يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

نموذج فئران للاستعمار المشترك المهبلي لـ Candida albicans و Streptococcus agalactiae

115 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/72557

⸱

أغسطس 21, 2026

 , 

في هذه المقالة

ملخص

يفصل هذا البروتوكول طريقة لاستعمار مهبل الفئران بشكل مشترك بـ Candida albicans و Streptococcus agalactiae. ويمكن استخدام هذه الطريقة لدراسة التفاعلات متعددة الميكروبات، والتفاعلات بين المضيف والميكروب، واستجابات المضيف لهذه الكائنات الحية.

الملخص

يتم عزل ميكروبات متنوعة من المسالك المهبلية البشرية، ويمكن للعديد من الكائنات التي تستوطن هذا الموطئ البيئي التحول بين أنماط الحياة التعايشية والإمراضية. وتؤثر عدة عوامل، بما في ذلك تكوين المجتمع الميكروبي وبيئة المضيف، على نتائج المرض؛ ومع ذلك، فإن الآليات التي تحدد هذه النتائج ليست مفهومة جيداً. في هذه المخطوطة، نصف نموذجاً فأرياً لاستقصاء التفاعلات بين الممالك المختلفة واستجابة المضيف لـ Candida albicans و Streptococcus agalactiae (المجموعة ب المكورات العقدية، وبكتيريا المجموعة ب من المكورات العقدية (GBS)، وهي ممرضات انتهازية تستعمر الجهاز التناسلي الأنثوي (FGT). وتشير الأدلة الناشئة إلى أن *C. albicans* يعتبر الاستعمار عاملاً من عوامل الخطر لحمل بكتيريا GBS نظراً لتكرار عزلهما معاً. وخلال فترة الحمل، يمكن أن يؤدي استعمار GBS إلى نتائج عكسية. بما في ذلك التهاب السلى والمشيمة وموت الجنين داخل الرحم. كما يمكن أن تنتقل بكتيريا GBS إلى الجنين داخل الرحم أو لحديث الولادة أثناء الولادة، ويُعد سبباً رئيسياً لالتهاب السحايا لدى حديثي الولادة. ويُعتبر استعمار القناة المهبلية مقدمة حاسمة للإصابة بمرض بكتيريا GBS، وتفرض هذه البيئة العديد من الضغوط الانتقائية التي قد يتأثر بعضها بـ C. albicans استعمار. يصف هذا البروتوكول نموذجاً للاستعمار المتزامن C. albicansالاستعمار المشترك للمهبل بـ GBS باستخدام العلاج بالمضادات الحيوية وجرعة واحدة من 17β-إستراديول لإنشاء C. albicans الاستعمار، يليه سحب المضادات الحيوية والتلقيح بـ GBS. يتم قياس الأحمال الميكروبية في تجويف المهبل على مدار التجربة عن طريق الغسيل، بينما يتم قياس الأحمال في جميع أنحاء الجهاز التناسلي الأنثوي (FGT) عن طريق التشريح، والتجنيس، وزرع عينات من المهبل وعنق الرحم والرحم. ستسمح هذه الطريقة باستقصاء الآليات التي تؤثر من خلالها التفاعلات متعددة الميكروبات المباشرة وغير المباشرة على أنماط حياة وإمراضية هذين الكائنين، فضلاً عن المشهد المناعي للمضيف في الجهاز التناسلي الأنثوي.

المقدمة

Streptococcus agalactiae (المجموعة ب) المكورات العقدية (Streptococcus)تعد بكتيريا المجموعة ب من العقديات (GBS) ممرضاً بكتيرياً موجب الجرام يستعمر مواقع متعددة تحتوي على ميكروبات متنوعة، بما في ذلك الجهاز الهضمي والمهبل. وبينما يكون الاستعمار المهبلي عادةً بدون أعراض، يمكن لبكتيريا GBS أثناء الحمل أن تنتقل صعوداً من القناة المهبلية إلى الرحم وتخترق الأغشية السليمة، مما يسبب عدوى في السائل السلوي والمشيمة. وبذلك، فهي تشكل عامل خطر رئيسي لنتائج الحمل السلبية، وعدوى الجنين، وأمراض حديثي الولادة.1,2بما أنها مسبب رئيسي للعدوى الغازية لدى حديثي الولادة، فمن الضروري توصيف العوامل التي تؤثر على مخاطر ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على العمل الحيواني المعروض في هذه المخطوطة وتنفيذه وفقاً للجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوان (IACUC) في جامعة كولورادو أنشوتز بموجب البروتوكول رقم 00316. في الجدول الزمني أدناه، يشير اليوم 0 إلى يوم تلقيح S. agalactiae.

1. إعطاء المضادات الحيوية قبل التلقيح.

  1. قم بتحضير محلول مركز بتركيز 50 mg/mL لكل من ampicillin وneomycin وgentamycin المذابة في مياه شرب الفئران. استخدم مرشحاً بمسامية 0.22 µm لتعقيم محلول المضادات الحيوية.
  2. أضف محلول المضادات الحيوية إلى مياه شرب الفئران بتخفيف 1:100 عن طريق إضافة 1 mL من المحلول لكل 99 g من الماء.
  3. بعد مرور 7 أيام، استبدل الماء بتكرار ا....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

لتوصيف الاستعمار المهبلي بواسطة GBS و C. albicans، تم تلقيح الفئران عن طريق المهبل بسلالة C. albicans SC5314 أو بمحلول PBS كعنصر تحكم، يليه التلقيح بسلالة GBS COH1. تمثل هذه السلالة النمط المصلِي الكبسولي III شديد الضراوة، ونوع التسلسل 17، وهي العزلات الأكثر ارتباطاً بأمراض حديثي الولادة الغازية والتهاب السحايا1. وقد استُبعدت من التحليل الفئران التي لم تُستعمر بواسطة GBS بعد يوم واحد من التلقيح. وعلى مدار جدول زمني تجريبي مدته أربعة أيام، تقوم الفئران المستعمرة بواسطة GBS وحده بت.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يشكل استعمار بكتيريا GBS للمهبل خطراً جسيماً على صحة الأم والجنين وحديثي الولادة. وتعد النماذج الحية In vivo ضرورية لفهم محددات الاستعمار وتطوير العلاجات الوقائية. نصف في هذه المخطوطة نموذجاً للفئران لإحداث استعمار مهبلي مشترك للفئران ببكتيريا GBS وفطر C. albicans، وتقييم الأحمال الميكروبية في التجويف المهبلي والجهاز التناسلي الأنثوي (FGT)، وجمع الأنسجة ذات الصلة لإجراء تحليلات لاحقة. تم تطوير هذا النموذج لدراسة التفاعلات بين الفطريات والبكتيريا والتفاعلات بين المضيف والميكروب في سياق الاستعمار المهبلي .......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يصرح المؤلفون بعدم وجود تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

نود أن نشكر مكتب موارد حيوانات المختبر في جامعة كولورادو أنشوتس، بما في ذلك مدير المنشأة وموظفي الحيوان (vivarium) المتفانين. هذا العمل مدعوم بمنح NIH رقم R01AI153332 و R21AI188719 الممنوحة لـ K.S.D.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
0.22 µمرشح mSigma-AldrichSLGSR33SB
0.45 µمرشح mSigma-AldrichSLHAR33SB
حقنة لور لوك سعة 1 ملMcKesson16-S1C
خرز الزركونيا بحجم 1.0 ممResearch Products International9835
حقنة لور لوك سعة 10 ملMcKesson16-S10C
17β-إستراديولSigma-AldrichE8875تنبيه: 17βيمكن امتصاص الإستراديول عبر الجلد والأسطح المخاطية. لذا، يجب ارتداء معدات الوقاية الشخصية المناسبة وتوخي الحذر أثناء الاستخدام.
18G 1.5" إبرةبي دي (BD)305196
أنبوب بسدادة لولبية سعة 2 مللترFisher Scientific02-681-374
26G 0.5" إبرةMcKesson16-N2605
آجارAlpha BiosciencesA01-102
أبامبيسيلينResearch Products InternationalA40040
وسط CHROMagar Candidaكروماجار (CHROMagar)CA222
CHROMagar StrepBCHROMagarSB282
جنتاميسينVWR لعلوم الحياة0304
نيومايسينResearch Products InternationalN20040
محلول ملحي منظم بالفوسفاتFisher ScientificBP2944
زيت السمسمSigma-AldrichS3547
مرق تود هيويتResearch Products InternationalT47500
مرق بيبتون وديكستروز للخميرةبي دي (BD)242810

المراجع

  1. Megli CJ et al. Virulence and pathogenicity of group B Streptococcus.: virulence factors and their roles in perinatal infection. Virulence. 2025;16(1):2451173.
  2. Manuel G et al. Group B streptococcal infections in pregnancy and early life. Clin Microbiol Rev. 2025;38(1):e00154-22.
  3. Verani JR, McGee L, Schrag SJ. Prevention of perinatal group B streptococcal disease: revised guidelines from CDC, 2010. MMWR Recomm Rep. 2010;59(RR-10):1-36.
  4. Prevention of group B streptococcal early-onset disease in newborns: ACOG Committee Opinion Summary, Number 797. Obstet Gynecol. 2020;135(2):489....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

المكورات العقدية من المجموعة بالجهاز التناسلي الأنثويالتفاعلات بين الممالكالعلاج بالمضادات الحيويةتقدير العبء الميكروبيالاستجابة المناعية للمضيف

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً