجرى أي إجراءات جراحية. وفقا للتوجيه 2010/63/الاتحاد الأوروبي، تم تقييم العبء المتوقع على الحيوانات على أنه أقل من عتبة الألم أو المعاناة أو الضيق أو الأضرار الدائمة التي تعادل أو أعلى من تلك الناتجة عن إدخال الإبرة وفقا للممارسة البيطرية الجيدة. تم إيواء جميع الحيوانات ورعايتها وفقا لمعايير رفاهية الحيوانات المؤسسية.
1. بناء الأقفاص (انظر قائمة المواد)
2. تحضير الحيوانات وإسكانها
3. التعود وتدريب الحيوانات
ملاحظة: القفص المكتمل يتكون من قفص منزلي (PTIII)، متصل بقفص أخذ عينات يحتوي على ثلاثة صناديق جمع منفصلة، PTII. يمكن استخدام أقفاص المنزل مثل الأقفاص التقليدية، مع فراش، وتعزيز الأقفاص، وغطاء سلكي بدون مثبتات خارجية، وتوفير الطعام والماء. يمكن تفكيك النظام للغسيل ولا يمكن استخدامه إلا خلال أسابيع العينة. خلال أسابيع بدون أخذ عينات، يمكن إيواء الحيوانات في أقفاص PTIII القياسية.
4. جمع عينات البراز
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم قياس مستقلبات الكورتيكوسترون البرازي (FCMs) بنجاح من عينات تم جمعها باستخدام أقفاص أخذ عينات البراز المخصصة في دراسة طولية قارنت بين الفئران التي تم تربيتها بشكل دائم ومتقطع. شمل تحليل FCM التمثيلي 30 حيوانا: مجموعة مربوطة بشكل دائم، n = 15 حيوانا في 5 أقفاص؛ المجموعة التي تم تربيتها بشكل متقطع، n = 10 حيوانات في 5 أقفاص، مع 5 ذكور في مأوى فردي باستثناء 3 فعاليات تكاثر، حيث تم إقامتهم مع الإناث. تم جمع العينات في 19 نقطة زمنية نصف شهرية في أيام تبديل الأقفاص وكذلك في عطلات نهاية الأسب...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يصف هذا البروتوكول نظام أقفاص بسيط لجمع عينات براز قابلة للتخصيص فرديا من الفئران المحفوظة في مجموعات. الميزة الرئيسية لهذه الطريقة هي أنها تجمع بين نسبة العينات الفردية والحفاظ على الجوانب الرئيسية للإسكان الاجتماعي، خاصة الاتصال البصري والشم مع شركاء القفص. وهذا مهم لأن السكن الجماعي غالبا ما يكون مطلوبا لرفاهية الحيوان وقد يكون أيضا جزءا من التصميم التجريبي10. على عكس أخذ عينات الأقفاص المنزلية المجمعة، يسمح النظام بتعيين قيم FCM للحيوانات الفردية، مع تجنب الإس...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يعلن المؤلفون أنه لا توجد لديهم مصالح مالية متنافسة.
نشكر البروفيسور بولاك على دعمه نشر هذا المقال.
تعبر كاثرينا تيلمان عن امتنانها لدعم جدها الراحل، برونو ووشنر، الذي ساهم في تخطيط نظام الأقفاص في سن الت99، وجعل ورشة الخشب متاحة له، وساعد في الصنفرة والبناء. كان حماسه للحرفية والبناء مصدر إلهام دائم ويذكر بامتنان هنا.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Drill bit 5 mm | Craftomat | 22380487 | 5mm diameter; Quantity 1 |
| Drill bits 60 mm | Bosch | 32064647 | 60 mm diameter; Quantity 1 |
| Drill bits 7 mm | Craftomat | 22380520 | 7 mm diameter; Quantity 1 |
| Drilling machine | Makita | 25730054 | Standard handheld or bench drill; Quantity 1 |
| Hot glue gun | Einhell | 29051207 | For cage assembly; Quantity 1 |
| Hot glue sticks | Einhell | 29049664 | Compatible with hot glue gun; Quantity 5-10 |
| Makrolon cage | Animalab | 31200129 | Standard Type II cage; Quantity 1 |
| Makrolon cage | Animalab | 31200256 | Standard Type III cage; Quantity 1 |
| Plexiglass / acrylic glass | Bauhaus | 29122352 | Approx. 0.25 m² total; 5 mm thickness; Quantity 2DIN A3 sheets |
| Saw or milling device | Scheppach | 32079641 | Small band saw, jigsaw, or CNC mill; Quantity 1 |
| Threaded screws | Profi Depot | 10807533 | 20 mm × 3 mm; Quantity 4 |
| Wooden chopsticks / rods | Ikea | 903.429.71 | Round wooden rods; Quantity 3 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً