What are the advantages of facial and submandibular vein blood collection in mice?

Facial and submandibular vein collection methods do not require anesthesia, making them suitable when anesthetics may confound blood results or other data. These less invasive procedures are methods-of-choice for studies where anesthetic interference is a concern. Both techniques allow researchers to collect blood while minimizing experimental variables.

How do you properly restrain a mouse for facial vein blood collection?

Use the scruffing technique to restrain the animal, minimizing side-to-side head movement for accurate venipuncture. Avoid gripping too tightly, as excessive pressure restricts blood flow and reduces collection volume. Proper restraint ensures safe and efficient blood collection from the facial vein running across the cheek.

What is the correct needle insertion depth for submandibular vein puncture?

Do not insert the needle beyond the bevel tip, as deeper insertion may cause trauma to muscles, nerves, and other vessels in the head, neck, and oral cavity. Proper depth control prevents complications while allowing successful blood collection from the submandibular vein.

How does the saphenous vein collection method differ from femoral vein collection?

Saphenous vein collection yields 10-150 microliters and may contain tissue products, with variable sample quality. Femoral vein collection produces larger volumes more easily and requires two people for conscious animals. Femoral vein puncture should occur near the knee to allow future anterior sampling, whereas saphenous sampling is limited to four samples per leg in 24 hours.

What equipment is needed for saphenous vein blood collection?

Required equipment includes a restraining device, tourniquet made from a syringe and suture, triple antibiotic ointment, hair clipper, 22-gauge needle, and hematocrit tube. The tourniquet is applied cranially to engorge the saphenous vessel, making it visible and accessible for safe venipuncture and blood collection.

Why is positioning the animal's head lower than the heart important during blood collection?

Positioning the head lower than the heart assists blood flow by using gravity to facilitate collection. This positioning helps ensure adequate blood volume is obtained and reduces collection time. After collection, apply pressure to the puncture site to achieve hemostasis and prevent excessive blood loss.

How frequently can the same facial vein site be used for serial blood collection?

Serial samples can be taken by alternating sides of the face, with neither side used more often than every 5-7 days. This interval allows the puncture site to heal and prevents tissue damage. Researchers must also adhere to maximum survival blood collection volumes outlined in Blood Withdrawal I guidelines.

سحب الدم II

0 مشاهدة06:32 دقيقة

p class = "jove_title" >1. نزيف وريد الوجه في الفئران

معدات
1. يتم جمع الدم من صيد حر في أنبوب دم أو أنبوب إيبندورف. في بعض الحالات ، من المستحسن جمع الدم مباشرة في أنابيب الهيماتوكريت.
2. سيتم اختيار إبرة الوخزة الذهبية بناء على الحجم المناسب للحيوان وفقا للعمر والجنس.
 1. يتم اختيار إبرة الوخز وفقا لعمر / حجم الفئران على النحو التالي:
 إبرة الوخز 4 مم: الفئران البالغة من العمر 3-4 أسابيع (أقل من 15 جراما من وزن الجسم) < / > 5 مم: إناث الفئران أقل من 10 أسابيع (أقل من ~ 20 جراما من وزن الجسم) < / > 5 مم: ذكور الفئران أقل من 6 أسابيع (أقل من ~ 20 جراما من وزن الجسم) إبرة الوخز 5 مم: للعينات ذات القطرة الواحدة (لمسحات الدم)
 5.5 مم: إناث الفئران على مدى 10 أسابيع (أكثر من ~ 20 جراما من وزن الجسم)
 5.5 مم: ذكور الفئران على مدى 6 أسابيع (أكثر من ~ 20 جراما من وزن الجسم)
 5.5 مم: عينات كبيرة
ضبط النفس
1. يتم تقييد الفئران باستخدام تقنية التقشير.
2. من المهم تقليل حركة الرأس من جانب إلى آخر. هذا يضمن بزل الوريد بدقة وأمان باستخدام إبرة الوخز.
سحب الدم
1. يتم تثبيت إبرة الوخز ذات الحجم المناسب بشكل عمودي على سطح الجلد.
2. نقطة إبرة الوخز مائلة قليلا ، مع توجيه الطرف نحو الأنف.
3. الأفضل استخدام شفرة إبرة الوخز في الوضع الرأسي.
4. أثناء تقييد الفأر ، حدد المنطقة التقريبية من وريد الوجه عن طريق قياس طول العين أسفل الكانثوس الجانبي وعرض العين الذيلية.
5. باستخدام نقطة إبرة الوخز، اشعر برفق بالنقطة التي ينتهي عندها عظم الفك.
6. للحصول على دقة أفضل في ثقب الوعاء ، ضع الفأر في الاستلقاء الجانبي.
7. اثقب الجلد على كتف إبرة الوخز في تلك المرحلة. يتم ذلك بدفعة قوية وليس برمي السهام.
8. عند إزالة إبرة الوخز ، سيبدأ الدم في التدفق.
9. للمساعدة في تدفق الدم ، ضع الفأر بحيث يكون رأسه أقل من القلب.
10. اجمع الدم في وعاء التجميع المطلوب.
11. امسح موقع البزل وحرر الضغط على القفص بحثا عن الإرقاء.

