يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

منصة ميكروفلويدية لدراسة أدوار الضغط الميكانيكي في التفاعلات بين الخلايا الورمية والخلايا المناعية ضمن مصفوفة خارج خلوية ثلاثية الأبعاد

121 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/72929

⸱

أغسطس 28, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biomedical Engineering, Cornell University, 2Department of Biological and Environmental Engineering, Cornell University, 3Translational Science and Therapeutics Division, Fred Hutchinson Cancer Center, 4Department of Pathology, Albert Einstein College of Medicine

في هذه المقالة

ملخص

نقدم بروتوكولاً لاستخدام منصة للموائع الدقيقة لنمذجة التفاعلات بين الورم والجهاز المناعي ضمن بيئة ثلاثية الأبعاد (3D). وقد كشفت نتائجنا أن الخلايا القاتلة الطبيعية (NK cells) حافظت على نشاطها المضاد للأورام تحت تأثير الضغط الميكانيكي.

الملخص

تؤثر القوى الميكانيكية بشكل كبير على قدرة الخلايا المناعية على قتل الخلايا الورمية في سياق العلاج المناعي القائم على الخلايا. ولكي تقتل الخلايا المناعية الخلايا الورمية، يجب أن تسلط قوى على الخلية المستهدفة وتُشكل تشابكاً مناعياً، يتم من خلاله إرسال الجزيئات السامة للخلايا —بما في ذلك granzyme B. وعلى الرغم من أهميتها، لا يزال فهم كيفية الاستفادة من الإشارات الميكانيكية لتعزيز القتل بوساطة المناعة محدوداً. ويعود هذا النقص في المعرفة جزئياً إلى غياب الأدوات القادرة على توفير إجهاد ميكانيكي محكوم بدقة للمزارع الخلوية في بيئة واقعية من الناحية الفسيولوجية. هنا، نصف جهاز ضغط مائع دقيق يمكنه تطبيق ضغط استاتيكي أو ديناميكي على الكريات الورمية المدمجة في المصفوفة خارج الخلوية (ECM)، مع السماح بالتصوير في الوقت الحقيقي للتفاعلات بين الورم والمناعة عبر المجهر الضوئي.

تتكون المنصة الموائعية الدقيقة من 12 حجرة (6 حجرات تحكم و6 حجرات وظيفية). وتحتوي كل حجرة على غرفة خلوية تقع مباشرة أسفل وحدة التحكم في الضغط. يتم وضع الكريات الخلوية المضمنة في المادة الخلالية خارج الخلوية (ECM) داخل الغرفة الخلوية. وباستخدام هذه المنصة، بحثنا في كفاءة القتل للخلايا القاتلة الطبيعية (NK) ضد كريات أورام الثدي (MCF-7) تحت ضغط ميكانيكي محدد. وأظهرت النتائج أن الخلايا القاتلة الطبيعية ظلت المحرك الأساسي لموت كريات الأورام بغض النظر عن الضغط الميكانيكي في كولاجين بتركيز 1.5 mg/mL. وهذا يشير إلى أن الخلايا القاتلة الطبيعية يمكنها الحفاظ على نشاطها المضاد للأورام تحت إجهاد الضغط. وتبرهن هذه النتائج على فائدة هذه المنصة في دراسة دور القوى الميكانيكية في التفاعلات بين الورم والجهاز المناعي. وتعمل الدراسات الجارية حالياً على تحديد الآليات الجزيئية التي تسمح للخلايا المناعية بالتكيف مع إجهاد الضغط. وقد تكشف الرؤى المكتسبة من هذه الدراسات عن مسار علاجي واعد.

المقدمة

يُعد العلاج المناعي للسرطان القائم على الخلايا نهجاً علاجياً يستخدم الخلايا المناعية لاستهداف الخلايا السرطانية1. وقد أظهرت هذه الاستراتيجية نجاحاً ملحوظاً في علاج سرطانات الدم2,3,4. ومع ذلك، فإن مستوى النجاح الملحوظ في سرطانات الدم لم يُنقل بالكامل بعد إلى علاج الأورام الصلبة5,6,7. وأحد الأسباب الرئيسية لهذا القصور هو البيئة الدقيقة المثبطة للمناعة في الورم (TME) والتي تميز الأورام الصلبة.

تتميز البيئة الدقيقة للورم (TME) بإشارات ميكانيكية مميزة يمكنها تنظيم السلوك الخلوي. ويتطلب القتل الفعال للخلايا الورمية بواسطة الخلايا المناعية أن تبذل هذه الأخيرة قوى على الخلايا المستهدفة وتنشئ مشبكًا مناعيًا يتم من خلاله إيصال الجزيئات السامة للخلايا8. لذا، فإن فهم كيفية تأثير القوى الميكانيكية على وظيفة الخلايا المناعية قد يكشف عن استراتيجيات علاجية جديدة لتحسين فعالية العلاجات المناعية القائمة على الخلايا ضد الأورام الصلبة.

تتمثل إحدى السمات الميكانيكية المحددة للبيئة الدقيقة للأورام الصلبة (TME) في إجهاد الضغط الذي تفرضه البيئة الدقيقة للورم على الورم النامي9,10. وحتى الآن، ركزت معظم دراسات الضغط على التأثيرات الواقعة على سلوك الخلايا الورمية10,11. ومؤخراً فقط، تحول الاهتمام نحو فهم كيفية تأثير الضغط على الخلايا المناعية داخل الـ TME12. ونتيجة لذلك، لا تزال الآليات التي يؤثر بها إجهاد الضغط على هجرة الخلايا القاتلة الطبيعية (NK)، وتكوين المشبك المناعي، ونشاط السمية الخلوية غير مفهومة جيداً وغير مقاسة بشكل كافٍ. وتمثل هذه الفجوة قصوراً حرجاً في فهمنا لكيفية الاستفادة من الإشارات الميكانيكية داخل الـ TME لتعزيز الاستهداف المناعي للأورام الصلبة.

تتمثل إحدى العقبات الرئيسية في معالجة هذا السؤال في نقص المنصات التجريبية القادرة على تطبيق ضغط محكوم وقابل للقياس ضمن بيئات مجهرية ثلاثية الأبعاد ذات صلة فسيولوجياً، مع تمكين التصوير في الوقت الفعلي للتفاعلات بين الورم والجهاز المناعي في آن واحد. تضمنت النهج التجريبية المبكرة لدراسة إجهاد الضغط دمج الكريات في هلام الأجاروز13. وبينما نجحت هذه الطريقة في محاكاة الحصر الفيزيائي، إلا أنها ألغت التفاعلات الطبيعية بين الخلايا والمصفوفة خارج الخلية (ECM). وقد طبق Dolega et al. الضغط الاسموزي لاستحثاث إجهاد الضغط؛ ومع ذلك، كانت الكريات معلقة في وسط زراعي وبالتالي ظلت مفتقرة إلى تفاعلات ECM9. واستخدم Pandey et al. غشاءً مسامياً (transwell insert) وأوزاناً لضغط الكريات المدمجة في الكولاجين، وهو ما حافظ على التفاعلات بين ECM والخلايا، ولكن ذلك حد من إمكانية التصوير عالي الدقة المطلوب لقياس حركة الخلايا المناعية والنشاط السام للخلايا14. وتؤكد هذه القيود مجتمعة الحاجة إلى منصات تجريبية تتيح التصوير في الوقت الفعلي للاستجابات المورفولوجية للخلايا تجاه الضغط ضمن البيئة المجهرية للورم (TME).

نقدم هنا بروتوكولاً لجهاز ضغط ميكروني15 يتيح التطبيق المتحكم فيه لإجهاد الضغط مع الحفاظ على التفاعلات ذات الصلة فسيولوجياً بين المصفوفة خارج الخلوية (ECM) والخلايا، ويدعم التصوير عالي الدقة للخلايا الحية لديناميكيات المناعة والأورام. يتكون البروتوكول من تحضير مكونات الجهاز (القسم 1)، وتجميع الجهاز (القسم 2)، وتصوير التفاعلات بين الورم والجهاز المناعي (القسم 3). ونوضح سير العمل باستخدام مقايسة قتل بواسطة خلايا NK ضد كرويات ورمية موسومة بالبروتين الفلوري الأخضر (GFP). وإلى جانب هذا التطبيق، يمكن تكييف هذه المنصة بسهولة لاستقصاء آثار القوى الميكانيكية على نطاق واسع من أنواع الخلايا والتفاعلات الخلوية في البيئات الميكرونية ثلاثية الأبعاد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. تحضير مكونات الجهاز

  1. تنشيط سطح غرفة تحميل العينة
    1. ضع قناعاً فوق غرفة تحميل العينة (الطبقة 1، L1) بحيث لا تظل سوى الآبار مكشوفة.
    2. عرّض الطبقة 1 المقنعة لبلازما الأكسجين لمدة 15 ثانية باستخدام إعداد الطاقة العالية (45 وات).
    3. ضع الطبقة 1 في أطباق بتري، ثم تابع الخطوات التالية داخل كابينة السلامة الحيوية.
    4. عالج كل بئر بـ 10 µL بتركيز 1% من البولي إيثيلين إيمين (PEI) لمدة 10 دقائق.
    5. أزِل مادة PEI من الآبار عن طريق الشفط بالتفريغ من الزوايا الأربع لكل بئر لمنع خدش السطح الزجاجي.
    6. اغسل الآبار بـ 10 µL من المحلول الملحي المنظم بالفوسفات (PBS)، ثم قم بإزالة سائل الغسل عن طريق الشفط الفراغي من الجانب.
    7. عالج الآبار بـ 10 µL من الغلوتارالدهيد (glutaraldehyde) بتركيز 0.1% لمدة 30 دقيقة، ثم إزالة الغلوتارالدهيد عن طريق الشفط بالتفريغ من الزوايا.
    8. اغسل الآبار بمحلول PBS ثلاث مرات، مع إزالة سائل الغسل من الزوايا بعد كل عملية غسل.
    9. غلف طبق بتري الذي يحتوي على الطبقة 1 بورق الألمنيوم، واتركه في كابينة السلامة الحيوية طوال الليل.
  2. التعقيم للهيكل المعدني
    1. اغمر الـ 38 مم × الإطار المعدني مقاس 88 مم والبراغي الاثني عشر ذات الرأس المسطح من طراز M2.5 في إيثانول بتركيز 70% طوال الليل.
  3. التهيئة لوحدة التحكم في الضغط
    1. عرض وحدة التحكم في الضغط لبلازما الأكسجين لمدة 30 ثانية باستخدام إعداد الطاقة العالية (45 واط).
    2. اغمر وحدة التحكم في الضغط، بحيث تكون الميزات متجهة للأسفل، في ماء منزوع الأيونات (DI) طوال الليل لملء القنوات وغرف وحدة التحكم في الضغط.
    3. في اليوم التالي، أخرج وحدة التحكم في الضغط من المياه منزوعة الأيونات (DI water) التي كانت مغمورة فيها.
    4. املأ خزان الموائع الدقيقة بـ 50 مل من الماء منزوع الأيونات (DI water).
      ملاحظة: يتكون خزان الموائع الدقيقة من أنبوب مخروطي سعة 50 مل مزود بغطاء مخصص يحتوي على وصلتين للأنابيب: خط أنابيب هوائي وخط أنابيب لتوصيل السوائل.
    5. قم بتوصيل محقنة مملوءة بالهواء بخط الأنابيب الهوائية.
    6. اضغط مكبس المحقنة ببطء لزيادة الضغط داخل الخزان ودفع الماء منزوع الأيونات (DI water) عبر أنابيب توصيل السوائل حتى تمتلئ الأنابيب ويبدأ الماء في التنقيط من الأنبوب.
    7. قم بتوصيل أنبوب توصيل السوائل المعبأ مسبقاً والناقط عبر الموزع المصنوع من البوليكربونات، ثم إلى المدخل الذي يبلغ قطره 1.5 مم والموجود في الجزء الخلفي من وحدة التحكم في الضغط.
    8. اترك وحدة التحكم في الضغط ومجموعة الموزع لتجف في الهواء لمدة ساعتين. وبمجرد جفافهما تماماً، تصبح وحدة التحكم في الضغط ومجموعة الموزع جاهزتين للخطوة التالية.

2. تجميع الجهاز

  1. تحضير الكولاجين المدمج بالخلايا
    1. أخرج الإطار المعدني والبراغي من الإيثانول بتركيز 70% وجففهما.
    2. ضع ثلاثة في كابينة السلامة الحيوية، 600 µL أنابيب دقيقة على الثلج. قم بتسمية الأنابيب على النحو التالي: "ن" (التعادل)، "نوع (sp)" (كرويات MCF-7)، و "الخلايا التائية المتخصصة (sp) والخلايا القاتلة الطبيعية (NK)" (كرويات MCF-7 مع الخلايا القاتلة الطبيعية NK cells).
    3. قم بتحضير خليط التعادل عن طريق إضافة 10× الحجم المطلوب من الوسط الغذائي 199 (M199) وهيدروكسيد الصوديوم (NaOH) إلى الـ "ن" أنبوب.
    4. انقل الحجم المناسب من خليط M199:NaOH إلى "نوع" و "خلايا sp+NK" أنابيب للوصول إلى تركيز نهائي قدره 1× التركيز.
    5. جمع الكريات الورمية وطردها مركزياً عند 141 × جـ لمدة 3 دقائق للسماح للكريات بالترسب في قاع الأنبوب.
      ملاحظة: الكريات الورمية تقريبًا 200 µm تم إنتاج آبار دقيقة من الأجاروز بقطر [أدخل القيمة] باستخدام منصة الآبار الدقيقة من الأجاروز الموصوفة سابقاً16وبإيجاز، 3 × 106 تم استزراع خلايا MCF-7 في طبق 36 × مصفوفة آغاروز ذات آبار دقيقة مكونة من 36 بئراً 200 µm في القطر و 200 µm بعمق، ثم زُرعت لمدة 7 أيام لإنتاج الكريات الورمية المستخدمة في التجارب.
    6. أزل السائل الطافي بعناية وأعد تعليق الكريات في 200 µL من الوسط الغذائي الكامل لـ MCF-7/NK بنسبة 50:50 (الجدول 1 و جدول 2).
    7. اجمع خلايا NK في أنبوب مخروطي سعة 50 مل، ثم قم بالطرد المركزي عند 141 × جـ لمدة 4 دقائق، ثم قم بعدّ الخلايا.
      ملاحظة: يجب أن تكون حيوية الخلايا القاتلة الطبيعية (NK cells) >85% في يوم التجربة.
    8. أعد تعليق الراسب الناتج في 200 µL من وسط NK الكامل.
    9. أضف الحجم المناسب من المحلول المخزون للكولاجين إلى كل أنبوب طرد مركزي دقيق.
    10. أضف الحجم المناسب من معلق الخلايا إلى كل أنبوب للحصول على حجم نهائي قدره 200 µL يحتوي على 1.5 ملجم/مل من الكولاجين.
      ملاحظة: الـ "نوع" يحتوي المعلق على كرويات ورمية فقط، بينما... "الخلايا التائية القاتلة والخلايا القاتلة الطبيعية (sp+NK)" يحتوي المعلق على كريات ورمية و1.5 × 106 الخلايا القاتلة الطبيعية (NK cells).
    11. امزج بلطف عن طريق السحب والضخ بالماصة لضمان التوزيع المتساوي للخلايا والكولاجين مع تقليل تكوّن الفقاعات.
  2. تجميع الجهاز وتحميل الخلايا
    1. ضع الطبقة 1 داخل الإطار المعدني المجفف.
    2. تحميل 9 µL من خليط الكولاجين في كل بئر.
    3. قم بمحاذاة وحدة التحكم في الضغط ومجموعة الموزع مع غرف الخلايا في الطبقة 1 باستخدام المجهر.
    4. أدخل البراغي المجففة عبر المجمّع وفي الإطار المعدني، مع تثبيت وحدة التحكم في الضغط والطبقة 1 (Layer 1) بين المجمّع والإطار المعدني.
    5. ضع الجهاز الذي تم تجميعه في 37 °C، 5% CO2₂ توضع في الحاضنة لمدة 45 دقيقة للسماح ببلمرة الكولاجين.
    6. أضف وسط زراعة الخلايا الكامل MCF-7/NK بنسبة 50:50 عبر منافذ الوسط الأربعة.

3. تصوير التفاعلات بين الورم والجهاز المناعي

  1. ضع الجهاز الذي تم تجميعه داخل حاضنة المنصة المثبتة على مجهر مضاد للفلورة مقلوب للتصوير الحي للخلايا.
    ملاحظة: حافظت حاضنة المنصة على درجة حرارة قدرها 37 °C ورطوبة تبلغ 50% تقريباً طوال فترة التصوير.
  2. ضع صندوق إيواء ثانوي فوق الجهاز المُجمَّع للحفاظ على البيئة الداخلية عند 37 °C، ورطوبة بنسبة 100%، و5% من ثاني أكسيد الكربون (CO2)₂ طوال فترة التصوير.
  3. قم بتوصيل الجهاز بجهاز التحكم في الضغط باستخدام الأنابيب الهوائية.
  4. التقط صوراً بالحقل المضيء (brightfield) وصوراً بالبروتين الفلوري الأخضر (GFP) للكريات الورمية قبل تطبيق الضغط، وذلك لتمكين تقييم تشوه الكريات بعد عملية الضغط.
  5. طبق ضغطاً ثابتاً قدره 120 ميلي بار طوال فترة التصوير.
    ملاحظة: يتيح برنامج التحكم في الضغط للمستخدم تحديد مخطط الضغط ومقداره المطبق أثناء التجربة. الشكل التكميلي 1 يحتوي على مخطط لنظام التحكم في الضغط.
  6. ابدأ التصوير بالفاصل الزمني عن طريق التقاط صور بالمجال المضيء وصور لبروتين GFP كل 10 دقائق لمدة 18 ساعة.
    ملاحظة: تم الحصول على الصور عند المستوى Z المركزي لكل كروية ورمية باستخدام عدسة 20× عدسة شيئية في مجهر فلوري فوقي مقلوب. تم التقاط صور الحقل المضيء وصور فلورة GFP بأوقات تعريض بلغت 200.1 ملي ثانية و 298.9 ملي ثانية، على التوالي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في التجارب التالية، تم استخدام جهاز ضغط ميكروفلويديك15 لنمذجة التفاعلات بين الورم والجهاز المناعي ضمن بيئة ميكروية ثلاثية الأبعاد (3D) ذات صلة فسيولوجياً، وبإمكانه في الوقت ذاته تطبيق ضغوط استاتيكية وديناميكية على الكريات الورمية (الشكل 1). تظهر مكونات الجهاز (الشكل 1A1) وترتيب تجميعها (الشكل 1A2) في الشكل 1A. يعمل الإطار المعدني كقاعدة للجهاز، م...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تصف هذه الطريقة استخدام جهاز ضغط ميكروفلويديك لاستقصاء آثار إجهاد الضغط على التفاعلات بين الورم والجهاز المناعي. ويستطيع هذا النظام تطبيق ضغط ميكانيكي محكوم على الكريات الورمية المدمجة داخل مصفوفة كولاجين ثلاثية الأبعاد (3D). وتتيح الركيزة الزجاجية التي تشكل قاعدة حجرة الخلايا (L1) تصويراً حياً عالي الدقة للخلايا، مما يجعل هذه المنصة مناسبة تماماً للدراسات التي تهدف إلى قياس حركة الخلايا المناعية، وتسللها، ونشاطها السام للخلايا. ومن المهم أن النظام يحافظ على التفاعلات بين الخلايا وبعضها وبين الخلايا والمصفوفة، مع السماح ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضاربات مصالح للإفصاح عنها.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من خلال منحة من المعهد الوطني للسرطان (المنحة R01CA221346)، وزمالة Lance R. Collins من كلية الهندسة بجامعة Cornell لـ FM، وصندوق عميد جامعة Cornell لمرونة الأبحاث لـ FM. أُجري هذا العمل جزئياً في Cornell NanoScale Facility، وهي عضو في البنية التحتية الوطنية المنسقة لتكنولوجيا النانو (NNCI)، والتي تدعمها المؤسسة الوطنية للعلوم (المنحة NNCI-2025233).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1 عياري NaOHSigma-Aldrich797247 µL
10× وسط M199Sigma-AldrichM0650200 µL
2-مركابتويثانولThermoFisher313500100
ضاغط هواءElveflowضاغط الهواء Jun-Air Model 3
منصة مجهر آلية بمحورين X-Yالأجهزة العلمية التطبيقيةMS-2000
كاميرا CCDHamamatsu PhotonicsORCA-R2
مصل جنين البقر (FBS)GeminiBioS11150
أنابيب توصيل السوائلإليفلو (Eleveflow)لفافة احتياطية من أنابيب PTFE1/16 بوصة في القطر الخارجي
مصدر الضوء الفلوريExcelitas Technologies وحدة الحاسوب X-Cite series 120
حمض الفوليكسيجماF7876
غلوتارالدهيدعلوم المجهر الإلكتروني 160190.10%
منظف البلازما HarrickHarrick PlasmaPDC-001-HPإعداد الطاقة العالية (45 واط)
مصل الخيل (HS)ThermoFisher16050-122
مجهر فلوريسنتي انعكاسيOlympusIX81عدسة شيئية بقوة تكبير 20x (الفتحة العددية NA = 0.25)، تعمل باستخدام برنامج Olympus CellSens
قناعآرتوس (Artus)رقائق تسوية من الألومنيوم مكونة من 10 صفحاتالسُمك هو 0.0125" (٠.٧٥ مم)
خط خلوي مستقر من خلايا MCF-7/GFP (بورسيميسين)GenTarget IncSC050-G
إطار معدنيمُصنّع حسب الطلب مُصنّع حسب الطلب 
خزان الموائع الدقيقةإيليفلو (Eleveflow)خزان مائعيات دقيقة سعة 50 مل 
المجهر OlympusCKX41عدسة شيئية بقوة تكبير 4x              (NA = 0.1)
ميو-إينوزيتولسيجماI7508
NK-92 MIATCCCRL-2407
بنسلين/ستربتومايسينGibco 15140122
محلول ملحي منظم بالفوسفات (PBS) ThermoFisher 10010072
أنابيب نيوماتيكيةإيليف فلو (Eleveflow)مدخل أنبوب بولي إيثر PUR شفاف4" القطر الخارجي بالـ ملم
بولي إيثيلين إيمين (PEI)Sigma-AldrichP31431%
منظم الضغطElveflowOB1 NK4يتم تشغيله باستخدام برنامج Elveflow Smart Interface
كولاجين النوع الأول من ذيل الجرذ Corning35424931.3 µL من محلول كولاجين مركز بتركيز 9.6 ملغم/ملل
البراغيفيليبسبرغي M2.5 برأس بان (Pan-head)١٢ برغيًا
حضانة المنصةالبلاستيك الدقيقمُصنَّع حسب الطلب
حقنةBecton Dickinson303134مقترن بقفل متكامل من نوع luer ذكوري بمقاس 3/32" وصلة شائكة ذات قطر خارجي (OD Barb) من Eleveflow
αوسط MEM الغذائيThermoFisher12561056

المراجع

  1. Cao J-Z, Zhao W, Xia X-J. Cell-based cancer immunotherapy: milestones, mechanistic insights, and emerging therapeutic directions. Acta Pharmacol Sin. 2026:https://doi.org/10.1038/s41401-026-01811-y.
  2. Yang R, Yang Y, Liu R, et al. Advances in CAR-NK cell therapy for hematological malignancies. Front Immunol. 2024;15:1414264.
  3. Neelapu SS, et al. Axicabtagene ciloleucel CAR T-cell therapy in refractory large B-cell lymphoma. N Engl J Med. 2017;377(26):2531-44.
  4. Sheykhhasan M, Manoochehri H, Dama P. Use of CAR T-cell for acute lymphoblastic leukemia (ALL) treatment: a review study. Cancer Gene Ther. 2022;29(8-9):1080-96.
  5. Tan S, Li D, Zhu X. Cancer immunotherapy: Pros, cons and beyond. Biomed Pharmacother. 2020;124:109821.
  6. Chen T, Wang M, Chen Y, Liu Y. Current challenges and therapeutic advances of CAR-T cell therapy for solid tumors. Cancer Cell Int. 2024;24(1):133.
  7. Peng L, et al. CAR-T and CAR-NK as cellular cancer immunotherapy for solid tumors. Cell Mol Immunol. 2024;21(10):1089-108.
  8. Basu R, et al. Cytotoxic T cells use mechanical force to potentiate target cell killing. Cell. 2016;165(1):100-10.
  9. Dolega ME, et al. Cell-like pressure sensors reveal increase of mechanical stress towards the core of multicellular spheroids under compression. Nat Commun. 2017;8(1):14056.
  10. Linke JA, Munn LL, Jain RK. Compressive stresses in cancer: characterization and implications for tumour progression and treatment. Nat Rev Cancer. 2024;24(11):768-91.
  11. Luo M, Cai G, Ho KKY, et al. Compression enhances invasive phenotype and matrix degradation of breast cancer cells via Piezo1 activation. BMC Mol Cell Biol. 2022;23(1):1.
  12. Ren T, Sun L, Zheng Y, et al. Mechanical forces and immune cells in the tumor microenvironment: from regulation mechanisms to therapeutic strategies. Int J Surg. 2025;111(8):5420-34.
  13. Helmlinger G, Netti PA, Lichtenbeld HC, Melder RJ, Jain RK. Solid stress inhibits the growth of multicellular tumor spheroids. Nat Biotechnol. 1997;15(8):778-83.
  14. Pandey M, et al. Mechanical compression regulates tumor spheroid invasion into a 3D collagen matrix. Phys Biol. 2024;21(3):036003.
  15. Suh YJ, et al. A microfluidic rheometer for tumor mechanics and invasion studies. Lab Chip. 2025;25(22):6018-32.
  16. Song W, et al. Dynamic self-organization of microwell-aggregated cellular mixtures. Soft Matter. 2016;12(26):5739-46.
  17. Pandey M, et al. Viscoelastic properties of tumor spheroids revealed by a microfluidic compression device and a modified power law model. Soft Matter. 2026;22(7):1618-29.
  18. Steff A-M, Fortin M, Arguin C, Hugo P. Detection of a decrease in green fluorescent protein fluorescence for the monitoring of cell death: An assay amenable to high-throughput screening technologies. Cytometry. 2001;45(4):237-43.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

التفاعلات المناعية الورميةالتشابك المناعيالكريات الورميةالخلايا القاتلة الطبيعيةالتصوير في الوقت الحقيقيالمجهر الضوئيمصفوفة الكولاجين

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.