يتم وصف نهج معدل لاستخراج الضرس السفلي الأول في الفئران ومقارنته بالنهج التقليدي لتقييم كفاءة الإجراء وقابليته للتكرار. يساهم النهج المعدل في تحسين اتساق الإجراء وتقليل التحديات التقنية في إنشاء نموذج لالتئام سنك الضرس السفلي لدى الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يتم وصف نهج معدل لاستخراج الضرس السفلي الأول في الفئران ومقارنته بالنهج التقليدي لتقييم كفاءة الإجراء وقابليته للتكرار. يساهم النهج المعدل في تحسين اتساق الإجراء وتقليل التحديات التقنية في إنشاء نموذج لالتئام سنك الضرس السفلي لدى الفئران.
يعد نموذج التئام سنخ السن (TSHM) نموذجاً حيوانياً واسع الاستخدام لاستقصاء الآليات الجزيئية الكامنة وراء تجدد العظام. ورغم أن نموذج TSHM في الفك السفلي للفئران ذو قيمة عالية لدراسة العمليات المرضية الخاصة بالفك السفلي، إلا أن إنشاء هذا النموذج لا يزال يمثل تحدياً تقنياً بسبب الخصائص التشريحية والميكانيكية الحيوية لمنطقة الضرس السفلي. يصف هذا البروتوكول نهجاً معدلاً لخلع الضرس الأول في الفك السفلي لدى الفئران، ويقارن أداءه بالتقنية التقليدية لتحسين كفاءة الإجراء وقابلية تكراره. وتحت ظروف تجريبية مضبوطة، قلل النهج المعدل بشكل كبير من متوسط وقت الخلع من 29 إلى 10 min. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت المجموعة التي خضعت للنهج المعدل مضاعفات أقل مرتبطة بالخلع، بما في ذلك كسور الجذور والعظم السنخي، مما يشير إلى تحسن في اتساق الإجراء. كما أظهر تحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (μCT) تحسناً في الحفاظ على بنية سنخ الخلع خلال مرحلة الالتئام المبكرة. وتشير هذه النتائج إلى أن نهج الخلع المعدل يحسن كفاءة الإجراء وقابلية تكراره مع تقليل التحديات التقنية المرتبطة بخلع أسنان الفك السفلي للفئران. قد يسهل هذا البروتوكول إنشاء نماذج التئام سنخ أسنان الفك السفلي للفئران بشكل أكثر اتساقاً، خاصة للباحثين الذين لديهم خبرة محدودة في الجراحة المجهرية.
يعد نموذج التئام سنخ السن (TSHM) نموذجاً كلاسيكياً لدراسة تجدد العظام1. ينشئ هذا النموذج إصابة صعبة ولكنها دون الحرجة داخل العظم السنخي، مما يسمح بالتئام طبيعي ملائم دون تدخل إضافي1. تُستخدم الفئران على نطاق واسع ككائنات نموذجية نظراً لخلفيتها الجينية، وتشابه استقلاب العظام لديها مع البشر، وانخفاض تكاليف تربيتها نسبياً، وسهولة صيانتها2. وعلى مدى العقود القليلة الماضية، جعلت التطورات السريعة في تكنولوجيا تحرير الجينات من الفئران عنصراً لا غنى عنه في استقصاء الآليات الجزيئية التي يقوم عليها تجدد العظام3. وبناءً على ذلك، استُخدم خلع الأضراس في الفئران المعدلة وراثياً على نطاق واسع لإنشاء نموذج TSHM من أجل دراسة الآليات التنظيمية لتجدد العظام4,5,6.
اعتمدت معظم الدراسات السابقة في إنشاء نموذج خلع الأسنان في الفئران (TSHM) باستخدام الفك العلوي4,5,6، وذلك لأن الفك السفلي أكثر صلابة ميكانيكيًا وأقل مرونة من الفك العلوي7، مما يزيد من الصعوبة التقنية لعملية خلع السن. بالإضافة إلى ذلك، فإن المجال الجراحي لخلع الأضراس العلوية متاح بشكل أكبر نسبيًا، كما أن تثبيت الفك العلوي أسهل من تثبيت الفك السفلي، مما يجعل الإجراء أقل تطلبًا من الناحية التقنية. وعلى الرغم من هذه التحديات، فإن المورفولوجيا المنحنية والمتضخمة للجذر الذروي للضرس الأول في الفك السفلي للفأر تزيد من الثبات الميكانيكي داخل العظم السنخي المحيط8,9، مما يزيد من تعقيد عملية الخلع (الشكل 1). ومع ذلك، تظل نماذج خلع أسنان الفك السفلي ضرورية للغاية لاستقصاء العمليات المرضية الخاصة بالفك السفلي، بما في ذلك التهاب العظم والنقي، ونخر العظم في الفك المرتبط بالأدوية، والاندماج العظمي للغرسات، وتجديد العظام باستخدام المواد الحيوية10,1,12. ولذلك، فإن وجود طريقة قابلة للتكرار وموثوقة لخلع الأضراس السفلية في الفئران يعد أمرًا مهمًا للدراسات التي تتطلب نماذج التئام مقابس الأسنان الخاصة بالفك السفلي.

الشكل 1مقارنة تخطيطية لمورفولوجيا الأسنان في البشر والفئران.
(أ) رسم تخطيطي لسن إنسان بالغ. (ب) رسم تخطيطي للضرس الأول السفلي لفأر في مرحلة المراهقة. (ج) رسم تخطيطي للضرس الأول السفلي لفأر بالغ. تسلط المخططات الضوء على الاختلافات في مورفولوجيا الجذور وتوزيع الملاط التي تساهم في زيادة التثبيت الميكانيكي للأضراس الأولى السفلية للفئران البالغة داخل العظم السنخي. يُشار إلى الميناء والعاج والملاط بالألوان المقابلة الموضحة في مفتاح الرسم. تستند السمات التشريحية إلى الأوصاف المنشورة.8,9,15. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
تعتمد تقنية سابقة لاستخلاص الأسنان طورها فريقنا البحثي على استخدام محاقن تم تعديلها لتكون بمثابة رافعات سنية13. ورغم أن هذه الطريقة تسمح باستخلاص الضرس الأول السفلي الأيمن بنجاح في الفئران، إلا أنها تتطلب مستوى عالٍ من الدقة التقنية، كما أن منحنى تعلمها حاد يتطلب تدريباً مكثفاً. وقد يتسبب المشغلون غير ذوي الخبرة دون قصد في إصابات للهياكل التشريحية المجاورة. بالإضافة إلى ذلك، يتطلب استخلاص الضرس الأول السفلي الأيسر تدريباً إضافياً على "الصورة المرآتية" لتحقيق الكفاءة الإجرائية. وقد تؤدي هذه التحديات إلى الإضرار بسلامة سنخ الاستخلاص، وتقليل اتساق نتائج الالتئام بين الحيوانات، والحد من إمكانية وصول الباحثين الذين لديهم خبرة محدودة في الجراحة المجهرية إلى هذا النموذج.
يصف هذا البروتوكول نهجاً معدلاً لخلع الضرس الأول السفلي في الفئران لتحسين إمكانية الوصول الإجرائي وقابلية التكرار. تم التحقق من صحة البروتوكول في ذكور فئران C57BL/6 بعمر 8 أسابيع لإنشاء نموذج TSHM للضرس الأول السفلي. تمت مقارنة النهج المعدل بشكل منهجي مع التقنية التقليدية لتقييم كفاءة الإجراء، ونجاح الخلع، والمضاعفات المرتبطة بالعملية. بالإضافة إلى ذلك، تم تحليل أنماط الفشل التقني الشائعة التي تمت مواجهتها أثناء اكتساب المهارة لتوفير إرشادات عملية للباحثين الذين يعملون على إنشاء نموذج TSHM للفك السفلي في الفئران.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على جميع الإجراءات من قبل لجنة الأخلاقيات في مدرسة غرب الصين لطب الأسنان بجامعة سيتشوان (WCHSIRB-D-2025-18)، وأُجريت وفقاً للإرشادات المؤسسية الخاصة برعاية الحيوان.
ملاحظة: استخدم فئران ذكور من سلالة C57BL/6 بعمر 8 أسابيع وتزن 2–29 g. يتم الحفاظ على الحيوانات بنظام غذائي قياسي من العلف مع توفير الماء ad libitum تحت ظروف إيواء قياسية (21°C–24°C، ورطوبة 40%–60%، ودورة ضوء-ظلام مدتها 12-h). استخدم المواد والأدوات المدرجة في جدول المواد. استخدم 24 فأراً للتقييم المقارن وعرض الحالات الفاشلة. استخدم فئران إضافية لتدريب المشغل قبل التجربة المقارنة.
1. التحضير لما قبل الجراحة
2. العملية الجراحية

الشكل 2مقارنة بين الطريقتين التقليدية والمعدلة لخلع الضرس الأول السفلي في الفئران.
(أ) رسم تخطيطي لطريقة الخلع التقليدية، حيث يتم إدخال إبرة مقاس 25 G مثنية في الرباط حول السني واستخدامها كرافعة لخلخلة السن. (ب) رسم تخطيطي لطريقة الخلع المعدلة، حيث يتم إمساك التاج بملقط عيون مسنن وتطبيق قوة سحب موازية للمحور الطولي للسن. (ج) صورة تمثيلية للطرف المثني لإبرة 25 G المستخدمة كرافع. (د) صورة تمثيلية للملقط العيوني المسنن المستخدم كملقط للخلع الدقيق. (هـ) صورة تمثيلية أثناء العملية تظهر سنخ الخلع مباشرة بعد خلع الضرس الأول السفلي؛ تشير الخطوط المتقطعة إلى أسناخ الخلع. (و) منظر دهليزي للضرس الأول السفلي الذي تم خلعه بنجاح. (ز) منظر لساني للضرس الأول السفلي المخلوع نفسه. أشرطة المقياس = 2 مم (ج، د) و 400 µm (هـ–ز). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
3. فحص الأسنان المخلوعة ومقابس الخلع
4. الرعاية بعد الجراحة
5. تدريب المشغلين
6. تحضير العينة
7. التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (µCT) والتحليلات
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم توضيح السمات التشريحية ذات الصلة بخلع الضرس الأول السفلي في الشكل 1، كما تم عرض نهجي الخلع التقليدي والمعدل تخطيطيًا في الشكل 2A،B. وتظهر الصور التمثيلية للإبرة المجهزة والملقط العيني المسنن، ومقابس الخلع الحديثة، والضرس الأول السفلي المخلوع في الشكل 2C–G. وتلخص الشكل 3 سير العمل الإجرائي الكامل. ولمقارنة كفاءة واتساق الإجراءين، تم تعيين مشغلين اثنين بخبرة متكافئة في...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يتطلب التأسيس الناجح لنموذج TSHM إزالة السن بالكامل مع الحفاظ على بنية السنخ المحيطة، حيث إن الإصابات المرتبطة بالخلع قد تؤثر سلبًا على تجدد العظام اللاحق16. وبناءً على ذلك، تمثل قابلية تكرار إجراء الخلع محددًا حاسمًا لموثوقية النموذج17. في هذه الدراسة، تمت مقارنة منهجية معدلة لخلع الضرس الأول السفلي تعتمد على الملاقط مع تقنية تقليدية تعتمد على الرافعة، وذلك تحت ظروف تدريب موحدة. أظهرت الطريقة المعدلة تحسنًا في كفاءة الإجراء وقابلية التكرار، وهو ما انعكس في تقليل وقت الخلع ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يقر المؤلفون بعدم وجود تضارب في المصالح.
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (منحة رقم 82571084) وبرنامج العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة Sichuan (منحة رقم 2024JDKXJ0001).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| إبر حقن بمقياس 25 G | Beyotime | FS802-30 قطعة | إبر محاقن تستخدم لمرة واحدة، وتُستخدم لمباعد الفم وللتخلخل المسبق الاختياري للرباط حول السني |
| محلول بارافورمالدهيد بتركيز 4% | Solarbio | P1110 | محلول بارافورمالدهيد بتركيز 4% المستخدم لتثبيت العينات |
| إيثانول بتركيز 75% | متجر أوس للأجهزة الطبية | يرجى تزويدي بالنص المصدر باللغة الإنجليزية لبدء عملية الترجمة. | إيثانول بدرجة طبية بتركيز 75% يستخدم لتطهير الأسطح |
| فئران C57BL/6 | Charles River | 213 | فئران ذكر من سلالة C57BL/6 بعمر 8 أسابيع وتزن 22–٢٩ جم |
| كاربروفين | Solarbio | C5350 | مُسكن للألم بعد الجراحة يُعطى تحت الجلد بجرعة 5 ملجم/كجم |
| كرات قطنية | أجهزة أونينج الطبية (Ouning Medical Devices) | نظرًا لعدم توفر نص مصدر للترجمة، يرجى تزويدي بالنص المراد ترجمته من الإنجليزية إلى العربية وفقاً للمعايير المهنية المذكورة. | كرات قطنية معقمة تُستخدم للتنظيف الفموي وإرقاء الدم |
| CTAn v1.18.4.0+ | SkyScan | لا ينطبق | البرمجيات المستخدمة لـ μCT تحليل الصور |
| DataViewer v1.5.6.2 | سكاي سكان (SkyScan) | نظرًا لعدم توفر نص مصدر، يرجى تزويدي بالنص الذي ترغب في ترجمته إلى اللغة العربية. | البرمجيات المستخدمة لعرض وتصدير النماذج المعاد بناؤها μCT صور |
| أغطية الأصابع | مكتب LeSu | MEKU-1/2/3B | أغطية الأصابع المستخدمة لحماية الإبهام أثناء عملية الاستخلاص |
| لوح رغوي | شركة دونغ غوان ليجيانغ لونغ الصناعية المحدودة (Dongguan Lijianglong Industrial Co., Ltd.) | نظرًا لعدم توفر نص مصدر للترجمة، يرجى تزويدي بالمحتوى العلمي أو التعليمي المطلوب ترجمته من اللغة الإنجليزية إلى اللغة العربية، وسأقوم بتنفيذه وفقًا للمعايير المهنية والأكاديمية المحددة. | لوح رغوي يُستخدم كمنصة للتشغيل والتثبيت |
| نظام غذائي هلامي | ReadyDietech | J10001 | يتم تقديم النظام الغذائي لفترة ما بعد الجراحة على أرضية القفص لمدة 3 أيام، عند الاستخدام. |
| GraphPad Prism v10.1.2 | GraphPad | RRID: SCR_002798 | البرمجيات المستخدمة في التحليل الإحصائي وإنشاء الرسوم البيانية |
| مصباح رأسي | مصنع بازو بنجن لمعدات الوقاية | نظرًا لعدم توفر نص مصدر، يرجى تزويدي بالمحتوى المراد ترجمته من اللغة الإنجليزية إلى اللغة العربية لضمان تقديم ترجمة علمية دقيقة تتوافق مع معايير JoVE. | مصباح رأسي يُستخدم لإضاءة المجال الجراحي |
| وسادة تسخين | شركة شيجياجوانغ جيانوان للأجهزة الكهربائية المحدودة | غير متاح | وسادة تسخين مُسخنة مسبقاً إلى حوالي 38 °C للتعافي بعد الجراحة |
| نموذج محاكاة من الهيدروكسيباتيت | إدارة جودة المخاطر (QRM) | QRM-70127 | نموذج معايرة يُستخدم لتحويل قيم التوهين في التصوير المقطعي المحوسب إلى كثافة المعادن في العظام |
| جهاز تكبير | شركة Olympus Corporation | SZX10 | الجهاز المستخدم لفحص أطراف الملقط المسنن وسن الخلع تحت التكبير |
| قناع | متجر سينلون (Senlun) المتخصص في الأجهزة الطبية | غير متاح | قناع جراحي |
