في هذا الفيديو ، ونحن يبرهن على وجود طريقة لفصل الكهربي للبروتينات باستخدام بولي acrylimide الكهربائي للهلام (PAGE).
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
ويستخدم الكهربي لفصل مخاليط معقدة من البروتينات (على سبيل المثال ، من الخلايا ، الكسور التحت خلوية ، كسور العمود ، أو immunoprecipitates) ، للتحقيق في التراكيب الوحيدات ، والتحقق من تجانس عينات البروتين. يمكن أن تستخدم أيضا لتنقية البروتينات لاستخدامها في تطبيقات أخرى. في هلام بولي أكريلاميد الكهربائي ، والبروتينات تهاجر ردا على الحقل الكهربائي من خلال المسام في المصفوفة هلام بولي أكريلاميد ؛ حجم المسام يتناقص مع زيادة تركيز مادة الأكريلاميد. مزيج من حجم المسام والمسؤول عن البروتين ، والحجم ، والشكل الذي يحدد معدل الهجرة من البروتين. في هذه الوحدة ، وصفت طريقة قياسية لLaemmli هلام إستشراد متقطع في ظل ظروف تغيير طبيعة ، أي في وجود كبريتات الصوديوم دوديسيل (SDS).
البروتوكول
بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في البروتوكولات الحالية في البيولوجيا الجزيئية .
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تعارض في المصالح للإفصاح عنه.
إعادة الطباعة والأذونات
