فئة < ص = "jove_title" >1. الحقن تحت الجلد

الشكل 1. الحقن تحت الجلد في الفئران.

الشكل 2. معالم الحقن داخل الصفاق في الفئران.


المصدر: كاي ستيوارت ، RVT ، RLATG ، CMAR. فاليري أ. شرودر ، RVT ، RLATG. جامعة نوتردام ، إنديانا
نظرا لأن العديد من بروتوكولات البحث تتطلب حقن مادة في…
فئة < ص = "jove_title" >1. الحقن تحت الجلد

الشكل 1. الحقن تحت الجلد في الفئران.

الشكل 2. معالم الحقن داخل الصفاق في الفئران.


غالبا ما تكون الإدارة المركبة جزءا لا يتجزأ من دراسة, والعديد من العوامل تحتاج إلى تقييم لضمان أن المركب يتم تسليمه بشكل صحيح وبطريقة إنسانية. طريقان رئيسيان للإعطاء هما المعويين - عبر الجهاز الهضمي ، والحقن - خارج الجهاز الهضمي. الفرق الرئيسي هو أنه إذا تم إعطاء المركب عبر الطريق المعوي فإنه يخضع لعملية التمثيل الغذائي الكبدي قبل دخول مجرى الدم. في حين أنه ، عبر أي طريق وريدي ، مثل الوريد أو العضل ، تتخطى المادة هذا المرور الأول عبر الكبد ، مما يؤدي عادة إلى زيادة التوافر البيولوجي.
في هذا الفيديو الأول من سلسلة الإدارة المركبة، سنبدأ بمناقشة العوامل المؤثرة في اختيار مسار الإدارة بشكل عام. وبعد ذلك سنراجع طرق الحقن بالحقن الأكثر شيوعا ، بما في ذلك تحت الجلد المختصرة باسم SC أو SubQ ، داخل الصفاق أو IP ، العضلي أو العضلي ، والوريد AKA IV.
لنبدأ بمراجعة بعض الأشياء التي يجب على المرء وضعها في الاعتبار قبل إجراء أي نوع من إجراءات الإدارة المركبة. تتمثل الخطوة الأولى في تحضير المحلول أو المعلق المراد حقنه ، والاعتبار الأساسي الأول لتحضير المادة هو العقم. لمنع إدخال مسببات الأمراض في ، من المهم أن تكون مادة الحقن وكذلك الإبر والمحاقن التي سيتم استخدامها معقمة.
الاعتبار الثاني هو التوافق الفسيولوجي. يجب تخزين محلول الجرعات ، سواء تم إعطاؤه معويا أو عن طريق الحقن ، من الناحية الفسيولوجية إلى درجة الحموضة المناسبة حتى يتم امتصاص المركب بشكل صحيح ، ولمنع إصابة الأنسجة. العامل الثالث هو لزوجة مادة الحقن ، والتي تلعب دورا مهما في اختيار الإبرة. عادة ، يتم استخدام 20 إلى 30 إبرة قياس في إجراءات الإدارة بالحقن للفئران والجرذان. عادة ما تكون محاور هذه الإبر مشفرة بالألوان لسهولة التعرف عليها.
يجب أن يحتوي المحلول على سيولة كافية للمرور عبر واحدة على الأقل من هذه الإبر. إذا كان الحل يمكن أن يمر عبر أكثر من واحد ، فعندئذ ، بشكل عام ، يكون الاختيار هو أصغر مقياس ممكن. العامل التالي هو حجم الإدارة الذي يؤثر على اختيار المحقنة. على غرار الإبر ، يجب اختيار أصغر حقنة ممكنة مطلوبة للجرعات الدقيقة مع التخرج الصحيح. يعتمد مقياس الإبرة وحجم الإدارة أيضا على المسار وأنواع الذي يتم إعطاؤه وحجمه وعمره. انظر الجدول 1 أدناه لمراجعة القيم المتعلقة بالمسارات التي تمت مناقشتها في هذا الفيديو. الاعتبار المهم الأخير هو معدل الامتصاص ، والذي يختلف اختلافا كبيرا مع كل طريق من طرق الإدارة وقد يلعب دورا في اختيار الطريقة الأنسب.
الآن ، دعنا نتحدث عن الخصائص الغريبة لطرق الحقن المستخدمة بشكل روتيني.
يضع SC أو SubQ Injection المادة بين طبقات الجلد والعضلات في مساحة افتراضية تم إنشاؤها عن طريق رفع الجلد. هذا يسمح بالحقن الآمن لكميات أكبر ، لكن معدل الامتصاص أبطأ من الطرق الأخرى ، مما يوفر تأثيرا أكثر استدامة. أثناء إدارة IP ، يتم حقن المركب مباشرة في التجويف البريتوني. هذه طريقة شائعة أخرى تستخدم لتقديم كميات كبيرة من المحلول. على الرغم من أن حقن IP يعتبر الإدارة بالحقن, آلية الامتصاص هي في الواقع أكثر تشابها مع الجرعات عن طريق الفم.