| جهاز التصوير المقطعي المحوسب الدقيق | Bruker SkyScan | SkyScan 1276 | μCT جهاز مسح ضوئي استُخدم عند 80 كيلوفولت، 500 μA، و 10 μm دقة الفوكسل |
| Mimics Research v21.0 | تجسيد | RRID: SCR_015802 | البرمجيات المستخدمة في إعادة البناء ثلاثي الأبعاد |
| بنتوباربيتال الصوديوم | Sigma-Aldrich | P3761 | ملح بنتوباربیتال الصوديوم المستخدم كمحلول تخدير بتركيز 1% |
| محلول ملحي منظم بالفوسفات | Solarbio | P1010 | مسحوق محلول ملحي منظم بالفوسفات بتركيز 0.01 مولار، والرقم الهيدروجيني 7.2–7.4 |
| محلول بوفيدون-يود المطهر | المتجر الرئيسي لصيدلية بيلكون (Belkon Pharmacy) | لا يوجد نص متاح للترجمة. يرجى تزويدي بالنص المصدر من اللغة الإنجليزية لبدء عملية الترجمة العلمية إلى اللغة العربية. | محلول بوفيدون-أيودين المستخدم لتطهير البطن |
| أربطة مطاطية | مصنع فوشان بولي للمنتجات المطاطية | لا يوجد نص مترجم. | أربطة مطاطية تُستخدم لتجميع مباعد الفم |
| محلول ملحي | Thermo Fisher | BR0053G | أقراص ملحية تستخدم لتحضير محلول التنظيف الفموي |
| نظام غذائي قياسي من أعلاف المختبرات | شركة جيانغسو شيتونغ للصيدلة وهندسة التكنولوجيا الحيوية المحدودة. | XTC01WC-001 | علف قياسي يُستخدم للإيواء الروتيني ويتم تليينه للتغذية بعد الجراحة |
| جهاز التعقيم بالبخار | مرفق مؤسسي | لم يتم توفير نص للمباشرة في ترجمته. يرجى تزويدي بالنص الإنجليزي المطلوب ترجمته إلى العربية وفقاً للمعايير المذكورة. | المعدات المستخدمة لتعقيم الملاقط المسننة والمحلول الملحي |
| مسحات قطنية معقمة | متجر كانغبايلاي للأجهزة الطبية | نظرًا لعدم توفر نص مصدر للترجمة، يرجى تزويدي بالنص الإنجليزي المراد ترجمته من محتوى JoVE العلمي والتعليمي، وسأقوم بترجمته بدقة إلى اللغة العربية الأكاديمية المتخصصة وفقًا للمعايير والضوابط المذكورة. | مسحات قطنية معقمة ذات استخدام واحد |
| قفازات معقمة | متجر سينلون (Senlun) المتخصص في الأجهزة الطبية | نظرًا لعدم توفر نص مصدر للترجمة، يرجى تزويدي بالنص الذي ترغب في ترجمته من الإنجليزية إلى العربية وفقًا للمعايير المحددة. | قفازات لاتكس معقمة |
| نسيج غير منسوج معقم | متجر هانغتشو لمستلزمات مكافحة العدوى في شاندونغ شينهوا | يرجى تقديم النص المصدر باللغة الإنجليزية لكي أتمكن من ترجمته إلى اللغة العربية وفقاً للمعايير العلمية والأكاديمية المحددة. | نسيج غير منسوج معقم يُستخدم لتغطية سطح العمل ووسادة التسخين |
| غطاء رأس جراحي معقم | متجر سنلون (Senlun) المتخصص في الأجهزة الطبية | غير متاح | غطاء رأس جراحي معقم |
| ملابس التعقيم الجراحية | متجر سينلون للأجهزة الطبية المتخصصة | نظرًا لعدم توفر نص مصدر، يرجى تزويدنا بالمحتوى المراد ترجمته لنتمكن من البدء في العمل وفقًا للمعايير العلمية والأكاديمية المحددة. | ملابس جراحية معقمة يتم ارتداؤها أثناء الإجراء |
| شريط لاصق | Thermo Fisher | 15947 | شريط لاصق يُستخدم لتثبيت أطراف الفأر |
| ملاقط عيون مسننة | Beyotime | FS229 | ملاقط عينية مسننة تُستخدم كملاقط أسنان |
| مرهم عيون بيطري | ديشرا للمنتجات البيطرية (Dechra Veterinary Products) | 143-16 | مرهم عيني يوضع بعد التخدير لمنع جفاف القرنية |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً