إدارة المجمع IV

داخل القلب ، المداري الرجعي ووسادة القدم هي بعض طرق الحقن المتخصصة التي يستخدمها باحثو الطب الحيوي للتجارب التي تتطلب توصيل المركبات عبر هذه الطرق غير النمطية.

يقوم الحقن داخل القلب بتوصيل المركب إلى البطين الأيسر مما يسمح للمادة بالدخول مباشرة إلى الدورة الدموية الشريانية. المسار المداري الرجعي هو بديل لحقن وريد الذيل ويستخدم لتوصيل المركب إلى الدورة الدموية الوريدية. ويتضمن حقن وسادة القدم إدارة المادة تحت الجلد في القدم الخلفية للحيوان. سيوضح هذا الفيديو اعتبارات وإجراءات وتطبيقات تقنيات الحقن الخاصة هذه.

لنبدأ ببعض المعلومات الأساسية والأشياء التي يجب على المرء مراعاتها قبل البدء في إجراءات الإدارة هذه.

غالبا ما يتم إجراء الإعطاء داخل القلب من خلال استخدام الموجات فوق الصوتية لتوجيه الإبرة إلى الموقع الصحيح في القلب. ومع ذلك ، إذا تم إجراؤها بشكل صحيح باستخدام المعالم المناسبة ، فيمكن إجراء الإدارة دون استخدام التصور بالموجات فوق الصوتية. لاحظ أن الإجراء يتطلب استخدام مخدر عام ، ويسمح بحقنة واحدة فقط لكل لإجراءات البقاء على قيد الحياة. بشكل عام ، يتم استخدام إبرة قياس 27-30 لهذا الحقن والحد الأقصى لحجم الإدارة هو 100 و 300 ميكرولتر للفئران والجرذان ، على التوالي.

للحقن في الوريد عبر المسار المداري الرجعي ، يجب أن يكون لدى المرء فهم عادل للبنية الوريدية المدارية. يحتوي الفأر على جيب حيث تتقارب العديد من الأوردة - وهي فوق الحجاج ، والأنف الظهري ، والجفن السفلي ، والسطحي الصدغي. بينما في الفئران ، توجد شبكة أو ضفيرة من عدة عروق. يتم إجراء الحقن في الجيوب الأنفية أو الضفيرة مباشرة. مثل داخل القلب ، يتطلب هذا الإجراء أيضا استخدام التخدير العام ، ويوصى بحقنة واحدة فقط لكل عين يوميا مع ما مجموعه حقنتين لكل عين لإجراءات البقاء على قيد الحياة. كما هو الحال مع جميع الحقن ، يجب اختيار أصغر إبرة - بشكل عام 27-30 مقياس - والحد الأقصى للحجم الموصى به هو 150؟ L لكل عين.

على الرغم من الجدل ، لا يزال استخدام حقن وسادة القدم مطلوبا لبعض الدراسات ، والتي ترتبط عادة بالالتهاب ونمو الورم. لاحظ أنه لا يمكن إجراء الحقن إلا على قدم واحدة ، وليس بشكل ثنائي الجانبين. ويجب إجراء قياسات وسادة القدم يوميا بمجرد حدوث تورم واضح. يوصى باستخدام إبرة قياس 29-30 للحقن والحد الأقصى للحجم الموصى به هو 50 لتر. بعد أي حقنة ، يجب مراقبة جميع عن كثب بحثا عن علامات الألم ومستوى استهلاك الطعام والتنزه الطبيعي. بشكل عام ، يجب القتل الرحيم للحيوان عندما تتداخل الآفة أو الورم مع قدرة على التنزه أو الوصول إلى الطعام والماء.

الآن دعنا نتعلم إجراءات الحقن ، بدءا من الحقن داخل القلب. سنوضح الإجراء في الماوس ، لكن المعالم والبروتوكول الخاص بالجرذ متشابهان.

الخطوة الأولى هي تحضير المحقنة. تذكر إبرة قياس 29 وحقنة 1 سم مكعب مناسبة للفئران. والحد الأقصى لحجم الحقن داخل القلب هو 100 ميكرولتر. عند رسم المحلول ، اترك كمية صغيرة من الهواء بين المكبس ومادة الحقن. هذا للسماح للدم بدخول المحقنة عند وضعها في القلب.

للبدء ، قم بتخدير باستخدام التخدير المستنشق أو عن طريق الحقن. راجع اعتبارات الحفاظ على التخدير العام في مقطع فيديو آخر من هذه المجموعة. بعد ذلك ، ضع في وضع الاستلقاء الظهري على منصة معزولة. بعد ذلك ، قم بلصق الأطراف الأمامية على المنصة وضع قطعة من الشريط أفقيا عبر البطن فوق الوركين. هذا لزيادة ثبات وتجنب أي حركة بمجرد إدخال الإبرة. بعد ذلك ، باستخدام مسحة ، بلل صدر بالكحول بنسبة 70٪.

لتحديد موقع الحقن ، حدد موقع الخنجري أولا وقص القص. ثم ابحث عن نقطة المنتصف بين المعلمين. 1-2 مم يسار من هذه النقطة ، هو معلم إدخال الإبرة. باستخدام قضيب برأس قطني ، ضع اليود البوفيدون لتحديد موقع إدخال الإبرة.

للحقن ، قم بتوجيه الإبرة بشكل عمودي على الطاولة ، وأدخلها على عمق حوالي 2 مم. ثم قم بتطبيق ضغط خلفي طفيف جدا على المكبس. يجب أن يدخل دم مؤكسج أحمر فاتح إلى محور المحقنة ، مما يؤكد الوضع المناسب. أمسك المحقنة في نفس المكان وحقن المادة ببطء وثبات على مدار 30 إلى 60 ثانية. يمكن أن يؤدي الحقن السريع إلى تكتل الخلايا وانسداد الشرايين ، أو صدمة للنظام بسبب انخفاض درجة حرارة المادة بشكل ملحوظ عن درجة حرارة الجسم ، أو تمدد البطين واضطراب إيقاع القلب.

بمجرد أن تمسح المادة المحقنة ، قم بإزالة الإبرة ببطء وحذر دون أي حركة جانبية لأن ذلك قد يؤدي إلى تلف عضلات القلب. ثم حرر الشريط على الفور من الأرجل الأمامية والبطن وضع في وضع الانبطاح في قفص نظيف مع فراش عميق بما فيه الكفاية ليكون بمثابة طبقة عازلة. لاحظ أن نصف قفص الاسترداد هذا موجود على مصدر تسخين وأن المخدر يقع على الجانب الساخن من القفص. هذا يمنع انخفاض حرارة الجسم ، وعندما يتعافى من التخدير ، سيكون قادرا على التحرك بعيدا عن الجانب الساخن حسب الرغبة.

بعد ذلك ، دعنا نتعلم طريقة الحقن في الوريد باستخدام الضفيرة المدارية الرجعية في الفئران. مرة أخرى ، سنوضح الإجراء على الفأر ، لكن المعالم والبروتوكول الخاص بالفئران متشابهة.

قم بتوصيل الإبرة المناسبة بالمحقنة المحددة واملأ مادة الحقن. تذكر أنه بشكل عام ، يمكن للمرء أن يستخدم إبرة قياس 27-30 مع أصغر حقنة ممكنة وحجم أقصى يبلغ 150 ميكرولترا.

لبدء الإجراء ، قم أولا بتخدير. ثم ضعه على سطح مستو في وضع الاستلقاء الجانبي. الآن ضع إصبعك السبابة على الجزء العلوي من الرأس والإبهام على الفك ، واسحب برفق للخلف ولأسفل. هذا لشد الجلد وإبرازات مقلة العين. احرص على عدم الضغط على القصبة الهوائية وتقييد تدفق الهواء. إذا كنت تخطط لحقن متعددة، فاستخدم مخدر العين الموضعي مثل التتراكايين أو البروباراكايين.

أدخل الإبرة في الكانثوس الإنسي للعين عند 45؟ زاوية إلى الأنف. يجب أن يكون العمق كافيا لاختراق أنسجة الملتحمة والتقدم إلى مدار العين وإلى الجيوب الأنفية. لا ينبغي أن تواجه العظم في الجزء الخلفي من المدار. لتجنب تمزق الأوعية الدموية ، تأكد من أن الإبرة لديها الحد الأدنى من الحركة بمجرد إدخالها. لا تشتاح ، لأن ذلك سيؤدي إلى انهيار الأوعية. حقن المقالة بطريقة بطيئة وثابتة. بعد ذلك ، اسحب الإبرة برفق واضغط بضغط خفيف على العين للسيطرة على النزيف وتوفير الإرقاء.

أخيرا ، دعنا نراجع طريقة حقن وسادة القدم في الفئران والجرذان. للبدء ، قم بتوصيل الإبرة المناسبة واملأ المحقنة بالحجم الصحيح. يمكن القيام بهذا الإجراء في الواعية.

ضع في أنبوب تقييد مع عزل قدم خلفية واحدة وممتدة عن طريق الإمساك بالجلد فوق الخنق. امسح القدم بالماء أو الكحول لإزالة الحطام قبل الحقن. لتجنب الأوعية الدموية التي تمتد على طول القدم ، يكون معلم الحقن في المنتصف ، ولكن بعيدا عن خط الوسط ، أقرب إلى أصابع القدم.

ضع شطبة الإبرة لأعلى في موقع الحقن ، وتوجيهها نحو الكعب. حقن المادة ببطء وثبات لتجنب الانتفاخ السريع لأنسجة القدم. سيؤدي ذلك إلى تضخم وسادة القدم حيث تملأ مادة الحقن تلك المساحة تحت الجلد. على قدم صغير ، يمكن أن يمتد التورم الناتج عن الحقن إلى الكعب ، بينما في أكبر سيكون أكثر موضعية.

بعد الحقن ، راقب يوميا وفي حالة وجود تورم مستمر أو إذا كانت هناك آفات أو أورام نتيجة للبروتوكول التجريبي ، فقم بإجراء قياس وسادة القدم باستخدام الفرجار. تقيس هذه الأداة سمك القدم بالمليمترات وتساعد في تحديد كمية التورم.

الآن دعونا نناقش بعض الأمثلة على التجارب التي تستخدم حقن داخل القلب والحقن المدارية الرجعية ووسادة القدم.

أحد التطبيقات العديدة للإدارة داخل القلب هو تطوير نموذج حيواني للورم الخبيث السرطاني. هنا ، استخدم الباحثون هذا الطريق لحقن الخلايا السرطانية التي تمتلك ميلا لاستعمار العظام. في الأيام التالية ، درسوا نمو الورم في العظام باستخدام تقنيات التصوير بالأشعة السينية والفلورة. في دراسة أخرى ، تم استخدام المسار المداري الرجعي لحقن أجسام مضادة محددة تصنف العدلات. بعد ذلك ، بمساعدة التصوير داخل الحيوية ، تمكن العلماء من تتبع نمط هجرة الخلايا المصنفة.

أخيرا ، غالبا ما يستخدم الباحثون حقن وسادة القدم لتحليل الاستجابة الالتهابية. في هذه التجربة ، قام الباحثون بعزل خلايا الدم المحيطية أحادية النواة من عينات الدم البشري ، وخلطوها مع مستضدات اختبار مختلفة وحقنوا المحاليل في وسادة قدم. أخيرا ، أجروا قياسات القدم لتحديد استجابة التورم بسبب المستضدات المختلفة.

لقد شاهدت للتو الدفعة الأخيرة من JoVE حول تقنيات إدارة المركب المعتادة والمتخصصة.

فقط للتلخيص ، في الجزء الأول قمنا بمراجعة المسار الحقلي الأكثر شيوعا. في الفصل الثاني ، ناقشنا الإجراءات المعوية والموضعية. تناولت الدفعة الثالثة المجموعة الأولى من الإجراءات غير النمطية مثل داخل الأدمة وداخل الأنف وداخل الجمجمة عند حديثي الولادة. أخيرا ، ناقشنا هنا ثلاثة طرق إضافية يستخدمها باحثو الطب الحيوي في المختبرات لأغراض محددة.

بعد مشاهدة هذه السلسلة ، يجب أن يكون لديك فهم أفضل بكثير لتقنيات الإدارة المختلفة ويجب أن تعرف أيضا الاعتبارات العامة والمحددة المتعلقة ببروتوكولات الإدارة المركبة هذه كما هو الحال دائما ، شكرا على المشاهدة!