حقن المراسلة العضلية يسلم مركبا مباشرة في الألوية أو عضلة المعدة. يتم امتصاص المادة المحقونة بالحقن العضلي بسرعة بسبب العدد الوفير من الأوعية داخل الأنسجة العضلية ، مما قد يجعلها طريقا مفضلا في بعض الحالات. يمكن أن يتسبب الحقن غير السليم أو المتكرر في العضلات في تلف الأعصاب مما يؤدي إلى الشلل أو نخر العضلات. أخيرا ، يعد الحقن الوريدي في وريد ذيل هو الطريقة الأكثر فعالية للإعطاء ، حيث يتم إدخال المادة مباشرة في الدورة الدموية. لاحظ أنه يجب حقن المركب في أحد الأوردة الذيلية الجانبية الموجودة على جانبي الذيل. هناك وعاء يمتد على طول خط الوسط البطني للذيل ، وهو غير مناسب لأغراض الحقن.
الآن بعد أن ناقشنا الخلفية ، دعنا نتعلم الإجراءات ، بدءا من حقن SC. بالنسبة للفئران ، اختر من ذيله واتركه يرتاح على سطح آمن آخر ، مثل غطاء القضيب السلكي. بعد ذلك ، قم بتقييد يدويا عن طريق رفع الجلد حول الرقبة ، وتشكيل خيمة. بعد ذلك ، ضع على الطاولة مع وضع القدمين الخلفيتين على السطح ووضع كعب يدك على الطاولة لتجنب الوزن غير المبرر على الذي قد يضر بالتنفس.
للحقن ، التقط المحقنة بالمحلول المراد حقنه ، وقم بتوجيه الإبرة الموازية للعمود الفقري وبعيدا عن الرأس لتجنب احتمال حدوث ثقوب في الجمجمة. بعد ذلك ، أدخل الإبرة مع توجيه شطبة لأعلى ، مما يسمح بالانزلاق اللطيف في الجلد. اسحب المكبس للخلف للتحقق من وضع الإبرة بشكل صحيح. إذا كان هناك ضغط عكسي عند سحب المكبس للخلف ، فإن الإبرة تكون في الموضع الصحيح. إذا تم سحب الهواء إلى المكبس ، فستحتاج إلى إعادة وضع الإبرة.
بعد التأكد من وضع الإبرة بشكل صحيح ، قم بالحقن ببطء بحركة ثابتة. توقف مؤقتا بعد الحقن وقم بتدوير الإبرة قليلا تحت الجلد لمنع فقدان مادة الحقن. ثم اضغط على الجلد في موقع الحقن واسحب الإبرة. يمكن استخدام نفس الطريقة في فطام الفئران.
بالنسبة للفئران البالغة ، يجب أولا تقييد باستخدام جهاز ، تمت مناقشة الإجراء الخاص به في فيديو "أساسيات المناولة وضبط النفس" لهذه المجموعة. بعد ذلك ، يمكن للمرء إجراء حقن SC بنفس الطريقة التي يتم بها في الفئران.
بعد ذلك ، سوف نتعلم كيفية إجراء حقن IP. في الفئران ، استخدم تقنية ضبط النفس باليدين لكبح جماح يدويا ، كما هو موضح مرة أخرى في فيديو "أساسيات المناولة وضبط النفس". تأكد من وضع يدك غير المهيمنة مرتفعة بما يكفي على الرقبة لمنع من الدوران. قم بتثبيت الخلف عن طريق وضع الذيل بين الإصبعين الثالث والرابع أو عن طريق تثبيت الجلد بإحكام بين الأصابع المتبقية وقاعدة الإبهام.
بعد ذلك ، ضع لفضح بطنه. قم بإمالة مع توجيه الرأس لأسفل عند 30؟ زاوية للسماح للأمعاء بالسقوط إلى الأمام. يمكن تحديد معلم الحقن على النحو التالي: ارسم خطا وهميا يمتد أفقيا عبر الجسم ، في الجزء العلوي من الورك ، من الجناح إلى الجانب. ثم ارسم الحد الإنسي ، أو خط الوسط ، على طول الخط الذي يلتقي فيه الشعر الذي ينمو في اتجاهين متعاكسين. أخيرا ، تخيل الحدود الجانبية ، وهي عبارة عن خط من أعلى الوركين إلى القلفة عند الذكور وتتبع الحلمات عند الإناث. يوفر هذا المنطقة المثلثة لحقن IP الآمن.
الطريقة التالية التي سنناقشها هي الحقن العضلي. يتطلب ضبط النفس في هذه التقنية لكل من الفئران والجرذان إما شخصين أو استخدام أنبوب تقييد. هنا ، سنصف طريقة الشخص الواحد باستخدام جهاز تقييد.
أولا ، ضع في الأنبوب ومع إخراج الساقين الخلفيتين ، اسحب الذيل لوضع. بعد ذلك ، أمسك جلد الجناح في الجزء الجمجمي من عظم الفخذ لتمديد الساق ومنع الخنق من الانحناء. بعد ذلك ، ضع جهاز التقييد للسماح بتصور موقع الحقن.
لتحديد معلم الألوية ، حدد موقع كتلة عضلات الألوية خلف عظم الفخذ. يمكن تحسس العظم والشعور بالعضلات الكبيرة بسهولة. لاحظ خط الوسط الذي يمتد من نقطة العرقوب إلى الذيل. يمكنك غالبا رؤية التلال حيث يجتمع الشعر من الأسطح الجانبية والداخلية معا وينمو في اتجاهين متعاكسين. عادة, يتم إجراء الحقن نحو الجانب الجانبي قبالة خط الوسط. المعدة هي عضلة الساق ومن الأفضل أيضا إجراء الحقن في هذه العضلة من الجانب الخلفي.
بالنسبة للعضلة الألوية ، عند المعلم الموجود ، أدخل الإبرة على عمق أقصى يبلغ حوالي 5 مم. تجنب إعادة وضع المحقنة أثناء الحقن لمنع تلف العضلات. بعد ذلك ، استنشق للتأكد من أن الموضع داخل العضلة ، وليس الأوعية الدموية. وأخيرا ، قم بحقن المادة بطريقة بطيئة وثابتة ، لأن الحقن السريع سيسبب صدمة الأنسجة. قم بإزالة الإبرة بطريقة عمودية باتباع نفس مسار الإدخال. بالنسبة لعضلة المعدة ، قم بإدخال الإبرة على عمق أقصى يبلغ 3 مم وقم بإجراء الحقن بنفس الطريقة التي تتناول بها عضلة الألوية.
أخيرا ، دعنا نتعلم كيفية إجراء الحقن الوريدي في أوردة ذيل القوارض. نفس الطريقة قابلة للتطبيق على كل من الفئران والجرذان.
ضع في أنبوب تقييد أسطواني وقم بتدفئة جسم بالكامل باستخدام وسادة تسخين كهربائية مضبوطة على MEDIUM لمدة 2-5 دقائق. استمر في تدفئة ، حتى تتسع الأوعية الدموية ، وهذا أكبر بشكل ملحوظ. تذكر أن أوردة الذيل الذيلية الجانبية تقع على جانبي الذيل. الشريان الموجود في خط الوسط البطني غير مناسب لأغراض الحقن. قم بتدوير جهاز التقييد ووضع الذيل بحيث تكون أوردة الذيل الجانبية متجهة لأعلى ومثبتة تحت التوتر. لا تستخدم توترا مفرطا وإلا يمكن أن يتمدد الوعاء الدموي ويقل تدفق الدم.
ضع الإبرة مشطوفة مباشرة فوق الأوعية الدموية في أقصى مكان ممكن ، وقم بالضغط قليلا لتحريك الإبرة في الذيل الموازي للعمود الفقري. حقن المادة بحركة بطيئة وسائلة ولاحظ أن الوعاء الدموي يبيض حيث يتم دفع الدم للخارج بواسطة مادة الحقن. إذا لم يتم وضع الإبرة بشكل صحيح في الوعاء ، فستكون هناك مقاومة قوية عند الحقن ، وإذا قمت بالحقن بالقوة ، فسوف تملأ المادة الفراغ تحت الجلد وسوف ينتفخ الذيل. توقف على الفور لأن المادة - المصممة للحقن عن طريق الوريد - قد تكون كاوية للأنسجة المحيطة. اسحب الإبرة وحاول حقنة أخرى بشكل أكبر في الجمجمة على الذيل. بعد الحقن الناجح ، اسحب الإبرة واضغط على موقع الحقن لضمان الإرقاء الجيد قبل إعادة إلى القفص.
الآن بعد أن أصبحت على دراية بطرق الحقن الشائعة ، دعنا نلقي نظرة على بعض تطبيقات طرق الإعطاء هذه ، بخلاف توصيل الدواء.
في العديد من التجارب ، يتم حقن الفئران بممرض معين لدراسة العدوى. هنا ، استخدم الباحثون الطريق تحت الجلد لإدخال البكتيريا المقاومة للمضادات الحيوية التي تسبب الآفات ، وكان حجم هذه الآفات بمثابة قراءة لضراوة العامل الممرض. يهتم العديد من العلماء بدراسة توزيع الخلايا الجذعية وبقائها بعد التسليم الجهازي. في هذه الدراسة ، أجرى الباحثون حقن وريد الذيل للخلايا الجذعية العصبية الموسومة وراثيا في نموذج حيواني للتصلب المتعدد وحددوا توزيع الخلايا المحقونة على الحبل الشوكي ومناطق الدماغ.
في تجربة أخرى ، قام الباحثون بحقن الخلايا العضلية الموسومة بالفلورسنت في نموذج حيواني للحثل العضلي. بعد ذلك ، تم إجراء التلألؤ البيولوجي لتحليل الزرع الناجح للخلايا الجذعية. أخيرا ، يمكن أيضا استخدام الحقن لتوليد نماذج حيوانية. قام هؤلاء العلماء بحقن ثنائي ميثيل نيتروزامين داخل الصفاق - وهو سم قوي للكبد - في ذكور فئران ويستار لتوليد نموذج حيواني لتليف الكبد ، والذي تم استخدامه بعد ذلك لدراسة تطور مرض الكبد.
لقد شاهدت للتو الدفعة الأولى من JoVE حول الإدارة المركبة التي تناقش الحقن الوريدي شائعة الاستخدام. تذكر أن مسار التسليم الأمثل يعتمد على عدة عوامل بما في ذلك الأس الهيدروجيني والحجم ولزوجة المحلول المحقون. ولكل تقنية مزايا وعيوب ، والتي يجب مراعاتها فيما يتعلق بالاحتياجات التجريبية. كما هو الحال دائما ، شكرا على المشاهدة!
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: What is the main difference between enteral and parenteral routes of compound administration?
Enteral administration delivers compounds via the digestive tract, where the substance undergoes hepatic metabolism before entering the bloodstream. Parenteral routes, such as intravenous or intramuscular injection, bypass the liver, resulting in higher bioavailability. This first-pass metabolism difference significantly affects how quickly and completely the compound reaches systemic circulation.
Q2: Why is sterility important when preparing injection solutions for animal studies?
Sterile preparation prevents introducing pathogens into the animal during injection. Both the injection material and the needles and syringes must be sterile to avoid infection. Contamination can compromise animal health and invalidate experimental results, making sterility a fundamental consideration before any compound administration procedure.
Q3: How does needle gauge selection relate to injection solution viscosity?
Solution viscosity determines needle selection because thicker solutions require larger gauge needles to pass through. For mice and rats, 20 to 30 gauge needles are typically used in parenteral administration. The solution should flow through at least one needle, and the smallest gauge feasible is chosen if the solution passes through multiple needle sizes.
Q4: What are the advantages of subcutaneous injection compared to other parenteral routes?
Subcutaneous injection allows safe administration of larger volumes by placing material between skin layers and muscle in a virtual space created by lifting the skin. Although absorption is slower than other routes, this provides a more sustained effect. The technique is relatively simple and carries lower risk of complications compared to intramuscular or intravenous injection.
Q5: Why must intravenous injections target the lateral caudal tail veins rather than the ventral midline?
The lateral caudal tail veins on the sides of the tail are suitable for injection because they deliver compounds directly into the circulatory system. The artery running along the ventral midline is not suitable for injection purposes. Proper vein selection ensures effective delivery and prevents tissue damage from injecting into arterial or subcutaneous spaces.
Q6: What precautions should be taken during intramuscular injection to prevent tissue damage?
Inject material slowly and steadily, as rapid injection causes tissue trauma. Avoid repositioning the syringe during injection to prevent muscle damage. For the gluteal muscle, insert the needle to a maximum depth of 5 mm; for the gastrocnemius, use 3 mm maximum. Improper or repeated injections can cause nerve damage resulting in paralysis or muscle necrosis.
Q7: How does intraperitoneal injection absorption compare to other parenteral routes?
Although intraperitoneal injection is classified as parenteral administration, its absorption mechanism is actually more similar to oral dosing. The compound is injected directly into the peritoneal cavity, allowing safe delivery of large volumes. This route provides intermediate absorption rates compared to subcutaneous and intravenous routes, making it useful for specific experimental applications.
Chapters in this video
0:00
Overview
1:30
Key Considerations for Compound Administration
3:43
Characteristics of Different Injection Techniques
5:15
Subcutaneous Injection
7:15
Intraperitoneal (IP) Injection
9:30
Intramuscular (IM) Injection
12:02
Intravenous (IV) Injection via the Tail Vein
13:36
Applications
14:34
Summary
Videos from this collection: