بيان أخلاقي: أُجريت هذه الدراسة وفقاً للإرشادات المؤسسية والمبادئ الأخلاقية لإعلان هلسنكي. تم الحصول على الموافقة الأخلاقية من اللجنة الأخلاقية بجامعة بيشة (UBCOM-RELOC)، بموجب رقم الموافقة H-06-BH-087/(0802.23). كانت المشاركة تطوعية، وتم الحصول على موافقة كتابية مستنيرة من جميع المشاركين قبل إدراجهم في الدراسة. تظهر المواد والمعدات والإجراءات التحليلية المستخدمة في الدراسة ملخصة في جدول المواد.
تصميم الدراسة ومكان إجرائها
أُجريت دراسة مستعرضة استعادية في مستشفى الولادة والأطفال في بيشة بالمملكة العربية السعودية، في الفترة ما بين ديسمبر 2022 ومايو 2023، لتقييم حالة الحديد وفحص العوامل المرتبطة بنقص الحديد بين الحوامل في منطقة عسير الشمالية.
مجتمع الدراسة ومنهجية أخذ العينات
تم إدراج ما مجموعه 200 مشاركة، بما في ذلك 135 امرأة حاملاً يترددن على عيادات رعاية ما قبل الولادة الروتينية، و65 امرأة غير حامل متطابقة في العمر شكلن المجموعة الضابطة. تم استقطاب المشاركات من العيادات الخارجية عن طريق العينة الميسرة خلال فترة الدراسة. تم التواصل بالتتابع مع النساء المؤهلات اللواتي حضرن خلال ساعات عمل العيادة، واستمر التوظيف حتى الوصول إلى حجم العينة المستهدف. وللحد من تحيز الاختيار المحتمل ضمن هذا الإطار، تم مطابقة الضوابط من حيث العمر باستخدام العينة العشوائية البسيطة من بين المترددات على العيادة من غير الحوامل والمؤهلات للدراسة.
كانت النساء الحوامل مؤهلات للإدراج إذا كانت أعمارهن 18 عاماً أو أكثر، وكان عمر الحمل يتراوح بين 12 و36 أسبوعاً. تم إدراج المشاركات المؤهلات بغض النظر عن حالة الحديد لديهن، ثم صُنّفن لاحقاً كنساء حوامل مصابات بفقر الدم الناجم عن نقص الحديد (IDA) أو غير مصابات به بناءً على النتائج المختبرية. ووفقاً لمعايير منظمة الصحة العالمية (WHO)، عُرِّف فقر الدم أثناء الحمل على أنه تركيزات الهيموغلوبين (Hb) < 11.0 جم/ديسيلتر خلال الثلثين الأول والثالث من الحمل و < ١٠.٥ جم/ديسيلتر خلال الثلث الثاني من الحمل. وقد تم تشخيص فقر الدم بنقص الحديد لدى النساء اللاتي استوفين حد الهيموجلوبين المحدد لفترة الحمل وكان لديهن دليل على نقص الحديد، بما في ذلك مستوى الفيريتين في المصل. < ١٥ نانوغرام/مل، حديد المصل < 10 µmol/L، وسعة ربط الحديد الكلية (TIBC) ≥ 68 µmol/L17,18. صُنفت النساء الحوامل اللواتي لم يستوفين هذه المعايير التشخيصية ضمن مجموعة الحوامل غير المصابات بنقص الحديد (IDA). أما مجموعة الضبط فكانت من النساء غير الحوامل في سن الإنجاب، واللواتي لا يعانين من حمل حالي ولا يعانين من اضطرابات دموية معروفة. وشملت معايير الاستبعاد لكلا المجموعتين وجود تاريخ موثق لحالات مزمنة أو جهازية مرتبطة باختلال استقلاب الحديد أو الحالة الالتهابية، مثل مرض الكلى المزمن، أو اضطرابات المناعة الذاتية، أو الأورام الخبيثة، أو متلازمة القولون الالتهابي، أو أمراض الكبد المزمنة، أو اضطرابات الحديد الوراثية (مثل داء ترسب الأصبغة الدموية). كما استُبعدت النساء المصابات بعدوى حادة وقت أخذ العينات، وأولئك اللواتي تلقين علاجاً بالحديد عن طريق الوريد أو نقل دم خلال الأشهر الثلاثة السابقة، واللواتي يتلقين علاجاً طويل الأمد بمثبطات المناعة. تم تسجيل مؤشر كتلة الجسم (BMI) والعرق لجميع المشاركات؛ ومع ذلك، لم تُستخدم هذه المتغيرات كمعايير استبعاد، بل اعتبرت كمتغيرات مصاحبة محتملة في التحليل.