الشكل 1. نزيف وريد الوجه في الفئران.

2. نزيف تحت الفك السفلي في الفئران: على الرغم من تشابهها إلى حد بعيد مع تقنية نزيف وريد الوجه ، إلا أن هناك اختلافات في المعدات واختلافات طفيفة في إجراء النزيف هذا.

معدات
1. يكون جمع الدم من صيد حر داخل أنبوب دم أو أنبوب [إبندورف]. في بعض الحالات ، من المستحسن أن تجمع مباشرة في أنابيب الهيماتوكريت.
2. يتم اختيار إبر قياس 18-22 بناء على الحجم المناسب للحيوان حسب العمر والجنس.
 1. يتم اختيار الإبر وفقا لعمر / حجم الفئران على النحو التالي:
 22 مقياس: الفئران البالغة من العمر 3-4 أسابيع (أقل من 15 جراما من وزن الجسم)
 20 مقياس: إناث الفئران أقل من 10 أسابيع (أقل من ~ 20 جراما من وزن الجسم)
 20 مقياس: ذكور الفئران أقل من 6 أسابيع (أقل من ~ 20 جراما من وزن الجسم) مقياس 20: للعينات ذات القطرة الواحدة (لمسحات الدم)
 18 مقياس: إناث الفئران على مدى 10 أسابيع (أكثر من ~ 20 جراما من وزن الجسم) 18 مقياس: ذكور الفئران على مدى 6 أسابيع (أكثر من ~ 20 جراما من وزن الجسم) < / > 18 مقياس: عينات كبيرة
ضبط النفس
1. يتم تقييد الفئران باستخدام تقنية التقشير.
2. من المهم تقليل حركة الرأس من جانب إلى آخر. هذا يضمن بزل الوريد الدقيق والآمن بالإبرة.
سحب الدم
1. يتم تثبيت الإبرة بشكل عمودي على سطح الجلد.
2. أثناء تقييد الفأر ، حدد المنطقة التقريبية للوريد تحت الفك السفلي بالنقطة التي يتقاطع فيها خط من زاوية الفم مع خط من الكانثوس الجانبي للعين. يتزامن هذا مع غمازة صغيرة خالية من الشعر وجدت ذيلية في زاوية الفم وأسفل خط الفك بقليل.
3. للحصول على دقة أفضل في ثقب الوعاء ، ضع الفأر في الاستلقاء الجانبي.
4. اثقب الجلد بطرف الإبرة في تلك المرحلة. يتم ذلك بدفعة قوية وليس برمي السهام.
5. لا يتم إدخال الإبرة خارج طرف شطبة.
6. عند إزالة الإبرة ، سيبدأ الدم في التدفق.
7. للمساعدة في تدفق الدم ، ضع الفأر بحيث يكون رأسه أقل من القلب.
8. اجمع الدم في وعاء التجميع المطلوب.
9. امسح موقع البزل ، وحرر الضغط على القفص بحثا عن الإرقاء.

