استخراج المؤشرات الحيوية من الرواسب - استخراج المذيبات المتسارع

1. جمع المواد اللازمة

1. استخراج العينات. يتم تجميد العينات (في هذه الحالة ، الرواسب) وتجفيفها بالتجميد وسحقها وتجانسها قبل الاستخراج ، واستخراجها في مجموعات لتحقيق أقصى قدر من الكفاءة.
2. اعتمادا على حجم العينة ، استخدم قوارير التجميع بأحجام 40 أو 60 مل. في هذه التجربة ، يتم استخدام قوارير زجاجية من البورسليكات (40 مل) وأغطية آمنة للمذيبات. قم باحتراق القوارير والماصات الزجاجية البورسليكات وعلب الوزن عند 550 درجة مئوية لمدة 6 ساعات قبل ضمان إزالة الملوثات العضوية المحتملة.
3. ثنائي كلورو الميثان (DCM) والميثانول شائعان في معظم مختبرات الكيمياء الجيولوجية العضوية. استخدمها بشكل فردي (الميثانول أولا ، متبوعا ب DCM) لشطف أدوات المختبر والأواني الزجاجية قبل الاستخدام. يستخدم خليط من ثنائي كلورو الميثان إلى الميثانول (MeOH ؛ 9: 1) في العديد من المختبرات لاستخراج المؤشرات الحيوية بكفاءة مع مجموعة واسعة من الأقطاب. يجب أن تكون المذيبات خالية من الملوثات العضوية.
4. احصل على مستخرج مذيب معجل لاستخدامه في هذه التجربة.

2. تحضير خلايا العينة

1. قم بتجميع خلية عينة لكل عينة يتم استخراجها ، بالإضافة إلى خلية واحدة فارغة.
   1. لكل خلية ، قم بربط غطاء نهاية على أحد طرفي جسم الخلية.
   2. ضع مرشحا محترقا من الألياف الزجاجية فوق كل خلية باستخدام ملاقط مغسولة بالمذيبات. ثم اضغط برفق وببطء على الفلتر لأسفل في الخلية باستخدام مكبس المرشح.
   3. قم بتسمية أجسام الخلايا بالرقم ( على سبيل المثال 1 - 22) لكل عينة واكتب "فارغة" على الخلية الفارغة.
   4. املأ الفراغ بالأرض الدياتومية (أو الرمل) وغطاءه بغطاء نهاية ثان. شد باليد.

3. تحضير العينات

1. ضع علبة وزن محترقة على ميزان المختبر ثم فارغها.
2. اشطف ملعقة المختبر بالمذيب ، ثم استخدمها لنقل كتلة مناسبة من العينة إلى علبة الوزن ، وتسجيل الكتلة.
   1. تختلف كتلة العينة حسب محتواها من المواد العضوية. قد تتطلب المواد العضوية الخالية من الدهون نسبيا (الطين البحري) عدة جرامات ، بينما قد تتطلب المواد العضوية الغنية (أنسجة الأوراق) أقل بكثير.
3. انقل جميع المواد الموجودة في علبة الوزن إلى خلية ASE مجهزة.
4. ضع مرشحا آخر من الألياف الزجاجية في الجزء العلوي من الخلية ، ثم اضغط ببطء برفق لأسفل حتى يصل إلى الجزء العلوي من العينة باستخدام مكبس المرشح.
5. أضف التراب الدياتومي (أو الرمل) إلى الخلية حتى تمتلئ تقريبا. احرص على إزالة أي حطام من خيوط جسم الخلية.
6. قم بتغطية الجزء العلوي من الخلية بغطاء طرفي آخر.
7. كرر الخطوات 3.1 - 3.6 لكل عينة.

4. تحضير قوارير التجميع

1. قم بتسمية كل قارورة برقم الخلية المقابلة ( على سبيل المثال 1 - 22 أو فارغة) وغطاء بغطاء قارورة تجميع ASE.

5. الاستخراج

1. ضع كل خلية عينة في فتحة مرقمة في درج ASE العلوي.
2. ضع قارورة التجميع المقابلة في نفس فتحة الأرقام على درج ASE السفلي.
3. قم بإنشاء طريقة الاستخراج باستخدام لوحة المفاتيح على ASE. يستخرج عند 100 درجة مئوية و 1,200 رطل لكل بوصة مربعة. استخرج كل عينة 3x مع ثبات ثابت لمدة 10 دقائق واغسل جسم الخلية بنسبة 50٪ من حجمها الإجمالي بين الحجوزات الثابتة.
4. تأكد من أن زجاجة المذيبات تحتوي على مذيب كاف لاستخراج جميع العينات.
5. اشطف ASE 3x قبل بدء التشغيل بالضغط على زر "شطف" على لوحة التحكم ASE.
6. اضغط على ابدأ.