تحديد حجم العينة
تـم حساب حجم العينة باستخدام برنامج حاسوبي لحساب حجم العينات الوبائية19، بناءً على انتشار متوقع لفقر الدم بنقص الحديد (IDA) بين الحوامل في المملكة العربية السعودية بنسبة 40%6، مع مستوى ثقة 95% وهامش خطأ 5%. قُدِّر الحد الأدنى لحجم العينة المطلوب بـ 182 مشاركة؛ وبناءً عليه، تم استقطاب إجمالي 200 مشاركة لتعزيز الدقة الإحصائية.
جمع البيانات
الاستبيان
جُمعت البيانات باستخدام استبيان مُقنّن ومُصادق عليه. تم تطوير الاستبيان بعد مراجعة شاملة للأدبيات العلمية، وخضع للتقييم من قبل لجنة من الخبراء المختصين، بما في ذلك أطباء التوليد، وأخصائيي التغذية، وعلماء الأوبئة، لضمان صدق المحتوى. كما أُجريت دراسة استطلاعية شملت 20 مشاركاً، لم يتم إدراجهم في التحليل النهائي، لتقييم مدى الوضوح والموثوقية والجدوى. وكان الاتساق الداخلي للاستبيان مقبولاً، حيث بلغت قيمة معامل ألفا كرونباخ 0.81.
تألف الاستبيان النهائي من ثلاثة أقسام تضم إجمالاً 35 بنداً (الملف التكميلي 1):
القسم 1 (البيانات السوسيو-ديموغرافية، 10 بنود): العمر، والمستوى التعليمي، والمهنة، ومكان الإقامة، والجنسية، والتاريخ العائلي للإصابة بفقر الدم.
القسم 2 (العادات الغذائية، 12 بندًا): تكرار استهلاك الأطعمة الغنية بالحديد (اللحوم الحمراء، واللحوم البيضاء، والأسماك، والخضروات، والحبوب المدعمة)، وتناول الشاي والقهوة، والنظام الغذائي. تم اختيار المتغيرات الغذائية مسبقًا بناءً على صلتها المثبتة بمدخول الحديد، والتوافر الحيوي للحديد، والعوامل الغذائية التي قد تؤثر على امتصاص الحديد. تضمن الاستبيان المصادر الغذائية الرئيسية للحديد، بما في ذلك اللحوم الحمراء، والدواجن، والأسماك، والخضروات الورقية الخضراء، والحبوب المدعمة. تم تقييم الأطعمة الغنية بفيتامين C، وخاصة الحمضيات، لأن فيتامين C يمكن أن يعزز امتصاص الحديد غير الهيمي. وفي المقابل، تم تقييم استهلاك الشاي والقهوة لأن البوليفينولات الغذائية قد تثبط امتصاص الحديد غير الهيمي عند تناولها مع الوجبات أو بالقرب منها. كما تم تقييم النظام الغذائي واستهلاك الوجبات السريعة للإشارة إلى الأنماط الغذائية العامة والكفاية التغذوية. وقد استندت البنود الغذائية المختارة إلى المراجعات الأدبية التي أجريت أثناء تطوير الاستبيان، وتم تقييمها لاحقًا من قبل خبراء في التوليد والتغذية والوبائيات للتحقق من صدق المحتوى.
القسم 3 (التاريخ السريري والأعراض، 13 بنداً): العمر الحملي، عدد الولادات، تاريخ نقل الدم، التعب، الدوار، الحمى، وغيرها من الأعراض المرتبطة عادةً بفقر الدم.
التقييم الكيميائي الحيوي
تم الحصول على عينة دم وريدي بحجم 5 mL من كل مشارك بعد صيام ليلة كاملة. تم إجراء طرد مركزي للعينات بسرعة 2000 × g لمدة 15 min لفصل المصل، والذي تم تحليله لاحقاً على الفور. تم قياس تركيز الهيموجلوبين باستخدام محلل دم آلي وسُجلت النتائج بالجرام لكل ديسيلتر (g/dL). كما تم تقييم مستويات الفيريتين في المصل باستخدام مقايسة المييزات الكيميائية الكهربائية (ECLIA) على محلل مناعي آلي وعُبر عنها بالنانوجرام لكل مليلتر (ng/mL). وتم تحديد مستوى الحديد في المصل، والسعة الرابطة الكلية للحديد (TIBC)، والسعة الرابطة غير المشبعة للحديد (UIBC) باستخدام طريقة قياس لونية على محلل كيميائي حيوي آلي، مع تسجيل النتائج بالميكرومول لكل لتر (µmol/L). أما نسبة تشبع الترانسفيرين (TR-SAT)، فقد حُسبت كنسبة الحديد في المصل إلى TIBC مضروبة في 100 وعُبر عنها كنسبة مئوية.
الإحصاءات وتحليل البيانات
تم ترميز البيانات وتحليلها باستخدام برامج تحليل إحصائي موحدة. واستُخدمت الإحصاءات الوصفية، بما في ذلك المتوسطات والانحرافات المعيارية والنسب المئوية، لتلخيص المتغيرات الاجتماعية الديموغرافية والغذائية والسريرية والكيميائية الحيوية. وأُجريت المقارنات بين المجموعات باستخدام اختبار t لـ Student للعينات غير المرتبطة أو تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA)، حسبما كان مناسباً. وحُددت الدلالة الإحصائية عند قيمة p < 0.05. كما أُنتجت المخرجات الرسومية باستخدام برامج الرسم البياني والإحصاء.
لفحص العوامل المرتبطة بشكل مستقل بفقر الدم الناجم عن نقص الحديد (IDA)، تم تطبيق نموذج انحدار لوجستي متعدد المتغيرات. تم تحديد حالة IDA كمتغير تابع ثنائي (IDA = 1، غير مصاب بـ IDA/مجموعة ضابطة = 0). وقد اختيرت المتغيرات المستقلة مسبقاً بناءً على المعقولية البيولوجية والأدلة المستمدة من الدراسات السابقة، وشملت الخصائص السوسيوديموغرافية (مكان الإقامة، والتاريخ العائلي لفقر الدم)، والحالة الفسيولوجية (الحمل)، والمتغيرات الغذائية (تناول اللحوم الحمراء، والدواجن، والحمضيات).
تم ترميز المتغيرات الفئوية باستخدام متغيرات وهمية، وصُنفت متغيرات المأخوذ الغذائي إلى منخفضة أو كافية بناءً على تكرار الاستهلاك المُبلغ عنه (≤2 مرة في الأسبوع مقابل >2 مرة في الأسبوع). أُدخلت جميع المتغيرات المختارة في نموذج الانحدار في آن واحد لتقدير ارتباطاتها المستقلة مع مراعاة العوامل المربكة المحتملة. تم تسجيل نسب الأرجحية المعدلة (ORs) مع فواصل ثقة (CIs) بنسبة 95%، حيث تعكس نسب الأرجحية التي تزيد عن 1 احتمالية أعلى للإصابة بفقر الدم بنقص الحديد (IDA). وعُرض ملخص مرئي لنسب الأرجحية وفواصل الثقة المقابلة لها بنسبة 95% باستخدام مخطط غابوي (forest plot) تم إنشاؤه بواسطة برنامج جداول بيانات.