مقالة بحثية

تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري: دراسة مقطعية قائمة على NHANES مع تحديد P2RY14 عن طريق تحليل النسخ (Transcriptomics)

6 مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/73687

⸱

أكتوبر 21, 2026

 ,  ,  , 
1Department of Emergency Medicine, Zibo Central Hospital

في هذه المقالة

ملخص

تبحث هذه الدراسة في العلاقة بين تناول فيتامين B12 الغذائي ومرض الكلى السكري باستخدام بيانات NHANES والتحليلات الترانسكريبتومية. وقد ارتبط ارتفاع تناول فيتامين B12 بانخفاض احتمالات الإصابة بمرض الكلى السكري، كما تم تحديد P2RY14 كمرشح لتوليد الفرضيات.

الملخص

يعد مرض الكلى السكري (DKD) من المضاعفات الرئيسية لمرض السكري، ولا تزال العلاقة بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري غير واضحة. شملت هذه الدراسة المقطعية 8,218 مشاركًا من المسح الوطني لفحص الصحة والتغذية (NHANES) للفترة 2011–2018. وأظهر تحليل الانحدار اللوجستي متعدد المتغيرات أن المشاركين في الربع الأعلى من حيث تناول فيتامين B12 كانت لديهم احتمالات أقل للإصابة بمرض الكلى السكري مقارنة بأولئك الذين في الربع الأدنى (نسبة الأرجحية (OR): 0.70؛ فاصل ثقة 95% (CI): 0.50–0.97). كما أشار تحليل الشريحة التكعيبية المقيدة إلى وجود ارتباط غير خطي معنوي بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري. وحدد تحليل النسخ 493 جينًا متباين التعبير (DEGs)، تداخل 20 منها مع الجينات المرتبطة بالكوبالامين. كان الجين P2RY14 مرتفع التعبير بشكل معنوي في حالات مرض الكلى السكري، وأظهر قدرة تمييزية أولية عبر مجموعات البيانات GSE30528 وGSE30529 وGSE142025. واقترحت تحليلات الإثراء الوظيفي وجود ارتباطات بين P2RY14 والتفاعل بين مستقبلات المصفوفة خارج الخلية، والالتصاق البؤري، وتطور الكلى. وتنبأت دراسة الالتحام الجزيئي الاستكشافية بنمط ارتباط محتمل بين MC-1 وP2RY14، بدرجة Vina بلغت −6.0 kcal/mol. وبشكل عام، تدعم هذه النتائج وجود ارتباط بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري، وتحدد الجين P2RY14 كمرشح لتوليد الفرضيات لمزيد من الاستقصاء.

المقدمة

يُعد داء السكري (DM) اضطراباً أيضياً يتميز بارتفاع مزمن في مستوى سكر الدم، وينتج عن نقص مطلق أو نسبي في إفراز الإنسولين و/أو نشاطه. ويصيب هذا المرض ما يقرب من 537 مليون شخص حول العالم1. وعلى مدى العقود الثلاثة الماضية، تضاعف الانتشار العالمي لداء السكري بنحو أربع مرات، حيث تم تشخيص حالة واحدة تقريباً من بين كل أحد عشر بالغاً، 90% منهم مصابون بداء السكري من النوع الثاني (T2DM)2. وغالباً ما يؤدي النوع الثاني من داء السكري إلى العديد من المضاعفات الوعائية الدقيقة والوعائية الكبيرة، بما في ذلك أمراض القلب والأوعية الدموية، والسكتة الدماغية، واعتلال الكلية، واعتلال الأعصاب، واعتلال الشبكية3. وتساهم هذه المضاعفات بشكل كبير في زيادة معدلات العجز، وتدني جودة الحياة، وانخفاض متوسط العمر المتوقع4,5. ومما يثير القلق بشكل خاص مرض الكلية السكري (DKD)، وهو مضاعفة وعائية دقيقة شائعة لداء السكري، وتظهر في حوالي 20% من المرضى المصابين بداء السكري6. ويتميز مرض الكلية السكري ببيلة ألبومينية مستمرة وانخفاض تدريجي في معدل الترشيح الكبيبي (GFR). وإذا تُرِك دون علاج، فقد يؤدي مرض الكلية السكري في النهاية إلى المرض الكلوي في المرحلة النهائية (ESKD)، حيث تتدهور وظائف الكلى بشدة، مما يستدعي إجراء غسيل الكلى أو زراعة كلية للبقاء على قيد الحياة7,8. علاوة على ذلك، يواجه المرضى المصابون بمرض الكلية السكري خطراً متزايداً للإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية، حتى في مراحله المبكرة، وترتبط هذه المراضة المشتركة بزيادة خطر الوفاة، مما يضع عبئاً كبيراً على أنظمة الرعاية الصحية9,10,11. لذا، من الأهمية بمكان استقصاء العوامل التي تساهم في تطور مرض الكلية السكري بدقة؛ إذ يعد الفهم العميق لهذه العوامل ضرورياً لابتكار استراتيجيات علاجية فعالة لمنع ظهور وتطور مرض الكلية السكري في الممارسة السريرية.

تلعب فيتامينات مجموعة B، وهي مجموعة من الفيتامينات القابلة للذوبان في الماء، دوراً محورياً في التمثيل الغذائي الخلوي والتوازن الداخلي، والحفاظ على التوازن الفسيولوجي، والدفاع بمضادات الأكسدة، وتخليق خلايا الدم الحمراء12. ويعد النظام الغذائي المصدر الرئيسي لفيتامين B. ونظراً لطبيعتها القابلة للذوبان في الماء، عادة ما يكون من الصعب تخزين هذه الفيتامينات في جسم الإنسان12. ويتم إخراج الفائض من فيتامين B بسهولة عن طريق البول؛ ومع ذلك، قد يختلف الامتصاص والاستخدام والتمثيل الغذائي بشكل كبير من فرد لآخر13. ويمكن أن يؤدي نقص فيتامين B إلى ضعف ملحوظ في الوظيفة الخلوية والجهاز المناعي، مما يؤدي إلى حدوث التهابات مرتبطة بفرط هوموسيستيين الدم14. وقد تساهم عوامل مثل نقص فيتامين B في تطور مرض الكلى المزمن (CKD) من خلال التأثير على عمليات الالتهاب والإجهاد التأكسدي المرتبطة بضعف وظائف الكلى وباثولوجيا أنسجة الكلى15. ومن بين فيتامينات B، يعد فيتامين B12، المعروف أيضاً باسم كوبالامين، فيتاميناً أساسياً قابلاً للذوبان في الماء يلعب دوراً هاماً في التمثيل الغذائي، لا سيما في تخليق DNA، والمثيلة، والتمثيل الغذائي للميتوكوندريا15. وفي المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المزمن والفشل الكلوي في المرحلة النهائية، يمكن أن تؤدي التغيرات الأيضية المختلفة - بما في ذلك الحماض، والالتهاب الجهازي، والاختلالات الهرمونية - جنباً إلى جنب مع الأمراض المصاحبة وتعدد الأدوية، إلى سوء التغذية، مما يؤدي لاحقاً إلى نقص فيتامين B1216. وقد أثبتت دراسات عديدة وجود ارتباط بين انخفاض تركيزات فيتامين B12 في المصل وحالات مثل ارتفاع مؤشر كتلة الجسم (BMI)، ومقاومة الإنسولين، ومرض السكري من النوع الثاني (T2DM)، واضطراب شحوم الدم، وأمراض القلب والأوعية الدموية17. وعلى العكس من ذلك، فإن السمية المحتملة المرتبطة بالإفراط في فيتامين B12 قد تفاقم الحالات لدى مرضى الكلى المزمن18. علاوة على ذلك، أشارت دراسة حديثة إلى أن التركيزات الأعلى من فيتامين B12 ترتبط بزيادة الوفيات لجميع الأسباب بين المرضى الذين يخضعون لغسيل الكلى الدموي19. ومع ذلك، فإن العلاقة بين تناول فيتامين B12 وحدوث مرض الكلى السكري (DKD) لم يتم بحثها بشكل شامل. فضلاً عن ذلك، لا تزال السمات الجزيئية التي قد تربط العمليات البيولوجية المتعلقة بفيتامين B12 بمرض الكلى السكري غير محددة بشكل كافٍ. لذا، فإن دمج الأدلة الوبائية القائمة على السكان مع بيانات الترانسكريبتوميك قد يوفر استراتيجية تكميلية لتحديد السمات الجزيئية المرشحة ذات الصلة بالارتباط الملحوظ وتحديد أولويات الأهداف للبحث التجريبي اللاحق.

نظراً للنقص الحالي في الفهم، أجرينا دراسة مستعرضة باستخدام بيانات من قاعدة بيانات NHANES لاستقصاء العلاقة بين تناول فيتامين B12 ومرض اعتلال الكلى السكري (DKD)، مع التحكم في مجموعة واسعة من العوامل المربكة المحتملة. وبالتوازي، تم تحليل مجموعات البيانات الترانسكريبتومية لمرض DKD لتحديد الجينات ذات التعبير المتباين، والتي تم تقاطعها لاحقاً مع الجينات المرتبطة بفيتامين B12 لفحص الجزيئات المرشحة التي قد تكون ذات صلة بمرض DKD. قد يوفر هذا النهج المتكامل رؤى إضافية حول العلاقة بين فيتامين B12 ومرض DKD.

البروتوكول

كانت الدراسة الحالية عبارة عن تحليل ثانوي لبيانات NHANES المتاحة علنًا والمجهولة الهوية، ولم تتضمن أي استقطاب جديد للمشاركين، أو تدخلات، أو جمع لمعلومات تحديد الهوية الشخصية. وبناءً على ذلك، لم تكن هناك حاجة إلى موافقة مستنيرة إضافية لهذا التحليل الحالي.

مجتمع الدراسة واختيار المشاركين

يستخدم المسح الوطني لفحص الصحة والتغذية (NHANES) تصميم عينة احتمالية معقدة ومتعددة المراحل لجمع بيانات صحية وغذائية تمثيلية على المستوى الوطني من سكان الولايات المتحدة.

تمت دراسة البيانات الأولية لـ 39,156 مشاركاً من خلال أربع دورات من مسح NHANES (2011-2012، و2013-2014، و2015-2016، و2017-2018). وقد استُبعد المشاركون إذا انطبقت عليهم أي من المعايير التالية: (1) السن < 18 عاماً؛ (2) فقدان بيانات تناول فيتامين B12 الغذائي؛ (3) نقص المعلومات المطلوبة لتقييم مرض السكري، بما في ذلك التاريخ المرضي للسكري المبلغ عنه ذاتياً، أو الهيموجلوبين السكري (HbA1c)، أو جلوكوز بلازما الصيام (FPG)؛ أو (4) نقص المعلومات المطلوبة لتقييم أمراض الكلى، بما في ذلك نسبة الألبومين إلى الكرياتينين في البول (ACR) أو معدل الترشيح الكبيبي المقدر (eGFR) (الشكل 1). وبعد هذه الاستبعادات، تم إدراج 8,218 مشاركاً لديهم كافة البيانات المطلوبة للتحليل الحالي.

تعريف مرض السكري (DM)، ومرض الكلى المزمن (CKD)، ومرض الكلى السكري (DKD)

وفقاً للمعايير التي وضعتها الجمعية الأمريكية لمرض السكري والدراسات السابقة، تم تشخيص مرض السكري (DM) بناءً على ما يلي: (1) تشخيص طبي سابق، (2) مستويات FPG ≥ 7.0 mmol/L، (3) مستويات HbA1c ≥ 6.5%، أو (4) الاستخدام الذاتي للأنسولين أو الأدوية المضادة لمرض السكري. تم تحديد مرض الكلى المزمن (CKD)20,21 لدى المشاركين الذين يعانون من ACR ≥ 30 mg/g أو eGFR (eGFR = 175 × (serum creatinine in mg/dL)-1.154 × (age in years)-0.203 x (0.742 if female) x (1.21 if black)) < 60 mL/min/1.73 m2. كما عُرِّف مرض الكلى السكري (DKD) بأنه وجود كل من DM وCKD20. وصُنِّف المشاركون الذين استوفوا معايير كل من DM وCKD ضمن مجموعة DKD، بينما صُنِّف أولئك الذين لم يستوفوا كلا المعيارين في آن واحد ضمن مجموعة Non-DKD. وبناءً على ذلك، شملت مجموعة Non-DKD المشاركين المصابين بـ DM ولكن بدون CKD، والمشاركين المصابين بـ CKD ولكن بدون DM، والمشاركين الذين لا يعانون من DM ولا CKD.

المتغيرات المصاحبة

تناولت هذه الدراسة المتغيرات المصاحبة التي قد تؤثر على الارتباط بين فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD). شملت المتغيرات الديموغرافية العمر، والجنس، والعرق/الإثنية، والمستوى التعليمي، ونسبة الفقر إلى الدخل (PIR)، والحالة الاجتماعية، واستهلاك الكحول، وسلوك التدخين، ومؤشر كتلة الجسم (BMI)، والنشاط البدني (PA)، ووجود ارتفاع ضغط الدم وفرط شحوم الدم. شمل التحليل المشاركين الذين تبلغ أعمارهم 18 عاماً فأكثر، وتم تقسيمهم إلى مجموعتين عمريتين: البالغون من الشباب إلى منتصف العمر (18- < 60 عاماً) وكبار السن (≥ 60 عاماً). صُنِّف الجنس إلى ذكر أو أنثى. تضمنت التصنيفات العرقية المكسيكيين الأمريكيين، وآخرين من أصول إسبانية، والبيض غير الإسبان، والسود غير الإسبان، وأعراق أخرى/متعددة. قُسِّم المستوى التعليمي إلى ثلاثة مستويات: أقل من الثانوية، وخريجو الثانوية، والكلية أو أعلى. صُنِّفت نسبة PIR إلى ثلاث فئات: < 1.5، و1.5–3.49، و≥ 3.521. عُبِّر عن الحالة الاجتماعية بأنها متزوج/يعيش مع شريك، أو لم يسبق له الزواج، أو أرمل/مطلق. صُنِّفت حالة التدخين إلى ثلاث مجموعات: المدخنون الحاليون (المدخنون يومياً وبشكل متقطع)، والمدخنون السابقون (أولئك الذين دخنوا > 100 سيجارة في حياتهم ولكنهم توقفوا عن التدخين)، وغير المدخنين مطلقاً (أولئك الذين دخنوا < 100 سيجارة خلال حياتهم). صُنِّفت حالة الشرب إلى ثلاث فئات: الشرب الكثيف (النساء: > 3 مشروبات يومياً؛ الرجال: > 4 مشروبات يومياً)، والشرب المعتدل (النساء: مشروبان يومياً؛ الرجال: 3 مشروبات يومياً)، والشرب الخفيف (النساء: < مشروبين يومياً؛ الرجال: < 3 مشروبات يومياً)22. حُدد مؤشر BMI كما يلي: < 25 kg/m2، و25–29.9 kg/m2، و≥ 30 kg/m2. صُنِّفت مستويات النشاط البدني PA كمنخفضة (< 600 MET-min/week)، ومعتدلة (600 إلى < 3000 MET-min/week)، وعالية (≥ 3000 MET-min/week). تم تأكيد فرط شحوم الدم وفقاً للمعايير التالية (استيفاء أحد المعايير التالية): (1) مستويات الكوليسترول الكلي (TC) ≥ 200 mg/dL؛ (2) مستويات الدهون الثلاثية الكلية (TG) ≥ 150 mg/dL؛ (3) الرجال: مستويات البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL) < 40 mg/dL؛ النساء: مستويات HDL < 50 mg/dL؛ (4) مستويات البروتين الدهني منخفض الكثافة (LDL) ≥ 130 mg/dL؛ أو (5) استخدام أدوية خافضة لشحوم الدم.

بالإضافة إلى ذلك، تم أخذ المؤشرات البيوكيميائية والمدخولات الغذائية في الاعتبار، بما في ذلك نسبة الألبومين إلى الكرياتينين في البول (ACR)، وحمض اليوريك في المصل (μmol/L)، ومعدل الترشيح الكبيبي estimated (eGFR) (mL/min/1.73m2)، والكرياتينين في المصل (Scr)، ونيتروجين يوريا الدم (BUN)، والكوليسترول الكلي في المصل TC، والدهون الثلاثية TG، وإنزيم ناقلة أمين الألانين في المصل (ALT)، وإنزيم ناقلة أمين الأسبرتات في المصل (AST)، والمدخولات الغذائية مثل مدخول الطاقة (kcal)، والبروتين (g)، والكربوهيدرات (g)، وإجمالي الدهون (g)، والصوديوم (mg)، والبوتاسيوم (mg)، وغيرها.

المتغير المستقل

استُخدم تناول الفيتامين B12 الغذائي كمتغير تعرض أساسي. وتم الحصول على بيانات تناول العناصر الغذائية من ملفات إجمالي تناول العناصر الغذائية الخاصة بـ NHANES، والتي تلخص التناول اليومي للعناصر الغذائية من الأطعمة والمشروبات. ولم يتم تضمين تناول الفيتامين B12 من المكملات الغذائية. كما شملت الدراسة فقط المشاركين الذين لديهم بيانات استذكار غذائي صالحة لكلا اليومين، وتم حساب متوسط تناول الفيتامين B12 عبر يومي الاستذكار والتعبير عنه بـ μg/day. ثم صُنِّف تناول الفيتامين B12 الغذائي الناتج إلى أرباع (Q1–Q4) لإجراء التحليلات الأساسية متعددة المتغيرات.

مصادر البيانات وتجميع مجموعة الجينات

تم الحصول على مجموعات بيانات تعبير DKD وهي GSE30528 وGSE30529 من قاعدة بيانات Gene Expression Omnibus (GEO). وقد تم إنشاء كلتا المجموعتين باستخدام منصة GPL571. تضمنت مجموعة GSE30528 عدد 9 عينات كبيبية مصابة بـ DKD و13 عينة كبيبية ضابطة طبيعية، بينما تضمنت مجموعة GSE30529 عدد 10 عينات أنبوبية مصابة بـ DKD و12 عينة أنبوبية ضابطة طبيعية. وبالنسبة لكلتا مجموعتي بيانات المصفوفات الدقيقة، تم الحصول على بيانات التعبير التي خضعت للمعالجة بواسطة RMA والتحويل اللوغاريتمي log2 مباشرة من GEO. وتم ربط معرفات المجسات برموز الجينات وفقًا لملف توصيف منصة GPL571. وفي الحالات التي ارتبط فيها عدة مجسات بنفس الجين، تم استخدام متوسط قيمة التعبير لتمثيل التعبير على مستوى الجين.

تم تضمين GSE142025، وهي مجموعة بيانات تسلسل الحمض النووي الريبي (RNA-seq)، بشكل إضافي للتحقق من صحة الجينات المرشحة. تم الحصول على بيانات تعبير TPM من GEO وتحويلها باستخدام log2 قبل التحليل اللاحق. تم إجراء تعليق توضيحي للجينات باستخدام تعليق الجينوم المرجعي hg19. ونظرًا لأن كل مجموعة بيانات تم تحليلها بشكل مستقل ولم يتم دمج مصفوفات التعبير من مجموعات بيانات مختلفة بشكل مباشر، فلم يتم تطبيق أي تصحيح لتأثير الدفعة (batch-effect correction) عبر مجموعات البيانات.

تم استرجاع ما مجموعه 716 جيناً مرتبطاً بالكوبالامين (فيتامين B12) من قاعدة بيانات GeneCards في 13 مارس 2026، وذلك باستخدام الكلمة المفتاحية "COBALAMIN". ولم يتم تطبيق أي حد أدنى لدرجة الصلة أو معايير تصفية إضافية، وتم الاحتفاظ بجميع الجينات الـ 716 المسترجعة كمجموعة الجينات المرتبطة بفيتامين B12.

تحليل التعبير التفاضلي والإثراء الوظيفي

أُجري تحليل التعبير التفاضلي بين عينات داء الكلى السكري (DKD) والعينات الطبيعية باستخدام حزمة 'limma' في لغة R (الإصدار 3.56.2)23، حيث تم تحديد الجينات ذات التعبير التفاضلي (DEGs) بناءً على قيمة |log2FC| > 1 ومعدل اكتشاف كاذب (FDR) < 0.05. ولتحديد الجينات المرشحة المرتبطة باستقلاب فيتامين B12، استُخدمت حزمة ggvenn في لغة R (الإصدار 0.1.19) لإجراء تحليل تقاطع بين الجينات ذات التعبير التفاضلي المحددة ومجموعة الجينات المرتبطة بفيتامين B12 المستخرجة من قاعدة بيانات GeneCards. وتم تمثيل الجينات المتداخلة بيانياً باستخدام مخطط فين، واحتُفظ بها كجينات مرشحة للتحليلات اللاحقة. بعد ذلك، أُجري تحليل الإثراء الوظيفي للجينات ذات التعبير التفاضلي باستخدام حزمة 'clusterProfiler' في لغة R (الإصدار 4.8.3)24، ليشمل مصطلحات الوجود الجيني (GO) (العملية البيولوجية، والوظيفة الجزيئية، والمكون الخلوي) ومسارات موسوعة كيوتو للجينات والجينومات (KEGG). واعتُبرت مصطلحات الإثراء ذات القيمة p-value المعدلة < 0.05 ذات دلالة إحصائية.

تحليل إثراء مجموعة الجينات (GSEA)

في مجموعة بيانات GSE30528، قُسمت العينات إلى P2RY14-مرتفعة و P2RY14-مجموعات منخفضة وفقاً للوسيط P2RY14 مستوى التعبير. ثم أُجري تحليل للتعبير التفاضلي بين المجموعتين، ورُتبت جميع الجينات ترتيباً تنازلياً وفقاً لقيم logFC الناتجة. وعقب ذلك، أُجري تحليل GSEA باستخدام حزمة clusterProfiler في لغة R (الإصدار 4.8.3).24تم الحصول على مجموعات جينات GO وKEGG باستخدام حزمة msigdbr من قاعدة بيانات MSigDB (الإصدار v2025.1.Hs). وكانت مجموعات الجينات المثرية ذات القيمة الاحتمالية المعدلة (adjusted p-value) < اعتُبرت القيم التي تقل عن 0.05 ذات دلالة إحصائية.

شبكات التفاعل بين البروتينات (PPI)

تم تحليل الارتباطات الوظيفية للبروتينات وشبكات التفاعلات البروتينية-البروتينية (PPI) باستخدام قاعدة بيانات STRING (الإصدار 11.0) (https://string-db.org/)25، مع اختيار Homo sapiens ككائن حي وتحديد حد أدنى لدرجة الثقة في التفاعل عند 0.4. وتم تصور شبكة PPI الناتجة باستخدام برنامج Cytoscape26. بالإضافة إلى ذلك، تم إرسال الجينات المرشحة العشرين المتداخلة نفسها إلى منصة GeneMANIA عبر الإنترنت لمزيد من التوصيف لارتباطاتها الوظيفية. حيث قامت GeneMANIA بدمج أنواع متعددة من الأدلة، بما في ذلك التعبير الجيني المشترك، والتفاعلات الفيزيائية، والتفاعلات الجينية، ونطاقات البروتين المشتركة، ومعلومات المسارات، مع اختيار Homo sapiens ككائن حي وضبط المعلمات المتبقية على القيم الافتراضية.

فحص الدواء والهدف

لتحديد المركبات المحتملة المرتبطة بـ P2RY14، تم استرجاع معلومات الدواء والهدف من قاعدة بيانات GeneCards، مما أسفر عن خمسة مركبات مرشحة. بعد ذلك، تمت مقارنة هذه المركبات المرشحة مع قاعدة بيانات DGIdb. وقد تم تحديد MC-1 (DrugBank ID: DB05315; PubChem CID: 1051) في كلتا قاعدتي البيانات، وبناءً على ذلك تم اختياره لإجراء تحليل إرساء جزيئي استكشافي لاحق.

تحليل الالتحام الجزيئي

لاستكشاف وضع الارتباط المحتمل بين MC-1 و P2RY14، تم إجراء الالتحام الجزيئي باستخدام منصة CB-Dock2 عبر الإنترنت، والتي تدمج الكشف عن التجويفات مع محرك الالتحام AutoDock Vina. تم الحصول على البنية ثلاثية الأبعاد لـ MC-1 (PubChem CID: 1051) من PubChem، وتم الحصول على النموذج ثلاثي الأبعاد المتوقع لـ P2RY14 من قاعدة بيانات AlphaFold لتركيب البروتين (AF-Q15391-F1-model_v4). بلغ متوسط درجة pLDDT لنموذج P2RY14 87.12، بينما كانت درجة pLDDT المحلية لمنطقة جيب الارتباط المتوقعة > 90، مما يشير إلى ثقة عالية في البنية المحلية المتوقعة. تم تطبيق استراتيجية التحام أعمى موجهة بالتجويف؛ حيث بحث عن تجويفات الارتباط المرشحة عبر كامل بنية P2RY14، وتم تقييم التجويفات الخمسة ذات الأحجام المتوقعة الأكبر. أضيفت ذرات الهيدروجين أثناء تحضير المستقبل والربيطة لتقريب حالات البروتونية في الظروف الفسيولوجية (حوالي pH 7.4). تم التعامل مع المستقبل كجسم صلب، بينما عوملت الربيطة كجسم مرن مع السماح بالروابط القابلة للدوران. أُجريت ثماني عمليات التحام مستقلة، وتم اختيار الوضع الذي سجل أدنى قيمة في Vina score ليكون وضع الارتباط المتوقع الممثل. تم تصور وتحليل معقد المستقبل-الربيطة الناتج باستخدام برنامج Discovery Studio (الإصدار 4.5).

التحليل الإحصائي

نظرًا لتصميم عينة الاحتمالية الطبقية والمتعددة المراحل والمعقدة الخاص بالمسح الوطني لفحص وتحليل المغذيات والامتحانات (NHANES)، تضمنت جميع التحليلات القائمة على NHANES أوزان المسح والطبقات ووحدات المعاينة الأولية (PSUs) المناسبة. ونظرًا لأن فيتامين B12 حُسب التناول بناءً على يومين من استذكار النظام الغذائي، حيث استُخدم وزن عينة النظام الغذائي لمدة يومين (WTDR2D). وبالنسبة لدورات NHANES الأربع المدمجة (2011-2018)، حُسب وزن عينة النظام الغذائي لمدة 8 سنوات كـ WTDR2D/4، مع دمج SDMVSTRA وSDMVPSU لمراعاة الطبقية والتجميع. وعُبر عن المتغيرات المستمرة في صورة متوسط ± الانحراف المعياري (SD)، والمتغيرات الفئوية كأعداد ونسب مئوية. وتم تقييم الفروق بين المجموعات باستخدام اختبارات t المرجحة واختبارات مربع كاي المرجحة. كما استُخدم نموذج الانحدار اللوجستي متعدد المتغيرات لتقييم الارتباط بين فيتامين B12 المدخول ومرض الكلى السكري (DKD). لم يتم تعديل النموذج 1؛ بينما تم تعديل النموذج 2 حسب العمر، والجنس، والعرق/الإثنية، والحالة الاجتماعية، والمستوى التعليمي؛ وتم تعديل النموذج 3 حسب جميع المتغيرات المصاحبة، بما في ذلك إجمالي مدخول الطاقة والمتغيرات الغذائية الأخرى. تضمنت جميع تحليلات الانحدار WTDR2D/4 وSDMVSTRA وSDMVPSU. فيتامين B12 استُخدمت الربيعيات الخاصة بالتناول (Q1-Q4) كعامل تعرض أساسي، مع اعتبار فيتامين B كمتغير مستمر12 كذلك تم تحليل المدخول كتعرض إضافي. وأُجريت تحليلات المجموعات الفرعية وفقاً للعمر، والجنس، ومؤشر كتلة الجسم (BMI)، ومعدل الرشح الكبيبي (eGFR)، ونسبة الألبومين إلى الكرياتينين (ACR)، وارتفاع ضغط الدم، وفرط شحوم الدم. كما أُجري تحليل الشريحة التكعيبية المقيدة (RCS) باستخدام النموذج 3 المعدل بالكامل لتقييم عدم الخطية المحتملة، حيث وُضعت أربع عقد عند المئينات الخامسة، و35، و65، و95 لفيتامين B12 تَنَاوُل، مع 3.24 μg/day استُخدمت كقيمة مرجعية للعرض البياني. وقد اشتُقت هذه القيمة المرجعية من تحليل نقاط التحول الاستكشافي اللاحق، ولم يتم تفسيرها على أنها مستوى تناول موصى به سريرياً. كما شملت تحليلات الجبينات المقيدة (RCS) كلاً من WTDR2D/4 وSDMVSTRA وSDMVPSU، وقُيِّمت اللاخطية باستخدام اختبار والد (Wald test). وعند اكتشاف لاخطية ذات دلالة إحصائية، حُددت نقاط التحول المحتملة باستخدام إجراء بحث تكراري مدمج مع الحد الأدنى لمعيار أكايكي للمعلومات (AIC)، يليه تحليل انحدار قطعي ثلاثي الأجزاء. وأُجريت تحليلات الحساسية باستخدام مواصفات بديلة للجبينات المقيدة (RCS) بثلاث وعشر عقد.27أُجري تحليل منحنى خصائص تشغيل المستقبل (ROC) للتقييم الأولي للقدرة التمييزية لـ P2RY14، مع ذكر فترات الثقة بنسبة 95% للمساحات تحت المنحنى (AUCs). القيمة الاحتمالية (p-value) < اعتُبرت القيمة 0.05 دالة إحصائيًا. وأُجريت جميع التحليلات الإحصائية باستخدام برنامج R (الإصدار 4.4.1).

النتائج

الخصائص الأساسية

تم تضمين ما مجموعه 8,218 مشاركاً من مسح NHANES للفترة 2011–2018، صُنّف منهم 623 مصاباً بمرض DKD و7,595 غير مصابين به (Non-DKD). لُوحظت فروق ذات دلالة إحصائية بين مجموعتي DKD وNon-DKD في العمر، والجنس، والعرق/الإثنية، والحالة الاجتماعية، والمستوى التعليمي، ومؤشر PIR، ومؤشر BMI، وضغط الدم، وارتفاع ضغط الدم، واستهلاك الكحول، وحالة التدخين، وتناول فيتامين B12، والمدخول الغذائي (جميعها p < 0.05). كما لُوحظت فروق ذات دلالة إحصائية في ACR وeGFR وScr وBUN وTC وTG (الجدول 1).

لوحظت فروق ذات دلالة إحصائية عبر أرباع استهلاك فيتامين B12 في كل من المستوى التعليمي، وارتفاع ضغط الدم، وحالة مرض الكلى السكري (DKD)، ومدخول الطاقة. وفي المقابل، لم تظهر فروق ذات دلالة إحصائية بين الأرباع فيما يتعلق بالعمر، أو الحالة الاجتماعية، أو مؤشر كتلة الجسم (BMI)، أو ضغط الدم، أو استهلاك الكحول، أو معدل الترشيح الكبيبي التقديري (eGFR)، أو نسبة الألبومين إلى الكرياتينين (ACR)، أو حمض اليوريك في المصل، أو كرياتينين المصل (Scr)، أو الدهون الثلاثية (TG) (الجدول 2).

الارتباط بين فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD)

تم تصنيف تناول فيتامين B12 إلى أرباع (Q1–Q4)، وتظهر نتائج تحليلات الانحدار اللوجستي متعدد المتغيرات في الجدول 3. وفي النموذج 3 المعدل بالكامل، كان المشاركون في الربع الأعلى من تناول فيتامين B12 (Q4) لديهم احتمالات أقل بكثير للإصابة بمرض الكلى السكري (DKD) مقارنة بأولئك في الربع الأدنى (Q1) (OR = 0.70, 95% CI: 0.50–0.97, p = 0.034)، بينما لم تلاحظ أي ارتباطات ذات دلالة إحصائية بالنسبة للربع Q2 (OR = 1.14, 95% CI: 0.85–1.53, p = 0.386) أو الربع Q3 (OR = 0.94, 95% CI: 0.69–1.28, p = 0.684). علاوة على ذلك، لم يصل الاتجاه الخطي في النموذج المعدل بالكامل إلى الدلالة الإحصائية (p for trend = 0.086)، على الرغم من أن الاتجاه العام للارتباط كان عكسياً. تشير هذه النتائج إلى أن زيادة تناول فيتامين B12، لا سيما في الربع الأعلى، ارتبطت بانخفاض احتمالات الإصابة بمرض الكلى السكري (DKD)، لكن النتائج لا تدعم وجود علاقة خطية مستقرة بين الجرعة والاستجابة فيما يخص تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD).

تحليلات المجموعات الفرعية للارتباط بين فيتامين B12 و DKD

أُجريت تحليلات للمجموعات الفرعية لفحص ما إذا كانت العلاقة بين تناول فيتامين B12 ومرض الاعتلال الكلوي السكري (DKD) متسقة عبر الخصائص المختلفة للمشاركين. في النموذج 1 (Model 1)، كان لدى المشاركين في الربع الأعلى من تناول فيتامين B12 (Q4) احتمالات أقل بكثير للإصابة بـ DKD مقارنة بأولئك في الربع الأول (Q1) في كل من المجموعات الفرعية للذكور والإناث (p < 0.05؛ الجدول 4). وكانت الارتباطات عبر المجموعات الفرعية لنسبة الألبومين إلى الكرياتينين (ACR) أكثر تباينًا. فمن بين المشاركين الذين كانت نسبة ACR لديهم < 30 mg/g، لُحظت ارتباطات ذات دلالة إحصائية لبعض الأرباع المتوسطة من تناول فيتامين B12، بينما تضاءل هذا النمط بعد التصنيف وفقًا لمستويات ACR الأعلى. ولم تُلاحظ أي ارتباطات ذات دلالة إحصائية عبر المجموعات الفرعية لمعدل الترشيح الكبيبي التقديري (eGFR).

علاقة غير خطية بين فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD)

أظهر تحليل RCS المعدل بالكامل وجود ارتباط غير خطي معنوي بين تناول فيتامين B12 ومرض DKD (الشكل 2، p لعدم الخطية = 0.037). استخدم نموذج RCS أربع عقد تقع عند المئين 5 و35 و65 و95 لتوزيع تناول فيتامين B12، مع استخدام 3.24 μg/day كقيمة مرجعية. وحدد تحليل نقاط التحول اللاحق نقطتي تحول مستندتين إلى البيانات عند 3.24 μg/day (95% CI: 2.86–3.62) و8.36 μg/day (95% CI: 7.52–9.20)، مما قسم تناول فيتامين B12 إلى ثلاثة نطاقات. وبالنسبة لتناول فيتامين B12 بمقدار < 3.24 μg/day، لم يلاحظ أي ارتباط معنوي مع DKD ‏(OR = 1.07, p = 0.575). وفي النطاق ما بين 3.24–8.36 μg/day، ارتبط تناول فيتامين B12 عكسياً مع DKD ‏(OR = 0.87, p = 0.025). أما بالنسبة للتناول بمقدار > 8.36 μg/day، فلم يلاحظ أي ارتباط معنوي (OR = 1.00, p = 0.995) (الجدول 5). واتسقت هذه النتائج مع نمط غير خطي، حيث لوحظ ارتباط عكسي معنوي فقط ضمن نطاق التناول المتوسط. ولتقييم متانة هذه النتائج، أجريت تحليلات حساسية باستخدام مواصفات RCS بديلة بثلاث وعقد خمس؛ ولوحظت أنماط ارتباط إجمالية مماثلة، مع وجود ارتباطات إجمالية ذات دلالة إحصائية عبر النماذج من 1 إلى 3 تحت كلا مواصفات العقد، بينما دعمت نماذج العقد الخمس العلاقة غير الخطية بشكل أكبر (الشكل التكميلي 1).

تحديد الجينات المرشحة المرتبطة بفيتامين B12 في مرض الكلى السكري (DKD)

في مجموعة بيانات GSE30528، حددنا 493 جينًا من الجينات ذات التعبير التفاضلي (DEGs) بين عينات مرض الكلى السكري (DKD) والعينات الطبيعية، والتي شملت 126 جينًا مرتفع التعبير و367 جينًا منخفض التعبير (|log₂FC| > 1, FDR < 0.05؛ الشكل 3A,B، الجدول التكميلي 1). وكشف تحليل مسارات KEGG عن إثراء ملحوظ لهذه الجينات ذات التعبير التفاضلي في مسارات التفاعل بين المستقبلات والمصفوفة خارج الخلوية (ECM)، والالتصاق البؤري، وإشارات الإنتغرين، وتنظيم الهيكل الخلوي للأكتين (الشكل 3C، الجدول التكميلي 2). كما أشار تحليل إثراء GO إلى أن الجينات ذات التعبير التفاضلي ارتبطت بشكل أساسي بالمصفوفة خارج الخلوية المحتوية على الكولاجين، وتطور الكبيبة الكلوية، والالتصاق البؤري، وتطور النفرون (الشكل 3D، الجدول التكميلي 2).

حدد تحليل التقاطع بين الجينات المعبّر عنها تفاضلياً (DEGs) ومجموعة الجينات المرتبطة بفيتامين B12 وجود 20 جيناً مرشحاً متداخلًا (الشكل 3E). استُخدمت هذه الجينات لاحقاً لبناء شبكة تفاعلات البروتين-بروتين (PPI) باستخدام قاعدة بيانات STRING، مع تصفية التفاعلات بناءً على حد أدنى لدرجة الثقة يبلغ 0.4. تكونت الشبكة الناتجة من 11 عقدة و20 حافة، تمثل البروتينات وتفاعلاتها على التوالي (الشكل 3F). كما تم تصور العلاقات بين الجينات المرشحة العشرين بشكل إضافي باستخدام GeneMANIA (الشكل 3G).

توصيف استكشافي لـ P2RY14 كجين مرشح مرتبط بفيتامين B12 في مرض الكلى السكري (DKD)

بناءً على الارتباط الملحوظ بين تناول فيتامين B12 وحالة مرض اعتلال الكلية السكري (DKD)، سعينا بعد ذلك إلى تحديد الجينات الرئيسية المرتبطة بفيتامين B12 والمتورطة في إمراضية DKD باستخدام تحليل الترانسكريبتوم. ومن بين 20 جيناً مرشحاً متداخلًا، قمنا بمزيد من المقارنة لأنماط تعبيرها عبر مجموعات بيانات DKD المختلفة. وفي مجموعتي البيانات GSE30528 وGSE30529، كان تعبير P2RY14 مرتفعاً بشكل ملحوظ في عينات DKD مقارنة بالمجموعات الضابطة الطبيعية (الشكل 4A،B). يقوم P2RY14 بتشفير مستقبل مقترن بالبروتين G، وقد ورد أنه يشارك في جذب الخلايا المناعية، وإعادة ترتيب الهيكل الخلوي، والاستجابات الالتهابية، والإجهاد التأكسدي28,29. ومع ذلك، لم يتم استقصاء دوره في DKD بشكل مباشر بعد. ونظراً لارتفاع تعبيره المستمر عبر مجموعات بيانات DKD المستقلة وأهميته البيولوجية المحتملة، تم إعطاء الأولوية لـ P2RY14 للتحقق اللاحق والتحليلات الوظيفية. ومن ثم أجري تحليل منحنى ROC لتقييم القدرة التمييزية لـ P2RY14 بشكل أولي. وفي مجموعة بيانات الاكتشاف GSE30528، كانت قيمة AUC هي 0.923 (95% CI: 0.807–1.000)، بينما في مجموعة بيانات التحقق الخارجية الأولية GSE30529، كانت قيمة AUC هي 0.883 (95% CI: 0.744–1.000). وفي مجموعة بيانات التحقق الإضافية GSE142025، كانت قيمة AUC هي 0.663 (95% CI: 0.478–0.847)، مما يشير إلى قدرة تمييزية محدودة (الشكل 4C–E). وبشكل عام، تقدم هذه النتائج دليلاً أولياً على القيمة التمييزية المحتملة لـ P2RY14، رغم أن أداءه التشخيصي يتطلب مزيداً من التحقق في مجموعات مستقلة أكبر.

لاستكشاف الوظائف والمسارات البيولوجية المرتبطة بتعبير P2RY14 في مرض اعتلال الكلية السكري (DKD)، تم تقسيم عينات GSE30528 إلى مجموعتين: مجموعة ذات تعبير عالٍ لـ P2RY14 ومجموعة ذات تعبير منخفض لـ P2RY14، وذلك بناءً على متوسط مستوى تعبير P2RY14. أُجري تحليل التعبير التفاضلي بين المجموعتين. ثم نُفذ تحليلا الإثراء GO وKEGG لتوصيف الوظائف والمسارات البيولوجية المرتبطة بتعبير P2RY14. وكشف تحليل إثراء GO أن P2RY14 يرتبط بالمادة الخلالية (ECM) المحتوية على الكولاجين، وتطور الكبيبة الكلوية، والمكونات الهيكلية للمادة الخلالية، وتطور الكلى (الشكل 4F، الجدول التكميلي 3). كما أظهر تحليل KEGG تورط P2RY14 في التفاعل بين المادة الخلالية والمستقبلات، والالتصاق البؤري، وشلالات المتممة والتخثر (الشكل 4G، الجدول التكميلي 3).

بالإضافة إلى ذلك، أظهر تحليل إثراء مجموعة الجينات (GSEA) أن NF-κأظهر مسار إشارات B ومسار إشارات TNF إثراءً ملحوظاً في P2RY14-عالية مجموعة، مما يشير إلى أن الارتفاع في P2RY14 قد يرتبط التعبير عن ذلك بإشارات الالتهاب في مرض الكلى السكري (DKD)الشكل 4H، الجدول التكميلي 3).

الرسو الجزيئي الاستكشافي لـ MC-1 مع P2RY14

تم تحديد خمسة مركبات مرشحة مرتبطة بـ P2RY14 من خلال الفحص باستخدام GeneCards وDGIdb، واختيار MC-1 لإجراء تحليل استكشافي للالتحام الجزيئي (الشكل 5A). وباستخدام MC-1 كربيطة وP2RY14 كمستقبل، توقع تحليل الالتحام وضعية ارتباط محتملة لـ MC-1 داخل جيب مرشح في P2RY14، بدرجة Vina بلغت −6.0 kcal/mol. تضمنت الوضعية المتوقعة تفاعلات مع بقايا Tyr وLys وAsn وAsp وGlu وتكوين سبع روابط هيدروجينية (الشكل 5B–D).

بيان توفر البيانات

البيانات المستخدمة في هذه الدراسة متاحة للعموم. تتوفر بيانات NHANES من دورات المسح للفترة 2011–2018 من المركز الوطني للإحصاءات الصحية. كما تتوفر مجموعات بيانات النسخ GSE30528 و GSE142025 و GSE30529 علنًا في قاعدة بيانات Gene Expression Omnibus (GEO). تتوفر نتائج التعبير التفاضلي المعالجة، والإثراء الوظيفي، ونتائج GSEA التي تم إنتاجها في هذه الدراسة في الملفات التكميلية.

figure-results-1
الشكل 1: مخطط تدفقي لاختيار المشاركين في تحليل NHANES. يوضح المخطط التدفيقي معايير الاستبعاد المتتالية التي طُبقت على المشاركين من دورات NHANES للفترة 2011-2018 ومجتمع الدراسة النهائي الذي أُدرج في التحليل. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-2
الشكل 2: ارتباط غير خطي بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD) باستخدام نموذج شريحة تكعيبية مقيدة. يمثل الخط المتصل نسبة الأرجحية المقدرة للإصابة بـ DKD عبر مستويات تناول فيتامين B12 الغذائي، وتمثل المنطقة المظللة فاصل الثقة 95%. تم تعديل النموذج باستخدام المتغيرات المساعدة المدرجة في النموذج 3 (Model 3). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-3
الشكل 3: تحديد الجينات المرشحة المرتبطة بفيتامين B12 في مرض الكلى السكري (DKD). (A,B) مخطط بركاني (Volcano plot) وخريطة حرارية توضح ملفات تعبير الجينات ذات التعبير التفاضلي (DEGs) بين عينات مرض الكلى السكري (DKD) والعينات الطبيعية في مجموعة بيانات GSE30528. (C,D) أهم 15 مساراً إثرائياً في KEGG ومصطلحات GO للجينات ذات التعبير التفاضلي (DEGs). (E) تحليل تقاطعي بين الجينات ذات التعبير التفاضلي (DEGs) والجينات المرتبطة بفيتامين B12. (F) شبكة التفاعل بين البروتينات (PPI). (G) شبكة GeneMANIA للجينات العشرين المرتبطة بفيتامين B12. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-4
الشكل 4: توصيف استكشافي لـ P2RY14 كجين مرشح مرتبط بفيتامين B12 في مرض اعتلال الكلية السكري (DKD). (A,B) مخططات صندوقية توضح مستويات تعبير الجينات المرشحة المتداخلة في عينات DKD والضوابط الطبيعية في مجموعتي بيانات GSE30528 وGSE30529، على التوالي. (C–E) تحليلات منحنى خصائص تشغيل المستقبل (ROC) لـ P2RY14 في مجموعات بيانات GSE30528 وGSE30529 وGSE142025، على التوالي. (F) تحليل إثراء الوجود الجيني (GO). (G) تحليل إثراء مسارات موسوعة كيوتو للجينات والجينوم (KEGG). (H) تحليل GSEA للمجموعات ذات التعبير العالي والمنخفض لـ P2RY14، مما يظهر إثراء مسارات إشارات NF-κB وTNF في GSE30528. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

figure-results-5
الشكل 5: مسح الأدوية المستهدفة وتحليل الالتحام الجزيئي الاستكشافي لـ P2RY14. (A) شبكة التفاعل بين الدواء والهدف للأدوية المرتبطة بـ P2RY14. (B–D) الالتحام الجزيئي لـ MC-1 مع بروتين P2RY14. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.

الجدول 1: الخصائص الأساسية لمجتمع الدراسة. يتم عرض الخصائص الديموغرافية والسريرية والكيميائية الحيوية والغذائية للمشاركين وفقاً لحالة داء الكلية السكري (DKD). تم تلخيص المتغيرات المستمرة والفئوية باستخدام تحليل مرجح بالمسح. يرجى النقر هنا لتحميل هذا الجدول.

الجدول 2: الخصائص الأساسية للمشاركين وفقاً للربيعيات الخاصة بتناول فيتامين B12. يتم عرض الخصائص الديموغرافية والسريرية والكيميائية الحيوية والغذائية لمجتمع الدراسة عبر ربيعيات تناول فيتامين B12 الغذائي. يرجى النقر هنا لتحميل هذا الجدول.

الجدول 3: الارتباط بين تناول فيتامين B12 وحالة مرض الكلى السكري (DKD) بين البالغين في الولايات المتحدة. يتم عرض نسب الأرجحية (ORs) وفواصل الثقة 95% (CIs) للارتباط بين تناول فيتامين B12 الغذائي وحالة مرض الكلى السكري عبر نماذج انحدار لوجستي معدلة تدريجياً، مع اعتبار الربع الأدنى لتناول فيتامين B12 (Q1) كمجموعة مرجعية. يرجى النقر هنا لتنزيل هذا الجدول.

الجدول 4: الارتباط بين تناول فيتامين B12 وحالة مرض اعتلال الكلية السكري (DKD) في تحليلات المجموعات الفرعية. يتم عرض نسب الأرجحية (ORs) وفواصل الثقة 95% (CIs) لمرض DKD عبر رباعيات تناول فيتامين B12، مقسمة حسب المجموعات الفرعية للعمر، والجنس، ومؤشر كتلة الجسم (BMI)، ومعدل الرشح الكبيبي التقديري (eGFR)، ونسبة الألبومين إلى الكرياتينين (ACR)، وارتفاع ضغط الدم، وفرط شحميات الدم، ومعدلة وفقاً للنماذج المحددة. يرجى النقر هنا لتحميل هذا الجدول.

الجدول 5: تحليل الانحدار القطعي ثلاثي الأجزاء للعلاقة بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD). يتم عرض الارتباطات بين تناول فيتامين B12 الغذائي ومرض الكلى السكري (DKD) لنطاقات التناول الثلاثة المحددة بنقطتي انكسار مستمدتين من البيانات عند 3.24 و 8.36 μg/day. يرجى النقر هنا لتحميل هذا الجدول.

الشكل التكميلي 1: تحليلات الحساسية للارتباط بين تناول فيتامين B12 الغذائي ومرض DKD باستخدام نماذج الشريحة التكعيبية المقيدة. (A–C) نماذج بثلاث عقد. (D–F) نماذج بخمس عقد. يمثل الخط المتصل نسبة الأرجحية (OR) المقدرة، وتمثل المنطقة المظللة فاصل الثقة (CI) بنسبة 95%، ويشير الخط المقطع إلى أن OR = 1. تظهر قيم p للارتباط العام وعدم الخطية في كل لوحة.يرجى النقر هنا لتحميل هذا الملف.

الجدول التكميلي 1: الجينات ذات التعبير التفاضلي بين عينات مرض الكلى السكري (DKD) والعينات الطبيعية في مجموعة بيانات GSE30528. تُعرض نتائج التعبير التفاضلي للجينات التي تم تحديدها بقيمة |log₂FC| > 1 وFDR < 0.05 جنباً إلى جنب مع مجموعة الجينات المرتبطة بالكوبالامين المستخدمة في فحص الجينات المرشحة.يرجى النقر هنا لتحميل هذا الملف.

الجدول التكميلي  2: تحليل الإثراء الوظيفي للجينات ذات التعبير المتباين في مرض الكلى السكري (DKD). يتم عرض نتائج إثراء الأنطولوجيا الجينية (GO) وموسوعة كيوتو للجينات والجينومات (KEGG) للجينات ذات التعبير المتباين التي تم تحديدها في مجموعة بيانات GSE30528.يرجى النقر هنا لتحميل هذا الملف.

الجدول التكميلي  3: نتائج تحليل الإثراء الوظيفي وتحليل إثراء مجموعة الجينات المرتبطة بـ P2RY14 في مجموعة بيانات GSE30528. يتم عرض نتائج GO وKEGG وGSEA المستخدمة لتوصيف الوظائف والمسارات البيولوجية المرتبطة بـ P2RY14.يرجى النقر هنا لتنزيل هذا الملف.

المناقشة

في هذا التحليل المقطعي الممثل وطنياً لـ 8,218 من البالغين في الولايات المتحدة، ارتبط ارتفاع تناول فيتامين B12 بانخفاض احتمالات الإصابة بمرض الكلى السكري (DKD)، على الرغم من أن هذه العلاقة لم تتبع نمط استجابة خطي بسيط للجرعة. كما مال المشاركون الذين تناولوا كميات أعلى من فيتامين B12 إلى الحصول على مستويات تعليمية أعلى، وانخفاض معدل انتشار ارتفاع ضغط الدم ومرض الكلى السكري، وزيادة في تناول الطاقة. تشير هذه الاختلافات إلى أن تناول فيتامين B12 قد يكون مصحوباً بخصائص ديموغرافية وصحية وغذائية أوسع، وهو ما ينبغي مراعاته عند تفسير العلاقة الملحوظة. وبشكل عام، تدعم نتائجنا وجود علاقة بين تناول فيتامين B12 وحالة الإصابة بمرض الكلى السكري (DKD).

أظهر التحليل القائم على الربيعيات أن المشاركين في الربيع الرابع (Q4) كانت لديهم احتمالات أقل بكثير للإصابة بمرض الكلى السكري (DKD) مقارنة بأولئك في الربيع الأول (Q1)، بينما لم تلاحظ أي ارتباطات ذات دلالة إحصائية للربيع الثاني (Q2) أو الثالث (Q3). كما أن الاتجاه الخطي عبر الربيعيات لم يكن ذا دلالة إحصائية أيضاً (p للاتجاه = 0.086)، مما يشير إلى أن الارتباط قد لا يتبع نمط استجابة خطي بسيط للجرعة. وتماشياً مع هذه النتيجة، أظهر تحليل المنحنيات المقيدة (RCS) وجود ارتباط غير خطي ذو دلالة إحصائية (p لعدم الخطية = 0.037). وحدد تحليل نقاط التحول اللاحق نقطتي تحول مستمدتين من البيانات عند 3.24 و8.36 μg/day. وقد لوحظ ارتباط عكسي ذو دلالة إحصائية فقط ضمن النطاق المتوسط الذي يتراوح بين 3.24–8.36 μg/day، في حين لم تلاحظ أي ارتباطات ذات دلالة إحصائية دون هذا النطاق أو فوقه. ومن المهم الإشارة إلى أن نقاط التحول هذه قد اشتُقت من مجموعة البيانات الحالية ويجب اعتبارها قيماً إحصائية استكشافية وليست عتبات سريرية مثبتة. وبناءً على ذلك، لا ينبغي تفسير الفترة ما بين 3.24–8.36 μg/day على أنها نطاق تناول أمثل أو موصى به دون التحقق الخارجي. وبشكل عام، تدعم هذه النتائج وجود ارتباط غير خطي محتمل بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD) بدلاً من علاقة استجابة خطية مستقرة للجرعة.

تعد الفيتامينات مغذيات دقيقة أساسية تشارك في عمليات أيضية متعددة، وقد ارتبطت بالصحة القلبية الأيضية30,31. كما أشارت دراسات سابقة إلى أن العديد من الفيتامينات قد تكون ذات صلة بمرض السكري ومضاعفاته. فعلى سبيل المثال، ارتبط مستوى فيتامين B6 عكسياً بمرض السكري ومضاعفاته31، بينما تم تسجيل تغير في مستويات فيتامين D في حالات مرض الكلى السكري (DKD) واعتلال الكلية السكري32,33. وتسلط هذه النتائج الضوء على الأهمية المحتملة لحالة المغذيات الدقيقة في التشوهات الأيضية والكلوية المرتبطة بالسكري، وتوفر مبرراً لمزيد من الفحص للعلاقة بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD).

أفادت الدراسات الوبائية بنتائج غير متسقة فيما يتعلق بالعلاقة بين حالة أو تناول فيتامين B12 والنتائج المرتبطة بمرض السكري. فقد أشار تحليل حديث من NHANES إلى وجود ارتباط إيجابي بين مدة الإصابة بالسكري ومستويات فيتامين B12 في المصل34. وفي المقابل، وجدت دراسة أجريت في أوغندا أن تطور مرض الكلى لدى المرضى المصابين بـ T2DM كان مصحوباً بانخفاض تناول فيتامين B12 وارتفاع تركيزات الهوموسيستين35. كما أفاد Wu وزملاؤه بأن المكملات المشتركة من حمض الفوليك وفيتامين B12 لدى المرضى المصابين بالسكري واعتلال الكلية السكري أدت إلى خفض مستويات الهوموسيستين والمالوندdialdehyde في المصل، وزيادة نشاط أكسيد النيتريك وسوبر أكسيد ديسموتاز، وتقليل إفراز الميكروألبومين في البول36. وأشارت دراسات أخرى أيضاً إلى انتشار مرتفع نسبياً لنقص فيتامين B12 بين المرضى المصابين بـ T2DM37,38,39,40,41. وتماشياً مع احتمالية أن تكون حالة فيتامين B12 ذات صلة بمضاعفات السكري، وجدت دراستنا أن زيادة تناول فيتامين B12 الغذائي كانت مرتبطة بانخفاض احتمالات الإصابة بـ DKD.

قد تكون العلاقة العكسية الملحوظة بين تناول فيتامين B12 ومرض الكلى السكري (DKD) منطقية من الناحية البيولوجية، نظراً لأدوار فيتامين B12 في استقلاب الهوموسيستين، وتنظيم الإجهاد التأكسدي، والاستجابات الالتهابية، واستقلاب الطاقة الخلوية42,43. كما ارتبط نقص فيتامين B12 باختلالات أيضية، وقد يساهم عدم التوازن الذي يتميز بتناول مفرط للفولات مقترناً بنقص فيتامين B12 في ضعف استقلاب الجلوكوز والإصابة بمرض السكري من النوع الثاني (T2DM)44,45. وتسلط هذه الملاحظات الضوء على أهمية الحفاظ على تناول كافٍ ومتوازن للمغذيات الدقيقة في الصحة الأيضية. وتماشياً مع هذه الخلفية، وجدت دراستنا أن ارتفاع تناول فيتامين B12 الغذائي كان مرتبطاً بانخفاض احتمالات الإصابة بمرض الكلى السكري (DKD). وهناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتوضيح علاقة الجرعة والاستجابة بين تناول فيتامين B12 وصحة الكلى لدى الأفراد المصابين بالسكري، والتحقق من نطاقات التناول الملحوظة في الدراسة الحالية في مجموعات سكانية مستقلة، وتحديد ما إذا كانت مكملات فيتامين B12 ذات أهمية سريرية لدى هذه الفئة من السكان.

حدد تحليل الترانسكريبتوميك كذلك P2RY14 كجين مرشح مرتبط بمرض اعتلال الكلى السكري (DKD). أظهر P2RY14 قيم AUC مرتفعة نسبياً في مجموعات GSE30528 وGSE30529، بينما كانت قدرته التمييزية أكثر تواضعاً في GSE142025. ونظراً لمحدودية أحجام العينات، يجب اعتبار هذه النتائج أولية وتتطلب التحقق من صحتها في مجموعات مستقلة أكبر. بالإضافة إلى ذلك، أشارت تحليلات الإثراء الوظيفي إلى أن P2RY14 قد يكون مرتبطاً بتنظيم المصفوفة خارج الخلية (ECM)، والالتصاق البؤري، وتطور الكلى، مما يدعم إجراء المزيد من الاستقصاءات حول دوره المحتمل في اعتلال الكلى السكري.

وعلى نطاق أوسع، يوفر دمج الوبائيات الغذائية القائمة على السكان مع تحليل الترانسكريبتوم إطاراً تكميلياً لربط التعرضات الغذائية بالسمات الجزيئية المرتبطة بالمرض. وقد يسهل هذا النهج صياغة الفرضيات في أبحاث الوبائيات الغذائية ومرض الكلى السكري (DKD)، ويساعد في تحديد أولويات الأهداف الجزيئية المرشحة للتحقق التجريبي اللاحق. ومع ذلك، تظل هذه النتائج استكشافية ولا تثبت فائدة سريرية أو تشخيصية أو علاجية.

تتمثل إحدى القيود الرئيسية للدراسة الحالية في التركيب غير المتجانس لمجموعة Non-DKD، والتي شملت مشاركين بحالات مختلفة من DM وCKD بدلاً من أن تقتصر على الأفراد المصابين بـ DM دون الإصابة بـ CKD. وبناءً على ذلك، فإن الاختلافات المتبقية في حالة السكري ووظائف الكلى والصحة العامة قد تكون قد أثرت على الارتباطات المرصودة. بالإضافة إلى ذلك، فإن التصميم المقطعي للدراسة يمنع الاستنتاج فيما يتعلق بالعلاقات الزمنية أو السببية. وفقاً لذلك، يجب تفسير النتائج الوبائية على أنها ارتباطات على مستوى السكان مع حالة DKD، وهناك حاجة إلى دراسات مستقبلية استشرافية تركز على الأفراد المصابين بالسكري. علاوة على ذلك، تم تقدير تناول فيتامين B12 الغذائي من خلال استرجاعين غذائيين لمدة 24 ساعة، وهو أمر قد يتأثر بالتباين الغذائي اليومي وأخطاء التذكر، وبالتالي قد لا يعكس بشكل كامل التناول المعتاد طويل الأمد لفيتامين B12، مما قد يكون قد أدخل درجة معينة من الخطأ في قياس التعرض. كما يجب الإقرار بعدة قيود في تحليلات النسخ والالتحام الجزيئي؛ حيث استُمدت بيانات NHANES وGEO من مجموعات سكانية مستقلة، ولم يتم تقييم التنظيم المباشر لـ P2RY14 بواسطة فيتامين B12 تجريبياً. وقد استُخدم التداخل بين DEGs المرتبطة بـ DKD والجينات المرتبطة بالكوبالامين في مسح استكشافي للمرشحين، ولم يتم اختبار إثرائه بما يتجاوز التوقع العشوائي بشكل رسمي. لذا، يجب اعتبار P2RY14 مرشحاً لتوليد الفرضيات، وتتطلب أهميته البيولوجية مزيداً من التحقق. بالإضافة إلى ذلك، فإن التفاعل المتوقع بين MC-1 وP2RY14 استند إلى الالتحام الجزيئي وحده ويجب اعتباره استكشافياً. هناك حاجة إلى دراسات مستقبلية تتضمن التدخل بفيتامين B12، والتحليلات الوظيفية لـ P2RY14، ومقايسات الارتباط المباشر أو الوظائف المستقبلية، مثل رنين البلازمون السطحي أو الترحيل الحراري المجهري، لمزيد من تقييم هذه العلاقات المتوقعة.

الخلاصة

وفي الختام، تدعم دراستنا وجود ارتباط بين تناول فيتامين B12 وحالة مرض اعتلال الكلية السكري (DKD)، حيث ارتبط ارتفاع تناول فيتامين B12 بانخفاض احتمالات الإصابة بـ DKD مع وجود علاقة يحتمل أن تكون غير خطية. وعلاوة على ذلك، حدد تحليل الترانسكريبتوم جين P2RY14 كمرشح لتوليد الفرضيات مرتبط بـ DKD، بينما تنبأ الالتحام الجزيئي الاستكشافي بنمط ارتباط محتمل بين P2RY14 و MC-1. وتوفر هذه النتائج أساساً لمزيد من الاستقصاء حول العلاقة بين تناول فيتامين B12 و DKD، بالإضافة إلى الأهمية البيولوجية المحتملة لـ P2RY14.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح يتعين الإفصاح عنه.

مساهمات المؤلفين:
كتب A.Z. النص الرئيسي للمخطوطة. وأعد G.Z. و J.D. الأشكال والجداول. وقام J.L. بمراجعة و... تم تحرير المخطوطة، وقد راجع جميع المؤلفين المخطوطة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مصفوفة Affymetrix Human Genome U133A 2.0Affymetrix؛ مفهرسة بواسطة NCBI GEO<رابط تشعبي="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GPL571">https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GPL571GPL571 (HG-U133A_2)
AlphaFoldGoogle DeepMind / EMBL-EBIhttps://alphafold.ebi.ac.uk//
AutoDockمختبر أولسون، معهد سكريبس للأبحاثhttps://autodock.scripps.edu/الإصدار 4.2.6 (AutoDock 4.2.6)
التنظيم الذاتيحزمة Rالإصدار 0.3.3 (autoReg)
CB-dock2/http://183.56.231.194:8001/cb-dock2/index.phpCB-dock2
clusterProfilerBioconductor؛ يو وآخرون.الإصدار 4.8.3 (PMID: 22455463)
Cytoscapeاتحاد Cytoscape<رابط لـ"https://www.r-project.org/">https://cytoscape.org/الإصدار 3.7.2 (PMID: 14597658)
DGldb/https://dgib.org/DGldb
GeneMANIAفريق GeneMANIAhttp://genemania.org/GeneMANIA
مستودع التعبير الجيني (GEO)المركز الوطني لمعلومات التقانة الحيوية (NCBI)، المكتبة الوطنية الأمريكية للطبhttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/أرشيف تعبيرات الجينات (GEO)
GSE30528قاعدة بيانات NCBI GEO<رابط إلى="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE30528">https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE30528سلسلة GEO العامة (GSE30528؛ مشروع BioProject PRJNA154757)
GSE30529قاعدة بيانات NCBI GEO<رابط تشعبي="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE30529">https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE30529سلسلة GEO العامة (GSE30529)
جين كاردز (GeneCards) – قاعدة بيانات الجينات البشريةمعهد وايزمان للعلوم / لايف ماب ساينسز (LifeMap Sciences)https://www.genecards.org/GeneCards
تحليل إثراء مجموعة الجينات (GSEA) / قاعدة بيانات العلامات الجزيئية (MSigDB)/https://www.gsea-msigdb.org/gsea/index.jspv2025.1.Hs (GSEA / MSigDB)
الوجودية الجينية (GO)ائتلاف الوجودية الجينية (Gene Ontology Consortium)https://geneontology.org/انطلق
موسوعة كيوتو للجينات والجينوم (KEGG)مختبرات كانيهيساhttps://www.kegg.jp/KEGG
limmaBioconductor؛ ريتشي وآخرون.الإصدار 3.56.2 (PMID: 25605792)
المسح الوطني لفحص الصحة والتغذية (NHANES)المركز الوطني للإحصاءات الصحية (NCHS)، مراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها (CDC)<أداة الربط التشعبي (a href=)"http://www.cdc.gov/nchs/nhanes/index.htm">http://www.cdc.gov/nchs/nhanes/index.htm2011–٢٠١٨ (أربع دورات ٢٠١١–2012; 2013–2014; 2015–2016; 2017–2018)
المسح الوطني لفحص الصحة والتغذية (NHANES)حزمة Rالإصدار 1.0 (nhanesA)
منحنى خصائص التشغيل للمستقبل (pROC)حزمة Rالإصدار 1.18.5 (pROC)
PubChemالمركز الوطني لمعلومات التقانة الحيوية (NCBI)، المكتبة الوطنية الأمريكية للطبhttps://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/PubChem
جذر متوسط المربعاتحزمة Rالإصدار 8.1-0 (rms)
برنامج Rمؤسسة R للحوسبة الإحصائيةhttps://www.r-project.org/الإصدار 4.4.1
مجزأحزمة Rالإصدار 2.1-4 (مجزأ)
يرجى تزويدنا بالنص المراد ترجمته.اتحاد STRINGhttps://string-db.org/الإصدار 11.0 (PMID: 30476243)
استبيانحزمة Rالإصدار 4.4-8 (survey; svydesign(); svyglm())
الجدول الأولحزمة Rtableone؛ ()svyCreateTableOne