الشكل 2. نزيف الوريد تحت الفك السفلي في الفئران. 3. نزيف صافن

معدات
1. يمكن استخدام مخاريط التقييد البلاستيكية الشفافة والمرنة إما للفأر أو الفئران. بالنسبة للفئران ، يمكن استخدام الأنابيب المخروطية البلاستيكية المعدلة سعة 50 مليلتر لضبط النفس. بالنسبة للفئران ، يمكن استخدام أنابيب تقييد زجاجية معدلة - مع فتحة واسعة بما يكفي لتمديد الساق الخلفية.
2. عند استخدام المخروط البلاستيكي ، يتم قياسه مقابل طول جسم ، ويتم قطع ثقب بيضاوي على مستوى الفخذ.
3. يمكن تعديل أنبوب مخروطي للفأر لطريقة جمع الدم هذه عن طريق قطع نهاية الأنبوب للسماح بوجود ثقب في التنفس. يتم قطع فتحة من نهاية غطاء الأنبوب بعرض 1/2 بوصة وطول 2 بوصة. الحواف مغطاة بشريط من القماش أو ناعمة من أجل سلامة.
4. يتم تصنيع العاصبة باستخدام حقنة 3 سم مكعب وطول 2-0 خياطة غير قابلة للامتصاص. ³
5. يستخدم مرهم المضادات الحيوية الثلاثي أو الفازلين الأبيض كحاجز مقاوم للرطوبة على الجلد.
6. إبرة قياس 22 هي الحجم المفضل لبزل الوريد.
7. يتم جمع الدم مباشرة في أنابيب الهيماتوكريت.
ضبط النفس
1. مخاريط بلاستيكية مرنة
  1. يتم وضع الفأر أو الجرذ في الأنف المخروطي أولا.
  2. يتم طي نهاية المخروط وإغلاقه باستخدام مشبك رابط صغير لمنع من الخروج من مخروط التقييد.
  3. يتم سحب الساق الخلفية برفق من خلال الفتحة البيضاوية إلى الفخذ.
2. أنبوب مخروطي للفئران
  1. يتم وضع الفأر في أنف الأنبوب أولا.
  2. يتم توجيه الساق الخلفية برفق إلى الفتحة.
  3. يتم وضع الإصبع الأوسط على نهاية الأنبوب لمنع الماوس من الخروج من الأنبوب.
  4. السبابة والإبهام على تثبيت ساق الفأر.
3. أنبوب تقييد زجاجي للفئران
  1. يتم وضع الجرذ في أنف الأنبوب أولا.
  2. يتم توجيه الساق الخلفية برفق إلى الفتحة.
  3. تأمين نهاية الأنبوب لمنع الفئران من الرجوع إلى الخلف والخروج من الأنبوب.
  4. يعمل السبابة والإبهام على تثبيت ساق الفئران.
سحب الدم
1. تتم إزالة الشعر من الجانب الجانبي للساق من العرقوب إلى الخنق. يمكن القيام بذلك عن طريق نتف أو الحلاقة أو استخدام كريم مزيل الشعر.
2. بمجرد إزالة الشعر ، يتم وضع كمية صغيرة من المرهم وتوزيعها في طبقة رقيقة جدا على المنطقة الخالية من الشعر.
3. يتم تطبيق العاصبة إلى أقصى حد ممكن في الجمجمة وتشديدها.
4. سيبدأ الوعاء الصافن الذي يمتد عبر السطح الخارجي للساق من الركبة إلى الكاحل في الامتلاء وسيصبح مرتفعا ويسهل تصوره.
5. يتم تثبيت الإبرة بشكل عمودي على سطح الجلد مباشرة فوق الأوعية الدموية. ثقب الوعاء. احرص على عدم إدخال الإبرة بعمق في الساق لتجنب ثقب العضلات أو ضرب العظام.
6. سوف يوضع الدم على سطح الساق لتجميعه باستخدام أنبوب الهيماتوكريت.
7. بمجرد جمع الدم ، قم بفك العاصبة واضغط على ثقب الإرقاء.
8. بمجرد توقف النزيف ، أخرج من المقبوض وأعده إلى قفص المنزل.

الشكل 1

الشكل 3. نزيف الوريد الصافن في الفئران. 4. الوريد الفخذي للفئران

معدات
1. يتم جمع الدم في أنبوب الهيماتوكريت.
2. هناك حاجة إلى مرهم مضاد حيوي ثلاثي لإنشاء حاجز بين الجلد / الشعر وقطرات الدم.
3. يتم استخدام إبرة قياس 22 لثقب الوريد.
4. يتم استخدام ماكينة قص شعر صغيرة محمولة بشفرة بعرض 1 بوصة تقريبا لقص الشعر من الساق.
ضبط النفس
1. يتم تقييد الفئران باستخدام مخروط تقييد بلاستيكي شفاف ومرن.
2. يتم قياس المخاريط البلاستيكية مقابل طول الجسم وقطع ثقب بيضاوي على مستوى الفخذ. يتم قطع المخروط بحيث يمكن إخراج الساق الخلفية من خلال الوصول إلى الوريد.
سحب الدم
1. يتم حلق الشعر من السطح الداخلي للساق من الفخذ إلى الركبة.
2. يتم وضع مرهم المضادات الحيوية الثلاثية في طبقة رقيقة في موقع البزل.
3. يقوم الشخص المقيد بسد الوريد ويحمل الجرذ مع السطح الداخلي للساق في مواجهة الفصد.
4. استخدم الإبرة لثقب الوريد. يتم تثبيت الإبرة بشكل عمودي على الأوعية الدموية ويتم البزل مباشرة على الوريد.
5. يتم إجراء البزل بالقرب من الركبة قدر الإمكان ، مما يسمح بأخذ عينات إضافية أمام موقع جمع الدم الأول.
6. الوعاء سطحي. لذلك ، يجب ألا يكون عمق الثقب أعمق من طول شطبة الإبرة.
7. للمساعدة في تدفق الدم ، ضع الجرذ بحيث تكون ساقه أقل من القلب.
8. اجمع الدم في أنابيب الهيماتوكريت لأنه ينتشر على سطح الجلد.
9. حرر الضغط على الساق واضغط على موقع البزل لتحقيق الإرقاء.