المراجع

  1. Forst T, et al. New strategies to improve clinical outcomes for diabetic kidney disease. BMC Med. 2022;20(1):337.
  2. Zheng Y, Ley SH, Hu FB. Global aetiology and epidemiology of type 2 diabetes mellitus and its complications. Nat Rev Endocrinol. 2018;14(2):88-98.
  3. Zhang Y, Sun X, Icli B, Feinberg MW. Emerging Roles for MicroRNAs in Diabetic Microvascular Disease: Novel Targets for Therapy. Endocr Rev. 2017;38(2):145-68.
  4. Lyssenko V, Vaag A. Genetics of diabetes-associated microvascular complications. Diabetologia. 2023;66(9):1601-13.
  5. Valencia WM, Florez H. How to prevent the microvascular complications of type 2 diabetes beyond glucose control. BMJ. 2017;356:i6505.
  6. Hung PH, Hsu YC, Chen TH, Lin CL. Recent Advances in Diabetic Kidney Diseases: From Kidney Injury to Kidney Fibrosis. Int J Mol Sci. 2021;22(21).
  7. McGrath K, Edi R. Diabetic Kidney Disease: Diagnosis, Treatment, and Prevention. Am Fam Physician. 2019;99(12):751-9.
  8. Lin YC, Chang YH, Yang SY, Wu KD, Chu TS. Update of pathophysiology and management of diabetic kidney disease. J Formos Med Assoc. 2018;117(8):662-75.
  9. Sabanayagam C, et al. Association of Diabetic Retinopathy and Diabetic Kidney Disease With All-Cause and Cardiovascular Mortality in a Multiethnic Asian Population. JAMA Netw Open. 2019;2(3):e191540.
  10. Saran R, et al. US Renal Data System 2018 Annual Data Report: Epidemiology of Kidney Disease in the United States. Am J Kidney Dis. 2019;73(3 Suppl 1):A7-A8.
  11. Miller RG, et al. Contemporary Estimate of Total Mortality and Cardiovascular Disease Risk in Young Adults With Type 1 Diabetes: The Pittsburgh Epidemiology of Diabetes Complications Study. Diabetes Care. 2016;39(12):2296-303.
  12. Lyon P, Strippoli V, Fang B, Cimmino L. B Vitamins and One-Carbon Metabolism: Implications in Human Health and Disease. Nutrients. 2020;12(9).
  13. Chazot C, Steiber AL, Kopple JD. Chapter 26 - Vitamin metabolism and requirements in chronic kidney disease and kidney failure. In: Kopple JD, Massry SG, Kalantar-Zadeh K, Fouque D, editors. Nutritional Management of Renal Disease (Fourth Edition): Academic Press; 2022. p. 413-65.
  14. Shakoor H, et al. Be well: A potential role for vitamin B in COVID-19. Maturitas. 2021;144:108-11.
  15. Green R, et al. Vitamin B(12) deficiency. Nat Rev Dis Primers. 2017;3:17040.
  16. Capelli I, et al. Folic Acid and Vitamin B12 Administration in CKD, Why Not Nutrients. 2019;11(2).
  17. Bamonti-Catena F, et al. Folate measurements in patients on regular hemodialysis treatment. Am J Kidney Dis. 1999;33(3):492-7.
  18. Andres E, Serraj K, Zhu J, Vermorken AJ. The pathophysiology of elevated vitamin B12 in clinical practice. QJM. 2013;106(6):505-15.
  19. Soohoo M, et al. Association of serum vitamin B12 and folate with mortality in incident hemodialysis patients. Nephrol Dial Transplant. 2017;32(6):1024-32.
  20. Zhang H, Liu N, Dang H. Association of the Controlling Nutritional Status (CONUT) score with all-cause and cause-specific mortality in patients with diabetic kidney disease: evidence from the NHANES 2009-2018. BMJ Open. 2024;14(4):e079992.
  21. Rahman HH, Niemann D, Munson-McGee SH. Association of albumin to creatinine ratio with urinary arsenic and metal exposure: evidence from NHANES 2015-2016. Int Urol Nephrol. 2022;54(6):1343-53.
  22. Phillips JA. Dietary Guidelines for Americans, 2020-2025. Workplace Health Saf. 2021;69(8):395.
  23. Ritchie ME, et al. limma powers differential expression analyses for RNA-sequencing and microarray studies. Nucleic Acids Res. 2015;43(7):e47.
  24. Yu G, Wang LG, Han Y, He QY. clusterProfiler: an R package for comparing biological themes among gene clusters. Omics : a journal of integrative biology. 2012;16(5):284-7.
  25. Szklarczyk D, et al. STRING v11: protein-protein association networks with increased coverage, supporting functional discovery in genome-wide experimental datasets. Nucleic Acids Res. 2019;47(D1):D607-D13.
  26. Shannon P, et al. Cytoscape: a software environment for integrated models of biomolecular interaction networks. Genome research. 2003;13(11):2498-504.
  27. Zhao L, et al. Non-linear association between composite dietary antioxidant index and depression. Front Public Health. 2022;10:988727.
  28. da Silva Ebone R, Doleski PH, Jantsch MH, da Silveira RP, Leal DBR. P2Y14 receptor activation and neutrophil signaling: linking inflammation to systemic pathophysiology. Purinergic Signal. 2026;22(1):5.
  29. Lazarowski ER, Harden TK. UDP-Sugars as Extracellular Signaling Molecules: Cellular and Physiologic Consequences of P2Y14 Receptor Activation. Mol Pharmacol. 2015;88(1):151-60.
  30. Survase S, Bajaj I, Singhal R. Biotechnological Production of Vitamins. Food Technology and Biotechnology. 2006;44.
  31. Mascolo E, Verni F. Vitamin B6 and Diabetes: Relationship and Molecular Mechanisms. Int J Mol Sci. 2020;21(10).
  32. Delrue C, Speeckaert R, Delanghe JR, Speeckaert MM. The Role of Vitamin D in Diabetic Nephropathy: A Translational Approach. Int J Mol Sci. 2022;23(2).
  33. Wang H, et al. In vitro and in vivo inhibition of mTOR by 1,25-dihydroxyvitamin D(3) to improve early diabetic nephropathy via the DDIT4/TSC2/mTOR pathway. Endocrine. 2016;54(2):348-59.
  34. Raizada N, Jyotsna VP, Sreenivas V, Tandon N. Serum Vitamin B12 Levels in Type 2 Diabetes Patients on Metformin Compared to those Never on Metformin: A Cross-sectional Study. Indian J Endocrinol Metab. 2017;21(3):424-8.
  35. Kibirige D, Mwebaze R. Vitamin B12 deficiency among patients with diabetes mellitus: is routine screening and supplementation justified J Diabetes Metab Disord. 2013;12(1):17.
  36. Wu HHL, Wang AY. Vitamin B12 and chronic kidney disease. Vitam Horm. 2022;119:325-53.
  37. Kumthekar AA, Gidwani HV, Kumthekar AB. Metformin associated B12 deficiency. J Assoc Physicians India. 2012;60:58-60.
  38. Nervo M, et al. Vitamin B12 in metformin-treated diabetic patients: a cross-sectional study in Brazil. Rev Assoc Med Bras (1992). 2011;57(1):46-9.
  39. Bell DS. Metformin-induced vitamin B12 deficiency presenting as a peripheral neuropathy. South Med J. 2010;103(3):265-7.
  40. Pflipsen MC, et al. The prevalence of vitamin B(12) deficiency in patients with type 2 diabetes: a cross-sectional study. J Am Board Fam Med. 2009;22(5):528-34.
  41. Liu KW, Dai LK, Jean W. Metformin-related vitamin B12 deficiency. Age Ageing. 2006;35(2):200-1.
  42. Halczuk K, Kazmierczak-Baranska J, Karwowski BT, Karmanska A, Cieslak M. Vitamin B12-Multifaceted In Vivo Functions and In Vitro Applications. Nutrients. 2023;15(12).
  43. Mohan A, Kumar R, Kumar V, Yadav M. Homocysteine, Vitamin B12 and Folate Level: Possible Risk Factors in the Progression of Chronic Heart and Kidney Disorders. Curr Cardiol Rev. 2023;19(4):e090223213539.
  44. Krishnaveni GV, Veena SR, Karat SC, Yajnik CS, Fall CH. Association between maternal folate concentrations during pregnancy and insulin resistance in Indian children. Diabetologia. 2014;57(1):110-21.
  45. Yajnik CS, et al. Vitamin B12 and folate concentrations during pregnancy and insulin resistance in the offspring: the Pune Maternal Nutrition Study. Diabetologia. 2008;51(1):29-38.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

دراسة NHANESالتحليل الترانسكريبتوميتعبير P2RY14الجينات ذات التعبير المتباينالانحدار اللوجستيالتفاعل مع المصفوفة خارج الخليةالالتصاق البؤريالالتحام الجزيئي
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.